Mac Conkey Agar.

Este medio se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae desarrollan en el mismo.

Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva. Por fermentación de la lactosa, disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares. Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras. Fórmula (en gramos por litro) Peptona 17.0 Pluripeptona 3.0 Lactosa 10.0 Mezcla de sales biliares 1.5 Cloruro de sodio 5.0 Agar 13.5 Rojo neutro 0.03 Cristal violeta 0.001 pH final: Instrucciones

Suspender 50 g del polvo por litro de agua destilada. Reposar 5 minutos y mezclar hasta uniformar. Calentar suavemente y hervir 1 a 2 minutos hasta disolver. Esterilizar en autoclave a 121°C durante 15 minutos.

7.1 ± 0.2

Siembra
- Sembrar en superficie. - Utilizando la técnica de Pour Plate: sembrar 1 ml de muestra y agregar aproximadamente 15 ml de medio de cultivo fundido y enfriado a 45-50 ºC.

Incubación
Durante 18-48 horas, a 35-37 ºC, en atmósfera aeróbica

Resultados
Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri ATCC 12022 Proteus mirabilis ATCC 43071 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Colonias Rojas con halo turbio Rosadas mucosas Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Incoloras, transparentes Diminutas, incoloras, opacas

Características del medio
Medio preparado: rojo púrpura

Almacenamiento:
Medio deshidratado: a 10-35 ºC. Medio preparado: a 2-8 ºC.

AGAR EOSINA Y AZUL DE METILENO
BIBLIOGRAFÍA RESULTADOS PREPARACIÓN FORMULA EXPLICACIÓN USO Blv.
-20-95 · 53-84-20-70 · 53-84-20-50

ESPECIFICACIONES
El Agar Eosina y Azul de Metileno es un medio utilizado para el aislamiento y diferenciación de bacilos entéricos Gram negativos. Este medio también es conocido como Agar EMB por sus siglas en inglés.

37°C durante 18 a 24 horas y observar el crecimiento. la eosina y el azul de metileno son colorantes que se combinan para formar un precipitado a pH ácido. alimentos y otros materiales en los cuales se sospeche su presencia. Calentar a ebullición durante 2 o 3 minutos. El uso de la eosina y del azul de metileno permite la diferenciación de las colonias fermentadoras de lactosa de las no fermentadoras. Fórmula (en gramos por litro) Pluripeptona 5. Caducidad: 5 años en frasco cerrado. acidifican el medio haciendo virar al rojo el indicador de pH. La selectividad. 2.00033 Rojo neutro 0. Reposar 5 minutos y mezclar hasta homogeneizar.0 Lactosa 10. Los coliformes que utilizan la lactosa y/o sacarosa producen colonias de color azul a negro con centros obscuros y brillo metálico.2± 0. Holt-Harris y Teague desarrollaron posteriormente la formulación para el Agar de Levine para la diferenciación de organismos coliformes fecales y no fecales.0 Mezcla de sales biliares 8. las fosfatos actúan como buffer y el agar como agente solidificante. La producción de ácido sulfhídrico se evidencia como colonias con centro negro debido a la formación de sulfuro de hierro.0 Extracto de carne 5.5 Citrato férrico 1. Procedimiento: 1. Enfriar a 45-50°C y distribuir unos 20 ml por placa. obteniéndose colonias rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. La sacarosa está incluida en el medio para detectar a los miembros del grupo coliforme que fermentan más rápidamente la sacarosa que la lactosa. Las colonias de Salmonella y Shigella son translúcidas. de la mayoría de los coliformes y el desarrollo invasor del Proteus spp.025 Instrucciones Suspender 60 g del polvo por litro de agua destilada.5 Verde brillante 0.0 Agar 13. y de algunas especies de Shigella spp.0 pH 7.065 Agar Bacteriológico 15. Este medio se considera superior al Agar ENDO. Es diferencial debido a la fermentación de la lactosa. crecen bien en el me dio de cultivo. de color ámbar o incoloras. Calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Las carbohidratos proporcionan la fuente de energía. El Agar EMB es una combinación de la fórmula original y la de Levine donde las peptonas proveen la fuente de nitrógeno. y a la formación de ácido sulfhídrico a partir del tiosulfato de sodio.5 Citrato de sodio 8. Los pocos microorganismos fermentadore s de lactosa capaces de desarrollar. Este medio permite diferenciar al grupo Salmonella y otros organismos lactosa negativos de organismos coliformes.La fórmula original del Agar EMB fue desarrollada por Holt -Harris y Teague. NO ESTERILIZAR EN AUTOCLAVE. Presentación: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en paquete con 10 placas Salmonella Shigella Agar. y producen colonias transparentes.4 Azul de Metileno 0. sembrando las placas por estría. Fundamento Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. ya que resulta ser un medio más sensible. estable y seguro y permite una diferenciación mas temprana entre las colonias fermentadoras y no fermentadoras de lactosa. Medio de cultivo utilizado para el aislamiento de Salmonella spp. a partir de heces. Para aumentar la selectividad.0 Lactosa 5.0 Fosfato Dipotásico 2.0 Sacarosa 5. Recolectar las muestras y sembrarlas tan pronto lleguen al laboratorio. Digerido Pancreático de Gelatina 10. Shigella y otros microorganismos no fermentadores de lactosa. . Salmonella. Otros coliformes como Enterobacter presentan colonias mucosas de color rosa.2 Método: Suspender 36 g del medio en un litro de agua purificada. Incubar las placas 35. se recomienda incubar previamente la muestra en Selenito caldo (B02-120-05). Almacenamiento: 2-30° C. Las cepas de Enterococcus faecalis son parcialmente inhibidas. esta dada por la sales biliares y el verde brillante. que inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas. Esterilizar en autoclave a 121°C (15 libras de presión) durante 15 minutos. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C y vaciar en placas de Petri estériles. Los colorantes actúan como inhibidores e indicadores.5 Tiosulfato de sodio 8.0 EosinaY 0. Secar la superficie del medio unos minutos en la estufa.

3 ± 0. No contiene inhibidores del desarrollo bacteriano. Resultados Microorganismos Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri Shigella sonnei Proteus mirabilis ATCC 43071 Escherichia coli ATCC 25922 Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Colonias Transparentes.B. El agregado de cloruro de sodio permite el enriquecimiento con sangre de carnero u otras sustancias para facilitar el cultivo de microorganismos exigentes.2 5.0 Siembra En superficie o por la técnica de pour plate. según el uso a que se destine.0 ± 0. aguas y otros materiales de importancia sanitaria.M. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 ºC.0 15 minutos. Recomendaciones. en aerobiosis. se aconseja sembrar en forma conjunta una placa de agar E.0 8. Distribuir y esterilizar a 121°C durante 15. Mezclar y dejar reposar 5 minutos. La pluripeptona es la fuente de carbono y nitrógeno para el desarrollo bacteriano. Fundamento Por las características de sus componentes es un medio usado para el cultivo de microorganismos poco exigentes en sus requerimientos nutricionales. Su uso está descripto en muchos procedimientos para el análisis de alimentos. a 35-37 ºC durante 24 horas. (B02-101-05) o de agar Mac Conkey (B02-114-05). Incubación En aerobiosis. pH final: 7.pH final: 7. para el aislamiento de microorganismos poco exigentes en lo que se refiere a requerimientos nutritivos. de muy escaso crecimiento Características del medio Medio preparado: rojo naranja. Fórmula (en gramos por litro) Pluripeptona Extracto de carne Cloruro de sodio Agar Instrucciones Suspender 31 g de polvo por litro de agua destilada. centro negro Rosadas a rojas Rosadas cremosas y mucosas Incoloras. Resultados a-Agar nutritivo: Microorganismos Crecimiento .2 Siembra Sembrar por estriado la superficie del medio de cultivo. Incubación Durante24-48 horas a 35-37 °C. centro negro Incoloras Incoloras Transparentes.0 3. Calentar suavemente agitando y hervir 1 o 2 minutos hasta su disolución. Presentación x 100g :Código: B02-138-05 X 500g :Código: B02-138-06 Nutritivo Agar Medio de cultivo utilizado para propósitos generales.

Para el tratamiento de materia fecal se recomienda hacer cultivo primario en medios menos selectivos. Secar la superficie del medio por unos minutos en la estufa. cereus ATCC 10876 E.0 Cloruro de sodio 5. La lactosa y la sacarosa son los hidratos de carbono fermentables. aureus ATCC 25923 B. alimentos. Fundamento En el medio de cultivo. que vira al amarillo cuando hay producción de ácido a partir de la fermentación de azúcares. 6. por su alta capacidad de diferenciación de las colonias sospechosas.0 Extracto de levadura 3. faecalis ATCC 29212 P. el cloruro de sodio mantiene el balance osmótico.2 Siembra Sembrar en superficie por estriado a partir de una dilución del material a investigar o de un cultivo previo en un medio de enriquecimiento selectivo.0 pH final: Instrucciones Suspender 58 g de polvo por litro de agua destilada. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118-121°C durante 15 minutos. No se recomienda para el aislamiento de Shigella spp.P. constituyen la fuente de nitrógeno. o Mac Conkey agar (B02-114-05). x 100g :Código: B02-122-05 Presentación x 500g :Código: B02-122-06 6 x 50 ml: B04-122-84 Verde Brillante Agar. y otros materiales de importancia sanitaria. excepto S. pyogenes ATCC 19615 S. a partir de muestras clínicas. Fórmula (en gramos por litro) Pluripeptona 10. aeruginosa ATCC 27853 Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente Bueno-excelente b-Agar nutritivo suplementado con 5% de sangre de carnero: Microorganismos S. como Salmonella Shigella agar (B02-138-05).9 ± 0. Almacenamiento Medio deshidratado: a 10-35 ºC.0125 Agar 20.0 Lactosa 10. el rojo fenol es el indicador de pH. Resultados . pneumoniae ATCC 49619 Crecimiento Abundante Abundante Abundante Hemólisis Beta Alfa Alfa Características del medio Medio preparado: ámbar claro a medio ligeramente opalescente. Reposar 5 minutos y mezclar calentando a ebullición durante 2 o 3 minutos. paratyphi. Medio preparado: a 2-8 ºC.0 Sacarosa 10. Medio de enriquecimiento altamente selectivo para el aislamiento de Salmonella spp.0 Rojo fenol 0. Incubación Incubar 24 horas a 35 -37°C.. y el verde brillante actúa como agente selectivo. la pluripeptona y el extracto de levadura. como Selenito caldo (B02-120-05) o Tetrationato caldo (B02-145-05). vitaminas y minerales. typhi y S. mirabilis ATCC 43071 E.08 Verde brillante 0. pneumoniae ATCC 6305 S. coli ATCC 25922 S. Es de un valor excepcional cuando se investiga un gran número de muestras de heces o alimentos.

Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Salmonella enteritidis ATCC 13076 Salmonella typhi Salmonella typhimurium ATCC 14028 Shigella flexneri. blancas o transparentes sobre fond o rojo Crecimiento inhibido Crecimiento inhibido Características del medio Medio preparado: verde. El Agar Métodos Estandar fue desarrollado por Buchbinder Baris and Goldstein en 1953 como un requerimiento de la American Public Health Association. El extracto de levadura y la peptona de caseína han sido utilizados en medios diseñados para estudiar la presencia de microorganismos termofílicos en productos lácteos desde 1928. Centro Industrial Nº 1017. Almacenamiento: Medio deshidratado: a 10-35 ºC. 54070.0 ± 0. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50 °C y vaciar en placas de Petri estériles. Este medio se formula con los ingredientes originales. Edo. Mezclar. Procedimiento: 1. La dextrosa es el carbohidrato fermentable y el agar es adicionado como agente solidificante.5 Agar Bacteriológico 15. C. Puente de Vigas.2 Método: Suspender 23. Ind. Medio preparado: a 2-8 ºC. Incubar las placas a 35 ±2 °C durante 18-24 horas. La peptona de gelatina y el extracto de levadura proporcionan la fuente de carbono y nitrógeno.0 Dextrosa 1. agua y otros materiales.P. Colocar alícuotas de la muestra en las placas Petri y vaciar el medio enfriado a 45 °C. Almacenamiento: 2-30°C. Presentación: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en paquete con 10 placas . alimentos y productos lácteos.0 pH 7. Caducidad: 4 años en frasco cerrado. Consultar las referencias apropiadas respecto a los procedimientos para procesar y sembrar muestras de alimentos. Esterilizar en autoclave a 121°C (15 libras de presión) durante 15 minutos. dependiendo de la técnica utilizada. aguas residuales. Este medio también es conocido como Agar Cuenta Estandar. Calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Después del período de incubación se hace el conteo de colonias ya sea en la superficie del filtro o en el seno del medio. Presentación x 100g :Código: B02-124-05 x 500g :Código: B02-124-06 AGAR METODOS ESTANDAR BIBLIOGRAFÍA RESULTADOS PREPARACIÓN FORMULA EXPLICACIÓN USO Blv.5 g del medio en un litro de agua purificada. Peptona de Caseína 5. blancas o transparentes sobre fondo rojo Crecimiento inhibido Rosas. ATCC 12022 Staphylococcus aureus ATCC 25923 Características de las colonias Amarillo-verdosas sobre fondo amarillento Rosas. Tlalnepantla. 3. Este medio también puede utilizarse para hacer la siembra por filtración de membrana.0 Extracto de Levadura 2. Fracc. de México Teléfono y Fax: 53-84-20-95 · 53-84-20-70 · 53-84-20-50 ESPECIFICACIONES El Agar Métodos Estandar es un medio utilizado para el recuento de bacterias aeróbicas a partir de agua. 2. dejar solidificar e incubar.

Peptona de Caseína 15. Almacenamiento: 2-30°C. Así mismo este medio puede ser utilizado como base para preparar medios suplementados como el Agar Sangre y Agar Glosa Chocolate.0 pH 7.2 Método: Suspender 40 g del medio en un litro de agua purificada. Para preparar Agar Sangre.0 Cloruro de Sodio 5. Presentación: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en paquete con 10 placas Medio preparado en caja con 10 Tubos . Tlalnepantla. Caducidad: 5 años en frasco cerrado. Este medio es recomendado en los procedimientos microbiológicos de control de aguas . adicionar ascéticamente sangre desfibrinada estéril al 5% después de esterilizar y enfriar el medio. Fracc. En este medio las peptonas proveen la fuente de nitrógeno y minirales. de México Teléfono y Fax: 53-84-20-95 · 53-84-20-70 · 53-84-20-50 ESPECIFICACIONES El Agar Soya Tripticaseína es un medio utilizado para promover el crecimiento de microorganismos fastidiosos y adicionado de sangre para observa reacciones hemolíticas. Dejar enfriar a una temperatura entre 45-50°C y vaciar en placas de Petri estériles. cosméticos y en la industria farmaceútica. El Agar de Soya Tripticaseína provee un excelente soporte de crecimiento para organismo aerobios y anaerobios. Calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. según lo demostró Leavit en 1955. El Cloruro de Sodio tiene su función en el balance osmótico y el Agar es incorporado como agente solidificante. Esterilizar en autoclave a 121°C ( 15 libras de presión) durante 15 minutos. C. Puente de Vigas. De aguerdo con la Farmacopea. Centro Industrial Nº 1017.3 ± 0. El azúcar de la Peptona de Soya provee la fuente de carbohidratos. Ind. 54070.P.0 Agar Bacteriológico 15. Clínicamente se utiliza para diferenciar especies de Haemophylus debido a que no contiene los factores X y V requeridos para su crecimiento.0 Peptona de Soya 5.AGAR SOYA TRIPTICASEINA BIBLIOGRAFÍA RESULTADOS PREPARACIÓN FORMULA EXPLICACIÓN USO Blv. Edo.