LAPORAN TETAP BIOKIMIA II

OLEH : RA’YAL AINI
NIM : G1C 008 012

PROGRAM STUDI KIMIA
FAKULTAS MIPA
UNIVERSITAS MATARAM
2011


KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadiran Tuhan yang Maha Esa karena berkat limpahan
rahmat dan hidayahnya penyusunan laporan ini dapat diselesaikan sebagai salah satu syarat
untuk menyelesaikan mata kuliah Biokimia 2.
Pembuatan laporan ini,merupakan hasil praktikum yang bertujuan untuk memahami secara
mendalam materi-materi kuliah dan mengetahui prosedur kerja dari praktikum yang telah
dilakukan.Penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu dalam
penyusunan laporan ini.
Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari sempurna.Oleh karena itu,kritik dan
saran yang sifatnya membangun bagi penyempurnaan penyusunan laporan selanjutnya sangat
diperlukan.Semoga laporan ini dapat bermanfaat khususnya bagi mahasiswa kimia.



Mataram, 24 Juni 2011

Penulis



DAFTAR ISI
Halaman Judul ..................................................................................................................... I
Halaman Pengesahan........................................................................................................... II
Kata Pengantar .................................................................................................................... III
Daftar Isi ............................................................................................................................... IV
Uji Sifat Fisik Dan Kimia Cairan Tubuh ............................................................................... 1
Menetapkan Kadar Kolesterol ............................................................................................... 19
Penetapan Amilase (Wohlgemuth) ........................................................................................ 36

















UJI SIFAT FISIK DAN KIMIA CAIRAN TUBUH
(AIR LIUR DAN EMPEDU)

A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM
1. Tujuan : Mengetahui sifat fisik dan kimia dari cairan tubuh yaitu air liur dan
empedu.
2. Hari, tanggal : Senin, 21 Mei 2011.
3. Tempat : Laboratorium Kimia Lantai II , Fakultas MIPA Universitas Mataram

B. LANDASAN TEORI
Saliva atau air liur adalah cairan yang lebih kental dari air biasa. Tiap hari sekitar 1-1,5
liter saliva dikeluarkan oleh kelenjar saliva. Saliva terdiri atas 99,24% air dan 0,58% terdiri
atas ion-ion Ca
2+
, Mg
2+
, Na
+
, K
+
, PO
4
3-
, Cl

, HCO
3
‾,
SO
4
2‾
, dan zat-zat organik seperti musin
dan enzim amilase atau ptialin. Musin suatu glikoprotein dikeluarkan oleh kelenjar sublingual
dan kelenjar submandibular, sedangkan ptialin dikeluarkan oleh kelenjar parotid. Saliva
mempunyai pH antara 5,75 sampai 7,05. Pada umumnya pH saliva adalah sedikit dibawah 7
(Poedjiadi, 2007: 235).
Air liur (saliva) disekresi oleh tiga pasang kelenjar besar yaitu parotis, submaksilaris,
dan sublingualis. Selain itu, air liur juga disekresi oleh beberapa kelenjar kecil dalam mukosa
mulut seperti labialis, lingualis, bukal dan palatal. Sekresi air liur dari kelenjar ke dalam mulut
dapat disebabkan oleh rangsangan lokal dalam mulut atau oleh perangsangan pusat akibat
rangsang psikis atau somatik. Air liur dalam rongga mulut berfungsi sebagai pelicin dan untuk
membasahi makanan saat dikunyah sehingga mudah ditelan. Air liur juga merupakan tempat
ekskresi obat-obat tertentu seperti alkohol dan morfin. Air liur mengandung air kira-kira
99,5%. Sekitar dua pertiga dari bahan terlarut dalam air liur merupakan bahan organik dan
sepertiganya adalah bahan anorganik. Komponen anorganik air liur antara lain adalah
natrium, kalium, kalsium, magnesium, fosfat dan bikarbonat. Sedangkan kandungan organik
air liur terutama terdiri atas musin dan enzim amilase, bahan organik lain yang juga terdapat
dalam jumlah sedikit adalah urea, kolesterol, hormon-hormon tertentu dll. Saliva juga
mengandung berbagai macam sel, seperti sel epitel mukosa mulut, leukosit dan bakteri
(Prijanti, 1999: 22).
Liur mengandung amilase dan lipase. α-amilase liur mampu membuat pati dan glikogen
dihidrolisis menjadi maltosa dan oligosakarida lain dengan menyerang ikatan glikosidat α (1-
4). Amilase liur akan segera terinaktivasi pada pH 4,0 atau kurang, sehingga kerja pencernaan
makanan di dalam mulut akan terhenti begitu lingkungan lambung yang asam menembus
partikel makanan. Pada banyak hewan, enzim amilase liur sama sekali tidak dijumpai
(Murray, 2001: 632).
Cairan lain yang terdapat dalam tubuh yang juga berperan pada pencernaan makan yaitu
cairan empedu. Cairan empedu dibuat dalam hati dan disimpan dalam kantung empedu
apabila tidak digunakan. Kantung empedu ini terdapat melekat pada hati. Pada waktu ada
proses pencernaan makanan, kantung empedu berkontraksi, dan mengeluarkan cairan empedu
ke dalam duodenum, melalui saluran yang menyatu dengan saluran cairan pankreas pada
bagian akhir. Cairan empedu merupakan cairan jernih, berwarna kuning, agak kental, dan
mempunyai rasa pahit. Selama 24 jam dihasilkan cairan empedu sebanyak 500 mL sampai
700 ml. Kontraksi dan pengenduran kantung empedu diatur oleh hormon kolesistokinin yang
dibentuk dalam sel usus, sebagai akibat adanya makanan yang masuk ke dalam usus, terutama
protein dan lemak (Poedjiadi, 2007: 244).
Empedu merupakan prodak hati, mempunyai peranan penting pada pencernaan
makanan terutama lemak. Empedu hati, sebelum disekresi kelumen intestinal lebih dahulu
disimpan dikandung empedu. Kandung empedu akan mengosongkan isinya selama proses
pencernaan berlangsung di dalam intestin. Empedu dan kelenjar pancreas bermuara ditempat
yang sama di dalam intestin. Pengosongan empedu dirangsang oleh hormon kolesistokinin,
salah satu komponen hormone Boyliss & Starling selama berada di dalam kandung empedu,
empedu akan mengalami proses pemekatan melalui cara absorpsi air (Hardjasasmita, 1992;
27)
Meskipun hati bukan suatu organ yang tepat dari pencernaan, sekresinya, empedu
memegang peranan penting dalam pencernaan lemak. Empedu dihasilkan secara terus-
menerus oleh hati, tapi ditampung dalam sebuah alat penampung ialah kantung empedu
diantara waktu makan. Bila makanan masuk ke duodenum, lepasnya kolesistokinin akan
merangsang konsentrasi kantung empedu dan keluarnya empedu yang dihimpun ke dalam
duodenum. Empedu kecuali garam empedu mengandung bahan lainnya, antara lain ialah
pigmen empedu, pigmen empedu ini adalah ahsil pemecahan pigmen sel darah merah,
hemoglobin, yang dipindahkan oleh hati dari sel-sel darah merah yang tua. Warna kecoklatan
pigmen empedu ini memberi warna coklat yang khass dari feses atau tinja (Kimball, 1983;
171).
Empedu manusia berwarna kuning keemasan, namun bila dibiarkan pada udara terbuka
maka warnanya akan berubah menjadi hijau, biru, dan coklat karena pigmen empedu
teroksidasi. Kandungan empedu yang penting antara lain adalah garam-garam empedu,
pigmen empedu, lesitin, kolesterol dan garam-garam anorganik. Empedu merupakan
campuran hasil sekresi dan ekskresi. Bahan-bahan yang disekresi misalnya garam-garam
empedu, sedangkan yang disekresi misalnya pigmen empedu dan kolesterol. Pigmen-pigmen
empedu sebagian besar merupakan hasil katabolisme hemoglobin yang berasal dari
penghancuran sel-sel darah merah oleh sistem retikuloendotelial dari hati, limpa dan sumsum
tulang. Pigmen empedu yang utama adalah biliverdin, yang berwarna hijau dan bilirubin yang
berwarna jingga/kuning coklat. Oksidasi pigmen empedu oleh berbagai pereaksi akan
menghasilkan suatu turunan yang berwarna, misalnya mesobiliverdin (hijau hingga biru),
mesobilirubin (kuning) dan mesobilisianin (biru hingga ungu) (Prijanti, 1999: 32-33).



C. ALAT DAN BAHAN
Alat : - Tabung Reaksi
- Pipet Tetes
- Rak Tabung Reaksi
- Pipet Volum
Bahan : - Air Liur
- Empedu
- Indikator Univesal
- Kertas Saring
- NaOH 10%
- CuSO
4

- Pereaksi Molisch
- Asam Sulfat Pekat
- Asam Asetat Encer
- HCl
- BaCl
2
2%
- HNO
3
pekat
- Larutan Sukrosa 5%
- Minyak
- Air Suling

D. CARA KERJA
Air Liur
1. Uji Biuret
2 mL Air Liur (tidak disaring)
- Masukkan tabung reaksi
- + 2mL NaOH 10% (campur)
- + CuSO
4

- Campur
Hasil
2. Uji Molisch
2 mL Air Liur (tidak disaring)
- Masukkan tabung reaksi
- + 2 tetes pereaksi Molisch
- Campur
Hasil
- + 2 mL asam sulfat pekat (alirkan melalui dinding
tabung)
- Perhatikan dan catat perubahannya
Hasil

3. Uji Presipitasi
2 mL Air Liur (disaring)
- Masukka tabung reaksi
- + 1 tetes asam asetat encer
- Campur
- Perhatikan dan catat yang terjadi
Hasil

4. Uji Sulfat
1 mL Air Liur (disaring)
- Masukkan tabung reaksi
- + 3-5 tetes HCl
- + 5-10 tetes BaCl
2

- Campur
- Perhatikan dan catat yang terjadi
Hasil
Empedu
1. Sifat Empedu
Perhatikan dan catat sifat fisik empedu




2. Uji Gmelin
3 mL HNO
3
pekat
- Masukkan tabung reaksi
- Alirkan melalui dinding tabung 3 mL empedu encer
(kedua larutan tidak bercampur)
- Perhatikan warna yang terbentuk pada perbatasan kedua
cairan
Hasil
3. Uji Pettenkofer
5 mL larutan empedu encer
- Masukkan tabung reaksi
- + 5 tetes larutan sukrosa 5%
- Alirkan 3 mL asam sulfat pekat melalui dinding tabung
2 lapisan cairan
- Perhatikan cincin pada perbatasan kedua lapisan
Hasil

4. Fungsi Empedu sebagai Emulgator
2 tabung reaksi

Tabung I Tabung II
- Masukkan @ 3 mL air suling
- + @ 1 tetes minyak

Tabung I Tabung II
- + 3 mL empedu encer
- Kocok keduanya
- Catat apakah terbentuk emulsi yang stabil
Hasil tabung I dan tabung II




E. HASIL PENGAMATAN
Air Liur
Langkah Kerja Hasil Pengamatan
Uji Biuret
 2 ml air liur (tidak disaring) + 2 mL
NaOH 10% (campur)
 + beberapa tetes CuSO
4
(campur)

 Terbentuk 2 fase. Di atas putij keruh dan
bagian bawah bening
 Larutan berubah menjadi biru dan setelah
dikocok larutan menjadi ungu, makin
lama dikocok larutan semakin ungu
Uji Molisch
 2 mL air liur (tidak disaring) + 2 tetes
pereaksi Molisch (campur)

 + 2 mL asam sulfat pekat (alirkan
melalui dinding tabung)


 Larutan menjadi keruh dan terdapat butir
hitam
 Terbentuk cincin, dan terdapat 3 fase
Atas : putih keruh agak cokelat
Tengah: cincin ungu
Bawah : putih bening
Uji Presipitasi
 2 ml air liur (disaring) + 1 tetes asam
asetat encer (campur)

 Setelah disaring air liur menjadi bening.
Larutan menjadi putih keruh dan
terbentuk buih dipermukaan larutan
Uji Sulfat
 1 mL air liur (disaring) + 3-5 tetes HCl
 + 5-10 tetes BaCl
2
2% (campur)

 Warna larutan menjadi bening
 Menjadi lebih bening

Empedu
Langkah Kerja Hasil Pengamatan
Sifat Empedu
 Perhatikan dan catat sifat fisik empedu

Terdapat lendir berwarna hijau, memiliki
selaput seperti kantung yang di dalamnya
terdapat cairan kental berwarna hijau tua
Uji Gmelin
 HNO
3
pekat + 3 mL empedu encer (tidak
bercampur)


 Terbentuk beberapa fase, paling atas
hijau, selanjutnya hitam, cokelat, merah
kekuningan dan paling bawah bening.
Setelah didiamkan beberapa detik
terdapat 4 fase dengan warna berbeda;
I (paling atas): coklat tanah
II : orange kemerahan
III : kuning
IV (paling bawah) : bening
Uji Pettenkofer
 5 mL empedu encer + 5 tetes larutan
sukrosa
 Alirkan 3 mL asam sulfat pekat melalui
dinding tabung (terbentuk 2 lapisan)

Timbul gelembung (busa) di atas.
Terbentuk 3 lapisan:
Lapisan atas : warna hijau
Lapisan tengah : agak hitam
Lapisan bawah : agak bening coklat
Fungsi Empedu sebagai emulgator
 2 tabung reaksi @ masukkan 3 mL air
suling + @ 1 tetes minyak
 Tabung II + 3 mL empedu encer
 Kocok kedua tabung


 Tabung I dan II antara air suling dan
minyak berpisah
 Ya.
Di bagian paling atas terbentuk emulsi.
Minyak tersisa sedikit, ada yang larut dan
ada yang tidak larut.


F. ANALISIS DATA
Persamaan reaksi1. Air Liur
Uji biuret


Uji molish



Uji presipitasi

Uji sulfat

2. Empedu
Uji gmelin
Bilirubin + HNO
3
→ cincin kuning (Choletelin)






Uji Pettenkoffer
O
OH
H
O H
OH
H
O H OH
O
H
H
H
O H
OH
H OH
H
OH
O
terhidrolisis
OH
O
H OH
O H H
H OH
H OH
sukrosa
glukosa

OH
O
H OH
O H H
H OH
H OH
glukosa
+ H
2
SO
4
C
O
CH
C
CH
CH
O
H
2
C
OH
5-hidroksimetil furfural
C
O
CH
C
CH
CH
O
H
2
C
OH
5-hidroksimetil furfural
+
asam-asam empedu
kompleks hijau kehitaman

Uji empedu sebagai emulgator
Garam-garam empedu + minyak → micelles
Micelles + air → larut



G. PEMBAHASAN
Pencernaan makanan yaitu pengubahan makanan dari sejak awal hingga menjadi bentuk
molekular yang siap untuk diserapmelalui dinding usus. Proses ini berlangsung dalam sistem
pencernaan makanan yang terdiri dari berbagai organ tubuh yaitu mulut sampai empedu.Di
dalam mulut terdapat cairan air liur atau saliva yang terdiri atas enzim amilase yang dapat
membantu dalam proses penghancuran makanan secara kimiawi.
Pada praktikum ini akan dibahas mengenai sifat fisik saliva (air liur) dan empedu sebagai
organ pencernaan manusia. Percobaan pertama yang dilakukan yaitu mengamati sifat fisik dari
air liur dan empedu. Sifat fisik yang dapat di amati dari air liur tersebut, yaitu air liur terlihat
kental daripada air biasa. Sedangkan empedu terlihat berwarna hijau tua dan pekat. Warna hijau
ini disebabkan adanya pigmen biliverdin, yaitu zat warna empedu yang berasal dari pemecahan
hemoglobin pada butir darah merah. Empedu berbau amis hal ini dikarenakan empedu banyak
mengandung garam-garam anorganik, kolesterol, lemak dan pigmen-pigmen yang bercampur
menjadi satu sehingga menghasilkan bau yang amis. Keadaan wujud dari empedu adalah cair dan
kental, banyaknya zat-zat yang terkandung dalam empedu mengakibatkan cairan empedu kental.
Adapun percobaan yang dilakukan pada air liur atau saliva yaitu penetapan pH air liur,
uji biuret, uji molisch uji presipitasi dan uji sulfat.
Pada penetapan pH air liur dengan kertas indikator didapatkan bahwa pH air liur yaitu 8,
yang menunjukkan bahwa air liur tersebut bersifat basa. Namun pada umumnya pH saliva adalah
sedikit dibawah 7 (Poedjiadi, 2007: 235), yang artinya bersifat asam. Perbedaan pH air liur pada
praktikum bisa disebabkan karena faktor makanan yang dikonsumsi oleh pemilik air liur.
Percobaan selanjutnya yaitu reaksi biuret yang bertujuan untuk membuktikan adanya senyawa
dengan ikatan peptida (protein) dalam air liur. Reaksi biuret (larutan CuSO
4
alkalis) terdiri atas
larutan NaOH dan larutan CuSO
4
. Cu pada larutan alkalis bereaksi dengan protein membentuk
suatu kompleks koordinasi antara ion Cu
2+
dengan gugus CO dan NH pada ikatan peptida.
Kompleks tersebut memberi warna lembayung (Prijanti, 1999: 25). Penambahan NaOH pada
reaksi biuret bertujuan agar larutan protein dalam air liur menjadi alkalis, sedangkan
penambahan CuSO
4
akan menunjukkan apakah uji ini positif atau negatif. Uji positif dari reaksi
ini ditandai dengan terbentuknya endapan ungu. Hal ini terjadi karena gugus –CO dan –NH dari
ikatan peptida dalam molekul protein yang di uji membentuk warna merah violet atau ungu bila
direaksikan dengan

dalam suasana alkali.Dan dari praktikum yang dilakukan uji ini positi
karena terbentuknya warna ungu pada larutan setelah dikocok. Hal ini menunjukkan adanya
ikatan peptida pada air liur tersebut.

Uji ketiga dari air liur yaitu uji Molisch yang bertujuan menunjukkan adanya karbohidrat
dalam air liur. Pereaksi Molisch terdiri dari larutan α-naftol dalam alkohol. Bila pereaksi ini
ditambahkan misalnya, pada larutan glukosa kemudian dengan hati-hati ditambahkan asam sulfat
pekat, akan terbentuk dua lapisan zat cair dengan adanya cincin ungu (Poedjiadi, 2007: 42).
Reaksi ini disebabkan oleh daya dehidrasi asam anorganik pekat terhadap karbohidrat,
membentuk furfural atau turunannya, seperti hidroksimetilfurfural. Pereaksi Molisch yang terdiri
atas α-naftol akan bereaksi dengan furfural membentuk senyawa berwarna ungu (Prijanti, 1999:
27). Dan dari hasil pengamatan yang kami lakukan terliha adanya cincin ungu yang
menunjukkan bahwa uji ini positif, artinya pada air liur terdapat adanya karbohidrat. Selain itu
pada reaksi ini menujukkan adanya reaksi eksoterm, yang ditandai dengan dinding tabung terasa
hangat.
Uji selanjutnya yaitu uji presipitasi pada air liur yang disaring, yang bertujuan menunjukkan
adanya musin dalam air liur dengan dasar bahwa protein dapat dipresipitasi oleh asam asetat.
Hasilnya diperoleh larutan yang berubah menjadi keruh, yang menunjukkan bahwa dalam air liur
tersebut terdapat musin yaitu suatu golongan glikoprotein, dimana protein berikatan dengan
karbohidrat.
Uji terakhir untuk air liur yaitu uji sulfat yang tujuannya untuk menunjukkan adanya sulfat
dalam air liur. Dimana dasarnya bahwa ion sulfat dapat diendapkan oleh barium. Uji positif dari
reaski ini yaitu akan terbentuk senyawa berwarna, namun dari hasil praktikum tidak didapatkan
larutan berwarna dan tidakada endapan karena larutan menjadi bening yang berarti di dalam air
liur tidak terdapat adanya sulfat.
Pengujian kedua yaitu untuk empedu. Untuk mengetahui sifat lain dari empedu dilakukan
3 macam uji, yaitu uji gmelin, pettenkofer, dan pengujian untuk membuktikan fungsi empedu
sebagai emulgator. Uji pertama yaitu uji gmelin tujuannya untuk mengetahui adanya pigmen
empedu. Hasil yang didapat dari uji ini dengan penambahan HNO
3
yaitu terbentuk beberapa
warna seperti coklat, kuning, dan bening dimana warna-warna ini merupakan pigmen dari
empedu. Hal ini terjadi karena penambahan asam nitrat pada pigmen empedu akan menghasilkan
senyawa hasil oksidasi yang berwarna.Sehingga dari percobaan ini dapat dikatakan bahwa
empedu tersebut mengandung pigmen empedu.
Uji kedua yaitu uji pettenkofer yang bertujian untuk membuktikan adanya asam empedu.
Asam-asam empedu yang terdapat dalam empedu terutama sebagai garam empedu, merupakan
turunan senyawa aromatik kompleks. Asam empedu bereaksi dengan furfural (yang terbentuk
pada penambahan asam pekat dan karbohidrat) membentuk turunan yang berwarna (Prijanti,
1999: 35). Pada percobaan ini terlihat bahwa setelah pnambahan asam sulfat pekat larutan
menimbulkan tiga wara yaitu hijau muda, hitam dan bening kekuningan. Hal ini menunjukkan
bahwa pada empedu terdapat adanya asam empedu.
Uji terakhir terhadap empedu yaitu untuk membuktikan empedu bersifat sebagai emulgator
atau bahan yang dapat menstabilkan emulsi. Emulsi adalah suatu suspensi penstabil yang
terbentuk dari 2 atau lebih zat cair yang tidak dapat larut satu sama lain. Untuk menstabilkan
emulsi dibutuhkan komponen ketiga yang dapat menurunkan tegangan permukaan antara kedua
fase cairan. Garam empedu mempunyai kemampuan cukup besar untuk menurunkan tegangan
permukaan. Kemampuan ini membuat getah empedu mampu mengemulsikan lemak di dalam
usus dan melarutkan asam lemak serta sabun yang tak larut air (Murray, 2001: 634). Hasil yang
didapat yaitu pada tabung 2 terbentuk emulsi dimana minyak yang ditambahkan tidak larut
semua namun tersisa sedikit yang tak larut.



H. KESIMPULAN
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan, dapat diambil beberapa kesimpulan
antara lain:
1. Sifat fisik air liur yaitu air liur terlihat kental daripada air biasa.
2. Empedu terlihat berwarna hijau tua dan pekat. Warna hijau ini disebabkan adanya
pigmen biliverdin, yaitu zat warna empedu yang berasal dari pemecahan hemoglobin
pada butir darah merah. Empedu berbau amis hal ini dikarenakan empedu banyak
mengandung garam-garam anorganik, kolesterol, lemak dan pigmen-pigmen yang
bercampur menjadi satu sehingga menghasilkan bau yang amis.
3. Reaksi biuret yang bertujuan untuk membuktikan adanya senyawa dengan ikatan
peptida (protein) dalam air liur, menunjukkan hasil yang positif yang ditandai dengan
terbentuknya warna ungu pada larutan.
4. Uji Molisch yang bertujuan menunjukkan adanya karbohidrat dalam air liur dan uji
ini menunjukkan hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya cincin ungu
5.
6. Dari uji sulfat dapat disimpulkan bahwa dalam air liur terkandung sulfat ditunjukkan
dengan terbetuknya senyawa berwarna. Dan pada praktikum uji ini negatif
7. Dari uji gmelin yang dilakukan terhadap empedu dapat dibuktikan bahwa dalam
pigmen terdapat adanya pigmen empedu yang ditunjukkan oleh terbentuknya warna-
warna setelah penambahan HNO
3

8. Uji pettenkofer membuktikan di dalam empedu terdapat asam empedu yang
ditunjukkan oleh terbentukya warna setelah penambahan reaktan.
9. Empedu dapat berfungsi sebagai emulgator karena mempunyai kemampuan untuk
menurunkan tegangan permukaan









DAFTAR PUSTAKA
Hardjasasmita, Pantjita.1992.Ikhtisar Biokimia Dasar A. Jakarta: Fakultas Kedokteran
Universitas Indonesia.

Kimball, John. W.1983.Biologi Edisi Kelima. Jakarta: Erlangga.
Murray, Robert K dkk. 2001. Biokimia Harper. Jakarta: Kedokteran EGC.

Poedjiadi, Anna. 2007. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press.

Prijanti, Ani Retno. 1999. Penuntun Praktikum Biokimia Untuk Mahasiswa Keperawatan.
Jakarta: Widya Medika.
























MENETAPKAN KADAR KOLESTEROL
A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM
1. Tujuan : Untuk mengetahui kadar kolesterol
2. Hari, Tanggal : Senin, 30 Mei 2011
3. Tempat : Laboratorium Kimia, Fakultas MIPA Universitas Mataram.

B. LANDASAN TEORI
Kolesterol merupakan steroid hewani yang terdapat paling meluas dan dijumpai
dalam hampir semua jaringan hewan. Batu kandung empedu dan kuning telur merupakan
sumber yang kaya akan senyawa ini. Kolesterol merupakan zat antara yang diperlukan dalam
biosintesis hormin steroid, namun tak merupakan keharusan dalam makanan karena dapat
disintesis dari asetilkoenzim A. Kadar kolesterol yang tinggi dalam darah dikaitkan dengan
arteriosklerosis (pengerasan pembuluh darah), suatu keadaan dalam mana kolesterol dan lipid-
lipid lain melapisi dinding dalam pembuluh darah dapat dikendalikan dengan diet (Fessenden,
1986: 425).
Barangkali steroid yang paling dikeal ialah kolesterol. Dengan 27 karbon, kolesterol
dibiosintesis dari lanosterol lewat urutan reaksi, yang menyertakan pelepasan tiga atom
karbon. Kolesterol terdapat dalam semua sel hewan tetapi terutama terkonsentrasi dalam otak
dan sumsum tulang punggung, dan pada tubuh manusia terdapat dalam darah, empedu,
adrenal korteks, dan jaringan syaraf. Jumlah total kolesterol yang ada dalam tubuh manusia
rata-rata ialah sekitar 2 ons. Tampaknya terdapat hubungan antara konsentrasi kolesterol
serum darah dan penyakit jantung koroner. Kadar di bawah 200 mg/dL dapat diterima, tetapi
kadar di atas 280 mg/dL tampaknya beresiko tinggi (Hart, 2003: 479).
Dari rumus kolesterol, dapat dilihat bahwa gugus hidroksil yang terdapat pada atom
C nomor 3 mempunyai posisi β oleh karena dihubungkan dengan garis penuh.
OH
CH
3
CH
3
CH
CH
3
CH
2
CH
2
CH
2
CH
CH
3
CH
3
kolesterol

Kolesterol dapat larut dalam pelarut lemak, misalnya eter, kloroform, benzena, dan alkohol
panas. Bila terdapat dalam konsentrasi tinggi, kolesterol mengkristal dalam bentuk kristal
yang tidak berwarna, tidak berasa dan tidak berbau, dan mempunyai titik lebur 150-151˚C.
Endapan kolesterol bila terdapat dalam pembuluh darah dapat menyebabkan penyempitan
pembuluh darah karena dinding pembuluh darah menjadi makin tebal. Adanya kolesterol
dapat ditentukan dengan menggunakan beberapa reaksi warna. Salah satu diantaranya ialah
reaksi Salkowski. Apabila kolesterol dilarutkan dalam kloroform dan larutan ini dituangkan
di atas larutan ini dituangkan di atas larutan asam sulfat pekat dengan hati-hati, maka bagian
asam berwarna kekuningan dengan fluoresensi hijau bila dikenai cahaya. Bagian kloroform
akan berwarna biru dan yang berubah menjadi merah dan ungu. Larutan kolesteol dalam
kloroform bila ditambah anhidrida asam asetat dan asam sulfat pekat, maka larutan tersebut
mula-mula akan berwarna merah, kemudian biru, dan hijau. Ini disebut reaski Lieberman
Burchard. Warna hijau yang terjadi ini ternyata sebanding dengan konsentrasi kolesterol
(Poedjiadi, 2007: 74-75).
Kolesterol adalah lipid yang terdapat pada membran sel pada jaringan hewan, dan
ditransportasikan ke plasma darah pada hewan tersebut. Sebagian besar kolesterol di dalam
tubuh kita disintesa oleh tubuh dan juga diambil dari sumber makanan. Kolesterol memainkan
peranan penting dalam proses biokimia misalnya sebagai komponen membran sel dan sintesa
berbagai hormon steroid. Karena kolesterol tidak larut dalam darah, maka ditransportasikan
dalam system sirkulai lipoprotein ( Sudarma, 2009: 85).
Spektofotometer adalah alat untuk mengukur transmitans (T atau %T) atau absorban
(A) suatu cuplikan sebagai fungsi dari panjang gelombang. Spektofotometer dapat digunakan
untuk mengukur serapan baik dadaerah tampak ( sinar tampak) dengan daerah panjang
gelombang antara 380-750 nm, didaerah ultra lembayung(sinar UV atau sinar ultraviolet)
dengan daerah panjang gelombang antara 200-350nm. Absorpsi dalam daerah ultraviolet dan
daerah tampak menyebabkan eksitasi elektron ikatan. Puncak absorpsi (λ
maks
) dapat
dihubungkan dengan jenis ikatan-ikatan yang ada dalam spesies (Khopkar, 2007: 201-202).
Absorpsi cahaya UV atau cahaya tampak mengakibatkan transisi elektonik yaitu
promosi elektronik dari orbital keadaan dasar tereksitasi berenergi lebih tinggi. Panjang
gelombang cahaya UV atau cahaya tampak bergantung pada mudahnya promosi elekton.
Molekul yang memerlukan lebih banyak energi untuk promosi elektron, akan menyerap pada
panjang gelombang yang lebih pendek. Molekul yang memerlukan energi lebih sedikit akan
menyerap pada panjang gelombang yang lebih panjang. Senyawa yang menyerap cahaya
dalam daerah tampak( yakni senyawa berwarna) mempunyai elektron yang lebih mudah
dipromosikan dari pada senyawa yang menyerap pada panjang gelombang UV yang lebih
pendek. Panjang gelombang absorpsi biasanya dilaporkan sebagai λ
maks
, yakni panjang
gelombang pada titik tertinggi kurva. Ahli kimia menyatakan absorpsi energi itu sebagai
absortivitas molar dan bukan sebagai absorbans sebenarnya. Sering kali spektra UV dialur
untuk menunjukkan c atau log c dan bukan A sebagai ordinat (Fessenden, 1986: 437-439):
c= A/ cl
c = absortivitas molar
A= absorbans
c = konsentrasi , dalam M
l= panjang sel , dalam cm


C. ALAT DAN BAHAN
Alat : - Alat Spektrofotometer UV
- Vortex Mixer
- Tabung Reaksi
- Rak Tabung Reaksi
- Penutup Tabung Reaksi
- Pipet Volum
- Pipet Tetes
- Penjepit
- Penangas Air
Bahan : - Alkohol Absolut
- Serum (tinggi dan rendah)
- Petroleum Eter
- Colour Reagent (1,0 mgr FeCl
3
.6H
2
O/ml asam asetat glasial)
- Colour Reagent (0,000 gr FeCl
3
.6H
2
O/ml asam asetat glasial)
- Kolesterol Standar
- H
2
SO
4
pekat
- Asetat glasial
- Aquades
D. SKEMA KERJA
 Uji Sampel
25 mL alkohol absolut
Masukkan dalam tabung reaksi bertutup (S)
+ 0,1 ml serum
Kocok
Hasil
+ 5 ml petroleum eter (tutup tabung)
Campur dengan vortex mixer (30 detik)
Hasil
+ 3 ml aquades
Kocok (10-15 detik)
Diamkan sampai terbentuk 2 lapisan

Lapisan Atas Lapisan Bawah
Ambil, masukkan tabung reaksi lain
Uapkan, Masukkan penangas (80°C)
Biarkan mengering di udara terbuka
Hasil
+ 4 ml colour reagent (1 ml FeCl
3
. 6H
2
O / ml asam asetat glasial)
Sampel Blangko
A penangas air ± 5 menit Masukkan 4 mL asam asetat
Dinginkan pada suhu kamar glasial
+ 3 mL asam sulfat pekat
Kocok dengan vortex mixer
Diamkan dalam ruang gelap (30 menit)
Ukur A dan %T S terhadap B (λ=560 nm)
Hasil




 Kurva kalibrasi
Larutan kolesterol standar 0,05 mg/ml petroleum eter
Masukkan masing-masing dalam 3 tabung reaksi

Tabung I Tabung II Tabung III
(0,5 mL) (1 mL) (2 mL)

Uapkan →kering (penangas air 80°C), sisanya
uapkan pada suhu kamar
Hasil
+ 4 ml colour reagent (1 ml FeCl
3
. 6H
2
O / ml
asam asetat glasial)

Sampel Blangko
A penangas air ± 5 menit Masukkan 4 mL asam asetat
Dinginkan pada suhu kamar glasial
+ 3 mL asam sulfat pekat
Kocok dengan vortex mixer
Diamkan dalam ruang gelap (30 menit)
Ukur A dan %T S terhadap B (λ=560 nm)
Hasil

E. HASIL PENGAMATAN
a. Uji sampel
Langkah Kerja
Pengamatan
Serum 246 Serum 177
I. uji sampel
1. Sediakan tabung reaksi
tertutup ( tabung S)
2. 2,5 ml alkohol absolut ke
dalam tabung reaksi
3. Tambahkan 0,1 ml serum
kocok
4. Tambahkan 5,0 ml
petroleum eter, tutup
tabung reaksi rapat – rapat
5. Campur dengan vortex
mixer selama 30 detik
6. Tambahkan 3 ml aquades
dan kocok lagi selama 10 –
15 detik, kemudia
didiamkan sampai terjadi
2 lapisan
7. Ambil lapisan atas
masukkan dalam tabung
reaksi.
8. Uapkan dalam penangas air
1. Bening
2. Terbentuk endapan
putih
3. Tidak
menyatu/bercampur
4. V=1,5 x 1000pm
Semakin terpisah
endapan semakin
padat
5. Terbentuk 2 lapisan .
lapisan atas bening ,
lapisan bawah putih,
keruh dan ada
endapan /gumpalan
putih.
6. Lapisan atas bening
7. Terdapat bercak-
bercak merah
8. Terbentuk 2 lapisan
atas benin dan bawah
endapan hijau
Hasil (2-12) sama
dengan serum 246
sedangkan yang ke
13. endapan naik
kepermukaan terbentuk
2 lapisan bawah bening
atas endapan hijau (tidak
banyak /seperti terbentuk
cincin)

denga temperatur 80
0
C (
dalam chemical hood )
samapai cairan tinggal
sedikit ambil tabung dan
biarkan mengering
9. Tambahkan 4,0 ml Colour
Reagent
10. Ambil tabung lain untuk
blangko
11. Masukkan 4,0 ml Colour
Reagent ( 0,000 gr
FeCl
3
6H
2
O/ml asam asetat
glasial).
12. Masukkan tabung S dalam
penagas air beberapa menit
kemudian dinginkan
13. masukkan 3,0 ml H
2
SO
4

pekat kedalam tabung S
dan B dengan mengalirkan
melalui dinding tabung
yang dimiringkam.
14. Kocok dengan vortex
mixer.
15. Diamkan tabung S dan B
dalam ruang gelap selama
30 menit.
16. Ukur A dan % T larutan S
terhadap B dengan
spektrometer pada _= 560
nth

12. sama dengan yang 9
akan tetapi filtrat(atas)
lebih bening dan endapan
lebih memisah
13. terbebtuk 3 lapisan:
atas berwarna hijau,
tengah berarna hijau
muda agak kekuningan,
dan bawah berwarna
bening.
15. sama dengan hasil
pengamatan ke 13
16. λ= 560 nm






b. Kurva kalibrasi
Langkah Kerja Pengamatan
1. Sediakan 3 tabung reaksi, masing-msing
diisi 0,5 ml; 1,0 ml; dan 2 ml larutan
kolesterol standar 0,05 mg/ml petroleum
eter.
2. kira-kira 0,2 ml
 Tabung 1 = + colour reagent
(warna hijau keruh)
 Tabung 2 = + colour reagent
(warna hijau keruh)
 Tabung 3 = + colour reagent
(warna hijau keruh)
 Tabug 1 setelah didiamkan
terdapat endapan berarna hijau
kebiruan dan filtrat berwarna
bening agak keruh
 Tabung 2 sama dengan tabung 1
 Tabung 3 sama dengan tabung 1
 Blangko hanya berisi colour
reagent
1. Setelah diuapkan
 Tabung 1 filtrat semakin bening ,
endapan biru kehijauan
 Tabung 2 sama dengan tabung 1 tapi
endapan lebih banyak
 Tabung 3 sama akan tetapi
endapannya lebih sedikit
2. Setelah ditambah H
2
SO
4
menjadi
panas
 Tabung 1 terbentuk 2 lapisan atas
2. uapkan sampai kering pada penangas air
(80ºC) dan sisanya diuapkan pada
temperatur kamar
kadar kolesterol masing-masing
tabung I : 125 mg%
Tabung II : 250 mg%
Tabung III : 500 mg%
3. Tambahkan 4 ml colour reagent
4. Ambil tabung lain untuk blanko
krem , bawah hijau
 Tabung 2 setelah dikocok atas hijau
kebiruan, bawahputih keruh
 Tabung 3 warna krem endapan larut
(cepat larut)
 Blangko= terbentuk 3 lapisan
Atas hijau, tengah berwarna kuning,
dan bagian baah bening.


c. Pengukuran
1. absorbans dan % T sampel
Sampel % T
Serum tinggi 81,6 %
Serum rendah 82,1 %

2. absorbans dan % T kurva kalibrasi
Standar % T
Blangko 79,2 %
Tabung 1 (0,5 ml) 79,4 %
Tabung 2 (1 ml) 73,2 %
Tabung 3 (2 ml) 80,2 %








F. ANALISIS DATA


1. Pembuatan Kurva Kalibrasi
- Tabung 1 : V = 0,5 ml
% = 0,05 mg/ml
Berat kolesterol = V x %
= 0,5 x 0,05
= 0,025 mg
%T = 79,4 %
A = -log T
= -log (0,794)
= 0,1001
- Tabung 2 : V = 1 ml
% = 0,05 mg/ml
Berat kolesterol = V x %
= 1 x 0,05
= 0,05 mg
%T = 73,2 %
A = -log (0,732)
= 0,1354
- Tabung 3 : V = 2 ml
% = 0,05 mg/ml
Berat kolesterol = V x %
= 2 x 0,05
= 0,1 mg
% T = 80,2 %
A = -log (0,802)
= 0,0958
Tabel analog:
Tabung Berat (mg) Absorbans (A)
1 0,025 0,1001
2 0,05 0,1354
3 0,1 0,0958



2. Penentuan Kadar Kolesterol
Dari grafik di atas di dapatkan suatu persamaan garis yaitu
0.1001
0.1354
0.0958
y = -0.162x + 0.119
R² = 0.081
0
0.02
0.04
0.06
0.08
0.1
0.12
0.14
0.16
0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12
a
b
s
o
r
b
a
n
s
i

massa
kurva kalibrasi
Y = ax + b
dimana: Y = absorbans b = intersep
a = slope
x = konsentrasi
- Serum tinggi
Dik : T = 81,6 %
A = - log (0,816) = 0,0883
Y = 0.0883
Dari kurva diperoleh persamaan
Y = -0,162x + 0,119
0,0883 = -0,162x + 0,119
X = 0,1895 mg/ 0.1ml
= 1,895 mg/ml
Jadi, konsentrasi kolesterol pada serum tinggi adalah 189,5 mg /100ml
- Serum rendah
Dik : T = 82,1 %
A = - log (0,821) = 0,0856
Y = 0,0856
Dit : x …..?
Jawab:
Y = -0,162x + 0,119
0,0856 = -0,162x + 0,119
x =
162 , 0
119 , 0 0856 , 0
÷
÷
= 0,2061 mg/ 0,1 ml
konsentrasi kolesterol = 206,1 mg/100ml
3. Persamaan Reaksi























G. PEMBAHASSAN

Pada praktikum kali ini kita melakukan percobaan mengenai penetapan kadar kolesterol,
dimana kolesterol adalah salah satu turunan steroid penting yang banyak terdapat pada hewan
dan manusia. Sebagai turunan steroid, maka senyawa ini diturunkan dari cincin utama steroid
yang disebut kelestana. Kolesterol terdapat pada hampir semua sel hewan dan manusia. Pada
tubuh manusia, kolesterol terdapat di dalam darah, empedu, kelenjar adrenalin bagian luar (
adrenal cortex), dan jaringan syaraf (Anna Poedjiadi, 2007.74).

Pada praktikum ini dilakukan 2 kali percobaan yaitu percobaan pertama pengujian
sampel pada serum tinggi dan serum rendah, percobaan ke-dua yaitu pengukuran absorbans
dan % T pada tiga kolesterol standart dengan kadar masing-masing 125 mg%, 250 mg%, dan
500 mg%.. Kolesterol dalam serum tidak terdapat bebas, melainkan berkonjugasi sebagai
lipoproteida, yaitu pembentu protein yang terdiri atas 25% kolesterol dan 75% ester asam
lemak tidak jenuh (Yazid, 2006).
Untuk uji sampel, perlakuan pertama pada serum baik serum tinggi maupun serum
rendah yaitu penambahan alkohol dimana alkohol di sini berfungsi sebagai pelarut. Karena
pada dasarnya kolesterol dapat larut dalam pelarut lemak, misalnya eter, kloroform, benzena,
dan alkohol panas. Bila terdapat dalam konsentrasi tinggi, kolesterol mengkristal dalam
bentuk kristal yang tidak berwarna, tidak berasa dan tidak berbau, dan mempunyai titik lebur
150-151˚C (Poedjiadi, 2007: 74). Selain alkohol, penambahan petroleum eter juga berfungsi
sebagai pelarut untuk melarutkan serum. Setelah penambahan larutan petroleum eter larutan
terlihat tidak bercampur, dan setelah disentrifuga endapan semakin padat.Namun setelah
penambaha aquades terbentuk dua lapisan , yang atas bening dan yang bawah keruh dan ada
gumpalan putih. Kemudian lapisan atas diambil dan diuapkan dengan penangas air, yang
diuapkan di sini yaitu pelarut-pelarut yang digunakan tadi seperti alkohol dan petroleum eter
karena kedua pelarut tersebut mudah menguap, sehingga tabung mongering. Tabung yang
sudah mongering tersebut ditambahkan dengan color reagent, yang berfungsi sebagai
pereaksi yang memberikan warna, setelah itu di panaskan agar sisa-sisa kolesterol dapat larut
dengan cepat
Selain penambahan pelarut, ada juga penambahan H
2
SO
4
atau asam sulfat yang
berfungsi untuk membentuk kompleks warna, sehingga dari hasil pengamatan menunjukkan
terbentuknya tiga lapisan warna yaitu hijau,hijau muda agak kekuningan, dan bening. Selain
sebagai pembentuk kompleks warna, asam sulfat juga berfungsi memutus ikatan ester lipid.
Bila dalam sampel terdapat kolesterol, maka lapisan kolesterol di bagian atas akan menjadi
berwarna merah. Ketika asam sulfat ditambahkan dalam campuran yang berisi kolesterol,
maka molekul air berpindah dari gugs C
3
kolesterol yang kemudian teroksidasi membentuk
3,5 kolestadiena (Pramanaroh, 2008).
Dan sebelum pengukuran pada spektrofotometer, sampel disimpan terlebih dahulu
dalam tempat gelap selama kurang lebih 30 menit untuk memaksimalkan penyerapan cahaya
oleh larutan sampel, sehingga didapat nilai absorbans yang baik juga. Hasil yang didapat dari
pengukuran transmittans pada serum tinggi yaitu %T=81,6% sedangkan untuk serum rendah
%T=82,1%.
Untuk menentukan kadar dari kolesterol maka diperlukan adanya kurva kalibrasi,
dimana dalam penentuannya digunakan 3 volume kolesterol standar yaitu 0,5 ml, 1ml, dan 2
ml yang selanjutnya diperlakukan hampir sama dengan uji sampel dari mulai penambahan
colour reagen sampai pengukuran absorban dan tansmitan. Pada pemanasan kedua setelah
penambahan colou reagent untuk tabung sampel, dilakukan untuk melarutkan kolesterol yang
ada dalam sampel ditandai dengan larutan bercampur semua dan terlihat bening. Hasil yang
didapat dari pengukuran absorban kurva kalibrasi menunjukkan angka yang tidak bagus
dimana nilai absorbannya hampir sama dan ada yang sama. Hal ini dapat disebabkan karena
kesalahan pada saat praktikum, misalnya saja karena pemanasan atau penguapan yang
pertama terlalu kering sehingga hanya sedikit atau bahkan tidak ada yang tersisa dalam
tabung, kolesterol belum larut semuanya, atau faktor lainnya.
Dari kurva kalibrasi didapat persamaan y=0,034X dimana slope=0,034, sehingga
dapat ditentukan kadar kolesterol pada serum tinggi dan serum rendah yaitu serum rendah
1,794 dan serum tinggi 2,088.






H. KESIMPULAN


Dari praktikum yang telah dilakukan dapat diambil beberapa kesimpulan, antara lain:
1. Penambahan alkohol dan petroleum eter berfungsi sebagai pelarut untuk melarutkan
sampel.
2. Penambahan asam sulfat menyebabkan terbentuknya kompleks warna dan dapat memutus
ikatan ester lipid.
3. Penyimpanan di tempat gelap bertujuan agar kolesterol yang erbentuk tidak berubah
menjadi vitamin D.
4. Dari kurva kalibrasi diperoleh persamaan garis y=0,034X
5. Kadar kolsterol pada serum tinggi yaitu 2,088
6. Kadar kolesterol pada serum rendah yaitu sebesar 1,794
7. Kadar kolesterol yang tinggi berarti mengandung protein tinggi dan trigliseral rendah.


DAFTAR PUSTAKA


Fessenden. 1986. Kimia Organik Edisi Ketiga. Jakarta: Erlangga.
Hart, Harold. 2003. Kimia Organik: Suatu Kuliah Singkat. Jakarta: Erlangga.
Khopkar. 2007. Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: UI-Press
Poedjiadi, Anna. 2007. Dasar-Dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press.
Pramanaroh. 2008. Test For Cholesterol (terhubung berkala).
http//:www.planetayurvida.com/cholesterol,remedieshtml.
Sudarma, I Made. 2009. Kimia Bahan Alam. Mataram: Universitas Mataram Press.
Yazid, estin. 2006. Penuntun Praktikum Biokimia Untuk Mahasiswa Analis. Yogyakarta :
ANDI-yogyakarta



TA BIOKIMIA NAMA ; RA’YAL AINI
NIM : G1C008012

1. Jalur biosintesis kolesterol dari asetil koenzim A:

Biosintesis kolesterol dari asetil koenzim A melalui beberapa tahap reaksi. Tahap jalur
reaksi tersebut dibagi menjadi 3 bagian yaitu
a. Pembentukan asam mevalonat dari asetat

Asam mevalonat tebentuk dari tiga molekul asetil-CoA yang berkondensasi
melalui pembentukan β-hidroksi-β-metil-glutaril-CoA(HMG-CoA) sebagai senyawa
antaranya. Masing- masing reaksi dikatalisis oleh enzim HMG-CoA sintase dan HMG-
CoA reduktase, dan dalam masing-masing tahap dilepaskan satu molekul koenzim-
A(CoASH) bebas. Dua Molekul NADPH dipakai sebagai koenzim pada tahap reaksi
kedua yang di katalisis oleh HMG-CoAreduktase

C H
3
CO CH
2
CO SCoA COOH CH
2
CH CH
2
CO SCoA
O H
|÷hidroksi- |-metilglutaril-SCoA (HMG-SCoA)
asetoasetil-SCoA
HMG-SCoA sintase
C H
3
CO SCoA
CoASH
CH
3
C CH
2
OH CH
2
COOH
OH
mevalonat
HMG-SCoA reduktase
H
+
+ NADPH
CSoA + NADP
+


b. Pembentukan skualin dari asam mevalonat

Tahap reaksi ini di mulai dengan fosforilasi asam mevalonat dengan ATP,
berturut-turut menghasilkan asam 5-fosfomevalonat, asam 5-pirofosfomevalonat, asam
isopentil pirofosfat (IPP) yang tidak mantap, dna asam 3,3-dimetilalilpirofosfat (DPP)
yang untuk pembentukannya masin-masing, berturut-turut dikaltalisis oleh enzim
mevalonat kinase, fosfomevalonat kinase, pirofosfomevalonat dekarboksilase, dan
isopentenil pirofosfat isomeras.

COOH
CH
2
C
CH
2
CH
2
CH
3
CH
3
O H
mevalonat
mevalonat kinase
COOH
CH
2
C
CH
2
CH
2
OPO
3
H
2
CH
3
O H
COOH
CH
2
C
CH
2
CH
3
O H
O P O P OH
OH
O
O
OH
5-pirofosfomevalonat
5-fosfomevalonat
ATP
ADP
ATP
ADP
fosfomevalonat kinase




Tahap reaksi berikutnya satu molekul IPP berkondensasi dengan stu DPP,
menghasilkan satu molekul monoterpen, geranil pirofosfat (GPP). Reaksi ini
melepaskan 1 molekul pirofosfat (PPi) dan dikatalisis oleh enzim dimetil alil
transferase. Satu molekul (IPP) lagi kemudian bereaksi dengan GPP, dikatalisis oleh
enzim yang sama menghasilkan satu molekul seskuiterpena, farnesil pirofosfat (FPP).

C H
2
C
CH
3
CH
2
H
2
C O P O P OH
OH
OH
O
O
C H
2
C
CH
3
CH
H
2
C O P O P OH
OH
OH
O
O
isopentenil pirofosfat (IPP)
3,3-dimetilalil pirofosfat (DPP)
IPP isomerase
C H
2
C
CH
3
CH
CH
2
H
2
C
CH
C
CH
3
CH
H
2
C O P O P OH
OH
OH
O
O
geranil pirofosfat (GPP)
dimetil transferase
HC
C
CH
3
CH
CH
2
H
2
C
CH
C
CH
3
CH
H
2
C O P O P OH
OH
OH
O
O
CH
2
CH
C
CH
3 C H
2
fersenil pirofosfat (FPP)
IPP
PPi
dimetil transferase



Tahap selanjutnya molekul FPP berkondensasi, melepaskan molekul PPi dan
dikatalisis oleh enzim preskualin sintase, menghasilkan preskualin pirofosfat yang
selanjutnya oleh enzim skualin sintase dan NADPH, direduksi menjadi skualin dan
melepaskan satu molekul PPi.
HC
C
CH
3
CH
CH
2
H
2
C
CH
C
CH
3
CH
H
2
C O P O P OH
OH
OH
O
O
CH
2
CH
C
CH
3
C H
2
fersenil pirofosfat (FPP)
O PH O PH OH
C C CH
2
CH
2
)
2
CH C C H
3
CH
2
CH C (CH
2
CH C CH
3
)
2
CH
3
CH
3 CH
3
preskualin pirofosfat








skualin
skualin sintase
preskualin sintase
FPP
PPi
NADPH
NADP
+
, PPi

ACARA III
PENETAPAN AMILASE ( WOHLGEMUTH )

A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM

1. Tujuan Praktikum : Menentukan kadar amilase pada air seni.
2. Waktu Praktikum : Senin, 6 Juni 2011
3. Tempat Praktikum : Lantai 3 Laboratorium Kimia Dasar FMIPA

B. LANDSAN TEORI

Tubuh manusia menghasilkan berbagai macam enzim yang tersebar di berbagai bagian dan memiliki
fungsi tertentu. Salah satu enzim yang penting dalam sistem pencernaan manusia adalah enzim amilase.
Amilase merupakan enzin hidrolase yang menguraikan golongan karbohidrat yaitu menguraikan amilum
(suatu polisakarida) menjadi maltosa 9 suatu disakarida) ( Hardjono, 2003: 26 ).

2 (C
6
H
10
O
5
)n + n H2O n C
12
H
22
O
11



Glukosa amilum dapat dihidrolisis sempurna dengan menggunakan asam sehingga mengahsilkan
glukosa. Hidrolisis juga dapat dilakukan dengan bantuan enzim amilase, dalam ludah dan dalam cairan
yang dikeluarkan oleh pangkreas terdapat amilase yang bekerja terhadap amilum yang terdapat dalam
makanan kita, oleh enzim amilase amilum diubah menjadi maltose dam bentuk β maltose. Enzim amilase
dapat memecah ikatan-ikatan pada amilum hingga terbentuk maltosa. Ada tiga macam enzim amilase,
amilase
amilum maltosa
yaitu o amilase, | amilase, dan · amilase. o amilase terdapat dalam saliva (ludah) dan pankreas, enzim
ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah
bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum. | amilase terutama terdapat pada tumbuhan dan
dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada ujung molekul amilum
secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk maltosa, · amilase telah diketahui terdapat dalam
hati. Enzim ini dapat memecah ikatan 1-4 dan 1-6 pada glikogen dan menghasilkan glukosa (poedjiadi.
2007:37dan 152-154).
Enzim o amilase mempunyai kemampuan untuk memotong ikatan o -1,4 amilosa dan amilopektin
dengan cepat pada larutan pati yang kental yang mempunyai gelahtinasi. Proses ini juga dikenal dengna
nama proses Likufikasi pati, produk akhir yang dihasilkan dari aktivitasnya adalah dekstrin beserta
sejumlah kecil glukosa dan malkosa. Menurut Forgaty dan Whitaker, alpha amilase akan menghidralis
ikatan alfa -1,4 glukoksida pada polisakarida dengan hasil degradasi secara acak dibagian tengah atau
bagian dalam molekul. (Nur Richana, 2000).
Amilase merupakan enzim yang penting dalam bidang pangan dan bioteknologi. Amilase
merupakan enzim yang mengkatalisis reaksi hidrolisis pati menjadi gula‐gula sederhana. Amilase
mengubah karbohidrat yang merupakan polisakarida menjadi maltosa (alfa dan beta) ataupun glukosa
(gluko amilase). Amilase dapat diperoleh dari berbagai sumber seperti tanaman, binatang dan
mikroorganisme ( Anam, 2010 : 1 ).
Urin atau air seni atau air kencing adalah cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang
kemudian akan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi. Eksreksi urin diperlukan
untuk membuang molekul-molekul sisa dalam darah yang disaring oleh ginjal dan untuk
menjaga homeostasis cairan tubuh. Namun, ada juga beberapa spesies yang menggunakan urin
sebagai sarana komunikasi olfaktori. Urin disaring di dalam ginjal, dibawa melalui ureter menuju
kandung kemih, akhirnya dibuang keluar tubuh melalui uretra ( Syaifudin, 2005: 33 ).
Urin terdiri dari air dengan bahan terlarut berupa sisa metabolisme (seperti urea), garam terlarut, dan
materi organik. Cairan dan materi pembentuk urin berasal dari darah atau cairan interstisial. Komposisi
urin berubah sepanjang proses reabsorpsi ketika molekul yang penting bagi tubuh, misal glukosa, diserap
kembali ke dalam tubuh melalui molekul pembawa. Cairan yang tersisa mengandung urea dalam kadar
yang tinggi dan berbagai senyawa yang berlebih atau berpotensi racun yang akan dibuang keluar tubuh.
Materi yang terkandung di dalam urin dapat diketahui melalui urinalisis. Urea yang dikandung oleh urin
dapat menjadi sumber nitrogen yang baik untuk tumbuhan dan dapat digunakan untuk mempercepat
pembentukan kompos. Diabetes adalah suatu penyakit yang dapat dideteksi melalui urin. Urin seorang
penderita diabetes akan mengandung gula yang tidak akan ditemukan dalam urin orang yang sehat (
Trioktavia,2010: 30 ).
Fungsi utama urin adalah untuk membuang zat sisa seperti racun atau obat-obatan dari dalam
tubuh. Namun, kita dapat mengetahui berbagai penyakit dari perubahan warna urin. Misalnya,
urin dapat menjadi penunjuk dehidrasi. Orang yang tidak menderita dehidrasi akan
mengeluarkan urin yang bening seperti air. Penderita dehidrasi akan mengeluarkan urin berwarna
kuning pekat atau cokelat. Di samping itu diabetes adalah suatu penyakit yang dapat dideteksi
melalui urin. Hal yang dilakukan untuk menguji apakah seseorang menderita diabetes adalah
dengan melakukan uji glukosa pada urin orang tersebut. Urin seorang penderita diabetes akan
mengandung gula yang tidak akan ditemukan dalam urin orang yang sehat ( Novalia, 2011: 12).


C. ALAT DAN BAHAN

1. Alat
- Gelas kimia
- Tabung reaksi
- Rak tabung reaksi
- Pengaduk
- Pipet volum
- Pipet tetes
- Labu takar 10 ml
- Penjepit
- Penangas air
- Stopwatch
2. Bahan
- Air seni
- Akuades
- Amilum 0,1 %
- Larutan iod
- Tisu
D. SKEMA KERJA

Tabung reaksi
Diberi tanda 1-10
+ urin diencerkan pada tabung 1-5
+ urun tak diencerkan pada tabung 6-10
+ aquades @ tabung
+ amilum 0, % sebanyak 2 ml @ tabung
∆ selama 30 menit T=37
0
C


hasil
dinginkan selama 5 menit dalam air dingin
+ iod @ tabung sampai terjadi perubahan warna
hasil




Tabel Kerja
tabung 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Urin diencerkan
(1:10)(ml)
0,5 0,6 0,7 0,8 0,9
Urin tak
diencerkan (ml)
0,1 0,2 0,3 0,4 0,5
Aquades (ml) 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0,9 0,8 0,7 0,6 0,5
Amilum (ml) 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2

E. HASIL PENGAMATAN
Prosedur Kerja Hasil Pengamatan
 @ urin ditambahkan aquades

 @ urin ditambahkan amilum 0,1 %

 @ urin dipanaskan

 @ urin didinginkan

 @ urin ditambahkan larutan iod encer
 Warna urin tidak ada perubahan

 Tidak ada perubahan

 Tidak ada perubahan

 Tidak ada perubahan

 Tabung 1:larutan menjadi merah jingga dengan 3
tetes larutan iod

 Tabung 2: larutan menjadi bening kekuningan
dengan 4 tetes iod

 Tabung3 : larutan bening kekuningan dengan 2
tetes iod

 Tabung 4 : larutan bening kekuningan dengan 3
tetes iod


 Tabung 5 : larutan bening kekuningan dengan 5
tetes iod
 Tabung 6 : larutan bening kekuningan dengan 4
tetes iod

 Tabung 7 : larutan bening kekuningan dengan 8
tetes iod
 Tabung 8 : larutan bening kekuningan pada
tetesan ke-9

 Tabung 9 : larutan larutan bening kekuningan
pada tetesan ke-11
 Tabung 10 : larutan bening kekuningan dengan 2
tetes iod



F. ANALISIS DATA
Reaksi pada percobaan di atas antra lain sebagai berikut:
1. Reaksi Kimia
Amilum
(s)
+ H
2
O
(l)
→ Amilum
(aq)

Amilum + Iodin → Amilodestrin (biru tua)
Amilodestrin + Amilase → Eritrodestrin
Amilodekstrin (aq) + H2O → Eritodekstrin (aq)
Eritodekstrin (aq) + H2O → Akrodekstrin (aq)
Akrodekstrin (aq) + H2O → Maltosa (aq)

2. Proses Hidrolisis






3. Reaksi Hidrolisis
amilase ∆

amilum amilodestrin akrodestrin (tidak berwarna)



maltosa
O
H
H
H
O H
OH
H OH
H
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H CH
3
CH
2
OH
O
O H
2
O
H
H
H
O H
OH
H OH
H
CH
2
OH
O CH
2
O
O H
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
+
+
destin













G. PEMBAHASAN

Pada percobaan ini akan dibahas mengenai enzim amylase. Adapun tujuan dari praktikum ini yaitu
untuk menentukan kadar amylase dalam urine.
Telah diketahui sebelumnya bahwa di dalam urine terdapat adanya enzim amylase. Namun enzim
amylase tidak hanya terdapat pada urine tetapi juga terdapat pada air liur atau saliva dan pangkreas yang
berupa · amylase, enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat dalam amilum dan disebut endo amilase
sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum. | amilase terutama terdapat
pada tumbuhan dan dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada ujung
molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk maltosa, · amilase telah diketahui
terdapat dalam hati. Enzim ini dapat memecah ikatan 1-4 dan 1-6 pada glikogen dan menghasilkan
glukosa (Poedjiadi. 2007:37dan 152-154).
Untuk mengetahui adanya amylase dalam urine tersebut maka urine direaksikan dengan larutan
amilum 1%, sehingga amylase didalam urine tersebut akan dapat menghidrolisis larutan amilum, menjadi
maltose.
Pada percobaan ini digunakan 10 tabung reaksi yang masing – masing tabung reaksi diisi dengan
sampel ( urin ) yang jumlahnya berbeda – beda. Pada tabung reaksi 1 sampai 5 diisi dengan urin yang
diencerkan ( 1:10 ) sedangkan pada tabung reaksi6 sampai 10 masing – masing diisi dengan urin yang tak
diencerkan. Selanjutnya seluruh tabung tersebut ditambahkan dengan aquades sampai volumenya 1 ml.
kemudian masing – masing tabung tersebut ditambahkan dengan amilum sebanyak 2 ml. selanjutnya
semua larutan tersebut dipanaskan pada suhu 37ºC,
Hal ini dilakukan karena kerja enzim dipengaruhi oleh suhunya. Pada suhu rendah aktifits enzim rendah
tetapi kemantapannya tinggi, sedangkan pada suhu tinggi aktifitas tinggi sedangakan kematangannya
rendah (Wirahadikusumah, 2008 : 61).
Setelah dipanaskan, larutan kemudian didinginkan dan ditambahkan larutan iod encer satu tetes,
namun apabila setelah dikocok warna larutan hilang,maka ditambahkan lagi satu sampai dua tetes.
Namun dari hasil pengamatan dapat dilihat bahwa larutan yang dihasilkan tidak berwarna.
Dari refrensi diketahui bahwa apabila enzim amilase yang terkandung dalam urine tersebut direaksikan
dengan amilum maka, enzim amilase akan membantu proses hidrolisis amilum menjadi molekul yang
lebuh kecil yang ditunjukkan dengan terjadinya perubahan warna.
Pada reaksi hidrolisis parsial, amilum terpecah menjadi molekul yang lebih kecil yang disebut
dengan dekstrin, jadi dekstrin adalah produk antara sebelum terbentuknya maltosa. Tahap dalam hidrolisis
amilumserta warna yang terjadi dengan penambahan iodium sebagai berikut : (Poedjadi,2007 :38)
Tahap hidrolisis Warna dengan iodium
Amilum biru
Amilum terlarut biru
Amilodekstrin lembayung
Eritrodekstrin merah
Akrodekstrin tidak berwarna
maltosa
Apabila larutan yang dihasilkan berwarna merah maka didalam urine terbut terkandung cukup
banyak amilase yang dapat mencerna larutan 1% amilum terlarut menjadi eritrodekstrin, tetapi bila kadar
amilum didalam urine sedikit maka akan tejadi warna biru atau ungu. Dari hasil pengamatan hanya pada
urine yang diencerkan dengan 0,5 ml urine saja yang mengasilkan warna merah jingga ketika direaksikan
dengan larutan iod encer tiga tetes. Sedangakan yang lain hanya menghasilkan warna yang bening
kekuningan baik pada urine yang encer maupun urine pekat walaupun dengan penambahan larutan iod
sampai sebelas tetes. Hal ini dapat disebabkan kesalahan dalam praktikum, kemungkinan dapat
disebabkan karena larutan amilum yang digunakan sudah rusak, karena disimpan terlalu lama. Atau
amilase pada urine sangat sedikit.







H. KESIMPULAN
1. Amylase berfungsi membantu hidrolisis amilum.
2. Urin memiliki kadar amylase yang tinggi apabila pada reaksi hidrolisis amilum setelah
ditambahkan dengan larutan iodine terbentuk warna merah yang menandakan bahwa enzin
amylase cukup banyak untuk mencerna amilum menjadi eritrodekstin.
3. Tujuan pemanasan adalah untuk mengaktifkan kerja enzim
4. Tujuan penambahan amilum pada urine adalah sebagai aktifator
5. Penambahan iod dilakukan untuk menunjukkan ada tidaknya amilase pada urine yang dapat
memberi perubahan warna
6. Pada praktikum ini penetapan amilase pada urine tidak dapat diamati karena tidak terjadi
perubahan warna pada larutan setelah penambahan iod


















DAFTAR PUSTAKA

Anam, Khairul. 2010. Produksi Enzim Amilase. Bogor: Institut Pertanian Bogor.

Hardjono. 2003. Biokimia Dasar. Yogyakarta: UGM-Press.

Novalia. 2011. Ekskresi. Jakarta: Erlangga.

Nur Richana, 2000. Prospek dan Produksi Enzim o -Amilase dari Mikroorganisme. http//biogen-litbang
deptan.go.id. Jurnal Tinjauan Ilmiah Riset Biologi dan Bioteknologi Pertanian Volume 3 No. 2
tahun 2000.


Syaifudin, Mukh. 2005. Efek Radiasi Pada Komponen Biokimia. Jakarta: UI-Press.

Trioktavia. 2010. Sistem Ekskresi. Yogyakarta: UNY-Press.

Poejadi, anna dan F. M Tatin Supriyanti.1994. Dasar-Dasar Biokimia, Jakarta : UI Press.

Wirahadi Kusuma, Muhammad. 1997. Biokimia. Bandung, ITB Press





TA BIOKIMIA RA’YAL AINI
G1C008012

1. Jelaskan mekanisme kerja enzim amilase pada percobaan
2. Dapatkah kerja enzim amilase digunakan oleh asam atau basa? Jelaskan
3. Selain dalam urine dimana lagi dapat ditemukan enzim amilase?


Jawab
1. Pada percobaan tersebut enzim amilase yang terdapat pada urine akan menghidrolisis
atau memecah ikatan pada amilum menjadi molekul yang lebih kecil hinnga
terbentuknya maltosa, namun sebelum maltosa itu terbentuk maka akan terbentuk
produk antara yang disebut dekstrin dengan mekanisme:
1. Reaksi Kimia
Amilum
(s)
+ H
2
O
(l)
→ Amilum
(aq)

Amilum + Iodin → Amilodestrin (biru tua)
Amilodestrin + Amilase → Eritrodestrin
Amilodekstrin (aq) + H2O → Eritodekstrin (aq)
Eritodekstrin (aq) + H2O → Akrodekstrin (aq)
Akrodekstrin (aq) + H2O → Maltosa (aq)

2. Proses Hidrolisis







amilase ∆

amilum amilodestrin akrodestrin (tidak berwarna)



maltosa


3. Reaksi Hidrolisis
O
H
H
H
O H
OH
H OH
H
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H CH
3
CH
2
OH
O
O H
2
O
H
H
H
O H
OH
H OH
H
CH
2
OH
O CH
2
O
O H
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
O
O
H
H
H
OH
H OH
CH
2
OH
+
+
destin



2. Selain didalam urine enzim amilase juga terdapat pada air liur atau saliva dan
pangkreas yang berupa · amylase, enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat
dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam
atau bagian tengah molekul amilum. | amilase terutama terdapat pada tumbuhan
dan dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada
ujung molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk
maltosa, · amilase telah diketahui terdapat dalam hati

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kehadiran Tuhan yang Maha Esa karena berkat limpahan rahmat dan hidayahnya penyusunan laporan ini dapat diselesaikan sebagai salah satu syarat untuk menyelesaikan mata kuliah Biokimia 2. Pembuatan laporan ini,merupakan hasil praktikum yang bertujuan untuk memahami secara mendalam materi-materi kuliah dan mengetahui prosedur kerja dari praktikum yang telah dilakukan.Penulis mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu dalam penyusunan laporan ini. Penulis menyadari bahwa laporan ini masih jauh dari sempurna.Oleh karena itu,kritik dan saran yang sifatnya membangun bagi penyempurnaan penyusunan laporan selanjutnya sangat diperlukan.Semoga laporan ini dapat bermanfaat khususnya bagi mahasiswa kimia.

Mataram, 24 Juni 2011

Penulis

DAFTAR ISI
Halaman Judul ..................................................................................................................... I Halaman Pengesahan........................................................................................................... II Kata Pengantar .................................................................................................................... III Daftar Isi ............................................................................................................................... IV Uji Sifat Fisik Dan Kimia Cairan Tubuh ............................................................................... 1 Menetapkan Kadar Kolesterol ............................................................................................... 19 Penetapan Amilase (Wohlgemuth) ........................................................................................ 36

UJI SIFAT FISIK DAN KIMIA CAIRAN TUBUH (AIR LIUR DAN EMPEDU) A. PELAKSANAAN PRAKTIKUM 1. Tujuan : Mengetahui sifat fisik dan kimia dari cairan tubuh yaitu air liur dan empedu. 2. Hari, tanggal : Senin, 21 Mei 2011. 3. Tempat : Laboratorium Kimia Lantai II , Fakultas MIPA Universitas Mataram B. LANDASAN TEORI Saliva atau air liur adalah cairan yang lebih kental dari air biasa. Tiap hari sekitar 1-1,5 liter saliva dikeluarkan oleh kelenjar saliva. Saliva terdiri atas 99,24% air dan 0,58% terdiri atas ion-ion Ca2+, Mg2+, Na+, K+, PO43-, Cl‾, HCO3‾, SO42‾, dan zat-zat organik seperti musin dan enzim amilase atau ptialin. Musin suatu glikoprotein dikeluarkan oleh kelenjar sublingual dan kelenjar submandibular, sedangkan ptialin dikeluarkan oleh kelenjar parotid. Saliva mempunyai pH antara 5,75 sampai 7,05. Pada umumnya pH saliva adalah sedikit dibawah 7 (Poedjiadi, 2007: 235). Air liur (saliva) disekresi oleh tiga pasang kelenjar besar yaitu parotis, submaksilaris, dan sublingualis. Selain itu, air liur juga disekresi oleh beberapa kelenjar kecil dalam mukosa mulut seperti labialis, lingualis, bukal dan palatal. Sekresi air liur dari kelenjar ke dalam mulut dapat disebabkan oleh rangsangan lokal dalam mulut atau oleh perangsangan pusat akibat rangsang psikis atau somatik. Air liur dalam rongga mulut berfungsi sebagai pelicin dan untuk membasahi makanan saat dikunyah sehingga mudah ditelan. Air liur juga merupakan tempat ekskresi obat-obat tertentu seperti alkohol dan morfin. Air liur mengandung air kira-kira 99,5%. Sekitar dua pertiga dari bahan terlarut dalam air liur merupakan bahan organik dan sepertiganya adalah bahan anorganik. Komponen anorganik air liur antara lain adalah natrium, kalium, kalsium, magnesium, fosfat dan bikarbonat. Sedangkan kandungan organik air liur terutama terdiri atas musin dan enzim amilase, bahan organik lain yang juga terdapat dalam jumlah sedikit adalah urea, kolesterol, hormon-hormon tertentu dll. Saliva juga mengandung berbagai macam sel, seperti sel epitel mukosa mulut, leukosit dan bakteri (Prijanti, 1999: 22). Liur mengandung amilase dan lipase. α-amilase liur mampu membuat pati dan glikogen dihidrolisis menjadi maltosa dan oligosakarida lain dengan menyerang ikatan glikosidat α (14). Amilase liur akan segera terinaktivasi pada pH 4,0 atau kurang, sehingga kerja pencernaan makanan di dalam mulut akan terhenti begitu lingkungan lambung yang asam menembus partikel makanan. Pada banyak hewan, enzim amilase liur sama sekali tidak dijumpai (Murray, 2001: 632). Cairan lain yang terdapat dalam tubuh yang juga berperan pada pencernaan makan yaitu cairan empedu. Cairan empedu dibuat dalam hati dan disimpan dalam kantung empedu apabila tidak digunakan. Kantung empedu ini terdapat melekat pada hati. Pada waktu ada

proses pencernaan makanan, kantung empedu berkontraksi, dan mengeluarkan cairan empedu ke dalam duodenum, melalui saluran yang menyatu dengan saluran cairan pankreas pada bagian akhir. Cairan empedu merupakan cairan jernih, berwarna kuning, agak kental, dan mempunyai rasa pahit. Selama 24 jam dihasilkan cairan empedu sebanyak 500 mL sampai 700 ml. Kontraksi dan pengenduran kantung empedu diatur oleh hormon kolesistokinin yang dibentuk dalam sel usus, sebagai akibat adanya makanan yang masuk ke dalam usus, terutama protein dan lemak (Poedjiadi, 2007: 244). Empedu merupakan prodak hati, mempunyai peranan penting pada pencernaan makanan terutama lemak. Empedu hati, sebelum disekresi kelumen intestinal lebih dahulu disimpan dikandung empedu. Kandung empedu akan mengosongkan isinya selama proses pencernaan berlangsung di dalam intestin. Empedu dan kelenjar pancreas bermuara ditempat yang sama di dalam intestin. Pengosongan empedu dirangsang oleh hormon kolesistokinin, salah satu komponen hormone Boyliss & Starling selama berada di dalam kandung empedu, empedu akan mengalami proses pemekatan melalui cara absorpsi air (Hardjasasmita, 1992; 27) Meskipun hati bukan suatu organ yang tepat dari pencernaan, sekresinya, empedu memegang peranan penting dalam pencernaan lemak. Empedu dihasilkan secara terusmenerus oleh hati, tapi ditampung dalam sebuah alat penampung ialah kantung empedu diantara waktu makan. Bila makanan masuk ke duodenum, lepasnya kolesistokinin akan merangsang konsentrasi kantung empedu dan keluarnya empedu yang dihimpun ke dalam duodenum. Empedu kecuali garam empedu mengandung bahan lainnya, antara lain ialah pigmen empedu, pigmen empedu ini adalah ahsil pemecahan pigmen sel darah merah, hemoglobin, yang dipindahkan oleh hati dari sel-sel darah merah yang tua. Warna kecoklatan pigmen empedu ini memberi warna coklat yang khass dari feses atau tinja (Kimball, 1983; 171). Empedu manusia berwarna kuning keemasan, namun bila dibiarkan pada udara terbuka maka warnanya akan berubah menjadi hijau, biru, dan coklat karena pigmen empedu teroksidasi. Kandungan empedu yang penting antara lain adalah garam-garam empedu, pigmen empedu, lesitin, kolesterol dan garam-garam anorganik. Empedu merupakan campuran hasil sekresi dan ekskresi. Bahan-bahan yang disekresi misalnya garam-garam empedu, sedangkan yang disekresi misalnya pigmen empedu dan kolesterol. Pigmen-pigmen empedu sebagian besar merupakan hasil katabolisme hemoglobin yang berasal dari penghancuran sel-sel darah merah oleh sistem retikuloendotelial dari hati, limpa dan sumsum tulang. Pigmen empedu yang utama adalah biliverdin, yang berwarna hijau dan bilirubin yang berwarna jingga/kuning coklat. Oksidasi pigmen empedu oleh berbagai pereaksi akan menghasilkan suatu turunan yang berwarna, misalnya mesobiliverdin (hijau hingga biru), mesobilirubin (kuning) dan mesobilisianin (biru hingga ungu) (Prijanti, 1999: 32-33).

C.Masukkan tabung reaksi .Perhatikan dan catat perubahannya Hasil .NaOH 10% .Masukkan tabung reaksi .Asam Sulfat Pekat .+ 2 tetes pereaksi Molisch .Kertas Saring . Uji Biuret 2 mL Air Liur (tidak disaring) .Air Liur .Tabung Reaksi .Campur Hasil .CuSO4 .+ CuSO4 .Rak Tabung Reaksi .Larutan Sukrosa 5% .Pipet Volum Bahan : . Uji Molisch 2 mL Air Liur (tidak disaring) .HNO3 pekat .Pereaksi Molisch .Pipet Tetes .BaCl2 2% . ALAT DAN BAHAN Alat : .Empedu .Air Suling D.Campur Hasil 2.+ 2mL NaOH 10% (campur) .Minyak .+ 2 mL asam sulfat pekat (alirkan melalui dinding tabung) . CARA KERJA Air Liur 1.HCl .Indikator Univesal .Asam Asetat Encer .

Masukkan tabung reaksi .+ 3-5 tetes HCl .Campur .Perhatikan warna yang terbentuk pada perbatasan kedua cairan Hasil 3. Uji Gmelin 3 mL HNO3 pekat .Perhatikan dan catat yang terjadi Hasil 4.Perhatikan cincin pada perbatasan kedua lapisan Hasil .Masukkan tabung reaksi . Uji Pettenkofer 5 mL larutan empedu encer .Masukkan tabung reaksi .Perhatikan dan catat yang terjadi Hasil Empedu 1.3.+ 1 tetes asam asetat encer . Uji Presipitasi 2 mL Air Liur (disaring) .Alirkan melalui dinding tabung 3 mL empedu encer (kedua larutan tidak bercampur) .+ 5 tetes larutan sukrosa 5% . Sifat Empedu Perhatikan dan catat sifat fisik empedu 2.Masukka tabung reaksi .Campur .+ 5-10 tetes BaCl2 . Uji Sulfat 1 mL Air Liur (disaring) .Alirkan 3 mL asam sulfat pekat melalui dinding tabung 2 lapisan cairan .

Di atas putij keruh dan NaOH 10% (campur) bagian bawah bening  + beberapa tetes CuSO4 (campur)  Larutan berubah menjadi biru dan setelah dikocok larutan menjadi ungu.4.Kocok keduanya . dan terdapat 3 fase  + 2 mL asam sulfat pekat (alirkan Atas : putih keruh agak cokelat melalui dinding tabung) Tengah: cincin ungu Bawah : putih bening Uji Presipitasi  2 ml air liur (disaring) + 1 tetes asam  Setelah disaring air liur menjadi bening.Catat apakah terbentuk emulsi yang stabil Hasil tabung I dan tabung II Tabung I E. makin lama dikocok larutan semakin ungu Uji Molisch  2 mL air liur (tidak disaring) + 2 tetes  Larutan menjadi keruh dan terdapat butir pereaksi Molisch (campur) hitam  Terbentuk cincin. HASIL PENGAMATAN Air Liur Langkah Kerja Hasil Pengamatan Uji Biuret  2 ml air liur (tidak disaring) + 2 mL  Terbentuk 2 fase.Masukkan @ 3 mL air suling .+ @ 1 tetes minyak Tabung II . Fungsi Empedu sebagai Emulgator 2 tabung reaksi Tabung I Tabung II . asetat encer (campur) Larutan menjadi putih keruh dan terbentuk buih dipermukaan larutan Uji Sulfat  1 mL air liur (disaring) + 3-5 tetes HCl  Warna larutan menjadi bening  + 5-10 tetes BaCl2 2% (campur)  Menjadi lebih bening .+ 3 mL empedu encer .

memiliki selaput seperti kantung yang di dalamnya terdapat cairan kental berwarna hijau tua Uji Gmelin  HNO3 pekat + 3 mL empedu encer (tidak  Terbentuk beberapa fase. selanjutnya hitam. I (paling atas): coklat tanah II : orange kemerahan III : kuning IV (paling bawah) : bening Uji Pettenkofer  5 mL empedu encer + 5 tetes larutan Timbul gelembung (busa) di atas.Empedu Langkah Kerja Sifat Empedu  Perhatikan dan catat sifat fisik empedu Hasil Pengamatan Terdapat lendir berwarna hijau. sukrosa Terbentuk 3 lapisan:  Alirkan 3 mL asam sulfat pekat melalui Lapisan atas : warna hijau dinding tabung (terbentuk 2 lapisan) Lapisan tengah : agak hitam Lapisan bawah : agak bening coklat Fungsi Empedu sebagai emulgator  2 tabung reaksi @ masukkan 3 mL air  Tabung I dan II antara air suling dan suling + @ 1 tetes minyak minyak berpisah  Tabung II + 3 mL empedu encer  Ya. Setelah didiamkan beberapa detik terdapat 4 fase dengan warna berbeda. ada yang larut dan ada yang tidak larut. merah kekuningan dan paling bawah bening. paling atas bercampur) hijau. ANALISIS DATA Persamaan reaksi1. Air Liur Uji biuret . cokelat. Minyak tersisa sedikit.  Kocok kedua tabung Di bagian paling atas terbentuk emulsi. F.

Uji molish .

Uji presipitasi Uji sulfat 2. Empedu Uji gmelin Bilirubin + HNO3 → cincin kuning (Choletelin) .

Uji Pettenkoffer O OH HO H H OH HO H OH sukrosa OH H OH glukosa O H HO H H OH H OH OH OH 5-hidroksimetil furfural glukosa O OH O H HO OH terhidrolisis H HO H H OH H OH OH O H H O + O H2SO 4 H 2C OH C C CH CH CH O O H2C OH C C CH CH CH + asam-asam empedu kompleks hijau kehitaman 5-hidroksimetil furfural Uji empedu sebagai emulgator Garam-garam empedu + minyak → micelles Micelles + air → larut .

Kompleks tersebut memberi warna lembayung (Prijanti. 2007: 42). yaitu zat warna empedu yang berasal dari pemecahan hemoglobin pada butir darah merah. pada larutan glukosa kemudian dengan hati-hati ditambahkan asam sulfat pekat. 2007: 235). Percobaan pertama yang dilakukan yaitu mengamati sifat fisik dari air liur dan empedu. . Sifat fisik yang dapat di amati dari air liur tersebut. Perbedaan pH air liur pada praktikum bisa disebabkan karena faktor makanan yang dikonsumsi oleh pemilik air liur. uji biuret. Namun pada umumnya pH saliva adalah sedikit dibawah 7 (Poedjiadi. Empedu berbau amis hal ini dikarenakan empedu banyak mengandung garam-garam anorganik. Keadaan wujud dari empedu adalah cair dan kental. yang artinya bersifat asam. Bila pereaksi ini ditambahkan misalnya. yang menunjukkan bahwa air liur tersebut bersifat basa. Pada penetapan pH air liur dengan kertas indikator didapatkan bahwa pH air liur yaitu 8. Percobaan selanjutnya yaitu reaksi biuret yang bertujuan untuk membuktikan adanya senyawa dengan ikatan peptida (protein) dalam air liur. Hal ini menunjukkan adanya ikatan peptida pada air liur tersebut.G. PEMBAHASAN Pencernaan makanan yaitu pengubahan makanan dari sejak awal hingga menjadi bentuk molekular yang siap untuk diserapmelalui dinding usus. 1999: 25). Pada praktikum ini akan dibahas mengenai sifat fisik saliva (air liur) dan empedu sebagai organ pencernaan manusia. lemak dan pigmen-pigmen yang bercampur menjadi satu sehingga menghasilkan bau yang amis.Di dalam mulut terdapat cairan air liur atau saliva yang terdiri atas enzim amilase yang dapat membantu dalam proses penghancuran makanan secara kimiawi. Adapun percobaan yang dilakukan pada air liur atau saliva yaitu penetapan pH air liur. Sedangkan empedu terlihat berwarna hijau tua dan pekat. Penambahan NaOH pada reaksi biuret bertujuan agar larutan protein dalam air liur menjadi alkalis. banyaknya zat-zat yang terkandung dalam empedu mengakibatkan cairan empedu kental. Cu pada larutan alkalis bereaksi dengan protein membentuk suatu kompleks koordinasi antara ion Cu2+ dengan gugus CO dan NH pada ikatan peptida. kolesterol. Warna hijau ini disebabkan adanya pigmen biliverdin.Dan dari praktikum yang dilakukan uji ini positi karena terbentuknya warna ungu pada larutan setelah dikocok. Pereaksi Molisch terdiri dari larutan α-naftol dalam alkohol. Uji positif dari reaksi ini ditandai dengan terbentuknya endapan ungu. Reaksi biuret (larutan CuSO4 alkalis) terdiri atas larutan NaOH dan larutan CuSO4. sedangkan penambahan CuSO4 akan menunjukkan apakah uji ini positif atau negatif. Hal ini terjadi karena gugus –CO dan –NH dari ikatan peptida dalam molekul protein yang di uji membentuk warna merah violet atau ungu bila direaksikan dengan dalam suasana alkali. Uji ketiga dari air liur yaitu uji Molisch yang bertujuan menunjukkan adanya karbohidrat dalam air liur. Proses ini berlangsung dalam sistem pencernaan makanan yang terdiri dari berbagai organ tubuh yaitu mulut sampai empedu. akan terbentuk dua lapisan zat cair dengan adanya cincin ungu (Poedjiadi. yaitu air liur terlihat kental daripada air biasa. uji molisch uji presipitasi dan uji sulfat.

Uji selanjutnya yaitu uji presipitasi pada air liur yang disaring. Hasil yang . Selain itu pada reaksi ini menujukkan adanya reaksi eksoterm. Uji kedua yaitu uji pettenkofer yang bertujian untuk membuktikan adanya asam empedu. kuning. dimana protein berikatan dengan karbohidrat. dan pengujian untuk membuktikan fungsi empedu sebagai emulgator. dan bening dimana warna-warna ini merupakan pigmen dari empedu.Sehingga dari percobaan ini dapat dikatakan bahwa empedu tersebut mengandung pigmen empedu. yaitu uji gmelin. yang ditandai dengan dinding tabung terasa hangat. Hasil yang didapat dari uji ini dengan penambahan HNO3 yaitu terbentuk beberapa warna seperti coklat. Hasilnya diperoleh larutan yang berubah menjadi keruh. Pada percobaan ini terlihat bahwa setelah pnambahan asam sulfat pekat larutan menimbulkan tiga wara yaitu hijau muda. 2001: 634). Untuk mengetahui sifat lain dari empedu dilakukan 3 macam uji. hitam dan bening kekuningan. membentuk furfural atau turunannya. artinya pada air liur terdapat adanya karbohidrat. Kemampuan ini membuat getah empedu mampu mengemulsikan lemak di dalam usus dan melarutkan asam lemak serta sabun yang tak larut air (Murray. Emulsi adalah suatu suspensi penstabil yang terbentuk dari 2 atau lebih zat cair yang tidak dapat larut satu sama lain. Garam empedu mempunyai kemampuan cukup besar untuk menurunkan tegangan permukaan. yang bertujuan menunjukkan adanya musin dalam air liur dengan dasar bahwa protein dapat dipresipitasi oleh asam asetat. Uji pertama yaitu uji gmelin tujuannya untuk mengetahui adanya pigmen empedu. Pengujian kedua yaitu untuk empedu. pettenkofer. seperti hidroksimetilfurfural. yang menunjukkan bahwa dalam air liur tersebut terdapat musin yaitu suatu golongan glikoprotein. 1999: 35). Pereaksi Molisch yang terdiri atas α-naftol akan bereaksi dengan furfural membentuk senyawa berwarna ungu (Prijanti. Untuk menstabilkan emulsi dibutuhkan komponen ketiga yang dapat menurunkan tegangan permukaan antara kedua fase cairan. Dan dari hasil pengamatan yang kami lakukan terliha adanya cincin ungu yang menunjukkan bahwa uji ini positif.Reaksi ini disebabkan oleh daya dehidrasi asam anorganik pekat terhadap karbohidrat. Asam empedu bereaksi dengan furfural (yang terbentuk pada penambahan asam pekat dan karbohidrat) membentuk turunan yang berwarna (Prijanti. Asam-asam empedu yang terdapat dalam empedu terutama sebagai garam empedu. 1999: 27). Uji positif dari reaski ini yaitu akan terbentuk senyawa berwarna. merupakan turunan senyawa aromatik kompleks. Dimana dasarnya bahwa ion sulfat dapat diendapkan oleh barium. Uji terakhir terhadap empedu yaitu untuk membuktikan empedu bersifat sebagai emulgator atau bahan yang dapat menstabilkan emulsi. namun dari hasil praktikum tidak didapatkan larutan berwarna dan tidakada endapan karena larutan menjadi bening yang berarti di dalam air liur tidak terdapat adanya sulfat. Hal ini menunjukkan bahwa pada empedu terdapat adanya asam empedu. Hal ini terjadi karena penambahan asam nitrat pada pigmen empedu akan menghasilkan senyawa hasil oksidasi yang berwarna. Uji terakhir untuk air liur yaitu uji sulfat yang tujuannya untuk menunjukkan adanya sulfat dalam air liur.

2. 9. yaitu zat warna empedu yang berasal dari pemecahan hemoglobin pada butir darah merah. Uji pettenkofer membuktikan di dalam empedu terdapat asam empedu yang ditunjukkan oleh terbentukya warna setelah penambahan reaktan. Dari uji sulfat dapat disimpulkan bahwa dalam air liur terkandung sulfat ditunjukkan dengan terbetuknya senyawa berwarna. menunjukkan hasil yang positif yang ditandai dengan terbentuknya warna ungu pada larutan. H. Uji Molisch yang bertujuan menunjukkan adanya karbohidrat dalam air liur dan uji ini menunjukkan hasil positif yang ditandai dengan terbentuknya cincin ungu 5. Sifat fisik air liur yaitu air liur terlihat kental daripada air biasa. Empedu terlihat berwarna hijau tua dan pekat. Dari uji gmelin yang dilakukan terhadap empedu dapat dibuktikan bahwa dalam pigmen terdapat adanya pigmen empedu yang ditunjukkan oleh terbentuknya warnawarna setelah penambahan HNO3 8. lemak dan pigmen-pigmen yang bercampur menjadi satu sehingga menghasilkan bau yang amis. 6. KESIMPULAN Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan. kolesterol. Dan pada praktikum uji ini negatif 7. Empedu berbau amis hal ini dikarenakan empedu banyak mengandung garam-garam anorganik. 3. dapat diambil beberapa kesimpulan antara lain: 1. Warna hijau ini disebabkan adanya pigmen biliverdin.didapat yaitu pada tabung 2 terbentuk emulsi dimana minyak yang ditambahkan tidak larut semua namun tersisa sedikit yang tak larut. 4. Reaksi biuret yang bertujuan untuk membuktikan adanya senyawa dengan ikatan peptida (protein) dalam air liur. Empedu dapat berfungsi sebagai emulgator karena mempunyai kemampuan untuk menurunkan tegangan permukaan .

Pantjita. Jakarta: Erlangga.1983.DAFTAR PUSTAKA Hardjasasmita. 1999. Kimball. 2007. 2001. Dasar-Dasar Biokimia. Prijanti. . Jakarta: Kedokteran EGC.Ikhtisar Biokimia Dasar A. Penuntun Praktikum Biokimia Untuk Mahasiswa Keperawatan. Jakarta: Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia. Jakarta: UI-Press.1992. Ani Retno. Anna. W.Biologi Edisi Kelima. Biokimia Harper. Poedjiadi. John. Robert K dkk. Murray. Jakarta: Widya Medika.

MENETAPKAN KADAR KOLESTEROL A. B. 2003: 479). Kolesterol merupakan zat antara yang diperlukan dalam biosintesis hormin steroid. Batu kandung empedu dan kuning telur merupakan sumber yang kaya akan senyawa ini. . Kadar kolesterol yang tinggi dalam darah dikaitkan dengan arteriosklerosis (pengerasan pembuluh darah). Tempat : Untuk mengetahui kadar kolesterol : Senin. Dengan 27 karbon. 30 Mei 2011 : Laboratorium Kimia. yang menyertakan pelepasan tiga atom karbon. Kadar di bawah 200 mg/dL dapat diterima. kolesterol dibiosintesis dari lanosterol lewat urutan reaksi. Tujuan 2. namun tak merupakan keharusan dalam makanan karena dapat disintesis dari asetilkoenzim A. Dari rumus kolesterol. adrenal korteks. dapat dilihat bahwa gugus hidroksil yang terdapat pada atom C nomor 3 mempunyai posisi β oleh karena dihubungkan dengan garis penuh. suatu keadaan dalam mana kolesterol dan lipidlipid lain melapisi dinding dalam pembuluh darah dapat dikendalikan dengan diet (Fessenden. tetapi kadar di atas 280 mg/dL tampaknya beresiko tinggi (Hart. Barangkali steroid yang paling dikeal ialah kolesterol. PELAKSANAAN PRAKTIKUM 1. Tanggal 3. dan pada tubuh manusia terdapat dalam darah. 1986: 425). Hari. Fakultas MIPA Universitas Mataram. Jumlah total kolesterol yang ada dalam tubuh manusia rata-rata ialah sekitar 2 ons. dan jaringan syaraf. LANDASAN TEORI Kolesterol merupakan steroid hewani yang terdapat paling meluas dan dijumpai dalam hampir semua jaringan hewan. Tampaknya terdapat hubungan antara konsentrasi kolesterol serum darah dan penyakit jantung koroner. empedu. Kolesterol terdapat dalam semua sel hewan tetapi terutama terkonsentrasi dalam otak dan sumsum tulang punggung.

Karena kolesterol tidak larut dalam darah. kemudian biru. Apabila kolesterol dilarutkan dalam kloroform dan larutan ini dituangkan di atas larutan ini dituangkan di atas larutan asam sulfat pekat dengan hati-hati. Salah satu diantaranya ialah reaksi Salkowski. didaerah ultra lembayung(sinar UV atau sinar ultraviolet) . Warna hijau yang terjadi ini ternyata sebanding dengan konsentrasi kolesterol (Poedjiadi. Endapan kolesterol bila terdapat dalam pembuluh darah dapat menyebabkan penyempitan pembuluh darah karena dinding pembuluh darah menjadi makin tebal. kolesterol mengkristal dalam bentuk kristal yang tidak berwarna. 2009: 85). Kolesterol memainkan peranan penting dalam proses biokimia misalnya sebagai komponen membran sel dan sintesa berbagai hormon steroid. dan alkohol panas. dan ditransportasikan ke plasma darah pada hewan tersebut. maka ditransportasikan dalam system sirkulai lipoprotein ( Sudarma. dan mempunyai titik lebur 150-151˚C. dan hijau. maka larutan tersebut mula-mula akan berwarna merah. benzena. Spektofotometer dapat digunakan untuk mengukur serapan baik dadaerah tampak ( sinar tampak) dengan daerah panjang gelombang antara 380-750 nm. Sebagian besar kolesterol di dalam tubuh kita disintesa oleh tubuh dan juga diambil dari sumber makanan.CH 3 CH CH 3 CH 3 CH 2 CH 2 CH 3 CH 2 CH CH 3 OH kolesterol Kolesterol dapat larut dalam pelarut lemak. maka bagian asam berwarna kekuningan dengan fluoresensi hijau bila dikenai cahaya. Kolesterol adalah lipid yang terdapat pada membran sel pada jaringan hewan. 2007: 74-75). kloroform. misalnya eter. tidak berasa dan tidak berbau. Bagian kloroform akan berwarna biru dan yang berubah menjadi merah dan ungu. Larutan kolesteol dalam kloroform bila ditambah anhidrida asam asetat dan asam sulfat pekat. Ini disebut reaski Lieberman Burchard. Bila terdapat dalam konsentrasi tinggi. Adanya kolesterol dapat ditentukan dengan menggunakan beberapa reaksi warna. Spektofotometer adalah alat untuk mengukur transmitans (T atau %T) atau absorban (A) suatu cuplikan sebagai fungsi dari panjang gelombang.

Tabung Reaksi .Rak Tabung Reaksi . dalam M l= panjang sel . Panjang gelombang absorpsi biasanya dilaporkan sebagai λmaks.Pipet Volum .Penutup Tabung Reaksi .Vortex Mixer . Absorpsi cahaya UV atau cahaya tampak mengakibatkan transisi elektonik yaitu promosi elektronik dari orbital keadaan dasar tereksitasi berenergi lebih tinggi. Molekul yang memerlukan lebih banyak energi untuk promosi elektron. Sering kali spektra UV dialur untuk menunjukkan  atau log  dan bukan A sebagai ordinat (Fessenden. Puncak absorpsi (λmaks) dapat dihubungkan dengan jenis ikatan-ikatan yang ada dalam spesies (Khopkar.Pipet Tetes . Ahli kimia menyatakan absorpsi energi itu sebagai absortivitas molar dan bukan sebagai absorbans sebenarnya. ALAT DAN BAHAN Alat : . dalam cm C. Panjang gelombang cahaya UV atau cahaya tampak bergantung pada mudahnya promosi elekton. 1986: 437-439): = A/ cl  = absortivitas molar A= absorbans c = konsentrasi . akan menyerap pada panjang gelombang yang lebih pendek. Absorpsi dalam daerah ultraviolet dan daerah tampak menyebabkan eksitasi elektron ikatan.Alat Spektrofotometer UV . yakni panjang gelombang pada titik tertinggi kurva. Molekul yang memerlukan energi lebih sedikit akan menyerap pada panjang gelombang yang lebih panjang. Senyawa yang menyerap cahaya dalam daerah tampak( yakni senyawa berwarna) mempunyai elektron yang lebih mudah dipromosikan dari pada senyawa yang menyerap pada panjang gelombang UV yang lebih pendek.dengan daerah panjang gelombang antara 200-350nm.Penjepit . 2007: 201-202).

SKEMA KERJA  Uji Sampel 25 mL alkohol absolut Masukkan dalam tabung reaksi bertutup (S) + 0.000 gr FeCl3.Colour Reagent (0.Penangas Air Bahan : .Serum (tinggi dan rendah) .Aquades D.0 mgr FeCl3. masukkan tabung reaksi lain Uapkan.H2SO4 pekat . 6H2O / ml asam asetat glasial) Sampel Blangko Lapisan Bawah . Masukkan penangas (80°C) Biarkan mengering di udara terbuka Hasil + 4 ml colour reagent (1 ml FeCl3 ..6H2O/ml asam asetat glasial) .Alkohol Absolut .Kolesterol Standar .Petroleum Eter .6H2O/ml asam asetat glasial) .1 ml serum Kocok Hasil + 5 ml petroleum eter (tutup tabung) Campur dengan vortex mixer (30 detik) Hasil + 3 ml aquades Kocok (10-15 detik) Diamkan sampai terbentuk 2 lapisan Lapisan Atas Ambil.Asetat glasial .Colour Reagent (1.

5 mL) Tabung II (1 mL) Tabung III (2 mL) Uapkan →kering (penangas air 80°C). sisanya uapkan pada suhu kamar Hasil + 4 ml colour reagent (1 ml FeCl3 .05 mg/ml petroleum eter Masukkan masing-masing dalam 3 tabung reaksi Tabung I (0. penangas air  5 menit Dinginkan pada suhu kamar Masukkan 4 mL asam asetat glasial + 3 mL asam sulfat pekat Kocok dengan vortex mixer Diamkan dalam ruang gelap (30 menit) Ukur A dan %T S terhadap B (λ=560 nm) Hasil  Kurva kalibrasi Larutan kolesterol standar 0. 6H2O / ml asam asetat glasial) Sampel  penangas air  5 menit Dinginkan pada suhu kamar Blangko Masukkan 4 mL asam asetat glasial + 3 mL asam sulfat pekat Kocok dengan vortex mixer .

7. Terbentuk 2 lapisan . Bening reaksi 2. Ambil reaksi. Tambahkan 0. Terbentuk putih menyatu/bercampur x 1000pm terpisah semakin Semakin endapan padat 5. Campur 5. lapisan atas bening . Tambahkan petroleum 5. Tambahkan 3 ml aquades dan kocok lagi selama 10 – 15 detik. uji sampel 1. Terdapat lapisan atas bercak merah atas benin dan bawah endapan hijau bercakdan ada /gumpalan Hasil endapan dengan Serum 177 (2-12) serum sama 246 sedangkan yang ke 13. endapan naik 2.5 kepermukaan terbentuk 2 lapisan bawah bening atas endapan hijau (tidak banyak /seperti terbentuk cincin) tabung reaksi rapat – rapat mixer selama 30 detik 6. Lapisan atas bening 2 lapisan 7. keruh endapan putih.0 eter. 8. 2. dengan ml tutup vortex 1. Uji sampel Pengamatan Langkah Kerja Serum 246 I. HASIL PENGAMATAN a. lapisan bawah putih. V=1. Uapkan dalam penangas air masukkan dalam tabung 8.Diamkan dalam ruang gelap (30 menit) Ukur A dan %T S terhadap B (λ=560 nm) Hasil E.5 ml alkohol absolut ke 3. Terbentuk 2 lapisan .1 ml serum 4. kemudia didiamkan sampai terjadi 6. Tidak 3. Sediakan tabung tertutup ( tabung S) dalam tabung reaksi kocok 4.

( 0. terbebtuk 3 lapisan: atas tengah dan berwarna berarna bawah hijau.000 gr FeCl36H2O/ml asam asetat tinggal sedikit ambil tabung dan 12. Ukur A dan % T larutan S terhadap nth B dengan spektrometer pada = 560 dinding dengan tabung vortex yang dimiringkam. Masukkan tabung S dalam penagas air beberapa menit kemudian dinginkan 13. 16.0 ml H2SO4 pekat kedalam tabung S dan B dengan mengalirkan melalui 14. hijau muda agak kekuningan. λ= 560 nm . Masukkan 4. Diamkan tabung S dan B dalam ruang gelap selama 30 menit. 12. Kocok mixer.denga temperatur 800 C ( dalam chemical hood ) samapai cairan biarkan mengering 9. 15.0 ml Colour Reagent 10. sama dengan yang 9 akan tetapi filtrat(atas) lebih bening dan endapan lebih memisah 13. Ambil tabung lain untuk blangko 11. 15. sama dengan hasil pengamatan ke 13 16. berwarna bening. Tambahkan 4. masukkan 3.0 ml Colour Reagent glasial).

masing-msing 2. Tambahkan 4 ml colour reagent 4. 1.0 ml. uapkan sampai kering pada penangas air (80ºC) dan sisanya diuapkan pada temperatur kamar kadar kolesterol masing-masing tabung I : 125 mg% Tabung II : 250 mg% Tabung III : 500 mg% 3.2 ml diisi 0. Setelah diuapkan    Tabung 1 filtrat semakin bening .     Tabung 1 = + colour reagent (warna hijau keruh) Tabung 2 = + colour reagent (warna hijau keruh) Tabung 3 = + colour reagent (warna hijau keruh) Tabug 1 setelah didiamkan terdapat endapan berarna hijau kebiruan dan filtrat berwarna bening agak keruh 2. kira-kira 0. Ambil tabung lain untuk blanko    Tabung 2 sama dengan tabung 1 Tabung 3 sama dengan tabung 1 Blangko reagent 1.5 ml. Setelah ditambah H2SO4 menjadi panas  Tabung 1 terbentuk 2 lapisan atas hanya berisi colour . Sediakan 3 tabung reaksi.05 mg/ml petroleum eter. dan 2 ml larutan kolesterol standar 0.b. endapan biru kehijauan Tabung 2 sama dengan tabung 1 tapi endapan lebih banyak Tabung 3 sama akan tetapi endapannya lebih sedikit 2. Kurva kalibrasi Langkah Kerja Pengamatan 1.

dan bagian baah bening.2 % 79. c. absorbans dan % T kurva kalibrasi Standar Blangko Tabung 1 (0.4 % 73.2 % 80. Pengukuran 1. bawahputih keruh Tabung 3 warna krem endapan larut (cepat larut) Blangko= terbentuk 3 lapisan Atas hijau.1 % %T 2.6 % 82.2 % %T .krem . bawah hijau    Tabung 2 setelah dikocok atas hijau kebiruan. absorbans dan % T sampel Sampel Serum tinggi Serum rendah 81.5 ml) Tabung 2 (1 ml) Tabung 3 (2 ml) 79. tengah berwarna kuning.

1354  Tabung 3 : V = 2 ml % = 0.5 ml % = 0.05 mg/ml Berat kolesterol = V x % = 0.05 mg/ml Berat kolesterol = V x % = 1 x 0.05 mg %T = 73.025 mg %T = 79.794) = 0. Pembuatan Kurva Kalibrasi  Tabung 1 : V = 0.2 % A = -log (0.4 % A = -log T = -log (0.05 = 0.732) = 0.1001  Tabung 2 : V = 1 ml % = 0.05 mg/ml . ANALISIS DATA 1.5 x 0.05 = 0.F.

1 Absorbans (A) 0.025 0.02 0 0 0.05 = 0.04 0.1 mg % T = 80.08 0.14 0.119 R² = 0.2 % A = -log (0.1354 y = -0.06 massa 0.1001 0.162x + 0.1354 0.12 absorbansi 0.1 0.081 2.Berat kolesterol = V x % = 2 x 0.06 0.0958 Tabel analog: Tabung 1 2 3 Berat (mg) 0.04 0.16 0.1 0.0958 kurva kalibrasi 0.0958 0.05 0. Penentuan Kadar Kolesterol Dari grafik di atas di dapatkan suatu persamaan garis yaitu .1001 0.08 0.802) = 0.12 0.02 0.

? Jawab: Y = -0.119 X = 0.119 0.log (0.0856 Dit : x ….Y = ax + b dimana: Y = absorbans a = slope x = konsentrasi  Serum tinggi Dik : T = 81.6 % A = .816) = 0.log (0.895 mg/ml Jadi.119 0.0883 = -0.0856 Y = 0.162x + 0.0883 Y = 0. konsentrasi kolesterol pada serum tinggi adalah 189.119 b = intersep .0856 = -0.1895 mg/ 0.162x + 0.162x + 0.1 % A = ..821) = 0.0883 Dari kurva diperoleh persamaan Y = -0.1ml = 1.162x + 0.5 mg /100ml  Serum rendah Dik : T = 82.

0856  0. Persamaan Reaksi .162 konsentrasi kolesterol = 206.1 mg/100ml 3.119 = 0.2061 mg/ 0.1 ml  0.x= 0.

74). Pada praktikum ini dilakukan 2 kali percobaan yaitu percobaan pertama pengujian sampel pada serum tinggi dan serum rendah. kolesterol mengkristal dalam bentuk kristal yang tidak berwarna. dan alkohol panas. perlakuan pertama pada serum baik serum tinggi maupun serum rendah yaitu penambahan alkohol dimana alkohol di sini berfungsi sebagai pelarut. yang atas bening dan yang bawah keruh dan ada gumpalan putih. Karena pada dasarnya kolesterol dapat larut dalam pelarut lemak. Pada tubuh manusia. yang diuapkan di sini yaitu pelarut-pelarut yang digunakan tadi seperti alkohol dan petroleum eter karena kedua pelarut tersebut mudah menguap. Untuk uji sampel. misalnya eter. Selain alkohol. Tabung yang sudah mongering tersebut ditambahkan dengan color reagent. dan jaringan syaraf (Anna Poedjiadi. maka senyawa ini diturunkan dari cincin utama steroid yang disebut kelestana. setelah itu di panaskan agar sisa-sisa kolesterol dapat larut dengan cepat . Bila terdapat dalam konsentrasi tinggi. PEMBAHASSAN Pada praktikum kali ini kita melakukan percobaan mengenai penetapan kadar kolesterol. tidak berasa dan tidak berbau. yaitu pembentu protein yang terdiri atas 25% kolesterol dan 75% ester asam lemak tidak jenuh (Yazid. Kemudian lapisan atas diambil dan diuapkan dengan penangas air. 2007: 74). percobaan ke-dua yaitu pengukuran absorbans dan % T pada tiga kolesterol standart dengan kadar masing-masing 125 mg%.. kloroform. kelenjar adrenalin bagian luar ( adrenal cortex). dan mempunyai titik lebur 150-151˚C (Poedjiadi. melainkan berkonjugasi sebagai lipoproteida. 2006). 250 mg%. kolesterol terdapat di dalam darah.G. Setelah penambahan larutan petroleum eter larutan terlihat tidak bercampur. yang berfungsi sebagai pereaksi yang memberikan warna. Kolesterol dalam serum tidak terdapat bebas. Kolesterol terdapat pada hampir semua sel hewan dan manusia. 2007. Sebagai turunan steroid. penambahan petroleum eter juga berfungsi sebagai pelarut untuk melarutkan serum. dimana kolesterol adalah salah satu turunan steroid penting yang banyak terdapat pada hewan dan manusia. dan 500 mg%. benzena. empedu. dan setelah disentrifuga endapan semakin padat.Namun setelah penambaha aquades terbentuk dua lapisan . sehingga tabung mongering.

atau faktor lainnya. sehingga didapat nilai absorbans yang baik juga. Hasil yang didapat dari pengukuran absorban kurva kalibrasi menunjukkan angka yang tidak bagus dimana nilai absorbannya hampir sama dan ada yang sama.Selain penambahan pelarut.6% sedangkan untuk serum rendah %T=82. Dan sebelum pengukuran pada spektrofotometer. Bila dalam sampel terdapat kolesterol.5 ml. Hal ini dapat disebabkan karena kesalahan pada saat praktikum. sampel disimpan terlebih dahulu dalam tempat gelap selama kurang lebih 30 menit untuk memaksimalkan penyerapan cahaya oleh larutan sampel. 1ml. Untuk menentukan kadar dari kolesterol maka diperlukan adanya kurva kalibrasi.5 kolestadiena (Pramanaroh.794 dan serum tinggi 2. Selain sebagai pembentuk kompleks warna. misalnya saja karena pemanasan atau penguapan yang pertama terlalu kering sehingga hanya sedikit atau bahkan tidak ada yang tersisa dalam tabung. ada juga penambahan H2SO4 atau asam sulfat yang berfungsi untuk membentuk kompleks warna. kolesterol belum larut semuanya. dan 2 ml yang selanjutnya diperlakukan hampir sama dengan uji sampel dari mulai penambahan colour reagen sampai pengukuran absorban dan tansmitan. dan bening. Dari kurva kalibrasi didapat persamaan y=0.1%.034. Hasil yang didapat dari pengukuran transmittans pada serum tinggi yaitu %T=81.088. Ketika asam sulfat ditambahkan dalam campuran yang berisi kolesterol. maka molekul air berpindah dari gugs C3 kolesterol yang kemudian teroksidasi membentuk 3. asam sulfat juga berfungsi memutus ikatan ester lipid. dilakukan untuk melarutkan kolesterol yang ada dalam sampel ditandai dengan larutan bercampur semua dan terlihat bening.034X dimana slope=0. sehingga dapat ditentukan kadar kolesterol pada serum tinggi dan serum rendah yaitu serum rendah 1. . maka lapisan kolesterol di bagian atas akan menjadi berwarna merah. sehingga dari hasil pengamatan menunjukkan terbentuknya tiga lapisan warna yaitu hijau. 2008). dimana dalam penentuannya digunakan 3 volume kolesterol standar yaitu 0.hijau muda agak kekuningan. Pada pemanasan kedua setelah penambahan colou reagent untuk tabung sampel.

Kadar kolesterol pada serum rendah yaitu sebesar 1. 4. Kadar kolesterol yang tinggi berarti mengandung protein tinggi dan trigliseral rendah. Kadar kolsterol pada serum tinggi yaitu 2.H. .794 7. Penyimpanan di tempat gelap bertujuan agar kolesterol yang erbentuk tidak berubah menjadi vitamin D. Dari kurva kalibrasi diperoleh persamaan garis y=0. antara lain: 1. Penambahan asam sulfat menyebabkan terbentuknya kompleks warna dan dapat memutus ikatan ester lipid.088 6.034X 5. 3. Penambahan alkohol dan petroleum eter berfungsi sebagai pelarut untuk melarutkan sampel. 2. KESIMPULAN Dari praktikum yang telah dilakukan dapat diambil beberapa kesimpulan.

I Made. 2003. Yazid. Konsep Dasar Kimia Analitik. estin. Khopkar. Yogyakarta : ANDI-yogyakarta . 2008. Dasar-Dasar Biokimia. Kimia Organik: Suatu Kuliah Singkat. Jakarta: UI-Press Poedjiadi. Test For Cholesterol (terhubung berkala). Anna.planetayurvida. Hart. Sudarma. Jakarta: Erlangga.remedieshtml. Pramanaroh. Jakarta: UI-Press.DAFTAR PUSTAKA Fessenden. Jakarta: Erlangga. 2007. Harold. Mataram: Universitas Mataram Press. 1986.com/cholesterol. Kimia Organik Edisi Ketiga. 2006. http//:www. Penuntun Praktikum Biokimia Untuk Mahasiswa Analis. 2009. 2007. Kimia Bahan Alam.

masing reaksi dikatalisis oleh enzim HMG-CoA sintase dan HMGCoA reduktase. Pembentukan asam mevalonat dari asetat Asam mevalonat tebentuk dari tiga molekul asetil-CoA yang berkondensasi melalui pembentukan β-hidroksi-β-metil-glutaril-CoA(HMG-CoA) sebagai senyawa antaranya. Tahap jalur reaksi tersebut dibagi menjadi 3 bagian yaitu a. RA’YAL AINI NIM : G1C008012 1.TA BIOKIMIA NAMA . -metilglutaril-SCoA (HMG-SCoA) H + NADPH HMG-SCoA reduktase + + CSoA + NADP COOH CH3 CH 2 C OH mevalonat CH 2OH . Jalur biosintesis kolesterol dari asetil koenzim A: Biosintesis kolesterol dari asetil koenzim A melalui beberapa tahap reaksi. dan dalam masing-masing tahap dilepaskan satu molekul koenzimA(CoASH) bebas. Masing. Dua Molekul NADPH dipakai sebagai koenzim pada tahap reaksi kedua yang di katalisis oleh HMG-CoAreduktase H3C H3C CO CH 2 CO asetoasetil-SCoA CO SCoA CoASH COOH CH 2 CH HO CH 2 CO SCoA SCoA HMG-SCoA sintase hidroksi.

asam isopentil pirofosfat (IPP) yang tidak mantap. berturut-turut dikaltalisis oleh enzim mevalonat kinase. pirofosfomevalonat dekarboksilase. Pembentukan skualin dari asam mevalonat Tahap reaksi ini di mulai dengan fosforilasi asam mevalonat dengan ATP. fosfomevalonat kinase.b. dna asam 3.3-dimetilalilpirofosfat (DPP) yang untuk pembentukannya masin-masing. . berturut-turut menghasilkan asam 5-fosfomevalonat. dan isopentenil pirofosfat isomeras. asam 5-pirofosfomevalonat.

Reaksi ini melepaskan 1 molekul pirofosfat (PPi) dan dikatalisis oleh enzim dimetil alil .COOH CH 2 ATP HO C CH3 mevalonat kinase ADP HO COOH CH 2 C CH3 CH 2 CH 2 CH3 mevalonat CH 2 CH 2 OPO 3H2 5-fosfomevalonat ATP fosfomevalonat kinase ADP COOH CH 2 HO C CH3 OH P O 5-pirofosfomevalonat O OH P O OH CH 2 O Tahap reaksi berikutnya satu molekul IPP berkondensasi dengan stu DPP. geranil pirofosfat (GPP). menghasilkan satu molekul monoterpen.

menghasilkan preskualin pirofosfat yang . melepaskan molekul PPi dan dikatalisis oleh enzim preskualin sintase.3-dimetilalil pirofosfat (DPP) dimetil transferase H2C C CH CH 2 H2C CH CH3 H2C C IPP CH PPi CH3 CH 2 dimetil transferase CH3 HC C CH OH O P O O OH P O OH CH 2 H 2C CH C CH H2C O OH P O O OH P O OH CH3 fersenil pirofosfat (FPP) CH3 C CH H2C geranil pirofosfat (GPP) Tahap selanjutnya molekul FPP berkondensasi. farnesil pirofosfat (FPP). dikatalisis oleh enzim yang sama menghasilkan satu molekul seskuiterpena. H2C C CH 2 H2C CH3 H2C C OH P O OH P OH CH IPP isomerase H2C CH3 OH O P O O OH P O OH O O O isopentenil pirofosfat (IPP) 3. Satu molekul (IPP) lagi kemudian bereaksi dengan GPP.transferase.

. direduksi menjadi skualin dan melepaskan satu molekul PPi.selanjutnya oleh enzim skualin sintase dan NADPH.

PPi skualin .H2C C CH CH3 CH 2 HC C CH CH 2 H2C CH C CH H2C O OH P O FPP O OH P O OH CH3 fersenil pirofosfat (FPP) CH3 preskualin sintase PPi O CH3 H3C C CH CH 2)2 2 C CH NADPH C CH 2 CH PH O CH3 C (CH 2 CH PH OH CH3 C CH 3)2 preskualin pirofosfat skualin sintase + NADP .

Ada tiga macam enzim amilase. Waktu Praktikum : Senin. Amilase merupakan enzin hidrolase yang menguraikan golongan karbohidrat yaitu menguraikan amilum (suatu polisakarida) menjadi maltosa 9 suatu disakarida) ( Hardjono. . 6 Juni 2011 3. oleh enzim amilase amilum diubah menjadi maltose dam bentuk β maltose.ACARA III PENETAPAN AMILASE ( WOHLGEMUTH ) A. Tujuan Praktikum : Menentukan kadar amilase pada air seni. Hidrolisis juga dapat dilakukan dengan bantuan enzim amilase. dalam ludah dan dalam cairan yang dikeluarkan oleh pangkreas terdapat amilase yang bekerja terhadap amilum yang terdapat dalam makanan kita. Enzim amilase dapat memecah ikatan-ikatan pada amilum hingga terbentuk maltosa. PELAKSANAAN PRAKTIKUM 1. LANDSAN TEORI Tubuh manusia menghasilkan berbagai macam enzim yang tersebar di berbagai bagian dan memiliki fungsi tertentu. Salah satu enzim yang penting dalam sistem pencernaan manusia adalah enzim amilase. Tempat Praktikum : Lantai 3 Laboratorium Kimia Dasar FMIPA B. amilase 2 (C6H10O5)n + n H2O amilum n C12H22O11 maltosa Glukosa amilum dapat dihidrolisis sempurna dengan menggunakan asam sehingga mengahsilkan glukosa. 2003: 26 ). 2.

Komposisi urin berubah sepanjang proses reabsorpsi ketika molekul yang penting bagi tubuh. Materi yang terkandung di dalam urin dapat diketahui melalui urinalisis. Urin atau air seni atau air kencing adalah cairan sisa yang diekskresikan oleh ginjal yang kemudian akan dikeluarkan dari dalam tubuh melalui proses urinasi. Amilase mengubah karbohidrat yang merupakan polisakarida menjadi maltosa (alfa dan beta) ataupun glukosa (gluko amilase). Cairan yang tersisa mengandung urea dalam kadar yang tinggi dan berbagai senyawa yang berlebih atau berpotensi racun yang akan dibuang keluar tubuh. enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum. Menurut Forgaty dan Whitaker. ada juga beberapa spesies yang menggunakan urin sebagai sarana komunikasi olfaktori.  amilase telah diketahui terdapat dalam hati. Enzim  amilase mempunyai kemampuan untuk memotong ikatan  -1.4 glukoksida pada polisakarida dengan hasil degradasi secara acak dibagian tengah atau bagian dalam molekul.  amilase.yaitu  amilase. 2000). dibawa melalui ureter menuju kandung kemih. (Nur Richana. Amilase merupakan enzim yang penting dalam bidang pangan dan bioteknologi. Amilase merupakan enzim yang mengkatalisis reaksi hidrolisis pati menjadi gula‐gula sederhana. alpha amilase akan menghidralis ikatan alfa -1. 2005: 33 ). Namun. Amilase dapat diperoleh dari berbagai sumber seperti tanaman. Cairan dan materi pembentuk urin berasal dari darah atau cairan interstisial. garam terlarut. 2010 : 1 ). Eksreksi urin diperlukan untuk membuang molekul-molekul sisa dalam darah yang disaring oleh ginjal dan untuk menjaga homeostasis cairan tubuh. Proses ini juga dikenal dengna nama proses Likufikasi pati.4 amilosa dan amilopektin dengan cepat pada larutan pati yang kental yang mempunyai gelahtinasi. binatang dan mikroorganisme ( Anam. misal glukosa. Urin disaring di dalam ginjal. dan materi organik.  amilase terutama terdapat pada tumbuhan dan dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada ujung molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk maltosa. Enzim ini dapat memecah ikatan 1-4 dan 1-6 pada glikogen dan menghasilkan glukosa (poedjiadi. produk akhir yang dihasilkan dari aktivitasnya adalah dekstrin beserta sejumlah kecil glukosa dan malkosa.  amilase terdapat dalam saliva (ludah) dan pankreas. dan  amilase. Urin terdiri dari air dengan bahan terlarut berupa sisa metabolisme (seperti urea). akhirnya dibuang keluar tubuh melalui uretra ( Syaifudin. diserap kembali ke dalam tubuh melalui molekul pembawa. 2007:37dan 152-154). Urea yang dikandung oleh urin dapat menjadi sumber nitrogen yang baik untuk tumbuhan dan dapat digunakan untuk mempercepat .

Di samping itu diabetes adalah suatu penyakit yang dapat dideteksi melalui urin. Urin seorang penderita diabetes akan mengandung gula yang tidak akan ditemukan dalam urin orang yang sehat ( Trioktavia. urin dapat menjadi penunjuk dehidrasi. Urin seorang penderita diabetes akan mengandung gula yang tidak akan ditemukan dalam urin orang yang sehat ( Novalia. Namun. C. Orang yang tidak menderita dehidrasi akan mengeluarkan urin yang bening seperti air.2010: 30 ). Diabetes adalah suatu penyakit yang dapat dideteksi melalui urin. ALAT DAN BAHAN 1. kita dapat mengetahui berbagai penyakit dari perubahan warna urin. Fungsi utama urin adalah untuk membuang zat sisa seperti racun atau obat-obatan dari dalam tubuh.pembentukan kompos. Bahan .            Alat Gelas kimia Tabung reaksi Rak tabung reaksi Pengaduk Pipet volum Pipet tetes Labu takar 10 ml Penjepit Penangas air Stopwatch Air seni 2. Hal yang dilakukan untuk menguji apakah seseorang menderita diabetes adalah dengan melakukan uji glukosa pada urin orang tersebut. Penderita dehidrasi akan mengeluarkan urin berwarna kuning pekat atau cokelat. Misalnya. 2011: 12).

1 % Larutan iod Tisu D. % sebanyak 2 ml @ tabung ∆ selama 30 menit T=370 C hasil dinginkan selama 5 menit dalam air dingin + iod @ tabung sampai terjadi perubahan warna hasil . SKEMA KERJA Tabung reaksi Diberi tanda 1-10 + urin diencerkan pada tabung 1-5 + urun tak diencerkan pada tabung 6-10 + aquades @ tabung + amilum 0.    Akuades Amilum 0.

Tabel Kerja tabung Urin diencerkan (1:10)(ml) Urin tak diencerkan (ml) Aquades (ml) Amilum (ml) 0.6 3 0.8 2 0.5 2 0.2 0.7 4 0.5 2 0.8 5 0.1 0.2 2 0. HASIL PENGAMATAN Prosedur Kerja  @ urin ditambahkan aquades     @ urin ditambahkan amilum 0.4 0.9 6 7 8 9 10 E.9 2 0.3 0.7 2 0.1 2 0.6 2 0.5 1 0.4 2 0.1 % @ urin dipanaskan @ urin didinginkan @ urin ditambahkan larutan iod encer Hasil Pengamatan  Warna urin tidak ada perubahan  Tidak ada perubahan  Tidak ada perubahan  Tidak ada perubahan  Tabung 1:larutan menjadi merah jingga dengan 3 tetes larutan iod  Tabung 2: larutan menjadi bening kekuningan dengan 4 tetes iod  Tabung3 : larutan bening kekuningan dengan 2 tetes iod  Tabung 4 : larutan bening kekuningan dengan 3 tetes iod  Tabung 5 : larutan bening kekuningan dengan 5 tetes iod  Tabung 6 : larutan bening kekuningan dengan 4 tetes iod  Tabung 7 : larutan bening kekuningan dengan 8 tetes iod  Tabung 8 : larutan bening kekuningan pada tetesan ke-9 .3 2 0.5 2 0.

 Tabung 9 : larutan larutan bening kekuningan pada tetesan ke-11  Tabung 10 : larutan bening kekuningan dengan 2 tetes iod F. Reaksi Kimia Amilum(s) + H2O(l) Amilum + Iodin Amilodestrin + Amilase Amilodekstrin (aq) + H2O Eritodekstrin (aq) + H2O Akrodekstrin (aq) + H2O → Amilum(aq) → Amilodestrin (biru tua) → Eritrodestrin → Eritodekstrin (aq) → Akrodekstrin (aq) → Maltosa (aq) 2. Proses Hidrolisis amilum amilase amilodestrin ∆ akrodestrin (tidak berwarna) ∆ maltosa 3. Reaksi Hidrolisis . ANALISIS DATA Reaksi pada percobaan di atas antra lain sebagai berikut: 1.

CH2OH H H OH HO H OH H H O H H CH2OH O H OH H H CH2OH O H OH H H CH2OH O H OH H O O O O + H2O OH H OH H CH3 CH2OH H H OH HO H OH H O H CH2OH CH2OH O H O H OH H + O CH2 O H H OH HO H O H OH H OH destin .

Enzim ini dapat memecah ikatan 1-4 dan 1-6 pada glikogen dan menghasilkan glukosa (Poedjiadi. Dari refrensi diketahui bahwa apabila enzim amilase yang terkandung dalam urine tersebut direaksikan dengan amilum maka. 2007:37dan 152-154). 2008 : 61).  amilase terutama terdapat pada tumbuhan dan dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada ujung molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk maltosa. larutan kemudian didinginkan dan ditambahkan larutan iod encer satu tetes. Pada percobaan ini digunakan 10 tabung reaksi yang masing – masing tabung reaksi diisi dengan sampel ( urin ) yang jumlahnya berbeda – beda. Telah diketahui sebelumnya bahwa di dalam urine terdapat adanya enzim amylase. . Hal ini dilakukan karena kerja enzim dipengaruhi oleh suhunya. Untuk mengetahui adanya amylase dalam urine tersebut maka urine direaksikan dengan larutan amilum 1%. sedangkan pada suhu tinggi aktifitas tinggi sedangakan kematangannya rendah (Wirahadikusumah. enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum. PEMBAHASAN Pada percobaan ini akan dibahas mengenai enzim amylase.G. sehingga amylase didalam urine tersebut akan dapat menghidrolisis larutan amilum. enzim amilase akan membantu proses hidrolisis amilum menjadi molekul yang lebuh kecil yang ditunjukkan dengan terjadinya perubahan warna. kemudian masing – masing tabung tersebut ditambahkan dengan amilum sebanyak 2 ml. namun apabila setelah dikocok warna larutan hilang. Setelah dipanaskan. menjadi maltose. Selanjutnya seluruh tabung tersebut ditambahkan dengan aquades sampai volumenya 1 ml. Pada tabung reaksi 1 sampai 5 diisi dengan urin yang diencerkan ( 1:10 ) sedangkan pada tabung reaksi6 sampai 10 masing – masing diisi dengan urin yang tak diencerkan.  amilase telah diketahui terdapat dalam hati. selanjutnya semua larutan tersebut dipanaskan pada suhu 37ºC. Namun dari hasil pengamatan dapat dilihat bahwa larutan yang dihasilkan tidak berwarna. Pada suhu rendah aktifits enzim rendah tetapi kemantapannya tinggi. Adapun tujuan dari praktikum ini yaitu untuk menentukan kadar amylase dalam urine.maka ditambahkan lagi satu sampai dua tetes. Namun enzim amylase tidak hanya terdapat pada urine tetapi juga terdapat pada air liur atau saliva dan pangkreas yang berupa  amylase.

Hal ini dapat disebabkan kesalahan dalam praktikum. karena disimpan terlalu lama.2007 :38) Tahap hidrolisis Amilum Amilum terlarut Amilodekstrin Eritrodekstrin Akrodekstrin maltosa Apabila larutan yang dihasilkan berwarna merah maka didalam urine terbut terkandung cukup banyak amilase yang dapat mencerna larutan 1% amilum terlarut menjadi eritrodekstrin. tetapi bila kadar amilum didalam urine sedikit maka akan tejadi warna biru atau ungu. Sedangakan yang lain hanya menghasilkan warna yang bening kekuningan baik pada urine yang encer maupun urine pekat walaupun dengan penambahan larutan iod sampai sebelas tetes. Dari hasil pengamatan hanya pada urine yang diencerkan dengan 0. Atau amilase pada urine sangat sedikit.Pada reaksi hidrolisis parsial. kemungkinan dapat disebabkan karena larutan amilum yang digunakan sudah rusak. jadi dekstrin adalah produk antara sebelum terbentuknya maltosa. Tahap dalam hidrolisis amilumserta warna yang terjadi dengan penambahan iodium sebagai berikut : (Poedjadi. amilum terpecah menjadi molekul yang lebih kecil yang disebut dengan dekstrin.5 ml urine saja yang mengasilkan warna merah jingga ketika direaksikan dengan larutan iod encer tiga tetes. Warna dengan iodium biru biru lembayung merah tidak berwarna .

H. Pada praktikum ini penetapan amilase pada urine tidak dapat diamati karena tidak terjadi perubahan warna pada larutan setelah penambahan iod . Tujuan penambahan amilum pada urine adalah sebagai aktifator 5. KESIMPULAN 1. Urin memiliki kadar amylase yang tinggi apabila pada reaksi hidrolisis amilum setelah ditambahkan dengan larutan iodine terbentuk warna merah yang menandakan bahwa enzin amylase cukup banyak untuk mencerna amilum menjadi eritrodekstin. 3. Tujuan pemanasan adalah untuk mengaktifkan kerja enzim 4. Penambahan iod dilakukan untuk menunjukkan ada tidaknya amilase pada urine yang dapat memberi perubahan warna 6. Amylase berfungsi membantu hidrolisis amilum. 2.

Wirahadi Kusuma. Syaifudin. Mukh. http//biogen-litbang deptan.DAFTAR PUSTAKA Anam. 2010. Yogyakarta: UGM-Press. Sistem Ekskresi. 2011. Efek Radiasi Pada Komponen Biokimia. Yogyakarta: UNY-Press. Biokimia Dasar. 2 tahun 2000. 2005. 2000.1994. Trioktavia. Bogor: Institut Pertanian Bogor. Muhammad. Jakarta : UI Press.id. Ekskresi.go. 1997. Hardjono. Khairul. Dasar-Dasar Biokimia. anna dan F. Bandung. Poejadi. Jurnal Tinjauan Ilmiah Riset Biologi dan Bioteknologi Pertanian Volume 3 No. M Tatin Supriyanti. ITB Press . Jakarta: Erlangga. 2010. Jakarta: UI-Press. Prospek dan Produksi Enzim  -Amilase dari Mikroorganisme. Nur Richana. 2003. Novalia. Produksi Enzim Amilase. Biokimia.

Dapatkah kerja enzim amilase digunakan oleh asam atau basa? Jelaskan 3. Pada percobaan tersebut enzim amilase yang terdapat pada urine akan menghidrolisis atau memecah ikatan pada amilum menjadi molekul yang lebih kecil hinnga terbentuknya maltosa. Selain dalam urine dimana lagi dapat ditemukan enzim amilase? Jawab 1. Proses Hidrolisis amilum amilase amilodestrin ∆ akrodestrin (tidak berwarna) ∆ maltosa . namun sebelum maltosa itu terbentuk maka akan terbentuk produk antara yang disebut dekstrin dengan mekanisme: 1. Reaksi Kimia Amilum(s) + H2O(l) Amilum + Iodin Amilodestrin + Amilase Amilodekstrin (aq) + H2O Eritodekstrin (aq) + H2O Akrodekstrin (aq) + H2O → Amilum(aq) → Amilodestrin (biru tua) → Eritrodestrin → Eritodekstrin (aq) → Akrodekstrin (aq) → Maltosa (aq) 2.TA BIOKIMIA RA’YAL AINI G1C008012 1. Jelaskan mekanisme kerja enzim amilase pada percobaan 2.

3.  amilase telah diketahui terdapat dalam hati . Reaksi Hidrolisis CH2OH H H OH HO H OH H OH H OH H CH3 H O H H CH2OH O H OH H H CH2OH O H OH H H CH2OH O H OH H O O O O + H2O CH2OH H H OH HO H OH H O H CH2OH CH2OH O H O H OH H + O CH2 O H H OH HO H O H OH H OH destin 2. Selain didalam urine enzim amilase juga terdapat pada air liur atau saliva dan pangkreas yang berupa  amylase. enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum.  amilase terutama terdapat pada tumbuhan dan dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada ujung molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk maltosa.

Poejadi. namun sebelum maltosa itu terbentuk maka akan terbentuk produk antara yang disebut dekstrin dengan mekanisme: 1. ITB Press TA BIOKIMIA RA’YAL AINI G1C008012 1. Bandung. Wirahadi Kusuma. Selain dalam urine dimana lagi dapat ditemukan enzim amilase? Jawab 1. anna dan F. M Tatin Supriyanti. 1997. Jelaskan mekanisme kerja enzim amilase pada percobaan 2. Muhammad.1994. Dapatkah kerja enzim amilase digunakan oleh asam atau basa? Jelaskan 3. Dasar-Dasar Biokimia. Pada percobaan tersebut enzim amilase yang terdapat pada urine akan menghidrolisis atau memecah ikatan pada amilum menjadi molekul yang lebih kecil hinnga terbentuknya maltosa. Jakarta : UI Press. Biokimia. Reaksi Kimia Amilum(s) + H2O(l) Amilum + Iodin Amilodestrin + Amilase Amilodekstrin (aq) + H2O Eritodekstrin (aq) + H2O Akrodekstrin (aq) + H2O → Amilum(aq) → Amilodestrin (biru tua) → Eritrodestrin → Eritodekstrin (aq) → Akrodekstrin (aq) → Maltosa (aq) .

Proses Hidrolisis amilum amilase amilodestrin ∆ akrodestrin (tidak berwarna) ∆ maltosa 2.1. enzim ini memecah ikatan 1-4 yang terdapat . Selain didalam urine enzim amilase juga terdapat pada air liur atau saliva dan pangkreas yang berupa ∝ amylase. Reaksi Hidrolisis CH2OH H H OH HO H OH H OH H OH H CH3 H O H H CH2OH O H OH H H CH2OH O H OH H H CH2OH O H OH H O O O O + H2O CH2OH H H OH HO H OH H O H CH2OH CH2OH O H O H OH H + O CH2 O H H OH HO H O H OH H OH destin 1.

dalam amilum dan disebut endo amilase sebab enzim ini memecah bagian dalam atau bagian tengah molekul amilum.  amilase terutama terdapat pada tumbuhan dan dinamakan ekso amilase sebab memecah dua unit glukosa yang terdapat pada ujung molekul amilum secara berurutan sehingga pada akhirnya membentuk maltosa. ∝ amilase telah diketahui terdapat dalam hati .

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful