You are on page 1of 194

第一篇 细胞生理

第一章 细胞的基本结构
第二章 细胞的活动
第三章 细胞的增殖、分化与加工
第四章 肌肉
第五章 神经细胞的功能
第一章 细胞的基本结构
第一节 细胞膜和细胞表

 细胞膜是围在细胞外表面的一层薄膜,
细胞膜是围在细胞外表面的一层薄膜,称质
膜。它是细胞内外物质流、
它是细胞内外物质流、信息流、
信息流、能量流
的出入门户。
的出入门户。
 质膜与细胞内各种膜性结构称为生物膜。
质膜与细胞内各种膜性结构称为生物膜。
 生物膜在电镜下呈现三层结构
 内外层各厚2.0~
内外层各厚 ~2.5nm
 中间层厚3.5nm
中间层厚
 细胞膜功能“区域化
细胞膜功能 区域化”,
区域化 ,将某一功能有关的酶
系统集中于一定区域之内,
系统集中于一定区域之内 ,形成若干专一的
功能区,
功能区,使之不会与其它酶系统混杂。
使之不会与其它酶系统混杂。这样
可使各酶系统更有效发挥作用。
可使各酶系统更有效发挥作用。
一、细胞膜的化学组成

 细胞膜是一种脂质双分子层 , 30%~
%~40%
%~ %

蛋白质 , 40%~
蛋白质, %~50% 的脂质 , 1%~
%~ % 的脂质, %~5%
%~ % 的

糖。通常膜的功能越复杂,
通常膜的功能越复杂,膜蛋白质所占的

比例越大。
比例越大。
图1.1 细胞膜结构
(一)脂质
 构成膜的脂类有磷脂、
构成膜的脂类有磷脂、胆固醇和糖脂。
胆固醇和糖脂。在
膜中以磷脂最为丰富。
膜中以磷脂最为丰富。
 磷脂:
磷脂:磷脂酰胆碱、
磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、
磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌
醇、磷脂酰丝氨酸和鞘磷脂等 。它形成一种双
极性分子(amphipathic
极性分子 molecules)
 胆固醇:
胆固醇:为中性脂质,
为中性脂质,在真核细胞膜中含量较
多。与磷脂一样,
与磷脂一样,胆固醇也是双亲媒性分子,
胆固醇也是双亲媒性分子,
极性的羟基与非极性脂肪酸链间由固醇环连
接。
 糖脂:
糖脂:有伸出细胞外的短链糖类,
有伸出细胞外的短链糖类,称为寡糖,
称为寡糖,
一般认为它们与细胞识别的功能有关。
一般认为它们与细胞识别的功能有关。如神经
节苷脂是含有一个或几个唾液酸 (N-乙酰神经
乙酰神经
氨酸)
氨酸 及糖的残基的复合糖 。它又是膜上的受
如破伤风毒素、
体,如破伤风毒素 霍乱毒素、
、霍乱毒素 干扰素、
、干扰素、促甲
状腺素和 5-羟色胺等受体都属神经节苷脂
羟色胺等受体都属神经节苷脂。
羟色胺等受体都属神经节苷脂。
表1.1 不同动物组织中细胞膜表面的
脂质组成

CHOL:胆固
醇;
Pc:磷脂酰胆
碱;
PE.磷脂酰乙
醇胺;
Ps:磷脂酰丝氨
酸:
PI:磷脂酰肌
醇;sP:鞘髓磷
脂;
CE:糖脂;
GA:神经节苷
脂;
Oth:其他脂类
(二) 膜蛋白
 功能:
功能:细胞内外的物质转运;
细胞内外的物质转运;接受及传递
信号;
信号;细胞骨架和外基质的固着点;
细胞骨架和外基质的固着点;决定
细胞的特性等。
细胞的特性等。
1. 整合蛋白质(
整合蛋白质(integral protein)
 大多数整合蛋白质在膜的两侧有极性区,
大多数整合蛋白质在膜的两侧有极性区,
有一个或两个与磷脂层疏水部分相互作用
的结构。
的结构。
 整合蛋白质的跨膜功能区主要是α
整合蛋白质的跨膜功能区主要是α螺旋,
螺旋,
氨基酸侧链呈辐射状投射。
氨基酸侧链呈辐射状投射。
 整合蛋白质在膜上的结构和分布差别,
整合蛋白质在膜上的结构和分布差别,决
定了它们有着不同的功能。
定了它们有着不同的功能。 (受体 、离
子通道 、转运载体 、离子泵 、细胞的固
定作用 )
 靠近细胞膜内表面的蛋白质,
靠近细胞膜内表面的蛋白质,与其他蛋白
质一起形成了复杂的格子样结构,
质一起形成了复杂的格子样结构,此蛋白
质称为膜骨架蛋白(
质称为膜骨架蛋白(如锚蛋白、
如锚蛋白、血影蛋
白)P4。

2. 外周蛋白质(
外周蛋白质( peripheral
protein )
 有一些膜蛋白完全不能伸入到脂质双分子
层的疏水部分,
层的疏水部分,只能通过与其他膜蛋白以
共价或非共价相互作用,
共价或非共价相互作用,结合到膜的胞质
面或外表面,
面或外表面,这类蛋白称为外周蛋白质。
这类蛋白称为外周蛋白质。
分:
 免疫球蛋白家族(
免疫球蛋白家族(最大的一组),
最大的一组),调节同种细
),调节同种细
胞间的粘附反应,
胞间的粘附反应,或者是调节不同细胞间相同
分子间的相互作用。
分子间的相互作用。

 糖蛋白是钙依赖粘附分子
糖蛋白是钙依赖粘附分子 (cadherins, CADs)
家族,
家族,参与钙依赖性同种亲和粘附反应。
参与钙依赖性同种亲和粘附反应。
 整合素 (integrin) 家族,
家族,调节细胞和细胞基质
的相互作用。
的相互作用。这种相互作用是通过另一组细胞
外基质糖蛋白发挥作用的。
外基质糖蛋白发挥作用的。这些糖蛋白存在于
细胞间隙中而不是直接插入到细胞膜中。
细胞间隙中而不是直接插入到细胞膜中。 。
细胞外基质糖蛋白
 这些糖蛋白存在于细胞间隙中而不是直接

插入到细胞膜中。
插入到细胞膜中。

 神经系统中的层粘连蛋白 (lanfinin),
,是含

有类似表皮生长因子 (epidermal growth

factor,
,EGF) 重复片段的三聚体。
重复片段的三聚体。

 在发育早期在神经系统中有广泛的表达,
在发育早期在神经系统中有广泛的表达,

一般认为它与神经轴突的生长和促进轴突

向靶区的生长有关。
向靶区的生长有关。
图 1.2 细胞表面糖蛋白分子
模式图
图的左侧属于免疫球蛋白超级家族,右侧是
2+
Ca 依赖粘附分子家族。
表1.2 细胞表面分子
(三)糖类

 真核细胞表面都有糖类,
真核细胞表面都有糖类,占细胞重量的
2%~
~10%
 主要以糖蛋白与糖脂的形式存在于细胞表
面。
 与膜蛋白膜脂结合的单糖有 9 种,主要有半
乳糖、
乳糖、岩藻糖、
岩藻糖、甘露糖、
甘露糖、半乳糖胺、
半乳糖胺、葡萄糖
和氨基糖酸(
和氨基糖酸(唾液酸)
唾液酸)等。
 由于组成寡糖链的单糖的种类、
由于组成寡糖链的单糖的种类、数量、
数量、结合
方式及排列顺序不同,
方式及排列顺序不同,构成糖蛋白和糖脂外
伸的糖链也以多种多样的形式被覆盖天细胞
膜的外表面,形成细胞外被(cell coat)。
膜的外表面,形成细胞外被( )。
 糖类的存在成为细胞活动和细胞间识别的重
要功能基础。
要功能基础。
二、细胞膜的特性

 两个主要特性:不对称与流动性
两个主要特性:
(一)细胞膜的不对称性
膜的内外两层有结构上和功能上有很大的差
膜的内外两层有结构上和功能上有很
异,这种差异称不对称性。
这种差异称不对
1. 膜脂分布的不对
膜脂分布的不对称
 脂类双分子层的内外两层膜脂在种类、
脂类双分子层的内外两层膜脂在种类、含量
和比例上都有差别。
和比例上都有差别。
 红细胞 外层:
外层:含胆碱的磷脂,
含胆碱的磷脂,如磷脂酰胆碱、
如磷脂酰胆碱、
鞘磷脂
内层:
内层:含氨基酸的磷脂,
含氨基酸的磷脂,如磷脂酰丝氨酸、
如磷脂酰丝氨酸、磷脂
酰肌醇、
酰肌醇、磷脂酰乙醇胺
(带负电荷的磷脂酰丝氨酸主要在内层,
带负电荷的磷脂酰丝氨酸主要在内层,所以细
胞内侧负电大于外侧)
胞内侧负电大于外侧)
2. 膜蛋白分布的不对称

 没有一种蛋白是既
有一种蛋白是既存在于膜内层又
存在于膜内层又分布于膜
外层。
外层。
 贯穿膜全层的
膜全层的镶嵌蛋白两个
贯穿膜全层的镶嵌蛋白两个亲水端的长度
镶嵌蛋白两个亲 的长度和
氨基酸种类与顺序也不相同。
氨基酸种类与顺序也不相同。
 冰冻蚀刻发现
冰冻蚀刻发现,膜内外层中镶嵌蛋白的分布
发现,膜内外层中镶嵌
镶嵌蛋白的分布
是不对称的,
是不对称的,内层多于外层。
内层多于外层。
3. 糖类分布的不对称

 糖类主要分布在细胞膜外面,
糖类主要分布在细胞膜外面,以糖脂和糖蛋
白形式存在。
白形式存在。

细胞膜结构上的不对称性,
细胞膜结构上的不对称性,保证了膜功能的
保证了膜功能的
方向性,
方向性,如膜内、
如膜内、外两层的流动性不同;
外两层的流动性不同;物
质的转运有一定的方向性;
质的转运有一定的方向性;信号的接受与传
递也有方向性。
递也有方向性。
(二)细胞膜的流动性

 生物膜是一种动态的结构,
生物膜是一种动态 膜脂与膜蛋白处
的结构,膜脂与膜蛋白处
于不断运动的状态
于不断运动的状态,这是生物膜的基本
这是生物膜的基本特
征。
 在生理温度下
在生理温度 膜脂质多呈液晶态,
晶态,当温度
理温度下,膜脂质多呈液晶态
下降到某一点(
到某一点(相变温度)
变温度)时,液晶态则变
成晶态。
晶态。温度上
温度上升时晶态又可
升时晶态又可熔融为液
为液晶
熔融为液晶
态。
 很多因素
多因素影响着膜的流动性:
着膜的流动性:
1. 胆固醇:
胆固醇:
 在相变温度以上时,
在相变温度以上时,胆固醇能抑制磷脂分子脂肪
酸链的旋转异构化运动,
酸链的旋转异构化运动,减少扭曲现象,
减少扭曲现象,从而使
膜的流动性降低。
膜的流动性降低。
 在相变温度以下时,
在相变温度以下时,胆固醇能干扰膜脂有序性的
出现,
出现,诱发脂肪酸链扭曲现象,
诱发脂肪酸链扭曲现象,阻止晶态形成,
阻止晶态形成,
防止膜流动性的突然降低。
防止膜流动性的突然降低。
2. 脂肪酸链的长与不饱和度:
脂肪酸链的长与不饱和度:
 短链能降低脂肪酸链尾部的相互作用,
短链能降低脂肪酸链尾部的相互作用,在相变温度以
下不易凝集。
下不易凝集。
 长链则增加分子的有序性,
长链则增加分子的有序性,使流动性降低。
使流动性降低。
 饱和的脂肪酸链直而不弯曲,
饱和的脂肪酸链直而不弯曲,流动性低。
流动性低。
 不饱和脂肪酸链的双链处易于弯曲,
不饱和脂肪酸链的双链处易于弯曲,使脂质分子尾部
难以相互靠近,
难以相互靠近,彼此排列疏松。
彼此排列疏松。
3. 膜蛋白的影响:
膜蛋白的影响:
 膜蛋白嵌入膜脂质疏水区后,
膜蛋白嵌入膜脂质疏水区后,产生与胆固醇相似的作
用,使膜的粘度增加。
使膜的粘度增加。镶嵌蛋白越多,
镶嵌蛋白越多,膜脂的流动性
就越小。
就越小。
4. 其它因素的影响:
其它因素的影响:
 温度、pH、
温度、 、离子强度、
离子强度、金属离子等都会不同程度地影
响膜脂的流动性。
响膜脂的流动性。
 环境温度越高,
环境温度越高,流动性越大,
流动性越大,反之亦然。
反之亦然。
三、细胞表面

 细胞表面是指:细胞膜、
细胞表面是指 细胞膜、细胞外被(
细胞外被(糖)、
细胞膜内面的胞质溶胶、
细胞膜内面的胞质溶胶
溶胶、各种细胞连接结构
和细胞膜的一些特化结构的统称。
和细胞膜的一些特化结构的统称。

 细胞表面是一个以细胞膜为核心的复合的结
细胞表面是一个以细胞膜为核心
构与功能体系,主要功能是维持细胞相
构与功能体系,主要功能是维持细胞相对稳
维持细胞相对稳
定的微环境,
微环境,实现物质交换
定的微环境 现物质交换、
交换、信息传递、
信息传递、细
胞识别和免疫反应等功能活动
胞识别和免疫反应
免疫反应等功能活动。
等功能活动。
(一)细胞外被

 细胞外被是细胞膜中糖蛋白和糖脂伸出细胞
表面的分支可不分支
表面的分支可不分支的寡糖链。
的寡糖链。
 如哺乳动物小肠
乳动物小肠上皮细胞的细胞外被称
小肠上皮细胞的细胞外被称
糖萼。糖萼实是细胞结构的一部分
是细胞结构的一部分,但
萼实是细胞结构的一部分,
它又有独立性
独立性,去除它
去除它并不损伤细胞
损伤细胞
膜。
 消化、呼吸、
呼吸、生殖道的糖萼
道的糖萼有润滑作
润滑作
用。
 细胞膜抗原
细胞膜抗原都是糖蛋白
抗原都是糖蛋白、
都是糖蛋白、糖脂,
糖脂,用于细
胞、识别。
识别。
 膜受体是糖蛋白或糖脂蛋白,
膜受体是糖蛋白或糖脂蛋白,糖链可作
细胞的 化学天线”
细胞的“化
(二)胞质溶胶层

 厚度为0.1~
在细胞膜内表面的厚度为
在细胞膜内表面的厚度 ~0.2nm的
的溶胶
层称胞质溶胶层
层称胞质溶胶
溶胶层。
 其中含有浓度较高的蛋白质
其中含有浓度较高的蛋白质、微丝与
浓度较高的蛋白质、微丝与微管。
微管。
 该部分有相当
部分有相当大的抗张强度
大的抗张强度,
抗张强度,对维持细胞的
对维持细胞的
极性、形态和运动很
极性、 和运动很重要。
重要。
 与胞呑胞吐作用及越膜调控
与胞呑 作用及越膜调控有关
调控有关。
有关。
(三)细胞表面的特化结构

 微绒毛
 内褶
 纤毛
 鞭毛
 暂时性的
性的变形足和皱褶
暂时性的变
特化结构在细胞执行特定的功能方面起了
特化结构在细胞执行
执行特定的功能方面起了
重要作用。
重要作用。
(四)细胞连接

 闭锁连接
闭锁连接
 紧密连接
 锚定连接
 粘合连接
 粘合带
 粘合斑
 桥粒
 点状桥粒
 半桥粒

 通讯连接
 间隙连接
 化学突触
第二节 膜性细胞器

一、内质网
二、高尔基复合体
三、溶酶体
四、过氧化物酶体
五、线粒体
第三节 核糖体
第四节 细胞骨架

一、微管
二、微丝
三、中间丝
第五节 细胞核

一、核膜
二、染色质与染色体
三、核仁
四、核基质
第二章 细胞的活动
 活细胞通过与机体内外环境
活细胞通过与机体内外环境的相互
的相互协调来实
环境的相互协调来实
现自身的
自身的新陈代谢,
新陈代谢,从而完成细胞的生长、
而完成细胞的生长、
繁殖、
繁殖、发育、分化、遗传、变异、
发育、分化、 运动、支
变异、运动、
持、病变、
病变、转归、衰老和
衰老和死亡等基
死亡等基本
等基本生命活
动。
 疾病有一个发生发
有一个发生发展的过程
疾病有一个发生发展的过程,大多数疾
大多数疾
病发生发展
发生发展到一定阶
到一定阶段后终将结
将结束,这
后终将结束
就是疾病的转
的转归。疾病的转
疾病的转归 的转归,是指疾
疾病的转归
病发展的最后阶
的最后阶段
后阶段,即疾病的结
的结局。一
即疾病的结局
般而言,疾病的转
般而言 的转归,可分为痊愈
疾病的转归 可分为痊愈、
痊愈、死
亡、缠绵、
缠绵、后遗等
后遗等。
第一节 细胞的物质转运

一、离子和小分子跨膜运输
(一)被动运输
1. 单纯扩散
 不消耗细胞
细胞代谢的能量
消耗细胞代谢的能量,不依靠专一性膜蛋
代谢的能量,
白分子。
白分子。
 脂溶性物质: 激素和 O2、
性物质:苯、乙醇、甾类激素和
N2、CO2 等通过此方式。
等通过此方式。
2. 易化扩散

 经载体易化扩散:
经载体易 扩散:如葡萄糖、氨基酸、核苷
如葡萄糖、氨基酸、
酸的转运。
酸的转运。如葡萄糖转运体
 经通道易化扩散:
经通道易 扩散:
 电压门控通道

 化学门控通道

 机械门控通道
3. 初级主动转运

 Na+-K+-ATP酶
 钙泵
4. 次级主动转运

 Na+-葡萄糖同向转运体
葡萄糖同向转运体
二、大分子和颗粒的膜泡运输
(一)胞呑作用
 胞呑作用可分 3 种类型
 胞饮作用
 细胞周围的溶液和小溶质分子先吸附在细胞表面,
细胞周围的溶液和小溶质分子先吸附在细胞表面,通过
该部位细胞膜下微丝的收缩作用使膜凹陷包围了液体物
质,接着与膜分离
接着与膜分离。

 主要发生于人体上皮细胞
主要发生于人体上皮细胞、
上皮细胞、粘液细胞、
粘液细胞、成纤维细胞、
成纤维细胞、毛
细血管内皮细胞、
细血管内皮细胞、肾小管细胞和巨噬细胞等
肾小管细胞和巨噬细胞等
 呑噬作用
 细胞呑入较大的固体颗粒和大分子复合物的过程,
细胞呑入较大的固体颗粒和大分子复合物的过程,如呑
噬细菌和细胞的碎。
噬细菌和细胞的碎。
 在哺乳动物如网状内皮系统的巨噬细胞、
在哺乳动物如网状内皮系统的巨噬细胞、单核细胞和多
形核白细胞等。
形核白细胞等。
 受体介导的胞呑作用
 大分子物质内呑首先同细胞膜上的特异性受体结合,
大分子物质内呑首先同细胞膜上的特异性受体结合,然
后内陷形成有衣小窝,
后内陷形成有衣小窝,继而形成有衣小泡进入细胞。
继而形成有衣小泡进入细胞。
 高特异性
 能使细胞摄入大量特定的配体,
能使细胞摄入大量特定的配体,而不需要摄入很多细胞
外液,
外液,
 可达非特异性胞呑作用效率的1000倍
可达非特异性胞呑作用效率的 倍
 激素、转换蛋白和低密度蛋白(LDL)
激素、转换蛋白和低密度蛋白( )等大分子都是通过
此途经进入细胞的
笼蛋白
 是一种高度稳定的
是一种高度稳定的纤维状蛋白
高度稳定的纤维状蛋白,相对分子量
纤维状蛋白,
×105,与另一种较小
为 1.8× 一种较小的多
的多肽一起形成
较小的多肽
被的结构单位----三
衣被的结构单位 三脚蛋白复合体
(triskelion)。

 一个三脚蛋白复合体由 3 个笼蛋白重链和 3
一个三脚
个较小的多
的多肽轻链组成
较小的多肽轻
肽轻链组成,呈三分支状排列,
链组成,呈三分支状排列,
它们在有小泡表面组
它们在有小泡表面组装成五角或
小泡表面组装 五角或六角形的
形的网
六角形的网
状结构。
状结构。
 笼蛋白的作用与有衣小窝
蛋白的作用与有衣小窝最
衣小窝最初的形成有关,
的形成有关,
一旦小泡形成
形成,笼蛋即解体
旦小泡形成, 即解体脱下,可再参加
形成新的有衣小泡
形成新的有衣小泡。
衣小泡。
(二)胞吐作用

 真核细胞的分泌活动几乎
真核细胞的分泌活动几乎都是以胞
都是以胞吐的形式
几乎都是以胞吐
进行的。
 结构性分泌:分泌蛋白经合成后立即
结构性分泌 蛋白经合成后立即被
后立即被装入
高尔基体的分
基体的分泌囊泡中
泌囊泡中,然后被
高尔基体的分泌囊泡 然后被迅速带到细
迅速带到细
胞膜处排出。
胞膜处排出。几乎存在于所有细胞
几乎存在于所有细胞。
存在于所有细胞。
 调节性分
调节性分泌
性分泌:要分泌
要分泌的蛋白或小
的蛋白或小分子,
分子,贮存
在特定的分泌囊泡中
在特定的分泌囊泡 只有当接受细胞外信
泌囊泡中,只有当
号(如激素)
激素)的剌激时,
剌激时,分泌泡才移到细胞
泌泡才移到细胞
膜处,与其融
与其融合将囊泡
合将囊泡中分
中分泌物排出。
囊泡中分泌物排出。内分
泌腺、神经元、消化腺细胞等
泌腺、神经元
第二节 细胞内物质的运
输、
分选与加工
一、细胞内蛋白运输的途径
细胞表

内质 高尔基
高尔基 溶酶体
网 体
分泌颗
核糖 粒
线粒
体 体

胞质溶
胞质溶 细胞核

过氧化物
酶体
二、细胞内蛋白质运输的
方式
(一)直接穿膜运输
 发生在细胞质与细胞器之间的蛋白质运输
发生在细胞质与细胞器之间的蛋白质运输。
蛋穿过细胞器
过细胞器的膜从
的膜从细胞质进入细胞器
细胞质进入细胞器内
部。
 膜内有特殊的蛋白质转运装置
膜内有特殊的蛋白质转运装置。
装置。
 穿膜的蛋白质必须
膜的蛋白质必须是非
是非折叠的
必须是非折叠
折叠的。
(二)通过转运小泡的运输

 见于细胞器之间的蛋白质运输,
见于细胞器之间的蛋白质运输,如内
质网到高尔基体、
质网到高尔基体、高尔基体的一个膜
囊到一个膜囊,
囊到一个膜囊,及高尔基体到其它细
胞器的蛋白运输。
胞器的蛋白运输。
 转运小泡直径 ~100nm,
转运小泡直径50~ ,以出芽方
式形成,
式形成,小泡内有被运蛋白,
小泡内有被运蛋白,小泡膜
上镶嵌有膜蛋白。
上镶嵌有膜蛋白。
 当转运小泡到达靶细胞器即融合,
当转运小泡到达靶细胞器即融合,将
蛋白质从一个细胞器运送到另一个细
胞器。
胞器。
三、蛋白质的分选信号

 蛋白质在细胞内的运输方式是由蛋白质分子
蛋白质在细胞内的运输
上的分选信号决定的。
上的分选信号决定的。
 蛋白质分选信号有信号肽
蛋白质分选信号有信号肽和信号斑
和信号斑。
(一)信号肽和信号斑
 信号肽:是位于蛋白质上的一段连续
信号肽 于蛋白质上的一段连续的氨基
酸顺序,一般 ~60个
酸顺序,一般15~ 个残基。
 引导蛋白质从细胞浆进入内质网、
引导蛋白质从细胞浆进入内质网、线粒体和细胞

 也引导某些蛋白质保留在内质网内
 在完成分选任务即引导蛋白质到达目的地后,
在完成分选任务即引导蛋白质到达目的地后,信
号肽往往蛋白质上被切除。
号肽往往蛋白质上被切除。
 信号斑:是位于蛋白质不同部位
信号斑 于蛋白质不同部位的氨基顺序
在多肽链折叠后形成的
在多肽 形成的斑块区
折叠后形成的斑块
斑块区,它是一种三
维结构,组成信号斑的不同氨基酸可在多肽
结构,组成信号斑的不同氨基酸可在多肽
链上相距很远。
链上相距很远
距很远。
 高尔基体中某些溶酶体酶蛋白上具有的信号斑,
高尔基体中某些溶酶体酶蛋白上具有的信号斑,
可被特殊的分选酶识别。
可被特殊的分选酶识别。
(二)信号假说
 编码分
编码分泌蛋白溶
蛋白溶酶体水解
酶体水解酶以及膜蛋白的
mRNA的
的5’端
端,有一组编码
有一组编码特定信号
特定信号肽顺序
编码特定信号肽
的信号密码,
密码,位于始始密码(AUG)之
的信号密码 始始密码 之后。
 信号密码翻译出信号
信号密码翻译出信号肽,引导蛋白质进入内
密码翻译出信号肽 引导蛋白质进入内
的信号肽有18~
质网的信号肽 ~30个疏水氨基酸组成
个疏水氨基酸组成。
个疏水氨基酸组成。
 能先合成这一段多肽
合成这一段多肽链的核糖体都向内质网
链的核糖体都向内质网
表面靠拢并附在其上
表面靠拢并附
拢并附在其上。
在其上。
 不能合成信号肽的核糖体散
不能合成信号肽的核糖体散布于细胞质基质
中成为游离核糖体。
中成为游离核糖体。
 颗粒(SRP)
在细胞质中存在信号识别颗粒(
在细胞质中存在信号识别颗粒 )
 6 个多肽亚单位和一个小的 7 SL RNA分子组
分子组
成。
 SRP 能识别露出核糖体之外的信号肽,
能识别露出核糖体之外的信号肽,又能识别
粗面内质网上的 SRP 受体。
受体。

 当 SRP 与带有信号肽的核糖体结
有信号肽的核糖体结合形成 SRP-核

糖体复合体后,核糖体的 A 部位正好被
糖体复合体后, 正好被 SRP 所
占据,
占据,影响下一个氨基酸
影响下一个氨基酸-tRNA
下一个氨基酸 进入,
进入,使蛋白质
合成暂时中止。一直到 SRP-核糖体复合体和内
合成暂时中止。 核糖体复合体和内
质网膜的 SRP 受体结
受体结合为止。
合为止。
四、细胞核与细胞质间的物质
交换

 与一些离子:如 Na+、K + 、Mg2+、Cl-、分子量在


水与一些离

5 000以下的单糖
以下的单糖、
以下的单糖、氨基酸、
氨基酸、核苷与核苷酸等可以通

过核膜。
过核膜。

 分子量大的如 DAN 聚合酶、


合酶、RNA 聚合酶、
合酶、核糖体

亚基和 mRNA 则要通过核


则要通过核孔
通过核孔复合体进行
复合体进行运输。

Physiology.blogerhome.com
(一)核蛋白质的运输

 核输入信号
 是引导蛋白选择性输入到细胞核的信号。
是引导蛋白选择性输入到细胞核的信号。
 4~
~8 个 Aa 的短肽。
的短肽。
 首先在 SV40 病毒的 T 抗原中被发现。
抗原中被发现。后来在许多核
蛋白中都鉴定出带有该信号。
蛋白中都鉴定出带有该信号。
 在不同的核蛋白中有差异,
在不同的核蛋白中有差异,常富含带正电荷的赖氨酸
和精氨酸,
和精氨酸,一般都含脯氨酸。
一般都含脯氨酸。
 蛋白质输
蛋白质输入细胞核的方式
入细胞核的方式:
方式:
 不穿过膜结构,
不穿过膜结构,而是通过核孔。
而是通过核孔。
 蛋白质进入核后,
蛋白质进入核后,其信肽被切除。
其信肽被切除。
 蛋白质通过核孔复合体运输时保持完全折叠的天然结
构。如核糖体亚基就是以装配好的核糖体颗粒形式通
过核孔运输的。
过核孔运输的。
(二)生物大分子的双向运输

 细胞核内合成的 RNA (rRNA, mRNA 和

tRNA) 和核糖体亚
和核糖体亚基等也必须输
基等也必须输出到细胞质
必须输出到细胞质

中。

 核孔除了有识别核
了有识别核输入信号的受体外,
孔除了有识别核输入信号的受体外,还具
有 1 个或多个识别 RNA 分子(
分子(或与 RNA

结合的蛋白质)的受体,当核孔存在这些受
结合的蛋白质)的受体,

体时,就可以向细胞质方向运输
可以向细胞质方向运输物质。
物质。
第三节 细胞的能量转换
一、细胞能量的获得与转换

(一)细胞呼吸
 在细胞内特定的细胞器----线粒
在细胞内特定的细胞器 体内,在 O2
线粒体内
线粒体内,
的参与下,
与下,分解各种大分子物质,
各种大分子物质,产生
CO2。

 分解代谢所 出的能量储存于 ATP 中,


解代谢所释放出的能量
释放出的能量储

这一过程为细胞呼吸
这一过程为细胞呼吸。也称生物氧化或细胞
呼吸。也称生物氧
氧化。
细胞呼吸的特点

 细胞呼吸本质上是在
细胞呼吸本质上是在线粒体中进
呼吸本质上是在线粒体中进行的一系列
线粒体中进行
由酶系所催化的氧
由酶系所催化的氧化还原反应。
还原反应。
 所产生的能量储
生的能量储存于ATP的
存于 的高能磷酸键
能磷酸键中。

 整个反应过
反应过程是分步
整个反应 是分步进行的,能量也是逐步
能量也是逐步
释放的
释放的。

 反应在
反应在恒温和
恒温和恒压条件下进
下进行。
恒压条件下进行
 反应过程中需要 H2O 。
反应过
(二)ATP----细胞能量转换分子
细胞能量转换分子

 细胞呼吸所 生的能量储存在 ATP 中。


呼吸所产生的能量储
细胞呼吸
 ATP 是高能磷酸化合物。
能磷酸化合物。

A-P~
~P ~P--
--→ A-P ~P + Pi
--→
+1.72 KJ 去磷酸

磷酸

 随着细胞内不断
着细胞内不断进行的能量释放
的能量释放和
释放和储存,
ATP 与 ADP 不停地进
停地进行着互变
着互变。
 ATP 是细胞内能量转换
是细胞内能量转换的中间者
的中间者,所以被称
为“能量
能量货币”
能量货币
货币
二、细胞能量转换的分子机制

 “能量货币 ATP 中所携带


能量货币”
能量货币 中所携带的能量
的能量来源于
携带的能量来源
来源于

氨基酸和脂肪的氧化。
糖、氨基酸和脂肪

 以葡萄糖氧化为列,
以葡萄糖氧 大体分为三个步骤:
化为列,大体分为三个步骤
步骤:
 糖酵解

 三羧酸
三羧酸循环

 氧化磷酸化
第四节 细胞的运动
一、细胞运动的形式

(一)细胞的位置移动
 局部性的、
部性的、近距离的移
离的移动。
 整体性的、远距离的
整体性的、 离的移动。
远距离的移
 动物发育过程中,胚胎内单个或一
胚胎内单个或一群
内单个或一群细胞发生
细胞发生位
置迁徒。
置迁徒。
 呑噬细胞具有趋向
细胞具有趋向性
趋向性,能主动搜寻人体内的
搜寻人体内的病原
体内的病原
微生物,
微生物,保护宿主抵御感染。
护宿主抵御感染。
 肿瘤扩散也是
肿瘤扩散也是因肿癌
也是因肿癌细胞运动功能
因肿癌细胞运动功能失去
细胞运动功能失去控制
失去控制所
控制所
致。
(二)细胞的形态改变

 体内大多数细胞的位置是相对固
定不变的,但它们仍表现出十分
活跃的开态改变。如:
肌肉的收缩
神经元轴突的生长
细胞表面突起(绒毛、伪足等)
细胞分裂中的胞质分裂
(三)细胞内的运动

 膜泡的运动
 胞内常见
胞内常见的而
常见的而且很重要
的而且很重要的运
且很重要的运输
的运输形式是:以生物膜
生物膜
将所要运
将所要运输的物质包装起来,
包装起来,形成膜泡
形成膜泡在细胞内
移行运
移行运输。

 轴突运输
轴突运输
 轴突长的可达数米
的可达数米。
数米。由于核糖体只
由于核糖体只存在于胞体与
树突中,
突中,在胞体合成蛋白质、
在胞体合成蛋白质、神经递
神经递质、小分子
物质以及线粒体等膜性结
质以及线粒体等膜性结构都必须没轴
构都必须没轴突运
必须没轴突运输
突运输到
神经末稍
神经末稍。
末稍。

 轴突运输
突运输是沿着微管提供的
沿着微管提供的轨道进行
道进行的。
 染色体分离
染色体分离

 在细胞有丝分裂期
在细胞有丝分裂期,
裂期,染色体在细胞内发剧烈
色体在细胞内发剧烈的运
剧烈的运

动。

 中期染色体
期染色体排列
色体排列组
排列组装于赤道板上,后期姐妹染色
期姐妹染色

单体分离移向
单体分离移向细胞的
离移向细胞的两
细胞的两极。
第三章 细胞的信号转导
二、细胞运动的机制

 两个基本机制
两个基本机制
 特殊酶参与,酶能水解 ATP 获得能量
特殊酶参与,酶能水解 获得能量

 微管蛋白或肌动蛋白
微管蛋白或肌动蛋白聚
蛋白或肌动蛋白聚合,组装成束状或网状而

引起细胞运动。
细胞运动。
(一)肌动蛋白

 与微丝有关的动
有关的动力蛋白是肌球
微丝有关的动力蛋白是肌球蛋白
肌球蛋白
 与微管有关的动
有关的动力蛋白有驱
微管有关的动力蛋白有驱动蛋白的动位
动蛋白的动位蛋
白。

1. 肌球蛋白
 所有真核细胞都含有肌球蛋白
所有真核细胞都含有肌球蛋白。目前已鉴
肌球蛋白。目前已鉴定
出 10 几种肌球蛋白成
蛋白成员。
肌球蛋白成员
 含量最丰富
丰富的是肌球蛋白 I 和 II。
含量最丰富的是肌球蛋白 。肌球蛋白 II 为
肌肉收缩和胞质分
肉收缩和胞质分裂提供
和胞质分裂提供动
裂提供动力。
 肌球蛋白 I 、V 则与骨架-膜的相互作用有关
骨架 膜的相互作用有关。
膜的相互作用有关。
1. 驱动蛋白 (kinesin)

 它是微管动
微管动力蛋白。
它是微管 蛋白。

 分子结构与肌球蛋白类似
分子结构与肌球蛋白类似,由二条重链和二
肌球蛋白类似, 重链和二
条轻链聚合而成
条轻链聚合而成。
链聚合而成。

 它含有三个结构域:
它含有三个结构域:
 一对大球形的头部
大球形的头部,
头部,产生动
产生动力的活性部位。

 中央长柄部

 一对小球形尾部尾部
小球形尾部尾部含
尾部尾部含轻链,与膜泡结
与膜泡结合
泡结合。
3. 动位蛋白

 可分为胞浆动位蛋白的轴突(
可分为胞浆 蛋白的轴突(或鞭毛)
鞭毛)动位
蛋白。
蛋白。
(二)动力蛋白介导细胞运动的机

 在 ATP 存在下,
存在下,肌球蛋白的
蛋白的头部结合到肌
肌球蛋白的头部结合到肌
动蛋白丝 通过水解 ATP,
动蛋白丝(细丝)上,通过水解 ,朝向
+丝
丝的 (+)
)端移动
端移动。
 动是不连续的,每水解 1 分子
这种移动是不连续
这种移
ATP, 蛋白移动 2~
,肌球蛋白
肌球蛋白移 ~3 个肌动蛋白亚
动蛋白亚基
的距离(11 ~15nm), 时产生 3 ~4 pN
),同时产生
),同
的力量。
 驱动蛋白与动位
动蛋白与动位蛋白的运动机制
蛋白的运动机制和
机制和肌球蛋白
肌球蛋白
相似,但是它们以微管
相似, 是它们以微管作为运动的
作为运动的轨道。
微管作为运动的轨
(三)纤毛和鞭毛的运动机制

 纤毛与
纤毛与鞭毛摆
鞭毛摆动的特征
动的特征是从基体产
基体产生滑动,
沿着轴丝
着轴丝将弯曲传递到
传递到尾部,因此二
弯曲传递到尾 因此二管之间
的滑动必须转
必须转换为弯曲运动
弯曲运动。
运动。
 在轴丝上任意两点的
在轴丝 两点的滑动速度不等
任意两点的滑 不等时,滑动
速度不等时
可转换为弯曲。
可转换 弯曲。这种滑
这种滑动速度的差
速度的差异
的差异主要来
主要来
自维持轴
自维持轴丝结构的联
结构的联合蛋白,它们在一定程
合蛋白,它们在一定程
度上限制了二联管
二联管的自由滑动。
 在某时某位置,
在某时 只有部分动位蛋白臂
位置,只有部分动位蛋白臂被激
活,激活的动位
活的动位蛋白臂
蛋白臂使轴丝
使轴丝朝一边弯曲,
边弯曲,
激活另一半侧朝
一半侧朝另一边弯曲。
边弯曲。二条动位蛋白
臂的作用不同,
的作用不同,内臂产生滑动,导致轴丝弯
曲,而外臂
而外臂可以加
可以加快滑动的速度
动的速度。
速度。
(四)染色体分离

 染色的分离
染色的分离包
的分离包含了微管
含了微管组
微管组装动力学和
力学和动力蛋
白水解 ATP 两种机制
白水解 两种机制。
机制。
1. 有丝分裂器 它是的一个动态
它是的一个动态的结构,
的结构,在
中期细胞中包括两部分
中期细胞中包括
包括两部分:
两部分:
 纺锤体
纺锤体 由对称的微管束
称的微管束组成的形
微管束组成的形似橄榄
组成的形似橄榄球的
似橄榄球的结
球的结
构,在细胞赤
在细胞赤道板被染色体一分为二
色体一分为二。
 星体 在纺锤
纺锤体的
体的两端
体的两端各有一个
两端各有一个,
各有一个 为一簇呈放射
,为一 簇呈放射
状的微管
状的微管。
微管。
 纺锤体
纺锤体两极的中心
极的中心体发出的微管
体发出的微管分
微管分三种:
 动粒微管 与染色体着丝点处的动粒结合
 极微管 与染色体接触
 星体微管 在星体中,
在星体中,不参与纺锤体的组装
2. 有丝分裂器的组装

 有丝分裂前期
有丝分裂前期,
裂前期,染色质变与染
色质变与染色体,
色体,同时有丝分裂器
同时有丝分裂器
开始组
开始组装:
 微管蛋白聚合
 中心体分离
 染色体俘获
 染色体排列
 以上过程
以上过程是在动力
是在动力蛋白和微管
蛋白和微管组
微管组装的共同作用下进行
同作用下进行
的。
 动力蛋白:
动力蛋白:
 (+)向运动的驱动蛋白相关蛋白
(+)向运动的驱动蛋白相关蛋白
 (-)向运动的动位蛋白
3. 染色体分离

 有丝分裂后期分为两个阶
期分为两个阶段

 后期 A:
:动粒微管缩
动粒微管缩短
微管缩短,拉动染色体朝
色体朝细胞的两
细胞的两

极运动

 后期 B:
:纺锺体伸
纺锺体伸长
体伸长,两极离得更远。
离得更远。

 这时期微管动
微管动力蛋白参
蛋白参与,极微管相互
相互滑
微管相互滑

动、延长,同时星体也能产
体也能产生拉动力。
4. 细胞分裂

 细胞质通过断裂的方式进行
细胞质通过断 的方式进行分裂。

 细胞分裂在有丝
细胞分裂在有丝分裂后期染色体分别到达细
染色体分别到达细
胞两极时已经
时已经开始。
胞两极时已

 在细胞中央的两个子代
在细胞中央的两个子代核之间,
核之间,微丝收缩开
微丝收缩开
成收缩环
收缩环,肌球蛋白作用下
蛋白作用下,微丝收缩
肌球蛋白作用下,微丝收缩,
收缩,使
细胞膜产生凹陷,
细胞膜产 形成与纺锺体轴相
凹陷,形成与纺锺体轴相垂直的
纺锺体轴相垂
分裂沟。
裂沟。

 分裂沟越
裂沟越陷越深,最后将细胞一分为二
将细胞一分为二。
第一节 G 蛋白与跨细胞

信息转导
 水溶性神经递质一般都不进入胞内,
性神经递质一般都不进入胞内,只与

胞膜上的受体结合,将信号传给受体便
胞膜上的受体结合,将信号传给受体便完

成了使命。
成了使命

 离子通道型受体接受传来
离子通道型受体接受传来的信号,
的信号,便直接

通过藏于自身分子内的效
通过藏 分子内的效应器,
应器,即离子通
自身分子内的效应器
道给出反应 。

 代谢调节型
代谢调节型受体必需
受体必需经一系列的转传过
经一系列的转传过程
必需经一系列的转传过程

将信号传入胞内,再传给离子通道或代谢
将信号传入胞内, 离子通道或代谢

型效应器分子
应器分子。
分子。
 受体将
受体将接受的信号跨
接受的信号跨膜转传给离
膜转传给离子通道或胞内
传给离子通道或胞内
的代谢型 分子的过程称信号 (跨
代谢型效应器分子的过程 跨膜) 转导

(signal transduction)。

G 蛋白的发现
 1958 年 Sutherland 发现,
发现,胰高血糖素
血糖素和

肾上腺素促使
促使肝细胞糖原
腺素促使肝细胞糖原分解作用都是通
过 cAMP 实现的。
现的。

cAMP 是激活 cAMP 依赖蛋白激


蛋白激酶
(cAMP-dependent protein kinase) 所
必需,由活化的 PAK 再激活磷酸
必需, 活磷酸酯酶
再激活磷酸酯

从而催化肝糖原的分解
的分解。

Sudhedand 于 1965 年便提出了


出了激素
年便提出了激素
作用的第二信使学说 (the second
作用的第二信使
第二信使学
messenger theory)。

 Rodbell 在脂肪
在脂肪细胞碎
细胞碎片制备的实验中发
现几种激素 (如 血糖素、Ad 和 ACTH
如胰高血糖素
等) 都通过 ACase 系统催
系统催化 ATP 生成
cAMP 这一共同的第二
这一共同的第二信使
第二信使。
信使。
 他还设想 ACase 应是膜中的独立
应是膜中的独立分子
独立分子,
分子,否则
难以想象几种不同受体都具有ACase
象几种不同受体都具有 活性,并
且在受体与 ACase 之间应存在一种被他
之间应存在一种被他称为
transducer (转
转传体) 的第三种分子
第三种分子,
种分子,可将受
体和 ACase 隅联起来。
隅联起来。

 于 1970 年他又发现
年他又发现,
又发现,在由激
在由激素、受体、
受体、
ACase 系统催化
系统催化 ATP 转化为 cAMP 的反应中
尚必需有 GTP 的参与。
尚必需有 的参与。实验又表明,GTP在
实验又表明, 在
反应中不被分解,又不与受体和 ACase 结
反应中不被分解
合。
 Gilman (1987) 成功地
成功地将这种与 GTP 结
合,又可将受体与 ACase 联系起来
系起来的转
导蛋白从
蛋白从膜制备中分离纯
中分离纯化了出来
化了出来,称
GTP 结合蛋白。
结合蛋白。

 这是首先被阐明的信号跨膜转
这是首 的信号跨膜转导途径。
阐明的信号跨膜转导途径。为
此 Sutherland 获得了
获得了 1971 年度以及
Gilman 和 Rodbell 获得了
获得了1994年
年度的诺

贝尔奖。
跨细胞膜信息传递机制的
3 个环节
 受体识别
 膜受体分 3 大类:
大类:

 化学门控离子通道

 与 G 蛋白耦联的受体(
蛋白耦联的受体(占较大比例)
占较大比例)

 本身具有效应酶活性的受体(
本身具有效应酶活性的受体(或连接酶的表面受

体)

 信号转导
信号转导

 细胞内效应。
细胞内效应
G 蛋白似 “时间开关”
 G 蛋白就
蛋白就象准确的
象准确的开关,控制着分子的
着分子的启
控制着分子的启
闭。
 是一种极其准确
其准确的 “时间
是一种极其准确的 时间开关”,
时间开 ,在它的作用下
准确决定着细胞一些生理代谢过程的 “开
准确决定着细胞一些生理代谢
细胞一些生理代谢过 开” 和
“关
关” 的时间,
的时间,

 这种机制极其广泛
这种机制极其广泛存在于
其广泛存在于生命活
存在于生命活动的
生命活动的生物
动的生物化学
生物化学
代谢反应过
代谢反应过程
反应过程中。

 G 蛋白耦联
蛋白耦联的受体所
的受体所引发的反应
耦联的受体所引发的反应要比
要比配基
反应要比配
控制的离子通道
的离子通道介导的反应慢得
控制的离子通道介 反应慢得多
慢得多,而且
多样化。
多样化。
 G 蛋白耦联
蛋白耦联的受体不
耦联的受体不仅
的受体不仅调节离
调节离子通道,
子通道,

 还参与细胞分化、
参与细胞分化、生长代谢、
生长代谢、基因表达等
因表达等方
达等方面
的调节。
的调节。
G 蛋白介导的信号转导系统
E:效应分子(如腺苷酸环化酶,也可以是离子通
道 );R:受体分子
一、G 蛋白的分类
 G 蛋白的种类已
蛋白的种类已多达 40 余种,大多数存
在于细胞膜上,由 α、β、γ 三个亚
在于细胞膜上, 三个亚单
位构成。
构成。
 两个亚单位的不同可以将 G 蛋白分为
βγ两个
βγ两个亚
Gs、
、Gi、
、Go、
、Gq、
、G? 及 Gt 等六类。
G 蛋白及其α亚基的分类及特

小 G 蛋白
 存在另一类 G 蛋白,
在细胞内还存在另
在细胞内还 蛋白,这类 G
酸的结合位点,有 GTP
蛋白具有鸟核苷酸的结合位
蛋白具
酶活性,其功能也受鸟核苷酸调节,
酶活性,其功能也受鸟 调节,但与
跨膜信息传递似乎没有直接关链
跨膜信息传递似乎没
乎没有直接关链。
有直接关链。
 在结构上不同于前述的 G 蛋白,
在结构上不同于前 分子量较
蛋白,分子量较
小,在 20~ ~30 kDa 之间,
之间,不是以 α、
β、γ 三聚体方式存在,
三聚体方式存在,而是单体分子,
而是单体分子,
因此被称为小 G 蛋白(
因此被称为小 蛋白(small G
proteins)。
)。
 如 ras 表达产物为一种小 G 蛋白。
表达产物为一种小 蛋白。小 G
蛋白同 ras 蛋白具 有同源性,同属于 ras
蛋白具有同源
超家族(ras superfamily)。
超家族( )。哺乳动物 G
)。哺
蛋白中属 ras 超家族约有
蛋白中属 超家族约有 50 多个成员
多个成员,
根据它们序列同
它们序列同源性相近程度又
根据它们序列同源 性相近程度又可以分为
程度又可以分为
Ras、
、Rho 和 Rab 三个主要的亚
三个主要的亚家族。家族。
分类
分类 (Classification)

 α、β和γ亚
GDP

单位
组成的异三聚 Gαα β
体 γ

 小分子 GDP
蛋白
G蛋白
G
二、G 蛋白的结构与功能
 G 蛋白全称为鸟
蛋白全称为鸟核苷酸调节蛋白
调节蛋白
(guannine nucleoside regulatory
proteins),

 目前发现至少存在 20 多种不同形式和功
发现至少存在
目前发现至少
能的 G 蛋白。
蛋白。
 G 蛋白一般存在于细胞膜上,
蛋白一般存在于细胞膜上,由 3 个不同
亚基形成的三聚体构成 (α
αβγ),
βγ ,总相对
分子质量在 1.0 × 105 左右。
左右。
 β亚基都非常 ×104 左右。
亚基都非常相似,分子量在 3.6× 左右。
 γ亚基分子量在 5.0×
×103 ~ 8.0×
×103左右。
左右。大
多数 G 蛋白中的γ
蛋白中的γ亚基都是一样的 (Gt 除外)。
除外 。
 βγ通
βγ通常紧密结
紧密结合,只有使蛋白质变性才
有使蛋白质变性才能使
之分开
之分开。
 各种 G 蛋白的差
蛋白的差别都在α
别都在α亚基。
亚基。有鸟苷酸结
苷酸结合
位点。
膜结合 G 蛋白异源
蛋白异源三聚体
异源三聚体
结构
1. α亚基有鸟
亚基有鸟苷酸结
苷酸结合位点
合位点。
2. 失活态时
失活态时 3 个亚基紧紧结
个亚基紧紧结合在一起
合在一起。α和γ亚基有
脂肪酸结构的 “尾
着脂肪酸结 尾”,连接到突触后膜内部的“小
,连接到突触后膜内部 小叶”
上 (leaflet),
,这样使 G 蛋白、
蛋白、受体和效
受体和效应分子保持
应分子保持在
同一个平
同一个平面中,
面中,同时也避
同时也避免其扩散进胞内的溶质中
其扩散进胞内的溶质中
(一)G 蛋白与受体的结合部

 细胞表面的受体通过与其相应配体作用后
细胞表面的受体通过与其相应 体作用后,
可经不同种类的 G 蛋白偶联
蛋白偶联,
偶联,分别发挥不
同的生物学效应。
同的生物学

 与 G 蛋白偶联
蛋白偶联的多种受体
的多种受体具有共同的结构
偶联的多种受体具
功能特点:
功能特点:
 分子量 40~
~50 kDa 左右,
左右,由 350 ~ 500 氨基酸
组组成,形成 7 个由疏水
组组成, 个由疏水氨基酸组成的
疏水氨基酸组成的α
氨基酸组成的α螺旋区
段,反复 7 次穿越细胞膜的脂质双层
细胞膜的脂质双层。肽链的 N
次穿越细胞膜的脂质双层。
在胞膜外,C 末端在细胞内
末端在胞膜外
末端在胞膜外, 在细胞内。N 末端上
末端在细胞内。 末端上常有
许多糖基修饰
多糖基修饰。
修饰。
 由 7 个跨膜区段间通过特定氨基酸残
个跨膜区段间通过特定氨基酸残基之
间的相互作用形成复杂的空间构象
间的相互作用形成复杂的空间构象。配体
结合于识别区域之后,即导致
结合于识别区域之后 即导致整个受体构
象的变化。
 受体肽链的 C 末端和连接第
受体肽 和连接第 5 和第 6 个跨
三个胞内环是 G 蛋白结合部
膜区段的第三个胞内环
膜区段的第
位。
 与 G 蛋白耦联
蛋白耦联的受体
的受体具有多种异
耦联的受体具有多种异构体。
构体。
同一类型的受体还
同一类型的受体还可分出不同的亚
可分出不同的亚型。这
种进化的最大优点就在于,
种进化的最大优 单一激动剂在
在于,单一激
不同细胞中可以激活不同的 G 蛋白,
不同细胞中可以激 蛋白,从而
引发不同的第二
发不同的第二信使
信使反应。
第二信使反应
反应。
 毒蕈碱型胆碱能 M1、
、M3 和 M5 受体直接作用
于两种 G 蛋白而活
蛋白而活化磷脂酶 C (PIE),

 毒蕈碱型胆碱能 M2、
、M4 受体则
受体则通过 Gi 抑制
腺苷酸环化酶(AC),
腺苷酸环化酶 ,激活钾通道
激活钾通道,
通道,然后进一步
然后进一步
通过其他 G 蛋白或影响其他
通过其他 蛋白或影响其他的反应
影响其他的反应。
的反应。
各类 G 蛋白与受体结合后效应
 Gs:
:细胞表面受体与 Gs( (stimulating
adenylate cyclase g protein, Gs)
)偶联
激活腺苷酸
腺苷酸环化酶, 化酶,产生 cAMP 第二信 第二信
使,继而激活 cAMP 依赖的蛋白激 的蛋白激酶。
 Gi:
:细胞表面受体同 Gi( (inhibitory
adenylate cyclase g protein,Gi)
)偶联则
偶联则
产生与 Gs 相反的生物学 的生物学效应。
 Gt:可以激活 cGMP 磷酸二酯
:可以激 磷酸二酯酶
二酯酶,同视觉
有关。
有关。
 Go:可以产生百日咳杆菌毒不
:可以产 百日咳杆菌毒不导致的一系
列效应。
列效应
 Gq:
:同 PLC 偶联,
偶联,在磷脂酰
在磷脂酰肌醇代谢途
代谢途
信号传递过程
径信号传递过 中发挥重要作用。
程中发挥重要作用。
 小 G 蛋白:有着广泛的调节功能
蛋白:有着广泛的调节
调节功能。
功能。
小 G 蛋白的作用

 Ras 蛋白主要参
蛋白主要参与细胞增
与细胞增殖和信号转导
和信号转导;
 Rho 蛋白对
蛋白对细胞骨架网
细胞骨架网络的构成发挥调节
的构成发挥调节
作用;
作用;
 Rab 蛋白则参
蛋白则参与
则参与调控细胞内膜
细胞内膜交通
调控细胞内膜交
(membrane traffic)。
)。
 此外,Rho 和 Rab 亚家族可能分别
此外, 可能分别参与
家族可能分别参
细胞极化(polarization)
淋巴细胞极化
淋巴细胞极化( )和抗原的
抗原的
提呈。
(二)βγ亚基的功能
βγ亚基的功能

 G 蛋白的β
蛋白的β和γ亚基通常紧
基通常紧密结合,在非失
结合,在非失
活条件下
条件下难以将二
以将二者分开。
 推测至少应存在 20 种不同的 βγ二
理论上推测至少应 βγ二
聚体。
聚体。
 βγ亚
βγ亚基的一个功能是将α
基的一个功能是将α亚基固定在细胞
膜上,增加了局部α亚基的浓度
膜上, 基的浓度,
浓度,以此促进
受体与α亚基的耦联
受体与α 基的耦联。
耦联。
 βγ的 一个功能是催化 GTP/GDP 的交
βγ的另一个功能是催
换。实验表明没有βγ亚
βγ亚基的存在,受体便
基的存在,受体便
不能催化 GTP 和 GDP 的交换。
不能催 交换。
 βγ不
βγ不但促进受体对
促进受体对α亚基的激
基的激活,而且

能够抑制
够抑制α亚基的活化。
基的活化。
 当 G 蛋白的α
蛋白的α亚基被激活
亚基被激活后
激活后,它与 βγ 的亲

降低,G 蛋白被分解
和力降低, 蛋白被分解成为游离
成为游离的
游离的α和 βγ

亚基。
亚基。

 βγ亚基能异构抑制
βγ亚基能异构抑制 GTP 的结合以及结
合以及结合后的

反之,GDP 和βγ亚基都能
活化;反之, βγ亚基都能彼此增加
亚基都能彼此增加双
彼此增加双

方与α亚基的亲和力
亚基的亲和力。这样,
这样,βγ既
βγ既能通过稳
能通过稳
定地与 GDP 的结合又可通过抑制与 GTP 的结

合来抑制 G 蛋白的活
蛋白的活化。

 无激动
无激动剂作用受体的情况
作用受体的情况下
情况下,βγ 亚基能够稳
亚基能够稳

定地与 GDP 结合,使非活


使非活性状态的 G 蛋白处
蛋白处

于一个较低活
于一个较低活性的基础水平
性的基础水平。
础水平。
三、G 蛋白激活的机理

 G 蛋白在信号传递过程
蛋白在信号传递过程中的基本
中的基本作用是
 连接受体和效
连接受体和效应器,

 放大受体的反应,
大受体的反应,

 影响信号的时
影响信号的时程
信号的时程和反应强
和反应强度
 对信号进行分类处理 (并
信号进行分类处理 并通过将
通过将受体与其
受体与其相应的
效应器耦联的作用
器耦联的作用)
的作用
G 蛋白的两种构象
 与 GTP 结合时 活状态,与 GDP 结合
结合时呈激活状态
时呈失活状态
活状态,这两种状态
这两种状态的相互转换就
的相互转换就
构成了GTP
构成了 酶循环。循环中
 将 GDP 交换成 GTP 后就激活了 G 蛋白,
蛋白,但激活的
过程是相当短暂的,因为 G 蛋白是一种 GTP 酶,它
过程是相当短暂的,
使结合的 GTP 水解为 GDP。

 在没有激动剂作用时,GDP/GTP 的交换是全部循环
在没有激动剂作用时,
中最慢的步骤。Gs蛋白的
中最慢的步骤。 蛋白的 3 个亚基正常时呈聚合状
态,α 亚基与 GDP 结合(Gαβγ ,与 GDP
结合 αβγ·GDP),
αβγ
结合的非活化状态的 G 蛋白占绝大多数,
蛋白占绝大多数,大约为
99%,
,这时的 G 蛋白与受体呈低亲和力状态。
蛋白与受体呈低亲和力状态。
 当受体与激动剂结合时,加快了 GTP/GDP 的交换
当受体与激动剂结合时,
速率,因而增加了结合 GTP 的活性 G 蛋白的数量。
速率, 蛋白的数量。
在受体受到较强刺激的情况下。
在受体受到较强刺激的情况下。有大约60%
有大约 的G蛋
白可保持在活性状态。
白可保持在活性状态。
G蛋白活性的
蛋白活性的
调节 GDP
受体

α

β
γ
GDP GTP

GTP
α
Gα α

β
γ
α
效应蛋白Gα
β
γ

效应蛋白β
γ
蛋白激活: 与Gα
蛋白激活 GTP与
◆ G蛋白激活 α
相结合
蛋白失活: 酶水
蛋白失活 GTP酶水
◆ G蛋白失活
GTP
G 蛋白激活与失活态的循环
 G 蛋白的 GTP 酶活性就
酶活性就像一只分子定时
一只分子定时
钟,限定了活性态
定了活性态的时程,经离体测定,
时程,经离体测
GTP 的催化作用较 结合型的 GTP 分
化作用较慢,结合型
子的寿命约为 3~
子的寿 ~15s。

 很迅速地刺激 GTP/GDP 的交
由于受体能很迅速地刺
由于受体能很迅速地
换,这表明每
这表明每个结合
个结合激动剂的受体能催
明每个结合激 的受体能催化
激活多个 G 蛋白分子。
蛋白分子。
 即,全部受体中可能
全部受体中可能只需要部
受体中可能只需要部分受体与
只需要部分受体与激
分受体与激动剂
结合,就可以达到对效
可以达到对效应蛋白的最大
对效应蛋白的最大激活
应蛋白的最大激活作
激活作
而存在着 “空余
用,因而存在着 受体 (spare
空余受体
空余受体”
receptor)。

 与 G 蛋白耦联
蛋白耦联的受体
的受体具有惊人的
耦联的受体具 惊人的放大能
力。
 在蛙的视网膜上,
网膜上,通过一个光
通过一个光子作用的单个漂
子作用的单个漂
白的视紫
白的视紫红质分子
视紫红质分子, 激活大约 37 000 个
红质分子,可以激活
可以激活大
G 蛋白分子。
蛋白分子。
G 蛋白对其他分子活动的 “开”、“关

 这种 “开
开”、
、“关
关”调节
调节主要是通过将 GTP
调节主要是通过将
水解成 GDP 来实现的
来实现的。
现的。
 当 G 蛋白处 失活或 “关
蛋白处于失活或 关” 的状态时,
的状态时,G 蛋白
和 GDP 紧密结合在一起.这时 GDP 释放的
紧密结合在一起 释放的速
率常数少于 0.03 min-1。当 GDP 被释放的时
率常数少于 释放的时
候,G 蛋白进入了一个瞬时 “空
蛋白进入了一个瞬 空”的或
的或 “中性
中性”
中性
状态.
状态
 这时胞质中存在一个较高的 GTP/GDP 浓度
比,因而 GTP 与 G 蛋白结
蛋白结合。
 GTP 的结合引起了
合引起了 G 蛋白构型的变化,
蛋白构型的变化,因而转
变成 “开
开” 或激活态
激活态 (通
通常用G*来表示
来表示).
来表示 这种开
这种开
的状态能够
的状态能够进一步激活
进一步激活细胞内
步激活细胞内其他
细胞内其他的
其他的生物化学
生物化学
反应,
反应,
 催化 GTP 水解成
水解成 GDP + Pi,
,因而使它又回
而使它又回到
初始状态
初始状态。
状态。
受体分子与 G 蛋白分子的功能共轭偶联
四、与 G 蛋白耦联受体的
信号传递
 与 G 蛋白耦联的信号传递系统主要包括 3
蛋白耦联的信号传递系统主要
耦联的信号传递系统主要包括
大部分:
大部分:
 受体
 G 蛋白
 效应器
 G 蛋白的基本
蛋白的基本作用是连接受体与效
作用是连接受体与效应器,并激活效
应器。
 前所知与 G 蛋白耦联
目前所知与 蛋白耦联的受体和
耦联的受体和效
的受体和效应器的种类相
当多,通过 G 蛋白的耦联
当多, 蛋白的耦联形成
耦联形成了
形成了一个庞
一个庞大的信号
体系。不同的受体可以和不同的 G 蛋白相耦联
蛋白相耦联,
耦联,
而不同的 G 蛋白又可以激活
蛋白又可以激活不同的
激活不同的效
不同的效应器。
 不同受体的信息可以会聚到少数
不同受体的信息可以会 到少数的几个效
的几个效应分
子上
 一个受体可以激活两
一个受体可以激活两个或
激活两个或两个以上的调节通路
个或两个以上的调节通路
可以辐散使其得到
时,信息则可以
息则可以辐 其得到放大
 通过信号系统的这种酶的级联反应,
通过信号系统的这种酶的
系统的这种酶的级 反应,我们可以
想象发生
象发生在机体中的各种生物
在机体中的各种生物化学反应和信号
生物化学反应和信号
传递过 是如何复杂。
传递过程是如何
(一)信号通过肾上腺素能受
体的转导

 分子克隆分
克隆分析肾上
分子克隆 腺素β2 受体 (β
析肾上腺素β β2 -AR)是

由 418 个氨基酸组成的蛋白质。
个氨基酸组成的蛋白质。
 疏水跨膜序列分析表明,7 次疏水跨膜结
疏水跨膜序列分析
因而也具有 7 TM 跨膜螺旋结构。
构,因而也具 跨膜螺旋结构。
 儿茶酚胺 深深插入 7 次跨膜结构
儿茶酚胺配基可以深深
基可以深深插入
来自第 2、
中,并与来自第 、4、
、5 和 6 螺旋域的氨
基酸侧链发生反应。
基酸侧链发生反应
反应。
去甲肾上
甲肾上腺素与受体作用
腺素与受体作用

耦联机理
耦联机理
c:
:腺苷酸环化酶;
腺苷酸环化酶;

cAMP:
:环化腺苷酸;
环化腺苷酸;

NE:
:去甲肾上腺素。
上腺素。

R,G,C 蛋白的激活
蛋白的激活形
激活形式分别用带
分别用带

点的图表示
 没有 NE 信号存在时
信号存在时,膜中 3 种蛋白β
种蛋白β2 -
AR、
、G 蛋白和腺苷
腺苷酸环化酶 (c) 都在膜中呈
蛋白和腺苷酸
游离状态
离状态。
 它们能够来回
够来回滑动有时并
它们能够来回滑 互相碰撞,
动有时并互相碰撞 然而它们却
碰撞,然而它们却
不会粘合在一起
粘合在一起。

 NE 和β2-AR发生作用
发生作用时,使β2-AR 的构型
发生作用时 的构型
发生改变,
发生改
 增加了受体与
增加了受体与 G 蛋白β
蛋白β和γ亚基之间的粘性。
亚基之间的粘性。
 G 蛋白形态发生
蛋白形态发生变化,
变化,导致α亚基游离并释放
亚基游离并释放
GDP,
,实现 GDP/GTP 的交换。
交换。
 与此同时,
同时,α亚基也发生
亚基也发生构型的变化,
构型的变化,导致它与
腺苷酸环化酶的粘合力增加并激活
腺苷酸环化酶的粘合力增加并激活后者
力增加并激活后者。
后者。
 α亚基同时将结
将结合的 GTP 脱磷酸变成 GDP,
亚基同时将结合的 ,与
腺苷酸环化酶脱离并恢
腺苷酸环化酶脱离并恢复到原来
复到原来的构型
原来的构型。
的构型。
 当它与βγ复合物相遇时,再一次形成无活
当它与βγ复合
βγ复合物 形成无活性的
无活性的
G 蛋白αβγ
蛋白αβγ复合
αβγ复合物
复合物。
α2受体
受体
β受体 M受体
受体

Gs Gi
+ -

腺苷酸环化酶

cAMP

PKA
靶蛋白 靶基
磷酸化 因

Adenylyl cyclase signal 录
transduction pathway
 cAMP 可激活蛋白激
活蛋白激酶 A (PKA),

 PKA 可以使细胞蛋白质中的丝
可以使细胞蛋白质中的丝氨酸和苏
氨酸和苏氨
酸残基上的羟
基上的羟基磷酸化, 而这些残基很可
基磷酸化,而这些残
能是通道的组成部分,
能是通道的组成部分,它们参它们参与 K+ 和
Ca2+ 的流动的调控
的流动的调控。
调控。
 PKA 还能使β
能使β-AR 本身脱敏
本身脱敏。这是由于受
体 C 端的丝氨酸和苏
氨酸和苏氨酸磷酸化产
氨酸磷酸化产生的。
生的。
 还存在另
存在另一种激
一种激酶,β肾上腺素受体 受体激酶
腺素受体激

β-adrenergic receptor kinase,
,β-
ARK),
,也能使 C 端的苏氨酸和丝 氨酸和丝氨酸残 氨酸残
基磷酸化。在这两种情况中
基磷酸化。在这两种情况情况中,都可能存在
一种β 因子 β-arrestin),
一种β阻抑因子
阻抑因子(β ,它能与受
体结合并防止受体与 G 蛋白的进一步
体结合并防止受体与 蛋白的进一步作
用。
 最后,
最后,如果受体较长时间暴露于激
受体较长时间暴露于激动剂中时,
中时,
通过膜的凹入使整个受体随
通过膜的凹入使整个受体随同凹入的膜一同被
移走。
(二)信号通过促代谢型受体
的传递
 谷氨酸能受体 (glutamate receptors,

GluRs) 能够控制离子通道 促离子型受


离子通道 促离子型
控制离子通道----促离子

体。

 近期人们又发现还
近期人 发现还存在另
存在另一种类型
一种类型的谷氨
酸受体,即与 G蛋白
酸受体, 耦联的促代谢型谷
蛋白耦联的
蛋白耦联 代谢型谷氨
型谷氨

酸能受体 (mGluRs)。

 1991 第一个被克隆
克隆的 mGluR 是从非洲蟾蜍卵
一个被克隆的 是从非洲蟾蜍卵

母细胞中获得
细胞中获得的
获得的,这是因为它不具有与其他 7
这是因为它不具有与其他

TM受体相类
受体相类似
受体相类似的序列
的序列。

 目前已有六种 mGluR 被发现。


被发现。
mGluRs 蛋白
 所有 mGluRs 都是大的蛋白质 (854~

1179 氨基酸),
氨基酸 ,7 个疏水跨膜片段形成了与
G 蛋白耦联
耦联的典型 7 TM 结构。
蛋白耦联的 结构。
 N 端在细胞外,
在细胞外,C 端在胞浆
在胞浆,并有一些脱
有一些脱
敏和磷酸化位
和磷酸化位点。
 M5 和 M6 之间的胞浆环很短,在 mGluR
之间的胞浆环很短
家族中
家族中具有高度保守
高度保守性,推测这个区域
这个区域对
推测这个区域对
与 G 蛋白 的耦联起着关
起着关键作用。
耦联起着关键 作用。
 它的三级结构与其他 7 TM 受体相似,
它的三级 受体相似,但
在氨基酸序列和总的构型
在氨基酸序列和总的构型方面却
方面却存在着较
存在着较
大的差别,这表明 mGluR 在进化上可能
大的差别,这表明
是独立的
独立的。
谷氨酸能受体
柱状结构示 7 次跨膜 旋能结构, Y 和 P 分别表示
次跨膜螺旋能结 分别表示糖
表示糖
基化和磷酸化位点。G:
基化和磷酸化位点 :G蛋白
蛋白
五、G 蛋白对效应蛋白的
调节
 目前已经确认的 G 蛋白的调节
目前已经 蛋白的调节效
调节效应物大约
物大约
有 10 种,可以相信,一些新的 G 蛋白--效
可以相信,一些新 蛋白 效
应物耦联的类
的类型将会不断
耦联的类型将会不断被发现。
被发现。
 各种效应蛋白间的差异
各种效应蛋白间的差异非常大,它们包括
非常大,它们包括
 合成或降解第二
合成或降解第二信使的酶
解第二信使的酶
 电压依赖性的离
电压依赖性的离子通道

 膜的转运蛋白。
膜的转运蛋白。
(一)对腺苷酸环化酶的调节
 腺苷酸环化酶 (adenylvl cyclase,
腺苷酸 ,AC)
磷酸腺苷 (cAMP) 的
是细胞内制造产生环磷酸腺苷
是细胞内制
酶。
 一些激素和 调节细胞膜上 AC
激素和介质是通过调节
一些激素 质是通过调节细胞膜上
的活性来产生效
的活性来产生效应的。几乎在
来产生效应 几乎在每一种动物
细胞中都能发现 AC,

 它大约由 1100 个氨基酸残
它大约 个氨基酸残基组成,
基组成,是相
分子质量为 ×105 的膜整合蛋白,
对分子质量为1.5× 的膜整合蛋白,
 由两条 6 次跨膜肽
由两条 跨膜肽链和很
链和很长的胞内域连接
形成。
形成。
 AC 催化 ATP 生成 3',5'-环腺苷酸
环腺苷酸,AC 作用的
环腺苷酸,
底物和产物均
产物均为水溶性的。
溶性的。
腺苷酸环化酶
平面图示 12 次跨膜段和极长的胞内 N 端域
 存在两种 G 蛋白与受体和腺苷
蛋白与受体和腺苷酸
腺苷酸环化酶相

耦联。
耦联。
 激活腺苷酸环化酶的受体
腺苷酸环化酶的受体:通过 Gs 与之耦联
激活腺苷酸环化酶的受体: 与之耦联
 受体与激动剂结合后,通过 Gs 激活 AC,
受体与激动剂结合后, ,形成
AC·Gs·GAP 复合物。
复合物。

 抑制腺苷酸环化酶的受体:
抑制腺苷酸环化酶的受体:通过 Gi 与之耦联
与之耦联
 Gi 激活后,
激活后,随 Giα
α的解离,
的解离,释放βγ
释放βγ亚基
βγ亚基,
亚基,
AC与活化的
与活化的 Gsα结合,从而降低来自 Gs 的作
α结合,

用。

 由于 Gi 的含量大大高于 Gs,
,因而 Gi 释放出的
βγ亚基可显著中和 Gsα
βγ亚基可显著中和 α的作用,
的作用,结果通过
Giα βγ的共同作用使 AC 活性降低。
α和βγ的共同作用使 活性降低。
Gs 和 Gi 对腺苷酸环化酶的调节
(二)对磷酸二酯酶的调节
 事实表明,G 蛋白可以调节磷酯酶
事实表明,
C (phospholipase C,
,PLC) 的活
性。
 PLC 进而影响 1,4,5-三磷酸肌醇
三磷酸肌醇
(IP3) 和二酰基甘油 (DG) 等第二信
使。
 膜上的磷酯酰
膜上的磷酯酰肌
酯酰肌醇二磷酸(PIP2
磷酸 )是
是很多
第二信使的
信使的前体,可被水解产
第二信使的前 可被水解产生两个重
解产生两个重
要的第二信使
要的第二
第二信使:
信使:
 三磷酸肌醇 (IP3)
 IP3 激活内质网上的钙通道,
激活内质网上的钙通道,将钙从内质网
释放入胞液中
 二酰基甘油
酰基甘油 (DG)
 DG 激活蛋白激酶 C (PKC)。

 有两类不同的 G 蛋白通过不同的途径
蛋白通过不同的途径调节
途径调节
PLC。

 如 M2、
、M4 毒蕈碱型胆碱受体是能对
碱型胆碱受体是能对 PT(百日
百日
毒素 敏感的 G 蛋白 (可能为
咳毒素)敏 可能为 Gi )起
起作用的。
作用的。

 M1、
、M3 毒蕈碱型胆碱受体、
碱型胆碱受体、α1肾
肾上腺素受体
是对 PT 不敏感的G 蛋白 (Gp) 起作用。
作用。最近已
认有两种不同的 Gp,
确认有两 ,他们是不同的基因产
们是不同的基因产
物。
(三)对不依赖于第二信使的离子
通道的调节

 一般,G 蛋白的功能都涉
一般, 蛋白的功能都涉及酶活性的变
及酶活性的变化,
这种变化导致了细胞内信息分子的变
这种变 了细胞内信息分子的变化,从
而调节细胞功能
调节细胞功能。
细胞功能。

 最近研究表
研究表明,细胞膜上的钾
最近研究 细胞膜上的钾通道和钙
通道和钙通道
等一些离子通道也受激素或递质的
等一些离子通道也受激素或递质的调节,
激素或递质的调节
调节,这
表明细胞膜电位
细胞膜电位及细胞膜离子通透
及细胞膜离子通透性的变
性的变
化,能够受多种方式的调节
受多种方式的调节,
调节,很可能也包括
可能也包括
了G 蛋白的调节
蛋白的调节。
调节。
 心脏节律细胞, 神经释放 Ach 后,激
细胞,迷走神经
迷走神经释放
活这两种细胞膜上的 M 受体,
受体,导致钾通道
致钾通道
开放,形成细胞膜的超
形成细胞膜的超极化状态
极化状态,从而使
细胞的节律性去极化减慢
细胞的节 极化减慢。
减慢。
 发现,给 Ach 后,膜电流的变
很早就发现, 膜电流的变化并
非立即发生
立即发生。
发生。
 现认为, 主要是在胆碱能 M 受体与钾
现认为,这主要是在胆碱能 受体与钾通道之
间存在着 G 蛋白的介
间存在着 蛋白的介导。
 Gi 的α亚基可以直接激活膜上的钾通道
 Gi 的 β、γ 亚基则无明显的作用
 牛脑中提取的 Gi 蛋白的α
蛋白的α亚基不能激活钾通
道,但 β、γ 亚基却能激活钾通道。
亚基却能激活钾通道。
 这些事实均表明 G 蛋白参与钾通道的调节是可
能的。
能的。
 G 蛋白对
蛋白对钙通道的调节
通道的调节可能有两种方式
调节可能有两种方式:
可能有两种方式:
 一种与上述 通道的调节类似,即 G 蛋白与钙
一种与上述钾通道的调节类似

通道耦联
通道耦联发挥直接的调节作用
耦联发挥直接的调节作用;
发挥直接的调节作用;

 另一种方式
另一种方式为间接调节
方式为间接调节。
为间接调节。
 例如儿茶酚胺能激活β受体,通过 Gs 使 AC 活
例如儿茶酚胺能激活β受体,

性提高,产生大量的 cAMP,
性提高, ,提高了蛋白激酶 A

的活性。
的活性。

 钙通道恰是这些蛋白激酶的底物之一。
钙通道恰是这些蛋白激酶的底物之一。
 蛋白激酶 A 使钙通道磷酸化,
使钙通道磷酸化,改变其活性,
改变其活性,达到

其间接调控离子通道的作用。
其间接调控离子通道的作用。
第二节 第二信使系统
 具有信息传递功能的分子统称为信使物
在细胞生物学及生理学
质。在细胞生物学及生理学中
理学中,一些细胞
外的信使物质,如激素、
外的信使物质, 激素、神经递质等被称
为第一信使。
一信使。
 第一信使分子分为亲脂性和亲水
一信使分子分为亲脂性和亲水性两类。
 亲脂性小分子:
亲脂性小分子:类固醇类激素、
类固醇类激素、甲状腺激素。
甲状腺激素。
 穿过质膜进入细胞,
穿过质膜进入细胞,与细胞质或细胞核中的受体
结合形成受体复合物。此复合物与 DNA 特定控
结合形成受体复合物。
制区结合,
制区结合,改变基因的表达,
改变基因的表达,来特异性影响机体
组织的生长和分化。
组织的生长和分化。

 亲水性信号分子:
亲水性信号分子:神经递质、
神经递质、生长因子、
生长因子、细胞因
子和大多数激素类物质等。
子和大多数激素类物质等。
 与细胞表面上受体结合,
与细胞表面上受体结合,引起细胞内新的信号物
质的产生,称为第二信使。如 cAMP/cGMP 核苷
质的产生,称为第二信使。
酸类、膜肌醇磷脂代谢产物(DG)、
酸类、膜肌醇磷脂代谢产物( )、花生四烯酸
)、花生四烯酸
的代谢产物等。
的代谢产物等。
主要信号通路
 主要信号通路涉及到一些重要的
主要信号通路涉及到一些重要的第二信
路涉及到一些重要的第二
第二信
这些信使主要分为以下几类:
使。这些信使主要分为以下几
 环核苷酸类,
环核苷酸类,cAMP,
,cGMP

 肌醇磷脂的代谢产物
肌醇磷脂的代谢产物 IP3、DG

 Ca2+

 花生四烯酸
四烯酸代谢产物 AA。

一、环核苷酸系统
 环核苷酸作为第二
酸作为第二信使的
信使的标准如下
第二信使的标准
标准如下:
如下:
 激素作用于完整细胞时,
素作用于完整细胞时,cAMP 的含量增加
的含量增加;
增加;
 激素效应发生
应发生在 cAMP 浓度升高以后;
高以后;
 存在催
存在催化合成 cAMP/cGMP的特异酶类
的特异酶类;
的特异酶类;
 存在核苷酸的特异分解
存在核苷酸的特异分解途径;
途径;
 一些外源 水解类 cAMP 能模拟激
一些外源性非水解
性非水解类 模拟激素的作
用;
 磷酸二
磷酸二酯酶抑制剂加强激
酶抑制剂加强激素的作用
剂加强激素的作用;
素的作用;
 除 cGMP 调节 Na+ 电流外,
电流外,所有已知的环核苷
酸的作用都通过激活
酸的作用都通过激活环核苷酸依赖的蛋白
激活环核苷酸依赖的蛋白激
环核苷酸依赖的蛋白激酶
来实现
来实现。
(一) cAMP 系统
1. cAMP 第二信使系统的基本构成
 参与 cAMP 合成调节
调节有 3 种独立的生化组
合成调节有 独立的生化组
分:
 配基作用的受体 R

 作为与受体和效 耦联的 G 蛋白
作为与受体和效应物中介耦联的

 腺苷酸环化酶催
腺苷酸环化酶催化亚基 C
受体
 此类受体都有与 G 蛋白耦联
蛋白耦联受体的共同结
耦联受体的共同结
构,
 7 次跨膜 的同源结构,具有与配
次跨膜α螺旋疏水区的同
疏水区的同源 具有与配
基结合位点
合位点。
 细胞膜上的受体都与腺苷酸环化酶 (AC) 系统
耦联。
耦联。
 两种类型的受体,
两种类型的受体,
 Rs 型
 通过 Gs 刺激腺苷酸环化酶的活性,
刺激腺苷酸环化酶的活性,提高胞内
cAMP 的水平。
的水平。
 有几十种 Rs。。属于这类受体的有肾上腺素β
属于这类受体的有肾上腺素β受
体、垂体后叶加压素受体、
垂体后叶加压素受体、胰高血糖素受体、
胰高血糖素受体、促
黄体生成素受体、
黄体生成素受体、促卵泡激素受体、
促卵泡激素受体、促甲状腺激
素受体、
素受体、促肾上腺皮质激素受体等。
促肾上腺皮质激素受体等。
 Ri 型
 通过 Gi 抑制腺苷酸环化酶的活性,
抑制腺苷酸环化酶的活性,从而抑制
cAMP 的生成,
的生成,降低了胞内 cAMP 的水平。
的水平。
 存在几十种 Rs 受体。
受体。属于这类受体的有:
属于这类受体的有:肾上
腺素α2 型受体、
腺素α 阿片肽能受体、胆碱能 M 受
型受体、阿片肽能受体、
体和生长激素释放抑制因子受体等。
体和生长激素释放抑制因子受体等。在一个特定
的细胞中,
的细胞中,可以有任何类型的上述受体存在。
可以有任何类型的上述受体存在。
腺苷酸环化酶 (AC) 催化亚基
 AC 是一种跨膜糖蛋白,有多种亚型,主
是一种跨膜糖蛋白,有多种亚
要有两种:
要有两种:
 一种于脑 ×105,
一种于脑组织,相对分子质量为 1.25×
可为 Ca2+/CaM 所激活;
所激活;
 一种于心 是外周组织 AC 的主要形
一种于心脏,是外周 主要形式,相
×105,其活性由
对分子质量为1.50×
分子质量为 其活性由 Gs 介导。
 AC 主要位于质膜的内侧,
主要位于质膜的内侧,催化亚基 C 与 Gs 形
成复合物,催化底物 Mg2+-ATP 生成 cAMP。
成复合物, 。
 配基与受体结合------受体构象改变并在膜上位移
配基与受体结合 受体构象改变并在膜上位移
受体在膜脂的环境里与 G 蛋白 (Gs)
和聚集-----受体在膜脂的环境里与
和聚集
结合 发生 GTP/GDT 的交换-----
结合------发生 的交换 Gs 活化----
活化
-形成
形成 Gs-GTP 复合物-----激活
复合物 激活 AC-----催化
催化
Mg2+- ATP 生成cAMP。
生成 。
2. 细胞内 cAMP 浓度的调节
 胞内 cAMP 的浓度取决于合成酶腺苷酸环化酶
(AC) 和降解酶磷酸二酯酶 (PDE) 二者之间的平
和降解酶磷酸二 者之间的平
衡。
 磷酸二酯酶 (PDE)
磷酸二 )

 PDE 催化 cAMP 水解。


水解。
 PDE 的作用发生在第二信使的效应开始后,
的作用发生在第二信使的效应开始后,PDE 水
解 cAMP 为 5-AMP。

 当受体与配基作用后,胞内 Ca2+ 浓度升高,
当受体与配基作用后, 浓度升高,激活了
Ca2+/钙调素依赖的
钙调素依赖的 PDE。

 可溶性 PDE 有 4 种主要类型:
种主要类型:
 钙调素依赖的 PDE

 被 cGMP 激活的 PDE

 被 cGMP 抑制的 PDE

 特异水解 cGMP 的 PDE


 腺苷酸
腺苷酸环化酶是质膜蛋白,
化酶是质膜蛋白,环核苷酸磷酸

二酯酶是胞液蛋白
二酯酶是胞液蛋白。
酶是胞液蛋白。

 两种酶的活力都受到调节
两种酶的活力都受到调节。
调节。
 如 AC 受 Gs 和 Gi 的调节

 磷酸二
磷酸二酯酶受 Ca2+ 的调节。
的调节。
3. 细胞内 cAMP 的信使效应

 细胞内的绝大多数生理
细胞内的绝大多数生理功能是通过蛋白激
功能是通过蛋白激酶
A (adenosine protein kinase,
,PKA) 实现
的。
 上皮外,已知真核细胞中 cAMP 调
除在嗅上皮外,
的效应物是 PKA。
节的效应 。
 嗅上皮细胞内的 cAMP 直接调节离
直接调节离子通道。
子通道。
蛋白激酶 (PKA)

 PKA 为一四
为一四聚体,
聚体,
 两个调节亚基 (R), ×104
,相对分子质量为 5.0×

 两个催化亚基 (c) 组成,


组成,相对分子质量为
×104
4.2×

 全酶 (R2C2) 时无活性。
活性。

 cAMP 与调节亚基
调节亚基 R 结合后
结合后,释放出
释放出游离
的催化亚基 C,
,并促使靶蛋白磷酸化
促使靶蛋白磷酸化,
磷酸化,进
而产生多种生理
生多种生理、生化效应
生化效应
 释放的 PKA 的催化亚基可进入核中磷
被释放的
酸化一种 CREB蛋白
蛋白,CREB 可作为基因
蛋白,
调节蛋白
蛋白来影响靶基因的表达。
调节蛋白来 靶基因的表达。
cAMP 对离子通道的调节
离子通道的调节
cAMP与一个大的四聚体一蛋白激酶
与一个大的四聚体一蛋白激酶 A (PKA) 作用。
作用。
PKA 由两个调节亚基 (R) 和两个催化亚基 (C) 组成。
组成。每个
调节亚基有两个 cAMP 结合位点。
结合位点。当调节亚基与两个
cAMP 结合后,催化亚基与之解离,通过 ATP 作为能量和
结合后,催化亚基与之解离,
磷酸根来源,
磷酸根来源,催化通道蛋白侧链上的特异氨基酸磷酸化,
催化通道蛋白侧链上的特异氨基酸磷酸化,结
果改变了通道的构型。
果改变了通道的构型。
 酶的作用是把 ATP 上的磷酸催
蛋白激酶的作用是把
蛋白激 上的磷酸催化转
移到蛋白质分子的特异
到蛋白质分子的特异丝氨酸、
氨酸、苏氨酸或酪
氨酸或酪
氨酸残
氨酸 基上。
残基上 由于磷酸根
。由于磷酸 大量负
根带大量负电荷,它
与蛋白质结合,就改变了蛋白质多肽
与蛋白质结合, 了蛋白质多肽链的折
链的折
叠,从而改变了它的功能。
了它的功能。
 利用改变蛋白质构象
蛋白质构象的机制,
机制,就可调节受
调节受
体、离子通道、
离子通道、酶及结构蛋白的功能。
酶及结构蛋白的功能。
 PKA 有两种类型
有两种类型 (Ⅰ
Ⅰ型和Ⅱ型)。

 Ⅰ型主要与促进细胞的
与促进细胞的增殖有关,
主要与促进细胞的增 有关,Ⅰ型酶的调

节亚基 RⅠ
Ⅰ有两种(RⅠ
Ⅰα和 RⅠ
Ⅰβ),

 Ⅱ型主要与抑制
与抑制增殖和促进分化有关。
主要与抑制增 和促进分化有关。 Ⅱ型酶

的调节亚基也有两种 (RⅡ
的调节亚基也有两 Ⅱα和 RⅡ
Ⅱβ),

 但催化亚基仅有一种功能形式。RⅠ
化亚基仅有一种功能形式 Ⅰ和 RⅡ
Ⅱ与

cAMP 的亲和力
的亲和力以及与催
以及与催化亚基结
化亚基结合的亲和力
合的亲和力

差别很小。
(二)cGMP 系统
 哺乳动物组织里普遍
乳动物组织里普遍存在
存在鸟苷酸环化酶
织里普遍存在鸟
(guanylyl cyclase,
,GC),
,催化 GTP 生
成 cGMP。

 有两种鸟苷酸环化酶,
有两种鸟 化酶,
 胞液中的可溶性酶;
胞液中的可溶性酶;

 结合于质膜上的酶,
合于质膜上的酶,

 两种酶均含有催
两种酶均含有催化域,其顺序与腺苷酸
腺苷酸环
化域,其顺序与腺苷
化酶的催化域相似。
化酶的催化域相似。具同源性。
两种类型的鸟苷酸环化酶
1. cGMP 浓度的调节

 cGMP 受鸟苷酸环化酶和 cGMP 磷酸二酯


磷酸二酯
调节。
酶的调节。
 钙调素存在的情况
情况下,Ca2+可激活 cGMP 磷酸二
钙调素存在的情况下 磷酸二
酯酶,因此增加 cGMP 的水解。
水解。
 cGMP 发挥效应
发挥效应是通过 cGMP 依赖的蛋白
激酶 (PKG) 参与的蛋白磷酸化作用。
与的蛋白磷酸化作用。
 PKG 的调节亚基与催
的调节亚基与催化亚基是在同一个分子上,
化亚基是在同一个分子上,
分子质量约为7.6×
相对分子质量约 ×104,在其 N 端有两个与
GMP 结合的位点
合的位点。PKG 的催化域与 PKA 相
也是处于 C 端。
似,也是处
2. cGMP 对光线的反应

 视杆细胞的质膜及其
细胞的质膜及其盘状体上存在对
视杆细胞的质膜及其盘 状体上存在对光敏感
的与 G 蛋白耦联
蛋白耦联的受体
的受体 视紫红质
耦联的受体—视紫红
视紫红质,
 视紫红质共价结合于一种内
质共价结合于一种内源性拮抗剂发光
视紫红质共价结合于一种内源
色团 11-顺
顺-视黄醛
视黄醛。
视黄醛。在光线作用下,
作用下,视黄醛
异构变为全反
为全反式而成为激
式而成为激动剂。
 视紫红质激活 Gi,
活化的视紫红质
活化的视紫红 ,继而激活 cGMP
二酯酶(PDE),
磷酸二酯酶
磷酸二酯 ,PDE 降低了cGMP 的
浓度。
浓度。
 细胞膜电位状态受细胞内 cGMP 浓度
视杆细胞膜电
视杆细胞膜电位
的调节。
调节。
 在黑暗中
黑暗中,cGMP 的浓度较高,
度较高,促使外段
促使外段细胞
膜上的钠 开放,通过细胞膜上的 Na+-Ca2+
膜上的钠通道开放
通道开放,
交换使 Na+进入胞内并排
交换使 并排出 Ca2+。在暗中,估
进入胞内并排出
均每秒有 1.5 × l06 个 Na+ 进入细胞内。
计平均每秒有 进入细胞内。

 光照后,由于激活
激活的 PDE 的作用降低了
由于激活的 的作用降低了细胞内
减少了进入细胞内的 Na+,使
cGMP 的浓度,减少了
细胞膜处于超极化状态。
细胞膜处 极化状态。
Gαt 蛋白对 cGMP 磷酸二酯酶的调节作用
cGMP 磷酸二酯酶

 光感受细胞上的 cGMP 磷酸二酯


光感受细胞上的 磷酸二酯酶是结合
二酯酶是结合
于细胞膜上的外周蛋白
 由 αβγ2
βγ 四聚体组成。
聚体组成。
 α和β亚基的催
亚基的催化作用受 γ 亚基的抑制。
亚基的抑制。

 活化的 Gα
αt 先结合于γ
合于γ亚基,
亚基,并使其与全酶分
离,因而解除了对α
了对α和β亚基的抑制,
亚基的抑制,使其被激
活。
 GTP 的水解使
水解使 Gα
αt 失活,
失活,将γ亚基释放
亚基释放,
释放,后者
又可结合在磷酸二酯酶上,
又可结合在磷酸二 酶上,抑制其活
抑制其活性
其活性。
3. NO 激活鸟苷酸环化酶
 目前为
目前为止还未发现激素对
发现激素对鸟
激素对鸟苷酸环化酶的
滑肌发现 NO 能够
直接作用。在小血管平滑肌发现
直接作用。
激活腺苷酸
腺苷酸环化酶。
化酶。
 释放的 Ach 能够引起体内小
副交感神经释放
神经释放的 起体内小血
管的舒张
 舒张作用
舒张作用并
作用并非是乙酰胆碱直接作用所
非是乙酰胆碱直接作用所引起。
 ACh首先与内皮细胞上的 mAChR 结合----胞内
首先与内
首先与内皮 胞内
Ca2+浓度升高----激活
激活 NO 合成酶 (Ca2+/钙调素
钙调素
依赖酶)----催
依赖酶 氨酸的分解----生
催化精氨酸的分解 生成NO。

 在有氧 条件下,NO 的半衰期仅
的体液条件下
在有氧的体液条件 期仅为 3~
半衰期仅为 ~
5s。
。NO 弥散到邻近的
邻近的平滑肌细胞激活
肌细胞激活可溶性
激活可溶性
的鸟苷酸环化酶,
苷酸环化酶,进而增加了
进而增加了cGMP
增加了 的浓度,
从而刺激 PKG,
从而刺 ,使肌蛋白磷酸化, 起平滑肌
使肌蛋白磷酸化,引起平滑
的收缩。
收缩。
二、肌醇磷脂系统
 膜肌醇磷脂系统是细胞内存在的一条
醇磷脂系统是细胞内存在的一条非环

核苷酸类的第二
酸类的第二信使通
信使通路。
第二信使通路

 该系统主要由磷脂酰
系统主要由磷脂酰肌醇代谢产生的两个
代谢产生的两个

第二信使
信使介导细胞效应
第二信使介 细胞效应,构成了信息传递

的通路。
的通路

 1,4,5-三
三磷酸肌醇 (Inositol 1,4,5-triphosphate,

IP3)

 二酰基甘油
酰基甘油 (diacylglycerol,
,DG)
(一)肌醇磷脂代谢

 代谢包括肌醇磷脂的合成、
肌醇磷脂代谢包
肌醇磷脂代谢包括肌醇磷脂的合成、分解及第二信使
第二信使

的产生和降
产生和降解
和降解。

 肌醇磷脂占质膜总脂的 5%~
肌醇磷脂占质膜总 ~10%,然而却是最
,然而却

活跃的一类,
的一类,大部分布在质膜的内侧
在质膜的内侧,部分分布
分分布

在内质网。
在内质网。

 磷脂酰肌醇,PI
磷脂酰肌醇,

 4-磷酸磷脂酰肌醇
磷酸磷脂酰肌醇,PI(4)P
磷酸磷脂酰肌醇,

 4,5-二磷酸磷脂酰肌醇
二磷酸磷脂酰肌醇,PI(4,5)P2
二磷酸磷脂酰肌醇,
肌醇磷脂循环
外界信号通过磷酯酶 C
(PLC)作用于 PIP2。使之
断裂形成两个第二信使
IP3 和 DG。DG 被磷酸化
形成 PA,然后与 CTP 反
应加上 CMP。IP3 经一系
列脱磷酸化形成IP2、
IP1,然后形成 I。两类循
环产物共同形成 PI、
PIP,并最终回到 PIP2 状
态。循环要求 ATP 和
CTP 提供磷酸基 (Pi)。
CMP:胞嘧啶核苷一磷酸;
CTP:胞嘧啶核苷三磷酸;
DG:二酰基甘油;
I:肌醇;
IP1:一磷酸肌醇;
IP2:二磷酸肌醇;
 PI 存在于细胞的内膜上,
存在于细胞的内膜上,经 PI 激酶、PIP
酶两步磷酸化生成 4-磷酸磷脂
激酶两步 磷酸磷脂酰肌醇
磷酸磷脂酰
(PIP)
)和 4,5-二
二磷酸磷脂酰
磷酸磷脂酰肌醇
(PIP2)。

 一信使与受体蛋白结合后,可激活 G
当第一信使与受体蛋白结合后
蛋白来刺激磷酯酶 C (PLC),
蛋白来 ,水解 PIP2 成
两个第二信使分子
两个第二
第二信使分子三磷酸
信使分子 肌醇 (IP3) 和二
三磷酸肌
三磷酸
基甘油 (DG)。
酰基甘油 。

 IP3 能够被肌醇磷酸酶 (IP-PME) 水解成无


活性的 IP2,使第二信使作用
信使作用终止。IP3 失
第二信使作用终
磷酸根后成为 IP2 和 IP1,并转回到 I,
去磷酸根 ,
重新进入 PI 循环。
 醇磷脂的合成和分解受 PLC 的调节,
肌醇磷脂的合成和分解 调节,质
膜上 PI、
、PIP、
、PIP2 均为 PLC 的作用底
的作用底

物。

 目前认为
目前认为来自
认为来自受体的信息可能通过一种类似
来自受体的信息可能通过一种类似
于 cAMP 信号通路
信号通路中的 G 蛋白,
蛋白,来完成受
体的活化和与 PLC 间的耦联
间的耦联。
耦联。此蛋白称为
Gq 蛋白,
蛋白,能与 GTP 结合并
结合并受其调节
受其调节。
调节。
 IP3 可溶于水,
于水,是亲水分子,
水分子,故能扩散入质
扩散入质
上受体,增加 Ca2+由内质
而作用于内质网上受体,
而作用于内质网
到胞质的外流量,Ca2+则作为第
网到胞质的外流量, 作为第三信使激
三信使激
活 Ca2+ /钙
钙调素依赖
调素依赖性激酶,此酶使靶蛋白
磷酸化而产生细胞水平
磷酸化而产生细胞水平的反应。
反应。
(二)IP3 和 DG 的第二信使作用
 DG 的作用
 DG 能特异地激活蛋白激酶 C (PKC),
能特异地激活蛋白
激活蛋白激 ,使效应

蛋白磷酸化而发挥生理
蛋白磷酸化而发挥生理功能
生理功能。
功能。
 许多刺激 PIP2 水解的激素和递质的最后都是通过 PKC

的激活来发挥作用的。
的激活来发挥作用的。

 当无 DG 时,PKC 激活就需要高于
激活就需要高于生理浓
高于生理浓度的
生理浓度的

Ca2+;当存在 DG 时,PKC 对 Ca2+ 水平的


水平的需

要就降低
要就降低, 范围内的 Ca2+水平也可以使
生理范围内的
降低,即生理范围 水平也可以使

它激活。
激活。

 PKC 的激活包括
激活包括形成一个含有膜脂质、
形成一个含有膜脂质、

Ca2+ 、DG 与 PKC 的蛋白复合物


的蛋白复合物。
 IP3 的作用
 IP3 主要作用在内质网中
作用在内质网中对 IP3 敏感的钙库
主要作用在内质网中对 的钙库的受

体上。
体上。

 IP3 结合到特异受体后, 钙通道,通常 3 个


合到特异受体后,打开钙通道,

一个钙通道,使 Ca2+从内质网中进入
IP3 打开一个钙通道,

胞浆。
胞浆。

 IP3 受体介
受体介导钙动员
导钙动员的最初
的最初反应是引起
反应是引起短暂的胞

内钙池释放 Ca2+ ,随后是由内 Ca2+ 释放诱导


内钙池 释放诱导

的作用较长的外 Ca2+内流。
的作用较长 内流。

 IP3 通过这种 Ca2+ 动员作用,


作用,导致胞内 Ca2+ 的

升高, Ca2+ 进一步激活


进一步激活 Ca2+ / CaM 蛋白激
蛋白激

蛋白质的磷酸化从而介导细胞内的反
酶,引起蛋白质的磷酸化从而介

应。
 蛋白激酶 C
蛋白激
 相对分子质量为 7.7 × 104 ~ 8.7 × 104 的单

体肽链
 至少有 11 种不同的亚类被分离
种不同的亚类被分离和鉴定

 它们以无活
它们以无活性形
无活性形式
性形式存在于胞质中
 蛋白激
蛋白激酶 C 在 N 端的调节区
的调节区域和 C 端的催化

、磷脂和 Ca2+ 结合部位。


区域具有与 DG、

 受蛋白激
受蛋白激酶 C 催化的底
化的底物包括
物包括表皮生长因子受
生长因子受
组胺、胰岛素受体
体、组胺、胰岛素受体、
素受体、某些癌
某些癌基因和蛋白激
和蛋白激
酶 C 本身。

 一般认为,
一般认为,IP3 / Ca2+ 和 DG/PKC 两个反应系
个反应系
同调节着 PKC 的活化和失活
统共同调节
统共同调节着 化和失活。
失活。
 DG 和 IP3 相伴而生,分别作为第二信使
而生,分别作为第二
第二信使,
信使,

构成两条独立的信号传递通
构成两条独立的信号传递通路,因而称为
条独立的信号传递通路
“分 信号通路”,
分叉信号通路 ,但这两条
这两条通路的单独
的单独作用

都不足以完成跨膜信号传递,
都不足 它们的协同作
以完成跨膜信号传递,它们的协
用是必须的
用是必须
必须的。
刺激肌醇磷脂代谢的外来信号分子

 许多外界
多外界信号分子能够刺
信号分子能够刺激肌
够刺激肌醇磷脂
醇磷脂代
激肌醇磷脂代
谢。
 递质
 乙酰胆碱----
乙酰胆碱 M型受体
型受体
 肾上腺素 α1 受体
肾上腺素----α
 5-HT----5-HT能受体
能受体
 H1-组胺
组胺----组胺类受体
组胺 组胺类受体

 激素类物
素类物质
 加压素、血管紧张素Ⅱ、P 物质和去甲肾上腺素
加压素、血管紧张素Ⅱ
释放因子等,以及血小板生长因子 PDGF、
释放因子等, 、T 细
胞有丝分裂原等。
胞有丝分裂原等。这些外界信号分子与其相应的
细胞表面受体结合,
细胞表面受体结合,都能活化磷脂酰肌醇信号通
路。
三、Ca2+的第二信使作用

 Ca2+ 作为一种耦联
作为一种耦联因子
因子参与信使作用。
耦联因子参与信使作用。

 Ca2+ 在肌肉组织的兴奋-收缩耦联
兴奋 收缩耦联中的作用
收缩耦联中的作用

是最先被研究。
是最先 研究。

 现发现, Ca2+ 广泛参


现发现, 广泛参与机体的各种生理调
体的各种生理调
代谢中, Ca2+ 、IP3 和 DG
节。在肌醇磷脂代谢
醇磷脂代谢中

一起被确认为第二
一起被确认为第二信使
信使联合体。
第二信使联合体。
Ca2+分布的不平衡
 Ca2+ 的生物学
的生物学功能在相当
功能在相当大的程度
大的程度上是
上是建
程度上是建
立在细胞内外 Ca2+ 分布的不平衡
分布的不平衡上
平衡上 。
 胞外液中的 Ca2+浓度为 1.8 mmol/L

 胞内游离
游离 2+的浓度约为 0.1μ
胞内游离Ca μ mol/L
 内质网,肌质网和线粒体 2+的浓度与胞外
内质网,肌质网和线粒体Ca
Ca2+ 浓度相当

 这种显著的浓度差成为 Ca2+发挥第二
显著的浓度差成为
这种显著 发挥第二信使
第二信使
作用的生理基础。
作用的生理基础。
 估计细胞内
估计细胞内 Ca2+上升 l μmol/L,
,便能触发不
同的细胞效
同的细胞效应。
Ca2+ 浓度的
测定
 细胞液 Ca2+ 浓度的
浓度的测定是相当
定是相当困难的
困难的
 主要原因在于
在于静息时 Ca2+ 的浓度很低,
主要原因在于静

 而其他一些干扰
一些干扰离子如 Mg2+ 、Na+ 、K+等的浓
其他一些干扰离 等的浓
要比它高出 104~106 倍。
度都要比
度都要比它高出

 此外,由于胞液中 Ca2+ 的浓度变化异常


度变化异常迅速,
常在 1s 内就有较大的变化,
有较大的变化,

 因此一个理想的 Ca2+ 的指示剂不


因此一个理想
一个理想的 示剂不但要有高的
选择性和高的灵敏
性和高的灵敏度
灵敏度,而且需要有
且需要有很高的时间
能反映 Ca2+ 的动力
分辨率,才能反映 的动力学变化过程
学变化过程。
Fura-2
 Fura-2 是 Ca 2+ 螯合剂 EGTA 类的指
类的指示

剂。
 把 Fura-2 带电羟基改造
改造成酯,Fura-2 酯可以
电羟基改造成
顺利通过细胞脂膜
顺利通过细胞脂膜,然后被酯酶分解
通过细胞脂膜,然后被酯酶分解形成多羧
形成多羧
基分子后与 Ca2+ 螯合成为 Ca2+ 的指示剂。
示剂。

 当 Ca2+ 与 Fura-2 结合时将


合时将会增强激发
增强激发波长
340~
~350 nm 的发射强度而同时减弱激发波长
的发射强度而同时减
射强度而同时减弱
为 380~
~390 nm 的发射强
的发射强度 因此,如果用
射强度。因此,
两种波长 (350nm,
,380nm)的
的紫外光去激发细
光去激发细
胞,则 Ca2+ 的浓度可从两
度可从两种波长所激发的
长所激发的强
发的强度
比来加以测定。
之比来加以
(一)Ca2+/钙调素
钙调素
 Ca2+ 的效应
的效应大多是通过一些 Ca2+ 结合蛋
或某些受钙调节的酶或蛋白
白、或某些受钙 的酶或蛋白来介导。
调节的酶或蛋白来
 一种 Ca2+ 结合蛋白----钙
结合蛋白 钙调素
(calmodulin,
,CaM) 最为重要.
最为重要
 它是含有 148 个氨基酸的胞液蛋白,
个氨基酸的胞液蛋白,相对分子
×104,由单链组成,
质量为 1.67× 由单链组成,广泛存于
广泛存于所
存于所
有的真核细胞中,
有的真核细胞中 在神经组织
,在神经组 和内分泌
织和内分泌组织中
的含量较高。
的含量较高。
 CaM 是胞内 Ca2+ 的受体,
的受体,它有 4 个结构相似
构相似
的与 Ca2+ 结合的结
合的结构域位点,每个结构域可结
合一个 Ca2+ 。
 CaM 本身无活性
无活性,当它与 Ca2+ 结合后,
合后,引起
CaM 构象的改
构象的改变,使之与受体酶结
使之与受体酶结合形成了活
合形成了活
化的钙调素--酶复合
化的钙调素 酶复合物 从而启动靶酶引起生
酶复合物,从而启 酶引起生
理效应
理效应。
受钙调素调节的酶

 钙调素是一个多功能激活
钙调素是一个多功能激活者
激活者,它调节许
它调节许多蛋白的功
能活动,其中包括几种蛋白激
几种蛋白激酶
 不同 Ca2+ 浓度会使 调素与 Ca2+ 的结合
会使钙调素与
浓度会使钙
产生不同的构象
生不同的构象变化,因而可识别不同的
酶系统,引起不同的生理
酶系统, 起不同的生理效应。
 如低浓
如低浓度的 Ca2+ 能够激活 AC,

 高浓度的 Ca2+ 则抑制 AC 而同时激活
而同时激活 PDE,

从而达到对 cAMP 和 cGMP 浓度的调控。
从而达到对 度的调控。

 Ca2+/钙
钙调素还可
调素还可调节许
调节许多与第二
多与第二信使相
第二信使相
关的酶,许多与钙
关的酶, 多与钙通路的相互作用是通过
钙调素来实现的
调素来实现的。
现的。
 如脑内含有钙调素或敏
内含有钙调素或敏感或不敏
或不敏感的腺苷酸环
化酶及 cAMP 磷酸二
磷酸二酯酶的同工
酶的同工酶。
 不同神经元
不同神经元以及同一神经元
以及同一神经元的不同部
的不同部位,钙调
素存在的比例也不同。
素存在的比 也不同。
 神经元 定部位的 Ca2+ 浓度的升
神经元某一特定部
某一特定部位的 度的升高可以增
高可以增
强或拮抗 cAMP 的生成量,
成量,因为它可分别影响
为它可分别影响
局部的环化酶及磷酸二
的环化酶及磷酸二酯酶
钙调素(A)和它的激
活作用
(B)Ac:腺苷酸环化酶;
PDE:磷酸二酯酶;
PKC:蛋白激酶C
(二) CaM 激酶Ⅱ
激酶Ⅱ
 CaM 激酶Ⅱ(CaM kinaseⅡ 是 Ca2+/钙
Ⅱ)是 钙调
素调节的蛋白
的蛋白激酶。
素调节的蛋白激
 CaM 激酶Ⅱ是一族
是一族由大分子同源催
由大分子同源催化 源催化亚基
组成的 12 寡聚体,
寡聚体,
 至少有 5 种不同的亚基:
种不同的亚基:α、β、β’、
、γ和
δ。
 其中α和β亚基仅在神经元上表达。
亚基仅在神经元
 CaM 激酶Ⅱ在脑内的浓度
内的浓度特别
特别高,特别是
浓度特别高
在前脑神经元
神经元,例如它占海马
例如它占海马蛋白含量的
海马蛋白含量的
2%。
%。
 在前脑,约有半数的 CaM 激酶Ⅱ位于神经元
位于神经元
的胞液内,
的胞液内,
 其余分
其余分布在颗粒性结
粒性结构中,如分布在突触后膜
构中,如分布
中的致
中的致密带中,它占突触后膜致 分蛋白总
突触后膜致密部分蛋白总
量的 20%
%。30%
%。
 CaM激
激酶Ⅱ的神经底
的神经底物蛋白包括
物蛋白包括微管
包括微管相关
微管相关
蛋白 MAP2、
、酪氨酸羟
氨酸羟化酶、
化酶、色氨酸羟
氨酸羟化
酶、管蛋白及突触
蛋白及突触素Ⅰ。
 当 CaM 激酶Ⅱ的全酶在 Ca2+/钙
钙调素存在
调素存在

条件下被
下被激活时,它的每
条件下被激 它的每个亚基均有被自
有被自

身磷酸化 (autophosphorylated)的能
的能

这可以改变 CaM 激酶的特性,


力,这可以改 酶的特性,有可

能使 CaM 激酶起着一个分子开
酶起着一个分子开关作用。
关作用。

 非磷酸化的 CaM 激酶只有在 Ca2+/钙调素存在


钙调素存在

时才变得具有催
具有催化活性

 当激酶的自身
酶的自身磷酸化发生数秒后,由于激
自身磷酸化发生数
磷酸化发生数秒 由于激酶自

身的磷酸化, 产生了新的 Ca2+ 不依赖激


的磷酸化,于是产生了
于是产生了新 不依赖激酶

活性。
CaM 激酶Ⅱ
激酶Ⅱ的自身磷酸化
 Ca2+ 不依赖激酶活性产
酶活性产生的原
生的原因是由于位
因是由于位
于钙调素结合域
结合域附近的苏
调素结合域附近的苏氨酸残
氨酸残基自身磷
自身磷
酸化的结果。
酸化的结果
 自身磷酸化可能
磷酸化可能防止了
防止了激酶的重新折叠
自身磷酸化可能防止 酶的重新折叠,
新折叠,
避免使其进入一种不活动的结构形式。
使其进入一种不活动的结构形式。
 全酶中只要有一个或两个亚基的自身
全酶中只要有一个或两个亚基的自身磷酸
自身磷酸
化即可使其他亚
可使其他亚基陆续激活 这是一种变
续激活,这是一种变
构性的相互作用。
构性的相互作用。
 磷酸化后,则无需 Ca2+ 的
全酶一旦经自身磷酸化
全酶一旦 自身磷酸化后
作用而继续活化。
作用而继 活化。自身磷酸化
自身磷酸化很
磷酸化很可能模仿
可能模仿
了钙调素结合的作用
结合的作用,阻止了
调素结合的作用,阻止了激酶重新
酶重新弯
曲成为不活动的构型
成为不活动的构型。
 自身磷酸化机制可能使 CaM 激酶Ⅱ能够保
磷酸化机制可能使
自身磷酸化机制

在此之前由 Ca2+ 激活的信号信息,


持住在此之前 活的信号信息,因

而形成记忆和存
而形成记忆和存储。
记忆和存储

 当有意义的功能
的功能底物蛋白被增
意义的功能底物蛋白被增强磷酸化时
磷酸化时,
这种存储的信息可以被 读出”。
这种存储的信息可以被“读 信息保持的
。信息保持
保持的

时间长短
间长短将取决于钙
决于钙不依赖自身磷酸化
磷酸化增强
自身磷酸化增

的速率和细胞磷酸酶的局
和细胞磷酸酶的局部催化速率之间平
之间平

衡。
四、蛋白磷酸化是信息调节的
共同通路
 在各种第二信使的作用过
在各种第二信使的作用过程中,蛋白质磷
第二信使的作用过程
酸化是生物调节的最基
酸化是生物调节的最基本和最重要的公
调节的最基本和最重要的公共
通路。

 蛋白磷酸化系统组成和功能一般具有以下
蛋白磷酸化系统组成和功能一般具
特征:
 由蛋白激 蛋白磷酸酶和它们相应的底物蛋
由蛋白激酶、蛋白磷酸酶和它们相应的底
白组成。
白组成。
 蛋白激酶催化底物蛋白从脱磷酸转为磷酸化,
蛋白激酶催化底物蛋白从脱磷酸转为磷酸化,

 蛋白磷酸酶则把磷酸化蛋白质变回脱磷酸状态;
蛋白磷酸酶则把磷酸化蛋白质变回脱磷酸状态;

 所有的蛋白激酶都催化 ATP 的γ磷酸转移


有的蛋白激酶都催 磷酸转移至相
应底物氨基酸残基的羟基部
氨基酸残基的羟基部位上;
位上;
 底物蛋白质则以丝氨酸或苏氨酸残基作为磷酸化
的部位。
的部位。
(一)磷酸化作用中的主要蛋白激

 蛋白激酶的分布和作用底
蛋白激酶的分布和作用底物的特性均
物的特性均有较大
的差异 以它们的激活物 (第二
的差异,均以它们的激 第二信使
信使 来命
第二信使)
名。
1. 依赖第二信使介导的蛋白激酶

 cAMP 依赖的蛋白激
的蛋白激酶 PKA:

 全酶为四
酶为四聚体,

 两个调节亚基和两
个调节亚基和两个催化亚基。
化亚基。

 该酶被激活
激活时,cAMP 结合到调节亚基,
酶被激活时 合到调节亚基,引起

催化亚基的分离
化亚基的分离然后发挥作用。
然后发挥作用。
 cGMP 依赖的蛋白激
的蛋白激酶 PKG:

 全酶有相同的两
酶有相同的两个亚基。
个亚基。

 每一亚基上都有与 cGMP 结合的位点


合的位点和催
化单位。
化单位。

 cGMP 与酶结
与酶结合后激活全
合后激活全酶
激活全酶。

 受其催化的
化的底物主要有
其催化的底物主要有

 cAMP-磷酸
磷酸二酯酶、
磷酸二

 G 激酶 (G-kinase)

 Ca2+-ATPase
 蛋白激酶 C (PKC):
蛋白激 :
 单体

 由 DG-PLC 激活
 Ca2+ 依赖的蛋白激
的蛋白激酶:pkCaMⅠ
Ⅰ,
pkCaM Ⅱ,pkCaM Ⅲ

 均可由 Ca2+ /钙调素


钙调素激活
钙调素激活

 Ca2+ 依赖蛋白激 化的底物主要有


依赖蛋白激酶催化的底物主要有:
 PKC

 胰岛素

 核苷酸二酯酶

 内皮生长因子
 Ca2+-Mg2+ ATPase等

2. 不依赖第二信使介导的蛋白激酶

 存在一类不需要第二信使
存在一类不需 信使介导的蛋白激
第二信使介 的蛋白激酶,
氨酸蛋白激酶 (PTK)。
即酪氨酸蛋白激 。

 一些生长因子与其相应的受体结合后
一些生长因子与其相应的受体结合后,活化
受体本身的
本身的酪氨酸蛋白激
受体本身 氨酸蛋白激酶,激酶再磷酸化
靶蛋白的酪氨酸残
靶蛋白的酪氨酸残基,通过一系列的磷酸化
级联反应
级联反应,
反应,影响基因的表达。
基因的表达。
 酪氨酸蛋白激
氨酸蛋白激酶的激活不需要 G 蛋白耦联
酶的激活不需 蛋白耦联
的第二信使的作用而完成信息的跨膜转
信使的作用而完成信息的跨膜转导。
第二信使的作用而完成信息的跨膜转导
 多生长因子受体,如 EGF 受体,
许多生长因子受体, 受体,胰岛
受体等,均含有一个 PTK 域,当受体
素受体等,
在细胞外接受信号时,PTK 即在胞内发动
在细胞外接受信号时
级联蛋白磷酸化
蛋白磷酸化反应。
级联蛋白磷酸化反应
反应。

 酪氨酸蛋白激
氨酸蛋白激酶的底
酶的底物包括:
包括:
 活化 GTP 酶的蛋白 (GTPase-activating

protin,
,GAP)、

 磷酯酶 C-γ
γ(PLC-γ
γ)、

 磷酯酰肌醇 3-激
激酶 (PI3)、

 SyP 酪氨酸磷酸酶

 Src 类的非受体酪
类的非受体酪氨酸蛋白激
氨酸蛋白激酶等。
酶等。
(二)去磷酸化作用中的主要蛋白
磷酸酶

 底物蛋白的磷酸化程度就
物蛋白的磷酸化程度就是磷酸化与
是磷酸化与脱磷酸
程度就是磷酸化与脱
化整个过程平衡的结
化整个过程 的结果。
平衡的结果
 蛋白磷酸酶与蛋白激酶一个很
蛋白磷酸酶与蛋白激酶一个很大的区别在
蛋白磷酸酶大多数不受第二信使的作
于,蛋白磷酸酶大多数不受第二
第二信使的作
用。
 脑中的 4 种蛋白磷酸酶分成两大
类。
 一类为第二
一类为第二信使与酶的结合直接
信使与酶的结合直接激活其
第二信使与酶的结合直接激
活性,
活性,这种类型这种类型的代表有Ca2+ /钙 钙调素激
活的磷酸酶-2B
活的磷酸酶 (PP2B),
,或钙神经素
神经素
(calcineurin),
,它是 2 型磷酸酶的一
种,
 2 型磷酸酶可分为 3 种:磷酸酶 2B 需
要Ca2+并
并受Ca2+/钙
钙调素调节;
调素调节;磷酸酶
2C需
需要Mg2+,两种阳离子都不需
,两种阳 离子都不需要的
为磷酸酶 。另一类为第二
为磷酸酶2A。 一类为第二信使与一
第二信使与一
酶的抑
类该酶的 物一起作用,
抑制物一起作用 间接激
,间接激活磷
酸酶。 在这种情况中
酸酶。在这种情况情况中,第二信使 信使先激活
第二信使先激
先激活
蛋白激酶,催化抑制物的磷酸化改
蛋白激 物的磷酸化改变其
抑制物的活性, 磷酸化酶脱抑制后则被
物的活性,磷酸化酶脱 制后则被
激活。属这一类调节
这一类调节的有蛋白磷酸酶
调节的有蛋白磷酸酶-
的有蛋白磷酸酶
l,它是参与糖原代谢
,它是参 与糖原代谢的主要磷酸酶
原代谢的主要磷酸酶,
的主要磷酸酶,
该酶受3种
酶受 种抑制物的调节
物的调节。
调节。
第三节 核内第三信使系

 神经递质、激素类等物质称为
神经递质、 类等物质称为第一信使。
激素类等物质称为第一信使。
 导激活了细胞内的 cAMP、
通过跨膜转导激活了细胞内的
通过跨膜转导激 、
、Ca2+、IP3和 DG 等第二信使分子
cGMP、 第二信使分子。
信使分子。
 第二信使可能
信使可能激活一类特定的核蛋白。
第二信使可能激活一类特定的核蛋白。被磷
酸化的核蛋白识别靶基因上的特定调节序列
酸化的核蛋白识别靶基因上的特定调节
调节序列
并与之结合,
与之结合,引起基因转录
起基因转录的变化。称这类
核内第三信使”,
核蛋白质为“核内
核蛋白质为 核内第 以区别于位于
三信使 ,以区别于位
胞浆内的其他各类信使。
内的其他各类信使。
 这些蛋白质能与靶
这些蛋白质能与靶基因上的特定
上的特定序列结合
列结合并调节
水平,因而称之为 DNA 结合蛋白。
其转录水平, 合蛋白。
 这些蛋白质是在胞浆内合成后进入细胞核内,
这些蛋白质是在胞浆内合成后进入细胞核内,发
挥信使作用,
挥信使作用,因而称这类核蛋白质为“核内
而称这类核蛋白质为 核内第三
核内第三信
第三信
使”,
,以区别于位于胞浆内的其他
别于位于胞浆内的其他各类信使
其他各类信使。
各类信使。
一、原癌基因编码的转录因子
Fos 和 Jun
 原癌基因 (proto-onco gene),或称细胞癌
,或称细胞癌
基因,是广泛存在于原核细胞和真核细胞基
基因,是广泛存在于原
因组内的高度保守
高度保守的基因,
因组内的高度保 由于它被逆转录
的基因,由于它被逆
病毒转导后可
导后可变成有致癌成有致癌活性的活性的病毒癌基因
致癌活性的病 毒癌基因
而得名。
得名。
 相应的蛋白则
的蛋白则称为癌
称为癌蛋白。
蛋白。
 癌基因可分为两大类:
基因可分为两大类:
 一类是病
一类是病毒癌基因(v-onc),
,如夏转录病毒致癌基
致癌基
它们能使靶细胞恶
因,它们能使靶细胞恶性转化
 另一类是细胞癌基因(c-onc),
另一类是细胞癌 ,它们能使细胞转化
为肿瘤细胞
肿瘤细胞。
细胞。
 毒癌基因组中的 onc 基因并
病毒癌基因组中的 基因并非来自病毒
来自病毒
本身.
本身.而是病
而是病毒感染
毒感染动物或人
动物或人体后获得的细
获得的细
胞原癌基因。
基因。
(一) c-fos 和 c -jun 家族

 Fos 最早被鉴定为病毒 Fos 或 v-Fos,


最早被鉴定为病 ,它
是 FBJ 和 FBR 小鼠骨肉瘤病
肉瘤病毒的固有转
化蛋白。
化蛋白。
 Jun 在研究初
研究初期被认为是 v-jun,
,是鸟肉
瘤病毒 17(ASV-17) 的转化蛋白。
的转化蛋白。
 v-Fos 和 v-Jun 蛋白代
蛋白代表正常细胞蛋白的
病毒变种。c-fos 编码的蛋白是核内重要
编码的蛋白是核内重要
的癌蛋白,
蛋白,它参与了细胞中信号转导
与了细胞中信号转导途
径。
 如血清、NGF、
如血清、 、某些神经递质和激素、
某些神经递质和激素、某些药
物、生理的或药理的刺激、
生理的或药理的刺激、外科手术
外科手术等外界因素
手术等外界因素
的刺激等。
的刺激等。
 c-fos 的转录
的转录激活在 5 min 内即可发生,
可发生,一
般可维持 15~
般可维持 ~20 min,
,c-fos mRNA 在刺
激后 30~
~45 min 达到高
达到高峰。c-fos 转录产
生的成熟 mRNA 编码一个由
生的成熟 编码一个由 380 个 Aa 组
成的、 ×104 的核酸蛋白,
成的、分子量为 6.2× 的核酸蛋白,简
称 Fos。
。Fos 的半衰
的半衰期为 2 h。

 c-jun 的成熟
的成熟 mRNA 编码一个 ×l04 的
编码一个 3.9×
核酸蛋白,简称Jun。
核酸蛋白, 。前者为基因转
为基因转录调节
前者为基因转录

因子,后者为基因转
因子, 为基因转录因子,
后者为基因转录因子,二者共同参
共同参与
对靶基因的转录
靶基因的转录调节。
调节。
(二)Fos 和 Jun 的结构和功
能、
1. Fos-Jun 异源二聚体
 作为 DNA 结合蛋白的 Fos 并不直接与靶
基因结合,而是与细胞蛋白的 p39 形成复
基因结合,
发挥作用。现已清楚 p39 就是 c-
合物后发挥作用。
合物后
jun 的基因产
的基因产物 Jun。

 Jun 从结构和功能上都与 AP-1 (activator
protein 1) 相似,
相似,它是一种与 DNA 序列
相结合的蛋白质复合物,即转录因子。
相结合的蛋白质复合物, 因子。
Fos 和 Jun 是 AP-1 复合物的主要成分。
复合物的主要成分。
 当 c-fos 和 c-jun 被快速诱导转录时,胞浆
中的 mRNA 数量迅速
数量迅速增 翻译出的 Fos
迅速增加,翻译出的
和 Jun 进入细胞核内并
进入细胞核内并形成异源
形成异源二
异源二聚体
Fos-Jun 复合物。
复合物。
 该复合物结 的调节区,称为 TPA 反应
合到靶基因的调节区
复合物结合到
物结合到靶
单元 (TRE) 的 7bp的 子单元,从而进一步影
的增强子单
增强子单元 从而进一步影
响靶基因的表达。
 TPA (phorbol ester 12-O-tetmdecanoyl-

phorbol-13-acetate) 是一个强 肿瘤启动子,


是一个强的肿瘤启动子,能
激活 PKC,
,并快速使一个或多个 TRE 的基因表
的基因表
达。已经发现许多基因,如胶原酶、神经生长因
经发现许多基因 神经生长因
蛋白启动子中都有 TRE 区。AP-l 单元又
子和珠蛋白启
子和珠
称为 AP-1 结合位点
合位点,TRE/
/AP-l 位点的共享序
列是 TGACTCA。

2. 第二信使诱导 c-fos 和 c-jun 的表达

 至少存在 3 种第二信使能
至少存在 信使能激活 c-fos,
第二信使能激 ,它们
是甘油二酯依
油二酯依赖的蛋白激
是甘油二酯 的蛋白激酶 C (PKC),

cAMP 和 Ca2+/钙
钙调素。
调素。
 此外,还有一些信号通路参与了 c-fos 和 c-jun
有一些信号通路参与了
的表达和耦联
达和耦联。
耦联。
图 即刻早基因的
即刻早基因的
表达
图示细胞外刺
细胞外刺激引起受
体的反应,
体的反应,产生第二信
产生第二信
使并释放进胞液中
并释放进胞液中,
进胞液中,然
后通过核孔
后通过核孔进入核内激
进入核内激
活IEGs、
、c-jun 和 c-
fos。
。两个IEGs 转录形
成的 mRNAs 扩散回胞
扩散回胞
质然后形成 Fos 和 Jun
蛋白。这些蛋白再返回
蛋白。这些蛋白再返
再返回
核内形成异源二聚体复
核内形成异源二聚体复
信使基因(或
合物与第二信使基
第二信使基因 或
动基因) 序列
称晚启动基
晚启动基因
(TGACTCA) 结合
二、CREB
 CREB 是转录
是转录激活因子 (activating
transcription factor,
,ATFs) 和 cAMP 应
答成分 (cAMP responseelement, ,CRE)
的结合蛋白 (CRE-binding proteins, ,
CREB) 家族成
家族成员。
 在调节一些被 快速诱导的基因表达中
调节一些被cAMP快
一些被
发挥一定的作用。
发挥一定的作用。
 有关 CREB 的最初 来自于对 cAMP-
的最初的线索来自于
应答神经肽
神经肽基因调节
基因调节区功能的
区功能的研究。
研究。研究发
调节区功能的研究 研究发
生长抑素、前脑啡肽
现、生长抑 脑啡肽、血管活性肠肽
活性肠肽等
肠肽等
基因含有一段回文单 此单元与 cAMP
回文单元,此单元
基因含有一段回文
的诱导有关。
有关。
三、类固醇激素及甲状腺激素
受体
 类固醇激素家族
激素家族本身
类固醇激素家族本身是一些脂
是一些脂溶性小分子。
本身是一些脂溶 分子。
 所有的甾类激素都是由胆固醇合成的
所有的甾 激素都是由胆固醇合成的,
都是由胆固醇合成的,其化
学结构相似。 它们是疏水性小分子,
结构相似。它们是疏水性小 分子,相对分
子质量在 左右。
子质量在300左右
左右。
 它们能自由弥散穿过细胞膜进入到细胞质中
它们能自 散穿过细胞膜进入到细胞质中
或细胞核内。
或细胞核内。
 如甲状腺素、
如甲状腺素、维生素 D、
、维甲酸和雌
甲酸和雌激素等可与
核内的受体结合形成配基受体复合物
核内的受体结合形成配基受体复合物,导致受体
蛋白的构象变化, 受体与基因DNA调节序
蛋白的构象变化,暴露了受体与基因 调节序
列结合的位
列结合的位点
合的位点。
 进入胞质的激
进入胞质的激素,如皮质酮、黄体酮和皮质类固
醇等可与胞质内的受体结
醇等可与胞质内的受体结合后,形成配基与胞质
合后,形成配
受体复合物
受体复合物进入细胞核,
进入细胞核,与基因
与基因调节序列结
调节序列结合
列结合,
调节基因
调节基因的表达。与细胞核内结
与细胞核内结合的这些受体就
合的这些受体就
是转录因子。
是转录
 这些特化的转录因子是一个大家族
这些特化的转录因子是一个大家族,
家族,包括:
包括:
 性激素、甲状腺激
甲状腺激素、糖皮质激素、视黄酸及维
酸及维
生素 D3 受体。
受体。
 这些受体都具有共同的框架:
这些受体都具有共同的框
 一个 DNA 结合域
结合域、一个激素结合域
一个激素结合域和一个调节转
录域。
录域。前二个域具
二个域具有受体的特异性
域具有受体的特异性。
有受体的特异性。

 在类固醇激素受体
在类固醇激素受体家族则是由锌离子与 4 个
家族则是由锌
激素受体家族
半胱氨酸连接而成,形成一个手指样结构。
氨酸连接而成,形成一个手 样结构。
 一般情况下受体蛋白辨认 DNA 特异核苷酸顺
一般情况下受体蛋白
情况下受体蛋白辨 特异核苷酸顺序
子的参与。如雌激素受体与 DNA 结
需要金属离子的参与。
需要金
合依赖于 Zn2+ 的存在, 其他两价离子如
的存在,如用其他两
如用其他两价

Ca2+ 代替则无效。
则无效。
图 锌指结构模
结构模式图
多转录因子都具有锌指
许多转录 子都具有锌指结
锌指结构基序,
构基序,这种基序形成了
这种基序形成了与
DNA 结合域作用所
作用所具有的共 构特征。此基序有两
具有的共同结构特征 基序有两种
产生方式。在转录因子 Spl 中,是由锌
产生方式。在转录 是由锌离子与两
子与两个半胱
氨酸及两个组氨酸相互作用形成的四面体结
氨酸及两个组氨酸相互作用形成的四面体结构;在类固
醇激素受体家族则是由锌离子与 4 个半胱氨酸连接完成
素受体家族则是由锌 半胱氨酸连接完成

四、 同源盒蛋白
 对果蝇的发育生物学
的发育生物学的研究发现
研究发现,
发现,存在一种
同源性突变
性突变,结果导致果蝇发育的异常。
致果蝇发育的异
 其中一种突变是触角
中一种突变是触角与脚位点的重排。
重排。
 由于Antp蛋白的异位
由于 蛋白的异位表 使触角被移到了脚
蛋白的异位表达,使触角
上。
 另一种双胸 功能的突变体,使胸 3 段的
另一种双胸位点缺失功能的突变体,
体节被移到了胸 2 段,于是果蝇
体节被移 于是果蝇出现
出现两套翅膀。
果蝇出现两套翅膀。

 这些控制发育的基因
这些控制发育的基因编码一组含有
控制发育的基因编码一组含有高度保守
高度保守
编码一组含有高度保
序列的碱性氨基酸结构域的核蛋白,许多同
序列的碱性氨基酸结构域的核蛋白,
源异形基因都含有此相同的 DNA 片段,
源异形基因都含有此相同的 片段,此
保守的 DNA 序列被称为同源
序列被称为同源盒
(homeobox)
 目前,
目前,在高级和低级真核动物细胞中
低级真核动物细胞中均
真核动物细胞中均发现
了同源盒高度保守
了同源 高度保守的序列。
的序列。最初在爪蟾早期
爪蟾早期
胚胎的 mRNA 中发现存在同源
胚胎的 中发现存在同源盒所编码的
编码的
序列,以后又在
序列, 后又在小鼠和人的基因组中找
的基因组中找到这
段 DNA 序列。
序列。
 对人及小鼠的分子生物学研究鉴定出 4 类具
的分子生物学研究鉴定出
有同源 序列的基因,统称为 Hox 复合物。
有同源盒序列的基因, 复合物。
 在小鼠 分别被命名为 Hox a、
在小鼠,分别被命 、Hox b、
、Hox c
和 Hox d
 在人类,命名为 Hox A,
,Hox B,
,Hox C 和 Hox
D。

 各基因定
各基因定位于不同的
因定位于不同的染
位于不同的染色体上,
色体上,它们在染
它们在染色体上
排列顺序相应于早
的排列顺序相应于早期胚胎体 头尾顺序,这
期胚胎体轴的头尾顺
果蝇的Hox 基因极其相似。
种特征与果蝇的
种特征
 同源盒蛋白调控
蛋白调控发育特
发育特异性的生化机制目前
调控发育特异性的生化机制目前
尚不清楚。
清楚。
 同源盒作为转录
作为转录因子对调节
因子对调节无
对调节无脊椎和
脊椎和脊椎动
脊椎动
物的胚胎发育都具有重要作用。
物的胚胎发育都
胚胎发育都具有重要作用。
第四章 细胞的增殖、
细胞的增殖、分
化、
衰老与死亡
第一节 细胞的增殖
第二节 细胞的分化
第三节 细胞衰老与死亡
 衰老 (aging or senescence) 和死亡
( death) 是生命
是生命过程中的一部分,
中的一部分,而细胞作
为构成机体的基本
为构成机体的基本单位,大多数都要经过未
大多数都要经过未
分化到分化、由化分到衰老、
衰老、再由衰老走
分化到分化、由化分到衰老 衰老走向
死亡的
死亡的历程。
一、细胞的衰老

(一)细胞的寿命
 机体中的细胞不断衰老
体中的细胞不断衰老与
断衰老与死亡,
死亡,同时又不
时又不断
地增殖与新生,呈动态
呈动态平衡。
平衡。
 很多细胞交
多细胞交替更新是很频繁的,如:
 表皮细胞、
细胞、部分血细胞等。
细胞等。

 与生命密切
与生命密 相关的细胞一般寿命接近或等同
命密切相关的细胞一般寿
于与动物自身寿
自身寿命。
于与动物自身
 心肌细胞、神经元等死亡就
肌细胞、神经元 死亡就会影响生命。
影响生命。
 体内各种细胞本身寿
本身寿命差异很大
体内各种细胞本身 一般来说
异很大,一般来
能够保持继
保持继续分裂能力的细胞是不容
的细胞是不容易衰老
的。

 离体细胞也有一定的寿命,而其寿
离体细胞也有一定的寿 而其寿命长短并
不取决于培养的天数,而取决于培养
决于培养的天数
培养的天数, 决于培养细胞的
培养细胞的
平均代数-----即
平均代 即体倍增次数
增次数。
 体外培养
体外培养实验
实验证明,成纤维细胞在体外
培养实验证 细胞在体外培养中细
纤维细胞在体外培养
培养中细
胞的平均代数越大
胞的平 代数越大,该动物寿命相应地也越长
相应地也越长,
越长,
衰老速度也相对缓慢。
衰老速度也相对缓慢。
(二)细胞衰老的表现

 细胞衰老主要表
细胞衰老 现为对环境变化适
衰老主要表现为
主要表现为对 变化适应能力的降低和维
应能力的降低和维
细胞内环境恒定
持细胞内环境恒
境恒定能力的降低。
的降低。
 形态结 构的改变、生化的改
形态结构的改 化的改变和功能的紊
变和功能的紊乱,据分析
有 150 多种变化。
多种变化。
 结构上表
构上表现为细胞内水
现为细胞内水分减少, 得原生质硬度增增
分减少,使得原生质
加,造成细胞收缩
成细胞收缩、
收缩、失去正常形
失去正常形。
 细胞核也发生 构不清,染色质加
细胞核也发生固缩,结构不清 色质加深,细胞核
与细胞质比率减小或核消失。
与细胞质比率减小或核
比率减小或核消
 细胞内出现色素或蜡样物质如脂褐
细胞内出现色素或蜡 质如脂褐素等沉积
素等沉积
 细胞内酶的活
细胞内酶的活性与含量降低,
性与含量降低,从而导致
从而导致氨基酸与蛋白
合成速率下降、衰老细胞
合成速率下降
速率下降、 细胞增殖速度下降。
衰老细胞增 度下降。
二、细胞衰老的假说

(一)遗传决定说
传决定说
 一个种内所有个体寿命非常一致
一个种内所有个体寿 非常一致,如一个特
系大鼠的群体寿命为 3 年;果蝇 30
殊品系大鼠
的最长寿命可达 100 多岁,这些下
天;而人的最长寿
是由它们的遗传基因决定的。
是由它们的遗传基因决定的。
 在遗传决定的基础上,
传决定的基础上,从基因组水平
基因组水平又有多
种学说进行补充和
补充和加强。如体细胞突变学
加强。如体细胞突变学
说、“误
误差”学
学说、密码子
密码子限制学说
制学说、基因调
基因调
节学说
节学说等。
体细胞突变学说

 生物体一生中,随机的和
生物体一生中, 的和自发的突变
随机的和自发的突变能破坏
有些分裂后的细胞的基因和染色
有些分裂 的细胞的基因和染色体
染色体,并逐步
增加它的突变
它的突变负荷。
负荷。突变基因的增
基因的增加和功能
基因的丧失减少了功能性蛋白的
基因的丧 了功能性蛋白的产生。
失减少了功能性蛋白的产
第四章 肌肉