UNIVERSIDADE FEDERAL DE UBERLNDIA INSTITUTO DE CINCIAS AGRRIAS PS-GRADUAO: AGRONOMIA

SEMINRIOS II

Espectroscopia de Infravermelho Prximo (NIR) em anlise de Solos e Plantas

Ana Paula Santos Mestranda em Solos

Prof. Dr Gaspar H. Korndorfer Orientador

Introduo
-K -P

-N

+ Fe

Fonte:IPNI

Continuao...

TEMPO

REAGENTES
3

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Ex: Anlise de Si em tecido vegetal

gua Oxigenada Hidrxido de Sdio

cido clordrico Molibdato de Amnio cido Oxlico

Banho Maria (85 C) 1 hora Autoclave (123 C) 1 hora

16 hs (1 noite)
4

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Anlises Convencionais de Solo e Planta

Colorimetria Espectrofotmetro de absoro atmica; Colormetro; Fotmetro de chama... Quantificao: Absoro de radiao ultravioleta Slido > Soluo

Fonte: Disponvel em:www.laborsolo.com.br/galeria

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Infravermelho Prximo

Tabela 1. Regies espectrais do Infravermelho

C O N

Fonte: Borin, 2003

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Infravermelho Prximo
Espectrofotmetro de Infravermelho prximo (nir) Quantificao: Vibraes na regio de infravermelho Slidos ou lquidos Sem abertura da amostra (<1min)

Fonte: Taiz e Zeiger (2004, p.140)

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Infravermelho Prximo
Vantagens da tcnica

Anlises no destrutivas; Sem a utilizao de produtos qumicos; Anlise mltipla de componentes; Velocidade de resultados de anlise (menos de um minuto); Menor mo de obra; Menor custo.

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Infravermelho Prximo
Principais usos

Indstria de Alimentos (Carne, Leite, Massas..) Carboidrato, gordura, umidade, proteina

Indstria Farmacutica e de Cosmticos (Algodo, cremes, remdios...) Gordura, Umidade, fibras

Indstrias Agrcolas (Raes, papel, celulose...) Densidade, polpa,Gordura, Umidade, fibras

9

Continuao...

Infravermelho Prximo
Principais usos

Industria de papel Rendimento de polpa celulsica; densidade bsica. Reduo de mo de obra, tempo e custo RAIMOND et al., 2001

Usinas de cana Qualidades tecnlogicas de cana de acar: Pol, brix, %AR, % ATR, fibra (AMORIM, 1996)

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Objetivo

Avaliar a metodologia de espectroscopia de infravermelho prximo para estimar valores de Si, M.O. e argila em solos e N em folhas de milho e soja.

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Material e mtodos
Etapa I: Construo da curva de calibrao e validao do equipamento
Es.: Anlise Convencional (Determinao de Si)

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Material e mtodos
Etapa I: Construo da curva de calibrao e validao do equipamento

13

Continuao...

NIR
Muitos pontos Espectros de amostras x Concentrao ou caracterstica

versus

versus

[Si ]
X=[Si] medido pelo mtodo convencional
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Continuao...

Calibrao
Propriedade espectral

Modelo

Concentrao

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Obteno e preparo das amostras

Laboratrios
LABAS LAMAS LAFER IAC UBERSOLO Anlise N Foliar (n=108) Mtodo Convencional Kjeldahl (BATAGLIA,et al., 1983)

Si Solo (n=160) M.O. Solo (n=147)

Argila Solo (n=163)

Colorimtrico (KORNDORFER, et al., 2004) Walkley Black (WALKLEY; BLACK, 1934)

Pipeta (EMBRAPA, 1997)
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Secagem: solo: 45 C folha: 65 C

Homogeneizao: Solo: Peneira 2mm Folha: Peneira 177 m; 80 Mesh

Continuao...

Obteno dos espectros

Solo
25cm3/triplicata

Foto 1: Espectrofotmetro - NIR (Near Infrared spectroscopy)

Modelo WL90PLS 1100 -2500 nm Resoluo: 2nm

Folha

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Mtodo de calibrao Quimiomtricos: calibrao multivariada Modelo matemtico: PLS (Partial Least Square) Pr-processamento das amostras Correo de interferncias Direto (software:FemWim900) Primeira Derivada (Savitzky-Golay) (Software: Matlab) em execuo
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Calibrao e Validao do Equipamento

Bc Dados Silcio
160 (0,1 17,7) 147 (0,7 4,3)

Leituras
480 441 489 159 165

outliers
8 9 15 9 11

Seleo Calib/valid
300/172 (0,1 12,1) 300/132 (0,7 4,3)

Mtodo /VL
PLS/6 PLS/8 PLS/8 PLS/8 PLS/5

Matria Orgnica
Argila N Milho N Soja

163 (15,5 89,6) 53 (23,1 56,7) 55 (24,5 67,2 )

300/174 (15,5 73,8) 100/50 (23,1 37,1) 73/81 (24,5 67,2)

19

Continuao...

Etapa II: Predio de amostras

Anlise
Silcio Matria orgnica Argila N Milho N - Soja

Nmero de amostras
87 50 60 92 20

Real x Predito
20

Continuao...

Anlise de dados
Sem pr processamento Com pr processamento Correlaes simples Teste t - 5%
Software Correlao PRESS MSE ER (%)

FEMWIN900

Software

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Resultados parciais e discusso

Padres Previstos NIR (mg kg-1)
r=0,7125 n=300

Padres Reais (mg kg-1)

Figura 1: Grfico de Calibrao. Concentrao de silcio (Si) no solo medida pelo mtodo convencional de extrao por CaCl2 (Padres Reais) versus concentrao de Si previsto pelo NIR (Padres Previstos Nir), utilizando mtodo de calibrao multivariada (PLS) com 6 22 variveis latentes.

22

Continuao...

Padres Previtos NIR (mg kg-1)

r=0,7214 n=172

Padres Reais (mg kg-1)

Figura 2: Validao do equipamento. Concentrao de silcio (Si) no solo medida pelo mtodo convencional de extrao por CaCl2 (Padres Reais) versus concentrao de Si previsto pelo NIR (padres Previstos Nir).
23

Continuao...

Padres Previtos NIR (%)

r=0,8375 n=300

Padres Reais (%)

Figura 3: Grfico de Calibrao. Porcentagem de matria orgnica (M.O.) medida pelo mtodo convencional de referncia Walkley Black (Padres Reais) versus quantidade de M.O previsto pelo NIR (padres Previstos Nir). Calibrao Multivariada (PLS) com 8 variveis 24 latentes.

24

Continuao...

Padres Previstos NIR (%)

r=0,8037 n=132

Padres Reais (%)

Figura 4: Validao do Equipamento. Porcentagem de matria orgnica (M.O.) medida pelo mtodo convencional de referncia Walkley Black (Padres Reais) versus quantidade de 25 M.O previsto pelo NIR (Padres Previstos Nir).

25

Continuao...

Padres Previtos NIR (%)

r=0,8488 n=300

Padres Reais (%)

Figura 5: Grfico de Calibrao. Porcentagem de argila, medida pelo mtodo convencional da pipeta (Padres Reais) versus porcentagem de argila prevista pelo NIR (Padres Previstos Nir). 26 Calibrao Multivariada (PLS) com 8 variveis latentes.

26

Continuao...

Padres Previstos NIR (%)

r=0,8471 n=174

Padres Reais (%)

Figura 6: Validao do Equipamento. Porcentagem de argila, medida pelo mtodo convencional da pipeta (Padres Reais) versus porcentagem de argila prevista pelo NIR 27 (Padres Previstos Nir).

27

Continuao...

Padres Previstos NIR (g kg-1)

r=0,8470 N=100

Padres Reais (g kg-1)

Figura 7: Grfico de Calibrao. Teor de nitrognio (N) em folhas de milho, medido pelo mtodo Kjeldahl (Padres Reais) versus teor de N previsto pelo NIR (padres Previstos Nir). 28 Calibrao Multivariada (PLS) com 8 variveis latentes.

28

Continuao...

Padres Previstos NIR (g kg-1)

r=0,7792 N=50

Padres Reais (g kg-1) Padres Reais ()

Figura 8: Validao do Equipamento. Teor de nitrognio (N) em folhas de milho, medido pelo mtodo Kjeldahl (Padres Reais) versus teor de N previsto pelo NIR (padres Previstos 29 Nir).

29

Continuao...

Padres Previstos NIR (g kg-1)

r=0,8824 N=73

Padres Reais (g kg-1)

Figura 9: Grfico de Calibrao. Teor de nitrognio (N) em folhas de soja, medido pelo mtodo Kjeldahl (Padres Reais) versus teor de N previsto pelo NIR (padres Previstos Nir). 30 Calibrao Multivariada (PLS) com 5 variveis latentes.

30

Continuao...

Padres Previstos NIR (g kg-1)

r=0,8565 N=81

Padres Reais (g kg-1)

Figura 10: Validao do Equipamento. Teor de nitrognio (N) em folhas de soja, medido pelo mtodo Kjeldahl (Padres Reais) versus teor de N previsto pelo NIR (padres Previstos 31 Nir).

31

Continuao...

Predio de amostras desconhecidas

Nitrognio-Milho
39,0
Nitrognio Previsto (g kg-1) 34,0 29,0
y = 0,7645x + 7,2239 r=0,79 n=90

24,0
19,0

19,0

24,0

29,0

34,0

39,0

Nitrognio Real (g kg-1)

Figura 11: Teor de nitrognio (N) em folhas de milho, medido pelo mtodo Kjeldahl (Padres Reais) versus teor de N previsto pelo NIR (padres Previstos Nir).
32

Continuao...

Predio de amostras desconhecidas

Nitrognio-Soja
58,0 y = 0,8952x + 4,3026 r= 0,76 n=20

Nitrognio Previsto (g kg-1)

53,0

48,0

43,0

43,0

48,0

53,0

58,0

Nitrognio Real (g kg-1)

Figura 12: Teor de nitrognio (N) em folhas de soja, medido pelo mtodo Kjeldahl (Padres Reais) versus teor de N previsto pelo NIR (padres Previstos Nir).
33

Continuao...

Predio de amostras desconhecidas

Silcio - Solos
15,0 S Previsto (mg kg-1) 10,0 5,0

y = 0,1149x + 2,1588 r = 0,21 n=87

0,0
0,0 5,0 10,0 Si Real ( mg kg-1)
Figura 13: Concentrao de silcio (Si) no solo medida pelo mtodo convencional de extrao por CaCl2 (Padres Reais) versus concentrao de Si previsto pelo NIR (Padres 34 Previstos Nir).

15,0

Continuao...

Padres IAC
Valor mdio previsto Valores mnimos e mximos
(Mtodo CaCl2)

Quadro 2: Valores mnimos e mximos de Si em amostras de solo utilizadas como padres em laboratrios, medidas pelo mtodo convencional com extrao por CaCl2 e valores mdios previstos com o uso do sistema NIR (calibrao multivariada, mtodo PLS com seis variveis latentes)

(Mtodo NIR PLS6)

5,0 4,4 3,9 4,8 4,7 5,3 7,6 5,4 6,9 5,5 8,0 4,3 6,2 10,5 7,0 7,7 9,7 5,5 5,7

3,0 7,0 2,0 7,0 2,0 6,0 5,0 9,0 4,0 9,0 4,0 8,0 4,0 8,0 5,0 9,0 4,0 8,0 3,0 7,0 3,0 7,0 3,0 7,0 2,0 6,0 6,0 13,0 7,0 14,0 4,0 9,0 7,0 - 13,0 17,0 36,0 5,0 12,0

35

Continuao...

Predio de amostras desconhecidas

Matria Orgnica - Solos
3,9 3,4 M.O. Prevista (%) 2,9 2,4 1,9 1,4 0,9

y = 0,3086x + 1,0681 r = 0,43 n=50

0,4
0,4 0,9 1,4 1,9 2,4 2,9 3,4 3,9 M.O. Real (%)
Figura 14: Porcentagem de matria orgnica (M.O.) medida pelo mtodo convencional de referncia Walkley Black (M.O. Real) versus quantidade de M.O prevista pelo NIR (M.O. 36 Prevista). Calibrao Multivariada (PLS) com 8 variveis latentes.

36

Continuao...

Predio de amostras desconhecidas

Argila - Solos
Teor de Argila Previsto (%)
85,0 75,0 65,0 y = 0,3144x + 29,717 r = 0,49 n=62

55,0
45,0 35,0 25,0 15,0 15,0 25,0 35,0 45,0 55,0 65,0 75,0 85,0

Teor de Argila Real (%)

Figura 15: Porcentagem de argila, medida pelo mtodo convencional da pipeta (Teor Argila Real) versus porcentagem de argila prevista pelo NIR (Teor de argila previsto). Calibrao 37 Multivariada (PLS) com 8 variveis latentes.

37

Continuao...

Quadro 3. Teste t-student (0,05 de significncia) e correlaes obtidas para diferenas entre mdias, para os mtodos convencionais e estimados pelo NIR, da predio de amostras desconhecidas pelo aparelho.

Mtodos Correlao r Comparados Korndorfer x NIR Silcio 0,21 (n=87) Matria Walkey-Black X NIR 0,43 orgnica (n=50) Pipeta X NIR Argila 0,49 (n=62) Kjeldahl x NIR N Milho 0,79 (n=90) Kjeldahl x NIR N - Soja 0,76 (n=20) ns no diferem significativamente entre si *so significativamente diferentes

Anlise

t calculado 7,37 * 2,43 * -0,10 ns -0,53 ns 0,78 ns

t tabelado 1,98 1,99 1,98 1,97 2,03

38

Com pr processamento espectral

r(antes)=0,8375

Calibrao II

r=0,90603 Y=0,76958x + 0,42106

PREVISTO

Figura 16: Grfico de Calibrao(II). Porcentagem de matria orgnica (M.O.) medida pelo mtodo convencional de referncia Walkley Black (Real) versus quantidade de M.O previsto pelo NIR ( Previsto). Calibrao Multivariada (PLS) com 8 variveis latentes. 39

REAL

Calibrao II
Com pr processamento espectral
r(antes)=0,8488

r=0,88464 Y=0,81072x + 5,5953

PREVISTO

Figura 17: Grfico de Calibrao II. Porcentagem de argila, medida pelo mtodo convencional da pipeta (Padres Reais) versus porcentagem de argila prevista pelo NIR (Padres Previstos Nir). Calibrao Multivariada (PLS) com 11 variveis latentes. 40

REAL

Consideraes Finais
Mtodo NIR Substituio X Ferramenta de suporte
Os resultados iniciais indicam que h uma maior eficincia para analises foliares que para anlise de solos

41

Obrigada
paulasanttana@yahoo.com.br

42