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Instituto de Biocincias

Ensino de Botnica - Curso de atualizao de professores de Educao Bsica: A BOTNICA NO COTIDIANO

Organizadores: Dborah Yara A. Cursino dos Santos Fungyi Chow Cludia Maria Furlan

So Paulo 2008

AUTORES
Adriana Afonso Sandre Aline A. Cavalari Amanda Wanderley Anary P. M. Egydio Antonio Salatino Cludia Maria Furlan Cristiane Del Nero Rodrigues Dborah Yara A. Cursino dos Santos Douglas Silva Domingues Eny Iochevet Segal Floh Estela Maria Plastino Flvio Berchez Fungyi Chow Gladys Flvia de A. Melo-de-Pinna Gregrio C.T. Ceccantini Lgia Maria Ayres Lucimar Barbosa da Motta Maria Luiza Faria Salatino Maria Magdalena Rossi Mariana Cabral de Oliveira Marcos Buckeridge Milene Sampaio Clemente Mourisa Maria de Souza Ferreira Nanuza Luiza de Menezes Natlia Ghilardi

ORGANIZADORES
Dborah Yara A. Cursino dos Santos Fungyi Chow Cludia Maria Furlan

Apoio: Departamento de Botnica

Instituto de Biocincias

Ficha Catalogrfica
E59 Ensino de Botnica - Curso para atualizao de professores de Educao Bsica: A Botnica no cotidiano/ Organizado por Dborah Yara A. Cursino dos Santos, Fungyi Chow, Cludia Maria Furlan So Paulo: Universidade de So Paulo, Fundo de Cultura e Extenso: Instituto de Biocincias da Universidade de So Paulo, Departamento de Botnica, 2008. viii, 124p. : il. (Projeto de Cultura e Extenso). ISBN 978-85-85658-21-2 1. Botnica Estudo e ensino I. Santos, Dborah Yara A. Cursino, org. II. Chow, Fungyi, org. III. Furlan, Cludia M., org. IV. Ttulo: A botnica no cotidiano V. Srie. LC: QK 51

Apoio: Departamento de Botnica

Instituto de Biocincias

ndice

NDICE

1. A conquista do ambiente terrestre pelas plantas Nanuza Luiza de Menezes .......................................................................................................... 01 2. Diversidade morfolgica das espermatfitas Lucimar Barbosa da Motta & Cludia Maria Furlan ..................................................................... 07 3. Diversidade da morfologia floral Dborah Yara A. Cursino dos Santos & Lucimar Barbosa da Motta ........................................... 13 4. Reconhecimento dos grandes grupos de plantas Amanda Wanderley & Lgia Maria Ayres ..................................................................................... 19 5. A Relao do homem com os oceanos e seus vegetais Flvio Berchez, Natlia Ghilardi & Marcos Buckeridge ............................................................... 25 6. As algas na cozinha e sua importncia nos produtos de uso dirio Estela Maria Plastino, Fungyi Chow & Mariana Cabral de Oliveira ............................................. 31 7. Guloseimas de algas Fungyi Chow, Mariana Cabral de Oliveira & Estela Maria Plastino ............................................ 35

8. Morfologia e anatomia dos rgos vegetativos Gladys Flvia de A. Melo-de-Pinna, Gregrio C.T. Ceccantini & Nanuza Luiza de Menezes .... 37 9. Metablitos secundrios de origem vegetal e seus usos pelo homem Cludia Maria Furlan & Lucimar Bardosa da Motta ..................................................................... 45 10. Plantas medicinais e txicas Maria Luiza Faria Salatino, Milene Sampaio Clemente & Antonio Salatino ................................ 51 11. Obteno e deteco de substncias de origem vegetal Cristiane Del Nero Rodrigues, Lucimar Barbosa da Motta & Mourisa Maria de Souza Ferreira 59

12. Uso das plantas na alimentao saudvel Deborah Yara A. Cursino dos Santos ......................................................................................... 67 13. Pectina, gomas e gelias Aline A. Cavalari, Anary Priscila Monteiro Egydio, Ligia Maria Ayres & Marcos Buckeridge ...... 77 14. Biocombustveis Antonio Salatino .......................................................................................................................... 81 15. Fermentao e destilao de lcool Mourisa Maria de Souza Ferreira & Adriana Afonso Sandre ...................................................... 87 16. Origem das plantas cultivadas Dborah Yara A. Cursino dos Santos & Cludia Maria Furlan .................................................... 95 17. Cultura de tecidos e suas aplicaes biotecnolgicas Eny Iochevet Segal Floh .............................................................................................................. 101 18. Genmica e plantas transgnicas Maria Magdalena Rossi & Douglas Silva Domingues ................................................................. 107 19. Descobrindo genes Maria Magdalena Rossi & Douglas Silva Domingues ................................................................. 117

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Apresentao

Apresentao

Botnica! Quantos dos nossos colegas da Educao Bsica fogem das aulas de Botnica, relegando seu contedo ao final da programao do ano letivo, por medo e insegurana em abordar esses assuntos? Entre tantos argumentos, uma das maiores alegaes a dificuldade em desenvolver atividades prticas simples que despertem a curiosidade do aluno e mostre a utilidade daquele conhecimento no seu dia-a-dia. Mesmo concientes que a Botnica toma parte do cotidiano das pessoas, seja de forma direta na alimentao, por exemplo, ou indireta, como no uso de um frmaco extrado de um vegetal, ainda nos deparamos com um grande distanciamento entre o que se aprende de Botnica na escola e sua aplicao na realidade do aluno. O que estamos fazendo de to errado? Para ns, professores e pesquisadores do Departamento de Botnica, a importncia das plantas no cotidiano inerente. A partir da inquietude coletiva de alguns colegas e de uma profunda reflexo sobre o rumo do ensino de Botnica na Educao Bsica, em 2004 foi lanada nossa primeira proposta Aulas prticas de Botnica. Nesse projeto, tnhamos o objetivo de apresentar um conjunto de aulas prticas simples e possveis de aplicao em qualquer instituio de Educao Bsica. Pretendia-se, com essas atividades, mostrar o quanto a Botnica toma parte no dia-a-dia do cidado e como os materiais para aulas prticas nesse tema so acessveis e fceis de usar. A partir de materiais simples, sem o uso de equipamentos e vidrarias sofisticadas, apresentamos um material de apoio com 15 propostas de aulas prticas em diversos tpicos de Botnica. Ao longo das quatro edies desse primeiro curso de atualizao, surgiram novas idias e com base nos comentrios dos quase 200 professores que freqentaram aos cursos, resolvemos propor e encarar um novo desafio, agora um curso de extenso mais terico que prtico. Nesse novo curso, fundamentado novamente na idia de ressaltar a importncia dos vegetais no cotidiano do cidado, sero abordados diversos aspectos da Botnica, na tentativa de estimular, contextualizar e associar as diversas atividades humanas com a vida e a diversidade das plantas. Neste volume, trazemos assuntos de Botnica relacionados s nossas atividades cotidianas que, na maioria das vezes, passam despercebidas. A inteno estreitar o lao entre o contedo de Botnica e nossas atividades corriqueiras. Qual a relao entre a fabricao de etanol a partir de cana-de-acar e o produto final consumido pelos nossos veculos? Quais so e de onde vm as substncias presentes em muitos medicamentos que utilizamos? Como surgiram as plantas cultivadas das quais dependemos hoje? Elas sempre ocuparam esse ambiente? E as plantas transgnicas, o que so? Certamente, muitos de ns j pensamos sobre esses assuntos ou j tivemos que responder questes semelhantes a alunos cheios de curiosidade. Essas questes so apenas alguns exemplos de assuntos que sero abordados durante este volume. Cludia Maria Furlan Dborah Yara A. Cursino dos Santos Fungyi Chow

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1. A conquista do ambiente terrestre pelas plantas

1. A CONQUISTA DO AMBIENTE TERRESTRE PELAS PLANTAS Nanuza Luiza de Menezes (nanuzalm@ib.usp.br) Para que as plantas pudessem sair da gua e alcanar o ambiente terrestre, profundas modificaes vegetativas e reprodutivas aconteceram. Assim, enquanto na gua todas as clulas do organismo vegetal esto em contato com a prpria gua e, portanto, no h possibilidade de dessecamento, para viver no ambiente terrestre as plantas desenvolveram, atravs de mutaes, um sistema radicular para retirar a gua do solo, um sistema vascular para distribuir a gua no corpo da planta e um sistema de revestimento para evitar a perda de gua (epiderme com cutcula). Com relao aos elementos de reproduo, o que se verifica que enquanto na gua, oosferas e anterozides se deslocam por meio de movimentos de clios ou flagelos, na terra, nos grupos mais derivados, as clulas sexuais estaro situadas no interior dos estrbilos (gimnospermas) ou das flores (angiospermas). Naturalmente, foram necessrias muitas mudanas para passar de um extremo ao outro. Em todos os grupos de plantas, observa-se a alternncia de geraes. As brifitas apresentam como gerao predominante, isto , permanente, a gerao gametoftica (haplide). Em pteridfitas e nas plantas com semente gimnospermas e angiospermas a gerao predominante a gerao produtora de esporos, isto , a esporoftica (diplide). As brifitas e as pteridfitas, embora consigam sobreviver em solo seco, para a sua reproduo necessitam da gua para que os anterozides nadem de encontro s oosferas. Em brifitas, estas encontram-se em arquegnios superficiais e, em pteridfitas, mergulhados no talo (Figura 1).

A B

Figura 1. Posio da oosfera (O) em hepticas (A) e em pteridfitas(B). Retirado de Menezes et al. (2006). Entre as pteridfitas do grupo das filicneas, por exemplo, que so homosporadas, os esporngios produzem esporos iguais, e estes esporos originam um gametfito monoclino (monoclino vem do grego: mono = nico e kline = leito, significando um leito para os dois sexos). Os arquegnios com oosferas e os anterdios com anterozides, formam-se na superfcie inferior do gametfito. Aps a fecundao, o zigoto se desenvolve e forma um embrio que fica em contato com o solo, sujeito ao ataque por microrganismos (Figura 2).

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Menezes, N.L.

Figura 2. Embrio de uma filicnea desenvolvendo-se sob o gametfito feminino desprotegido. Retirado de Menezes et al. (2006). Ainda entre as pteridfitas, h os licopdios que so homosporados e formam gametfitos monoclinos e os equisetos, que tambm so homosporados, porm do origem a gametfitos diclinos (diclino vem do grego: di = dois e kline = leito, significando dois leitos, ou seja, um para cada sexo). Neste caso, os esporos iguais so fisiologicamente diferentes. Outro grupo de pteridfitas, as selaginelas, que so heterosporadas, forma dois tipos de esporos: maiores (megsporos, mascrsporos ou ginsporos) e esporos menores (micrsporos ou andrsporos) (Figura 3).

Figura 3. Estrbilo de selaginela. Retirado de Menezes et al. (2006).

Os esporos maiores originam o gametfito feminino (megagametfito ou megaprotalo ou ginfito) e os menores formam o gametfito masculino (microgametfito, microprotalo ou andrfito). A formao do gametfito feminino se d no interior da parede do prprio esporo, isto , h uma fase de ncleos livres, que posteriormente recebem paredes de fora para dentro. Aps a celularizao, formam-se os arquegnios com as oosferas, que sero fecundadas pelos anterozides. Uma vez ocorrida a fecundao, o zigoto d origem a um embrio que vai se desenvolver no interior das paredes do esporo = embrio endosprico (Figura 4) nutrindo-se dos tecidos do prprio gametfito.

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1. A conquista do ambiente terrestre pelas plantas

Figura 4. Embrio de selaginela com desenvolvimento endosprico. Retirado de Menezes et al. (2006). A partir do momento em que as plantas desenvolveram a capacidade de reter o gametfito feminino e, por conseguinte, o embrio sobre a prpria planta me, passaram a formar o grande grupo das espermatfitas (Spermatophyta), isto , plantas produtoras de sementes. Nessas plantas aparece o vulo como formao nova. O vulo o precursor ontogentico da semente, apresentando o esporngio feminino (megasporngio ou ginosporngio) envolvido por um tegumento (gimnospermas) ou dois tegumentos (angiospermas). Em geral, esse megasporngio chamado de nucelo no vulo. No vulo de cicas (Cycadophyta), por exemplo, ainda se formam anterozides que nadam na cmara arquegonial at alcanar a oosfera (Figura 5A). Esta uma evidncia de que os ancestrais de cicas viveram na gua. A partir de conferas (Coniferophyta), o tubo polnico leva as clulas espermticas (no mais anterozides) at a oosfera. Chama-se a ateno para o fato de que em cicas podem se formar at 16 arquegnios, num nico vulo. Em conferas e gnetos (Gnetophyta), se formam, no mnimo, dois arquegnios (Figura 5B). No vulo de uma angiosperma forma-se, via de regra, uma nica oosfera. Enquanto em cicas a fase de ncleos livres do megsporo, que precede a formao do gametfito feminino (megagametfito ou ginfito) pode formar at 1500 ncleos, nas angiospermas, a fase de ncleos livres formada por apenas oito ncleos. Esta fase conhecida como saco embrionrio e d origem, aps a celularizao, a um gametfito feminino, formado por sete clulas: trs antpodas, duas sinrgides, uma oosfera e uma clula central, binucleada, que aps a dupla fecundao, ir originar o endosperma. Enquanto que em gimnospermas o embrio para se desenvolver, alimenta-se dos tecidos do gametfito feminino, como acontece nas pteridfitas, em angiospermas o tecido nutritivo do embrio o endosperma. S aparece se o vulo for fecundado. Aps a dupla fecundao, enquanto uma das clulas espermticas fecunda a oosfera, para originar o embrio, a outra clula sexual masculina ir fecundar a clula central, com dois ncleos, originando um endosperma, em geral, triplide.

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Menezes, N.L.

Figura 5. vulo de cicas (A) e de pinus (B). Retirado Menezes et al. (2006). O endosperma foi uma importante aquisio das angiospermas e considerado um dos mais importantes caracteres da angiospermia. A presena de sinrgides significa, para alguns filogenistas, vestgios do arquegnio presente nas gimnospermas. Quando o embrio est completamente formando, a semente est pronta para ser dispersa. Os vrios agentes biticos e abiticos que so responsveis pela polinizao sero responsveis, tambm, pela disperso dessas sementes. importante salientar que entre as espermatfitas, assim como em brifitas e pteridfitas, ocorre uma alternncia de geraes, mas a gerao gametoftica completamente dependente da gerao esporoftica e s se liberta quando o embrio est pronto para se desenvolver. Portanto, a gerao gametoftica encontra-se no estrbilo de gimnosperma e na flor de angiosperma. Nas espermatfitas, apenas um megsporo frtil. Em gimnosperma o ncleo do megsporo sofre inmeras divises, formando centenas de ncleos (como em selaginela) que aps a fase de celularizao, origina o gametfito feminino (Figura 6A). Em angiospermas, formam-se, em geral, apenas oito ncleos. O ncleo do megsporo se divide uma vez e os dois ncleos resultantes dirigem-se um para cada plo de clula. Na segunda diviso, formam-se dois ncleos nos plos e em seguida quatro ncleos em cada plo. Depois, de cada plo migra um ncleo para o interior da clula multinucleada. Como dito anteriormente, essa fase de ncleos livres constitui o saco embrionrio. Aps se completarem as divises nucleares, ocorre a celularizao, originando sete clulas: trs antpodas, duas sinrgides, uma oosfera e uma clula central, maior, binucleada (Figura 6B).

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1. A conquista do ambiente terrestre pelas plantas

Figura 6. Formao do vulo em gimnosperma (A) e em angiosperma (B). As letras A-J indicam a seqncia dos eventos. Retirado de Menezes et al. (2006)

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Menezes, N.L.

BIBLIOGRAFIA SUGERIDA RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 7 edio. Editora Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 830p. MENEZES, N.L.; PIRANI, J.R.; GIULIETTI, A.M.; MONTEIRO, W.R.; VENTURELLI, M.; ESTELITA, M.E.; KRAUS, J.E.; ANGYALOSSY, V.; ARDUIN, M.; CECCANTINI, G.C.T. & MELO-DE-PINNA, G.F. 2006. Anatomia e Morfologia de Plantas Vasculares. Apostila do Departamento de Botnica, Universidade de So Paulo, So Paulo, 184p.

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2. Diversidade morfolgica das espermatfitas

2. DIVERSIDADE MORFOLGICA DAS ESPERMATFITAS Lucimar Barbosa da Motta (lugalll@yahoo.com.br) Cludia Maria Furlan (furlancm@yahoo.com.br)

Durante a evoluo das plantas no perodo Devoniano (360 Ma) surgiu a linhagem das plantas que produzem sementes, ou seja, as espermatfitas. A semente surgiu como um substituto eficiente dos esporos, como a principal maneira de propagao reprodutiva. importante salientar que as sementes no so homlogas aos esporos, pois os esporos so resultados de um processo meitico e daro origem aos gametfitos, enquanto as sementes so os prprios produtos da fecundao. Nas espermatfitas, os esporngios femininos produzem quatro esporos, mas esses esporos nunca sero liberados para germinarem no meio ambiente, pois desses quatro apenas um se desenvolver ainda na planta-me e dar origem ao gametfito feminino. Por outro lado, os esporngios masculinos do origem aos esporos que se desenvolvero em gros de plen ou gametfitos masculinos. Os gros de plen sero liberados ao meio para o encontro do gameta feminino e assim ocorrer a fecundao, originando o embrio. O surgimento da semente foi um dos principais acontecimentos responsveis pela dominncia das espermatfitas no meio terrestre, j que propiciou independncia do ambiente aqutico para que ocorresse a reproduo. O grande sucesso das plantas com sementes tem sido atribudo proteo que estas proporcionam para o embrio. Na maioria das vezes uma semente apresenta o embrio (que o prprio propgulo), um tecido de reserva, normalmente o endosperma ou o perisperma (que atua em estgios definitivos como a germinao) e uma camada protetora ou tegumento, como o prprio nome sugere protege o embrio dos rigores da vida terrestre. Esse grupo dominante de plantas tem suas caractersticas amplamente diversas. Em tamanho, elas variam desde espcies arbreas como as gigantescas sequias (Cupressaceae) de mais de 100 metros de altura e com caules de aproximadamente 10 metros de dimetro, at algumas espcies muito pequenas como as lentilias-dgua (Lemnaceae) que so plantas simples, flutuadoras e que muitas vezes no alcanam nem um milmetro de comprimento. Muitas plantas so adaptadas a crescer em regies extremamente ridas, como os cactos (Cactaceae) que possuem caules suculentos e folhas modificadas em espinhos. Diante de toda essa diversidade morfolgica, algumas caractersticas tm sido usadas para diagnosticar alguns grupos, especialmente as caractersticas reprodutivas, que mostraram grande diversificao durante a evoluo dos grupos. As espermatfitas so tradicionalmente divididas em dois grandes grupos: as gimnospermas (plantas com sementes nuas) e as angiospermas (plantas com sementes e flores); alguns autores tambm tratavam as espermatfitas como fanergamas, ou seja, plantas com rgos sexuais visveis. H quatro grupos de gimnospermas com representantes atuais: Cycadophyta, Ginkgophyta, Coniferophyta e Gnetophyta, que so caracterizados por possurem crescimento secundrio, traquedes no xilema e clulas crivadas no floema. As folhas so geralmente perenes (exceto no gnero Ginkgo) e a venao dicotmica (exceto em Gnetophyta).

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Motta, L.B. & Furlan, C.M.

Em relao aos aspectos reprodutivos, as gimnospermas se caracterizam por possurem o gametfito feminino imerso em uma estrutura chamada vulo, podendo estar completamente livre, ou inserido em uma escama. Frequentemente, em gimnospermas, os vulos encontram-se em estruturas denominadas estrbilos (Figura 1A), que so vrios vulos e suas respectivas escamas, densamente arranjados sobre um eixo. Existe grande variao na estrutura do estrbilo, principalmente no grupo das conferas. O gro de plen produz uma estrutura chamada tubo polnico, dentro do qual o gameta verdadeiro encontrado. Isso pode ser observado nos grupos de Coniferophyta, como por exemplo, Pinus e Araucaria, e tambm nos grupos de Gnetophyta, como por exemplo, Ephedra. Em outros grupos de gimnospermas, dentro do tubo polnico encontra-se um anterozide ciliado que nada para fecundar o gameta feminino, apresentando assim ainda certa dependncia da gua para a fecundao. Isso pode ser observado apenas em alguns grupos de gimnospermas como Cycadophyta, por exemplo, Cycas e Zamia, e tambm em Ginkgophyta, como por exemplo, Ginkgo biloba. A semente forma-se a partir da unio desses dois gametas, mas importante ressaltar que nenhum fruto verdadeiro formado nas gimnospermas, apenas semente, por exemplo, o saboroso pinho das araucrias (Figura 1B). Em alguns casos, as sementes das gimnospermas podem se encontrar sobre um receptculo carnoso e colorido, derivado da fuso de duas brcteas que, s vezes, podem ser confundidos com frutos, por exemplo, em Podocarpus. Outra estrutura carnosa e colorida que envolve as sementes conhecida como arilo, desenvolve-se nos teixos (Taxaceae) e atua na disperso das sementes por pssaros (Figura 1C). O outro grande grupo de espermatfitas, as angiospermas, facilmente reconhecido pela produo de flores. Nas angiospermas, o vulo similar ao das gimnospermas, mas difere por estar dentro de uma estrutura especial fechada, conhecida como carpelo. Supe-se que essa estrutura seja derivada de uma folha modificada. Nas angiospermas, o gro de plen possui parede nica e caracterstica, em vez de entrar diretamente pela micrpila como nas gimnospermas, aterrissa no estigma. O encontro dos gametas proporcionado pelo tubo polnico que cresce pelo estilete at a micrpila e ento penetra o vulo, permitindo a entrada de dois gametas masculinos no gametfito feminino, um fertiliza o gameta feminino produzindo o zigoto diplide e o outro se une s clulas polares formando o endosperma triplide que nutrir o embrio durante seu desenvolvimento, a chamada. Outra caracterstica das angiospermas que tanto o gametfito feminino como o masculino so usualmente encontrados em estruturas especficas ao longo do mesmo eixo floral ou da mesma flor. Essa consiste em uma das estruturas mais variveis em formas e cores nas plantas. Isso ocorre, pois esse grupo de plantas ao mesmo tempo que tem suas estruturas reprodutivas reduzidas em tamanho, possui tambm um refinado sistema de disperso dos gros de plen, a polinizao, havendo, assim, um investimento em atrair polinizadores ou utilizar recursos abiticos para a transferncia do plen. Todo esse esforo adaptativo das angiospermas proporcionou o desenvolvimento de uma vasta gama de cores e formas das estruturas florais, dando a algumas caractersticas certo destaque como, por exemplo, na produo de ptalas vistosas, como nas azalias, ou em modificaes de ptalas como o estandarte e a carena observados na famlia do feijo (Fabaceae). Outra estrutura que tambm apresenta 8
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2. Diversidade morfolgica das espermatfitas

especializaes variadas o estame, como aqueles fundidos corola, como na famlia da menta (Lamiaceae) ou aqueles estames com comprimentos diferentes (didnamos) (Figura 1D) como nos ips (Bignoniaceae). Em certos grupos, os estames se tornaram estreis e se transformaram em nectrios como nos lrios (Liliaceae). Outras plantas apresentam nectrios extraflorais como os elaiforos presentes na famlia da acerola (Malpighiaceae), que servem como recompensa aos polinizadores. Outra estrutura que chama ateno dos polinizadores so as brcteas grandes e coloridas como no bico-de-papagaio (Euphorbiaceae) ou nas primaveras (Nyctaginaceae). Tradicionalmente, as angiospermas eram classificadas em dicotiledneas e monocotiledneas. A partir de 1998, um sistema de classificao conhecido como APG (Angiosperm Phylogeny Group) revolucionou a classificao por ser construdo com base em seqncias de nucleotdeos de regies do DNA (dados de biologia molecular) e fazer uso da sistemtica filogentica, que se baseia em grupos derivados a partir de um nico ancestral comum (monofiltico). Atualmente, o sistema proposto considera que as angiospermas apresentam vrias linhagens evolutivas que podem ser facilmente caracterizadas. Entre elas, algumas linhagens com poucos membros e outras duas muito grandes que compreendem o grupo das monocotiledneas (que formam um grupo monofiltico) e o grupo das eudicotiledneas. importante salientar que o grupo conhecido como dicotilednea, hoje no considerado como um agrupamento taxonmico, uma vez que as evidncias mostram que esse grupo no derivado de um ancestral comum ( polifiltico) e, atualmente, seus membros esto distribudos em vrios outros grupos informais como as angiospermas basais e as eudicotiledneas (Figura 1G). Algumas linhagens pequenas e distintas de plantas com flores so conhecidas como angiospermas basais ou angiospermas mais antigas, entre elas esto plantas com numerosas peas florais e com perianto que no possui uma separao ntida entre clice e corola, como as magnlias (Magnoliaceae), as anonas (Annonaceae) e as ninfias (Nymphaeaceae). As monocotiledneas incluem plantas bem familiares como as gramneas (Poaceae), os lrios (Liliaceae), as orqudeas (Orchidaceae) e as palmeiras (Arecaceae); elas se caracterizam por apresentar as partes das flores em nmero de trs elementos (flores trmeras), alm de possurem plen monoaperturados (possuindo um poro ou sulco). Entre as monocotiledneas, alguns grupos merecem destaque na especializao, como as gramneas que apresentam flores geralmente inconspcuas que se adaptaram para a polinizao pelo vento, produzindo uma grande quantidade de plen que ser levado pelo vento, enquanto seus estigmas so amplos e plumosos, eficazes para receber o plen. Outro grupo muito especializado so as orqudeas, essas representam a maior famlia das angiospermas, seu sucesso atribudo a alguns fatores como sua grande quantidade de vulos que, por sua vez, pode resultar em um nmero muito grande de sementes; todo o plen est reunido em estruturas chamadas polnias, sendo disperso de uma s vez; a simetria da flor e a forma de suas ptalas, como o labelo, tambm auxiliam no processo de polinizao (Figura 1E).

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Motta, L.B. & Furlan, C.M.

semente

arilo

C
0,5 cm 2 cm 1 cm

D
0,5 cm

0,5 cm

polnia

Flores do disco

Flor do raio 2 cm

Figura 1. Representao esquemtica evidenciando: (A) Estrbilo de Pinus; (B) Pinho de araucria; (C) sementes de Taxaceae com arilo; (D) Estames didnamos; (E) Flor de orqudea; (F) Flores de girassol reunidas em captulo; (G) rvore simplificada, mostrando os grandes clados reconhecidos atualmente (adaptado do APG 2003). Ilustraes: Motta, A.R. (baseado em Gonalves & Lorenzi, 2007).

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2. Diversidade morfolgica das espermatfitas

As eudicotiledneas so mais diversificadas e incluem quase todas as rvores, arbustos e ervas. Tradicionalmente, eram tratadas como dicotiledneas; elas se caracterizam por apresentar plantas que possuem as partes das flores em nmero de quatro ou cinco elementos, alm de possurem plen triaperturados (possuindo trs poros ou sulcos). Nessa linhagem, alguns grupos merecem destaque, como o grupo das rosdeas que formado pelas plantas com corola dialiptala (ptalas separadas), entre elas esto a goiaba (Myrtaceae), o feijo (Fabaceae) e a ma (Rosaceae), entre outras. Outro grupo de grande destaque o das asterdeas, formado por plantas que possuem corola gamoptala, entre elas esto, por exemplo, a hortel (Lamiaceae) e a batata (Solanaceae). Nesse grupo se posiciona tambm uma das famlias com o maior grau de especializao em termos evolutivos, a famlia do girassol (Asteraceae). Essas plantas apresentam flores reunidas em captulos, que no geral d aparncia de uma grande flor (Figura 1F). O captulo apresenta o amadurecimento de suas flores durante vrios dias, assim seus vulos so fecundados por plen de diferentes doadores, levando assim a uma grande diversidade; seus frutos possuem estruturas conhecidas como pappus, que auxiliam na disperso e que podem se aderir a plos de animais e serem levados por grandes distncias. Aps a polinizao, o ovrio das angiospermas usualmente a nica poro da flor que persiste e se desenvolve em frutos, uma caracterstica exclusiva do grupo das angiospermas. Os frutos, alm de contriburem para a proteo da semente, tambm auxiliam na sua disperso. possvel observar que a grande diversidade morfolgica encontrada atualmente entre as espermatfitas est relacionada aos processos de diversificao adaptativa durante a histria evolutiva desses grupos. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA GONALVES, E. & LORENZI, H. 2007. Morfologia Vegetal. Editora Instituto Plantarum de Estudos da Flora, Nova Odessa, 416p. JUDD, W.S.; CAMPBELL, C.S.; KELLOGG, E.A. & STEVENS, P.F. 1999. Plant Systematics: a Phylogenetic Approach. 2 edio. Sinauer Associates Publishers, Sunderland, 576p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 7 edio. Editora Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 830p. SIMPSON, M.G. 2006. Plant Systematics. Elsevier Academic Press, Londres, 590p. SOUZA, V.C. & LORENZI, H. 2005. Botnica Sistemtica: Guia Ilustrado para Identificao das Famlias de Angiospermas da Flora Brasileira, Baseado em APG II. Instituto Plantarum de Estudos da Flora, Nova Odessa, 640p.

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3. Diversidade da morfologia floral

3. DIVERSIDADE DA MORFOLOGIA FLORAL Dborah Yara A. Cursino dos Santos (dyacsan@ib.usp.br) Lucimar Barbosa da Motta (lugalll@yahoo.com.br)

Durante a conquista do ambiente terrestre e evoluo das plantas, mais especificamente durante o Cretceo, a flor surgiu como novidade evolutiva em uma linhagem de plantas (Anthophyta), provocando uma verdadeira revoluo no mundo dos vegetais. Essa estrutura representou um avano evolutivo, pois nesse grupo de plantas seus vulos e sementes no mais esto expostos diretamente ao meio externo, mas includos num ovrio, resultado do dobramento e soldadura das bordas do megasporofilo ou carpelo; dessa estrutura que envolve os vulos e sementes originou o nome do grupo - angiosperma, de origem grega (angio = vaso ou urna; sperma = semente). H controvrsias de como seriam as primeiras flores. Alguns fsseis indicam que seriam pequenas e com estruturas reduzidas, outros mostram flores grandes com peas florais desenvolvidas e em grande nmero. No obstante essa discusso, no h dvida que o surgimento e a fixao dessa novidade evolutiva tenham culminado na efetiva conquista de ambiente terrestre e o seu domnio pelas angiospermas. A flor consiste de um ramo caulinar de crescimento determinado, ou seja, um ramo que cresce por tempo limitado. Esse ramo apresenta folhas modificadas, dispostas nos ns, agora bem prximos, devido ao achatamento dos entrens. Muitas flores apresentam quatro conjuntos de apndices, dois estreis e dois frteis, ligados ao receptculo (parte do eixo na qual as peas florais esto inseridas), dispostos, muitas vezes, em crculos (verticilos) (Figura 1A). O verticilo mais externo na flor formado por peas muito similares a folhas, conhecidas como spalas. O conjunto das spalas chamado de clice. As spalas tm como funo principal guarnecerem o boto floral em seus estgios iniciais. As peas desse verticilo podem ser livres entre si (clice dialisspalo), ou podem ser unidas (clice gamosspalo). Internamente ao clice, aparece o verticilo formado por apndices foliceos, agora mais modificados, geralmente coloridos, chamados de ptalas, que em conjunto, so conhecidos como corola. Esse verticilo alm da proteo dos verticilos internos, tambm atua na atrao de polinizadores. As ptalas geralmente tm textura mais delicada que as spalas e apresentam diferentes cores; raramente so verdes ou negras. Os diferentes formatos e cores da corola esto muito relacionados aos diferentes polinizadores. Da mesma forma que o clice, a corola tambm pode apresentar as ptalas livres entre si (corola dialiptala) ou unidas (corola gamoptala). Ao conjunto dos verticilos estreis da flor (clice e corola) denomina-se perianto. Em alguns casos, as spalas e ptalas no so morfologicamente distintas, sendo ento denominadas tpalas. As peas do perianto nem sempre esto presentes. Uma flor que no possui clice e nem corola uma flor aclamdea; se possui apenas o clice (ou mais raramente, apenas a corola) uma flor monoclamdea; se possui clice e corola uma flor diclamdea. Acima (ou mais interno) s partes estreis da flor esto dispostos os veriticilos que contm a poro frtil desse rgo. O primeiro deles (mais externo) o androceu, formado por microsporofilos bastante modificados conhecidos como estames. Os estames so formados por uma parte estril denominada filete, 13
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Santos, D.Y.A.C. & Motta, L.B.

geralmente de forma alongada e que porta em sua poro apical uma estrutura denominada antera, dentro da qual os gros de plen so formados. O nmero de estames por flor bastante varivel, existindo desde flores com um s estame, at flores com numerosos estames. Apesar dessa variao, pode-se relacionar o nmero de estames com o de ptalas. Assim temos as flores isostmones, quando o nmero de estames igual ao nmero de ptalas; flores oligostmones, quando o nmero de estames menor do que o nmero de ptalas; e flores polistmones, quando o nmero de estames maior do que o nmero de ptalas. Os estames podem ser livres entre si ou unir-se atravs dos filetes formando um ou vrios grupos. Os estames so denominados monadelfos quando todos esto unidos em um s grupo; diadelfos quando unidos em dois grupos ou poliadelfos quando formam muitos grupos. Os estames podem estar inseridos diretamente no receptculo, sendo ento denominados estames livres desde a base, ou estarem adnatos (unidos) s ptalas, denominados, ento, epiptalos. A antera tem forma globosa, bilobada contendo em seu interior quatro microsporngios (ou sacos polnicos) arranjados em dois pares, onde so formados os gros de plen. Cada lobo da antera (teca) contm um par de sacos polnicos. A liberao do gro de plen se d atravs da deiscncia (abertura) da teca que pode ser por uma fenda longitudinal (deiscncia longitudinal ou rimosa), por poros localizados geralmente na poro apical da teca (deiscncia poricida), ou por uma ou duas valvas em cada teca (deiscncia valvar) (Figura 1B, 1C, 1D). A antera pode unir-se ao filete pela sua base (antera basifixa), pelo seu dorso (antera dorsifixa) ou, mais raramente, pelo pice (antera apicefixa). Os carpelos (apndices florais que contm os vulos) formam o verticilo mais interno da flor, denominado gineceu. Essas estruturas so megasporofilos que se dobram ao longo do seu comprimento e portam um ou mais vulos. Numa flor, os carpelos podem estar livres entre si, constituindo o gineceu apocrpico, ou unidos entre si, total ou parcialmente, constituindo o gineceu sincrpico (Figura 1E, 1F). O carpelo isolado ou o conjunto de carpelos fusionados chamado de pistilo O pistilo se divide em trs pores bem definidas denominadas de ovrio, estilete e estigma. A poro apical do pistilo o estigma que, na maioria das vezes apresenta uma superfcie glandulosa, pilosa ou rugosa que facilita a recepo e aderncia dos gros de plen. O estigma ligado ao ovrio pelo estilete que, geralmente, tem a forma alongada e cilndrica. A poro basal do pistilo normalmente dilatada e abriga os vulos, sendo denominada ovrio. O ovrio formado por carpelos fusionados, pode apresentar internamente um ou mais lculos. O nmero de lculos pode fornecer uma boa estimativa do nmero de carpelos daquele gineceu. A regio do ovrio onde se originam os vulos e na qual eles permanecem aderidos denominada de placenta, e essa pode apresentar arranjos variados (placentao) no ovrio. Em algumas flores com gineceu sincrpico, o ovrio apresenta vrios lculos com os vulos aderidos coluna central formada pela unio dos carpelos placentao axilar. De outra forma, esses vulos aparecem presos coluna central no ligada a parece externa do ovrio (placentao central livre). Nas flores com placentao parietal os vulos esto presos parede externa do ovrio (Figura 1G, 1H, 1I). Nesses dois ltimos casos, o ovrio deve ser unilocular. Quando existe somente um vulo, esse pode estar ligado base (placentao basal) ou ao pice (placentao apical) do ovrio. Flores com gineceu apocrpico geralmente apresentam ovrios com placentao marginal (vulos presos s margens da regio de soldadura do carpelo). 14
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3. Diversidade da morfologia floral

De acordo com a posio de insero das peas florais (perianto e androceu) no receptculo em relao posio do gineceu, o ovrio pode ser dito spero, quando est livre e as demais peas florais se localizam abaixo ou em torno do gineceu, ou nfero, quando as spalas, ptalas e estames se inserem, aparentemente, prximas ao topo do ovrio (Figura 1J, 1K). Muitas plantas apresentam o perianto fusionado aos estames formando uma extenso do receptculo, em forma de taa, chamada de hipanto. Flores com ovrio spero sem hipanto so ditas hipginas (peas florais inseridas abaixo do ovrio). Quando h formao do hipanto, as flores podem ser perginas (peas florais inseridas em um receptculo cncavo, livre da parede do ovrio, ou aderido a ele, at metade do seu comprimento) ou epginas (peas florais inseridas em um receptculo cncavo completamente aderido a parede do ovrio ovrio nfero). Da mesma forma que os verticilos estreis (clice e corola), no so todas as flores que apresentam androceu e gineceu. Quando as flores apresentam estames e pistilo so ditas perfeitas (bissexuadas) ou hermafroditas ou monoclinas (do grego: mono = nico, kline = cama ou leito). No caso de apresentarem somente androceu (flores estaminadas) ou somente o gineceu (flores pistiladas) so chamadas flores imperfeitas (unissexuais) ou diclinas (do grego: di = dois, kline = cama ou leito). Quando flores estaminadas e pistiladas ocorrem na mesma planta, esta denominada monica (do grego: monos = nico, oikos = casa), porm quando essas flores (estaminadas ou pistiladas) so encontradas em plantas separadas, essas plantas so conhecidas como diicas (do grego: di = dois, oikos = casa). Outro aspecto interessante relacionado s flores sua simetria. Algumas flores apresentam suas peas florais dispostas de maneira uniforme no receptculo, permitindo mais de um plano de simetria, sendo denominadas actinomorfas. No caso de flores que apresentam uma ou mais peas florais diferenciadas, permitindo um s plano de simetria, a flor zigomorfa (Figura 1L, 1M). Quando no podem ser traados planos de simetria as flores so chamadas assimtricas. Uma flor denominada de completa se todos os verticilos (clice, corola, androceu e gineceu) esto presentes. Se qualquer um deles estiver faltando, a flor chamada incompleta. Assim, uma flor imperfeita (unissexuada) tambm incompleta, porm nem toda flor incompleta imperfeita, pois estames e carpelos podem estar presentes. As flores podem ser solitrias ou estar agrupadas de diversas maneiras, em estruturas conhecidas como inflorescncias. Esse conjunto de flores categorizado segundo sua ontognese. Existem muitos tipos de inflorescncias, sendo os mais comuns os racemos (conhecidos como cachos), que apresentam crescimento indeterminado, e os captulos, nos quais as flores se dispem em um receptculo plano, sugerindo muitas vezes, no seu conjunto, uma nica flor. Nessa aula, estudaremos a estrutura de algumas flores buscando entender a diversidade no arranjo de suas peas florais.

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Estame (androceu)

D - Valvar

Ptala (corola)

Perianto Filete Spala (clice) Receptculo


A

Abertura da antera

C- Poricida

Teca

Antera

B - Rimosa ou longitudinal

Pednculo

Estigma

Estilete

Ovrio

M - Zigomorfa H - Central livre I - Parietal K - nfero

F - Sincrpico

Pistilo (gineceu)

Figura 1. Representao esquemtica da morfologia floral. (A) Vista geral de uma flor completa. Tipo de abertura da antera: (B) rimosa, (C) poricida e (D) valvar. Tipo de fuso de carpelos: (E) apocrpico e (F) sincrpico. Tipo de placentao: (G) axial, (H) central livre e (I) pariental. Tipo de posio de ovrio: (J) spero e (K) nfero. Simetria da flor: (L) actinomorfa e (M) zigomorfa. Ilustraes: Motta, A.R. (baseado em Gonalves & Lorenzi, 2007). 16
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Posio dos ovrios

Fuso dos carpelos

E - Apocrpico

G - Axial

Placentao

J - Spero

L - Actinomorfa

Simetria da flor

3. Diversidade da morfologia floral

LISTA DE MATERIAL NECESSRIO Estilete Flor de azalia Flor de hibisco Flor de lrio Girassol (ou qualquer margarida grande) Lmina de barbear Lupa conta-fios Placa de Petri

PROCEDIMENTOS 1. Pegue a flor do material nmero 1 e procure identificar todas suas partes. Se necessrio utilize uma lupa conta fios. a. Observe as ptalas, as spalas, o ovrio e os estames. b. Observe a forma das peas do perianto. Essas peas se assemelham a qual outro rgo vegetal? c. Observe o androceu. Identifique as partes dos estames: filete, antera e conectivo.

d. Observe o gineceu. Identifique as partes: ovrio, estilete e estigma. e. Corte o ovrio e observe o que tem dentro. Quando o fruto amadurece, em que se transformam essas estruturas? 2. Analise da mesma forma as flores dos demais materiais oferecidos. 3. Discuta com os seus colegas e responda: a. Qual a funo de cada uma das partes observadas? 4. Discuta com os seus colegas e complete o quadro abaixo, comparando os materiais.

CARACTERSTICAS Planta Clice (conjunto de spalas) Nmero Livres ou fundidas Colorao Corola (conjunto de ptalas) Nmero Livres ou fundidas Colorao Distino entre clice e corola Androceu (conjunto de estames) Nmero Livres ou fundidos Abertura da antera e plen Gineceu Nmero de ovrios por flor Nmero de vulos no ovrio

Material 1

Material 2

Material 3

Material 4

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5. Analise agora o girassol e responda: a. Qual a principal diferena entre o girassol e o material 1? b. Todas as partes observadas no material 1 podem ser vistas no girassol? 6. Observe os materiais em demonstrao. Veja as diferentes formas de organizao das flores nas angiospermas. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA GONALVES, E. & LORENZI, H. 2007. Morfologia Vegetal. Editora Instituto Plantarum de Estudos da Flora, Nova Odessa, 446p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 6 Ed. Editora Guanabara Koogan. 830p. SIMPSON, M.G. 2006. Plant Systematics. Elsevier Academic Press, Londres, 590p. SANTOS, D.Y.A.C.; CECCANTINI, G. & SANO, P.T. 2004. Diversidade floral. In: Santos, D.Y.A.C. & Ceccantini, G. (org.). Propostas para o Ensino de Botnica. Manual do Curso para Atualizao de Professores dos Ensinos Fundamental e Mdio. Apostila do Departamento de Botnica, Universidade de So Paulo, 48p. (http://felix.ib.usp.br/Apostila_PEB.pdf)

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4. Reconhecimento dos grandes grupos de plantas

4. RECONHECIMENTO DOS GRANDES GRUPOS DE PLANTAS Amanda Wanderley (amanda_bio@uol.com.br) Lgia Maria Ayres (ligia_ayres@yahoo.com.br)

A cincia um campo muito dinmico e natural que os sistemas de classificao estejam em constante transformao. O sistema de cinco reinos proposto por Robert Whittaker em 1969, que perdura at hoje em muitos dos livros didticos considera primordialmente semelhanas morfolgicas e fisiolgicas. Atualmente, muitos trabalhos utilizam ferramentas de biologia molecular para elucidar as relaes de parentesco entre os diversos organismos, revelando que muitos dos grupos antes estabelecidos no possuem qualquer significado taxonmico e, portanto, novas filogenias tm sido adotadas. Uma nova proposta de filogenia foi concebida por Carl R. Woose em 1978, incluindo dados de biologia molecular e agrupando os seres vivos em trs grandes domnios: Archaea, Bacteria e Eukarya. Posteriormente, surgiram vrias hipteses de filogenias para cada um dos respectivos domnios. Um dos sistemas de classificao de eucariontes mais atuais representa aquele proposto por Baldauf (2003), no qual os eucariontes foram agrupados em oito grandes grupos (Figura 1).

Figura 1. Representao esquemtica de filogenia de consenso dos eucariotos. Modificado de Baldauf (2003). 19
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De forma particular, trataremos aqui apenas os organismos fotossintetizantes que possuem clorofila a e liberam oxignio no processo de fotossntese: algas (procariontes e eucariontes), brifitas, pteridfitas, gimnospermas e angiospermas, nem todos pertencem necessariamente linhagem das plantas verdes (Figura 2).
Spermatophyta Tracheophyta Embryophyta Brif itas Pteridf itas Gimnospermas

Figura 2. Hiptese da filogenia da linhagem das plantas verdes. Nomes entre aspas () no correspondem a categorias taxonmicas pois no so monofilticos. Modificado de Raven et al. (2007). A seguir, caracterizamos brevemente os grupos vegetais que podemos reconhecer nos ambientes que nos cercam, enfatizando a morfologia externa, as adaptaes para absoro de gua e sua organizao dentro da planta e aspectos relacionados reproduo. importante salientar que, com exceo das angiospermas (Anthophyta), todos esses grupos so desprovidos de significado taxonmico pelo seu carter polifiltico (Figura 2). Os fungos, tradicionalmente estudados em botnica, no sero abordados aqui por se tratar de organismos mais relacionados aos animais do que s plantas. Algas O grupo das algas abrange organismos muito diversos, inclusive procariontes (Cyanobacteria), no constituindo, portanto, uma categoria taxonmica. As algas esto agrupadas em filos conforme a organizao do talo, pigmentao, constituio da parede celular e substncias de reserva. Existem formas unicelulares, coloniais, pluricelulares (filamentosas ou parenquimatosas) e cenocticas. As algas so organismos avasculares e, portanto, sem organizao de raiz, caule e folhas. A maioria de seus representantes aqutica, mas alguns vivem no ambiente terrestre, crescendo sobre tronco de rvores, por exemplo. As algas verdes (Chlorophyta) so as mais comuns no ambiente terrestre e na gua doce e, 20
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4. Reconhecimento dos grandes grupos de plantas

portanto, mais acessveis aos professores que desejem us-las em aulas prticas. Tambm fazem parte deste grupo Euglenophyta (euglenfitas), Rhodophyta (algas vermelhas), Phaeophyta (algas pardas), Bacillariophyta (diatomceas) e Dinophyta (dinoflagelados). Hoje se sabe que tais filos so pouco relacionados entre si, e que apenas as algas verdes e vermelhas possuem parentesco direto com Embryophyta (plantas que produzem embrio) (Figura 1), tambm denominadas plantas terrestres. Devido s semelhanas bioqumicas, ultra-estruturais, detalhes da diviso celular e dados de biologia molecular, considera-se que um pequeno grupo de Chlorophyta, chamada Charophyceae (alguns autores consideram esse grupo como um filo distinto, Filo Charophyta), deu origem s embrifitas. A hiptese considerada mais plausvel que um grupo de algas verdes relacionadas s Charophyceae teria originado um organismo desconhecido que seria o ancestral comum entre formas de brifitas e de pteridfitas. Brifitas Assim como as algas, o grupo das brifitas constitudo por organismos avasculares. Entretanto, as brifitas possuem gametas masculinos e femininos envolvidos por uma camada de clulas estreis, formando os chamados anterdeos e arquegnios, respectivamente. Este envoltrio protege os gametas contra dessecao e representa um grande passo para a sobrevivncia no meio terrestre. Atualmente, o termo brifitas no representa uma categoria taxonmica, pois, com o avano dos estudos filogenticos, o que era compreendido pelo antigo filo Bryophyta hoje est divido em trs filos: Hepatophyta (hepticas), Anthocerophyta (antceros) e Bryophyta (musgos) (Figura 2). H discordncia quanto ao grupo que teria divergido mais cedo e qual seria o mais prximo a Tracheophyta (plantas vasculares). Entretanto, com o advento da biologia molecular, parece mais plausvel que as hepticas tenham divergido primeiramente e os musgos sejam os mais aparentados a Tracheophyta (Figura 2). As brifitas vivem em locais midos e sombrios e atingem apenas poucos centmetros de comprimento. Neste grupo, o gametfito (haplide, n) a fase dominante e o esporfito (diplide, 2n) dependente do gametfito. Nos musgos, o gametfito composto por foldeos em disposio espiralada em torno do cauldeo e o esporfito constitudo por uma haste alongada (seta) e uma cpsula, dentro da qual so produzidos os esporos. A fase gametoftica das hepticas e dos antceros constitui-se em um talo lobado. A fase esporoftica das hepticas composta por um p, uma curta seta e uma cpsula, enquanto a dos antceros formada por um p e uma cpsula longa e cilndrica. No possuem sistema radicular, de modo que a absoro de gua e sais minerais feita por clulas alongadas chamadas rizides localizadas na poro inferior do talo. Alm da ausncia de vasos condutores e de mecanismos eficientes para a conservao da gua absorvida, a distribuio do grupo limitada pelo fato de os gametas masculinos moverem-se por flagelo, implicando na necessidade de um meio aquoso para que haja a fecundao da oosfera. Pteridfitas O grupo das pteridfitas compreende organismos vascularizados e pertence, juntamente com gimnospermas e angiospermas, ao grupo Tracheophyta. Como as brifitas, possuem anterdeos e arquegnios e os gametas masculinos possuem flagelos (tambm com dependncia de gua para a reproduo sexuada), porm estas plantas so maiores e apresentam o esporfito como fase dominante (caracterstica predominante a partir deste grupo), o qual apresenta grande variedade de formas. 21
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Distinguem-se das demais traquefitas pela ausncia de sementes, sendo, por isso, tambm denominadas traquefitas sem sementes. Seus representantes viventes so atualmente divididos em quatro filos: Psilotophyta (psilotum), Sphenophyta (cavalinhas), Lycophyta (licopdios, selaginelas) e Pterophyta (samambaias, avencas); assim como brifitas, pteridfitas tambm j no constituem uma categoria taxonmica, embora ambos ainda sejam utilizados pelos livros didticos. Psilotum no possui razes nem folhas e apresenta esporngios agregados em grupos de trs nas terminaes dos ramos, formando uma estrutura denominada sinngio. Nas cavalinhas, licopdios e selaginelas, os esporngios encontram-se dispostos na base de folhas modificadas (esporofilos), formando uma estrutura denominada estrbilo. Nas samambaias e avencas, os esporngios apresentam-se agrupados em soros na parte inferior das folhas, que geralmente so compostas (frondes). Em algumas espcies, os soros so protegidos por indsio, uma projeo da folha. Gimnospermas So plantas vascularizadas e com sementes, pertencentes a Spermatophyta. Gimnosperma significa literalmente semente nua, ou seja, as sementes encontram-se expostas na superfcie de esporofilos. As gimnospermas atuais incluem quatro filos: Cycadophyta (cicadfitas), Ginkgophyta (ginkgo), Conipherophyta (pinheiros, araucrias, sequias) e Gnetophyta (gnetfitas), novamente, pelo carter polifiltico do grupo, gimnosperma no representa uma categoria taxonmica. Caractersticas morfolgicas e dados moleculares tm fornecido apoio crescente idia de que Gnetophyta o grupo de gimnospermas mais relacionado s angiospermas. A semente a unidade de disperso destas plantas e constituda por um envoltrio, um embrio e material de reserva. A semente representa um considervel progresso evolutivo para a vida fora da gua: o embrio permanece em estado quiescente at que as condies sejam favorveis ao seu crescimento. Na maioria das gimnospermas, a gua no mais essencial para o transporte dos gametas masculinos at as oosferas. Aqui, o gametfito masculino parcialmente desenvolvido, o gro de plen, transferido pelo vento at as proximidades do gametfito feminino no interior de um vulo (polinizao). Depois da polinizao, o gametfito masculino produz uma expanso, o tubo polnico, atravs do qual o gameta masculino imvel transportado para a oosfera dos arquegnios. Angiospermas As angiospermas, Filo Anthophyta, so vascularizadas, apresentam sementes, flores verdadeiras e frutos. Formam o grupo mais diversificado de plantas, com mais de 250 mil espcies. Suas caractersticas mais marcantes so a formao de ramos de crescimento determinado, nos quais as folhas se transformam nos apndices florais (spalas, ptalas, estames e pistilos - uma flor tpica) e a presena de frutos nos quais ficam encerradas as sementes. A reproduo basicamente igual a das gimnospermas, ocorrendo aqui uma reduo ainda maior dos gametfitos, que no caso feminino geralmente formado por sete clulas, uma delas com dois ncleos. No caso do masculino, o gro de plen formado por apenas duas ou trs clulas. Este germina sobre o estigma e forma um longo tubo polnico que leva a clula gamtica atravs das estruturas femininas at fecundar a oosfera e os ncleos centrais, originando o embrio e o endosperma, respectivamente.

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4. Reconhecimento dos grandes grupos de plantas

Liquens No constituem uma categoria taxonmica, pois so formados por uma associao de organismos que vivem em simbiose mutualstica. Estes organismos so os fungos (geralmente ascomicetos) e as algas, Chlorophyta ou Cyanobacteria. A maior parte do corpo do lquen composta pelo fungo, que absorve os nutrientes orgnicos produzidos pelas algas, que, por sua vez, obtm proteo contra dessecao e excesso de luz. O talo do lquen pode ser classificado em folhoso, gelatinoso, crostoso e fruticoso. O lquen pode propagar-se apenas assexuadamente, a partir de estruturas denominadas sordios, pacotes com clulas da alga envoltas por hifas do fungo, ou a partir de isdios, pequenas projees do talo. Os liquens so pioneiros na colonizao de superfcies inspitas, propiciando as condies necessrias para o crescimento de outros organismos. Alm disso, os liquens so bons indicadores ambientais, uma vez que sua diversidade inversamente proporcional poluio atmosfrica. Como uma forma de melhor aprendizado e fixao dos conhecimentos ser realizada uma atividade prtica com o objetivo de identificar e caracterizar alguns dos grandes grupos tradicionalmente estudados em botnica: algas, brifitas, pteridfitas, gimnospermas, angiospermas e liquens. LISTA DE MATERIAL NECESSRIO Bandejas plsticas Barbante Cartolina branca para herborizar o material Chapa de metal ou plstico Conta gotas ou pipeta de Pasteur Folhas de jornal Giletes Lmina Lamnula Lupa de mo Microscpio e esteromicroscpio Papelo Placa de Petri Prensas de madeira Pinas de ponta fina

PROCEDIMENTOS Em laboratrio, as equipes recebero exemplares de cada grupo a ser estudado, coletados no fitotrio do Departamento de Botnica, IB-USP. As plantas selecionadas podem ser facilmente encontradas em jardins e praas da cidade ou at mesmo na casa dos alunos. 1. Compare, macroscopicamente, algas e brifitas; atente para as estruturas reprodutivas; 2. Compare, macroscopicamente, brifitas e pteridfitas; atente para as estruturas reprodutivas; 3. Compare os estrbilos de pteridfitas e gimnospermas; 4. Compare as flores de angiospermas; 5. Observe, em demonstrao, um corte transversal de um lquen. Identifique os organismos que o compe; 6. Herborize os diversos exemplares; HERBORIZAO: o material a ser herborizado deve, preferencialmente, conter estruturas que permitam a posterior identificao da planta, tais como folhas, flores ou outras estruturas reprodutivas. 1. Coloque o material sobre uma cartolina clara, em disposio adequada para observao das estruturas de interesse. No caso das algas, a cartolina deve ser colocada em uma bandeja com gua e o material disposto sobre a cartolina molhada; 23
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2. Com o auxlio de uma chapa de metal ou plstico, retire a cartolina da gua cuidadosamente para que o arranjo da alga no se desfaa; 3. Coloque a cartolina entre folhas de jornal; 4. Empilhe todas as exsicatas entre dois pedaos de papelo e coloque este conjunto entre duas prensas de madeira, amarrando firmemente com barbante; 5. Coloque para secar em estufa ventilada. Tambm possvel secar o material em forno, aps aquecimento e desligamento do mesmo. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA BALDAUF, S.L. 2003. The deep roots of eukaryotes. Science 300: 1703-1706. OLIVEIRA, E.C. 2003. Introduo Biologia Vegetal. 2 edio. Editora da Universidade de So Paulo, So Paulo, 267p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 7 edio. Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 830p.

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5. A relao do homem com os oceanos e seus vegetais

5. A RELAO DO HOMEM COM OS OCEANOS E SEUS VEGETAIS Flvio Berchez (fberchez@ib.usp.br) Natlia Ghilardi (natalinoel@gmail.com) Marcos Buckeridge (msbuck@usp.br)

A influncia dos oceanos e seus vegetais no nosso dia-a-dia Os oceanos recobrem a maior parte da superfcie do nosso planeta, atingindo profundidades de at 11 km. Ainda que quando o planeta seja visto como um todo e seus oceanos compreendam apenas uma fina pelcula, eles tm uma importncia fundamental para a manuteno das condies de vida na Terra, tendo grande influncia tambm na atmosfera. As massas de gua que compem os oceanos esto em movimento permanente. Em termos globais, observam-se as imensas correntes ocenicas que funcionam como grandes rios, transportando seus enormes volumes de gua e componentes (por exemplo, substncias orgnicas e inorgnicas) de um ponto a outro do globo. Essas correntes funcionam tambm como imensos radiadores, possibilitando a troca de calor e regulando as temperaturas na atmosfera e mantendo-a relativamente estvel. Um bom exemplo dessa ao o caso do fenmeno El Nio (El Nio-Oscilao do Sul, ENOS), que provoca um aquecimento das guas superficiais do Oceano Pacfico, o qual tem grandes conseqncias no nosso pas, desde a Floresta Amaznica at a Regio Sul, regulando principalmente a umidade e a circulao atmosfrica, com conseqncias drsticas para o ser humano, por exemplo, no que se refere agricultura e ao abastecimento de gua. possvel distinguir basicamente dois tipos de correntes, as frias e as quentes. As primeiras so provenientes das regies mais prximas aos plos, sendo muito ricas em nutrientes. Por isso, possibilitam o desenvolvimento abundante de organismos marinhos, principalmente quando atingem regies mais quentes e ganham calor. Em contraste, as correntes quentes j tiveram seus nutrientes consumidos ao longo de sua passagem pelos trpicos; elas se dirigem para as regies polares, onde iro perder calor e se tornaro progressivamente mais ricas, uma vez que h menos seres vivos para consumir os nutrientes que nela se acumulam. O desenvolvimento dos organismos marinhos fundamental para a manuteno da composio atmosfrica. Por exemplo, uma grande parcela da renovao do oxignio conseqncia da fotossntese do fitoplncton (vegetais marinhos, microalgas marinhas, em sua maioria unicelulares, que vivem nas camadas superficiais do mar), processo que consome o gs carbnico (CO2) e libera oxignio (O2). Por esse processo, esses minsculos organismos so responsveis pela renovao da maior parte do oxignio da atmosfera, que corresponde a 21% de sua composio. Essa renovao leva, aproximadamente, 2.000 anos para acontecer. Acredita-se que o oxignio da atmosfera sempre tenha tido origem biolgica. Essa molcula no existia na atmosfera ancestral da Terra, tendo sido produzido inicialmente por algas azuis (cianobactrias), tambm marinhas e microscpicas, durante os primrdios da vida, no perodo Pr-cambriano. Esse teria sido o primeiro fenmeno de mudana global causada por seres vivos, permitindo, da em diante, o

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Berchez, F.; Ghilardi, N. & Buckeridge, M.

desenvolvimento de diversos organismos com respirao aerbia que hoje dominam amplamente tanto os ambientes marinhos como os terrestres. Esses exemplos mostram claramente a importncia dos oceanos e seus vegetais na manuteno das condies nos mares e na atmosfera, na ciclagem de nutrientes e de organismos que dependem deles, na renovao do oxignio e nas diversas atividades humanas, entre outros, atividades todas partcipes no nosso dia-a-dia. Na regio sudeste do Brasil, a principal corrente marinha a Corrente do Brasil, que flui no sentido sul, junto superfcie, paralelamente costa e corrente fria ACAS (gua Central do Atlntico Sul) de fluxo predominante em direo ao norte. Como a gua fria mais densa, essa corrente corre junto ao fundo ocenico, aflorando apenas em condies especiais como, por exemplo, na regio de Cabo Frio, no Rio de Janeiro. No vero essas guas frias tendem a se aproximar mais da costa, propiciando, nesses casos, noites com temperaturas bem amenas, principalmente nas cidades a beira-mar, mas com seus reflexos atingindo regies bem mais distantes, como por exemplo, a cidade de So Paulo. Em funo das condies geradas por essas correntes e pelo tipo de substrato, encontramos no Brasil vrios tipos de ambientes onde ocorrem vegetais marinhos (algas e angiospermas marinhas). O primeiro deles seria a prpria coluna dgua, contendo o fitoplncton, que pode ser definido como sendo o conjunto de microalgas que vivem na coluna de gua, mas que tm poder limitado de locomoo sendo, portanto, transportadas passivamente pelas correntes e pelos movimentos de gua. Um segundo tipo de ambiente seria o prprio substrato. Os organismos desse ambiente constituem o bentos, denominao dada por viverem sobre o substrato ocenico, sendo fixos ou mveis. As comunidades marinhas bentnicas podem ser divididas arbitrariamente naquelas de fundos areno-lodosos, no-consolidados, sobre os quais, de forma geral, poucos organismos marinhos conseguem se fixar, sendo exemplo disso as angiospermas marinhas existentes na regio de Abrolhos e naquelas de fundos duros, consolidados. Dentro desta ltima categoria podem ser destacados os costes rochosos, os recifes de arenitos, os recifes de corais e os bancos de algas calcrias. Em todos esses ambientes, que descreveremos abaixo, da mesma forma que nos ambientes terrestres, os vegetais ocupam grande parte do substrato e tm grande importncia ecolgica, no s como produtoras de oxignio, mas tambm como base da cadeia alimentar marinha. Entretanto, cabe ressaltar que, contrariamente ao que ocorre na terra, onde as angiospermas so dominantes, na grande maioria dos ecossistemas marinhos as algas constituem o grupo de organismos mais importante. A denominao ecossistemas de costo rochoso se refere quelas comunidades assentadas sobre rochas do tipo gnaisse ou granito, sendo situados, em sua maior parte, onde elevaes costeiras se encontram com o mar. Ocorrem desde Torres, norte do Rio Grande do Sul, at o Estado do Maranho, com maior extenso linear na regio sudeste, onde o litoral se apresenta bastante recortado e a Serra do Mar fica mais prxima da linha de costa. Podem ser encontrados na forma de paredes contnuos ou de blocos fragmentados, neste caso com inmeras facetas que resultam em um grande nmero de habitats e em uma grande diversidade biolgica. De forma geral, se estendem pouco em direo ao mar, pois apresentam declividade acentuada e logo atingem o fundo com substrato no-consolidado. Na regio continental

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5. A relao do homem com os oceanos e seus vegetais

apresentam profundidade mxima normalmente ao redor de 10 a 15 m, embora em ilhas possam ser mais profundos. Os ecossistemas de recifes de arenito compreendem as comunidades existentes sobre rochas de origem metamrfica que acompanham as plancies costeiras desde o litoral do Estado do Esprito Santo at o nordeste, ocorrendo tanto junto praia como formando barreiras a certa distncia do mar. So caracterizados por formarem um substrato bastante erodido, apresentando inmeras fendas e cavidades que, como nos costes rochosos, resultam em uma alta diversidade. Os ecossistemas de recifes de coral so estruturas calcrias de origem biolgica relacionadas ao de corais e de algas coralinceas crostosas (ver definio abaixo), as quais, como os primeiros, tambm precipitam uma matriz de carbonatos. Estas formaes consolidadas so usadas como suporte e abrigo por inmeros outros organismos, resultando em uma grande biodiversidade. Os recifes coralinos se distribuem em manchas ou cordes em vrios pontos da costa, especialmente no nordeste do pas. Sua distribuio mais restrita que os ecossistemas de costo rochoso, embora no litoral da Bahia, na regio do Arquiplago de Abrolhos, se estendam por uma vasta rea, constituindo-se no maior complexo recifal do Atlntico Sul. Os ecossistemas de bancos de algas calcrias so resultantes do crescimento de algas crostosas (Corallinaceae), cujo crescimento forma incrustaes calcrias laminares, ndulos avermelhados (os rodolitos) ou blocos calcrios de diferentes tamanhos que, primeira vista, tem o aspecto de pedras. Essas estruturas consolidadas aparecem geralmente sobre substrato no-consolidado, constitudo por um cascalho calcrio resultante de sua prpria fragmentao. So utilizadas como suporte por uma grande diversidade de organismos, incluindo algas foliceas ou carnosas e vrios grupos de invertebrados que vivem sobre eles ou no interior de suas cavidades. De forma semelhante aos recifes de coral, essa tambm uma formao calcria de origem biolgica. Esses ecossistemas, embora muito pouco conhecidos no Brasil, ocupam reas imensas da plataforma continental, indo desde o limite inferior das mars mais baixas at cerca de 100 m de profundidade. So encontrados, com algumas descontinuidades, desde o litoral norte do Rio de Janeiro at o Maranho, embora manchas isoladas ocorram tambm em Santa Catarina. A existncia de substrato consolidado em uma rea to extensa tem grande importncia ecolgica e econmica, pois resulta em uma maior diversidade e biomassa de organismos, alguns com importncia econmica direta como, por exemplo, lagostas e diversas espcies de peixes, ou indireta, na alimentao e como berrio de espcies comerciais. Alm dos ambientes j descritos, cabe mencionar os ecossistemas de manguezal que, em sua maioria, ocupam extensas reas na regio das plancies costeiras de confluncia de rios com o mar. Embora de fundo no consolidado, permitem a fixao de organismos macroscpicos sobre a poro de caules e razes sujeitas inundao pelas mars altas. Com alta concentrao de nutrientes e oferecendo um ambiente mais protegido do que o mar aberto, os manguezais so especialmente importantes como locais de procriao e sobrevivncia de formas juvenis de peixes e crustceos. Em todos estes ecossistemas encontram-se diversos vegetais que apresentam importncia para o homem, direta ou indireta. As algas e angiospermas marinhas so a base da cadeia alimentar nos oceanos, sendo a principal fonte de alimento para muitos organismos que sero posteriormente consumidos pelo 27
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homem, como peixes, moluscos, equinodermos e crustceos. Alm disso, algas usadas na alimentao, como Porphyra (nori), ou pelas indstrias alimentcia, farmacutica e cosmtica, como Pterocladiella, Gracilaria, Hypnea e Sargassum, entre outras, so encontradas ocupando diferentes zonas destes ambientes. Por exemplo, os bancos de Laminaria, alga importante como fonte de alginato, localizam-se sobre os rodolitos na plataforma continental do estado do Esprito Santo, na regio conhecida como Mar das Bananeiras. A influncia do dia-a-dia do homem nos oceanos e seus ecossistemas Embora a influncia dos oceanos sobre o homem e todos os seres vivos seja imensa, o impacto antrpico, por outro lado, sobre os ecossistemas marinhos vem sendo igualmente muito grande. Impactos locais so inmeros, observados, por exemplo, em bancos de pesca ou nos arredores de metrpoles costeiras e grandes reas porturias, com alteraes drsticas da biodiversidade local e da estrutura das comunidades. Em relao aos vegetais, temos relatos de populaes naturais de algas marinhas que foram completamente dizimadas no Brasil devido explorao predatria, iniciada na dcada de 40 e feita sem base em estudos da biologia e ecologia dessas populaes. Como exemplo, podemos citar os bancos de Maracaja no Estado do Rio Grande do Norte, hoje praticamente inexistentes. Por outro lado, observam-se tambm impactos no planeta, como a camada de leo que atualmente encontrada recobrindo praticamente toda superfcie dos oceanos, o que certamente prejudica o equilbrio gasoso entre esses e a atmosfera. As alteraes globais do clima, relacionadas ao aumento da concentrao do CO2 na atmosfera, cuja principal conseqncia o aquecimento global, tm grandes implicaes paras os ambientes marinhos. Um dos exemplos o aumento da intensidade e freqncia das grandes tormentas e furaces, que resultam em grandes aumentos na agitao da gua do mar, resultando na destruio dos ecossistemas por onde passam, por exemplo, fragmentando os vegetais marinhos ou arrancando-os por inteiro do substrato. Embora as comunidades marinhas tenham uma boa capacidade de recuperao, possivelmente muitos ambientes esto ou se tornaro irreversivelmente alterados. Outras alteraes, como o aumento da temperatura da gua, a elevao do nvel dos oceanos ou a reduo da salinidade possivelmente viro a ter grandes efeitos sobre as comunidades marinhas. Um exemplo do que j vem ocorrendo o branqueamento e morte de corais em extensas regies onde est sendo verificado o aumento da temperatura da gua. Esse fenmeno ocorre devido expulso das algas simbiontes destes organismos, comumente denominadas zooxantelas, essenciais para a sobrevivncia dos corais. Por outro lado, a alterao mais grave se refere acidificao gradativa da gua do mar, relacionada ao aumento da quantidade de CO2 na atmosfera. Este fenmeno se deve ao fato de que cerca de um quarto do CO2 liberado na atmosfera se dissolve no oceano. Parte desse CO2 reage com a gua formando cido carbnico que, por sua vez, reage com ons carbonato presentes na gua, resultando na liberao de ons H . A quantidade de ons H determina o grau de acidez ou alcalinidade e medido pela unidade pH: quanto menor o pH, maior a quantidade de ons H e maior a acidez. Na escala de pH,
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5. A relao do homem com os oceanos e seus vegetais

considera-se pH neutro quando o valor 7. Acima deste valor, o pH considerado alcalino, enquanto que abaixo de 7, o pH considerado cido. Estima-se que desde o incio da era industrial o pH dos oceanos tenha sofrido uma queda mdia de 0,1 unidade, devendo cair mais 0,3 at o final deste sculo. A acidificao dos oceanos prejudica a precipitao do carbonato, que forma as matrizes calcrias de animais como moluscos, corais, crustceos e outros organismos calcificados, como as algas Corallinaceae. Compromete tambm a estabilidade dessas matrizes depois de formadas, deixando essas carapaas frgeis e comprometendo a sobrevivncia desse tipo de organismos. Se a tendncia atual de acidificao se mantiver, aps o ano 2150 o pH deve atingir um valor no qual o balano qumico do sistema carbonato se inverter, prevalecendo a dissoluo do carbonato de clcio acumulado nos oceanos ao invs de sua deposio, o que acarretar na sada de CO2 do mar para a atmosfera agravando ainda mais o efeito estufa. Embora a principal ameaa sugerida na literatura, relacionada acidificao da gua do mar, seja o comprometimento dos organismos planctnicos calcificados, no caso do bentos da costa brasileira, a principal ameaa parece estar relacionada aos extensos bancos de algas calcrias da plataforma continental e aos recifes de corais. O conjunto dessas alteraes, locais e globais, resultantes da influncia do homem sobre os ecossistemas marinhos deve certamente resultar em uma dramtica reduo da sua biodiversidade e alterao da estrutura de suas comunidades, com implicaes ecolgicas e econmicas de extrema gravidade. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA BERCHEZ, F.; AMANCIO, C.E.; GHILARDI, N.P. & OLIVEIRA FILHO, E.C. 2008. Impactos das mudanas climticas globais nas comunidades de organismos marinhos bentnicos da costa brasileira. In: Buckeridge, M. (org.). Biologia e as Mudanas Climticas Globais (no prelo). FLANNERY, T. 2005. Os Senhores do Clima. Editora Record, So Paulo, 388p.

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6. As algas na cozinha e sua importncia nos produtos de uso dirio

6. AS ALGAS NA COZINHA E SUA IMPORTNCIA NOS PRODUTOS DE USO DIRIO Estela Maria Plastino (emplasti@usp.br) Fungyi Chow (fchow@ib.usp.br) Mariana Cabral de Oliveira (mcdolive@usp.br)

As algas vm sendo usadas como alimento e produto medicinal desde tempos muito antigos. Esses vegetais marinhos j eram utilizados a mais de 12.000 anos no Japo e na Amrica do Sul. Atualmente, os maiores consumidores de algas ainda so os povos orientais, porm, em vrios pases ocidentais, passaram a integrar o cardpio de muitos restaurantes. Alguns de seus derivados tornaram-se imprescindveis na preparao de vrios pratos da cozinha contempornea e so adicionados na elaborao de muitos produtos alimentcios industrializados. Da mesma forma que os vegetais terrestres so produzidos por meio da agricultura, algumas algas so cultivadas em grandes reas nas regies costeiras, especialmente em pases orientais. A anlise qumica de muitas algas mostrou que elas apresentam contedo significativo de protenas, vitaminas (Tabela 1) e sais minerais (Tabela 2). As algas contm grande quantidade de polissacardeos coloidais peculiares, conhecidos como ficocolides, que, de modo geral, no so digeridos pelos seres humanos. Essa caracterstica permite que as algas sejam empregadas em dietas de baixas calorias. As algas podem ser diretamente empregadas na alimentao, ou delas podem ser extrados subprodutos, como os ficocolides, que vm sendo amplamente utilizados na indstria alimentcia. Outro produto extrado a partir de algas o pigmento beta-caroteno. ALIMENTAO - CONSUMO DIRETO As algas utilizadas na alimentao podem ser colhidas de seus ambientes naturais e consumidas diretamente, ou podem passar por processos de desidratao, para preservao, comercializao e posterior consumo. So trs os principais grupos de macroalgas marinhas, dos quais alguns gneros so bastante apreciados (Tabela 3): algas vermelhas (Rhodophyta), algas pardas (Phaeophyta) e algas verdes (Chlorophyta). So apresentados a seguir alguns representantes de maior importncia econmica e comercializados no Brasil. Porphyra spp. (nome popular: nori) Alga vermelha usada principalmente no preparo do sushi e do temaki, pratos tpicos da cozinha japonesa. comercializada em lminas desidratadas que podem ser tostadas, adquirindo colorao verde escura. O cultivo de nori teve seu incio h aproximadamente 300 anos e tem uma longa histria de cultivo entre os povos da China e do Japo. Atualmente, o cultivo envolve um total controle do histrico de vida da Porphira e inclui a participao de comunidades de pescadores que em determinada poca do ano dedicam-se ao seu cultivo e, em outras pocas, pesca. Eucheuma spp. e Kappaphycus spp. (nome popular: gar-gar) Algas vermelhas apreciadas como alimento, principalmente entre os povos da China e Malsia. O nome popular ao conjunto destas espcies gar-gar, e no deve ser confundido com o ficocolide que ser tratado mais adiante. Tcnicas especficas para o seu cultivo foram desenvolvidas nas Filipinas.

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Plastino, E.M.; Chow, F. & Oliveira, M.C.

Tabela 1. Teor de vitaminas em algas marinhas e outros alimentos (mg por 100 g e UI = unidade internacional (adaptado de Arasaki & Arasaki, 1983). Espcies/Alimentos Porphyra sp. (nori) Laminaria sp. (kombu) Tomate Espinafre Ma Couve B1 (mg) 0,21 0,08 0,08 0,12 0,02 0,05 VITAMINAS B2 B6 (mg) (mg) 1,00 1,04 0,32 0,27 0,03 0,11 0,30 0,18 0,03 0,03 0,05 0,16 B12 (mg) 13-29 0,3 0 0 0 0

A (UI) 38.400 430 200 2.600 5 10

C (mg) 20 11 20 100 5 44

Tabela 2. Teor de sais minerais (mg por 100 g) em algas marinhas e outros alimentos (adaptado de Arasaki & Arasaki, 1983). CLCIO: Algas Hizikia fusiforme Undaria pinnatifida Laminaria sp. Ulva sp. Porphyra tenera FERRO: Algas Enteromorpha sp. Ulva sp. Hizikia fusiforme Porphyra tenera Laminaria sp. IODO: Algas Laminaria sp. Eisenia bicyclis Sargassum confusum Gelidium sp. Porphyra tenera 106 87 29 23 15 Outros alimentos Semente de gergelim Sardinha seca Soja Bife Espinafre Outros alimentos Moluscos Crustceos Peixe Manteiga Ovos 16 10 7 3,6 3,3 1.400 1.300 800 730 470 Outros alimentos Semente de gergelim Sardinha seca Soja Leite Espinafre 1.100 330 190 100 98

193 471 98 564 300 160 0,5

0,29 0,15 0,07 0,01 0,006

Tabela 3. Principais gneros de algas marinhas comestveis. ALGAS VERDES Monostroma Caulerpa Enteromorpha Ulva ALGAS PARDAS Laminaria Undaria Alaria Eisenia Ecklonia 32
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ALGAS VERMELHAS Porphyra Palmaria Gracilaria Gelidium Eucheuma

6. As algas na cozinha e sua importncia nos produtos de uso dirio

Laminaria japonica (nome popular: kombu) Alga parda usada na preparao de diversos produtos culinrios. Esses so preparados com carnes, peixes e sopas. Variaes do kombu (por exemplo, tororo kombu e shiroita kombu) so tambm utilizadas na culinria. O cultivo tem sido efetuado principalmente na China, onde estudos sobre a biologia e a ecologia dessas algas tm levado a um sistema de cultivo bem planejado e em larga escala. Selees e cruzamentos de linhagens so tcnicas que vm sendo empregadas na obteno de formas mais adequadas ao cultivo. Undaria pinnatifida (nome popular: wakame) Alga parda muito apreciada como alimento entre os povos do Japo e da China, sendo utilizada como ingrediente de sopas, molhos e saladas. Tem sido cultivada desde a dcada de 1950. produzida principalmente no Japo, na China e na Coria, sendo este ltimo o maior produtor atual. Monostroma spp. (nome popular: hitoegus) e Enteromorpha spp. (nome popular: aonori) Algas verdes usadas como tempero para sopas ou arroz. So tambm preparadas como pat (tsukudani). Seu cultivo ocorre principalmente no Japo. FICOCOLIDES So substncias mucilaginosas (polissacardeos coloidais) extradas de algas. Fazem parte da parede celular desses organismos. O interesse comercial nos ficocolides resulta de suas propriedades fsicas em solues aquosas, onde eles formam substncias viscosas incluindo gis (gelatinas). Esses gis podem tornar-se slidos com o decrscimo da temperatura, sendo que a fora do gel aumenta com o aumento da concentrao. So classificados em trs tipos: alginatos, gar e carragenanas. A escolha na utilizao de cada um deles depende de suas propriedades fsicas. A particularidade do grande interesse comercial pelos ficocolides deve-se a que nenhum dos atuais produtos artificiais consegue substituir suas caractersticas de gelificao e viscosidade. Alginatos O cido algnico e seus vrios sais constituem-se em ficocolides caractersticos das algas pardas. So polmeros dos cidos L-glucurnico e D-manurnico. So usados como agentes gelificantes, estabilizantes e emulsificantes. So apresentados a seguir alguns de seus principais usos culinrios: Sorvetes - impedem a formao de cristais macroscpicos de gelo em solues aquosas, mesmo quando submetidos a temperaturas muito baixas, tendo, portanto, grande importncia na indstria de sorvetes. Cerveja - possibilitam a formao da espuma por formar uma pelcula resistente s bolhas decorrentes da agitao do lquido. Esferificao (encapsulao) de diversos produtos - a culinria contempornea incorporou em alguns de seus pratos o uso da tcnica de esferificao, que emprega o alginato de sdio. Esse composto promove a gelificao externa quando acrescido a algum outro ingrediente e gotejado numa soluo de cloreto de clcio. Esse processo resulta em pequenas esferas com pelcula gelatinosa e interior lquido. Os principais gneros utilizados para produo de alginato so: Macrocystis, Laminaria e Ascophyllum, todos caractersticos de guas frias. O gnero Macrocystis coletado de populaes naturais na costa oeste dos EUA. O gnero Laminaria vem sendo cultivado intensamente na China. 33
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Plastino, E.M.; Chow, F. & Oliveira, M.C.

Carragenanas So polissacardeos presentes nas algas vermelhas. So polmeros de D-galactose que se caracterizam por apresentar grupos sulfatados. Existem vrios tipos de carragenanas que podem ser diferenciados por suas propriedades fsicas e aplicaes industriais. Sua maior aplicao est na indstria alimentcia na qual, devido a suas propriedades gelificante e estabilizante, so utilizados na fabricao de queijos, cremes e gelatinas. conhecido com o nome comercial de musgo da Irlanda ou kappa. Os principais gneros produtores de carragenana so: Chondrus, Eucheuma, Kappaphycus, Gigartina, Iridaea e Hypnea. Destes, o nico que vem sendo cultivado Eucheuma, um gnero tambm utilizado na alimentao. gar um termo que vem sendo empregado para caracterizar uma famlia de polissacardeos presentes em algas vermelhas que apresenta estruturas de D- e L-galactose. A maioria dos gares possui um baixo teor de sulfato, o que lhes confere uma alta fora de gel. O gar, alm de ter as mesmas aplicaes das carragenanas, pode ser usado na preparao de meios de culturas, sendo a matria-prima bsica na biologia molecular. Preparaes comerciais de gar so obtidas principalmente de espcies de Gelidium e Gracilaria. Tentativas de cultivo dessas algas, principalmente Gracilaria, vm sendo realizadas em vrios pases. O maior produtor de gar o Japo, que produz, tanto para a indstria alimentcia quanto para a de microbiologia. considerado o ficocolide mais valioso. BETA-CAROTENO Pigmento encontrado em diferentes vegetais e algas. Comercialmente obtido artificialmente ou por meio do cultivo de microalgas pertencentes ao gnero Dunaliella. Essa alga verde unicelular cultivada em lagos altamente salinos, em locais com alta intensidade luminosa. Nestas condies as clulas acumulam mais de 5% de beta-caroteno. Esse pigmento conhecido como um antioxidante potente e vem sendo usado como complemento alimentar. Existem controvrsias sobre a eficcia do produto sinttico, que pode ser obtido por um custo inferior ao produto natural. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA ARASAKI, S. & ARASAKI, T. 1983. Vegetables from the Sea. Japan Publications, Inc., Tquio, 193p. JENSEN, A. 1993. Present and future needs for algae and algal products. Hydrobiologia 260/261: 15-23. OLIVEIRA, E.C. 1981. Perspectivas da explorao de algas marinhas no Brasil. Jornal Brasileiro de Cincias 1(1): 15-16. OLIVEIRA, E.C. 1997. Algas marinhas: um recurso ainda pouco explorado no Brasil. Panorama da Aqicultura, junho/julho: 24-26. OLIVEIRA, E.C. 1997. Macroalgas marinhas de valor comercial: tcnicas de cultivo. Panorama da Aqicultura, junho/julho: 42-45. OLIVEIRA, E.C.; OLIVERIA, M.C.; SATIOR, M. & GAROFALD, M.C. 1992. Carragenanas. Algas polivalentes. Cincia Hoje 14: 73-77.

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7. Guloseimas de algas

7. GULOSEIMAS DE ALGAS Fungyi Chow (fchow@ib.usp.br) Mariana Cabral de Oliveira (mcdolive@usp.br) Estela Maria Plastino (emplasti@usp.br)

Nos tempos modernos, um hbito alimentar equilibrado extremamente importante para adultos e crianas. No entanto, no h quem no aprecie uma deliciosa guloseima pouco saudvel. As algas, geralmente no fazem parte dessa lista de cobiadas guloseimas. Nossa finalidade nesta aula mostrar algumas dicas culinrias que possam vir a contribuir na incorporao das algas ou seus derivados no nosso to saudvel hbito alimentar. O tema compreendido nesta aula ser abordado por meio de uma atividade prtica-ldica, na qual mergulharemos numa aventura culinria mediante guloseimas de algas e seus derivados. Alm disso, sero apresentados diversos produtos do nosso dia-a-dia contendo esses componentes. LISTA DE MATERIAL NECESSRIO Preparao do flan ou manjar: Acar Algodo e papel de filtro de caf Algas desidratadas de uso culinrio Extrato de baunilha, leite de coco e coco fresco ralado ou chocolate em p Forma para flan ou manjar Funil de garrafa PET Panela com tampa

(vermelhas: agarfita ou carragenfita) Chapa aquecedora ou fogo Colher de pau

Salada e onigiri com algas: Materiais para preparar uma salada de algas e onigiri com algas

Produtos de algas e seus derivados no nosso dia-a-dia Diversos produtos que contenham algas no estado ao natural ou seus derivados (por exemplo, cerveja, nori, sorvete, aonori, creme dental, temperos, xampu, etc.) PROCEDIMENTOS Preparao do flan 1. Em uma panela com gua, hidrate aproximadamente 20-40 g de alga seca por 15 minutos; 2. Lave as algas e coloque uma quantidade de gua suficiente apenas para cobri-las; 3. Leve as algas ao fogo mdio durante 50 minutos ou at engrossar; 4. Filtre usando funil de plstico, algodo e papel filtro, e recolha o filtrado em outra panela (desprezando as algas); 5. Misture o filtrado com o extrato de baunilha, leite de coco e coco fresco ralado (ou chocolate em p) e o acar e leve ao fogo mdio por alguns minutos; 6. Despeje em uma forma e leve geladeira por 2 horas ou at tomar consistncia. Uma vez pronto, sirva o flan ou manjar para degustao.

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Chow, F.; Oliveira, M.C. & Plastino, E.M.

Salada e onigiri com algas 1. Na aula ser apresentado um prato de salada e onigiris feitos com algas marinhas para degustao dos alunos; 2. Alm disso, sero fornecidas algumas dicas sobre o preparo de receitas com algas. Produtos de algas e seus derivados no nosso dia-a-dia 1. O professor apresentar aos alunos diversos produtos do nosso cotidiano contendo algas ao natural ou seus derivados; 2. Os alunos devero identificar os produtos e reconhecer a presena das algas em todos eles. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA ARASAKI, S. & ARASAKI, T. 1983. Vegetables from the Sea. Japan Publications, Inc., Tquio. 193p. FAO. 2002. Perspectivas para la produccin de algas marinas en los paises en desarrollo. http://www.fao.org/DOCREP/004/Y3550S/Y3550S00.HTM

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8. Morfologia e anatomia dos rgos vegetativos

8. MORFOLOGIA E ANATOMIA DOS RGOS VEGETATIVOS Gladys Flavia de A. Melo-de-Pinna (gfmelopinna@hotmail.com) Gregrio C.T. Ceccantini (gregorio@usp.br) Nanuza Luiza de Menezes (nanuzalm@ib.usp.br)

Morfologicamente as razes diferem do caule pela ausncia de folha e, conseqentemente, de ns e entrens. Na extremidade de uma raiz, podemos observar as seguintes partes: coifa, zona lisa, zona pelfera e zona de ramificao. Os tipos fundamentais de sistemas radiculares so: sistema pivotante ou axial e sistema fasciculado. No primeiro caso, encontrado em gimnospermas e eudicotiledneas, h uma raiz principal, originada da radcula do embrio (raiz primria), a qual penetra perpendicularmente ao solo. Razes secundrias so formadas ao longo da raiz principal (Figura 1A).

Figura 1. Sistemas radiculares: (A) sistema axial ou pivotante, onde h um eixo principal, do qual partem razes laterais e (B) sistema fasciculado, onde as razes partem do eixo caulinar (hipoctilo), sendo, portanto, razes adventcias. Retirado de Menezes et al. (2006). O sistema fasciculado ocorre em monocotiledneas, onde no h desenvolvimento acentuado da raiz primria e vrias razes so formadas a partir do eixo caulinar do embrio (Figura 1B). Neste tipo de sistema, as razes originadas do eixo caulinar so chamadas razes adventcias (razes que se originam de outras partes da plantas como caule e folha). No sistema pivotante, o mesmo meristema que estava na radcula, estar presente na raiz primria e na raiz principal. Alguns tipos morfolgicos de razes sero descritos abaixo, com exemplos que podem ser encontrados em jardins e supermercados e, portanto, podem ser utilizados em sala de aula. 1. Razes tuberosas: razes intumescidas, especializadas como rgos de reserva, podendo ser razes secundrias (batata-doce Ipomoea batatas, Convolvulaceae) ou principal (beterraba Beta vulgaris, Amaranthaceae e nabo Brassica rapa, Brassicaceae). 2. Razes areas: neste grupo de razes podemos encontrar diferentes tipos, todos representados por razes que no se desenvolvem subterraneamente. Dentre esses tipos podemos citar as razes suporte que oferecem equilbrio planta, como exemplo o milho Zea mays (Poaceae). Variao

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Melo-de- Pinna, G.F; Ceccantini, G. & Menezes, N.L.

desse sistema encontrada na figueira (Ficus sp., Moraceae) com razes tabulares que se encontram ligadas ao caule. 3. Razes sugadoras ou haustrios: ocorrem em plantas parasitas; os haustrios penetram no caule da planta hospedeira para retirar gua e nutrientes do sistema vascular. Muitas vezes utilizamos a morfologia interna (anatomia) para determinar se uma estrutura um caule ou uma raiz. Como em todas as partes de uma planta vascular, a estrutura interna est organizada em trs sistemas: sistema drmico ou de revestimento; sistema fundamental ou de preenchimento e sistema vascular ou condutor. Nas razes, o sistema vascular formado por xilema primrio, floema primrio e periciclo que est organizado em uma poro central (cilindro vascular). O floema (tecido condutor da seiva elaborada) ocorre prximo periferia do cilindro vascular, na forma de cordes e o xilema (tecido vascular condutor da seiva bruta gua e sais minerais) tambm forma cordes dispostos alternadamente com os cordes de floema. Nas razes adventcias, a poro central ocupada por clulas parenquimticas, chamada de medula (Figura 2B), enquanto que nas razes originadas da radcula do embrio ou de outras razes a regio central ocupada pelo xilema que apresenta projees entre os cordes floemticos (Figura 2A). Independente da organizao central do cilindro vascular, em todas as razes o sistema vascular limitado externamente pelo periciclo. Este tecido responsvel pela origem das razes laterais. Externamente ao cilindro vascular encontra-se o crtex, cuja camada mais interna a endoderme. Externamente ao crtex encontra-se a epiderme com ou sem plos absorventes.

Epiderme Crtex

Endoderme Periciclo Floema 1rio Cmbio Xilema 1rio Medula Xilema 2rio Cmbio Xilema Floema 2rio Floema 1rio

Figura 2. Aspectos gerais de razes em corte transversal: (A) raiz de eudicotilednea com xilema ocupando a regio central e (B) raiz de monocotilednea com medula na regio central. Retirado de Menezes et al. (2006).

A B
O caule apresenta algumas caractersticas morfolgicas que o distingue das outras partes da planta como a presena de ns e entrens ou interns, tendo folhas e gemas presentes na regio dos ns. A gema localizada no pice do eixo caulinar chamada de gema terminal ou apical, e as gemas localizadas nas axilas das folhas so as gemas axilares (Figura 3). Diversos tipos morfolgicos de caule so encontrados na natureza e embora seja o rgo cuja principal funo conduzir gua e sais minerais das razes para as folhas e os carboidratos produzidos pelas folhas para as demais partes da planta, o caule tambm d sustentao planta e pode acumular 38
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8. Morfologia e anatomia dos rgos vegetativos

gua (como nos cactos) ou reservas (tubrculos da batata-inglesa). Como nas razes, podemos encontrar caules areos ou subterrneos, sendo os principais tipos descritos abaixo. Caule areo 1. Haste: caule delicado, no lenhoso presente na maioria das ervas. 2. Tronco: ocorre na maioria das rvores lenhosas, varia de delgado a muito robusto. Caule subterrneo 1. Tubrculos: apresenta a poro apical (terminal) intumescida (Figura 4A). Exemplo: batata-inglesa (Solanum tuberosum, Solanaceae). 2. Bulbo: caule reduzido a um disco basal de onde partem catfilos, que podem ser secos ou carnosos. Exemplo: alho (Allium sativum, Liliaceae) e cebola (Allium cepa, Liliaceae). 3. Rizoma: caule de crescimento horizontal que produz diretamente folhas ou ramos verticais (Figura 4B).

Figura 3. Esquema geral de uma plntula. Retirado de Menezes et al. (2006).

A organizao interna do caule, ou seja, a anatomia caulinar compreende os trs sistemas: o drmico ou de revestimento, o fundamental e o vascular ou condutor. Como na raiz, o sistema de revestimento na estrutura primria da planta est representado pela epiderme, que pode ser substituda pela periderme como resultado da atividade do felognio (meristema lateral, responsvel pelo crescimento secundrio do sistema de revestimento) que produz sber (mais externo) e feloderme (mais interno). Quanto ao sistema fundamental do caule, podemos organiz-lo em duas regies: crtex (entre a epiderme e o sistema vascular) e a medula (poro central do rgo, interno ao sistema vascular). Essas regies podem ser formadas pelos tecidos fundamentais: parnquima, colnquima e esclernquima. A camada mais 39
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Melo-de- Pinna, G.F; Ceccantini, G. & Menezes, N.L.

interna do crtex chamada de endoderme (presente tambm na raiz e na folha), a qual desempenha um importante papel como camada seletiva de substncias que penetram no sistema vascular. O sistema vascular no caule difere da raiz por estar organizado em feixes (lembre: raiz no tem feixes), mas, como no sistema radicular tambm est representado por periciclo, xilema e floema. O periciclo, como na raiz e na folha, est limitando externamente o sistema vascular. Interno ao periciclo ocorre o floema, o qual est seguido pelo procmbio (tecido meristemtico formador do sistema vascular primrio) e o xilema. Portanto, o xilema no caule est mais prximo da regio central. A esta organizao do caule, em eudicotiledneas, chamamos de eustelo (Figura 5A). Nas monocotiledneas, o caule tem uma organizao atactostlica, com endoderme e periciclo limitando os feixes vasculares dispersos aleatoriamente em todo o rgo (Figura 5B).
A
Folha Cmbio fascicular Cmbio interfascicular Razes laterais Tubrculo jovem Tubrculo adulto Feixe vascular Epiderme Crtex Medula

B B
Intern N Folhas Gema Razes laterais

Figura 4. Tipos de caule subterrneo: (A) tubrculo em Solanum tuberosum, Solanaceae (batata-inglesa) e (B) rizoma em Iris sp., Iridaceae. Retirado de Hickey & King (2000).

Figura 5. Organizao do sistema vascular em corte transversal. (A) Caule de eudicotiledneas (eustelo). (B) Caule de monocotilednea (atactostelo). Retirado de (A) Menezes et al. (2006) e (B) Hickey & King (2000).

No crescimento secundrio do caule das eudicotiledneas, o xilema e o floema secundrios so formados pela atividade do cmbio fascicular (originado a partir de clulas procambiais entre xilema e floema primrios) e do cmbio interfascicular (originado de clulas pericclicas entre os feixes vasculares). As folhas so os rgos que, na maioria das espcies, esto mais estruturadas para realizar a fotossntese, sendo geralmente achatadas de modo que o tecido clorofiliano (tecido responsvel pela fotossntese) fica prximo superfcie. Morfologicamente, as folhas apresentam grande variedade de formas e tamanhos, com uma classificao prpria muito utilizada na sistemtica de determinados grupos. Uma folha apresenta uma lmina foliar ou limbo, caracterizada, em geral, por ser achatada, podendo em alguns casos ser cilndrica. 40
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8. Morfologia e anatomia dos rgos vegetativos

O limbo pode prender-se diretamente no caule (folha sssil, Figura 6B) ou apresentar uma regio mais estreita na base, chamada de pecolo (folha peciolada, Figura 6A).

Pecolo

Figura 6. Representao esquemtica da folha. (A) Folha peciolada. (B) Folha sssil. Retirado de Hickey & King (2000).
Fololos

Figura 7. Tipos de folhas: (A) e (B) folhas simples, (C) e (D) folhas compostas, constitudas por fololos. Retirado de Hickey & King (2000).

As folhas podem ser classificadas quanto ao tipo do limbo em folhas simples e folhas compostas. 1. Folhas simples: limbo inteiro (indiviso, Figuras 7A, 7B). 2. Folhas compostas: limbo formado por unidades distintas, chamadas de fololos (Figuras 7C, 7D). A organizao interna das folhas segue o padro encontrado em todos os rgos da planta, com sistema drmico ou de revestimento (epiderme); sistema fundamental ou de preenchimento e o sistema vascular ou de conduo (feixes vasculares) Na epiderme encontramos aberturas (poros) fazendo parte de uma estrutura complexa chamada estmato. Os estmatos so formados por clulas epidrmicas especializadas e atravs do ostolo (poro ou abertura) ocorrem as trocas gasosas, fundamentais no processo de fotossntese. Os estmatos podem ocorrer na superfcie superior e inferior da folha ou em apenas uma delas. O tecido clorofiliano est presente no sistema fundamental (regio do mesofilo) e ocorre em toda a extenso da lmina foliar. Ao analisar uma folha, em corte transversal perpendicular ao eixo do rgo, sem qualquer procedimento prvio laboratorial, possvel observar em microscopia de luz a distribuio do tecido clorofiliano que se apresenta com uma colorao verde. O sistema vascular da folha muito semelhante ao do caule. Em uma viso mais simples podemos pensar que a folha um caule achatado. Essa semelhana, em parte, se deve ao fato de que ambos os rgos so formados a partir da mesma regio meristemtica (meristema apical do caule), diferente da raiz que originada do meristema apical da raiz (no caso da raiz primria) ou do periciclo (razes laterais e as adventcias).

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Ao observarmos uma folha luz do sol, possvel na maioria das vezes, perceber a venao foliar, ou seja, os caminhos percorridos pelo sistema vascular em toda a lmina foliar (Figura 8). Esse sistema, quando analisado em um corte transversal, pode ser descrito como apresentando uma nervura principal (maioria das eudicotiledneas) e vrias nervuras de menor porte ao longo do mesofilo. Essas nervuras correspondem aos feixes de xilema e floema, semelhante ao descrito para o caule (raiz NO tem feixe vascular). No entanto, nas folhas o xilema est voltado para a superfcie superior da folha e o floema para a superfcie inferior. Essa caracterstica permite distinguir anatomicamente a folha do caule, pois no ltimo caso o xilema est voltado para o interior do rgo e o floema mais externamente.

Lmina foliar

Nervura

Feixe vascular

Superfcie superior da epiderme

Tecido clorofiliano parnquima paliadico

Tecido clorofiliano parnquima lacunoso Espao intercelular Superfcie inferior da epiderme

Estmato

Figura 8. Representao da organizao interna da folha. Retirado de Hickey & King (2000).

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8. Morfologia e anatomia dos rgos vegetativos

LISTA DE MATERIAL NECESSRIO Canudos plsticos finos na cor vermelha Canudos plsticos finos na cor azul Canudo plstico grosso na cor vermelha Canetas para retroprojetor (cores: azul, preto e vermelho) Estiletes Fitas adesivas transparente Folhas de isopor de 25 mm Folhas de isopor de 10 mm Tubos de cola para isopor Palito para churrasco

Exerccio 1. Observe os materiais em demonstrao e procure classific-los usando caractersticas morfolgicas de caule, raiz e folha. Exerccio 2. Observe as lminas, em microscpio ptico como demonstrao. Em seguida, identifique nas pranchas fornecidas os principais tecidos. Exerccio 3. Aps ter interpretado os tecidos da prancha de folha, faremos um exerccio de construo de modelo didtico com materiais simples, montando as partes como se fosse um sanduche. 1. Coloque juntos a epiderme (isopor fino) e cutcula (plstico ou celofane); 2. Em seguida, coloque uma camada de isopor grosso (parnquima palidico); 3. Monte um feixe vascular unindo as partes com fita adesiva, conforme a imagem e esquema fornecidos. Deve conter protoxilema (canudos vermelhos finos), metaxilema (canudos vermelhos espessos), floema (canudos azuis). Ao redor desses envolva tudo com palitos de churrasco, como sendo uma bainha de fibras; 4. Coloque o feixe vascular no meio do isopor, esculpindo um sulco com estilete de cortar papeis; 5. Coloque outra camada de isopor grosso (parnquima lacunoso); 6. Adicione outra camada de epiderme: epiderme (isopor fino) e cutcula (plstico ou celofane); 7. Em seguida, cole tudo com cola de isopor e/ou fita adesiva; 8. Use as canetas de retroprojetor para delimitar clulas, ncleos e espessamentos de parede. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA HICKEY, M. & KING, C. 2000. The Cambridge Illustrated Glossary of Botanical Terms. Cambridge University Press, Londres, 208p. MENEZES, N.L.; PIRANI, J.R.; GIULIETTI, A.M.; MONTEIRO, W.R.; VENTURELLI, M.; ESTELITA, M.E.; KRAUS, J.E.; ANGYALOSSY, V.; ARDUIN, M.; CECCANTINI, G.C.T. & MELO-DE-PINNA, G.F. 2006. Anatomia e Morfologia de Plantas Vasculares. Apostila do Departamento de Botnica, Universidade de So Paulo, So Paulo, 184p.

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9. Metablitos secundrios de origem vegetal e seus usos pelo homem

9. METABLITOS SECUNDRIOS DE ORIGEM VEGETAL E SEUS USOS PELO HOMEM Cludia Maria Furlan (furlancm@yahoo.com.br) Lucimar Barbosa da Motta (lugalll@yahoo.com.br)

Com os avanos da cincia nos ltimos anos, alguns assuntos tm se tornado muito populares e de grande penetrao nos mais diversos ramos da sociedade. A alimentao nutracutica tem grande destaque atualmente, com a efetiva comprovao da ao de determinados alimentos como, por exemplo, na reduo de colesterol. Da mesma forma, vrios cosmticos vm sendo destacados na reduo de celulite ou como antioxidantes, que amenizam os efeitos da idade. So diversos os empregos de vegetais ou substncias extradas deles nos diferentes ramos industriais, como o farmacutico, de tintas, de corantes, entre outras atividades; essas substncias, em sua grande maioria, so oriundas do metabolismo secundrio das plantas. O metabolismo nada mais do que o conjunto de reaes qumicas que ocorrem no interior das clulas visando produo de protoplasto e tambm a manuteno de importantes funes vitais como, no caso dos vegetais, a fotossntese, respirao, transporte de solutos, entre outras. Embora ainda no se tenha estabelecido um limite claro entre o metabolismo primrio e o secundrio, usualmente aceito que o metabolismo primrio leva sntese de acares, aminocidos, cidos graxos, nucleotdeos e polmeros derivados destes, como polissacardeos, protenas, lipdeos e cidos nuclicos, sendo todos eles universalmente encontrados nos vegetais, alm de essenciais vida. J o metabolismo secundrio definido como rotas alternativas, que utilizam os produtos ou subprodutos do metabolismo primrio, originando compostos no necessariamente essenciais ao organismo e que podem ser diferentes para cada espcie vegetal. Como exemplo disso pode ser citada a classe de flavonides, substncias responsveis pelas coloraes de vrios rgos vegetais, como as flores e que variam de acordo com o grupo de plantas estudado. Entretanto, o termo metabolismo secundrio vem se mostrando pouco satisfatrio, uma vez que muitos metablitos secundrios tambm funcionam como reguladores de importantes processos bioqumicos; por exemplo, os cidos giberlico, indolilactico e abscsico, relacionados com o desenvolvimento e o crescimento das plantas, ou as quinonas, envolvidas nos processos de respirao celular e fotossntese, ou ainda substncias volteis, como monoterpenos, envolvidos nas interaes da planta com o meio. Por essa razo a diviso entre metabolismo primrio e secundrio no perfeita, mas continua sendo empregada ainda nos dias atuais. De maneira sinttica, os metablitos secundrios, em plantas, so originados a partir de trs vias de sntese: a via do cido chiqumico, a via do acetato-malonato e a via do acetato-mevalonato, alm de substncias originadas a partir de aminocidos. A figura 1 mostra, esquematicamente, as principais vias de biossntese de metablitos secundrios em plantas. a partir do metabolismo secundrio que so produzidas substncias como, por exemplo, os compostos fenlicos (taninos, ligninas, fenilpropanides derivados da via do cido chiqumico), os terpenides (monoterpenos, ditertepenos, sesquiterpenos, esterides derivados da via do acetato-mevalonato), os alcalides (derivados de aminocidos), constituintes de ceras epicuticulares (derivados da via do acetato-malonato), entre outros exemplos.

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Fotossntese

Glicose

Polissacardeos Glicosdeos

Gliclise

Via da Pentose Fosfato


cidos Nuclicos

Fosfoenolpiruvato

Eritrose 4-f osf ato Taninos Ligninas Fenilpropanides

cido Chiqumico

Via do cido Chiqumico


Piruvato Aminocidos Aromticos Aminocidos Alif ticos Peptdeos Protenas Alcalides

Flavonides

Ciclo do cido Ctrico

Acetil CoA

Via do Acetato-Malonato
Malonato

cidos Graxos Policetdeos

Via do Acetato-Mevalonato
Mevalonato Terpenides Esterides

Figura 1. Representao esquemtica das vias de sntese de metablitos secundrios em plantas. Embora o metabolismo secundrio nem sempre seja essencial para que uma planta complete seu histrico de vida, as substncias por ele produzidas desempenham um importante papel na interao das plantas, funcionando como mediadoras de interaes entre os vegetais e os fatores biticos e abiticos do meio externo. Como exemplo, substncias com importante papel em minimizar a ao de herbvoros ou o ataque de patgenos, ou influenciando na competio entre plantas (alelopatia), ou ainda como sinalizadores para outros organismos como polinizadores e dispersores de sementes. Podemos tambm relacionar alguns metablitos secundrios como agentes protetores a alguns estresses abiticos, como os associados com mudanas ambientais de temperatura, luminosidade, umidade, entre outras. Por exemplo, flavonides esto relacionados fotoproteo contra a ao da radiao ultravioleta (UV), pois absorvem os raios compreendidos nesse comprimento de onda. Dessa forma, desde muito cedo o homem aprendeu a observar e, conseqentemente, a utilizar em seu benefcio, as propriedades conferidas por algumas substncias de origem vegetal. Atualmente so inmeras as atividades humanas que empregam vegetais ou seus derivados. Dentre essas atividades, a alimentao e o cuidado com o corpo, seja ele no uso de frmacos ou no uso de produtos de higiene pessoal, representam indstrias que movimentam enorme montante financeiro. A busca por novas fontes de frmacos, alimentos com ao nutracutica e cosmticos de ao antienvelhecimento so, hoje em dia, importantes ramos da indstria farmacutica mundial, que, estima-se, deve movimentar cerca de US$ 1,3

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9. Metablitos secundrios de origem vegetal e seus usos pelo homem

trilhes at 2020, dobrando o valor movimentado hoje, devido crescente demanda atual por medicamentos e tratamentos preventivos. A explorao de recursos vegetais pelo homem relaciona-se com o prprio surgimento da espcie humana: manter sua alimentao como forma de sobrevivncia. Com o advento da agricultura, por volta de 10.000 a.C., tambm teve incio a domesticao de algumas espcies vegetais interessantes para o consumo humano. Nessa seleo de espcies, embora que inicialmente de forma inconsciente, temos como resultado plantas atualmente cultivadas e que so bem diferentes das espcies selvagens que lhes deram origem. Por exemplo, ao longo do cultivo de mandioca (Manihot esculenta, Euphorbiaceae) foram selecionados exemplares menos txicos para o consumo humano, com menores quantidades de glicosdeos cianognicos e, dessa forma, novas variedades foram criadas. Atualmente, cada vez mais difcil encontrar a mandioca designada como brava, causadora de casos de intoxicaes. Alm da alimentao, as civilizaes humanas foram descobrindo vrias outras formas de utilizao das plantas em suas atividades dirias, empregando diretamente os vegetais na construo de casas, meio de transporte e objetos de decorao, ou pela extrao de substncias com propriedades industrialmente importantes, sejam como fonte de frmacos, ou como ingredientes de diversos produtos de higiene pessoal, entre outros usos. Mais recentemente, a partir da dcada de 1990, os termos alimentos funcionais e nutracutica ganharam mais evidncia dentro da rea da nutrio. Ambos referem-se combinao das palavras nutrio e farmacutica, rea que estuda os componentes qumicos presentes nos vegetais e suas aes sobre a sade humana, principalmente na preveno ou reduo de risco de doenas crnicodegenerativas. Pensando na imensa diversidade vegetal apresentada pelo Brasil, um dos cinco pases mais megadiversos do mundo, podemos imaginar a importncia de estudos sobre a nossa flora, como utiliz-la de forma sustentvel assim como preserv-la. A importncia desse conhecimento tambm se justifica pelo fato do grande interesse por parte de outros pases em explorar espcies vegetais endmicas do Brasil, sem, muitas vezes contribuir com um retorno social da explorao de alguns produtos. Essa grande diversidade de vegetais propicia uma grande variedade de substncias por elas produzidas, muitas delas com potencial uso em diversas atividades humanas. Com essa grande diversidade qumica, encontramos os metablitos secundrios agrupados em vrias classes, muito mais pela estrutura qumica que apresentam do que pela rota de biossntese que os originou. Dessa forma, podemos citar os alcalides, as substncias fenlicas, os terpenides, os glicosdios cianognicos e os glicosinolatos. Algumas dessas classes so importantes fontes de frmacos, outras so interessantes pelas suas propriedades como fragrncias, ou emulsificantes, na composio de cremes, ou ainda como adstringentes ou abrasivos. A importncia do conhecimento para o desenvolvimento de uma explorao sustentvel dessas substncias est refletida no nmero de pessoas dependentes de produtos vegetais. Estima-se que 75% da populao humana atual ainda dependam de medicamentos de origem vegetal, enquanto outra grande parcela da populao j no saiba mais como sobreviver sem seus produtos de higiene pessoal. Milhes de pessoas so dependentes de glicosdeos cardioativos para manter uma vida normal controlando problemas cardacos. Essas substncias so obtidas a partir de apenas duas espcies 47
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de Plantaginaceae pertencentes ao gnero Digitalis, sendo vrios os frmacos obtidos dessas espcies, mas que ainda no possuem um derivado sinttico similar. Dentre as classes de metablitos secundrios os alcalides talvez constituam a mais importante devido diversidade de substncias utilizadas medicinalmente. Um dos primeiros alcalides isolados pelo homem foi a morfina, em 1816 a partir de frutos no maduros de papoulas (Papaver somniferum, Papaveraceae). Juntamente com a morfina outros alcalides so extrados a partir do pio de papoulas, como a codena, a papaverina e a tebana. Alcalides so substncias nitrogenadas onde o tomo de nitrognio faz parte de um anel heterocclico. Essas substncias so originadas a partir dos aminocidos, especialmente fenilalanina, tirosina e triptofano e, de acordo com o aminocido de origem, compem uma classe qumica diferente de alcalides. A cafena, a cocana e a herona, juntamente com a morfina, so talvez os exemplos mais conhecidos de alcalides. Outra classe importante de metablitos secundrios a dos terpenides, constituda pelos leos volteis (monoterpenos e sesquiterpenos, principalmente), diterpenos, triterpenos e os carotenides. Todas essas substncias so constitudas por unidades menores de cinco tomos de carbono, o isopreno, sendo classificadas de acordo com o nmero de carbonos que possuem: monoterpenos (10 tomos de carbono = 2 isoprenos), sesquiterpenos (15 tomos de carbono), diterpenos (20 tomos de carbono), triterpenos (30 tomos de carbono) e carotenides (40 tomos de carbono). Essa classe mostra sua grande participao na indstria de fragrncias, como constituintes de aromatizantes, como por exemplo, com o uso do mentol, do cineol e do pineno. Um exemplo interessante o uso do leo voltil extrado do pau-rosa (Aniba rosiadora, Lauraceae), espcie nativa brasileira rica na produo de linalol, que devido a sua fragrncia agradvel serve como matria-prima para a confeco do perfume Chanel N 5. Outros terpenides importantes so os triterpenos, atualmente descritos como um grupo de largo espectro de ao biolgica, inclusive anti-HIV, como exemplo o cido betulnico e o cido platnico. J muito conhecidos pela populao esto os carotenides, principalmente o licopeno e o beta-caroteno, utilizados na alimentao como fonte para a produo de vitamina A, importante para a manuteno sadia da crnea. Mais recentemente, a classe das substncias fenlicas tambm vem ganhando destaque na mdia principalmente pelo potencial antioxidante que essas substncias oferecem. Sob esta denominao so identificadas vrias classes de substncias como cidos fenlicos (elgico, cafico, glico, clorognico, qunico, cinmico), flavonides (catequinas, flavonas, flavonis, isoflavonides), lignanas, polifenis e taninos. So substncias quimicamente caracterizadas por possurem hidroxilas ligadas a anis fenlicos. Substncias como os flavonides vm sendo cada vez mais empregadas em preparaes cosmticas no combate a radicais livres, relacionados ao processo de envelhecimento. Vrias indstrias vm produzindo cremes faciais que possuem essas substncias em sua formulao, como, por exemplo, flavonides de Passiflora (gnero do maracuj), tidos como importantes na reduo do aparecimento de rugas e no combate ao envelhecimento da pele. Outra substncia fenlica que vm se destacando atualmente so os polifenis, como por exemplo, o resveratrol, encontrado em sementes de uva preta e no vinho tinto, essa substncia tm mostrado excelentes resultados no combate ao colesterol. Como substncias fenlicas j consagradas pelo seu uso, podemos citar alguns aromatizantes utilizados na indstria alimentcia e de fragrncias, como o caso da vanilina, a famosa baunilha, extrada de frutos de espcies de orqudeas do 48
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o

9. Metablitos secundrios de origem vegetal e seus usos pelo homem

gnero Vanilla. Outro exemplo o leo voltil extrado da parte interna da casca de troncos de Cinnamomum zeylanicum (Lauraceae), a canela, muito utilizado na culinria, como condimento e aromatizante e, na medicina, relacionado cura de resfriados e problemas de garganta. Como outro exemplo de utilizao de substncias fenlicas, pode ser citado o eugenol (um fenilpropanide), constituinte majoritrio do leo voltil extrado de botes florais de Eugenia caryophyllus (Myrtaceae), popularmente conhecida como cravo-da-ndia, amplamente empregado em odontologia por possuir uma ao anti-sptica e anestsica. Algumas substncias no tm uma funo medicinal ou um uso industrial na sua forma estrutural natural, mas, muitas vezes, podem apresentar detalhes moleculares aproveitados para a sntese de importantes frmacos produzidos sinteticamente em laboratrio. Um exemplo a cortisona, at ento obtida das glndulas supra-renais de animais. Em 1950, descobriu-se que algumas espcies vegetais (especialmente monocotiledneas) apresentavam altos teores de saponinas esteroidais que quando tratadas com cidos do origem a cortisona e outras substncias com ao contraceptiva. Dessa forma, alm da no utilizao animal na produo de cortisona, pode-se dar vazo crescente demanda de substncias contraceptivas. Outro exemplo o cido acetilsaliclico componente da aspirina. No sculo V antes de Cristo, Hipcrates descreveu que o p cido da casca do salgueiro ou choro (Salix alba, Salicaceae) aliviava dores e diminuia a febre. O princpio ativo da casca, o cido saliclico foi isolado na sua forma cristalina em 1828. Em 1897 a Bayer conjugou quimicamente o cido saliclico com acetato, criando o cido acetilsaliclico, que mostrou ser menos txico. Fica cada vez mais evidente a grande participao das plantas em inmeras atividades do nosso dia-a-dia como fonte direta ou no de matria-prima para confeco de diferentes produtos. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA LEWINGTON, A. 2003. Plants for People. Transworld Publishers, Londres, 304p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 7 edio. Editora Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 830p. VICKERY, M.L. & VICKERY, B. 1981. Secondary Plant Metabolism. Macmillan Press, Hong Kong, 335p

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10. Plantas medicinais e txicas

10. PLANTAS MEDICINAIS E TXICAS Maria Luiza Faria Salatino (mlfsalat@usp.br) Milene Clemente Sampaio (msclemente@ig.com.br) Antonio Salatino (asalatin@ib.usp.br)

PLANTAS MEDICINAIS Frmacos importantes obtidos de plantas H plantas de grande importncia medicinal que so utilizadas na medicina oficial como fontes para obteno de frmacos. a forma de utilizao que se reveste do maior interesse econmico no campo das plantas medicinais. Os frmacos so isolados e obtidos sob forma pura, na maioria das vezes cristalina. Passam ento a fazer parte de medicamentos sob a forma de comprimidos, drgeas, injetveis, etc. 1. Plantas fornecedoras de frmacos usados no tratamento do cncer Catharanthus roseus (Apocynaceae), nativa de Madagascar e atualmente cultivada em muitos pases tropicais, contm mais de oitenta alcalides, sendo a vincristina e vinblastina muito usados no tratamento e cura do mal de Hodgkin e vrias formas de cncer, inclusive leucemia infantil. Para obter 3 g desses alcalides, requer-se uma tonelada de partes areas secas da planta. A vinblastina tambm usada como matria prima para a sntese em laboratrio de vindesina, um frmaco mais potente em sua atividade antimittica, e que utilizado no tratamento da leucemia linfoblstica, linfomas e vrios tipos de tumores slidos, como cncer de mama, de esfago e do trato respiratrio. Das cascas de Taxus brevifolia (Taxaceae), uma gimnosperma nativa do Hemisfrio Norte, obtevese, h alguns anos, o diterpeno taxol. Este usado no tratamento de vrios tipos de cncer, principalmente tumores ovarianos. Para a obteno de 1 kg de taxol necessitam-se 7,5 toneladas de cascas secas da planta. Como a remoo das cascas ocasiona sua morte, o taxol tem sido obtido pelo isolamento a partir de folhas de um hbrido de Taxus desenvolvido para esse fim e tambm por sntese a partir do diterpeno 10desacetilbacatina III. Podophyllum peltatum (Berberidaceae) uma erva nativa das florestas dos Estados Unidos e Canad. A planta possui um caule subterrneo (rizoma) que fornece uma resina contendo substncias fenlicas, entre elas a podofilotoxina. Esta substncia usada para a sntese de etoposdio e de teniposdio, derivados usados no tratamento de vrias formas de cncer, como linfomas, tumores dos testculos, do crebro e leucemia aguda. Trs espcies so conhecidas como ip-roxo: Tabebuia heptaphylla, T. impetiginosa e T. ipe (Bignoniaceae). A pesquisa cientfica no encontrou na casca do ip roxo nada que justificasse a sua fama como anticancergena. No entanto, no lenho de vrios ips existem substncias fenlicas, em especial o lapachol, que de fato inibe o crescimento de tumores malignos e reduz a dor, motivo pelo qual a substncia vem encontrando aplicao medicinal. Camptotheca acuminata (Nyssaceae), uma planta nativa do Sul da China, acumula o alcalide camptotecina nas cascas do caule e da raiz e nos frutos. Esta substncia impede a replicao e a diviso celular. Substncias sintticas anlogas camptotecina tm sido produzidas, como a topotecan. Essa substncia possui menos efeitos txicos que a camptotecina e vem apresentando interessantes resultados 51
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Salatino, M.L.F.; Sampaio, M.C. & Salatino, A.

no tratamento de cncer do esfago, dos brnquios e do clon. 2. Plantas fornecedoras de frmacos usados contra problemas do sistema cardiovascular O ritmo de vida atual e a adoo de hbitos alimentares inadequados levam a um incremento na freqncia de males relacionados com a fisiologia cardiovascular. Vrias plantas so teis como fontes de frmacos usados para o controle desses problemas. A digoxina e a digitoxina, exemplos de glicosdeos cardioativos, so substncias largamente usadas para o tratamento de insuficincia cardaca e taquicardia. So obtidas de Digitalis lanata e D. purpurea (Plantaginaceae), ervas nativas da Europa, conhecidas como dedaleiras. Papaver somniferum (Papaveraceae), a papoula, fornecedora do pio, material rico em alcalides, obtido do ltex de seus frutos. Alm de fornecer alcalides como a morfina, um potente analgsico, e a codena, um antitssico, o pio tambm contm papaverina, de forte ao sobre a musculatura lisa, agindo como relaxante das fibras musculares dos vasos sanguneos. usado tambm para a preveno de acidentes vasculares, pois diminui a fragilidade capilar. O pio tambm tem interesse toxicolgico, pois alm de se constituir em droga de uso abusivo, ilegalmente usado para a obteno de herona, atravs de sntese a partir da morfina. Certos frutos de gramneas (por exemplo, o centeio), quando infectados por um fungo do gnero Claviceps, so fontes de importantes substncias chamadas alcalides do ergot. Os frutos infectados ficam anormalmente grandes, sendo ento chamados esclercios, e acumulam quantidades substanciais daqueles alcalides em uma complexa mistura. A substncia encontrada em maior proporo nessa mistura a ergotamina, que atua como vasoconstritora, com ao pronunciada nos vasos do crebro. Os alcalides do ergot so estruturalmente baseados numa substncia chamada cido lisrgico, este pode ser convertido (em laboratrio) em sua dietilamida, o LSD, que teve grande importncia toxicolgica h vinte ou trinta anos, devido ao seu uso como alucingeno. Existem vrias espcies de Cinchona que fornecem a quinina, um alcalide obtido da casca do caule com grande importncia para o controle da malria. Essas plantas pertencem s Rubiaceae (famlia do caf), sendo nativas de regies andinas da Colmbia, do Peru e da Bolvia. Alm da quinina, obtm-se de Cinchona outros alcalides, como a quinidina, que um frmaco de grande importncia para o tratamento de arritmias e outros problemas cardacos, inclusive da taquicardia. Como a quinina o composto predominante na mistura de alcalides, a indstria obtm a quinidina por sntese, a partir dessa substncia. Um problema vascular muito freqente na atualidade a hipertenso, que vem sendo tratada com reserpina, um alcalide obtido das razes do arbusto Rauvolfia serpentina (Apocynaceae), cujo isolamento se deu em 1949. Verificou-se que esse alcalide era capaz de reduzir a presso sangunea de 30/15 para 16/10. Na atualidade, a reserpina perdeu muito de sua importncia no tratamento da hipertenso, devido introduo de outros frmacos. A casca da laranja e de outros frutos de Citrus (Rutaceae) so fontes de hesperidina e diosmina, flavonides usados no tratamento de fragilidade capilar. A rutina outro flavonide usado para os mesmos fins. Ele obtido de umas poucas fontes vegetais, entre elas os frutos de duas leguminosas do cerrado, Dimorphandra mollis e D. ledgeriana (Fabaceae), ambas conhecidas como barbatimo-de-folha-mida. 52
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10. Plantas medicinais e txicas

3. Exemplos de outras plantas fornecedoras de importantes frmacos A seguir fornece-se uma lista de plantas que so usadas para a obteno de frmacos que so usados em sua forma natural ou empregados como ponto de partida para a semi-sntese de frmacos. Cada tpico iniciado com a propriedade atribuda aos frmacos em questo. ANALGSICOS - No h analgsico mais popular do que a aspirina, o clebre cido acetil-saliclico ou AAS. A aspirina, que tem tambm efeito antitrmico obtida em laboratrio a partir do cido saliclico. Esse cido encontrado em vrias espcies de Salix (choro ou salgueiro), entre outras plantas. Atualmente o AAS tem grande aplicao tambm na preveno de derrames cerebrais. No sculo passado, tinturas de pio, chamadas de ludano, eram usadas para o alvio das dores mais intensas. O ingrediente mais importante do ludano a morfina. Esse alcalide um potente analgsico, que causa vrias alteraes no sistema nervoso central que resultam na inibio da liberao da substncia P, um neurotransmissor da dor. Porm, o uso da morfina rigorosamente controlado em todo o mundo, pois ela causa uma forte dependncia nos usurios. ANTITSSICOS - A codena, um dos alcalides presentes no pio muito usada como sedativo da tosse, sendo freqentemente encontrada em xaropes. ANTIMALRICOS - Alm da quinina, que atua sobre as formas assexuadas de Plasmodium situadas no interior dos eritrcitos, o kinghao (Artemisia annua - Asteraceae), planta tradicional da China, tambm utilizada contra a malria. As folhas contm leo voltil, no qual se encontra a artemisina, que atua em pequenas doses na fase eritroctica do ciclo do plasmdio. ESPASMOLTICOS E DILATADORES DA PUPILA - H plantas de Solanaceae (famlia da batata) que fornecem alcalides empregados para o alvio das dores provocadas por espasmos da musculatura lisa, como clicas intestinais, uterinas e renais. As principais plantas so a beladona (Atropa belladona), o estramnio (Datura stramonium) e o meimendro (Hyoscyamus niger). Todas so txicas e alucingenas. A atropina e a hioscina, esta ltima conhecida tambm como escopolamina, so os alcalides obtidos delas e ainda muito empregados. A atropina tambm age como dilatador da pupila, efeito muito explorado em oftalmologia para exame do fundo de olho. HORMNIOS ESTEROIDAIS - Antes da Segunda Guerra Mundial, os hormnios esteroidais usados em teraputica eram obtidos de fontes animais, como ovrios, testculos, glndulas supra-renais e urina, sendo extrados em quantidades extremamente pequenas. Com o crescente interesse em se obter hormnios para a produo de contraceptivos e de cortisona, fontes mais abundantes de esterides foram pesquisadas. Dioscorea mexicana (Dioscoreaceae) forneceu a diosgenina, de cujo ncleo esteroidal pode-se obter a progesterona. Vrias sapogeninas so empregadas para a semi-sntese de cortisona e hormnios, como Agave e Yucca (ambas Agavaceae) e espcies do gnero Smilax (Smilacaceae). ANTICONCEPCIONAIS MASCULINOS - O gossipol, um triterpeno, uma substncia presente nas sementes de algodo que tem ao contraceptiva quando administrada a homens. Ele extrado de vrias espcies de Gossypium (Malvaceae). Aps dois meses de uso, essa substncia causa oligospermia pela destruio dos tbulos seminferos. Ele causa tambm efeitos colaterais, tais como a reduo do nvel de clcio no sangue, distrbios gastrointestinais, reduo da libido e esterilidade prolongada. VASOCONSTRITORES - A efedrina, um alcalide obtido dos caules de espcies de gimnospermas do 53
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gnero Ephedra, apresenta estrutura qumica muito prxima da adrenalina. Por essa razo, ela provoca acelerao do ritmo cardaco e da respirao, inibe a contrao da musculatura lisa e promove dilatao dos brnquios. Devido a esse ltimo efeito, a efedrina foi usada, no passado, no controle da asma. Esse alcalide ainda usado em formulaes para instilao nas narinas nos casos de constipao nasal. Atualmente obtida por sntese. A efedrina age tambm em nvel cerebral, apresentando um efeito estimulante semelhante ao das anfetaminas. Por essa razo, o seu eventual uso por atletas proibido. ANTIGLAUCMICOS E CONSTRITORES DA PUPILA - O glaucoma uma doena que causa desconforto e dor nos olhos devido ao aumento da presso intraocular. Espcies nativas do Brasil, do gnero Pilocarpus (Rutaceae) so fontes de pilocarpina, um eficiente alcalide no controle do glaucoma. Seus efeitos so antagnicos aos da atropina. INIBIDORES DA PLACA DENTRIA - Sanguinaria canadense (Papaveraceae), nativa da Amrica do Norte, muito curiosa devido secreo de um ltex vermelho. Nela existem diversos alcalides, sendo a sanguinarina, o mais importante. No Brasil, essa substncia ainda no usada, mas nos Estados Unidos a sanguinarina um componente da frmula de pastas dentifrcias e formulaes para bochechos. Esse alcalide possui ao antibacteriana, antifngica e antiinflamatria. A sanguinarina inibe o crescimento da grande maioria dos germes patognicos da placa dentria e apresenta toxicidade muito baixa. ANTISSPTICOS - Um dos males mais comuns em todos os pases a gripe. Devido queda na resistncia do organismo, h um maior risco nos ataques de gripe e resfriados, com a possibilidade de surgir complicaes, como a pneumonia. Um dos frmacos mais populares nos tratamentos da gripe uma substncia voltil, o cineol. Este apresenta ao anti-sptica, agindo sobre muitos germes patognicos. Acredita-se que ele previne complicaes posteriores. Apresenta tambm ao sobre as mucosas dos brnquios e das fossas nasais, dando uma sensao de bem-estar respiratrio. A fonte de cineol so os leos volteis das folhas de Eucalyptus globulus (Myrtaceae), a principal espcie de eucalipto com propriedades medicinais. ESTIMULANTES DO SISTEMA NERVOSO CENTRAL - O mais consumido frmaco com ao estimulante do sistema nervoso, em todo o mundo, a cafena. Trata-se de um alcalide que exerce ao estimulante no crtex cerebral, aumenta o estado de alerta, a capacidade de concentrao e de raciocnio e reduz a sensao de fadiga e sono. Alm disso, a cafena estimula a respirao, por aumentar a sensibilidade do bulbo pelo gs carbnico e promove acelerao dos batimentos cardacos e aumento discreto da diurese. A cafena largamente empregada em medicamentos da linha popular, em associao com analgsicos e antigripais. Esses medicamentos, para aliviar esses sintomas, contm um analgsico (geralmente aspirina) e a cafena para restabelecer a disposio geral do organismo. A cafena encontrada nas sementes secas do caf, Coffea arabica (Rubiaceae), originria das regies montanhosas da Etipia. Foi cultivada inicialmente pelos rabes, da o epteto especfico arabica. Coffea canephora, cuja variedade robusta apresenta sementes muito ricas em cafena, tambm utilizada. As folhas do ch (Camellia sinensis, Teaceae) e do mate (Ilex paraguaiensis, Aquifoliaceae), as sementes da cola (Cola nitida, Malvaceae) e do guaran (Paulinia cupana, Sapindaceae) so tambm fontes de cafena, embora apenas as sementes de cola sejam comercialmente usadas para a obteno do alcalide. ANTIASMTICOS A asma resultante da contrao da musculatura lisa dos bronquolos, o que acaba 54
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10. Plantas medicinais e txicas

por limitar a quantidade de ar que chega aos pulmes. So vrias as causas da asma, uma das mais comuns tem origem alrgica. A teofilina, um alcalide quimicamente muito semelhante cafena e com atividade estimulante do sistema nervoso central utilizada para minimizar os ataques de asma. A teofilina existe em pequenas quantidades no ch e obtida por semi-sntese, a partir da cafena. ENZIMAS PROTEOLTICAS - H medicamentos que apresentam ingredientes ativos representados por enzimas que desdobram protenas, liberando os seus aminocidos constituintes. Tais enzimas so teis para alguns casos de problemas do aparelho digestivo. A ficina, obtida do ltex de espcies de Ficus (Moraceae), a papana, obtida do ltex de espcies de Papaver (Papaveraceae) so dois exemplos. ADOANTES NO CALRICOS Atualmente, com o aumento da estimativa de vida humana, aumentou tambm a possibilidade do surgimento de diabetes. Alm disso, as pessoas, hoje em dia, tm uma grande preocupao em manter seu peso dentro de certos limites, por razes puramente estticas ou por medo de comprometimento da sade. Por isso, um nmero crescente de pessoas, principalmente aps os 40 anos de idade, procura ingerir cada vez menos acar. H, portanto, uma intensa procura por fontes naturais de adoantes no calricos. O mais conhecido atualmente o esteviosdio, obtido das folhas de estvia (Stevia rebaudiana, Asteraceae), uma planta nativa do Brasil e do Paraguai. O esteviosdio 200 vezes mais doce do que a sacarose (acar da cana) e praticamente atxico. Nos Estados Unidos e no Japo j se usa a taumatina, uma mistura de protenas que contm 207 aminocidos, obtida dos frutos de Thaumatococcus danielli (Marantaceae - famlia da cana-da-ndia), uma planta nativa da frica. O poder adoante da taumatina impressionante: 100 mL de uma soluo a 60% so suficientes para adoar 30 caixas dgua de 1000 L cada. A sensao adoante persiste na boca por 15-20 minutos, deixando um sabor residual de alcauz. Periandra mediterranea (anteriormente denominada Periandra dulcis, Fabaceae), um arbusto ou pequena rvore conhecida popularmente com alcauz-da-terra, cujas razes tm sabor adocicado, potencialmente indicada como fornecedora de substncias adoantes. Constatou-se que nesses rgos existem saponinas, chamadas periandrinas, responsveis pelo sabor doce. Essa planta nativa da nossa flora. PLANTAS TXICAS PARA O HOMEM Vamos descrever a partir daqui, apenas algumas espcies txicas mais importantes, devido a sua proximidade com o homem. Manihot esculenta - Mandioca (Euphorbiaceae) Apesar de ser uma planta largamente consumida pelo homem como fonte calrica, a mandioca, se preparada inadequadamente, causa uma intoxicao que, no raro, se mostra fatal. A raiz da mandioca contm uma substncia chamada linamarina. Sob a ao da enzima linamarase, presente nos tecidos da prpria raiz, a linamarina decompe-se, liberando, entre outras substncias, o cianidreto (HCN). Este o mesmo gs que se utiliza em alguns locais dos Estados Unidos nas cmaras de gs para execuo de condenados morte. A linamarina um representante do grupo dos glicosdeos cianognicos. Certas variedades de mandioca acumulam quantidades muito maiores de linamarina: so as chamadas mandiocas bravas. Sem anlise qumica, no possvel distinguir as variedades bravas das mansas. A linamarina ocorre em maiores quantidades na casca da raiz, mas a polpa branca comestvel contm quantidades considerveis do glicosdeo. 55
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Na circulao sangnea, o cianidreto libera o on cianeto, que transportado pela hemoglobina. Nas clulas, o cianeto liga-se fortemente ao citocromo mitocondrial, que responsvel pelo transporte de eltrons na respirao celular. Por essa razo, o intoxicado passa por um processo de asfixia celular que, dependendo da quantidade de cianeto no sangue, pode provocar a morte. A maneira mais segura de se consumir mandioca no ambiente domstico eliminar uma boa espessura dos tecidos mais externos da casca, deixar as partes descascadas imersas em gua por uma ou duas horas (o que causa morte das clulas e decomposio da linamarina) e cozinhar em gua fervente por pelo menos uma hora (para garantir a decomposio qumica do que restou da linamarina. Dieffenbachia picta - Comigo-ningum-pode (Araceae) Comigo-ningum-pode uma planta herbcea muito cultivada nos lares, nos estabelecimentos do pequeno comrcio (bares, mercearias) e tambm muito usada em rituais afro-brasileiros. Uma parcela da populao acredita que a comigo-ningum-pode uma planta capaz de neutralizar certos sentimentos negativos, como a inveja e o mau-olhado. As folhas da planta so muito vistosas, apresentando uma variegao, isto , uma distribuio irregular de reas verdes e albinas. A mastigao, ainda que de pequenas pores de folhas ou pecolos de comigo-ningum-pode, causa uma intensa irritao das mucosas da boca, faringe e laringe, com inchao (edema) da lngua e estreitamento da passagem de ar nas vias areas superiores. A pessoa pode perder a fala por algum tempo, da o nome ingls da planta, "dumb-cain", que significa a cana-do-mudo. Dependendo da gravidade da reao do organismo pode sobrevir a morte por asfixia. A irritao e o inchao so conseqncias do desencadeamento de um processo alrgico. Existem na planta, cristais longos (rfides) terminados em bisel e reunidos em feixes contendo algumas centenas deles. Estes feixes so embebidos por um suco vacuolar protico com atividade enzimtica, chamado dumbcana. Os cristais, por terem as extremidades cortantes, perfuram as mucosas e injetam nelas o suco contendo a dumbcana. Esta protena provoca a lise das membranas celulares que libera histamina, serotonina e outras aminas, desencadeando um intenso processo alrgico que leva formao do edema. Comigo-ningum-pode uma das plantas mais perigosas no ambiente domstico por ser muito comum e capaz de provocar uma reao muito intensa e de extrema gravidade a partir da simples mastigao de pequenas pores da folha. muito importante ensinar isto s crianas e manter sobre elas estreita vigilncia para evitar eventuais acidentes de intoxicao. Abrus precatorius - Jequiriti (Fabaceae); Jatropha curcas - Pinho-de-purga (Euphorbiaceae); Ricinus communis - mamona (Euphorbiaceae) Essas trs plantas tm em comum, protenas muito txicas em suas sementes. Elas so capazes de aglutinar hemcias, sendo letais em quantidades muito pequenas. A protena txica do jequiriti chamada abrina, a do pinho-de-purga, curcina, e a da mamona, ricina. O jequiriti uma trepadeira nocultivada, portanto, as pessoas no tm contato freqente com a planta. Suas sementes so muito vistosas, apresentando-se vermelhas com uma mancha negra, sendo utilizadas como objetos de adorno. s vezes, crianas ingerem as sementes semelhantes a contas do colar ou do tero, o que pode ser muito perigoso. J houve casos em que a ingesto de uma nica semente foi suficiente para matar uma criana. A semente do jequiriti situa-se entre os mais potentes venenos conhecidos, orgnicos ou inorgnicos. 56
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As sementes do pinho-de-purga e da mamona tm efeito semelhante quando ingeridas. Ambas contm grande quantidade de leo, que apresenta efeito purgativo. As protenas txicas presentes em ambas no ocorrem no leo, quando este extrado. Portanto, o leo de mamona, que era usado medicinalmente como purgativo, no tinha atividade txica. Porm, a torta que se obtm aps a extrao do leo altamente txica. H referncias de que cinco sementes de pinho-de-purga so suficientes para matar uma criana. As sementes do pinho-de-purga e da mamona, embora sem os atributos ornamentais das do jequiriti, so tambm vistosas, o que atrai a ateno principalmente de crianas. A mamona, devido ao fato de ser uma planta muito comum, oferece maior risco de intoxicao. O QUE FAZER NOS CASOS DE INTOXICAO POR PLANTAS importante conhecer as principais plantas txicas presentes no lar, no jardim, nos locais pblicos e nos arredores. Neste captulo foram apresentadas apenas algumas plantas que podem representar riscos de intoxicao para as pessoas. Deve-se assumir como norma rigorosa e geral o aconselhamento das pessoas, principalmente crianas, de no ingerir qualquer planta ou parte de planta, cultivada ou no, que seja desconhecida ou a respeito da qual no se tenha absoluta certeza sobre a sua inocuidade. No se deve tambm recorrer prtica de fazer chs ou outras preparaes medicamentosas de plantas, a no ser que se tenha total segurana de que o seu uso seguro. Deve-se combater a noo, totalmente infundada, mas infelizmente muito comum, de que as plantas, se no fazem bem, tambm no fazem mal. Na verdade, na ingesto de quailquer parte de uma planta desconhecida, muito mais provvel a ocorrncia de manifestaes indesejadas do que a inocuidade. Finalmente, no caso de uma intoxicao, chame um mdico ou leve a pessoa ao pronto socorro. Tenha mo um ramo da planta que motivou o acidente ou partes dela, mesmo que sejam fragmentos retirados da boca do intoxicado ou do vmito. possvel que o mdico desconhea a existncia do Centro de Intoxicaes local, que muitas vezes essencial para o tratamento das intoxicaes em geral, incluindo as causadas por plantas. Na cidade de So Paulo, temos o Centro de Controle de Intoxicaes da Prefeitura - Hospital Dr Arthur Ribeiro de Saboya, Rua Francisco de Paula Quintanilha Ribeiro, 860, CEP 043320-001. Telefones: (11) 5012-5311 ou 0800-771-3733 (Planto mdico) (11) 5011-5111, ramal 250 (Laboratrio) (11) 5011-5111, ramais 253 e 254 (Secretaria) (11) 5012-2399 (fone/fax da Coordenao e Secretaria) BIBLIOGRAFIA SUGERIDA BRUNETON, J. 1999. Pharmacognosy, Phytochemistry, Medicinal Plants. Intercept Ltd., Londres, 1119p. BRUNETON, J. 2001. Plantas Txicas. Editora Acribia S.A., Zaragoza, 527p. DEWICK, P.M. 2002. Medicinal Natural Products. A biosynthetic Approach. John Wiley & Sons, Chichester, 507p. LORENZI, H. & MATOS, F.J.A. 2002. Plantas Medicinais no Brasil. Instituto Plantarum de Estudos da Flora, Nova Odessa, 512p.

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Salatino, M.L.F.; Sampaio, M.C. & Salatino, A.

SIMES, C.M.O.; SCHENKEL, E.P.; GOSMANN, G.; MELLO, J.C.P.; MENTZ, L.A. & PETROVICK, P.R. 2000. Farmacognosia: da Planta ao Medicamento. Editora da Universidade Federal de Santa Catarina, Florianpolis, 821p. YUNES, R.A. & CALIXTO, J.B. 2001. Plantas Medicinais sob a tica da Qumica Medicinal Moderna. Argos, Editora Universidade, Chapec, 523p.

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11. Obteno e deteco de substncias de origem vegetal

11. OBTENO E DETECO DE SUBSTNCIAS DE ORIGEM VEGETAL Cristiane Del Nero Rodrigues (cristiane.rodrigues@gmail.com) Lucimar Barbosa da Motta (lugalll@yahoo.com.br) Mourisa Maria de Souza Ferreira (mourisa@usp.br)

As plantas protegem-se contra a herbivoria de muitas maneiras, tais como a presena de espinhos, acleos, paredes celulares lignificadas ou silicosas e a sntese de substncias qumicas de proteo, que podem ser repelentes, impalatveis, urticantes ou txicas. Por meio da seleo natural e da coevoluo, em resposta presso de predao, uma grande variedade de substncias de defesa foram selecionadas, dentre elas, falaremos aqui dos glicosdeos cianognicos, dos alcalides e os dos leos volteis. Glicosdeos cianognicos so substncias que liberam cianidreto (HCN) quando hidrolisadas. Esta reao depende da ao de enzimas endgenas que liberam HCN como produto final da hidrlise dos glicosdeos. Tanto os glicosdeos como as enzimas ocorrem naturalmente no tecido vegetal, mas em compartimentos separados, de forma que para que ocorra o contato entre eles necessrio que o tecido vegetal seja lesionado. Isto ocorre durante o processamento das plantas como, por exemplo, cana-deacar (Saccharum officinarum, Poaceae) e mandioca (Manihot esculenta, Euphorbiaceae), quando so modas, amassadas ou cortadas e, por isso, o cuidado na ingesto dessas plantas quando cruas. Os glicosdeos so formados biossinteticamente a partir de aminocidos. Por exemplo, a linamarina proveniente do aminocido valina, e ocorre em muitas plantas junto com a lotaustralina, derivada da isoleucina, como na mandioca e na linhaa (Linum usitatissimum, Linaceae). A cianognese tem sido detectada em pelo menos 2.650 espcies de plantas provenientes de 550 gneros e 130 famlias de pteridfitas, gimnospermas e angiospermas, assim como tambm tem sido registrada em bactrias, fungos e liquens, demonstrando, desta maneira, ser um fenmeno bastante difundido no somente entre os vegetais. As famlias nas quais a cianognese especialmente comum so: Araceae, Asteraceae, Euphorbiaceae, Fabaceae, Poaceae, Papaveraceae, Proteaceae, Passifloraceae, Rosaceae, Ranunculaceae, Salicaceae e Sapindaceae. Tanto cianoglicosdeos como cianolipdeos, quando hidrolisados por enzimas, formam acares, cidos graxos, aldedos ou cetonas e cianidreto. A liberao de cianidreto considerada um mecanismo de defesa vegetal e o seu efeito a inibio da cadeia respiratria, resultando em morte do herbvoro por asfixia. Linamarina, lotaustralina, durrina, epilotaustralina, epieterodendrina, triglochinina, amigdalina e prunasina so exemplos de glicosdeos cianognicos presentes em plantas comestveis como trigo (Triticum aestivum, Poaceae), cevada (Hordeum vulgare, Poaceae), aveia (Avena sativa, Poaceae), sorgo (Sorghum bicolor, Poaceae), mandioca (Manihot esculenta, Euphorbiaceae), broto de fejo (Phaseolus luantus, Fabaceae), feijo (Phaseolus vulgaris, Fabaceae), linhaa (Linum usitatissimum, Linaceae) e ma (Malus pumila, Rosaceae). O princpio txico com odor de amndoas amargas a amigdalina, que difere de todos os outros glicosdeos cianognicos conhecidos por apresentar o acar gentiobiose no lugar da glicose. O gliosdeo prunasina possui a mesma estrutura do amigdalina, mas com a glicose como acar. Ambas ocorrem em sementes de pssego (Prunus) e ma, pertencentes as Rosaceae. 59
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Rodrigues, C.D.N.; Motta, L.B. da & Ferreira, M.M.S

O HCN liberado dos glicosdeos cianognicos de acordo com o esquema abaixo: R1 O-glicose hidrlise enzimtica R1 OH R1 Reao espontnea +

C
R2 CN

C
R2 CN

C=

HCN

R2

Glicosdeo cianognico

Cianoidrina

onde R1 e R2 podem ser grupos alqulicos, aromticos ou outros substituintes quaisquer. Alcalides so substncias orgnicas nitrogenadas, quase sempre de origem vegetal e que apresentam geralmente carter alcalino. Esto entre os mais importantes compostos ativos do ponto de vista farmacolgico ou medicinal. Entre eles temos a atropina, a cafena, a cocana, a nicotina, a pilocarpina e a morfina. A morfina foi primeiramente obtida por meio de cortes na cpsula da papoula (Papaver somniferum, Papaveraceae), quando ainda verde, de onde se retiram o ltex (pio) que contm cerca de 25 alcalides diferentes. Quando seco, o ltex passa a se chamar p de pio. A morfina utilizada na medicina como analgsico e como inibidor da tosse. A cafena um estimulante encontrado em plantas como o caf (Coffea arabica, Rubiaceae), presente nas folhas e nos frutos, o cacau (Theobroma cacao, Malvaceae) e o ch-da-ndia (Camellia sinensis, Theaceae). De acordo com o processo de oxidao da cafena, temos trs tipos de chs: o chpreto, o ch-verde e o ch-branco. No ch-preto a cafena encontra-se totalmente oxidada, sendo este ch o mais forte em paladar e com maior quantidade de alcalide. Outro ch com grande quantidade de cafena o ch-mate extrado de Ilex paraguariensis (Aquifoliaceae), planta de origem brasileira chamada de chimarro no Rio Grande do Sul, principalmente, e de terer no Paran e no Mato Grosso de Sul. Outro alcalide parecido com a cafena a guarana, encontrado nos frutos da planta do guaran (Paullinia cupana, Sapindaceae), utilizados pela indstria alimentcia para fazer o refrigerante de guaran. A nicotina outra substncia estimulante e obtida de folhas de tabaco (Nicotiana tabacum, Solanaceae), responsvel pela manuteno de um dos maiores ramos industriais na atualidade, a indstria tabagista. A atropina, utilizada atualmente como estimulante cardaco e, desde muito tempo, como dilatador de pupilas, era extrada do meimendro-egpcio (Hyoscyamus muticus, Solanaceae) no ltimo sculo a.C.. Clepatra j usava esse alcalide para dilatar as pupilas, o que na poca era considerado como um adorno feminino mais atraente. J na Idade Mdia era extrada da beladona (Atropa belladonna, Solanaceae) e usada com o mesmo fim. A pilocarpina, obtida de Pilocarpus jaborandi e P. microphyllus (Rutaceae), utilizada pela oftalmologia no tratamento de glaucoma. A cocana obtida da planta da coca (Erythroxylum coca, Erythroxylaceae), um arbusto nativo da regio andina da Bolvia e do Peru. Muitos habitantes das grandes altitudes mascam pequenas quantidades de folhas de coca para reduzir a fome, a fadiga, a sensao de falta de ar, o cansao e os sintomas de cefalia, nuseas e vmitos, entre outros, resultantes das condies com baixos nveis de oxignio. Ao mastigar as folhas, concentraes muito reduzidas de cocana so ingeridas aliviando parte desses malestares. 60
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11. Obteno e deteco de substncias de origem vegetal

Vrios remdios possuem em sua constituio alcalides como a cafena, a codena e a atropina em analgsicos; a morfina e a papaverina, em relaxantes musculares; e a pilocarpina, em colrios para glaucoma. leos volteis so conhecidos como uma mistura de substncias como os terpenides, os fenis e os alcois, entre outros. Os leos volteis tm merecido muita ateno, pois, esto presentes nas plantas aromticas e podem apresentar ao farmacolgica alm de servirem como atraentes, repelentes e at como toxinas para insetos e microorganismos. O uso desses leos observado no nosso dia-a-dia, como o caso do leo da citronela, como repelente de insetos. O leo de citronela tem como componente principal, o citronelal, que uma substncia presente em algumas espcies de plantas, como por exemplo, o capim citronela (Cymbopogon nardus e C. winterianus, Poaceae) e o eucalipto (Eucaliptus citriodora, Myrtaceae). Outros componentes dos leos volteis usados pelo homem com ao diversa so o pineno, presente na resina do pinheiro (Pinus sp, Pinaceae), o nerol extrado do capim-limo (Cymbopogon citratus, Poaceae), o limoneno do leo da casca do fruto de diversas espcies de laranja e limo (Citrus spp., Rutaceae), e algumas substncias obtidas de plantas utilizadas como condimento alimentar, como o eugenol do cravo-da-ndia (Eugenia caryophyllata, Myrtaceae) e o mentol da hortel (Mentha piperita, Lamiaceae). A forma como obtemos esses leos pode variar conforme a localizao na planta, da proposta de utilizao do mesmo e das suas caractersticas fsico-qumicas (por exemplo, volatilidade e solubilidade em solventes orgnicos apolares e em gua). De forma geral os leos volteis so obtidos por meio da destilao por arraste de vapor dgua. Entretanto, os leos provenientes dos pericarpos de frutos ctricos so obtidos por prensagem. Em laboratrio, esses leos podem ser obtidos de forma mais elaborada, por meio do aparelho de Clevenger e em escala industrial em aparelhos semelhantes a alambiques; em ambos os casos o leo obtido por destilao a vapor ou arraste por vapor d'gua. Os leos volteis tambm podem ser extrados por meio de solventes especficos em laboratrio. No nosso cotidiano muitas vezes realizamos alguns procedimentos artesanais com o objetivo de extrair essas substncias de origem vegetal, entre esses esto os famosos chs, que so realizados de diversas formas. A infuso consiste em colocar gua fervendo sobre as partes das plantas das quais se deseja extrair os princpios ativos. Depois da juno da gua, o recipiente deve ser abafado com uma tampa at esfriar, em seguida, coa-se e o lquido fica pronto para ser consumido, esse processo bastante utilizado para chs de flores e folhas. Outra forma de extrao de substncias por meio de chs mediante a decoco, que consiste em colocar as partes das plantas em um recipiente com gua e levar ao fogo para ferver durante algum perodo com o recipiente fechado ( varivel de acordo com a planta de interesse). Em seguida, coa-se e o lquido fica pronto para ser consumido, quente ou frio de acordo com o interesse. Esse processo bastante utilizado para chs de cascas e razes. interessante ressaltar que o processo de decoco muitas vezes realizado com o recipiente aberto, isso pode levar a um menor rendimento, pela perda por evaporao dos leos volteis.

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DETECO DO ION CIANETO A cianognese detectada de maneira rpida e simples nos tecidos vegetais por meio do teste de colorao de picrato que especfico para HCN. Papis de picrato so preparados mergulhando-se pedaos retangulares de papel de filtro em soluo aquosa saturada de cido pcrico (C6H3N3O7), previamente neutralizado com bicarbonato de sdio (NaHCO3) e filtrado. Os papis secos podem ser guardados indefinidamente. LISTA DE MATERIAL NECESSRIO Bquer Chapa aquecedora ou banho-maria Clorofrmio Estante para tubos de ensaio Faca e estilete Papeis filtro (1,5 X 0,5 cm) Pina Pipeta de Pasteur com pipetador (pra) Pipeta graduada Soluo de cido pcrico Raiz de mandioca (Manihot esculenta) e de cenoura (Daucus carota) Rolhas com um pedao de arame formando um gancho Tabua para cortar carne Tubos de ensaio grandes

PROCEDIMENTOS 1. Impregne o papel filtro com a soluo de cido pcrico com auxlio de uma pina e um conta-gotas. Deixe o papel secar e encaixe-o no gancho da rolha de cortia. OBS: Fure e atravesse a rolha de cortia de lado-a-lado, no meio, com um arame; fixe o arame rolha em um dos extremos para ele no soltar; no outro extremo faa um gancho de aproximadamente 4 cm de comprimento; 2. Pique, sem descascar, a raiz da mandioca e da cenoura em cubos pequenos e finos (tipo cebola); 3. Coloque em tubos de ensaio cerca de 1 cm de altura dos pedaos de cada raiz e adicione em cada um 2 mL de gua e 2 gotas de clorofrmio; 4. Feche os tubos de ensaio com as rolhas contendo o papel impregnado com a soluo cido pcrico. O papel no deve ficar em contato com a raiz, com a gua ou com as paredes do tubo de ensaio; 5. Coloque os tubos dentro de um bquer com gua e aquea por 30 min a 60 A gua deve cobrir C. 1-2 cm acima da altura da raiz+gua e os tubos devem ficar em posio reta (cuidando para o papel no encostar na parede do tubo). prefervel deixar o material incubando por 2 horas a 40 pois a esta temperatura os vapores de gua n o molham o papel e o picrato, que solvel C, em gua, no pingar; 6. Observe a mudana de colorao do papel e compare os resultados da mandioca e da cenoura. Na presena de HCN o papel de picrato mudar de amarelo para marrom avermelhado; 7. Se a reao der negativa ou nenhuma mudana for observada, o tubo deve ser deixado temperatura ambiente por 24-48 horas e, ento, reexaminado. A intensidade da mudana de cor est relacionada quantidade de HCN presente. Para fazer a soluo de cido pcrico (trinitrofenol): dissolva 0,66 g de trinitrofenol em 100 mL de gua.

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11. Obteno e deteco de substncias de origem vegetal

DETECO DE ALCALIDES LISTA DE MATERIAL NECESSRIO cido clordrico 1% Balo de destilao de fundo chato Banho-maria Basto de vidro Chapa aquecedora Cpsula de porcelana Clorofrmio Estante para tubos de ensaio Funil de vidro simples Hidrxido de amnio Lmina de microscpio Material seco (remdios e plantas) Papel alumnio Papel de Filtro Pipeta graduada Pipeta de Pasteur com pipetador (pra) Proveta graduada de 10 e 100 mL Reagente de Draggendorff Refrigerante de cola ou guaran Rolha com vareta de vidro longa (+ 150 cm) Sulfato de sdio anidro Suporte e garra Tubo de ensaio

PROCEDIMENTOS Extrao para material lquido: 1. Com o auxlio de uma pipeta graduada, transfira 10 mL do refrigerante para um tudo de ensaio; 2. Adicione com uma pipeta de Pasteur 4 gotas de hidrxido de amnio para alcalinizar o meio e possibilitar a extrao dos alcalides com solvente orgnico; 3. Adicione 4 mL de clorofrmio para a extrao dos alcalides. Com o auxlio de outra pipeta de Pasteur, colete a frao clorofrmica (inferior) e coloque-a numa cpsula de porcelana. Repita este procedimento mais 2 vezes juntando todas as fraes na cpsula; 4. Evapore o solvente completamente em banho-maria (se possvel em uma capela com exausto). Extrao para material seco 1. Pese 0,2 g de material seco e transfira para um balo de destilao de fundo chato; 2. Adicione de 5 a 10 gotas de hidrxido de amnio, certificando-se de que todo o material foi umedecido. 3. Adicione 10 mL de clorofrmio. Tampe o balo com uma rolha perfurada com uma vareta de vidro longa acoplada (a vareta substitui um condensador e tem por finalidade evitar a perda do solvente por evaporao, uma vez que os vapores de clorofrmio atingiro altura e condensaro retornando ao balo). Coloque o balo em uma chapa aquecedora apoiando com uma garra o sistema (balo + vareta longa). Mantenha em ebulio sob refluxo por 30 minutos; 4. Resfrie o extrato deixando-o sobre uma bancada, embrulhe o balo com papel alumnio; 5. Filtre para uma cpsula de porcelana usando um funil de vidro simples com papel de filtro e um pouco de sulfato de sdio anidro; 6. Evapore o solvente completamente em banho-maria (se possvel em uma capela com exausto).

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Testes de Caracterizao de Alcalides 1. Adicione duas gotas (no mximo) de HCl 1% aos resduos das cpsulas de porcelana. Os resduos sero homogeneizados com o auxlio de um basto de vidro pequeno; 2. Transfira gotas da soluo cida para uma lmina de microscpio e adicione ao lado uma gota do reagente de Draggendorff. Misture ambas as solues usando uma pipeta de Pasteur e observe a formao de precipitado que indicar a presena de alcalides. Para fazer o reagente de Draggendorff (iodobismutato de potssio): junte 50 mL de gua a 5 g de carbonato de bismutila, adicione 12 mL de cido clordrico e agite at quase dissoluo; junte aos poucos 25 g de iodeto de potssio e agite sempre. Aps dissoluo, complete com gua para obter 100 mL de volume final. Para fazer a soluo de cido clordrico (HCl) 1%: adicione 9 mL de gua destilada numa proveta de 10 mL de capacidade; adicione 0,1 mL de cido clordrico concentrado; complete com gua para obter 10 mL de volume final. EXTRAO DE LEOS VOLTEIS POR ARRASTE DE VAPOR DGUA: USO DO APARELHO DE CLEVENGER LISTA DE MATERIAL NECESSRIO Aparelho de Clevenger Balo de destilao de 1 L Bquer Chapa aquecedora Folhas de capim-limo (Cymbopogon citratus) Mangueiras de borracha Suporte e garra Tesoura Vidro pequeno com tampa

PROCEDIMENTOS 1. Com o auxlio de uma tesoura, pique o material; 2. Transfira o material para um balo de destilao de fundo chato e boca esmerilhada. A capacidade do balo depender da quantidade de material usada para a extrao (no caso do capim limo necessrio coletar material suficiente para preencher metade de um balo de 1 L, pois o rendimento de leo baixo); 3. Adicione gua destilada at cobrir o material e coloque o balo sobre uma chapa aquecedora; 4. Preencha o aparelho de Clevenger com gua destilada at a ltima marca da graduao e encaixeo no balo. 5. Deixe em ebulio por aproximadamente 2 horas. O leo voltil ser arrastado pelo vapor dgua que, ao entrar em contato com a superfcie fria do condensador do aparelho de Clevenger, condensar e se depositar no bulbo. A cada gota de leo depositada sobre o bulbo, uma gota dgua retornar ao balo de destilao por meio do tubo inclinado do sistema, mantendo, desta maneira, volume constante; 6. Para retirar o leo, abra a torneira e escoe a gua com cuidado para um bquer. Quando a frao contendo o leo chegar torneia, retire o bquer com a gua e colete o leo num recipiente pequeno com tampa.

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11. Obteno e deteco de substncias de origem vegetal

BIBLIOGRAFIA SUGERIDA HARBORNE, J.B., TURNER, B.L. 1984. Plant Chemosystematics. Academic Press, Londres, 562p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 7 edio. Editora Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 830p. SIMPSON, B.B. & OGORZALY, M.C. 2001. Economic Botany: Plants in our World. 3 edio. McGraw-Hill. Nova Iorque, 529p. STASI, L.C.D. 1996. Plantas Medicinais: Arte e Cincia. Editora Unesp, So Paulo, 230p. Associao Brasileira de Produtos de Amido e Mandioca

http://www.abam.com.br/livroscargil/Capitulo%202/Capitulo%205.pdf Ministrio Pblico Federal - Procuradoria Geral da Repblica Secretaria de Servios Integrados de Sade http://www.pgr.mpf.gov.br/pgr/saude/drg/opio.htm

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12. Uso das plantas na alimentao saudvel

12. USO DAS PLANTAS NA ALIMENTAO SAUDVEL Dborah Yara A. Cursino dos Santos (dyacsan@ib.usp.br)

Desde a poca em que o homem tinha o hbito de caador-coletor as plantas j eram utilizadas para diversos fins, incluindo a alimentao. Com o aparecimento do hbito sedentrio, o homem passou a domesticar animais e plantas, desenvolvendo a agricultura. Desde ento, as plantas tm desempenhado um importante papel no nosso dia-a-dia no que se refere obteno dos nutrientes para uma vida saudvel. A m nutrio pode ser vista de duas formas paradoxalmente conflitantes. Uma delas est geralmente associada pobreza, s condies ambientais extremas (por exemplo, a seca no Nordeste) ou aos conflitos polticos (por exemplo, a guerra em Kosovo - 1999). Dessa maneira, os indivduos no tm acesso ao mnimo de alimento necessrio para a manuteno de um estado satisfatrio de sade. A outra forma est associada alimentao incorreta, freqentemente ligada superalimentao. Nesses casos os problemas advindos podem ser de obesidade, diabetes e doenas cardiovasculares. De maneira geral, os pases situados acima do Trpico de Cncer ou abaixo do Trpico de Capricrnio apresentam uma situao muito boa, ou pelo menos satisfatria de suprimentos nutricionais. Os habitantes em pases situados na faixa intertropical apresentam, no mximo, um suprimento alimentar adequado. Em geral, as pessoas que vivem em pases subdesenvolvidos recebem de a das calorias dirias consumidas pela populao dos pases mais abastados (Figura 1). O conhecimento das necessidades nutricionais do organismo, da composio dos principais alimentos que fazem parte da nossa dieta e das suas propriedades nutricionais deveria fazer parte da formao cultural do cidado. A alimentao humana composta de vrios tipos de molculas orgnicas necessrias manuteno da sade. Alm da gua, podemos encontrar diferentes quantidades de carboidratos, protenas, lipdeos, vitaminas e sais minerais que vo ser digeridos atravs de processos enzimticos no trato gastrointestinal. As nossas clulas requerem alimento para as seguintes finalidades: a) liberao de energia necessria ao metabolismo - alimentos energticos, b) proviso de matria-prima para a produo de novas clulas - alimentos plsticos e c) proviso de reguladores do metabolismo. A energia necessria ao trabalho celular pode ser obtida dos carboidratos, dos lipdeos e das protenas. Esses dois ltimos, alm da gua e sais minerais, so teis como matrias-primas para construo de novas clulas. Protenas, vitaminas e sais minerais so substncias reguladoras do metabolismo. Grande parte dos alimentos que utilizamos apresenta todas as classes de substncias acima, sempre com a predominncia de uma ou outra categoria. Por exemplo, os cereais (gros obtidos de certas Poaceae, como o trigo, o arroz e o milho) contm predominantemente carboidratos, mas possuem tambm lipdeos (por exemplo, o leo de milho muito conhecido e apreciado em culinria), vitaminas (sabe-se, por exemplo, que a remoo da parte perifrica do gro de arroz durante o seu beneficiamento priva-o da vitamina B1) e sais minerais. A carne muito rica em protenas, mas contm ainda lipdeos (gordura), em maior ou menor proporo, dependendo do animal e do tipo de carne considerado. Por exemplo, o porco tem, em geral, carne muito gordurosa, enquanto o peixe muito pobre em gorduras. O cupim uma carne bovina muito rica em gordura, enquanto o "filet mignon" tem relativamente pouco lipdeo. A carne apresenta 67
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tambm carboidratos (glicognio) e fonte de elementos reguladores importantes, como o ferro. H alguns alimentos que contm quase que exclusivamente uma dessas substncias. O acar refinado um caso extremo, formado exclusivamente por carboidratos (sacarose). A manteiga e o toucinho aproximam-se dessa condio, sendo constitudos basicamente por lipdeos.

Figura 1. Porcentagem da populao em condies de subnutrio (2003). Observem que esse fato muito mais grave em pases localizados em regies tropicais. Fonte: FAO - http://faostat.fao.org. A necessidade diria de energia de uma pessoa adulta estimada por volta de 2.400 Kcal, podendo ser satisfeita indiretamente por fontes glicdicas (carboidratos), lipdicas ou proticas. Dessa forma, existe uma grande variedade de alimentos que podem suprir essas necessidades energticas, sendo os lipdeos os mais eficientes. Durante o metabolismo, 1 g de pura protena ou de carboidrato pode render 4 calorias, enquanto 1 g de lipdeo fornece 9 calorias para o corpo. Com relao s substncias reguladoras e s matrias-primas para a reproduo celular, a questo mais complexa. Por exemplo, a vitamina B12 s fornecida por alimentos de origem animal. Da mesma forma, existem alguns cidos graxos considerados essenciais que s podem ser obtidos por meio de glicerdeos de origem vegetal. De forma geral, os alimentos de origem animal fornecem relativamente mais protenas que os vegetais. A carne de peixe ideal nesse particular por apresentar pouca gordura. Entre os alimentos de origem vegetal, as leguminosas so as fontes mais ricas em protenas. Algumas fontes tradicionais de carboidratos (cereais e tubrculos) apresentam quantidades menores de protenas. Outro fator importante corresponde s necessidades mnimas de protena em relao s calorias que devem ser ingeridas diariamente. Uma criana, em geral, necessita de 4 g de protena para cada 100 calorias, enquanto que para um adulto essa necessidade cai para 2,5 g/100 cal. Com isso, cabe salientar que a

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escolha de uma dieta equilibrada muito mais importante do ponto de vista nutricional (aproveitamento protico) do que do ponto de vista calrico. COMPOSIO QUMICA DOS ALIMENTOS Carboidratos A principal funo dos carboidratos prover energia continuamente para o corpo. Para isso, molculas complexas de carboidratos so quebradas durante a digesto em molculas simples de seis tomos de carbono que so absorvidas e transportadas pela corrente sangnea por todo o corpo, sendo metabolizadas rapidamente mediante a respirao celular. Neste processo a energia da molcula orgnica transferida para a adenosina trifosfato (ATP). Dentro da clula, a glicose pode ser usada na produo de glicognio (glicognese) ou diretamente como fonte de energia. O corpo usa a energia do ATP para produzir calor, para reparar danos nos seus tecidos, para lutar contra infeces e para a reproduo. O homem deve ingerir carboidratos continuamente, afim de manter a reserva de glicognio. Quando a ingesto de glicose inadequada, a reserva de glicognio do corpo utilizada para o suprimento de energia. Em condies de baixos teores de carboidratos, as protenas do corpo podem ser metabolizadas para suprir a energia necessria aos processos metablicos. Alm disso, os carboidratos exercem papel importante no metabolismo dos lipdeos e so essenciais para o bom funcionamento do sistema nervoso central. Alm da ingesto direta de acares, o amido uma das principais formas de ingesto de carboidratos. Os cereais representam os recursos mais extensamente explorados, principalmente o trigo, o arroz e o milho. A sua principal contribuio diettica se relaciona ao fornecimento de energia, devido ao alto contedo de amido. Outras fontes amilceas, todas elas inferiores aos cereais por conterem menos protenas, so em geral plantas que apresentam rgo subterrneo espessado, sob a forma de razes (mandioca, batata-doce), tubrculos (batata, inhame) e bulbos (taioba). Protenas Estas substncias so molculas grandes e complexas compostas de repetidas subunidades denominadas aminocidos, que desempenham diversos papis importantes no corpo humano. Quando as protenas dos alimentos de origem vegetal e animal so digeridas, os aminocidos podem ser absorvidos em diferentes escalas pelo corpo e serem utilizados na sntese de novas protenas pelo homem. Alm disso, as protenas podem ser metabolizadas na respirao celular para produo de energia. Existem cerca de 20 aminocidos diferentes que participam da formao das molculas proticas. Desses, oito no podem ser sintetizados no corpo humano em quantidades suficientes para o bom funcionamento celular. Por isso, so chamados essenciais, pois devem ser obtidos por meio da alimentao. So eles fenilalanina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, treonina, triptofano e valina. Protenas que contm os aminocidos essenciais podem ser encontradas em fontes alimentares de origem animal e vegetal. As protenas contidas nos alimentos so classificadas como completas ou incompletas, dependendo do contedo de seus aminocidos. Uma protena completa (protena de alta qualidade) no s contm todos os aminocidos essenciais, como os apresenta nas quantidades ideais para a manuteno do balano de nitrognio e promoo do crescimento normal do indivduo. Em uma protena incompleta (protena de baixa qualidade) faltam um ou mais aminocidos essenciais. 69
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A existncia dos aminocidos essenciais torna mais complexa a questo das necessidades mnimas de protena para o ser humano, pois, o problema passa a ser no s de ordem quantitativa, mas qualitativa. O valor biolgico de um alimento reflete o quanto ele pode suprir as necessidades do organismo pelos aminocidos essenciais. De maneira geral, protenas de alta qualidade so mais comuns em fontes alimentares de origem animal, enquanto aquelas de origem vegetal so incompletas em termos de um ou outro aminocido essencial e por isso apresentam valor biolgico inferior. A composio dos aminocidos presente nas protenas do ovo de galinha tem sido considerada a melhor entre as fontes comuns de alimento. O valor limitante para o pleno aproveitamento das protenas contidas em um alimento a proporo do aminocido que apresenta o menor ndice, em comparao com o valor deste mesmo aminocido da protena padro (ovo de galinha). Nos cereais, o aminocido em menor proporo a lisina. Nesses casos, a quantidade desse elemento limitante para o aproveitamento protico deste alimento. J para as sementes de leguminosas o fator limitante a concentrao de metionina. Todos os aminocidos essenciais podem ser obtidos por meio de vegetais. A necessidade nutricional de um indivduo pode ser suprida por uma dieta suficientemente variada de gros, frutas e outros vegetais. Dessa forma, a combinao milenar que o homem vem fazendo na sua alimentao entre um cereal e uma leguminosa, arroz e feijo, milho e lentilha, milho e feijo, gro de bico ou ervilha, provem uma complementao nutricional adequada em termos de aminocidos essenciais. Lipdeos Os lipdeos constituem um diverso grupo de substncias orgnicas que incluem as gorduras e os leos. So metabolizados durante a respirao celular provendo o corpo com altos nveis energticos. Alm disso, os lipdeos, assim como as protenas, desempenham importantes papeis no organismo como: 1) hormnios (mensageiros qumicos que regulam diversas funes no corpo humano) e 2) componentes essenciais das membranas celulares. Os leos podem tambm contribuir na dieta humana como solventes de algumas vitaminas (A, D, e E) que so lipossolveis e, dessa forma, so absorvidas pelo corpo somente quando esto dissolvidas nos leos ou gorduras. Nas plantas, os leos fixos so encontrados principalmente nas sementes, com a funo principal de reserva energtica para o embrio durante a germinao. Dentro da semente os leos podem estar armazenados no endosperma (por exemplo, mamona e coco), nos cotildones (por exemplo, amendoim, soja e algodo) ou no escutelo, o nico cotildone modificado encontrado nos cereais (por exemplo, milho). Quimicamente so, na maioria, misturas de triglicerdeos, ou seja, so formados por trs molculas de cidos graxos que esterificam uma molcula de glicerol:

H2C O CO HC O CO H2C O CO
glicerol

CH3 CH3 CH3


cido graxo triglicerdeo

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Os cidos graxos so substncias altamente energticas, pois possuem relativamente poucos tomos de oxignio na molcula. Dentre as reservas energticas encontradas em sementes (amido, protenas e leos), os triglicerdeos so os mais eficientes em termos de potencial energtico. Da energia total produzida pelos lipdeos, 95% provm dos cidos graxos formadores dos trigliceris, sendo o restante provido por meio das molculas de glicerol. Assim como os aminocidos formadores das protenas, existem alguns cidos graxos ditos como essenciais. Eles so necessrios para uma boa nutrio e no podem ser sintetizados pelo organismo a partir de molculas precursoras. Aos cidos graxos essenciais podem ser atribudas algumas funes como: 1) precursores de eicosanides (prostaglandinas e leucotrienos) que so potentes mediadores nos processos antiinflamatrios, 2) parte importante na modulao do sistema imunolgico, 3) componentes celulares nas membranas lipoproticas e de fosfolipdeos e 4) podem atuar como co-fatores enzimticos. Um exemplo o cido linolnico (C18:3), cuja ausncia pode acarretar eczema em crianas. Os cidos graxos fazem parte dos leos ou gorduras, podendo ser de dois grupos: cidos graxos insaturados e cidos graxos saturados, representando a ocorrncia ou no de ligaes olefnicas nas molculas. Os cidos graxos comumente encontrados nos leos vegetais so: cidos graxos saturados C4:0 cido butrico C6:0 cido caprico C8:0 cido caprlico C10:0 cido cprico C12:0 cido lurico C14:0 cido mirstico C16:0 cido palmtico C18:0 cido esterico C20:0 cido araqudico C22:0 cido lignocrico O nmero antes do sinal de : representa a quantidade de tomos de carbono da molcula. O nmero aps o sinal de : indica o nmero de insaturaes (ligaes olefnicas). A presena de insaturaes representa uma importante caracterstica qumica e nutricional dessas substncias. As propriedades fsicas e qumicas dos leos esto relacionadas sua composio em termos da natureza e proporo de seus cidos graxos constituintes. Os leos vegetais apresentam aplicaes econmicas diversas, como solventes de tintas e vernizes, e como matria-prima para a produo de sabes e xampus (como os leos de coco e de babau). Entretanto, o consumo desses leos na alimentao enorme, tanto direta como indiretamente. Os mais utilizados so o leo de soja, de milho, de girassol e de oliva. Alguns desses leos podem ser usados na indstria para produo de margarina. Para isso, o leo vegetal deve sofrer um processo chamado de hidrogenao cataltica, no qual o leo bombardeado com hidrognio gasoso sob presso na presena de um catalizador. Muitos especialistas acreditam que grandes quantidades de cidos graxos e colesterol na dieta so prejudiciais sade. Os cidos graxos no organismo convertem-se, em grande parte, em colesterol. Este 71
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cidos graxos insaturados C16:1 cido palmitolico C18:1 cido olico C18:2 cido linolico C18:3 cido linolnico

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se deposita, juntamente com outros lipdeos, na parede interna das artrias. Ocorre ento proliferao de tecido conjuntivo e leses degenerativas da parede, com o seu conseqente enrijecimento. Esse quadro conhecido como arteriosclerose. Se ele ocorrer em artrias coronrias, os riscos de um mbolo obstruir o vaso na regio espessada e provocar um enfarto so muito grandes. Por essa razo, h uma corrente que recomenda evitar a ingesto de glicerdeos com altas propores de cidos graxos saturados, como as gorduras animais; aconselha-se a substituio dessas gorduras por lipdeos de origem vegetal, que so predominantemente insaturados. Por outro lado, outros especialistas comeam a temer a presena de lipdeos insaturados na dieta, por considerarem que eles sejam perigosos devido facilidade com que so peroxidados. Os perxidos colaboram para a formao de tumores malignos e, dessa forma, os cidos graxos poliinsaturados poderiam ser uma causa do surgimento de cncer. Entretanto, os cidos graxos insaturados presentes dentro das clulas no sofrem auto-oxidao devido ao inibitria da vitamina E, de vrias enzimas e possivelmente do cido ascrbico. No caso de algumas doenas, este processo de auto-oxidao pode ocorrer, levando formao de depsitos anormais de lipdeos em certos tecidos. Atualmente, muito se tem falado sobre as gorduras trans. Esse termo est relacionado estrutura qumica dos cidos graxos que compem essas gorduras e/ou leos. Esses cidos graxos trans podem ser encontrados em pequenas quantidades em alimentos de origem animal como carne, leite e derivados. No entanto, a maior parte desses cidos graxos produzida no processo industrial de hidrogenao (reao do leo com hidrognio) de leos vegetais. Nesse processo, os leos tornam-se mais consistentes, passando de lquidos a pastosos ou slidos. O aquecimento dos leos vegetais tambm responsvel pelo aparecimento desses cidos graxos trans. As principais fontes desses cidos graxos so alimentos industrializados como biscoitos, batatas fritas, bolos, pes, congelados, fast food, entre outros. Estudos recentes tm sugerido problemas de sade relacionados ao consumo excessivo de cidos graxos trans como maior incidncia de cncer de mamas e aumento nos teores de colesterol sangneo, principalmente o LDL, aumentando os riscos de acidentes cardacos. Vitaminas Vitaminas so substncias orgnicas presentes em quantidades diminutas nos alimentos, que auxiliam na regulao do metabolismo e no funcionamento normal do corpo humano. Estas substncias so distintamente sensveis quanto a exposio ao calor, a luz, ao oxignio e ao pH do meio onde so estocadas. A maioria das vitaminas sintetizada pela plantas. O homem e os outros animais devem obtlas a partir das suas fontes alimentares. Nas ltimas duas dcadas, cuidados com o transporte, processamento, armazenamento e preparo dos alimentos antes do consumo tm sido extensivamente investigados para garantir o bom aproveitamento dessas substncias. Admite-se que o homem necessite de pelo menos 13 vitaminas, sendo a maioria assimilada de produtos de origem vegetal e animal. Com exceo da vitamina B12, todas as vitaminas necessrias na alimentao humana j foram detectadas em plantas. Os microrganismos so os maiores produtores de vitamina B12 na natureza. Os ruminantes suprem suas necessidades desta vitamina absorvendo-a dos microrganismos simbiontes nos seus estmagos. O homem obtm a maior parte da vitamina B12 atravs de alimentos de origem animal. 72
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12. Uso das plantas na alimentao saudvel

Diversos fatores, tais como disponibilidade do alimento, condio econmica, preferncias pessoais e hbitos alimentares podem influenciar de maneira drstica a captao de vitaminas a partir de diferentes alimentos em diferentes povos. As vitaminas podem apresentar outras funes que no aquelas classicamente atribudas a elas. Por exemplo, atualmente se sabe que as vitaminas C (cido ascrbico), E (tocoferol) e A (beta-caroteno) podem ter atividade como redutores dos riscos de algumas formas de cncer e problemas cardiovasculares, devido s suas propriedades como antioxidantes. A quantidade de vitamina nas plantas pode variar entre os rgos vegetais e tambm dentro do mesmo rgo, dependendo da poro analisada e da sua posio relativa na planta. As folhas contm de 2 a 6 vezes mais cido ascrbico que o caule. No caso da batata (Solanum tuberosum, Solanaceae), a quantidade de vitamina C (mg/100 g vegetal) nos tecidos foliares e nos tubrculos de 109 e 39, respectivamente, sendo a concentrao foliar 2,8 vezes maior. Tecidos vegetais mais perifricos normalmente apresentam maiores concentraes de vitaminas, no somente em vegetais folhosos como alface ou couve, mas tambm em frutos e vegetais no folhosos (legumes). Por exemplo, a casca da abbora contm concentraes mais altas de cido ascrbico, riboflavina, niacina, cido pantotnico, biotina e tocoferol em relao polpa do fruto. No caso da laranja (Citrus spp., Rutaceae) cerca de do teor de cido ascrbico desse fruto est na casca. O conhecimento sobre a composio e a maior concentrao de vitaminas nas diferentes partes das plantas pode ser, muitas vezes, de interesse puramente acadmico. No entanto, este conhecimento foge de interpretaes somente tericas quando se busca fornecer informaes de incremento do valor nutricional de dietas de populaes mal nutridas. A utilizao das folhas e cascas de alguns alimentos muitas vezes evitada por falta de conhecimento sobre seu valor nutricional. Mudanas nesses hbitos podem evitar grandes desperdcios nutricionais. Minerais Os minerais so elementos inorgnicos, como o ferro e o clcio, essenciais para a manuteno do funcionamento normal do corpo humano. O suprimento mineral em uma dieta deve ser considerado importante, visto esses elementos serem necessrios em diversos processos metablicos no corpo humano. Ainda que eles apaream na dieta, nem sempre esto em quantidades suficientes. Cuidados especiais devem ser tomados nas fases de crescimento, perodos de estresse e doenas traumticas. No corpo, os minerais so classificados como minerais majoritrios (aqueles que so necessrios em quantidades maiores que 100 mg por dia) e minerais traos (necessrios em quantidades menores que 100 mg por dia). Minerais em excesso no so utilizados pelo corpo podendo tornar-se txicos. Os minerais so encontrados livremente na natureza, estando presentes nos sistemas radiculares das plantas e no corpo dos animais que as consomem. As melhores fontes minerais so produtos de origem animal devido maior concentrao destes elementos em seus tecidos. Os minerais apresentam trs papeis principais no organismo: 1) participam da formao dos ossos e dos dentes, 2) esto intimamente envolvidos na manuteno do ritmo cardaco, na contrao muscular, na conduo nervosa e no balano cido-base dos fluidos corpreos e 3) desempenham um papel regulatrio

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no metabolismo celular, por serem constituintes importantes de enzimas e hormnios que modificam e regulam a atividade celular. Fibras dietticas As fibras dietticas dos vegetais podem ser consideradas como a parte resistente hidrlise enzimtica no intestino, por isso indisponvel como fonte de energia, porm podem ser fermentadas por algumas bactrias. Apesar de no serem consideradas nutrientes, as fibras dietticas tm um importante papel na dieta humana. A mastigao dessas fibras estimula a salivao e ajuda na absoro de nutrientes, devido ao maior tempo de permanncia no estmago e nos intestinos. Estas fibras atuam aumentando o bolo fecal e no amolecimento das fezes, promovendo a regularidade intestinal evitando a constipao e outros problemas como a diverticulite. As substncias classificadas como fibras dietticas so, em sua maior parte, polissacardeos no amilceos. So substncias de alto peso molecular, encontrados nos vegetais, tais como gros e cereais (arroz, soja, trigo, aveia), em verduras (alface, brcolis, repolho), razes (cenoura, rabanete) e outras hortalias (chuchu, pepino, vagem). As fibras podem ser classificadas de acordo com o papel que desempenham nos vegetais (polissacardeos estruturais e no estruturais) e tambm quanto a sua solubilidade e possibilidade de fermentao por microrganismos (fibras solveis e insolveis). A celulose, algumas hemiceluloses e a lignina so insolveis, permanecendo intactas em todo o trato gastrointestinal. Essas fibras atuam no aumento do bolo fecal, no estmulo da motilidade intestinal, aumentam a necessidade de mastigao e estimulam a excreo de sais biliares. Pectinas e hemiceluloses so hidrossolveis, tendendo a formar gis em contato com a gua. Uma caracterstica importante dessas fibras a capacidade de metabolizao por bactrias presentes na flora intestinal. As fibras solveis diminuem a absoro de cidos biliares, apresentam atividade hipocolesterolmica, parecem diminuir os nveis de triglicrides e de colesterol sangneo. As principais fontes de fibras dietticas (fibras alimentares) so frutos frescos, hortalias, legumes, produtos feitos com cereais integrais e castanhas. recomendada a ingesto diria de 20 - 60 g de fibras para a manuteno das funes fisiolgicas saudveis. Entretanto, dietas com excesso de fibras podem prejudicar a absoro de alguns nutrientes durante a digesto. Nutrientes no-tradicionais Alm do que j foi mencionado, um aspecto que tem sido amplamente valorizado na alimentao se refere ao consumo de alimentos considerando-se, especialmente, evidncias de efeitos benficos para a sade e bem estar. As substncias presentes nesses alimentos so os fitonutrientes, ou seja, nutrientes presentes em alimentos vegetais, mas que no so classificados como nutrientes tradicionais (carboidratos, protenas, lipdeos, vitaminas e sais minerais). Os alimentos portadores desses fitonutrientes tm sido classificados como alimentos funcionais e/ou nutracuticos. Esses dois termos, em muitos casos, tm sido tratados como sinnimos. A definio desses termos no consensual, assim como a legislao regulamentadora de seus usos. No Brasil, o Ministrio da Sade, por meio da Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria (ANVISA) regula os alimentos funcionais.

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12. Uso das plantas na alimentao saudvel

Um alimento pode ser considerado funcional se for demonstrado que ele pode afetar beneficamente uma ou mais funes no corpo. Os alimentos funcionais podem apresentar as seguintes caractersticas: a) serem alimentos convencionais e serem consumidos na dieta usual, b) terem efeitos positivos alm do valor nutritivo bsico, que podem aumentar o bem-estar e a sade e/ou reduzir o risco de ocorrncia de doenas, c) apresentarem embasamento cientfico na sua designao como alimento funcional e d) serem um alimento natural ou um alimento no qual um ou mais componentes tenham sido reduzidos ou alterados. J os nutracuticos so alimentos (ou parte destes) que proporcionam benefcios mdicos e de sade, incluindo preveno e/ou tratamento de doenas. Esses produtos incluem desde os nutrientes isolados, suplementos dietticos na forma de cpsulas, at produtos processados tais como cereais, sopas e bebidas. Os alimentos funcionais e os nutracuticos podem ser agrupados em diferentes categorias: a) Probiticos e prebiticos: os probiticos so microrganismos vivos que podem ser agregados como suplementos na dieta (exemplos: Lactobacillus e Bifidobacterium). Os prebiticos so oligossacardeos no digerveis, porm que podem ser fermentados, que atuam modificando a atividade e a composio da flora intestinal (por exemplo, algumas fibras dietticas); b) Alimentos sulfurados e nitrogenados: so substncias orgnicas usadas na proteo contra a carcinognese e mutagnese, sendo ativadores de enzimas na desintoxicao do fgado (por exemplo, glucosinolatos e isotiocianatos presentes em plantas pertencentes famlia das brassicceas, como brcolis, repolho e couve); c) Substncias antioxidantes: os sistemas biolgicos esto sujeitos a processos oxidantes devidos ao de radicais livres (molculas geradas por fontes endgenas ou exgenas que possuem um eltron isolado, livre para se ligar a qualquer outro eltron, sendo, portanto, altamente reativas). Os antioxidantes podem agir diretamente na neutralizao da ao dos radicais livres ou participar indiretamente dos sistemas enzimticos que atuam nessa neutralizao (por exemplos vitamina C, glutationa, cido rico, vitamina E, carotenides). Os carotenides so bastante comuns em alimentos de colorao amarela, laranja ou vermelha como tomate, abbora, pimento e laranja; d) Substncias fenlicas: vrios fenis, dentre eles os flavonides, tm sido indicados como substncias de alto valor antioxidante. A dieta mediterrnea rica em frutas frescas e vegetais associada baixa incidncia de doenas cardiovasculares e cncer, principalmente devido elevada proporo de compostos bioativos como vitaminas, flavonides e polifenis. O conhecido paradoxo francs que compatibiliza uma dieta rica em gorduras com baixa incidncia de problemas cardiovasculares, justificado pela presena de substncias fenlicas no vinho tinto (ingerido habitualmente de forma moderada) que apresentam propriedades antioxidantes, inibindo a oxidao do LDL e evitando o acmulo de lipdeos nas artrias; e) cidos graxos poliinsaturados: os cidos graxos das sries Omega-3 e Omega-6 so bastante comuns em peixes de gua fria (salmo, atum, sardinha, bacalhau), em leos vegetais, sementes de linhaa, nozes e alguns outros tipos de vegetais. Como j comentado acima, esses cidos so importantes precursores de prostaglandinas, leucotrienos e tromboxanos com atividade antiinflamatria,

anticoagulante, vasodilatadora e antiagregante; 75


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Santos, D.Y.A.C.

f) Fibras: a definio e a importncia da ingesto de fibras j foram mencionadas anteriormente. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA ANGELIS, R.C. 2001. Importncia de Alimentos Funcionais na Proteo da Sade Fisiologia da Nutrio Protetora e Preventiva. Editora Atheneu, So Paulo, 295p. LEWINGTON, A. 2003. Plants for People. Transworld Publishers, Londres, 304p. MORAES, F.P. & COLLA, L.M. 2006. Alimentos funcionais e nutracuticos: definies, legislao e benefcios sade. Revista eletrnica de Farmcia 3 (2): 109-122. SIMPSON, B.B. & OGORZALY, M.C. 2001. Economic Botany: Plants in our World. 3 edio. McGraw-Hill, Nova Iorque, 529p. FAO. Food and Agriculture Organization of the United Nations. http://www.fao.org
a

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13. Pectina, gomas e gelias

13. PECTINA, GOMAS E GELIA Aline A. Cavalari (alinecavalari@gmail.com) Anary P. M. Egydio (anary_egydio@hotmail.com) Lgia Maria Ayres (ligiaayres@usp.br) Marcos Buckeridge (msbuck@usp.br)

Pectina, gomas e gelias, o que so? De onde vm? Para que servem? Estas perguntas so freqentes quando falamos em pectina ou qualquer outra substncia proveniente das plantas. Mas para comearmos a responder sobre esses componentes, temos que entender um pouco sobre o que a parede celular vegetal. As plantas possuem estruturas que podem ser consideradas anlogas aos ossos de animais. Nos tecidos vegetais, cada clula envolvida por uma estrutura chamada parede celular (Figura 1A, 1B). Localizada externamente membrana celular (ou membrana plasmtica, ou plasmalema), a parede celular constituda por agregados de polmeros de acares (os polissacardeos), basicamente celulose, hemicelulose e pectina, alm de protenas e outros componentes estruturais. Esses polmeros interagem entre si formando uma estrutura que ao mesmo tempo que rgida, resistindo a foras de tenso e coeso nas clulas, tambm flexvel, permitindo ajustes e adaptaes de forma conforme s necessidades do crescimento e movimento dos vegetais. Foi o surgimento da parede celular, entre outros fatores, que possibilitou que os vegetais atingissem grandes alturas, como a palmeira-real (Roystonea spp., Arecaceae), que na Amaznia chega a atingir 40 metros de altura. Os arranjos entre os polmeros formam o que so chamados de domnios da parede celular. Chamamos de domnio de celulose-hemicelulose o conjunto entre as microfibrilas de celulose, com seus feixes de molculas longas de celulose que interagem fortemente entre si, recobertas pelas hemiceluloses (como se fosse a capa de um fio eltrico). As pectinas, por sua vez, formam outro domnio, constitudo por um gel que contm clcio e magnsio (como nas gelias). Essa massa gelatinosa ocupa os espaos entre os componentes do domnio celulose-hemicelulose e controla o trnsito de substncias entre as clulas do vegetal. Outro domnio o das protenas, as quais interagem com os dois domnios j citados (Figura 1). Para melhor compreendermos os domnios da parede celular vegetal podemos fazer uma analogia com o concreto utilizado na construo civil: as barras de ferro do concreto representariam o domnio celulosehemicelulose, enquanto a areia com cal e gua, que vm preenchendo os espaos entre as barras de ferro da construo, representariam o domnio das pectinas. Pectinas As pectinas so componentes que constituem os gis, redes frouxas que incluem vrios tipos diferentes de polissacardeos altamente hidratados, nos quais est imersa a rede de celulose-hemicelulose. Elas atuam como preenchimento, impedindo a agregao e o colapso da rede de celulose, alm de estabelecerem a porosidade da parede celular para as macromolculas. As pectinas so os mais solveis dentre os acares formadores da parede celular, podendo ser extradas com gua quente. Por propiciar consistncia gelatinosa, so utilizadas no preparo de gelias e

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Cavalari, A.; Egydio, A.P.M.; Ayres, L.M. & Buckeridge, M.

compotas. Ainda na indstria alimentcia, tambm so utilizadas como agente espessante, por exemplo, na fabricao de sorvetes.
Parede celular

Microf ibrilas de celulose

Domnio de pectinas

Hemicelulose f ortemente ligada celulose Lamela mdia Plasmalema

Hemiceluloses f racamente ligadas celulose

Figura 1. Representao esquemtica interna da parede celular: (A) em vista longitudinal e (B) representao das pectinas, hemiceluloses e celulose. Gomas So polmeros de carboidratos que, quando hidratados, apresentam aparncia mucilaginosa e transparente. So obtidas das sementes ou a partir do exsudado (seiva), tanto dos caules, razes, frutos ou outros rgos de certos vegetais. Essa exsudao formada quando o tecido vegetal danificado e tem como finalidade recobrir o ferimento minimizando o ataque de microrganismos. Quimicamente, so caracterizadas por apresentarem acares neutros e acares cidos (cidos urnicos) da famlia das pectinas. Por essa razo as gomas so conhecidas industrialmente como um tipo de pectina. As gomas so utilizadas para diversos fins, tais como adesivos, produtos para engomar tecido e papel, liga para doces, para tintas, etc. Um dos exemplos mais famosos de gomas usadas industrialmente a Goma Arbica, um produto exsudado pelo tronco das rvores do gnero Acacia (Leguminosae), sendo a Acacia senegal sua principal fonte. Gelias A gelia pode ser definida como uma conserva espessa e geralmente doce, que contem pedaos de uma nica ou vrias frutas. Para se obter uma gelia caseira so necessrios os seguintes ingredientes: frutas, pectina, cido (por exemplo, suco de limo) e acar. A consistncia da gelia s atingida se a concentrao de acar (sacarose) atingir entre 2 a 5% da mistura (dependendo da origem da pectina e sua estrutura). Em muitos casos, o prprio acar da fruta (sacarose, glicose e frutose) j suficiente para formar a gelia, adicionando-se sacarose somente quando necessrio. A fruta dar o sabor gelia e pode alterar a consistncia, a aparncia ou at mesmo a formao da gelia se no for escolhida com ateno. importante utilizar frutas perfeitas (nem muito verdes nem maduras demais), limpas e preparadas em uma s vez (sem deixar descansar depois de cortado). Para essa funo de sabor, tambm podem ser utilizados sucos industrializados. 78
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13. Pectina, gomas e gelias

Algumas frutas no possuem pectina em quantidade suficiente para produo de gelias. Nesses casos preciso adicionar pectina caseira (para cada xcara de suco de fruta, acrescentar 1/2 xcara de pectina) ou industrial (para cada xcara de suco de frutas, acrescentar 1 colher de caf). chamada de pectina caseira aquela encontrada nas cascas, polpa e sementes de maa cida. Para melhorar o sabor final e ajudar na formao do gel necessria a utilizao de um cido, pois intensifica as propriedades gelificantes da pectina. Exemplos de frutas cidas so ma, laranja, pitanga, limo, abacaxi, jabuticaba, entre outras. J a pra, o morango, o pssego, a banana e o caju so frutas com baixa acidez, sendo necessrio adicionar suco de limo para confeco de gelias. Geralmente, adicionamse duas colheres de sopa de suco de limo para cada quilo de fruta a ser utilizada Outro fator importante para a formao de gelias a presena de clcio. Quando em meio cido, os polmeros de pectinas se prendem ao clcio formando um gel. Normalmente, a quantidade de clcio presente naturalmente no fruto j suficiente para a confeco da gelia, sem que haja necessidade de adicionar bicarbonato. Como ltimo ingrediente, o acar contribui no sabor da gelia e tambm ajuda para dar a consistncia gelatinosa. Pode-se utilizar acar refinado ou cristal ou ainda, se quiser, acar mascavo ou mel. TESTE DE CONCENTRAO DE PECTINAS LISTA DE MATERIAL NECESSRIO lcool Colher de sopa Copo Suco de goiaba e abacaxi

PROCEDIMENTOS 1. Num copo, coloque uma colher de sopa de lcool; 2. Adicione uma colher de sopa de suco de fruta; 3. Observe se aparece uma formao gelatinosa; 4. Se a mistura ficar muito densa, adicione algumas colheres de gua para melhor observar a formao gelatinosa. Frutas ricas em pectina: ma, ameixa, goiaba, marmelo, limo, laranja, uvas pretas, damasco, tangerina, pssego, jabuticaba, pra. PREPARANDO GELIAS A PARTIR DE PECTINAS NATURAIS LISTA DE MATERIAL NECESSRIO gua Acar Acar cristal Chapa aquecedora ou fogol Colher de pau ou basto de vidro Faca para cortar frutas Frutas a gosto 79
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Frutas pobres em pectina: morango, figo, abacaxi.

Panela ou bquer de 1 L Peneira Pires Potes de vidro Suco de limo Tabua para cortar carne Vinagre

Cavalari, A.; Egydio, A.P.M.; Ayres, L.M. & Buckeridge, M.

PROCEDIMENTOS 1. Lave e corte as frutas firmes (marmelo, ma, pra); 2. Lave e esmage as frutas mais tenras (morangos, uva, amora); 3. Adicione gua o suficiente para cobrir as frutas; 4. Cozinhe at que fiquem tenras (frutas tenras: 2 a 3 minutos; frutas firmes: 15 a 20 minutos; laranja: 30 a 60 minutos); 5. Coe as frutas espremendo; 6. Adicione o acar ao suco obtido e ferva at o ponto de gelia (o acar varia de metade a um e meio do caldo das frutas; quanto mais pectina e cida for a fruta, mais acar deve ser adicionado; 7. Mexa bem at que o acar se dissolva completamente; 8. Retire a espuma que se forma em algumas das gelias; 9. Para determinar o ponto da gelia: A. Teste da colher de pau: Inicialmente, a gelia rala e escorre, mas com o tempo fica mais espessa e comea a cair em gotas. Quando a gelia estiver no ponto, ela cair em placas. B. Teste do pires: Coloque uma colher de sobremesa da gelia num pires e deixar esfriar. A gelia estar no ponto se depois de fria estiver compacta e enrugar ao inclinar o pires ou empurrar com o dedo. 10. Ainda quente, coloque a gelia em vidros limpos e esterilizados. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA ALBERTS, B.; BRAY, D. & LEWIS, J. 1999. Biologia Molecular da Clula. 3 edio. Artmed, So Paulo, 1550p. BUCKERIDGE, M.S.; TIN, M.A.; SANTOS, H.P. & LIMA, D.U. 2000. Polissacardeos de reserva de parede celular em sementes, estrutura, metabolismo, funes e aspectos ecolgicos. Brazilian Journal of Plant Physiology 12:137-162. LEHNINGER, A.; NELSON, K.Y. & COX, M.M. 2000. Princpios de Bioqumica. 3 edio. Sarvier. So Paulo, 975p. SIMPSON, B.B. & OGORZALY, M. C. 2001. Economic Botany: Plants in Our World. 3 edio. McGraw-Hill, Inc. Nova Iorque, 529p. The multilingual food information site - http://food-info.net TV TEM - http://tvtem.globo.com/culinaria
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14. Biocombustveis

14. BIOCOMBUSTVEIS Antonio Salatino (asalatin@ib.usp.br)

O domnio de fontes energticas tem sido um fator decisivo na evoluo tecnolgica das sociedades humanas. O processo teve incio com a domesticao do fogo, provavelmente por volta de 400.000 a.C., nas cavernas do homem de Pequim. A partir de 1870, poca que coincide com a expanso da atividade industrial, ocorreu uma elevao substancial no consumo energtico, com uma taxa de incremento que aumentou significativamente a partir do incio do sculo XX. Aps a II Grande Guerra, houve enorme incremento das populaes urbanas, devido principalmente expanso dos parques industriais. Com isso, cresceu sobremaneira o uso dos automveis. Em 1900, queimava-se diariamente o equivalente energia liberada pela queima de oito milhes de barris de petrleo. Em 1945, o consumo foi de cerca de 35 milhes de barris e em 1985, mais de 150 milhes. PROBLEMAS ATUAIS NO USO DOS RECURSOS ENERGTICOS A maior parte da energia consumida mundialmente provm de fontes no-renovveis: petrleo, carvo e gs natural. No Brasil, as hidroeltricas so as principais geradoras de energia e na Frana as usinas nucleares tm grande importncia para esse fim. A atual dependncia mundial de recursos energticos no-renovveis um motivo de grande preocupao. H um consenso de que as atuais jazidas de petrleo e as reservas que vierem a ser descobertas sero incapazes de satisfazer a demanda futura de leo por mais de um sculo, caso o ritmo de consumo atual seja mantido. Diante dessas ameaas de rpido esgotamento da disponibilidade de petrleo, atualmente h uma grande nfase em pesquisas para o desenvolvimento de tecnologias que minimizem ou retardem os problemas que futuras geraes devero encontrar, relacionadas insuficincia de fontes energticas. Entre os vrios objetivos perseguidos, dois so os mais importantes: a) maior eficincia na utilizao de energia, a fim de se obter substancial reduo no consumo total; b) substituio de combustveis fsseis por fontes renovveis de energia (biocombustveis) ou por formas alternativas de gerao de energia, como a elica e a solar, que so praticamente inesgotveis e limpas, ou seja, no agridem nem poluem o ambiente. A disponibilidade de carvo mineral no mundo bem maior que a de petrleo. No entanto, o carvo um combustvel bem mais poluente que os derivados de petrleo. No caso do Brasil, as reservas so mnimas, insuficientes para suprir o pas com energia termoeltrica (caso fosse feita essa opo para a gerao de energia eltrica). Alm disso, o nosso carvo de qualidade inferior, com muito enxofre, o que prejudica a sua utilizao para outros fins, como a indstria siderrgica, um setor importante na nossa economia. A combusto de carvo e de derivados de petrleo resulta na formao de resduos gasosos que contaminam a atmosfera, provocando nas cidades a formao do "smog" (combinao dos termos ingleses "smoke" = fumaa, e "fog" = neblina), um problema que se acentua em certas pocas do ano. As queimadas de campos agrcolas e de vegetao natural, alm de gerar CO2 e CO, formam ainda N2O, NO e NO2. A produo de arroz de vrzea e as atividades agropecurias levam formao de metano.

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Salatino, A.

Dentre os gases acima comentados, os mais abundantes na atmosfera so o CO2 (350 ppm) e o metano (CH4, 1,7 ppm). Por serem heteroatmicos, ou seja, terem molculas com tomos pertencentes a pelo menos dois elementos, esses gases absorvem radiaes infravermelho, especialmente as radiaes que so refletidas pela superfcie terrestre, e aquecem a atmosfera. Apesar de existir na atmosfera em proporo muito menor do que o CO2, o metano pelo menos 20 vezes mais potente. A figura 1 mostra a variao de temperatura global nos ltimos 150 anos.

Figura 1. Variao da temperatura atmosfrica global. Fonte: www.newscientist.com/.../dn11639-2_808.jpg O aproveitamento do potencial hidreltrico nos pases que dispem desse recurso vem sendo feito com enormes prejuzos para o meio ambiente e para as populaes humanas locais, j que extensas reas so alagadas na construo das usinas. No Brasil, o potencial hidreltrico fora da Amaznia est quase saturado. O planejamento atual de construo de usinas na Amaznia tem enfrentado grande resistncia por parte de ambientalistas, indgenas e outros setores da sociedade (Igreja, por exemplo). Propostas para substituir os combustveis fsseis por outras formas de energia tm sido formuladas em grande nmero, entre elas o hidrognio e as energias nuclear, solar e elica. RAZES QUE JUSTIFICAM O DESENVOLVIMENTO DE TECNOLOGIAS PARA OBTENO DE BIOCOMBUSTVEIS Apesar de crticas recentes, a produo de biocombustveis uma das recomendaes para se conseguir sustentabilidade no uso de recursos energticos. Alm de ser um recurso praticamente inesgotvel e de poder ser obtido em muitas partes do mundo, os biocombustveis so menos poluentes. Porm, a maior vantagem dos biocombustveis sobre os combustveis fsseis que o seu uso no contribui para o efeito estufa. Se forem produzidos em escala sustentvel, o CO2 liberado pela sua queima ser reabsorvido durante a fotossntese das plantas que esto sendo cultivadas para suprir futuras demandas. Desse modo, a bioenergia no contribui para o aquecimento do planeta. Nos dias atuais, h crticas em relao produo de biocombustveis, motivadas principalmente pelo fato de que o governo dos Estados Unidos est incentivando a produo de etanol a partir de milho, importante matria prima para alimentao de animais. Isso, infelizmente, coincidiu com uma poca em que 82
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14. Biocombustveis

a demanda por alimento no mundo crescente. Os dois fatores combinados contribuem para que os biocombustveis sejam considerados uma opo energtica perversa, pois estariam contribuindo para uma inflao dos preos dos alimentos em escala global, desse modo agravando o problema da fome. A demanda por biocombustveis coloca o Brasil numa posio de grande destaque, por vrias razes: 1) o nico pas com um programa slido de produo de lcool etlico para uso em automveis; 2) dispe dos melhores mtodos e tecnologia para produo de cana, extrao do caldo, fermentao e destilao de lcool e 3) dispe de clima e territrio para a produo de biocombustveis, podendo vir a tornar-se o maior exportador desses produtos. Alm de cautela para que regies do pas muito visadas internacionalmente (como a Amaznia) no venham a ser agredidas no processo de aumento da produo de biocombustveis, o Brasil precisa assumir medidas para no incorrer no risco de ser includo na lista de contribuintes para o agravamento do problema da fome no mundo. PRODUO DE LCOOL Dois alcois combustveis podem ser produzidos a partir de material vegetal: metanol e etanol. H o processo de destilao seca da madeira, que gera metanol, alm de subprodutos. A partir de 3.625 m de madeira, obtm-se 400-500 kg de carvo, 80-100 kg de acetato de clcio, 45-60 kg de cido actico e 30-40 L de metanol. Pensando-se em efeito estufa, esse mtodo no conveniente, pois requer alto dispndio de energia para a produo de muito pouco combustvel. Nos pases que dispem de grande quantidade de carvo, o metanol produzido a partir desse combustvel fssil. Abaixo so dadas as reaes para produo de metanol a partir de carvo mineral ou madeira: 2 C + H2O + O2 CO + H2O CO + 2 H2 CO + CO2 + H2
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CO2 + H2 CH3OH (metanol)

Muito mais interessante a obteno de etanol. Para essa finalidade, as melhores fontes so plantas acumuladoras de carboidratos de baixo peso molecular, como monossacardeos e dissacardeos, pois so convertidas diretamente em lcool por leveduras, sem necessidade de hidrlise inicial. O carboidrato de reserva mais comum nas plantas o amido. Mas para utiliz-lo como matria-prima para produo de etanol, ele precisa ser hidrolisado; a glicose assim liberada que passar por fermentao e converso em etanol. A beterraba e a cana-de-acar so plantas agrcolas acumuladoras de sacarose (um dissacardeo), que no precisa passar por hidrlise previamente fermentao. No que se refere produtividade, nenhuma planta supera a cana-de-acar, pois ela a mais eficiente planta que se conhece para converso de luz em energia qumica. Portanto, pelo menos at agora, a contribuio da beterraba para produo de etanol mnima. A sacarose no caldo de cana inicialmente convertida em glicose e frutose pelas clulas de levedura (Saccharomyces cerevisiae); em seguida, esses dois acares so fermentados, obtendo-se etanol e gs carbnico: C12H22O11 + H2O 2 C6H12O6 sacarose glicose + frutose 83
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C6H12O6

2 C2H5OH + 2 CO2 etanol

Salatino, A.

Com o programa Pr-lcool, houve um incremento notvel na produtividade da cana-de-acar, principalmente no Estado de So Paulo, passando de cerca de 55 ton/ha em 1971 para 72 ton/ha em 1981. A eficincia na extrao do caldo avanou de 88% para 95%, o tempo de fermentao reduziu-se de 18-24 h para 5-8 h e a eficincia fermentativa evoluiu de 70-80% para 88-92%. O rendimento de lcool de 60-70 L por tonelada de cana-de-acar. O bagao da cana-de-acar vem sendo utilizado em vrias usinas de lcool na produo de energia eltrica para consumo local. Os inconvenientes para produo de cana-de-acar que ela exigente no que se refere a solos (eles precisam ser bem adubados e profundos) e clima ( preciso pelo menos 1000 mm de precipitao de chuvas por ano). Outras opes para obteno de etanol Dada a alta produtividade, o milho a opo atual nos Estados Unidos. Essa escolha incorre nos problemas acima comentados de competio com a produo de alimento. No Brasil, a opo em termos de cultura amilcea seria a mandioca, planta que cresce muito bem em nosso territrio, altamente produtiva e pode ser cultivada em solos menos favorveis para a agricultura, inclusive no Nordeste. A maior expectativa quanto a matrias-primas para obteno de lcool reside na celulose, o carboidrato mais abundante na Terra. O grande problema nesse sentido ainda a dificuldade para hidrlise da celulose, pois ela o polissacardeo mais resistente hidrlise que se conhece. H esperanas de que em 10 anos ser factvel o seu uso para obteno de etanol. PRODUO DE BIODIESEL O etanol um combustvel adequado para substituir a gasolina. Ele pode ser usado, portanto, para movimentar motores de veculos mais leves, como automveis e motocicletas. Para veculos pesados, como caminhes e tratores, necessita-se de combustvel com maior poder calorfico, como o leo diesel. Um substituto para o leo diesel, derivado de plantas, pode ser obtido dos leos de sementes. Muitas angiospermas possuem em suas sementes, triglicerdeos como principal reserva energtica para os processos de germinao e crescimento do embrio e da plntula em suas primeiras fases de desenvolvimento. O teor de triglicerdeos em sementes pode chegar a 45-50%, como no caso do amendoim (Arachis hypogaea, Fabaceae) e at mesmo 60%, como no caso do endosperma do coco (Cocos nucifera, Arecaceae). A obteno do biodiesel conseguida em laboratrio por reao temperatura ambiente entre o leo e lcoois anidros (metanol ou etanol), usando um catalisador (em geral, usa-se hidrxido de potssio na proporo de 1%, em soluo alcolica). Aps 30 minutos de reao, formam-se duas fases. A superior o biodiesel, contaminado com um pouco de glicerina, sais de potssio de cidos graxos (sabo) e lcool. Depois de purificado, o biodiesel est pronto. Quimicamente, esse produto um ster metlico (no caso em que o lcool usado o metanol) ou etlico (se for usado etanol) de cidos graxos. A reao para obteno de biodiesel chamada transesterificao:

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14. Biocombustveis

O-CO-R1 CH3-CH2-O-CO- R1 KOH O-CO-R2

OH

3 CH3 CH2OH ETANOL

CH3-CH2-O-CO- R2 CH3-CH2-O-CO- R3

OH

O-CO-R3 TRIGLICERDEO steres etlicos de cidos graxos (BIODIESEL)

OH GLICEROL

Tem havido muitas propostas de matrias-primas para produo de biodiesel: leos de soja, de girassol, mamona, milho, dend, etc. Prope-se tambm o uso de leo usado em frituras. A pesquisa de plantas nativas, potencialmente teis como oleaginosas, deve ser considerada. Pelo menos duas possibilidades para o aproveitamento de plantas nativas merecem ser levadas em conta: 1) coleta de sementes principalmente de plantas arbreas em reservas extrativistas reas de conservao nas quais se incentiva o aproveitamento sustentado dos recursos disponveis e 2) adaptao de plantas nativas (principalmente herbceas e arbustivas) para o regime de cultivo, preferencialmente em reas marginais, ou seja, regies que no vm sendo aproveitadas para a agricultura. Enquadra-se na categoria de reas marginais muitas regies da caatinga. Tem havido incentivo para a produo de leo de jojoba exatamente pelo fato de se tratar de planta que se adapta muito bem ao cultivo em regime de baixa disponibilidade hdrica. Certamente, nossa flora dispe de muitas espcies que se enquadrariam muito bem a um regime de explorao extrativista em reservas destinadas a esse fim e ao regime de cultivo em regies do territrio brasileiro, atualmente imprprias para a agricultura. PRODUO DE BIOGS Tem havido iniciativas em vrias partes do mundo para produo de biogs (metano) por fermentao de diferentes substratos, como lixo, dejetos animais (inclusive humanos), resduos de plantas agrcolas e plantas aquticas. Uma recomendao em nvel mundial o aproveitamento do lixo de aterros sanitrios para produo de biogs. Desse modo, tem-se um combustvel til para queima em veculos ou em termoeltricas e evita-se a liberao do metano para a atmosfera, que contribuiria para o aquecimento da atmosfera. Os dejetos de animais criados em regime de confinamento (bois e porcos) tm sido aproveitados para alimentar biodigestores que produzem biogs. At mesmo dejetos humanos tm sido utilizados para esse fim. Resduos de plantas agrcolas (palha de milho, cana-de-acar, arroz) tambm so utilizados em biodigestores. Cerca de 90 a 95% do contedo do biodigestor deve ser composto por gua. Por essa razo, conveniente o uso em biodigestores de plantas aquticas que, por uma razo ou outra, representam problemas para a sociedade, especialmente quando se proliferam em reservatrios. Muita pesquisa tem sido feita para o aproveitamento do aguap em biodigestores. O guap cresce agressivamente em rios e represas, inclusive nas hidreltricas. Por isso, constitui um problema para a navegao fluvial e gerao de energia eltrica. Por outro lado, o guap til para a descontaminao da gua poluda, pois absorve rapidamente matria orgnica, alm de ser acumuladora de metais pesados. 85
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Salatino, A.

BIBLIOGRAFIA SUGERIDA GOLDEMBERG, J. 1998. Energia, Meio Ambiente e Desenvolvimento. Editora da Universidade de So Paulo, So Paulo, 234p. Agncia Nacional do Petrleo, Gs Natural e Biocombustveis - http://www.anp.gov.br/ Ministrio do Meio Ambiente - http://www.mma.gov.br/ New Scientist - www.newscientist.com/ Portal Nacional da Produo e Uso de Biodiesel - http://www.biodiesel.gov.br/

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15. Fermentao e destilao de lcool

15. FERMENTAO E DESTILAO DE LCOOL Mourisa Maria de Souza Ferreira (mourisa@usp.br) Adriana Afonso Sandre (drica_sandre@uol.com.br)

As plantas produzem carboidratos atravs do processo de fotossntese. Esses carboidratos so utilizados para gerar energia armazenada em molculas de adenosina trifosfato (ATP) por meio da gliclise, da respirao e da fermentao. Neste captulo trataremos da fermentao com nfase na sua utilizao na indstria alimentcia e de bebidas. O termo fermentao se refere quebra anaerbia da glicose ou de outros nutrientes orgnicos para obteno de energia. A glicose a principal fonte de energia para a maioria dos organismos e no apenas um excelente combustvel, mas tambm um precursor verstil, capaz de suprir uma gama de intermedirios metablicos necessrios para as reaes biossintticas. O processo de quebra da glicose (gliclise) no requer oxignio, o que sugere que a gliclise surgiu antes da presena desse gs na atmosfera. A quebra anaerbia da glicose , provavelmente, o mais antigo mecanismo biolgico para obteno de energia a partir de molculas orgnicas. Na gliclise, onde parte da energia livre liberada conservada na forma de ATP e NADH (coenzima que transporta hidrognio e eltrons em reaes de oxido-reduo), so produzidas duas molculas de piruvato. Por sua vez, o piruvato pode seguir trs vias diferentes: as vias fermentativas anaerbias para produo de etanol ou de lactato e a via aerbia para produo de gs carbnico (CO2) e gua. Nessas condies, o NADH produzido doa seus eltrons para o oxignio via cadeia transportadora de eltrons, onde reoxidado a NAD . Na ausncia de oxignio, a oxidao do NADH obtida pela transferncia dos eltrons para um composto orgnico que pode ser tanto lactato como etanol. O composto reduzido, geralmente eliminado para o meio externo de modo que o produto final pode ser utilizado por outros organismos como substrato oxidvel. Cabe ressaltar que, a incapacidade de regenerar o NADH a NAD deixaria a clula sem receptor de eltrons para a gliclise e as reaes de liberao de energia cessariam.
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A fermentao lctica, onde o piruvato reduzido a lactato, realizada por uma vasta gama de organismos. Muitas bactrias, como Lactobacillus e Streptococcus, fermentam a lactose do leite em cido lctico. A dissociao do cido lctico em lactato e H faz baixar o pH, desnaturando algumas protenas do leite, o que provoca sua precipitao. Na fermentao alcolica, o piruvato reduzido a etanol e CO2. Durante esse processo, liberado cerca de 7% da energia total disponvel na molcula de glicose (52 quilocalorias por mol). Este processo realizado por muitas bactrias, fungos (por exemplo, leveduras) e
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clulas animais. Em alguns tecidos vegetais, como por exemplo, o sistema radicular de plantas de locais alagados, a fermentao a fonte de energia para o crescimento e o metabolismo das prprias razes. Termodinamicamente, as fermentaes lctica e alcolica so similares. Em ambas o NADH reoxidado e a energia da quebra da glicose utilizada para originar duas molculas de ATP. O rendimento energtico da fermentao menor que o da oxidao aerbia. As bactrias realizam outros tipos de fermentao, alm da lctica e da alcolica, onde liberam produtos diferentes do lactato e do etanol. Dentre eles temos o metanol, empregado em misturas com a gasolina; os cidos frmico, actico e propinico; e os lcoois glicerol, isopropanol e butanol. Essas transformaes qumicas so complexas, com alto rendimento e produo de poucos resduos. Alguns materiais ricos em carboidratos e de obteno fcil e barata, como o amido de milho e a cana-de-acar, so fermentados pelas bactrias gerando produtos de grande valor comercial. Utilizao industrial A indstria alimentcia, tendo em conta a relao entre bactrias, fungos e alimentos, utiliza microrganismos na produo de certos alimentos por fermentao, por exemplo, como fonte de enzimas para o processamento de alimentos; no desenvolvimento e aperfeioamento de mtodos de conservao dos mesmos, que retardem a sua deteriorao devido atividade de microrganismos ou de outros fatores; e no desenvolvimento de tcnicas de melhoramento de alimentos ou de produo de novos alimentos. A fermentao alcolica utilizada na indstria de alimentos para a produo de po, vinho e cerveja. A produo de po e vinho ocorre por meio da ao da levedura Saccharomyces cerevisiae. Na produo de po, o amido da farinha hidrolisado em acares simples e posteriormente transformado em CO2 e etanol, sendo o CO2 o produto desejado, uma vez que faz crescer a massa, dando ao po uma textura porosa e macia. A fermentao inicia-se com a adio das leveduras e termina quando o calor do forno as mata. O calor provoca a expanso do gs, a evaporao do lcool, dando a estrutura ao po. No vinho, as uvas so colhidas, esmagadas e tratadas com compostos de enxofre, para inibir o crescimento de microrganismos competidores, formando o most que, inicialmente mexido para provocar a aerificao e o crescimento das leveduras, e, posteriormente, deixado em repouso a fim de criar as condies anaerbias favorveis fermentao. Na etapa chamada de fervura do vinho, h a liberao do CO2 para a atmosfera e a concentrao de etanol aumenta. Ao atingir uma concentrao de 12%, o etanol torna-se txico para as leveduras e a fermentao termina. A cerveja produzida com malte, gros de cevada germinados e secos, ou com outros materiais ricos em amido, como arroz, milho ou sorgo, alm de lpulo, gua e leveduras das espcies Saccharomyces cerevisiae ou Saccharomyces carlsbergensis. A primeira etapa consiste na produo de acares simples (sacarificao) a partir do amido na mistura de cereais. Durante a fermentao, ocorre a converso dos acares em etanol, CO2 e pequenas quantidades de glicerol e cido actico. O CO2 liberado e o lcool atinge uma concentrao de cerca de 3,8% do volume. Aps a fermentao, a cerveja armazenada durante alguns meses, ocorrendo a precipitao de leveduras, protenas e outras substncias indesejveis. Por fim, a cerveja carbonatada, clarificada, filtrada e engarrafada. J a fermentao lctica utilizada para a produo de iogurte, queijo e outros produtos lcticos fermentados. O iogurte proveniente da ao de uma cultura mista de bactrias do tipo Lactobacillus 88
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15. Fermentao e destilao de lcool

bulgaricus e Streptococcus termophilus. A produo de vrios tipos de queijo feita por meio da fermentao realizada por diferentes espcies de bactrias pertencentes aos gneros Propionibacterium, Lactobacillus, Streptococcus e Leuconostoc, em culturas puras ou mistas. a produo do cido lctico e de outras substncias pelas bactrias que contribuem para o aroma destes alimentos. O vinagre produzido por meio de um processo chamado de fermentao actica, devido s caractersticas do produto obtido. No entanto, o processo no uma fermentao, mas uma oxidao. obtido a partir de materiais contendo carboidratos, como suco de fruta, vinho ou cereais. A sua produo compreende primeiramente a fermentao do acar produzindo etanol, processo anaerbio realizado por leveduras, e, posteriormente ocorre oxidao do etanol a cido actico, que uma reao aerbia realizada por bactrias acticas dos gneros Acetobacter e Glucanobacter. Nesta aula sero desenvolvidas trs atividades: (a) produo de po, (b) produo e destilao de etanol de caldo de cana-de-acar e (c) observao ao microscpio de Saccharomyces cerevisiae. Alm disso, ser observada a produo de gs carbnico durante a fermentao. Estas atividades tm como objetivos visualizar os produtos finais da fermentao alcolica; observar a levedura Saccharomyces cerevisiae; verificar a diferena entre os fermentos qumicos e biolgicos; e discutir a importncia econmica da fermentao. PRODUO DE PO DE LIQUIDIFICADOR O fermento um ingrediente muito utilizado na cozinha e, graas a ele, podemos provar alimentos macios, de digesto fcil e sabor agradvel. Quando adicionado massa, ocorrem vrios processos (qumicos ou biolgicos), que acabam produzindo compostos gasosos. Esses gases expandem a massa dos pes e bolos e do origem a pequenos buracos, que a torna macia. A diferena entre os fermentos qumico e biolgico est em sua composio. Os qumicos so formados de uma substncia ou mistura de substncias que, pela influncia do calor e/ou umidade, produz desprendimento gasoso capaz de expandir massas elaboradas com farinhas, amidos ou fculas, aumentando-lhes o volume e a porosidade. De acordo com a Comisso Nacional de Normas e Padres para Alimentos (CNNPA), Resoluo - CNNPA n 38, de 1977, anexo I, na composio dos fermentos qumicos podero entrar como componentes essenciais as seguintes substncias: cidos, bicarbonatos, carbonatos, citratos, gluconato, lactato e sulfato de clcio, alm de substncias prprias para uso alimentar, tais como acares, farinhas, amidos, fculas, enzimas e fosfato de clcio. O fermento biolgico o produto obtido de culturas puras de leveduras (Saccharomyces cerevisiae) por procedimento tecnolgico adequado. So chamados de fermento biolgico ou levedura ativa e, de acordo com o seu teor de umidade, so classificados em fermento fresco, prensado, verde ou de levedura prensada; e fermento seco, tambm denominado de fermento desidratado ou levedura seca. De acordo com a Resoluo - CNNPA n 38, de 1977, anexo II, aos fermentos biolgicos podero ser adicionados farinhas, amidos e fculas, leos e gorduras comestveis; sulfato de clcio, carbonato de clcio, sorbitol e monolaurato de sorbitana. Por ser o fermento biolgico um organismo vivo, preciso deixar a massa crescer antes de ser assada, enquanto a que produzida com fermento qumico deve ir logo ao forno. O fermento fresco biolgico deve ser conservado a uma temperatura de 1 a 8 C (geladeira) e no deve ser congelado, pois as temperaturas abaixo de zero danificam as clulas da levedura e diminuem sua 89
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atividade fermentativa. prefervel adquirir o produto prximo a sua utilizao, j que um produto perecvel. Quando for usar no o misture diretamente com sal. A melhor forma para utiliz-lo dissolvendoo com a metade da quantidade de gua que ser utilizada na receita, ou esfarelando-o sobre a massa. LISTA DE MATERIAL NECESSRIO

1 colher de ch de sal 1 copo de gua morna 1/3 de um copo de leo 1/3 de um copo de acar 1 ovo

1 pacotinho de fermente seco de 10g 350 g de farinha de Trigo (aproximadamente) 1 forma untada e polvilhada com farinha de trigo Forno Liquidificador

PROCEDIMENTOS 1. Bata todos os ingredientes no liquidificador, menos a farinha de trigo; 2. Despeje em uma tigela; 3. Acrescente a farinha de trigo e mexa at obter uma massa homognea; 4. Deixe descansar por 10 minutos; 5. Acenda e aquea o forno (em temperatura mdia) por 10 minutos; 6. Despeje a massa na forma e leve ao forno para assar at que fique dourado, cerca de 20 a 30 minutos. QUESTES PARA DISCUSSO 1. Descreva o que ocorreu com a massa durante o experimento. Elabore alguma hiptese para explicar o fenmeno. 2. Quais so os gases liberados na fermentao? Qual seu efeito no volume da massa? Qual o papel dos fungos (leveduras)? 3. Para que ocorra a fermentao de pes e pizzas, os fungos (leveduras) produzem gs carbnico e lcool. Quando essa massa vai ao forno, o que acontece com: - as leveduras? - o gs carbnico? - o lcool? 4. Tente se lembrar de dois produtos utilizados pelos seres humanos em que o lcool produzido na fermentao. PRODUO E DESTILAO DE ETANOL DE CALDO DE CANA-DE-ACAR (Saccharum officinarum) O etanol obtido a partir da fermentao de um carboidrato utilizando uma linhagem selecionada de Saccharomyces cerevisiae. muito importante que a cultura de leveduras possua um crescimento vigoroso e uma elevada tolerncia ao etanol, para que se tenha um grande rendimento final. O etanol inibe o crescimento das leveduras quando em altas concentraes, portanto, a tolerncia das leveduras um ponto crtico para uma produo elevada. A tolerncia ao etanol varia consideravelmente de acordo com as linhagens de leveduras. De modo geral, o crescimento cessa quando a produo atinge 5% de etanol e a taxa de produo reduzida zero na concentrao de 6 a 10% de etanol. A intensidade da reao de fermentao depende do tipo de carboidrato utilizado, o que faz com que bebidas diferentes, produzidas 90
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15. Fermentao e destilao de lcool

pela fermentao de matrias-primas especficas, apresentem diferentes teores alcolicos, como, por exemplo, a cerveja (3 a 5%) e o vinho (10 a 15%). A produo de alguns tipos de bebidas alcolicas envolve um processo de destilao aps o de fermentao, resultando em um aumento no teor alcolico. So exemplos de bebidas destiladas a cachaa (45%) e o usque (40 a 75%). LISTA DE MATERIAL NECESSRIO

gua de cal, soluo saturada de Ca(OH)2 Alcometro Balo de destilao Caldo de cana-de-acar Chapa aquecedora Condensador Fermento de po granulado ou em tabletes Garrafa

Kitassato de 1 L Mangueira de borracha Proveta de 500 mL Rolha Suporte e garra Tubo de ensaio Tubo de vidro

PROCEDIMENTOS 1. Coloque dentro do kitassato o caldo de cana-de-acar e o fermento (5 g por 100 mL de caldo); 2. Encaixe a mangueira na sada lateral do kitassato e um tubo de vidro (por exemplo, uma pipeta de Pasteur) na outra extremidade da mangueira; 3. Coloque a soluo saturada em 2/3 do volume de um tubo de ensaio (use somente a poro lmpida da soluo); 4. Encaixe o tubo de vidro no tubo de ensaio. O tubo dever ficar imerso na soluo saturada de hidrxido de clcio de modo que o gs carbnico proveniente da fermentao seja borbulhado atravs dele; 5. Tampe o kitassato com uma rolha e agite levemente a mistura. O sistema dever permanecer em repouso por no mnimo quatro horas; 6. No final da reao, transfira o material do kitassato para o balo de destilao; 7. Revista o balo com papel alumnio para manter o calor interno; 8. Coloque o balo sobre uma chapa aquecedora e encaixe um condensador para que o vapor de gua e lcool condense e seja recolhido numa garrafa; 9. Coloque o lcool em uma proveta de dimenses que permitam ao alcometro flutuar livremente, sem tocar no fundo ou nas paredes. O alcometro um densmetro especial que indicar o nmero do volume de lcool etlico contido em 100 volumes de uma mistura feita exclusivamente de lcool etlico e gua 10. Observe, aps atingida a posio de equilbrio, o nmero correspondente, que indicar, em centsimos e em volume, o teor do lquido em lcool absoluto. necessrio fazer correes sobre a indicao do instrumento em funo da temperatura. Para fazer a soluo saturada de hidrxido de clcio (gua de cal): pese 0,29 g de Ca(OH)2 e dissolva em 100 mL de gua destilada. Aquea a soluo sob agitao. Acondicione a soluo num frasco limpo e deixe

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descansar. Transfira para o tubo de ensaio, com o auxlio de uma pipeta de Pasteur, uma alquota da poro lmpida da soluo, com cuidado para evitar agitao. QUESTES PARA DISCUSSO 1. Alm dos diferentes tipos de acares, qual outro fator pode afetar a intensidade da fermentao? 2. Qual o gs que, em contato com a gua de cal, produz um precipitado, turvando-a? 3. Que composto orgnico indispensvel em uma matria-prima para que ocorra a fermentao alcolica? 4. Qual a diferena entre os fermentos biolgico e qumico? OBSERVAO DA PRODUO DE GS CARBNICO PELA FERMENTAO LISTA DE MATERIAL NECESSRIO gua Acar Bexigas de 4 cores diferentes Etiquetas auto-adesivas Estante para tubos de ensaio Fermento Biolgico Sal (cloreto de sdio) Tubos de ensaio

PROCEDIMENTOS 1. Coloque gua suficiente para preencher metade dos tubos de ensaio; 2. Adicione no tubo 1 sal e fermento; 3. Adicione no tubo 2 fermento; 4. Adicione no tubo 3 acar; 5. Adicione no tubo 4 acar e fermento; 6. Tampe os tubos com bexigas de cores diferentes; 7. Aguarde de 10 a 15 minutos; 8. Observe o que acontece com as bexigas. QUESTES PARA DISCUSSO 1. Em qual dos tubos a bexiga ficou cheia? Por qu? 2. O que aconteceu no tubo com sal? Este pode substituir o acar? Justifique. OBSERVAO DA LEVEDURA Saccharomyces cerevisiae AO MICROSCPIO LISTA DE MATERIAL NECESSRIO

Fermento biolgico Lmina e lamnula Microscpio

Placa de Petri Pipeta de Pasteur

PROCEDIMENTOS 1. Misture uma alquota do fermento e um pouco de gua em uma placa de petri; 2. Com o auxlio de uma pipeta de Pasteur, coloque uma gota em uma lmina e cubra-a com uma lamnula 3. Observe ao microscpio.

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15. Fermentao e destilao de lcool

BIBLIOGRAFIA SUGERIDA LEHNINGER, A.L.; COX, N & YARBOROUGH, K. 2002. Princpios de bioqumica. 4. edio. Editora Sarvier, So Paulo, 1232p. RAVEN, P.H.; EVERT, R.F. & EICHORN, S.E. 2007. Biologia Vegetal. 7 edio. Editora Guanabara Koogan, Rio de Janeiro, 830p. SIMPSON, B.B. & OGORZALY, M.C. 2001. Economic Botany: Plants in our World. 3 edio. McGraw-Hill, Nova Iorque, 529p. Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria - http://www.anvisa.gov.br/legis/resol/38_77.htm Colgio Dante Alighieri - http://sistemas.colegiodante.com.br/microbiologia/manual.pdf Microbiologia - http://www.microbiologia.vet.br/ Revista Qumica Nova Na Escola - http://qnesc.sbq.org.br/online/qnesc10/exper1.pdf Unicamp, Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP) http://www.fop.unicamp.br/microbiologia/aulas/introducao.pdf
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16. Origem das plantas cultivadas

16. ORIGEM DAS PLANTAS CULTIVADAS Dborah Yara A. Cursino dos Santos (dyacsan@ib.usp.br) Cludia Maria Furlan (furlancm@yahoo.com.br)

Embora duas teorias se confrontem quanto ao que surgiu primeiro, se a agricultura ou o hbito sedentrio do homem primitivo, inegvel a grande correlao entre a agricultura e o surgimento das civilizaes humanas. Somente com a introduo da agricultura foram possveis o rpido aumento da populao das comunidades humanas e a criao de cidades. Alm disso, o hbito agricultor, embora exija um esforo maior do que o hbito caador, pensando-se nos cuidados com o cultivo, no exige que todos os membros da comunidade estejam diretamente envolvidos nas tarefas de conseguir alimento. Dessa forma, houve a possibilidade de desenvolvimento de outras tarefas, o que impulsionou o surgimento das artes, cincias e outras atividades que caracterizam a cultura humana. Assim como outras invenes humanas, alguns mitos rondam a histria do surgimento da agricultura. Para algumas culturas antigas, o surgimento da agricultura seria um presente dado pelos seus deuses. Por exemplo, no Egito antigo acreditava-se que Isis e Osris proibiram os humanos de praticar o canibalismo e teria sido Osris o responsvel por ensinar aos humanos a cultivar alguns gros e tambm a fabricar cerveja. Na mitologia chinesa, Shen-Nung, aparentemente o segundo imperador fictcio da China, seria o responsvel por ensinar aos humanos a usar um arado e tambm a utilizar o fogo para limpar uma rea florestada. Da mesma forma, na Amrica Central o deus asteca Quetzalcoatl aparece em muitos mitos, entre eles o de se transformar em uma formiga e carregar um gro de milho de Tonacatepel a Tomoanchn, entregando-o aos humanos para cultiv-lo. A partir do levantamento de achados arqueolgicos, os cientistas acreditam que a agricultura teve origem, em primeiro lugar, no Oriente Mdio, na regio conhecida como Crescente Frtil. Acreditava-se que o local exato devesse ser o vale dos rios Tigre e Eufrates. Atualmente h razes para se supor que os primrdios da agricultura tiveram lugar em regies montanhosas prximas ao vale dos rios acima citados e do rio Jordo, em reas correspondentes aos atuais territrios do Iraque e de Israel. H evidncias arqueolgicas que em pocas anteriores a 8000 a.C. o homem j coletava cereais selvagens. Em pocas ainda mais antigas, h 9600-10000 anos, o trigo j era cultivado no Corredor Levantino, no vale do rio Jordo. Evidncias do cultivo do trigo nesse local foram observadas em locais como Jeric, Native Hagdud e Gilgal. Acredita-se ainda que a agricultura tambm tenha surgido no Sudoeste Asitico na mesma poca que surgiu no Crescente Frtil, embora as evidncias arqueolgicas encontradas nessa regio sejam mais escassas e pouco conclusivas. A razo dos achados na ndia e na China serem mais escassos est relacionada, provavelmente, ao clima mais mido do que o da regio Mediterrnea, o que prejudica o processo de fossilizao. Entretanto, no se discute que o arroz j era cultivado na sia h pelo menos 8000 anos. Pesquisas arqueolgicas realizadas nos planaltos de Tehuacn, no Mxico, revelaram que o homem j havia se estabelecido nessa regio em 10000 a.C.. O primeiro indcio de plantas de milho cultivadas nessa regio foi encontrado em depsitos que datam de aproximadamente 5000 a.C.. Por volta 95
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Santos, D.Y.A.C. & Furlan, C.M.

dessa mesma poca tambm se cultivava ali a abbora, o abacate e o amaranto. Nos milnios seguintes, cultivaram-se outras plantas, principalmente o feijo. J na Amrica do Sul, a regio andina constitui um centro de diversidade gentica de plantas teis muito importante, estendendo-se ao longo da costa ocidental do continente, desde a Colmbia at a parte central do Chile. Nessa regio, acredita-se que a agricultura estabeleceu-se em pocas bem posteriores ao que ocorreu no Mxico e, seguramente, no antes de 3000 a.C., cultivando-se principalmente o feijo, a pimenta, a abbora, o algodo e a batata. As primeiras plantas cultivadas certamente eram espcies selvagens herbceas, de crescimento rpido e com um histrico de vida curto, provavelmente anual. Essas espcies so caracteristicamente boas produtoras de estruturas de reproduo, como frutos e sementes. Essas plantas ocupam rapidamente locais abertos e eutrofizados, sendo encontradas facilmente em ambientes perturbados, sendo tambm chamadas de espcies oportunistas. medida que as populaes humanas iam se estabelecendo em determinados locais, essas espcies oportunistas logo apareciam, de modo que o homem foi se habituando a elas e eventualmente aproveitando seus frutos, sementes ou outras partes. As plantas cultivadas que conhecemos atualmente originaram-se a partir de ancestrais selvagens em locais conhecidos como centros de diversidade, que so reas geogrficas especficas e mais ou menos restritas. Se pensarmos que frequentemente h uma nica rea de surgimento para um determinado gnero (no qual se inclui uma espcie cultivada), o nmero de espcies pertencentes a esse gnero diminui progressivamente medida que se aumenta a distncia em relao ao seu centro de diversidade. O estudo dos centros de diversidade fundamental para o entendimento da origem das plantas cultivadas e, para o seu melhoramento gentico e conservao. Os estudos sobre os centros de diversidade foram iniciados nas dcadas de 1920 e 1930 pelo pesquisador russo Vavilov, que realizou uma srie de expedies para muitas partes do mundo, coletando espcies selvagens taxonomicamente muito prximas s espcies cultivadas. Vavilov e seus seguidores reconheceram 12 centros de diversidade gentica (Figura 1), localizados em reas tropicais e subtropicais ou temperadas clidas. At recentemente, os centros de diversidade no incluam reas brasileiras, mas com o reconhecimento da importncia de plantas como o abacaxi, cacau, amendoim e mandioca, certas reas do Brasil, como a Amaznia, passaram a representar importantes centros de diversidade de plantas alimentcias. O conceito e a definio dos centros de diversidade propostos por Vavilov e seus seguidores no so consenso entre os estudiosos. Entretanto, unnime a idia que os principais centros de diversidade dos cereais e leguminosas mais comuns localizam-se nas regies: 1. Oriente Mdio, em rea que compreende hoje a Turquia, o Iraque, a Sria e Israel (Crescente Frtil); 2. Sul da Amrica do Norte, em territrio mexicano; 3. Sudoeste da sia, em partes da ndia e da China. Os estudos modernos da origem da agricultura nas vrias partes do mundo compreendem trabalhos de arqueologia, que requerem a interao de especialistas de vrias reas, como historiadores, arquelogos, antroplogos, botnicos e zologos. A arqueologia moderna procura desvendar como vivia o homem pr-histrico, o que ele comia e como ele interagia com o ambiente. As buscas arqueolgicas revelam uma grande variedade de materiais que requerem anlises de profissionais especializados como 96
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16. Origem das plantas cultivadas

um botnico ou um zologo, para determinar de que organismos eles provieram. A datao com

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C feita

para se determinar a poca em que o material foi utilizado. So analisados materiais diversos, como cascas de frutos, brcteas de flores, folhas, sementes, plen e ossos, alm de produtos manufaturados pelo homem. A anlise de coprlitos (fezes fsseis) tambm outra importante fonte de informao. Esse material, uma vez restaurado, pode fornecer dados sobre o tipo de alimentao de uma determinada sociedade, em que tipo de combinao e se era um alimento cozido ou cru.

VI V VIII VII IX XI IV II III I

Figura 1. Localizao dos centros de diversidade gentica propostos por Vavilov: (I) Centro da China; (II) Centro da Malsia (Burna); (III) Centro da Malsia (Indochina e Arquiplago Malaio); (IV) Centro da sia Central; (V) Centro do Oriente Mdio; (VI) Centro do Mediterrneo; (VII) Centro da Abissnia; (VIII) Centro do Mxico; (IX) Centro Sul-americano (Peru, Equador, Bolvia); (X) Centro Sul-americano (Chile); (XI) Centro Sul-americano (Brasil, Paraguai). Adaptado de www.prodiversitas.bioetica.org. Todo esse processo de adoo do hbito agricultor pelo homem esteve diretamente ligado seleo de caractersticas de interesse, tanto nas plantas como nos animais, envolvida naquele processo. Esse processo de seleo conhecido como domesticao, que pode ser entendida como a conseqncia de um processo de seleo que visa o aumento da adaptao de uma planta (e/ou animal) ao cultivo e utilizao pelo homem. A domesticao de plantas e de animais foram eventos que ocorreram provavelmente na mesma poca em vrios locais. Tanto as primeiras plantas como os primeiros animais a serem domesticados apresentavam, ainda na condio selvagem, caractersticas de pr-adaptao domesticao. Alguns critrios so utilizados para se distinguir espcies selvagens das domesticadas, no caso das plantas geralmente se utilizam caracteres da semente e das infrutescncias no processo de identificao. As sementes de plantas domesticadas so maiores (com maior contedo de reservas) e possuem tegumentos mais delgados, resultado de uma seleo, inicialmente inconsciente por parte do homem, j que sementes com tegumentos mais finos germinam mais rapidamente do que as que possuem tegumento mais resistente. Da mesma forma, sementes com maior contedo de reservas produzem plntulas que crescem mais rapidamente e competem mais vantajosamente. Outra caracterstica importante para a distino entre 97
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Santos, D.Y.A.C. & Furlan, C.M.

plantas cultivadas e selvagens o fato de que os frutos das primeiras permanecem aderidos ao eixo da infrutescncia, enquanto nas plantas selvagens os frutos destacam-se facilitando a disperso das sementes. Trabalhos arqueolgicos importantes esto sendo realizados no Brasil e vm resultando em achados interessantes. Merecem destaque as exuberantes pinturas rupestres descobertas em diversos stios arqueolgicos na regio de So Raimundo Nonato, Piau (hoje protegidos com a criao do Parque Nacional Serra da Capivara), que fornecem informaes importantes sobre a chegada do homem s Amricas. Atualmente, tm grande repercusso internacional os trabalhos realizados em Lagoa Santa (Minas Gerais), envolvendo um crnio de 11000 anos atrs, que ficou conhecido como Luzia e que pertenceu a uma mulher (da raa negride) que morreu com idade entre 20 e 25 anos. Acreditava-se que as populaes que chegaram Amrica eram todas monglicas, como os atuais indgenas. Pesquisadores da UFMG e do IB-USP acreditam que as primeiras populaes humanas chegaram Amrica h 45.000 anos, portanto muito antes do que sempre se sups. Alm das estratgias de estudo de coleta de espcies selvagens relacionadas, expedies arqueolgicas, datao por
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C e anlise de fsseis, atualmente os estudiosos lanam mo de diversas

tcnicas moleculares para estudar a origem de algumas espcies domesticadas. Vrias tcnicas, como RAPD (Random-Amplified Fragment Polymorphism polimorfismo de fragmentos amplificados ao acaso) e AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism polimorfismo do comprimento do fragmento amplificado), assim como a seqncia de bases de segmentos do DNA ou do RNA. As tcnicas de AFLP e RAPD enquadram-se na categoria geral de anlises de fragmentos de restrio. Em linhas gerais, os fragmentos de restrio so obtidos a partir do tratamento do DNA por enzimas de restrio, que so endonucleases obtidas de bactrias que quebram a molcula de DNA em determinados stios contendo uma seqencia de bases definida. Esses fragmentos so analisados por eletroforese em agarose ou poliacrilamida ou por meio de seqenciadores automticos. A comparao dos perfis eletroforticos das vrias plantas analisadas permite estabelecer stios de restrio ganhos ou perdidos na evoluo, assim como inseres e delees nos fragmentos, que porventura ocorreram. Essas anlises destinam-se ao estabelecimento de impresses digitais genticas das plantas, geralmente usadas para caracterizao de germoplasma e medidas de distncias genticas entre variedades e cultivares. A anlise da seqncia de bases presta-se excelentemente para estudos de origem e filogenia de plantas cultivadas. Nesses casos, um gene especfico (marcador) do genoma da planta analisado e a comparao da seqncia das bases nitrogenadas desse gene, obtidas das diversas amostras (espcies, variedades ou cultivares), fornece as informaes necessrias para os estudos filogenticos. Outra tcnica de anlise de fragmentos de restrio, que a mais utilizada para avaliar afinidades genticas entre linhagens de plantas cultivadas, a anlise de DNA microssatlite, que compara comprimentos de fragmentos contendo seqncias de at seis bases que se repetem em tandem (em rosrio). Os marcadores microssatlites tm alto grau de polimorfismo, permitindo a comparao entre linhagens com grande proximidade gentica.

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16. Origem das plantas cultivadas

A tabela abaixo mostra alguns exemplos de espcies de importncia econmica e seus locais de origem: REGIO FAMLIA APIACEAE EXEMPLOS Salsa (Petroselinum crispum) Cenoura (Daucus carota) ARECACEAE ASTERACEAE MEDITERRNEO/ ORIENTE MDIO BRASSICACEAE Tmara (Phoenix spp.) Alcachofra (Cynara scolymus) Chicria, almeiro e escarola (Cichorium intybus) Alface (Lactuca sativa) Couve, mostarda, nabo (Brassica oleracea) Rabanete (Raphanus sativus) MALVACEAE RUBIACEAE POACEAE CANNABACEAE AMARANTHACEAE FABACEAE Algodo (Gossypium spp.) Caf (Coffea arabica) Trigo (Triticum aestivum) Cnhamo (Cannabis sativa) Espinafre (Spinacia oleracea) Fava (Vicia faba) Lentilha (Lens culinaris) SIA CENTRAL LINACEAE MORACEAE OLEACEAE POACEAE Linho (Linum usitatissimum) Amora (Morus spp.) Azeitona (Olea europaea) Centeio (Secale cereale) Cevada (Hordeum vulgare) ANACARDIACEAE FABACEAE RUTACEAE SUDOESTE ASITICO MUSACEAE POACEAE Manga (Mangifera indica) Soja (Glycine max) Laranja (Citrus) Banana (Musa paradisiaca) Arroz (Oryza sativa) Cana-de-acar (Saccharum officinarum)

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Santos, D.Y.A.C. & Furlan, C.M.

REGIO

FAMLIA CUCURBITACEAE FABACEAE

EXEMPLOS Abbora (Cucurbita pepo) Feijo (Phaseolus vulgaris) Pimenta (Capsicum spp.) Tabaco (Nicotiana tabacum)

MXICO E AMRICA CENTRAL

SOLANACEAE

POACEAE EUPHORBIACEAE

Milho (Zea mays) Mandioca (Manihot esculenta) Seringueira (Hevea brasiliensis)

FABACEAE MYRTACEAE AMRICA DO SUL SOLANACEAE

Amendoim (Arachis hypogaea) Goiaba (Psidium guajava) Jabuticaba (Myrciaria cauliflora) Batata inglesa (Solanum tuberosum) Tomate (Solanum lycopersycum)

MALVACEAE

Cacau (Theobroma cacao)

BIBLIOGRAFIA SUGERIDA LEWINGTON, A. 2003. Plants for People. Transworld Publishers, Londres, 304p. SIMPSON, B.B. & OGORZALY, M.C. 2001. Economic Botany: Plants in our World. 3 edio. McGraw-Hill, Nova Iorque, 529p. Programa Panamericano de Defensa y Desarrollo de la Diversidad biolgica, cultural y social www.prodiversitas.bioetica.org.
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17. Cultura de tecidos e suas aplicaes biotecnolgicas

17. CULTURA DE TECIDOS E SUAS APLICAES BIOTECNOLGICAS Eny Iochevet Segal Floh (enyfloh@ib.usp.br)

Este texto tem como objetivo apresentar conceitos bsicos da cultura de tecidos vegetais, explicando de forma clara e concisa, as vrias etapas do processo e suas aplicaes como ferramenta biotecnolgica. Os primeiros seres vivos a serem clonados foram as plantas. Multiplicar plantas por meio de reproduo assexuada relativamente simples e muito utilizado pelos agricultores. Um dos exemplos mais comuns a estaquia onde um pedao de caule ou folha, quando colocado em um meio adequado (terra, areia, gua ou soluo de sais), desenvolve razes podendo ser transferido para a terra onde crescer normalmente como a planta matriz. Vrios tipos de plantas como as violetas, heras e gernios podem ser propagadas mediante este mtodo. Com o avano das tcnicas de clonagem em plantas, hoje em dia possvel regenerar uma planta inteira a partir da cultura de tecidos e de clulas in vitro (Figura 1). Essa tcnica biotecnolgica compreende a cultura de explantes, que so fragmentos de tecidos ou rgos vivos retirados de um organismo, neste caso de um vegetal. Esses explantes devem ser cultivados em condies asspticas e, em meios de cultura artificiais (contendo compostos como gua, sais minerais, vitaminas, fonte de carbono e reguladores de crescimento), e mantidos em condies ambientais controladas (luz e temperatura). Quando em cultura, as clulas vegetais presentes nos explantes, podem seguir diferentes caminhos morfogenticos (Figura 1), dando origem a novos rgos (razes, brotos e flores), por meio de um processo denominado de organognese, ou atravs da embriognese, dando origem aos embries somticos, similares aqueles encontrados nas sementes (embries zigticos). Outro caminho possvel a ser seguido pelo material em cultura a formao de uma massa de clulas chamada de calo, que contm clulas pouco diferenciadas. O calo, ao ser manipulado, especialmente pelos reguladores de crescimento vegetais, pode manter-se como calo, ou dar origem s vrias partes (rgos) de uma planta ou ainda a embries. Similarmente, para esta situao, os processos morfogenticos resultantes so denominados de: organognese e embriognese indireta, por terem passado por uma etapa intermediria de calo (Figura 1). O princpio bsico da cultura de tecidos vegetais est intimamente relacionado com a teoria da totipotencialidade formulada por Haberland, um fisiologista alemo que em 1902, props que cada clula vegetal possua o potencial gentico para produzir um organismo inteiro. A capacidade de proliferao celular e a capacidade de organizarem-se em tecidos, rgos e plantas completas denominado de totipotencialidade. Teoricamente, todas as clulas vegetais possuem a capacidade de manifestar esta totipotencialidade quando submetidas s condies de estmulo adequado. Os explantes so constitudos por diferentes tipos de clulas, as quais possuem diferentes competncias. A competncia definida como a habilidade de uma clula ou grupo de clulas de responder a um estmulo indutivo (que podem ser os reguladores de crescimento), visando a um processo especfico de desenvolvimento. Assim, dependendo do estmulo fornecido, as clulas competentes sero determinadas para diferentes vias de desenvolvimento e diferenciao, ou seja: formao de calos, organognese ou embriognese. A capacidade observada nas clulas vegetais, de retorno para um estdio pouco diferenciado, por muitos chamados de indiferenciado ou 101
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Floh, E.I.S.

desdiferenciado, e a possibilidade de re-diferenciao originando um novo tecido, rgo e mesmo um indivduo completo, tm sido um desafio para os pesquisadores que trabalham na rea animal, especialmente nas pesquisas com clulas tronco. Os caminhos da totipotencialidade, em clulas animais, ainda constituem um desafio com muito a ser estudado e investigado.

FONTES DE EXPLANTES

RESPOSTAS DOS MATERIAIS IN VITRO

PICE

POUCO DIFERENCIADO (calo)


FOLHA

MORFOGNESE DIRETA

GEMA LATERAL

ORGANOGNESE (brotos, flores, razes)

EMBRIOGNESE (embries somticos)

CAULE

MORFOGNESE INDIRETA
RAIZ

Figura 1 Fontes de explantes (A) e respostas de materiais cultivados in vitro (B) A biotecnologia envolve a manipulao de processos biolgicos para a obteno de produtos teis. A biotecnologia moderna explora grande parte do conhecimento proveniente dos estudos de DNA recombinante, selecionando caractersticas de interesse e eliminando as no desejveis. Os resultados obtidos pela biotecnologia de plantas tm reflexos na agricultura, na indstria alimentcia, nos consumidores, e, sobretudo, no meio ambiente. Por exemplo, pode-se alcanar a produo de plantas que necessitam menores quantidades de pesticidas, fertilizantes e gua, ou a produo de plantas com melhor qualidade de armazenamento e processamento e melhores qualidades nutricionais. Na biotecnologia vegetal, o domnio da cultura in vitro (ou cultura de tecidos) de plantas tem uma importncia crucial, em especial para a micropropagao e o melhoramento gentico. Dentre outras reas de aplicao da cultura de tecidos destacam-se: conservao de germoplasma, visando a conservao de recursos genticos, e a produo de metablitos secundrios (Figura 2).

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17. Cultura de tecidos e suas aplicaes biotecnolgicas

Cultura de Tecidos

Conservao de germoplasma

Micropropagao propagao clonal (clonagem)

Estudos aplicados

Melhoramento gentico ( fixao de gentipos superiores) - Resistncia a doenas, salinidade, herbicidas, etc. - Eliminao de vrus (cultura de meristemas). - Haplides (cultura de anteras). - Protoplastos e hibridizao somtica. - Variabilidade gentica (somaclonal). - Plantas transgnicas.

Metablitos secundrios Biossntese/produo de metablitos secundrios

Figura 2 Aplicaes da tcnica de cultura de tecidos de plantas A micropropagao, propagao clonal ou clonagem (Figura 2), considerados como tendo o mesmo significado, constituem os processos de propagao vegetativa na cultura de tecidos vegetais, onde uma planta pode ser dividida em milhares de clulas, cada uma com o potencial de se desenvolver em uma nova planta geneticamente idntica original. Neste contexto insere-se o conceito de clone, que constitui um conjunto geneticamente uniforme de indivduos, derivados originalmente de um indivduo simples por reproduo assexuada. O maior benefcio da cultura de tecidos vegetais para o melhoramento gentico de plantas perenes refere-se possibilidade de capturar e fixar componentes aditivos e no aditivos da varincia gentica mediante a propagao clonal, podendo ser assim utilizadas para a propagao em massa de gentipos superiores. Esta tecnologia permite propagar em larga escala plantas de qualidade superior (milhares ou mesmo bilhes) sem destruir a planta-me; obter plantas de fcil transporte para diversos pases, sem a introduo de novas doenas ou ainda, recuperar espcies em vias de extino. As potencialidades da cultura de clulas vegetais tm sido utilizadas para originar variantes somaclonais permitindo a obteno de indivduos resistentes a fatores de estresses, biticos e abiticos, ou com caractersticas melhoradas (por exemplo: aumento da produo de acar na cana-de-acar; resistncia ao fungo Fusarium em tomateiro, etc.). Estas tcnicas permitem tambm, a regenerao de indivduos provenientes de cruzamentos com pouca viabilidade pelos mtodos tradicionais, a obteno de hbridos somticos, a obteno de mutantes induzidos por aplicao de agentes qumicos e/ou fsicos, ou ainda, a introduo de determinadas 103
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Floh, E.I.S.

caractersticas de interesse em variedades elites, sem interferir no resto do genoma. Neste ltimo caso so utilizadas tcnicas de engenharia gentica, que quando associadas s tcnicas de cultivo in vitro, permitem a obteno de plantas transgnicas. Adicionalmente, pode-se produzir e multiplicar materiais in vitro, produzindo colees ou bancos de germoplasmas, constitudos por materiais que podem ser trocados e armazenados. A criopreservao, ou seja, a conservao por um longo perodo mediante tcnicas de congelamento de clulas em baixas temperaturas (-196 C) em nitrognio lquido, veio solucionar a grande dificuldade de conservao de estoques de material vivo para os cultivos posteriores, e a conservao de recursos genticos vegetais de germoplasmas. Desta maneira, atualmente existem bancos de germoplasmas que estocam materiais de propagao vegetativa e de espcies com sementes recalcitrantes. Todas as formas de melhoramento de plantas envolvem seleo. A seleo freqentemente visa maiores ganhos em produtividade, qualidade e diversidade das plantas exploradas. Plantas cultivadas para a utilizao alimentar so mais sensveis aos estresses ambientais quando comparadas com as selvagens, pois freqentemente foram selecionadas para uma determinada caracterstica. Os princpios estabelecidos por Mendel, no sculo XIX, fundamentaram o melhoramento convencional por cruzamentos e seleo, onde os progenitores so cruzados para permitir a obteno de uma descendncia com caractersticas selecionadas melhoradas. Por sculos a humanidade realizou o melhoramento de culturas agrcolas por meio do cultivo selecionado e da polinizao controlada de plantas. A biotecnologia vegetal moderna uma extenso desse melhoramento tradicional de plantas, com uma diferena importante: ela permite a transferncia de uma maior variedade de informaes genticas de forma precisa e controlada. Diferentemente do melhoramento tradicional, que envolve o cruzamento de centenas de genes, a biotecnologia vegetal de hoje permite a transferncia de apenas um ou poucos genes desejveis. Esta situao permite com que os melhoristas vegetais desenvolvam culturas com caractersticas benficas especficas, sem as indesejveis, como aquelas que reduzem a produtividade. fundamental, entretanto, que exista um controle rigoroso da qualidade e segurana desses produtos para o consumo pela populao e para o meio ambiente. Os conhecimentos adquiridos relativos polinizao cruzada, combinados com mtodos cada vez mais sofisticados de deteco das caractersticas de interesse, permitiram acelerar esse processo. A clonagem permite criar, por exemplo, florestas de eucaliptos geneticamente idnticos e com caractersticas genticas mais vantajosas, e assim obter plantas com qualidade superior de madeira e de crescimento. Da mesma maneira, podem ser obtidas plantaes de rvores frutferas clonadas a partir de uma original, excelente produtora de frutos saborosos e resistentes s variaes climticas. Porm, se por um lado a plantao de clones aumenta a produtividade e a qualidade dos produtos agrcolas, por outro devemos tomar cuidado com essa uniformidade gentica. Quando alguma praga atacar essa plantao, se uma planta for susceptvel a essa praga, todas sero, j que so geneticamente idnticas e, dessa forma, a plantao inteira ser destruda. Em uma plantao natural, existe uma variabilidade onde nem todas as plantas so excelentes para uma caracterstica como produo, mas, tambm, nem todas sero suscetveis quela praga. Assim, as mais resistentes sobrevivero, e a partir delas poderemos reconstituir a plantao. Por isso, fundamental 104
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17. Cultura de tecidos e suas aplicaes biotecnolgicas

que a clonagem seja utilizada de forma controlada, para que a diversidade gentica de cada espcie de plantas no seja diminuda. Afinal de contas, quem somos ns para saber quais indivduos so mais merecedores de serem propagados? Que genes interessantes esto contidos em uma planta de qualidade aparentemente inferior? Nossos critrios de seleo so muito limitados, e a diversidade gentica constitui patrimnio nico da humanidade. BIBLIOGRAIA SUGERIDA GUERRA, M.P. & NODARI, N.O. 2008. Apostila de Biotecnologia Introduo ao conceito de Biotecnologia Laboratrio de Fisiologia do Desenvolvimento e Gentica Vegetal- Universidade Federal de Santa Catarina. (http://www.cca.ufsc.br/lfdgv/Apostila.htm) HANDRO, W. & FLOH, E.I.S. 1990. Aspectos bsicos do controle da morfognese in vitro. In: Torres, A.C. & Caldas, L.S. (eds.). Tcnicas e Aplicaes da Cultura de Tecidos de Plantas. Braslia: ABCTP/EMBRAPA-CNPH; pp. 203-212. STEINER, N; SANTA-CATARINA, C.; ANDRADE, J.B.R.; BALBUENA, T.S.; GUERRA, M.P; HANDRO, W.; FLOH, E.I.S. & SILVEIRA, V. 2008. Araucaria angustifolia Biotechnology Review. Functional Plant Science and Biotechnology 2 (1): 20-28. TORRES, A.C.; CALDAS, L.S. & BUZZO, J. 1999. Cultura de Tecidos e Transformao Gentica em Plantas vol. 1 e 2. Braslia EMBRAPA, 864p.

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18. Genmica e plantas transgnicas

18. GENMICA E PLANTAS TRANSGNICAS Maria Magdalena Rossi (magda1708@yahoo.com) Douglas Silva Domingues (doug@ib.usp.br)

Um pouco de Historia: de Darwin ao Dogma Central da Biologia Molecular Desde meados do sculo XX os conhecimentos da biologia tm revolucionado a vida de nossa civilizao, principalmente nas reas de alimentao e sade. Estes novos conceitos, que deram origem a uma nova rea da biologia e que hoje recebe diversos nomes (biologia molecular, gentica molecular, tecnologia do DNA recombinante, engenharia gentica), permitiram o surgimento de tecnologias que levaram ao desenvolvimento de medicamentos em escala industrial (por exemplo, vacinas e antibiticos), salvando milhares de vidas e erradicando epidemias que assolaram a humanidade, como a varola e a paralisia infantil. Outro exemplo desse avano na rea mdica a produo de insulina comercial a partir de bactrias modificadas geneticamente. Ao mesmo tempo, a produo agropecuria tambm ganhou poderosas ferramentas que permitem acelerar o processo de melhoramento gentico de espcies de interesse econmico a fim de aumentar a produtividade, melhorar a qualidade nutricional e diminuir o impacto ambiental. Essa revoluo na biologia foi possvel a partir do descobrimento da estrutura do DNA por Watson e Crick em 1953, mas, para chegar a isso estes dois pesquisadores se basearam no conhecimento colhido ao longo de muitos anos por outros tantos valiosos cientistas. Tudo comeou com Charles Darwin, naturalista ingls, que em 1859 publicou seu famoso livro, A origem das espcies. Nesse livro ele props o conceito de seleo natural como um princpio pelo qual qualquer pequena variao num organismo, se for til, ser preservada ao longo das prximas geraes. Contemporaneamente, Gregor Mendel estabeleceu as leis da herana. Realizando cruzamentos entre ervilhas de semente lisa e rugosa (Figura 1), verificou que a primeira gerao (F1) apresentava o carter (fentipo) de um dos parentais. Esse carter foi chamado de dominante, enquanto o vindo do outro parental, de recessivo. A partir dessa observao, foram postuladas algumas concluses: Os caracteres so controlados por um par de fatores particulados (posteriormente chamados de genes), um proveniente da me e outro do pai. Nas linhagens parentais, os dois fatores do par ocorrem na mesma verso (posteriormente as diferentes verses foram chamadas de alelos) e se separam no momento da formao dos gametas. Na gerao F1 ocorre a combinao de ambos os alelos parentais. Indivduos com o mesmo fentipo podem ter diferentes combinaes de fatores (gentipo). O termo homozigoto refere-se ao par gnico que possui o mesmo alelo no gene proveniente da me e do pai. O termo heterozigoto refere-se ao par gnico que possui diferentes alelos. A reapario do fentipo recessivo na segunda gerao (F2) indica que ambos os alelos so transmitidos de maneira independente durante a formao dos gametas. Por algum tempo, os experimentos de Mendel caram no esquecimento da comunidade cientfica preocupada em determinar a natureza qumica do material que continha a informao gentica. Em 1871 foi 107
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Rossi, M.M. & Domingues, D.S.

descoberta a composio dos cidos nuclicos: o DNA, composto por desoxirribonucleotdeos (cada nucleotdeo composto por um fosfato, um acar do tipo desoxirribose e uma base nitrogenada), e o RNA composto por ribonucletdeos (cada um composto por um fosfato, uma ribose e uma base nitrogenada). Sutton e Boveri, em 1903, enunciaram a Teoria Cromossmica da Herana, que propunha: 1) que os fatores particulados de Mendel ocorriam nos cromossomos, 2) que estes ltimos eram transmitidos sistematicamente de uma gerao para outra e 3) que cada par de cromossomos homlogos (morfologicamente similares) se separava durante a meiose de maneira que cada gameta recebia apenas um dos cromossomos do par. Em 1909, Janssens props o termo genes para se referir aos fatores particulados de Mendel. Ele props, ainda, que os mesmos deveriam codificar toda a informao necessria para o crescimento, desenvolvimento, estrutura e reproduo dos organismos, e ter uma replicao precisa para garantir a mesma informao na descendncia, mas, ao mesmo tempo, deveriam ter a capacidade de variar para permitir as mudanas e adaptaes evidenciadas pela teoria da evoluo de Darwin. Estava dado o primeiro passo que ligava a seleo natural herana. A primeira vez que foi associado um gene a uma protena foi em 1909, quando Garrod estudou uma doena rara que causa uma mudana na cor da urina, conhecida como sndrome da fralda preta, ou alcaptonria. Essa doena era atribuda mudana em uma enzima, os indivduos acometidos por ela no eram capazes de converter o aminocido fenilalanina em tirosina. Garrod estabeleceu a genealogia de famlias que tinham essa doena, e inferiu que o gene selvagem (normal) era responsvel pela produo da enzima funcional enquanto que no indivduo homozigoto mutante essa enzima estava ausente. At ento, a teoria mais aceita na comunidade cientfica colocava as protenas como responsveis pela transferncia de informao de uma gerao para outra, no entanto, os experimentos de Griffith, em 1928, e de Avery, McLeod e McCarty, em 1944, mostraram um panorama diferente. Griffith observou que uma cepa de bactrias virulentas, quando injetadas num camundongo levavam a morte, mas perdiam sua virulncia quando eram mortas por calor. Mas, quando o macerado dessas bactrias mortas era misturado a bactrias no-virulentas, estas se tornavam virulentas. A concluso foi que a informao gentica das bactrias virulentas resistia ao calor e era transferida para as no virulentas. Posteriormente, Avery, McLeod e McCarty demonstraram que quando o extrato das bactrias mortas por calor era tratado com uma enzima que degradava DNA (desoxirribonuclease) este perdia a capacidade de transformar as bactrias novirulentas em virulentas. Desta maneira, foi demonstrado que a informao gentica estava contida no DNA. Um descobrimento que foi determinante para desvendar a estrutura do DNA foi a regra enunciada por Chargaff, que em 1949 observou que embora a proporo de cada base nitrogenada varie de uma espcie para outra, independentemente da fonte de DNA a quantidade de adenina era sempre igual de timina (A=T) e a de guanina sempre igual de citosina (G=C). Foi finalmente em 1953 que Francis Crick e James Watson interpretaram dados de difrao de raios X e conseguiram desvendar a estrutura do DNA, uma dupla fita antiparalela, unida por ligaes de hidrognio, onde esto emparelhadas as bases nitrogenadas, sempre A com T e G com C, respeitando assim a regra de Chargaff (Figura 2).

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18. Genmica e plantas transgnicas


gerao parental

gametas

Citocina (C) gerao F1 hbrida

Guanina (G)

gametas femininas

gametas masculinas

Timina (T)

Adenina (A)

Figura 2. Estrutura da molcula de DNA: dupla hlice antiparalela. Modificada de Buchanan et al. (2000).
gerao F2

Figura 1. Primeira lei da herana descrita por Mendel. Modificada de Buchanan et al. (2000).
replicao

transcrio

Figura 3. O dogma central da biologia desvendado: os processos envolvidos no fluxo da informao contida no DNA. Modificada de Watson et al.(2004).

traduo

Protena sendo sintetizada

aminocidos

tRNA

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Pois bem, sabia-se que a informao gentica estava contida no DNA, mas, como essa informao era transferida para obter as protenas que eram as molculas que executavam as funes estruturais e catablicas? Algumas evidncias sobre a localizao citoplasmtica do RNA levaram Francis Crick a propor, em 1956, o dogma central da biologia que descreve o fluxo da informao desde o DNA at as protenas utilizando o RNA como molcula intermediria. Surgia ento uma nova corrida para revelar os processos pelos quais: 1) o DNA se duplicava para garantir a transferncia de uma cpia para a clula filha; 2) a informao nele contida era transformada em RNA; e finalmente, 3) a informao do RNA era convertida em protenas executoras. Kornberg, em 1958, caracterizou a enzima responsvel pela sntese de DNA, e a chamou de DNA polimerase. Demonstrou que a enzima era capaz de catalisar a sntese de DNA unindo

desoxirribonucleotdeos por meio de ligaes fosfodisteres entre os extremos 3 do primeiro e 5 do seguinte, atuando unicamente na presena de DNA, e que a molcula produto tinha a mesma proporo A+T/C+G que o substrato. No mesmo ano, Meselson e Stahl revelaram que a replicao do DNA era semiconservativa, de maneira que, durante o processo, a dupla fita era aberta e a cpia de cada uma delas resultava em duas duplas fitas, cada uma contendo uma fita parental e outra recm sintetizada. Em 1960, Hurwitz e Weiss caracterizaram a RNA polimerase. Essa enzima atuava somente na presena de DNA; unia ribonucleotdeos (ATP, GTP, CTP e UTP) mediante ligaes fosfodisteres sintetizando a nova fita no sentido 53; durante a transcrio, s uma das fitas era utilizada como molde e, em bactrias, a mesma enzima sintetiza o RNA ribossomal (rRNA), o RNA de transporte (tRNA) e o RNA mensageiro (mRNA) a partir de diferentes segmentos do genoma. Finalmente, em 1961 com o descobrimento do cdigo gentico por Nirenberg e Matthaei, e conhecendo a existncia do tRNA e dos ribossomos, foi possvel completar o dogma central da biologia com os trs processos: replicao, transcrio e traduo (Figura 3). Assim, hoje podemos dizer que a pequena variao til num organismo, qual se referia Darwin, no era outra coisa que uma nova variante gnica (diferena na seqncia de nucleotdeos) responsvel em codificar uma protena com uma seqncia de aminocidos diferente, cuja funo permite uma maior adaptao desse organismo ao ambiente. Da mesma maneira, os alelos R e r de Mendel se referiam s duas variantes allicas do mesmo gene que determinam duas protenas estruturais diferentes que do s sementes a textura lisa ou rugosa. O genoma e o gene eucarioto Chamamos de genoma ao conjunto de material gentico que, no caso de uma clula eucariota, est contido em seu ncleo. Ao contrrio do que se pensava, com o advento do seqenciamento de DNA em grande escala (genmica), foi possvel verificar que grande parte do genoma dos organismos est formada por seqncias que no codificam protenas. Estas regies contm seqncias repetitivas e seqncias de DNA que se mobilizam no genoma, que em organismos mais complexos podem representar entre 45%, como o caso de humanos, a 80%, como no milho, de todo o material gentico. A funo dessas seqncias ainda desconhecida e foram chamadas, por muito tempo, de DNA lixo, mas j foi demonstrado o papel fundamental que elas ocupam na dinmica evolutiva dos organismos. Portanto, nem todo o DNA de uma clula expresso (transcrito). Mais ainda, embora o DNA seja exatamente o mesmo em cada clula de um mesmo organismo, os genes que sero expressos em cada tecido/clula ou condio 110
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fisiolgica sero diferentes, permitindo assim a diferenciao de funes e respostas a fatores biticos e abiticos. Define-se gene como uma seqncia de DNA, um fragmento do genoma, que codifica para um produto difusvel. No correto falar de uma seqncia que codifica para uma protena j que os fragmentos de DNA que codificam para os rRNAs (RNAs ribossomais) e os tRNAs (RNAs de transferncia) so considerados genes embora no resultem em produtos proticos. Alm da regio codificante, que dar origem ao produto ativo, seja protena ou RNA, um gene eucarioto possui diversas outras regies que so responsveis pela regulao do mesmo (Figura 4). Na regio 5 do gene se encontra o promotor, esta unidade funcional pode variar entre 1 a 10 Kb e vai determinar quando esse gene ser transcrito. O promotor possui alguns domnios conservados como so o TATA Box e CAAT Box, fundamentais para recrutar a maquinaria transcricional (complexo da RNA polimerase). O RNA mensageiro (mRNA) primrio comear no inicio de transcrio e acabar no final da transcrio, e contm xons e ntrons. Assim que termina a transcrio, o mRNA sofrer algumas modificaes para proteg-lo da degradao. Uma metilguanosina ser unida ao extremo 5 (CAP) e uma cauda de poliadeninas ao extremo 3. Posteriormente, ainda no ncleo, os ntrons sero removidos (processo chamado de splicing) dando origem ao mRNA maduro, o qual ir para o citoplasma onde ser traduzido pelos ribossomos em uma protena. A regio 5 no traduzida do mRNA contm as seqncias que sero reconhecidas pelos ribossomos. O primeiro aminocido da cadeia peptdica ser incorporado quando o ribossomo achar a seqncia ATG que corresponde ao aminocido metionina. A traduo prosseguir at o ribossomo achar um cdon de parada: TGA, TAA ou TAG. Genmica A genmica, estudo da estrutura e funcionamento do genoma de um organismo, surgiu em 1995 quando foram descritos os primeiros genomas totalmente seqenciados: o de Haemophilus influenzae (bactria que provoca meningites, septicemias, infeces do ouvido mdio, celulite e pneumonia) e Mycoplasma genitalium (bactria parastica que causa doena inflamatria plvica). Desde ento, mais de 180 genomas tm sido seqenciados incluindo bactrias (a grande maioria), insetos, animais e plantas. Em particular, as espcies vegetais que possuem os seus genomas totalmente seqenciados so: Arabidopsis thaliana (planta modelo para a fisiologia vegetal), Oryza sativa (arroz), Populus trichocarpa (lamo, uma arbrea), Sorghum bicolor (sorgo), Medicago trunculata (alfafa) e Zea mays (milho) (Tabela 1). Em lugar do seqenciamento completo do genoma (todo o DNA do ncleo), em diversos casos, especialmente para espcies com genomas muito grandes, se opta pelo seqenciamento do transcriptoma (ou, do ingls, ESTs, Expressed Sequence Tags), ou seja, unicamente das regies codificantes, evitando assim o seqenciamento das regies repetitivas e elementos mveis. Neste caso o mRNA extrado e so feitas cpias de DNA de cada mensageiro (cDNA) e essas cpias so ento seqenciadas. Desta forma se conhece a seqncia das regies codificantes de todos os genes expressos da espcie no tecido e nas condies nas quais foi isolado o mRNA.

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Figura 4. Estrutura representativa do gene eucarioto. Modificada de Buchanan et al. (2000).

Figura 5. Diferentes estratgias para o seqenciamento de genes. 112


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Tabela 1. Genomas vegetais totalmente seqenciados (Mb = mega pares de pares). Espcie Arabidopsis thaliana Oryza sativa Populus trichocarpa Sorghum bicolor Medicago trunculata Zea mays Nmero de cromossomos 5 12 19 10 8 10 Tamanho do genoma 125 Mb 430 Mb 550 Mb 770 Mb 500 Mb 2.500 Mb

A informao gerada pelos projetos de seqenciamento sejam genomas completos ou transcriptomas (Figura 5), assim como o desenvolvimento de novas ferramentas de anlise, esto causando alteraes profundas na maneira de estudar a biologia vegetal. A genmica teve impacto profundo no melhoramento gentico de plantas economicamente importantes e na preservao ecolgica e ambiental. Uma destas mudanas a utilizao da gentica reversa cada vez mais comum. Ao contrrio do que historicamente acontecia, onde primeiramente era caracterizado um fentipo (caracterstica externa) e posteriormente o gene responsvel, a gentica reversa prope a utilizao da seqncia gnica para identificar, posteriormente, a funo que o seu produto possui. A partir da seqncia completa do genoma de um organismo possvel, por meio da gentica reversa, conhecer de forma massiva a funo dos genes por ela codificados, genmica funcional. Por outro lado, comparando dados de seqenciamento de diferentes espcies ou variedades possvel avaliar as diferenas de maneira a obter informaes sobre os processos envolvidos na diferenciao das espcies e evoluo dos genomas, este tipo de anlise chamada de genmica comparativa. Transformao gentica vegetal via Agrobacterium tumefaciens O ponto de partida para o desenvolvimento da primeira tcnica de transformao gentica vegetal foram os estudos de Marc Van Montagu, bilogo belga, que descobriu o mecanismo de transferncia de genes entre a bactria Agrobacterium tumefaciens (patgena de plantas) e a clula vegetal. Esta bactria infecta as clulas vegetais formando um tumor e produzindo a doena chamada galha de coroa. Para a agrobactria entrar, a planta precisa ter uma leso. Como parte do mecanismo de defesa da planta, o tecido lesionado libera compostos fenlicos que so percebidos pela bactria por meio de um receptor formado pelas protenas VirA e VirG. Esse receptor estimulado ir induzir a expresso de uma srie de genes (outros genes Vir) localizados no plasmdeo pTi (molcula circular de DNA, independente do genoma bacteriano). Os produtos proticos dos genes Vir faro uma cpia do fragmento chamado T-DNA do plasmdio, e conduziro o T-DNA at a clula vegetal onde finalmente ser integrado no genoma da planta. Uma vez l, os genes contidos no T-DNA sero expressos e comear o crescimento do tumor. Mas, que genes so os que a bactria transfere para o genoma vegetal? O T-DNA contm dois tipos de genes: 1) genes que codificam enzimas envolvidas na biossntese de hormnios vegetais (citocininas e auxinas), como conseqncia do desbalano hormonal, as clulas transformadas proliferam desordenadamente formando o tumor; e 2) genes que codificam para enzimas da rota biossinttica de opinas, molculas semelhantes a aminocidos que so a fonte de carbono e nitrognio para a agrobactria. Ento, por um lado, a bactria faz a clula vegetal produzir seu alimento e por outro induz a proliferao das clulas escravizadas (Figura 6). 113
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Figura 6. Esquema representativo do mecanismo de transformao gentica via Agrobacterium tumefaciens.

Figura 7. Obteno de uma planta transgnica via Agrobacterium tumefaciens. 114


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Quando este mecanismo natural de transformao gentica foi descoberto, imediatamente surgiu a idia de utiliz-lo para introduzir genes de interesse nas plantas, modificando apenas o contedo do T-DNA. J tnhamos ento uma maneira de introduzir um gene de interesse numa clula vegetal, mas a incgnita ainda era como reconstruir uma planta transgnica normal a partir dessa transformada? A resposta para este ponto j estava formulada, uma vez que j h muito tempo vinha-se trabalhando em cultura de tecidos e era conhecida a totipotencialidade das clulas vegetais: j se sabia como regenerar plantas modelo a partir de uma nica clula. Desta maneira, surgiram as primeiras plantas transgnicas de fumo que expressavam uma protena que conferia resistncia a um antibitico que mata clulas vegetais. Resumindo, para obter uma planta transgnica necessrio modificar o plasmdio pTi de maneira a: 1) manter os genes Vir intactos, para garantir a transferncia do T-DNA para a clula vegetal; 2) retirar do T-DNA os genes de sntese de opinas e hormnios vegetais; 3) colocar no T-DNA um gene que codifique uma protena de resistncia a um antibitico que permita deixar vivas unicamente as clulas vegetais que tenham sido transformadas; e 4) incorporar ao T-DNA o gene de interesse. Por outro lado, necessrio conhecer um protocolo que permita regenerar uma planta inteira a partir de uma nica clula transformada da espcie de interesse (Figura 7). A tecnologia dos transgnicos uma poderosa ferramenta, hoje essencial para o avano do conhecimento nas mais diversas reas da biologia. Em particular, a obteno de plantas transgnicas est revolucionando a produo agrcola mundial, permitindo o aumento da produo sem necessariamente aumentar a rea cultivada, melhorando a qualidade nutricional e industrial e reduzindo a necessidade de aplicao de pesticidas, reduzindo assim o impacto ambiental. BIBLIOGRAFIA SUGERIDA LEWIN, 2004. Genes VIII. Pearson Education Inc., Nova Iorque, 1027p. MIR, L. 2004. Genmica. Editora Atheneu, So Paulo, 1114p. WATSON, J.D.; BAKER, T.A.; BELL, S.P.; GANN, A.; LEVINE, M. & LOSICK, R. 2004. Molecular Biology of the Gene. Pearson Education Inc, So Francisco, 732p. BUCHANAN, B.B.; GRUISSEM, W. & JONES, R.L. 2000. Biochemistry and Molecular Biology of Plants. American Society of Plant Physiologists, Rockville, 1367p. WATSON, J.D. 2005. DNA: o Segredo da Vida. Companhia das Letras, So Paulo, 470p. MARINO, C.L. 2006. Melhoramento Gentico de Plantas e os Transgnicos. Gentica na Escola: 1 (2), p. 75-78.

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19. Descobrindo genes

19. DESCOBRINDO GENES Maria Magdalena Rossi (magda1708@yahoo.com) Douglas Silva Domingues (doug@ib.usp.br)

Podemos ter dois tipos de Projetos Genoma: 1) Projeto genoma propriamente dito, ou seja, quando o genoma completo seqenciado. 2) Projeto transcriptoma, quando unicamente so seqenciadas cpias dos mRNA (transcritos) expressos. Veremos agora alguns detalhes tcnicos de cada caso. No primeiro caso, se parte de DNA total extrado de qualquer tecido do organismo. Esse DNA fragmentado e cada fragmento seqenciado. Sobrepondo as seqncias dos diferentes fragmentos, processo que se denomina montagem, obtida a seqncia total do genoma. Finalmente, a seqncia analisada, anotao, para descobrir os genes nela codificados, procurando o inicio e o trmino da traduo (Figura 5 - captulo 18). Para realizar um projeto transcriptoma, o ponto de partida o mRNA extrado de um tecido particular numa condio fisiolgica determinada. Esse mRNA copiado numa molcula de DNA dupla fita que posteriormente ser seqenciada. Cada mRNA produzir uma seqncia diferente e no temos conhecimento a respeito da ordem em que os diferentes genes esto distribudos no genoma. A seqncia de cada mRNA analisada separadamente, anotao, procurando o inicio e o trmino da traduo para conhecer a protena codificada (Figura 5 - captulo18). Para conhecer a possvel funo das protenas identificadas (para qualquer um dos casos), a seqncia de aminocidos comparada com a seqncia de protenas previamente descritas e disponveis em bancos de dados. Quando uma seqncia semelhante (homloga) seqncia de uma protena de funo conhecida, possvel assumir que a nova protena identificada possui uma funo tambm semelhante. Se a protena identificada no possui homologia com nenhuma protena conhecida at ento, no possvel ter evidencias da funo que ela desenvolve a partir unicamente da seqncia obtida. JOGO PARA COMPREENDER COMO DESENVOLVER UM PROJETO GENOMA E COMO

DECODIFICAR A INFORMAO PRODUZIDA. Cada grupo receber dois kits, um projeto genoma e um projeto transcriptoma. O objetivo descobrir as protenas codificadas nas seqncias correspondentes. Projeto genoma 1) Monte as seqncias para conhecer a seqncia completa. 2) Anote a seqncia identificando a seqncia de aminocidos da protena codificada. 3) Que protena voc identificou? Projeto transcriptoma 1) Anote a seqncia identificando a seqncia de aminocidos da protena codificada. 2) Que protena voc identificou?

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