PERMEABILITATEA MEMBRANEI BIOLOGIECE -membrana biologica prezinta o permeabilitate selectiva, insusire fundamentala de care depind schimburile ructalelor cat

si anumite manifestari vitale. -este influentata de metabolismul celular si conditiile mediului Procesul de traversare prin membr de subst se nm transport membranar, poate fi activ si pasiv -un aspect imp al permeabilitatii este asimetria, proprietatea ce lasa subst sa treaca intr-un singur sens PERMEABILITATEA SI FCT DE TRANSP A MEMBR ERITROCITARE -sunt supuse legilor diviziunii si osmozei, conditionate de gradientul electro-chimic al membranei -cand de-ao parte si alta a membr sunt concomitente diferite transp se face de la concentratie mare la concentratie mica -se poate studia comp hematiilor in solutie de clorura de sodiu in dif concentratii Materiale necesare: - grulute – 3%, stateri – 9%, solutie NaCl – 15%, pipete Pasteur Tehnica de lucru: 1) pregatim 3 eprubetedin care sol NaCLo izotera de concentratie 9% 2) sol NaCl hipotona de concentr 3% 3) sol. NaCl hipertona de con 1 -in fiecare eprubeta se pune o jumatate de picatura de sange recoltat prin punctie venoasa -citirea se face dupa 30 min -in eprubeta 1 eritrocitele sunt depuse la fundul eprubetei iar sol sepernatanta este incolora (transp prin membrane a avut loc in ambele sensuri -in eprubeta 2 lichidul supernatant se coloreaza in rosu dat faptului ca prin membr eritrocitara a patruns apa pt egalizarea concentratiei osmotice astfel incat eritrocitele au devenit globuloase geoj sau spart -in eprubeta 3 are loc zbarcirea eritrocitelor (se obs doar la microscop) prin iesirea apei in virtutea gradientului) DETERMINAREA HEMATOCRITULUI Principiu: prin cuantificare are loc spararea eritrocitelor de plasma evaluandu-se raportul conditetire dintre ele Hematocritul: cea mai precisa metoda de evaluare a anemiei sau poliglobulinei Mat. Necesare: hematocrit, centrifuga, autocoagulant (heparina), mat. Necesare pt recoltarea sangelui prin punctie venoasa -hematocritul este un tub gradat care se adauga la centriguga si permite dupa centrifugare citirea, inaltimea , coloratie de eritrocite si esxprima rocentul fata de coloana de sange -se pot confectiona tuburi de hemtocrit din tuburi de USH (tuburi de viteza sedimentara) Tehnica de lucru: - se umple componentele cu sange recoltat pe anticoagulant 2 tuburi si se centrifugheaza 30 min la 3000 rotatii/min; tubul este in pozitie orizontala sau se centrifugheaza pana valoarea eritrocitelor nu mai scade Calcul: dupa centrifugare se masoara inaltimea coloanei de eritrocite si inaltimea coloanei totale de sange -Daca tubul de hematii este gradat in mm, citire direct, iar daca tubul nu este fradat, citirea se face cu liniarul -coloana H reprez 100%, iar inaltimea coloanei de eritrocite. Hematocritul se noteaza Ht. Ht=h%=hx100/Ht Val. normale: barbati 45%, femei 42%, nou-nascuti 54% Rezultatul hematiilor determinate reprez hematocitele venoase. Val. hematocitului arterial si capilar sunt mai scazute Pt a det valoarea sangelui total se corecteaza cifra hematocritului venos, nesaturata pt a afla val hematocritului somatic care se calculeaza astfel: Hmato somatic=hematocrit venos x 0,86u 1)Variatii ale hematocritului a)hematocrit ridicat (policitemie) aparea in: poliglomie primara, policitem secundare, plasmorogii, deshidratari b) hematocrit normal apare in hemoragii acute, inainte de refacerea plasmatica c) hematocrit scazut (oligocetenie) apare in anemie si hidremie Cauze de eroare: citirea facuta dupa o centrifugare incompleta -in periada in care am umplut tuburile a patruns si aer

5 e de 1/20 si recoltat pana la 1 e de 1/10. Sa accelereze VSH -continua miscare a sangelui in vase -preenta proteinelor plasmatice (in jurul hematiilor acestea formeaza un invelis care influenteaza sarcina electr). Valori normale: barbati 4-6 mm/h. Dilutia sangelui recoltat pana la 0. -se agita continutul seringii. nefroze. D-dulutia 1/20. Daca pe 5mm2 se gasesc 160 leucocite. pipeta pt adilutia leucocitelor. iar apoi se aspira anticoagulant pana la diviziunea 2. albastru de metil 1%. Daca recoltarea se face pana la notatia 0. -capacitatea reala e pipetei e de 11 volume dar dilutia este de 1/10 si 1/20 datorita faptului ca un volum de diluant ramane in tubul capilar si nu dilueaza sangele. Astfel fibrinogenul si globulinele scad sarcina electroneg a hematiilro la albuminele cresc sarcina electr a hematiilor Tehnica de lucru: in cont de asepsie (perf igiena) se recolteaza sange prin punctie venoasa intr-o seringe de 2cm3. camera de numarat Burker-Turke. in infarctul miocardic) Valori scazute: in hepatita epidemica si in starile alergice Cauze de eroare: daca proba s-a facut dupa ce pacientul a mancat -daca s-a utilizat alt anticoagulant (oxalat) -pipeta nu a fost perfect verticala -determinarea se face imediat dupa recoltare NUMARATOAREA LEUCOCITELOR Principiu: sangele se dilueaza int-o pipeta speciala cu un lichid de dilutie care lezeaza eritrocitele si pastreaza doar elementul necesar Materiale necesare: material pt punctia venoasa.6cm3.pneumonii. iar leucocitele formeaza deasupra lor o pelicula subtire alb-cenusie -mentinerea hematiilor in stare de suspensie e data de: incarcarea electr a hematiilor (sunt incarcat electr negativ) ceea ce face ca scaderea sarcinilor elect. apa distilata 100ml. apoi cea superiara se fixeaza in partea de sus a stativului cu un ac pt contrapresiune Citirea se face la 1h. femei 6-12 mm/h. Se numara campuri de cate 1mm2 si se face media pe 1mm3. copii si sugari 0. dilutia fiind 1/1064x10x10=6400 leucocite/mm3 Valori normale: nou nascut 12000-20000. Tehnica de lucru: -recoltarea si umplerea camerei se face identic ca si la eritrocite. microscop -pipeta pt numaratoarea leucocitelor este formata din un tub capilar cu 10 gradatii cu notatiile 0. ce constituie o paerla de sticla de culoara alba. cateva picaturi. adult 4000-8000 Valorile crescute reprez leucocitoze iar cele scazute indica lucopozie .septicemii. prelungit cu o bula de dilutie. Deasupra lutei de dulutie este notata cifra 11. aspiram 1. 2h si la 24h. apoi se expulseaza intr-o eprubeta de hemoliza -din eprubeta sangele se aspira in pipeta Westergreen pana la diviziunea 0 -in timp ce orificiul superior al pipetei este fixat in indexul extern inf se groasa pe rotirea de cauciuc. I-inaltimea camerei 1/10 -> 32x20x10=6400 leucocite/mm3 Daca recoltarea se face pana la notatia 1.-sangele nu e facut perfect incoagulabil.5 si 1. dar trebuie citit volumul eritrocitar global Variatii fiziologice: -VSH este mai mare la femei fata de barbati -este mai accelerat in periaoda menstruala a graviditatii (mai ales in ult luni de sarcina) Variatii patologice – VSH creste in boli infectioase sau inflamatorii (TBC. aparitia hemolizei VITEZA DE SEDIMENTARE A HEMATIILOR (VSH) Sangele-circula elem fig care se gasesc in stare de suspensie -in sangele scos facut incoagulabil si lasat in repaus in un tub de sticla in virtutea granutatiei se prod separarea plasmei de elem figurate -eritrocitele se depun cel mai repede. pe 1 mm2 sunt 32 de leucocite. sugar 8000-12000. Reactivul de dilutie pt leucocita (solutie Turke) – acid acetil 1 ml.5-2 mm/h Valoarea de la 2g este aprox dublu fata de valoarea de la 1h La 24h este intre 80-120mm.5 nr de leucocite /mm3 este: N=32xDxI. Au densitatea cea mai mare.

5mm si suprafata de 1/25mm2 si patrate mici cu latura de 1/20mm3 deci supraf egala cu 1/400mm2. camera Birker-Tyrke. sulelianat 0. -se cunosc mai multe camere de numara:Thoma.1plus/minus2 milioane/mm3.6 mil/mm3 Valori crescute: se constata la altitudine. etc. b)timpul plachetar – incepe dupa cel vascular si se real prin aderarea si agregarea trombocitelor la locul leziunii realizand formarea troului alb-teguroar HEMOSTAZA SECUNDARA (coagularea) . -capacitatea totala a pipetei este de 101 volume dar diluata este de 1/100 si 1/200 datorita faptului ca un volum de diluat ramane in tubul capilar si nu dilueaza sangele Camera de numara: este o lama groasa de sticla in mijl caruia se gasest gravate una sau 2 retele de patrate cu dimensiunile cunoscute a) patrate mari cu latura de 1. D-corectia pt dilutie -dacadilutia este de 1/200. camera de numarat. poliglobuelii primitive sau secundare. tisular.5 si 1. intre 100-300 de mii in diferite tipuri de leucemie -alteori se intalneste o leucogemie ca in casexie. 5-corectia pt supraf de 1mm. fiind notate oliziunile 0. NUMARATOAREA ERITROCITELOR Principiu: se nmara direct la microscop.Leucocitozele fiziologice se constata la cateva minute dupa un efort fizic. Mat necesar: lichidul de dilutie.5g. e emotie sau la copii dupa plans. alcool eter si inca ceva Lichidul de dilutie – lichidul Hayem. Deosebirea intre ele este data de nr de ptrate si felul de asezare al acestora Calcul: nr hematiilor/mm3-Nx5x1xD. clorura de sodiu 1gr. ace. barbati 4. Deasupra liniei de dilutie este notatia 101. dupa activ fizite sustinute. pana la 60 demii/mm3 in reactii leucemoide. nr de leucocite ajungand la 10000-14000 Valori patologice: intalnim leucocitoza la valori pana la 20000-30000 mm3 in infectii acute. iar spatiul dintre ele este divizat in 10 segmente egale.9 plus minus 0. insomitie. un pranz bigat. Cauze de eroare: . sulfat de sodiu 5g. microscop. Tubul cailar este gradat. dupa un zbor cu avionul sau o excursie la o altit de peste 1000m. eritrocitele din un volum cunoscut de sange duluat intr-i proportie cunoscuta.5 sau 1 si apoi completat cu lichidul de dilutie a sangelui de 1/200 sau respectiv 1/100. variatii se inregistreaza si in raport de starile de deshidratare sau hemoconcentrtie EXPLORAREA HEMOSTAZEI -hemostaza fiziologica repr ansamblul de fenomene la care participa factori celular. consta intr-o vasoconstrictie localizata la nivelul arteriolelor. femei 4. apa distilata 200ml. pipeta pt eritrocite. H=nr de hematii numarate pe 80 patratele. vasculari care asigura oprirea unei hemoragii care rezulta in urma lezarii peretului capilar HEMOSTAZA PRIMARA (tipul vasculo-plachetar) – consta din o succesiune de reactii care induc o oprire provizorie a sangerarii permitand realizarea corelatiilor necesare formarii cheagului definitiv a)timpul vascular – e primul care intra in actiune fiind determ de leziunea peretelui capilar. Valori scazute: anemii. inaltimea fiind de 1/10 se va inmulti cu 200 si respectiv 10. I-corectia pt inaltimea camerei. in febra tifoida. -daca sangele e recoltat in tubul capilar pana la diviziunile 0.7 mil/mm3. Diltia sangelui e ne cesara pt a putea numara eritrocitele care sunt foarte numeroase si pt ca sangele sa nu se coaguleze. Partea de sus a pipetei se adapteaza la un tub de cauciuc care permite o aspiratie uniforma. Intre suprafata relelui de patrate si lamela care se fixeaza pe aceasta se gaseste un spatiu de 1/10mm. se paote folosi ca lichid de dilutie si serul fiziologic. dupa tratamente cu raze Roentgen. camera Burker. Pipeta: pt dilutia eritrocitelor (pipeta Potain) – prezinta un tub capilar si o lama de dilutie cu o perla mabila de culoare rosie.3 plus minus 0.diluarea sangelui prin comprimarea degetului -pipetarea si diluarea incorecta a sangeli -patrunderea de nush ce de aer in pipeta Potain -omogenizare insuficienta -examinarea unui nr mic de patrate -erorile admise intre 2 numaratori facutedin acelasi sange sunt de 100-200 de mii hematii/mm3 Valori normale: nou-nascuti 5.

-realizata prin – poate fi definiteria prin modificare starii fizice a sangelui care trece din stare lichida in gel Teste de explorare a hemostazei primare – testul gragilitatii capilare si timpul de sangerare Teste de explor a hemo secundare – timpul de coagular global (TC) si Totaiat Testul fragilitatii capilare – principiu – aceasta se apreciaza in condtiile cresterii temporare a presiunii intercapilare -material necesar – tensometrul -interpretare. 3039 test pozitiv (trei de plus) mai mult de 40 test intens pozitiv (4de plus) . notat cu plus.normal – mai putin de 10 pete rosii (test neg) Patologic – mai mult de 10 pete (test slab. intre 20-29 moderat pozitiv (doi de plus).

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful