Tinciones Tejido Conectivo Tricrómica de Gomori

Se trata de una solución acética estabilizada que contiene Chromotrope 2R, Azul de Anilina y Acido Fosfotúngstico. Listo para usar. No requiere dilución. Colorante Histológico. Tiñe citoplasma y fibras musculares de rojo, mientras que el colágeno toma un color azulado.

Tricrómica de Masson
Soluciones colorantes destinadas a la tinción según técnica de Masson y sus modificaciones (Lillie). Los colorantes se presentan listos para usar. No requieren diluciones. Para su empleo pueden combinarse de acuerdo a las necesidades del usuario para lograr la tinción deseada. A diferencia de otros productos comerciales que poseen sólo 2 colorantes, Biopur dispone de los 4 colorantes desarrollados para la técnica. La ventaja principal de poder realizar estas combinaciones radica en la posibilidad de teñir con colores diferentes de acuerdo a los tipos de tejidos en estudio. Se dispone de soluciones de: Fucsina Acida - Punzó de Xilidina Fucsina Acida - Escarlata de Biebrich Azul de Anilina Fast Green FCF

Verde de Metilo - Pironina
Se trata de una solución de Verde de Metilo asociada con Pironina G según Tarf-Kurnick. Colorante Histológico. Empleado para la investigación histológica del ácido nucleico contenido en los tejidos, así como para demostrar la presencia de células de la serie linfática y células plasmáticas. También es útil en la identificación de células plasmáticas y RNA en secciones de tejidos y preparaciones citológicas.

Carbohidratos PAS
Se trata de un kit compuesto por soluciones de: Acido Periódico al 1% (Conservar en Refrigerador 2-10°C) Reactivo de Schiff Biopur (Conservar en Refrigerador 2-10°C) Para la demostración histoquímica de componentes celulares que contienen Glicoles, tales como Carbohidratos, Glicoproteínas, etc. Permite la observación de Membranas Basales y algunas Mucinas

Mucicarmín
Se trata de un kit que contiene soluciones de: Mucicarmín Concentrada Biopur Acética de Tartrazina Biopur Colorante Histológico. Usado en la identificación de sitios de tumores primarios, ayudando a la distinción de células escamosas indiferenciadas mucina-negativas de los adenocarcinomas mucina-positivos. La cápsula de los criptococos (hongos) se tiñe de rosa oscuro. La tartrazina tiñe el citoplasma de amarillo.

Rojo Congo
Se trata de un kit que contiene soluciones de: Rojo Congo (Alcohólica Clorurada) (Stock) Alcohólica al 80%, clorurada (Stock) Hidróxido de Sodio 0.25 M Colorante Histológico (Bennhold-Puchtler). Destinado a la determinación de proteína amiloide en secciones de tejidos con el empleo de microscopios de luz común o polarizada.

Bacterias Gram
Se trata de un kit para la coloración de bacterias con la tinción según Gram Se dispone de soluciones de: Violeta Cristal Solución Concentrada de Iodo Decolorante Safranina La tinción de Gram fue desarrollada en el año 1884 por Christian Gram. La tinción hoy en día es aplicada para la clasificación como paso inicial en la identificación de las bacterias. También, como consecuencia de la tinción, las bacterias muestran su forma, tamaño, etc., lo que ayuda significativamente al diagnóstico.

Ziehl
Se trata de un kit compuesto por colorantes y decolorante. Se dispone de soluciones de: Fucsina Básica Decolorante Azul de Metileno Método tradicional para la detección del bacilo tuberculoso. Para empleo con esputo, concentrado o por extensión directa, líquido cefalorraquídeo u otros fluidos corporales, incluyendo orina cateterizada y material homogeneizado de tejidos.

Lista para usar. Estabilizador es un buffer fosfatos pH 6. Tricrómica de Gomori) Clásicas May Grunwald . descartándose los accidentes de las tonalidades rojo fucsia. No precipita. No requiere filtrado para su empleo. Coloración Hematoxilina & Eosina Hematoxilina Si bien tanto Hematoxilina Biopur como Hematoxilina Activada Biopur pueden ser usadas para la técnica de coloración Hematoxilina-Eosina. Coloración de Papanicolaou Se trata de una técnica citológica compuesta por 3 soluciones: Hematoxilina Biopur OG Biopur EA Biopur Hematoxilina Biopur Colorante nuclear. No requiere filtrado para su empleo. Tinción panóptica diferencial en un solo paso. que dificultan la tinción de los leucocitos. Posee ácido acético en su fórmula. Hematoxilina "Activada" Biopur está basada en la fórmula de Gill #2 conteniendo 4g/L de Hematoxilina. sin necesidad de aditivo alguno. Tinción diferencial rápida (15 segundos) Punción aspirativa Tejidos Biopsias por congelación Muestras hematológicas Recuento leucocitario diferencial Shorr En contraste con la tinción de Papanicolaou. que entorpecen la metacromasia. Rogamos referirse a la misma para información adicional. . Tricrómica de Masson. Wright Se trata de una solución May-Grünwald-Giemsa compuesta. sin necesidad de aditivo alguno. permitiendo su empleo inmediato. Hematoxilina Biopur está basada en la fórmula de Gill #1 conteniendo 2g/L de Hematoxilina. Lista para usar. Hematoxilina Férrica de Weigert Biopur encuentra aplicación específica en coloraciones especiales que requieren hematoxilina (Mucicarmín. Las características y recomendaciones para el uso de Hematoxilina Biopur fueron expuestas en la sección anterior. evitando de esta manera la perjudicial ebullición. Una Solución de Hematoxilina Alcohólica y una Solución de Cloruro Férrico.5 regulador del pH del agua a ser utilizada en tinciones hematológicas. no requiere el agregado de ácidos ni de mordientes. Posee ácido acético en su fórmula. evitando de esta manera la perjudicial ebullición. Tiñe selectivamente el citoplasma de células que tuvieron actividad metabólica poco antes de la recolección de la muestra. El ácido fosfotúngstico acidifica la solución y aumenta la unión del Orange G a zonas citoplasmáticas densas. Colorante ácido. Hematoxilina Biopur encuentra aplicación en técnicas citológicas fundamentalmente. EA Biopur Se trata de una solución alcohólica.Tinciones Nucleares Se trata de soluciones de Hematoxilina a diferentes concentraciones y con aplicaciones específicas. fotoestable que elimina los problemas causados por las tradicionales e inestables fórmulas numeradas EA-36/50/65/etc. Por esto. Estabilizador Biopur asegura la tinción salmón de los hematíes. Eosina Se trata de una solución de eosina. Se trata de una solución acuosa preparada por vía química en frío. Por esto. nucleolo y eritrocitos. Hematoxilina Férrica de Weigert Biopur se compone de 2 soluciones para la preparación de la misma. Utilizado como colorante de contraste de la hematoxilina en la tinción Hematoxilina-Eosina. Listo para usar. no requiere el agregado de ácidos ni de mordientes. recomendamos el uso de Hematoxilina Activada Biopur dada su doble concentración que permite lograr resultados en tiempos menores. Los colorantes según May-Grünwald y Giemsa son combinaciones de azul y azures de metileno asociados con eosina. Se trata de una solución acuosa preparada por vía química en frío. Tinción nuclear intensa y coloración citoplasmática homogénea. cilios. Tinción 15 Se trata de un kit de tinción diferencial rápida compuesto por 3 soluciones: Fijador Solución 1 (Xanténicos) Solución 2 (Tiazínicos) Coloración de extendidos. Hematoxilina Activada Biopur encuentra aplicación en técnicas histológicas fundamentalmente. y de las azuladas. No requiere filtración. Tiñe de rosa a rojo las células escamosas superficiales.Giemsa Se trata de productos que se complementan para la técnica de tinción según May-Grünwald y Giemsa. OG Biopur Se trata de una solución alcohólica de ácido fosfotúngstico y Orange G. Permite lograr la diferenciación neta de las células del epitelio vaginal. permitiendo su empleo inmediato. la tinción de Shorr se usa solamente en citodiagnóstico hormonal en el cual es superior. No precipita.

La mayoría de los tejidos. Tienen apetencia por sustancias ácidas del tejido como el ADN o ciertos componentes de la matriz extracelular como los glucosaminoglucanos. Así. Otra tinción combinada es el tricrómio de Mallory que tiñe el colágeno de verde. Según la naturaleza química del cromóforo hay varios tipos de colorantes: nitrosos. el azul de toluidina se vulve púrpura cuando se une a ciertos gránulos de los mastocitos. Cuando el colorante unido al tejido tiene el mismo color que en solución se denomina ortocromasia. Por ejemplo. Por ejemplo. azul de toluidina. el azul de metileno o la hematoxilina Ácidos: son sales con el anión coloreado y la base incolora. Esto se debe a que las propiedades de absorción de la luz del colorante cambian al unirse a componentes celulares. especialmente en los adipocitos. sobre todo los de los animales. derivados de iminas quinónicas. Los colorantes son los elementos principales de las tinciones generales. el eosinato de azul de metileno. ambas con capacidad para aportar color. son incoloros y por ello necesitamos teñirlos para observar sus características morfológicas. derivados de diferrilmetano y triferrilmetano. Se utilizan normalmente para teñir a las células y componentes tisulares que van a ser observados con el microscopio óptico y por ello se realizan habitualmente sobre secciones de tejido. la tinción denominada azán contiene azocarmín y anilina-naranja-ácido acético que tiñe los núcleos de rojo y sobre todo destaca el conectivo intensamente teñido de azul. ponen de manifiesto el núcleo y el ARN. Son moléculas que poseen tres componentes importantes: un esqueleto incoloro. Por ejemplo. así como ciertas matrices extracelulares ricas en componentes ácidos. mientras que la parte ácida es incolora. denominado cromóforo. Según la naturaleza química del radical auxocromo los colorantes se clasifican en: Básicos: son sales en las que la base aporta el color. Ejemplos de colorantes ácidos son la fucsina ácida. En algunas ocasiones necesitamos resaltar elementos tisulares de manera específica y para ello usamos colorantes que tienen apetencia por dichas estructuras. que normalmente es un anillo aromático de benceno. safranina. Al conjunto de estos tres elementos unidos en una molécula se denomina cromógeno. el colorante sudán se disuelve en los lípidos y por tanto teñirá a las gotas de lípidos. siendo las más utilizadas las secciones obtenidas a partir de inclusiones en parafina u obtenidas en el criostato. Tienen apetencia por sustancias básicas. naranja G o la eosina. las células musculares de rojo. verde rápido. Cuando un colorante se une al tejido y refleja un color diferente al que tiene en solución se dice que ha ocurrido un fenómeno de metacromasia. Por ejemplo. Indiferentes: realmente no se unen a elementos de los tejidos por afinidad química sino porque se disuelven en ellos. Ejemplos de colorantes básicos son la tionina. Por tanto un mismo colorante puede teñir tanto las partes básicas como las ácidas de los tejidos. Las tinciones generales están basadas en el uso de colorantes. Los colorantes son normalmente hidrosolubles y se caracterizan por unirse a ciertas moléculas presentes en los tejidos gracias a afinidades químicas. y otro que posibilita la unión a elementos del tejido denominado auxocromo. sustancias mediante las cuales se consigue colorear a los tejidos. derivados de la antroquinona. ozoicos. sobre todo el ARNr presente en los ribosomas por ser muy abundante. al cual se le unen dos tipos de radicales: uno que aporta el color. Neutros: poseen una porción ácida y otra básica. derivados de la acridina. sobre todo estructuras proteicas localizadas en el citoplasma celular y también el colágeno de la matriz extracelular. derviados del xanteno y derivados de las talocianinas. .

las que se suelen emplear en un laboratorio para el estudio general de los tejidos. Cuando se inventaron los primeros microscopios hubo que descubrir cómo teñir los tejidos para poder desentrañar sus características morfológicas. sino las más comunes. mientras que en aquellas zonas de la célula donde no estén estos metales provocaraán áreas luminosas en dicha pantalla. entre las que se pueden destacar aquellas que usan anticuerpos. inmunocitoquímicas. puesto que no aporta color a la muestra. el cual puede infiltrase en la resina calentada en un plancha y llegar hasta el tejido. hacerse una idea de qué zona del tejido vamos a cortar. Tinción de semifinos. Téngase en cuenta que en la microscopía electrónica lo importante no es añadir sustancias coloreadas sino moléculas que puedan interferir con el camino de los electrones emitidos por el microscopio y que atraviesan la muestra. Cuando se procesa material para microscopía electrónica es necesario. sin embargo. Por ello todas las imágenes originales de microscopía electrónica son en blanco y negro. con lo que dificulta aún más la orientación de la muestra. excepto aquellos que poseen algún tipo de pigmento como la sangre o la melanina de la epidermis. Muchas de estas sustancias fueron usadas como colorantes en la histología de los animales y de las plantas desde mediados del siglo XIX hasta la actualidad. Si partimos de cortes de criostato esto no se lleva a cabo. las cuales facilitan la delimitación celular y la discriminación entre diferentes tejidos. Además.Tinción general. por ese motivo lo incluimos en este apartado. gracias a la fluorescencia de la proteína verde fluorescente (GFP).5 a 1 µm de grosor con el ultramicrotomo. hibridaciones "in situ". para orientarnos en la muestra y seleccionar la zona a partir de la cual haremos las secciones ultrafinas. si partimos de cortes de parafina. Antes de proceder a la tinción. Los tejidos animales son en su gran mayoría incoloros. Los semifinos suelen tener áreas más más grandes que las que posteriormente vamos a usar para la obtención de las secciones ultrafinas. las que usan sondas de ADN o ARN. Por ello es frecuente hacer secciones de 0. Los metales pesados unidos al tejido impedirán que pasen los electrones y por tanto se verá una zona negra en la pantalla fosforescente. Aunque las secciones para microscopía electrónica se pueden observar directamente con el microscopio electrónico se suelen tratar previamente con metales pesados en un proceso denominado contraste. puesto que estos cortes son hidrosolubles. alcanzándose un enorme desarrollo y perfeccionamiento de nuevas técnicas y moléculas sintéticas que se usan según las necesidades del investigador. Téngase en cuenta que el área de una sección para observar con el microscopio electrónico es muy pequeña. Contraste de ultrafinos. a veces. En las plantas. existe una mayor variedad de pigmentos naturales que permiten su observación directa con el microscopio óptico. Se observó que algunos pigmentos como el carmín o la eosina. Los electrones que atraviesan la muestra inciden sobre una pantalla fosforescente que emitirá destellos de luz cuando reciban el impacto de un electrón y permite observar las características del tejido. se unían a determinados componentes de las células. tenemos que llevar a cabo unos tratamientos previos sobre las secciones como es el desaparafinado. a lo que también ayuda la presencia de las paredes celulares. . La expansión de la industria textil y su necesidad de colorear las telas provocó un rápido desarrollo de los tintes o pigmentos en el siglo XIX. el proceso de osmificación que ha de llevarse a cabo previamente a la inclusión acarrea el oscurecimiento del tejido. o más sofisticadas aún como las que mediante el diseño de animales transgénicos permiten identificar y observar a las células que expresan un determinado gen. Dividiremos el conjunto de técnicas histológicas en cuatro categorías. disueltos en agua. El contraste no es estrictamente una tinción. Con la llegada de la biología molecular se han puesto en marcha otras técnicas mucho más sofisticadas para observar elementos celulares. Una de las tinciones más comúnmente usada en histología es la hematoxilinaeosina sobre cortes de parafina. obteniendo así una imagen óptima de la ultraestructura celular. incluso en el organismos vivo. aunque se puedan colorear posteriormente con un ordenador. Como vemos se usa un colorante básico y otro ácido para teñir de diferente color a las estructuras ácidas y básicas de la célula. al menos no en estas páginas básicas. No vamos a describir con detalle las técnicas más complejas. pero sí es un proceso para poder observar los componentes ultraestructurales de la célula. El colorante usado para teñir secciones semifinas es normalmente el azul de toluidina.

. . se necesita que este posea un grado de dureza minimo. Son aquellas técnicas de tinción que implican la modificación química de algunas moléculas tisulares para posteriormente ponerlas de manifiesto con colorantes. e) Hibridación. b) Histoquímica. Estos anticuerpos añadidos a una sección de tejido reconocerán y se unirán específicamente a dicha molécula. tiene por objeto el observar secciones translucidas de sus estructuras inernas. como las selectinas. pero con menos definición pues se superponen unas a otras. Aquellas que usan sustancias coloreadas que se unen a componentes tisulares por afinidad química. cadenas de ADN o ARN con una secuencia de bases determinada que llevan una molécula unida para poder detectarlas. y proporcional a la finura de la rebanada que deseemos obtener: mas duro = mas fino. Los cortes demasiado gruesos permiten observar mas estructuras. Las lectinas son dominios de proteínas. Son técnicas histológicas muy potentes basadas en la alta especificidad de unión de los anticuerpos a los antígenos contra los que se produjeron.La obtención de rebanadas (cortes) de cuerpos sólidos. Siguiendo este principio se pueden sintetizar sondas marcadas. c) Lectinas. . TECNICA DE CORTE. pero con mas definición y finura. Con ello podemos observar qué células expresan un determinado gen. es necesario endurecerlos mediante las siguientes estrategias: 1ª. sea capaz de desarrollar una respuesta inmune. que son capaces de reconocer glúcidos que forman parte de polisacáridos. Estos antígenos pueden ser cualquier molécula tisular que. normalmente en forma de ARNm.Como la mayoría de los tejidos corporales son blandos. La secuencia de bases de la sonda es complementaria a otra que está presente en la célula.Fijación en glutaraldehido: Ideal para cortes gruesos a mano alzada. Los cortes finos pèrmiten ver menos estructura.Para obtener cortes del cuerpo solido. purificada en inyectada en un animal. hibriden. Tienen una gran especificidad y se usan para determinar el tipo de glúcido que aparece en las glucoproteínas de la membrana plasmática o de la matriz extracelular de los diferentes tejidos. mediante . En este apartado incluiremos también a los métodos de tinción basados en la capacidad catalítica de algunas enzimas presentes en los tejidos que queremos estudiar. Esto hace que dos cadenas complementarias de ácidos nucleicos se unan entre sí de forma muy específica. y de la guanina con al citosina).a) Tinciones generales. d) Inmunocitoquímica. o con el uracilo. Son técnicas basadas en la unión complementaria de las bases de ácidos nucleicos (adenina con la timina. es decir.

que pueden ir desde un grosor de unos cuantos nanometros hasta centenares de micras. Ideal para hacer preparaciones rápidas.(100-200 micras) 6ª.(5-20 micras). etc. Pulmon entero.(0. Rutina de laboratorio.5. podemos decir que cuanto más delgada queramos hacer una sección de tejido más endurecido ha de estar dicho tejido. Los cortes se realizan en un aparato llamado microtomo de parafina (imagen derecha). Se corta en el ultramicrotomo. en azul. en amarillo. se coloca en un brazo que se desliza verticalmente sobre una cuchilla. . etc Ideal para microscopía electerónica (20-40 nm) y corte de objetos extremadamente duros: hueso y diente. p. permiten su observación en secciones de cientos de micras. Cerebro entero. Por tanto tenemos que hacer secciones de los tejidos que queremos estudiar. aunque sí fijado o duro. 2ª. las paredes celulares hacen a los vegetales tejidos duros).5. Como hemos mencionado en los capítulos anteriores. Con estos aparatos sólo se pueden observar grosores muy pequeños de tejido por problemas de difusión y penetración de la luz en el caso de los microscopios ópticos y de penetración de los electrones en el caso del microscopio electrónico de transmisión. para lo que usamos el microscopio electrónico de barrido).Inclusión en Parafina: Ideal para trabajo de cortes en serie y de alta estabilidad.Congelación en criostato: -15 a -30 ºC. Ideal para cortes finos en histoquímica.el microtomo de mano y navaja barbera (0. para observar con el microscopio óptico. recubierta por un antirroll (antienrrollamiento) en azul mas claro. La dureza de los tejidos depende de sus características (por ejemplo. el medio de inclusión en el que se encuentre el tejido o si se ha endurecido por congelación o por inclusión. peroperatorias en antequirógfano.(5-20 micras de grosor) 4ª. Los microtomos más usados son: Microtomo para parafina: Se utiliza principalmente para material incluido en parafina y se obtienen secciones de 5 a 20 µm de grosor.e. Algunos tejidos como los vegetales. Microtomo de congelación: Con él se consiguen secciones de 30 a unas 100 µm de material congelado para su observación con el microscopio óptico.1 mm de grosor). Los aparatos mecánicos para hacer secciones de un grosor de micrómetros se denominan microtomos y existen diferentes tipos según el grosor que queramos conseguir en nuestras secciones.e.Inclusión en celoidina: Ideal para grandes piezas: p.(50-100 micras de grosor) 3ª.Inclusión en resinas epoxi: araldit. Vibratomo: Corta material no incluido. vestopal.. de la fijación que hayamos realizado y sobre todo del material en que hayamos incluido dicho tejido. para observar con el microscopio óptico. por sus características celulares. o mediante vibratomo.3 mm de grosor). 5ª. Las caterísticas tisulares y celulares microscópicas internas se observan con microscopios ópticos o electrónicos de transmisión (excepto si queremos ver superficies. en secciones de 30 a centenares de µm de grosor.mediante cuchillas de vidrio odiamante. Una manera más directa de endurecer el tejido es mediante congelación. La la pieza.Congelación en microtomo: -2 a -5 ºC.

Los aparatos de corte más usados tradicionalmente para estudiar las características generales de los tejidos y de las células son el microtomo para material incluido en parafina para observaciones con el microscopio óptico y el ultramicrotomo para observaciones con el microscopio electrónico de transmisión. Ultramicrotomo: Con él se corta material incluido en resinas y se obtienen secciones del orden de nanometros de grosor.Criostato: Consigue secciones a partir de material congelado y se obtienen grosores de 10 a 40 µm. para observar con el microscopio electrónico de transmisión. incluso se puede cortar material no fijado. . Ultracriotomo: Su uso no está muy extendido pero se suele emplear cuando se necesitan secciones del orden de nanometro de material que no se debe incluir. El criostato se usa también frecuentemente en microscopía óptica por el ahorro de tiempo que supone ya que no necesita incluir el tejido. para observar con el microscopio óptico. para observar con el microscopio electrónico de transmisión.