You are on page 1of 16

Inmunologia en las infecciones virales La respuesta inmune a cualquier agente infeccioso es una respuesta global integrada por 3 elementos

que actúan al unisono ¿Cuales son estas respuestas? 1. Respuesta inmune humoral comandada por linfocitos B y mediada por anticuerpos 2. Respuesta inmune celular comandada por linfocitos T y mediada por células 3. Factores que modifican la respuesta inmune y que son factores inespecíficos Tipos de inmunidad y Inmunidad activa y pasiva Inmunidad Activa es aquella en que el organismo actúa, es creada por el organismo, es elaborada por el organismo Natural - Artificial Inmunidad pasiva, el organismo recibe la inmunidad, alguien mas la hizo Natural - artificial *Inmunidad activa natural: El hombre la adquiere cuando sufre la infección naturalmente *Inmunidad activa artificial: Es cuando el individuo recibe un agente inmunizante, vacunas, aunque es la vacuna de Edward Jenner, virus de la vacuna o vaccinia *Inmunidad Pasiva natural: es cuando el individuo la recibe de la madre (inmunidad congénita) A través de la Ig G por la placenta y a través e la Ig A a través el calostro y la leche materna *Inmunidad Pasiva artificial: el individuo la recibe de dos fuentes: Homologa y Heterologa *Inmunidad pasiva artificial Homologa: Cuando recibe los anticuerpos producidos por individuos de la misma especie Dos tipos de anticuerpos muy conocidos Ig antirrabica humana y la Ig contra el antigeno de la Hepatitis B *Inmunidad Pasiva artificial Heterologa es la que se produce en animales, suero antirrábico hecho en equinos En heridas se Ig antirrabica humana y también la vacuna pero cuando no hay la antirrabica humana se da el suero de equinos Respuesta inmune humoral comandada por linfocitos B y mediada por anticuerpos

M y G En nuestros niños hay complicaciones como encefalitis. Vamos a ver ahora como se comporta la respuesta inmune en infecciones generalizadas y superficiales Respuesta inmune en infecciones superficiales y generalizadas Infecciones superficiales no son las infecciones de la piel son las de mucosa y sobre todo de la mucosa respiratoria Una de las puertas de entrada son las mucosas . si no se controla la infección conducto torácico Viremia y órganos centrales donde se multiplica tremendamente se produce una segunda viremia En el uno por ciento llega a medula ósea (astas anteriores) y produce paralisis flacida en el 1% de los casos. otitis media y neumonía y eso se debe a la falta de una buena nutrición ya el virus es el mismo y la cepa e es la misma La Alimentación es un factor inespecífico que altera la respuesta inmune. virus citocida = muerte celular En el 99 % restante puede ir a cualquier sitio sin producir mayores consecuencias. manos.Elementos que constituyen la respuestas 1) Linfocitos B se llama así por la bolsa de Fabricio y por Bone marrow Antigeno (ag) es proporcionado por la infección viral y la respuesta a ese ag son los anticuerpos (ac) Ig son proteinas por lo tanto. sin proteinas no hay Ig y no hay buena respuesta inmune Ag proporcionado por la infección viral (inmunidad natural) o por el agente inmunizante (inmunidad artificial) Virus de la polio es pequeño . El 1% es tan específico que identifica la enfermedad. placas de Peyer. 20 nm de diametro para que un buen inmunogeno sea un buen inmunogeno ese ag debe tener una determinada estructura Penetra mucosa digestiva. agua y alimentos contaminados con heces va a la red linfática que los lleva a ganglios linfáticos regionales. Las infecciones virales dan lugar a una respuesta inmune duradera que generalmente dura toda la vida Ac: son Ig que están constituidas por proteínas por eso la infección por sarampión en niños e EU y Canadá mientras en países en desarrollo la infección es diferente. Las Ig son la A.

progresiva.M y A 1) El virus se multiplica en la puertas de entrada y hace su recorrido.En las Infecciones generalizadas la respuesta inmune es intensa. bazo y medula ósea 3) Son infecciones por virus que no cambian su estructura antigénica en el curso el tiempo . primera viremía los lleva a los órganos centrales donde se multiplica tremendamente dando lugar a la produccion de una tremenda masa inmunogena. son virus monotipicos Si el virus entra por mucosa en ese lugar además de la Ig A en la sangre se produce Ig A extra secretoria que se produce a nivel de la mucosa. esto es hacia las dos semanas Hacia los ocho dias la IgG puede ser detectada y a partir de la segunda semana alcanza un titulo bueno y al mes o a los dos meses tiene un mejor titulo. luego se da la segunda viremía que lleva el virus a los órganos de choque 2) el virus entra en contacto temprano con las células del sistema inmune en los mismos sitios donde se multiplica que son hígado. moderada. . La IgA dura cinco anos en mucosa y y y Respuesta inmune a la primoinfección Respuesta inmune de tipo secundaria Respuesta inmediata. intensa y duradera Virus del sarampión. donde comienza a descender y puede durar algo mas de dos meses y se detectan hasta el mes IgG en el momento en que desciende la IgM es posible detectar la IgG. duradera y se produce con un despliegue de todas las Ig G. solo en virus que entran por mucosa se produce tan pronto como el virus entra y dura 5 anos Ig M. La infeccion repetida por el mismo virus da lugar a la respuesta inmune de tipo secundario que se produce La Ig A M y G tienen papel relevante pero solo los anticuerpos ligados a Ig G confieren protección ya que es la Ig de memoria El sarampión ingresa por mucosa respiratoria al ano ya sea por infección natural o por inmunización y la Ig se eleva y si a los seis anos se expone a la infección eleva nuevamente. los reactivos comerciales no la detectan antes de los cinco días llegando a un titulo moderado a las dos semanas.

Con cada enfrentamiento se produce un reconocimiento donde se produce una respuesta inmune no primaria sino secundaria. se producen las tres inmunoglobulinas. son generalmente producidas por virus respiratorios. virus que tienen variantes antigénicas. duradera e intensa y es solo Ig G La primaria es lenta progresiva y duradera y constituida por el despliegue de las tres Ig Infecciones superficiales. Existe por tanto una primoinfección ¿Cómo se produce la respuesta inmune en virus que tienen variantes antigénicas? TEORIA DEL PECADO ORIGINAL ANTIGENICO En virus que tienen variantes antigenicas como influenza. de los anticuerpos producidos pero simultáneamente se estimula la memoria inmunológica del virus con el cual el individuo entro en . la respuesta inmune secundaria es inmediata. En virus que están antigenicamente relacionados entre sí como el Dengue Aquellos virus con variantes antigenicas tienen dos características:  La respuesta inmune a las infecciones seriadas del mismo virus o con cepas antigenicamente relacionadas entre si. dan lugar a una respuesta inmune de tipo primario La misma figura se produce pero difícilmente los virus respiratorios llegan a sangre entonces no se multiplican en órganos centrales y la respuesta inmune es pobre y a lugar la producción de Ig A sérica y una Ig A local secretoria que sirve solo si la variante antigénica es la misma La IgM tiene una elevación pobre. es decir son virus no monotípicos. al mismo tiempo que se produce una amplificacion en la especificiad de los anticuerpos producidos. se ve influenciada por dos procesos que parecen operar por competencia Existe una amplificación en la especificidad contacto por primera vez Virus de influenza Con cada reinfeccion se produce una respuesta inmune e tipo primario Cada cepa esta antigenicamente relacionada.

hemoconcentración.Cada cepa que entra estimula la memoria inmunologica de la cepa con el que individuo entro en contacto pro primera vez por lo tanto escurece. Ya no se habla el Dengue hemorrágico sino de Dengue grave Extravasación. plaquetas por debajo de 100000 Mosquito Aedes aegypti Aedes albopictus Papel de los Anticuerpos El papel es de dos tipos: 1) neutralizar la capacidad infectiva viral 2) Dan lugar a la lisis celular provocada por el complemento Neutralizar la capacidad infectiva viral Anticuerpos ligados a igG El virus promueve la formación e anticuerpos para todas las estructuras antigenicas virales (proteinas). células endoteliales de vasos sanguíneos. La teoría del pecado original antigénico da dos problemas 1) interpretación e resultados 2) vacunación 1988 Dengue 1 por PRIMERA VEZ 1990 se introdujo el Dengue 2 la cepa americana 1993 Dengue 4 otra vez 2000 Dengue 3 genotipo 3 de Sri Lanka Y EL GENOTIPO ASIATICO DEL DENGUE 2 (Producción de anticuerpos no neutralizantes) DENGUE HEMORRAGICO NO HEMORAGIAS (Dengue Grave) Respuesta inmune inusual en la cual los ac no son neutralizantes . corazón. En el Dengue se depositan a nivel vascular . el complemento al fijarse en ac no neutralizantes hace que la pared vascular produzca la extravasación sanguínea y se deposita en células endoteliales de los vasos y se fija el complemento en esos inmunocomplejos que alteran los factores de coagulación y producen trombocitopenia. son ac no neutralizantes que circulan en todo el organismo depositándose en articulaciones. opaca la respuesta inmune de tipo primario. Solo aquellas contra la estructura externa viral . encéfalo. Se produce una respuesta inmune para un virus inexistente.

pH alto o bajo Fluorocarbon A mas de Ig complejos neutralizantes se producen los NO neutralizantes que se depositan en los glomerulos renales causando enfermedaes el complejo inmune que es caracteristica e las enfermedades cronicas Lisis celular mediada por complemento. En la superficie celular se van a exponer diferentes antigenos virales como consecuencia en la multiplicacion viral.Se producen inmunocomplejos e ag ac neutralizantes para evitar la acción infectante el virus mediante dos mecanismos: 1) El virus queda obstaculizado por obstáculo esterico y no puede buscar los sitios complementarios específicos en la célula huésped 2) El anticuerpo adherido por ambos sitios a la superficie el virion puede distorsionar la configuración de la envoltura viral lo suficiente para alterar los procesos normales e adhesión o para permitir la entrada e nucleasas Estos inmunocomplejos no son irreversibles osea una vez formados pueden ser separados por Vibración . Se produce cuando el virus se multiplica en las células. estas son las proteinas extranas y atraen hacia ella la respuesta inmune que estimulan la respuesta inmune que se fijan con su los brazo en enlazandose a los antigenos virales La fraccion cristalizable se fija al complemento causando la lisis celular antes de que el virus se multiplique en la celula En esta forma una célula infectada puede ser destruida por citolisis inmune. antes de que la muerte celular se produzca como resultado de la multiplicación viral porque esto significa que miles de partículas virales invaden células vecinas Inmunidad mediada por celulas T Es demostrable por las reacciones de hipersensibilidad que se presentan posteriormente a la inyección de antígenos virales en un inividudo que ha sido previamente expuesto a ellos La inmunidad mediada por celulas T es abatida en gran parte por la timectomia neonatal y el tratamiento con suero antilinfocitico Virus ectromelia poxivirus La inmunidad humoral predomina en aquellos virus en las cuales el virus se disemina por la via hematica La imunidad celular va a predominar en aquellas infeccione virales en que los virus se multiplican de célula a célula herpes citomegalovirus .

hígado y bazo pero también es responsable de los cambios inflamatorios letales en el cerebro La transferencia adoptiva de células T inmunes induce lesiones en el plexo coroideo y en las meninges de los ratones infectados con virus de la CML y que fueron inmunosuprimidos con tratamientos de ciclofosfamidad Las respuestas humorales al virus de la CML pueden ser patogénicas .Mecanismo de la respuesta inmune celular 1) los linfocitos T sensibilizados en los tejidos infectados promueven la aparición de interterleukinas en los tejidos infectados por los virus que inducen la migración y la activación de los macrófagos los que con ayuda de los ac que son las opsoninas fagocitan y digieren los viriones 2) Las células T sensibilizadas que se encuentran con las células infectadas intactas se dirigen a las células infectadas y las matan y constituyen los linfocitos supresores falttataa 3) Interferon: el acido nucleico estimula la produccion de interferon sobre todo RNA y los de doble cadena reovirus. Se explico que los imunocomplejos pueden ser no neutralizantes vagando y depositándose en glomérulo o en articulaciones autoinmunes Ejemplo: dengue corazón ando lugar a enfermedades . suero antilinfocitico o anti-O o con algún otro tratamiento inmunosupresivo En el ratón normal. el interferon impie la transcripcion del rna mensajero o impidiendo la traduccion el rna mensajero en proteinas Inmunopatologia En ciertas infecciones virales la respuesta inmune en si es el factor principal como determinante de cambios patológicos y por tanto de enfermedad Ej: coriomeningitis linfocitica que es letal para ratones no tratados pero no es patogénico en ausencia de respuesta inmune Estos ratones pueden ser protegidos por radiación con rayos x timectomia neonatal. la respuesta inmune mediada por células para la infección con CML elimina el virus de órganos como pulmón. a lo largo de su vida se forman pequenas cantidades de anticuerpos que reaccionan con los virus en la sangre y forman complejos inmunes. Los ratones infectados en etapa neonatal muestran tolerancia inmunológica.

la fijacion del complemento puede conducir a la lisis celular. neumonía. defectos oculares. esta activavion del complemento puede producir la liberacion de mediadores de inflamacion y causar cambios patologicos La respuesta mediada por celulas T es responsable de la recuperacion del sarampion y del exantema debido a citolisis en las celulas infectadas con el virus en la piel.Cuando cierta clase de anticuerpos reaccionan con antigenos virales en la superficie de celulas infectadas. en pctes con tumores linforreticulares se produce una neumonia de celulas gigantes mortal pero no al exantema Vrs mata al niño con lesiones graves pulmonares en niños cutas madres les han transmitido inmunidad congénita. sordera. no esta protegido sino que se producen inmunocomplejos que se agolpan en el pulmon Tolerancia inmunológica No todas las infecciones virales congénitas crean tolerancia en el individuo expuesto a ellas durante su vida embrionaria Si el virus es citocida. Carcinoma hepatocelular) /300000000 de portadores cronicos en el mundo/ Infecciones cronicas productivas . hepatitis. lesiones cerebrales) hasta los 3 o anos Infección persistente asintomatica en portadores crónicos de virus de hepatitis B (30 anos. anos o de por vida) asociados o no a manifestaciones clínicas Rubeola (cardiopatias. los tejidos embrionarios son tan susceptibles que la muerte fetal es lo mas común Inmunodepresión por virus En individuos tuberculino positivos que tienen sarampion se hacen negativos temporalmente La inmunidad mediada por celulas es dificil de medir pero el rechazo retardado del njerto de piel ha sido descrito en ratones infectados con virus de la leucemia El mecanismo de la inmunodepresion probablemente se deba a la multiplicacion de los virus en los linfocitos y en los macrofagos Infecciones persistentes ¿Qué mecanismo determinan la mantención o la erradicación viral en el organismo? El virus solo debe causar daño tisular o enfermedad leve Pueden permanecer por periodos prolongados (meses.

picornaviridae lucen iguales Es un metodo de investigacion. Ag-Ac. varicela zoster) Herpes permanece latente se dirige por los nervios sensitivos hasta los ganglios correspondientes. las particulas virales de Echo. solo mientras el virus este libre puede cultivarse Fase convaleciente: 15 días en adelante Diagnostico de Laboratorio de las Infecciones Virales Metodos Directos de diagnostico virologico: Detectan la presencia de virus en muestras clinicas. al cuarto dia comienza a formarse la respuesta inmune. no esta en los laboratorios de virología En heces. traumatismos Factores inespecíficos *Fagocitosis *Temperatura corporal *Nutricion *Traumatismos *Edad *Interferon *Hormonas *Stresss *Infecciones concurrentes *Resitencia geneticas Diagnostico de Laboratorio de las Infecciones Virales Fase de la enfermedad en que se encuentra el paciente Fase aguda: tres a cuatro dias.Infecciones latentes asociadas a episodios agudos de enfermedad (herpes. La luz solar. la tensión emocional. suero en fase convaleciente mas heces de pacte se formaban inmunocomplejos que se visualizan en el microscopio electrónico Los inmunocomplejos se separaron y se encontró que la partícula viral era hepatitis A Se debe pensar que virus estoy buscando y aplicar un Ac especifico que da lugar al complejo AG-AC . epidemia de SARS en 2003 Inmunoelectromicroscopia Hepatitis A. polio. lo que puede detectarse de varias formas Visualización Detección del antígeno Aislamiento viral Detección del acido nucleico viral Visualización de los virus Microscopia electrónica No es un método de diagnostico rutinario. Cocsackie.

P .Deteccion del Ag viral IFD:La Inmunofluorescencia Directa es una técnica de inmunomarcación que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula Hace uso de un único anticuerpo que se encuentra químicamente unido a un fluoróforo. Pocillos de ELISA El Radioinmunoensayo (o abreviado RIA del inglés Radioimmunoassay) es tipo de inmunoensayo o método radioinmunométrico que se basa en la formación específica de los complejos Antígeno-Anticuerpo (Ag-Ac) lo que le dota de una gran especificidad unido a la sensibilidad de los métodos radiológicos. Esta reacción es visible sólo si el anticuerpo está marcado con una sustancia que absorbe o emite luz o produce coloración. Contador Ganma Inmunoperoxidasa (ELISA casero) Corresponde a un grupo de técnicas de inmunotinción que permiten demostrar una variedad de antígenos presentes en las células o tejidos utilizando anticuerpos marcados. En las técnicas de inmunoperoxidasa se utilizan como marcadores enzimas capaces de hacer cambiar de color un sustrato incoloro. El anticuerpo reconoce la molécula diana y se une a ella directamente Rabia: se busca el Ag rábico En pacientes vivos se hace un frotis de cornea Ac conjugados con fluoresceina se unen al Ag del frotis y se visualiza en microscopio de fluorescencia / /Color verde brillante manzana // ELISA: (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Ensayo por inmunoabsorción ligado a enzimas) Es una técnica de inmunoensayo en la cual un antígeno inmovilizado se detecta mediante un anticuerpo enlazado a una enzima capaz de generar un producto detectable como cambio de color o algún otro tipo La aparición de colorantes permite medir indirectamente mediante espectrofotometría el antígeno en la muestra. Estas técnicas se basan en la capacidad de los anticuerpos de unirse específicamente a los correspondientes antígenos. La técnica ha sido prácticamente reemplazada por el método ELISA el cual mide la unión AgAc mediante colorimetrías en lugar de radiometrías Sustancias Radioactivas Iodo 125.

Herpes.) Cavidad alantoidea (clara) Cavidad amniotica (Influenza. Estos marcadores pueden unirse (conjugarse) directamente al anticuerpo primario Aislamiento viral Cultivos celulares Animales de Laboratorio Huevos embrionados Huevos embrionados (embrion de pollo en desarrollo) Goopasture 1931 Membrana corioalantoidea (viruela. Efecto citopatogenico (ECP) 2. Sarampiom y Parotiditis) Los huevos se inoculan 5 a 15 días postfertilizacion Embrión de pollo Animales de Laboratorio Modelo mas antiguo para aislar y conservar virus Se produce enfermedad con lesiones tipicas y/o muerte Raton lactante 1930 Primates (hepatitis) Hamsters (virus oncogenicos) Conejos (vacunas) Crecimiento viral de manera indirecta 1. Hemadsorcion 3. Ej: Enterovirus. vaccinia. Lesiones pustulosas: membrana corioalantoidea 6. pero NO TODOS matan a la célula en que se multiplican. Herpes simple y Viruela . fluidos alantoideos 5. Signos y síntomas de enfermedad Efecto Citopatogenico (ECP) Daño que el virus causa a la célula. Interferencia 4. Hemaglutinación: liquido amniotico. La mayoría de los virus. aminoetilcarbazol (color rojo) y nitroazul de tetrazolio (color azul).Las enzimas más frecuentemente utilizadas son peroxidasa y fosfatasa alcalina y los sustratos diaminobenzidina (color pardo).

inhibe la multiplicación de otro que se agrega despuésµ Tubo problema (virus de la rubeola) Tubo control = = no crece el echovirus crece el echovirus Hemaglutinación (fenómeno viral) Los virus contienen en su envoltura externa proteínas capaces de unirse a los eritrocitos (receptores).Primer grado: 25% de afectación del sistema Segundo grado: 50% de afectación del sistema Tercer grado: 75% de afectación del sistema Cuarto grado: afecta todo el cultivo MATAN A LA CELULA : Rubeola. Paramixovirus. estos virus forman puentes entre los glóbulos rojos y forman una red 1941 Hirst. plasmatica Interferencia En algunos virus la replicación ocurre sin producción de ECP. Togavirus. incorporan a la membrana plasmatica de la celula invadida proteínas virales que tienen afinidad por los glóbulos rojos. hemaglutininas. Neuraminidasa destruye los receptores y se pierde la red Virus de la Influenza = Hemaglutinación Lesiones pustulosas En embrión de pollo viruela Membrana corioalantoidea vaccinia herpes Lesiones localizadas ´pustulasµ caracteristicas de cada virus . pero esta replicación es capaz de inhibir la multiplicación de otro virus que penetra posteriormente ´La multiplicación de un virus. citomegalovirus *Daño lento y tardío *Retrasan el crecimiento celular *Alteraciones en recién nacido Hemadsorcion (fenómeno celular) Adosamiento de los glóbulos rojos a la membrana citoplasmica Las células cultivadas infectadas con Ortomixovirus. glicoproteinas que se proyectan en la envoltura viral (peplomeros). Ej: Influenza Tubo control: bailan los glóbulos rojos Tubo problema: No se mueven porque están unidos a la M. Influenza.

después. Para ello. una transferencia a una membrana en la cual se efectúa la hibridación de la sonda. ya resuelto. En la hibridación in situ se usa una secuencia de nucleótidos. simplemente. Para ello.Signos y Sintomas de enfermedad Ratón lactante 1930 48 horas de nacido inoculación intracerebral Encefalitis Rabia Arbovirus 24 horas de nacido inoculación intraperitoneal fláccida Virus entéricos: Coxsackie A Parálisis Deteccion del acido nucleico Hibridación in situs Se basa en la complementariedad de bases de nucleótidos. C. es una técnica de biología molecular desarrollada en 1986 cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular. Southern es un método de biología molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de este ácido nucleico. Southern blot. conocida como PCR por sus siglas en inglés (Polymerase Chain Reaction). denominada sonda. hibridación Southern o. G y T) en un oligonucleótido de ADN. o molde La secuenciación de ADN es un conjunto de métodos y técnicas bioquímicas cuya finalidad es la determinación del orden de los nucleótidos (A. a una membrana cargada positivamente en la cual se efectúa la hibridación de una sonda molecular marcada radiactiva o químicamente La reacción en cadena de la polimerasa. se toma la mezcla de ARN y se somete a una electroforesis en gel a fin de separar los fragmentos en base a su tamaño. partiendo de un mínimo. se transfiere el contenido del gel. Northern blot es una técnica de detección de moléculas de ácido ribonucleico (ARN) de una secuencia dada dentro de una mezcla compleja. emplea la técnica de electroforesis en gel de agarosa con el fin de separar los fragmentos de ADN de acuerdo a su longitud y. en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original. . que es complementaria a la secuencia del ARN mensajero que queremos detectar y que está marcada con una molécula que luego pondremos de manifiesto. Tras esto.

se hace una autoradiografía del mismo. A+G. C. . Una vez solidificado. De ese modo se genera una serie de fragmentos marcados a partir del final marcado radiactivamente hasta el primer lugar de "corte" en cada molécula. Los fragmentos posteriormente se separan por tamaño mediante electroforesis en gel. el método requiere marcaje radiactivo en uno de los extremos y la purificación del fragmento de ADN que se desea secuenciar. Para visualizar los fragmentos generados en cada reacción. Se deja incubar de modo que el suero con anticuerpos se difunde por la placa de agar y reacciona con el antígeno embebido en la placa. C+T). pero una al lado de la otra. separando los productos de las cuatro reacciones en cuatro carreras distintas. El tratamiento químico genera rupturas en una pequeña proporción de uno o dos de los cuatro nucleótidos en cada una de las cuatro reacciones (G. con una pipeta Pasteur se hacen agujeros (pocillos) que contendrán la muestra de suero. los plásmidos. a partir de las cuales se puede inferir la secuencia Métodos Indirectos de Diagnostico Virologico Son aquellos que investigan la respuesta de anticuerpos específicos antivirales en el suero del paciente Inmunodifusion Fijacion del complemento Neutralizacion Inhibicion de la hemaglutinacion IFI ELISA RIA Western -Blot *Inmunodifusion El antígeno en suspensión se mezcla con agar-agar en estado líquido y luego éste se vierte sobre una placa (generalmente un portaobjetos de microscopía). la mitocondria y cloroplastos En resumen.La secuencia de ADN constituye la información genética heredable del núcleo celular. lo que proporciona una imagen de una serie de bandas oscuras correspondientes a los fragmentos marcados con el radioisótopo.

Al cabo de 24 horas se ha creado un precipitado fruto de la reacción entre antígeno y anticuerpo que se muestra en la placa como una línea blanca rodeando al pocillo (en ocasiones se pueden aplicar tintes para facilitar su visionado). de modo que a mayor diámetro. Se investiga su infectividad residual mediante la inoculación en cultivos celulares. huevos embrionados o animales de laboratorio El limite de titulación se toma como la mas alta dilución del suero que inhibe el desarrollo del ECP en cultivos celulares o lamultiplicacion del virus en el animal empleado *Inhibición de la Hemaglutinación Los anticuerpos pueden inhibir la hemaglutinación mediada por virus bloqueando en la superficie del virion. mayor concentración de anticuerpo *Fijación del Complemento El complemento es un reactante inespecífico del sistema de defensa humoral del organismo El Sistema necesita ser activado mediante la presencia de inmunocomplejos Se mezcla el suero del paciente con un Ag especifico. El suero del paciente se trata para eliminar los inhibidores no específicos de la HA . a los antígenos responsables de este fenómeno. formando se un boton (inhibicion de la hemolisis) en el fondo de la placa *Neutralización Ciertos anticuerpos interactúan con los viriones y neutralizan su infectividad El suero se inactiva por calentamiento a 56 grados para destruir los inhibidores inespecíficos de la infectividad viral Las diluciones del suero se mezclan con dosis constantes de virus. si hay Ac se formaran inmunocomplejos EL complemento añadido es activado por estos inmunocomplejos consumiendose Si después se añaden eritrocitos sensibilizados se producirá la lisis de los mismos siempre que haya suficiente complemento (osea que no se hayan formado inmunocomplejos) Si se ha consumido el complemento. El diámetro de este círculo es un reflejo de la concentración de anticuerpos que teníamos en la muestra de suero. se dejan reaccionar por 60 minutos. los eritrocitos permaneceran intactos.

hace uso de un único anticuerpo que se encuentra químicamente unido a un fluoróforo. La inmunofluorescencia secundaria. pero en contrapartida es mucho mas flexible que una técnica directa y debido a que es posible que un anticuerpo primario una a mas de anticuerpo secundario. Esta técnica es un poco mas compleja que la IFD. Mediante una electroforesis en gel se separan las proteínas atendiendo al criterio que se desee: peso molecular estructura. o directa. mientras que el secundario que es el que se encuentra marcado con el fluoróforo. El anticuerpo reconoce la molécula diana y se une a ella directamente. implica un efecto de amplificación que también aumenta la sensibilidad de la técnica *Western blot El Western blot. como un extracto tisular). es una técnica analítica usada para detectar proteínas específicas en una muestra determinada (una mezcla compleja de proteínas. también conocida por sus siglas IFD (inmunofluorescencia directa).Se hacen diluciones seriadas en una placa. o indirecta (también conocida por sus siglas IFI) hace uso de dos anticuerpos. hidrofobicidad. Luego son transferidas a una membrana adsorbente (típicamente de nitrocelulosa para poder buscar la proteína de interés con anticuerpos específicos contra ella. o inmunoblot. el anticuerpo primario es el que reconoce y se une a al molécula diana.[ . reconoce al primario y se une a él. requiere mas pasos y es más posible que sufra interferencias. A cada dilución se añade el virus a probar y también eritrocitos animales La placa se incuba hasta que sedimenten los eritrocitos El titulo de IH se toma como la mas alta dilución que inhibe la hemaglutinación *Inmunofluorescencia indirecta (IFI) La inmunofluorescencia primaria.