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Enfermedades respiratorias virales que afectan la produccin de huevo

Rubn Merino Guzmn Departamento de Medicina y Zootecnia de Aves FMVZ UNAM onirem@unam.mx

Introduccin Una amplia variedad de agentes pueden ocasionar la reduccin en el nmero de huevos producidos por las gallinas de postura. Algunos agentes infecciosos como los virus de bronquitis infecciosa y el de la enfermedad de Newcastle, ocasionan dao celular en la mucosa del oviducto, lo que tiene como consecuencia la produccin de albmina acuosa o anormalidades del cascarn. Otras enfermedades de origen viral, como la laringotraquetis infecciosa y la viruela hmeda, no daan directamente el oviducto de las gallinas, pero si causan disminucin de la produccin de huevo. I. ENFERMEDAD DE NEWCASTLE

Tambin conocida como pneumoencefalitis aviar, peste aviar y enfermedad de Ranikhet (Alexander y Senne, 2008), la enfermedad de Newcastle (EN) es una infeccin viral de distribucin mundial de las aves domsticas y silvestres que causa alta morbilidad y mortalidad, en muchos pases permanece como uno de los mayores problemas que afectan a la industria avcola y est incluida en la lista de enfermedades de la Organizacin Mundial de Sanidad Animal (OIE) (Alexander and Senne, 2008). El primer brote reconocido ocurri en 1926 en Java (parte de Indonesia). En Europa fue reportado en 1927 en la regin de Newcastle upon Tyne, Inglaterra, de donde viene el nombre oficial de la enfermedad. En 1942 se dio el primer reconocimiento de la enfermedad en Norteamrica y en Mxico fue en 1946 (Mrquez, 1978). Importancia Las prdidas econmicas estn relacionadas con la mortalidad, descenso de la produccin de huevo y los embargos y restricciones comerciales de los productos (carne, huevo) de las granjas infectadas. En Mxico, el brote del ao 2000 en la comarca Lagunera, Coahuila, caus el sacrificio de ms de 13.6 millones de aves de 93 granjas afectadas. El costo del brote se estim en 250 millones de pesos (Rivera, 2000). Las cepas virulentas de la EN pueden causar conjuntivitis en el humano, principalmente en personal del laboratorio y de cuadrillas de vacunacin. Distribucin El uso generalizado de las vacunas contra la EN en aves comerciales en todo el mundo dificulta establecer con precisin la distribucin geogrfica del virus virulento, el cual es endmico en Asia, Medio Oriente, frica, Amrica Central y del Sur y partes de Mxico. Los virus velognicos que circulan en Mxico pertenecen a dos linajes del genotipo V (tipo Chimalhuacn y tipo Torren), y afectan a granjas comerciales, aves de combate y otras especies como la paloma y codorniz (Perozo et al. 2008); el virus Chimalhuacn, aislado en 1973, dio origen al virus Torren que es ligeramente menos virulento pero sigue siendo velognico (Merino et al. 2009).

Etiologa La EN es ocasionada por un paramixovirus que contiene ARN, del gnero Avulavirus que pertenece a la familia Paramyxoviridae. Los paramixovirus aviares forman 9 serogrupos [Paramixovirus 1 al Paramixovirus 9 (APMV1 al APMV9)] de los cuales slo el APMV-1 se relaciona con la EN. Aunque hay slo un serotipo del virus, ste ha mostrado 14 grupos antignicos con el uso de 9 anticuerpos monoclonales (AcM) y 39 patrones con un panel de 26 AcM (Alexander et al. 1997). El virus de la EN (VEN) codifica al menos 6 protenas principales que comprenden la nucleoprotena (NP), fosfoprotena (P), matriz (M), fusin (F), hemaglutininaneuraminidasa (HN) y una polimerasa de ARN (L). Las protenas HN y F forman proyecciones en la envoltura viral. La protena HN est involucrada en la unin del virin a los receptores que contienen cido silico de las clulas blanco. La actividad de neuraminidasa de la HN regula la ruptura del cido silico de los receptores para el virus en la superficie celular y le permite al virus liberarse de la clula infectada. La protena funcional F induce la fusin de las membranas del virus y la clula blanco y tambin es responsable de la induccin de la fusin entre clulas hospederas (formacin de sincitios). Esto le permite a la unidad de transcripcin viral, la nucleocpside y las protenas P y L, entrar al citosol de la clula hospedera. Por lo tanto, las glicoprotenas HN y F son esenciales para la infectividad viral y son blancos ideales para prevenir la infeccin por inmunidad protectora (Al-Garib et al. 2003). La patogenicidad del VEN depende grandemente de la ruptura de la protena de fusin precursora F0 en las protenas subunitarias F1 y F2, esta ruptura est mediada por proteasas de la clula hospedadora. La secuencia de aminocidos en el sitio de ruptura del precursor F0 ha sido utilizada para clasificar patotipos del VEN. Los virus virulentos para los pollos tienen secuencia 112Arg/Lis-Arg-Glu/Lis-Arg/Lis-Arg116 en el extremo C-terminal de la protena F2 y fenilalanina en el residuo 117, el extremo N-terminal de la protena F1. Los virus de baja virulencia tienen la secuencia 112Gli/Glu-Lis/Arg-GluGli/Glu-Arg116 y leucina en el residuo 117 de la misma regin. As, para que el virus sea virulento aparentemente se requiere de un par doble de aminocidos bsicos en los residuos 112 y 113 y en los residuos 115 y 116, ms una fenilalanina en el residuo 117 (Al-Garib et al. 2003). Actualmente se emplean dos sistemas para clasificar al virus, basados en informacin gentica similar; por lo tanto, las discrepancias entre ambos son nominales y se requiere de un criterio objetivo y uniforme para la clasificacin. El sistema propuesto por Aldous et al. (2003) agrupa al VEN en seis linajes y 13 sublinajes, a los que posteriormente se agregaron otros 3 sublinajes. El segundo sistema clasifica al VEN en las clases I y II; la I se divide en nueve genotipos y la II en 10. Epizootiologia Las aves silvestres, especialmente las acuticas, pueden ser los reservorios para los virus lentognicos; los que podran volverse ms virulentos despus de establecerse en las aves domsticas. La infeccin ocurre por la inhalacin o la ingestin del virus que se propaga de un ave a otra durante la evolucin de la enfermedad. Si el virus patgeno infecta aves vacunadas la infeccin puede ser enmascarada por la inmunidad, pero las aves excretan el virus patgeno; as, tanto las aves vacunadas como las infectadas pueden transmitirlo (Miller et al. 2007). La incidencia de los brotes de EN velognica

viscerotropica est poco relacionada con la poca del ao y no est relacionada con la latitud, pero se presenta ms frecuentemente en reas con alta densidad avcola. Especies susceptibles Los APMV-1 infectan a ms de 250 especies de aves en 27 rdenes; las gallinceas, en particular los pollos, son altamente susceptibles a la enfermedad mientras que las aves silvestres, especialmente las acuticas como patos y gansos pueden infectarse y mostrar signos clnicos leves o permanecer asintomticos, los pavos son menos propensos a desarrollar sntomas severos Las palomas son susceptibles a la enfermedad y los virus lentognicos o mesognicos son endmicos en sus poblaciones (CFSPH, 2008). Tambin se producen infecciones en los humanos, y en los cerdos (Huijun, 2010). Transmisin: horizontal, por el contacto entre aves infectadas y susceptibles. Las infectadas excretan el virus a travs de la secrecin nasal, oral, conjuntival o cloacal y ste infecta por va respiratoria u oral. El virus se disemina durante la incubacin, etapa clnica y convaleciente de la infeccin. Las gallinceas lo excretan por 1-2 semanas. El virus tambin puede ser transferido por materiales (bandeja del huevo, comederos, bebederos, las jaulas de captura y de transporte, restos del sacrificio, plumas, cartones, vehculos, etc.), alimento, agua de drenaje, basura, camiones, trabajadores, aves silvestres, roedores, y con el aire contaminado de una caseta a la otra. La supervivencia del virus en aerosoles depende de la humedad y otros factores ambientales, as como de la cantidad de aves infectadas. No existe evidencia de que el virus pueda transmitirse de manera vertical; sin embargo, la fuente de virus en los pollitos recin nacidos son los cascarones de huevos contaminados con heces y huevos rotos o fracturados procedentes de gallinas infectadas. El virus persiste en casetas contaminadas y sin limpiar hasta 7 das en verano, 14 en primavera y 30 en el invierno; sobrevive en la basura contaminada de 10 a 14 das a 23-29C, y en el suelo durante 22 das a 20C y las moscas pueden transmitirlo. Es sensible al ter, pH cido, formalina y fenol; es inactivado a 56C durante 3 horas y a 60C durante 30 minutos (Alexander and Senne, 2008). Perodo de incubacin En aves infectadas con cepas velognicas, es de 2 a 6 das, y en otras especies hasta 25 das. Morbilidad y mortalidad: con cepas velognicas pueden alcanzar el 100% en aves susceptibles; las aves inmunizadas tienen infecciones ms leves, pero la mortalidad puede alcanzar 30% - 90%. El virus mesognico puede ocasionar morbilidad de 10 a 50% y mortalidad de 2-5%. Presentacin de brotes En aves mayores de 4 semanas pueden apreciarse dos formas de la EN a) Manifestacin respiratoria, comn en parvadas de aves bien protegidas, con mortalidad y signos nerviosos o digestivos escasos (1-2%), lo que dificulta el diagnstico. b) Signos nerviosos y digestivos, baja en la produccin de huevo y mortalidad >5%, en parvadas con diferentes grados de inmunidad (Camacho et al. 2006).

Patogenia La introduccin e implantacin primaria del virus en las vas respiratorias, es seguida por la replicacin en las clulas del epitelio mucoso del tracto respiratorio, desde donde alcanza la circulacin sangunea, para un segundo ciclo de replicacin en los rganos viscerales y una nueva liberacin del virus en el torrente sanguneo, desde donde alcanza el sistema nervioso central en algunos casos. Los signos clnicos de la enfermedad y la eliminacin del virus al medio, se asocian con la segunda liberacin del virus a la sangre y el curso clnico de la enfermedad est determinado por los mecanismos de defensa que se desarrollan en esta fase (Moreno, 1994). En la replicacin del virus de Newcastle, las partculas virales son producidas con un precursor de la protena de fusin F0 la cual debe ser escindida en las protenas F1 y F2 para que el virus se vuelva infeccioso. La protena F0 de los virus patgenos puede ubicarse y reaccionar con la proteasa del husped que se encuentra en la mayora de los tejidos, incluidos el hgado, bazo, encfalo, corazn, aparato reproductor y tejido linfoide. El resultado es una infeccin sistmica y la aparicin de los signos clnicos que en la mayora de los casos es fatal. La protena F0 de los virus de baja virulencia requiere de enzimas tipo tripsina, por lo que la replicacin se restringe al tracto respiratorio y digestivo (Collins et al. 1994). Signos clnicos La variante Beaudette, corresponde a una forma mesognica-neurotrpica que produce mortalidad en aves jvenes, as como signos respiratorios y disminucin de la produccin de huevo durante varias semanas en aves adultas, y puede ocasionar signos nerviosos, pero la mortalidad es generalmente baja; las cepas clsicas son Roakin, Haifa-Komarov, Krananueld, H y Mukteswar. La variante Beach (1942), denominada neumoencefalitis, es letal y aguda en todas las edades, pero sus manifestaciones clnicas son fundamentalmente respiratorias y nerviosas por lo que se denomina neurotrpica, la morbilidad llega al 100% y la mortalidad puede ser del 50% en aves adultas y 90% en aves jvenes. La produccin del huevo cae, a veces dramticamente, con diarrea apenas aparente. La variante viscerotrpica (Doyle, 1927) es letal y aguda en aves de todas las edades, caracterizada por signos respiratorios, digestivos y nerviosos; causa hemorragias en todos los rganos del aparato digestivo; la mortalidad alcanza el 100% en aves susceptibles, tradicionalmente, las cepas mexicanas Iztapalapa, Quertaro y Chimalhuacn han sido clasificadas en esta presentacin. Los signos comienzan con apata, letargia e inapetencia, y las plumas pueden estar erizadas; el enrojecimiento de la conjuntiva y el edema pueden ser un signo temprano. Despus hay dificultad para respirar, debilidad, postracin y diarrea acuosa, verde esmeralda o blanca, a menudo verdosa. Algunas aves desarrollan signos respiratorios, cianosis e inflamacin de los tejidos de la cabeza y el cuello. Al mismo tiempo pueden observarse temblores, espasmos clnicos, tortcolis, opisttonos, paresia o parlisis de las alas o patas y marcha en crculos, que preceden a la muerte. La produccin de huevo a menudo disminuye drsticamente y este puede aparecer deforme, de color anormal, spero, o con cascarn delgado y albmina acuosa. Tambin es comn la muerte sbita, con pocos o ningn signo. Las aves que sobreviven ms de dos semanas normalmente

viven, pero pueden tener dao neurolgico permanente o disminucin permanente de la produccin de huevo. Los signos son menos graves en las aves vacunadas. Lesiones macroscpicas Las lesiones macroscpicas pueden estar ausentes si el ave muere poco despus de la infeccin. Los virus de baja patogenicidad no ocasionan lesiones serias, aunque en algunos casos pueden ocasionar secrecin catarral nasal. Las lesiones ms graves normalmente se encuentran slo en aves infectadas con cepas velognicas. La cabeza o regin periorbital pueden estar hinchadas, y el tejido intersticial del cuello puede ser edematoso, en especial cerca de la entrada torcica. En el cuadro respiratorio se puede encontrar congestin o hemorragias en la parte caudal de la faringe y en la mucosa traqueal, y a veces se producen membranas diftricas en la orofaringe, trquea y el esfago. Puede haber petequias, equimosis y necrosis focal en el proventrculo, yeyuno, la parte posterior del duodeno y en el recto. Las placas de Peyer y tonsilas cecales pueden estar inflamadas y hemorrgicas, con lceras, edema o necrosis. Tambin puede haber focos necrticos en el esfago y la cloaca, as como hemorragias del timo, bolsa de Fabricio y en la grasa pericrdica. El bazo puede estar agrandado, friable y de color rojo oscuro o moteado; tambin puede haber necrosis pancretica y edema pulmonar. En aves de postura se observa degeneracin, edema y atrofia de los folculos del ovario acompaada de hemorragias, as como inflamacin del oviducto. Lesiones microscpicas En el sistema nervioso (cerebelo, mdula, cerebro medio, tallo cerebral y mdula espinal) se observa encefalomietitis no supurativa con degeneracin neuronal, focos de clulas de la gla e infiltracin linfocitaria perivascular, degeneracin de los axones y desmielinizacin (Ecco et al. 2011). En el sistema vascular hay congestin, edema y hemorragias en varios rganos. Degeneracin hidrpica, hialinizacin de capilares y arteriolas, trombosis hialina en vasos pequeos, hipertrofia y necrosis de las clulas endoteliales de los vasos (Caldern et al. 2005). Sistema linfoide se presenta deplecin linfoide. Hay lesiones necrticas en el bazo y timo, adems de vacuolizacin focal y destruccin de linfocitos en las reas corticales y en los centros germinales. En la bolsa de Fabricio se presenta degeneracin marcada e incluso la destruccin completa de los linfocitos de la regin medular de los folculos (Merino et al. 2009). En el tracto intestinal hay hemorragia y necrosis del tejido linfoide de la mucosa. Mientras que en el tracto respiratorio se aprecia prdida de cilios del epitelio; congestin, edema e infiltracin densa de linfocitos y macrfagos en la mucosa. Las lesiones pulmonares se caracterizan por congestin y edema del parabronquio y seguida de hemorragias y eritrofagocitosis. Tambin puede observarse edema, infiltracin celular e incremento del grosor y densidad de los sacos areos; as como hinchazn y vacuolizacin de las clulas endoteliales de los capilares, principalmente en los pulmones (Galindo et al. 2001). En el sistema reproductor hay atresia de los folculos ovricos, con infiltracin de clulas inflamatorias y la formacin de agregados linfocitarios, los cuales tambin se observan en el oviducto (tero), el cual puede presentar atrofia y necrosis glandular. Las lesiones

en el oviducto son ms severas en el tero que en el magnum o el istmo (Bwala et al. 2011). En otros rganos, hay reas focales pequeas de necrosis en el hgado acompaadas de hiperplasia de clulas fagocticas mononucleares en la infeccin subaguda, y a veces con hemorragias en la vescula biliar y el corazn. Se puede presentar infiltracin linfocitaria pancretica. Se ha reportado tambin la necrosis de los islotes hematopoyticos y la destruccin de vasos sanguneos de la medula sea (Galindo et al. 2001; Caldern et al. 2005). El virus velognico viscerotrpico puede ocasionar hemorragia y ulceracin cutnea, acompaada de congestin y petequias en la cresta y barbillas, as como lesiones conjuntivales hemorrgicas. Diagnstico Ninguno de los signos o lesiones en las aves infectadas es considerado patognomnico, pero sirven para el diagnostico presuntivo, sobre todo cuando se examinan varios cadveres. El nico mtodo definitivo es el aislamiento viral o la deteccin de sus protenas especficas por pruebas de biologa molecular. La histopatologa apoya el diagnstico cuando se encuentran lesiones como las descritas anteriormente, especialmente en el sistema nervioso central. Anteriormente, la OIE clasific las cepas en cuanto a su virulencia con base en el tiempo medio de mortalidad embrionaria: baja patogenicidad (lentognicas) si el embrin tardaba ms de 90 horas; mesognicas (moderada patogenicidad) si moran entre las 60 y 90 horas; y velognicas (alta patogenicidad) si la muerte se daba en menos de 60 horas (OIE, 2009). Las pruebas de patogenicidad son tiles para determinar la virulencia de las cepas virales. Se usan diferentes rutas de infeccin en estas pruebas: la va intracerebral en pollos de un da de edad para determinar el ndice de patogenicidad intracerebral (IPIC) y la va intravenosa en pollos de 6 semanas de edad para determinar el ndice de patogenicidad intravenosa (IPIV). De acuerdo con la OIE (2009), los aislamientos de VEN con valor IPIC mayor a 0.7 se consideran virulentos. La prueba de la transcriptasa reversa - reaccin en cadena de la polimerasa (RT-PCR), secuenciacin de genes, anlisis de enzimas de restriccin y otras tcnicas moleculares, tambin se utilizan para identificar en unas horas el APMV-1. Algunas de las pruebas moleculares tambin pueden determinar el patotipo del virus. La mayora de las cepas que son de alta virulencia para los pollos tienen una secuencia particular, 112R/KRQK/R-R116 (mltiples aminocidos bsicos) en el extremo C-terminal de la protena F2 y fenilalanina en el residuo 117 de la protena F1. Las pruebas de diagnstico rpido (inmunocaptura) han recibido poca atencin debido a la limitada informacin que aportan, particularmente en parvadas vacunadas, ya que en el caso de resultado positivo, no identifican el patotipo o la cepa detectada. La infeccin con un virus patgeno o de origen vacunal estimula el sistema inmune del ave, lo que produce anticuerpos humorales en la sangre. Estos pueden ser detectados en el suero por varios mtodos (inmunodifusin, precipitacin en gel agar, virus seroneutralizacin), pero rutinariamente el mtodo de la inhibicin de la hemaglutinacin es el ms prctico. Si la prueba se utiliza para detectar infeccin causada por un virus patgeno se recomienda tomar muestras pareadas con 2 semanas de intervalo. El

incremento de 4 veces el ttulo de la segunda muestra, comparado con el resultado del primer muestreo, indican la infeccin con el virus. Otras pruebas incluyen la neutralizacin viral, hemoaglutinacin y el ensayo de inmunoabsorcin ligado a enzimas (ELISA, por su sigla ingls). Los paquetes ELISA son comercializados por diversas compaas y el mtodo se presta a tcnicas semiautomatizadas, por lo que ha llegado a ser popular, especialmente como parte de la evaluacin seriada de poblaciones vacunadas. Diagnostico diferencial El diagnstico diferencial de la EN velognica debe incluir la influenza aviar altamente patgena, bronquitis infecciosa, laringotraquetis, coriza infecciosa, clera aviar, viruela aviar hmeda, psitacosis, micoplasmosis, toxicosis, aspergilosis y problemas de manejo tales como la privacin de agua o alimento, y la mala ventilacin. Prevencin y control No hay tratamiento para la EN. La bioseguridad e higiene deben practicarse estrictamente: el aislamiento sanitario, las casetas bien separadas, la cerca perimetral, la restriccin de visitantes, suministro adecuado de alimento y de agua, reduccin al mnimo de los movimientos dentro y fuera de la instalacin, y la desinfeccin de vehculos y equipos que entran a la granja. Las aves no deben estar en contacto con aves de traspatio o cualquier otra ave domstica (especialmente psitcidas) o silvestre. Los insectos y ratones tambin deben ser controlados. Los trabajadores deben evitar el contacto con aves fuera de la granja y deben baarse y usar ropa exclusiva para el trabajo. Tambin es aconsejable la crianza todo adentro - todo afuera, con desinfeccin de las casetas y equipo entre parvadas. Vacunacin La aplicacin de vacunas se considera hasta ahora el mejor medio de prevencin en zonas endmicas. El objetivo principal es el desarrollo de anticuerpos que proteja contra los efectos de la infeccin con virus virulento. Los tipos de vacuna y programas de vacunacin varan con la amenaza potencial, la virulencia del virus de desafo, el fin zootcnico de las aves y otros factores. Se han desarrollado vacunas de virus apatgeno, atenuado e inactivado, as como vacunas recombinantes. Limitaciones de la vacunacin Generalmente se requiere de la re-vacunacin para proteger a las aves de ciclo productivo largo, ya que la inmunidad que se genera dura 8 10 semanas. La frecuencia de la re-vacunacin depende principalmente del riesgo de exposicin y la virulencia de la cepa de campo. La administracin apropiada de la vacuna con alto ttulo de antgeno es esencial para lograr una buena respuesta inmune. En la prctica, la vacunacin de las aves contra la EN no siempre previene brotes peridicos de la enfermedad, cuando la cantidad de anticuerpos caer por debajo del nivel protector, el virus de campo puede rebasar la barrera de la vacunacin y ocasionar un brote. El efecto ms importante de la vacunacin es que puede ser enmascarador, ya que las aves vacunadas que son desafiadas con virus virulento pueden infectarse y excretar este, aunque en cantidades relativamente pequeas, mientras que permanecen aparentemente sanas, lo que permite la circulacin del virus virulento en la parvada.

Respuesta inmune y proteccin contra la enfermedad En la prueba de inhibicin de la hemoaglutinacin (IH), el ttulo de 16 de anticuerpos sricos protege al 80% de los animales contra la muerte ante un desafo severo; si el ttulo es 32 o superior se puede alcanzar el 100% de proteccin. Con ttulo IH menor a 16, la correlacin entre la proteccin y el ttulo es mucho menor y depende de factores como el tipo de vacuna, dosis, va de administracin, edad, etc. En las aves en produccin, se evita la baja en la postura de huevo y las alteraciones de la calidad del mismo con ttulo de IH de 128 o ms (Survashe and Desmukh, 1998). El VEN velognico se aisl de hisopos traqueales y cloacales durante 14 das con ttulos sricos de anticuerpos IH entre 8 y 128; sin embargo, la excrecin se reduce significativamente cuando los ttulos estn entre 256 y 4096. La relacin entre el ttulo de anticuerpos medidos por IH y la resistencia al desafo con virus virulento se ha reportado como sigue (Survashe and Desmukh, 1998): Rango de ttulos IH (Log2) Resultado del desafo 22 o menor 100% mortalidad 22 - 2 4 10% mortalidad 24 - 2 6 0% mortalidad 6 8 2 - 2 Cada seria de la produccin, sin muertes. 29 - 211 Sin cada en la produccin, sin muertes. Convaleciente puede alcanzar 212 II. LARINGOTRAQUEITIS INFECCIOSA La laringotraquetis infecciosa aviar (LTI) es una enfermedad viral de las vas respiratorias de los pollos que puede resultar en prdidas graves en la productividad debidas a mortalidad, menor produccin de huevo o ambas (Guy y Garcia, 2008). Es aguda, caracterizada por signos de depresin respiratoria, boqueo y expectoracin de moco sanguinolento. La enfermedad fue descrita por vez primera en 1925 y el nombre laringotraquetis infecciosa fue adoptado en 1931 (Guy y Garca, 2008). El primer reporte clnico y aislamiento viral en Mxico fue hecho en 1960, la epizootia devast a la avicultura comercial del Valle de Mxico y de otras zonas avcolas del pas. La enfermedad est considerada como enzotica y de bajo riesgo desde el punto de vista epidemiolgico, econmico, de salud pblica y de comercio nacional e internacional, por lo que es de notificacin mensual obligatoria a las autoridades competentes de sanidad animal del pas (SAGARPA, 2007). Importancia Las prdidas econmicas que produce en aves de postura son debido a la alta mortalidad (5-50%), reduccin de la produccin de huevos (10-60%), que luego de 3 a 4 semanas regresa a la normalidad; y sobre todo representa un gran impedimento para la exportacin de los productos avcolas (OIE, 2009). Alvarado (2010) estim las prdidas econmicas en una granja de gallina de postura afectada por LTI: la postura de huevo total fue 16% menor a la de otra granja no infectada; adems, la mortalidad se increment al 18%, el costo de produccin por kilo de huevo aument en 34% y la utilidad por la venta de la gallina de desecho se redujo

en 25% debido a la mortalidad y la prdida de peso de las gallinas sobrevivientes. Adems de las prdidas en la productividad, la LTI ocasiona gastos asociados con el control, como la vacunacin, restriccin del movimiento de vehculos y personal, desinfeccin, y la morbilidad inducida por la vacunacin. El brote de LTI en la pennsula de Delmarva en el Noreste de los EUA entre 1998 y 2000 cost un poco ms de 4 millones de dlares a la industria avcola regional (Ritter, 2000). Etiologa La enfermedad es causada por el Gallid herpesvirus 1 (GaHV-1) (Fuchs et al. 2007; Wang et al. 2007) nico miembro del gnero Iltovirus de la subfamilia Alfaherpesvirinae de la familia Herpesviridae. La partcula viral mide entre 200 y 350 nm, contiene ADN lineal de doble cadena en un ncleo dentro de una cpside icosahdrica rodeada por una capa de protena y una envoltura externa con finas proyecciones que representan espculas de glicoprotena viral integrada en su superficie, las cuales originan las respuesta inmune humoral y mediada por clulas, el desarrollo de esta ltima en la trquea es la ms importante para la proteccin de las aves. El VLTI presenta un solo serotipo y las cepas parecen ser antignicamente homogneas; sin embargo, las cepas de campo varan en su virulencia desde infecciones leves o subclnicas hasta cepas que originan gran morbilidad y mortalidad en los pollos expuestos. El virus es fcilmente destruido por los desinfectantes comunes, pero la eficacia de estos se afecta por la presencia de materia orgnica. El VLTI es sensible al cloroformo, ter, cresol 3%, fenol 5% y iodforos. Se inactiva rpidamente a 55 C durante 15 minutos o a 38 C por 48 horas.2 y en la composta en 5 das (Ruano et al. 2001). Epizootiologa Aunque los brotes de LTI pueden iniciar en cualquier poca del ao, muchos de ellos tienden a ocurrir durante los meses de otoo e invierno (Dufour-Zavala, 2008). Estos patrones epidemiolgicos exigen a los productores vacunar obligadamente a sus parvadas. La concentracin de granjas en una cierta zona geogrfica favorece la diseminacin del virus de la laringotraquetis infecciosa (VLTI), el cual tiende a persistir en aves recuperadas despus del perodo de enfermedad, y puede reactivarse a partir de stas aves para ocasionar nuevos brotes (Bagust, 1986; Hughes et al. 1987). En Mxico, la LTI tiene un comportamiento cclico errtico estacional, caracterizado por periodos de baja virulencia durante algunos aos, y otros periodos de gran actividad que provocan numerosos brotes con alta mortalidad y enormes prdidas econmicas. Los casos de LTI se presentan continuamente en varios estados con gran poblacin de gallinas de postura, especialmente en las granjas con edades mltiples. A fines del ao 2004, se observ una serie de brotes de LTI en parvadas de gallina de postura en el estado de Sonora. Dichos brotes fueron diseminndose paulatina e inadvertidamente a los estados de Sinaloa y Nayarit. El VLTI afect parvadas de gallina de postura y de pollo, en el estado de Nuevo Len. En 2005, se presentaron focos de la enfermedad en el valle de Mxico, Puebla y Veracruz. Durante 2006, la LTI se disemin en el Bajo y Jalisco. En la mayora de los brotes los primeros signos observados fueron catarro de lenta diseminacin y baja morbilidad, acompaado de cierta cantidad de aves con conjuntivitis (Mosqueda, 2007). En la regin de Crdoba, Veracruz, una zona donde la enfermedad estuvo ausente por

ms de 15 aos, durante 2006 se present un brote de LT de baja virulencia en gallinas reproductoras pesadas, a consecuencia del mismo, la postura baj 5%. En 2007 tambin se observ un brote en una granja de gallinas reproductoras pesadas, esta vez se present 5% de mortalidad, 10% de baja en la produccin de huevo frtil y la necesidad de eliminar al 30% de la parvada, debido a que las gallinas no recuperaron completamente su productividad (Ruz, 2008). A finales del 2009 y tres primeros meses del 2010, se reportaron desafos de campo del vLTI en tres granjas de pollo de engorda de distintas zonas del pas, los cuales fueron confirmados por aislamiento viral y pruebas moleculares. La presentacin clnica fue leve, moderada o severa; en la manifestacin leve se cuantificaron menos partculas virales que en la granja donde la manifestacin del VLTI fue ms severa. Los virus aislados pertenecen a los genotipos IV y V, estrechamente relacionados con cepas vacunales, y el genotipo VI que es diferente al las cepas vacunales (Martnez y Lechuga, 2011; Lechuga, 2011). Especies susceptibles El pollo y faisn son los hospederos naturales del VLTI y la manifestacin clnica es casi exclusiva de la gallina y el pollo domsticos de cualquier edad, aunque los signos ms caractersticos se observan en aves adultas (Crawshaw y Boycott, 1982). Transmisin. El virus entra al organismo por las vas respiratorias altas y la ocular, la va oral es factible si se expone el epitelio nasal luego de la ingestin. La transmisin es ms efectiva a partir de aves infectadas de manera aguda, que a travs del contacto con aves portadoras recuperadas clnicamente. Periodo de incubacin Vara de 6-12 das. Despus de la fase aguda de infeccin de 7 das, el virus queda alojado en ganglio del nervio trigmino en estado de latencia y despus puede ser reactivado espontneamente o bajo condiciones de estrs, como el encasetamiento o un periodo cercano a la postura. Ya reactivado, el virus puede causar enfermedad por medio de pases de ave a ave en poblaciones susceptibles, as como tambin incrementar su virulencia (Williams et al. 1992). Morbilidad y mortalidad Las forma epizotica grave de la enfermedad origina morbilidad que puede alcanzar 90 a 100% y mortalidad variable (5 a 70%) que promedia de 10 a 20%. Patogenia La infeccin por VLTI de las vas respiratorias superiores de pollos susceptibles es seguida por una intensa replicacin viral. El VLT permanece en el tejido traqueal y secreciones por 6 a 8 das post-infeccin, se puede encontrar en baja concentracin hasta por 10 das; no hay evidencia de una fase virmica de la infeccin (Guy y Garca, 2008). La diseminacin del VLT hacia los ganglios trigminos, principal sitio de latencia, ocurre entre los 4 y 7 das post-infeccin, all puede permanecer de por vida en aves portadoras, incluidas las aves de traspatio. El VLT latente en los ganglios trigminos puede reactivarse hasta 15 meses despus de la infeccin; el virus vacunal tambin tiene la capacidad de causar un cuadro clnico en aves susceptibles despus de un estado de latencia; el virus tambin se ha encontrado en estado de latencia en la

trquea y puede reactivarse por factores estresantes o alteraciones hormonales en el inicio de postura (Hugues et al. 1989). El proceso de latencia ocurre por la integracin del ADN genmico al ADN de la clula hospedadora o por el mantenimiento del ADN viral en forma circular en el ncleo de las clulas hospedadoras de modo extracromosmico (Brandao y Chacn, 2009). Signos clnicos La severidad de los signos clnicos depende de la virulencia de la cepa, estado inmunitario del ave y complicaciones con otros agentes. En los pollos se observa enfermedad respiratoria aguda. En la presentacin leve hay descarga nasal, conjuntivitis, lagrimeo, inflamacin de senos infraorbitarios, y reduccin en la produccin de huevo. Las forma severa se caracterizan por boqueo, expectoracin mucosanguinolenta, y disnea marcada. Lesiones macroscpicas Las lesiones se encuentran en la conjuntiva (blefaroconjuntivitis), laringe y trquea (hemorragias en la capa mucosa) y, algunas veces, en los pulmones y sacos areos. Por lo general, los pollos se recuperan en 10 a 14 das, y en extremo de 1 hasta 4 semanas. Lesiones microscpicas Los cambios microscpicos varan segn la etapa de la enfermedad. Al inicio, la mucosa de la trquea presenta infiltracin de clulas inflamatorias, prdida de cilios y de las clulas caliciformes. En casos de intensa destruccin y descamacin celular puede desarrollarse hemorragia, debida a la exposicin y ruptura de los capilares sanguneos. En las etapas iniciales de la infeccin (1 a 5 das) se encuentran cuerpos de inclusin intranucleares en las clulas epiteliales, los cuales son patognomnicos, pero desaparecen como resultado de la necrosis y descamacin del epitelio (Guy y Garca, 2008). Diagnstico Para el diagnstico definitivo de la enfermedad, la demostracin de cuerpos de inclusin resulta menos sensible que el aislamiento del virus (Triphany y Garcia, 2008). Aunque esta ltima es la prueba de oro, cada vez se usa menos de forma rutinaria, porque puede tomar hasta semanas, requiere de mucho trabajo y es relativamente cara. La industria avcola requiere de mtodos que puedan arrojar resultados en menos de 24 horas, para que se tomen de inmediato las decisiones relacionadas con la comercializacin de las parvadas afectadas, las medidas de bioseguridad y el movimiento del material de cama. Por lo tanto, la deteccin histopatolgica y molecular expeditas se han vuelto los mtodos estndar para el diagnstico. Adems de ser ms sensibles que el aislamiento viral, las pruebas como PCR tiempo real, RFPL-PCR y la secuenciacin de genes, son utilizadas para determinar la causa del problema, su origen y relacin filogentica con otras cepas de la zona, el pas o el mundo, lo cual contribuye en gran medida a prevenir y controlar esta enfermedad en varios pases. La identificacin de la virulencia de los aislamientos es un problema prctico importante, particularmente la diferenciacin entre virus de campo y los vacunales activos modificados. Para lograrlo, se usan el anlisis de la virulencia en embriones de pollo, pruebas de hibridacin de ADN y el anlisis de los patrones de restriccin de

endonucleasas sobre el ADN viral seguida de la separacin electrofortica de los fragmentos resultantes (Guy y Garca, 2008). Aunque se han descrito varias tcnicas para la demostracin de anticuerpos contra VLTI en suero, como inmunodifusin en agar gel, neutralizacin de virus, inmunofluorescencia y ELlSA, el titulo de anticuerpos no refleja el grado de proteccin. La prueba ELISA puede ser de utilidad cuando detecta niveles de anticuerpos muy altos en zonas avcolas donde no se practica la vacunacin, por lo que ayuda a orientar el diagnstico y se ha empleado en programas de sero-prevalencia (Johnson et al. 2005). Tratamiento No se ha demostrado que algn frmaco sea capaz de reducir la intensidad de las lesiones o que alivie los signos de la enfermedad. Pero, si se logra un diagnstico de LTI al inicio de un brote, la vacunacin de las aves no afectadas puede inducir una proteccin adecuada. Prevencin y control Los procedimientos bsicos de bioseguridad son muy efectivos para prevenir la presentacin de laringotraquetis infecciosa y evitar la diseminacin del virus entre casetas (Guy y Garca, 2008; Dufour-Zavala, 2008). Vacunacin La vacunacin ha probado ser un mtodo satisfactorio para desarrollar resistencia en las poblaciones de pollos susceptibles. La mejor vacuna disponible es la que se origina en embrin de pollo, pero tambin es la ms invasiva, reactiva, y con mayor potencial de diseminacin y reversin a la virulencia, como lo demuestra el hecho de que la mayora de los virus aislados de brotes de campo estn relacionados con vacuna de origen de embrin de pollo. Puesto que la vacunacin puede resultar en aves portadoras infectadas de manera latente, slo se recomienda utilizarla en zonas geogrficas donde la enfermedad sea endmica. La vacuna de origen de cultivo celular, provoca una reaccin muy suave, debe ser aplicada va ocular, requiere estricta aplicacin individual, no se propaga de ave a ave, no crea portadores asintomticos, ni revierte a su virulencia original, pero es menos inmunognica. Las vacunas recombinantes que tienen como vector al herpes virus del pavo o al poxvirus se usan cada vez con mayor frecuencia para proteger a las aves, pero no han resuelto completamente el problema, la avicultura contina experimentando brotes de la enfermedad, incluso en parvadas o reas donde se han usado las vacunas recombinantes. La industria avcola an no dispone de una vacuna que sea, efectiva, segura, econmica, que no establezca latencia, y que proteja a las aves durante todo su ciclo productivo sin inducir retraso en el crecimiento, incremento en el ndice de conversin alimenticia, y sin el riesgo de transmisin horizontal y reversin a la virulencia (Zavala, 2011). Los anticuerpos de origen materno no confieren proteccin contra la infeccin ni interfieren con la vacunacin. Por lo general, se encuentra baja correlacin entre los ttulos de anticuerpos sricos y el estado inmunitario de las parvadas. Los pollos menores de 2 semanas de edad no responden tan bien a la vacunacin como las aves de mayor edad, aunque pueden vacunarse con xito al da de edad. En pollos mayores de 2 semanas, la vacunacin o la exposicin de campo al VLTI confieren proteccin

contra el desafo, que resulta parcial a los 3 a 4 das posteriores a la vacunacin y completa a los 6 a 8 das (Guy y Garca, 2008).

III. BRONQUITIS INFECCIOSA La bronquitis infecciosa aviar (BI) es una enfermedad infecciosa aguda, de origen viral, de rpida difusin que generalmente ocasiona alta morbilidad y baja mortalidad, ocasiona un cuadro respiratorio con estornudos, estertores traque-bronquiales hmedos, boqueo y descargas nasales; as como descenso en la produccin y calidad del huevo en las gallinas de postura. Los primeros reportes de BI datan de 1931 en Dakota, EUA; posteriormente, la enfermedad fue reconocida en otras partes de EU y del mundo. La presencia del virus en Mxico se confirm en 1962 por Moreno Chan. Importancia La BI es considerada como la principal causa de prdidas econmicas en los Estados Unidos. En Mxico, el impacto econmico en el pollo de engorda involucra prdidas por el gasto por medicaciones y vacunas, la mortalidad que vara de 5 a 20%, la prdida de 50 a 150 g en el peso final, el aumento del ndice de conversin en 0.3 a 0.5, el incremento de aves de desecho en 3 a 5%, el gasto por diagnstico, vacunacin y revacunacin. En las gallinas de postura, las prdidas se asocian con el retraso de 1 a 2 semanas en el inicio de la produccin de huevo, mortalidad de 1 a 4%, baja en produccin de 5 a 10%, mala calidad del huevo (cascarn y albmina) e incremento aves de desecho de 1 a 2%. Por lo tanto, se estima que las prdidas anuales ocasionadas por la bronquitis infecciosa en el pas superan los 10 millones de dlares (Barran, 2008) Distribucin La BI est ampliamente distribuida en el mundo. Se presentan brotes en parvadas de aves vacunadas y los virus aislados frecuentemente son de un serotipo diferente del virus vacunal. Etiologa El agente responsable de la enfermedad es un coronavirus que pertenece a la familia Coronaviridae, pleomrfico pero comnmente redondo, envuelto y con proyecciones o espculas sobre su superficie. Contiene una cadena simple de ARN en sentido positivo y est constituido por cuatro protenas estructurales: S (Spike) que es la responsable de la unin al receptor de la membrana celular y estimula la produccin de anticuerpos neutralizantes; M (Membrana), E (envoltura) y N (nucleoprotena) que envuelve y protege el genoma del virus. El virus de BI (VBI) cambia rpidamente y tradicionalmente se clasifica en serotipos con base en pruebas de virus neutralizacin (VN). Las tcnicas de biologa molecular diseadas para secuenciar el gen de la protena S ayudan a la clasificacin gentica del virus; sin embargo, la clasificacin del genotipo y el serotipo no siempre agrupan a los aislamientos del VBI de la misma manera. Existen fundamentalmente tres serotipos del virus de la BI en Norteamrica, los denominados Massachusetts, Connecticut y

Arkansas 99. En Europa, las denominadas variantes holandesas, designadas mediante nmeros (D-274, D-212). Generalmente no hay reaccin cruzada entre serotipos; sin embargo, existen cepas virales que dan proteccin cruzada in vivo, las cuales se conocen como protectotipos. Estudios extensivos revelan la aparicin de numerosos serotipos del VBI, pero el ms comn es el Massachusetts y se considera el protectotipo ms importante porque puede conferir proteccin contra virus de otros serotipos o genotipos Epizootiologa La BI est presente en todas las zonas del mundo con produccin avcola intensiva. Especies susceptibles En condiciones naturales, solo las aves de granjas son susceptibles; afecta a las aves de todas las edades, pero es ms severa en las de menos de 2 semanas de edad, en las cuales puede ocasionar mortalidad. Transmisin La enfermedad se difunde rpidamente entre las aves por micro-aerosoles, durante un brote epizotico el virus puede viajar por el aire de una caseta a otra, incluso a otras granjas que estn prximas. El virus ha sido recuperado de la trquea y la cloaca hasta 49 das despus de la infeccin (Cunningham, 1970) Periodo de incubacin Las aves inoculadas por aerosol con fluido alantoideo de embriones infectados, manifiestan los primeros signos respiratorios a las 24 hrs. El periodo de en condiciones naturales es de 18 a 36 hrs. En una caseta infectada, la infeccin se trasmite en 90 a 100% de las aves en las primeras 48 horas. Morbilidad y mortalidad La mortalidad se presenta principalmente en aves jvenes, depende de la edad, la inmunidad humoral y las condiciones ambientales. Puede alcanzar 25% en aves de 3 a 4 semanas o menores, y es mucho ms baja en aves mayores de 6 semanas de edad. Patogenia Las aves se infectan por va respiratoria. El virus tiene una replicacin primaria en el epitelio del tracto respiratorio superior, causa la prdida de las clulas epiteliales de los senos nasales y la trquea. El virus se disemina a travs de la sangre a los riones, el tracto reproductor, las tonsilas cecales y la bosa de Fabricio, donde puede persistir ms tiempo que en la trquea o el pulmn. Las cepas nefropatgenas causan lesiones especialmente en los riones. Signos clnicos Los signos caractersticos son tos, estornudos, estertores traqueales, lagrimeo y letargia. Los pollos de engorda, especialmente los jvenes, presentan descarga nasal, depresin, se agrupan bajo la fuente de calor, hay baja en el consumo de alimentos y ganancia de peso y puede presentarse la sofocacin. Los pollos pueden morir directamente por la infeccin, pero generalmente la muerte se debe a infecciones bacterianas secundarias (Cavanagh, 2003). Las aves infectadas con virus nefropatognico se recuperan de la fase respiratoria, pero muestran depresin, plumas

erizadas y aumenta el consumo de agua. En las aves mayores de 6 semanas y adultas las descargas nasales no ocurren tan frecuentemente y la enfermedad puede pasar desapercibida (Dhinaker, 1997; Cavanagh, 2003). En gallinas ponedoras se pueden escuchar estertores traqueales hmedos, sofocacin y estornudos. Disminuye la produccin de 25-40%, se afecta la calidad externa del huevo, el cual puede tener cascarn muy delgado, deforme, rugoso o despigmentado. Las irregularidades del cascarn pueden persistir por perodos indefinidos, en presencia o no de signos respiratorios (Cook, 1986). La calidad interna del huevo tambin disminuye, la albmina puede estar acuosa y sin una demarcacin definida entre la albmina densa y la lquida. En las gallinas reproductoras el nmero de huevos infrtiles puede incrementarse a 92% y la incubabilidad reducirse a 7%. Las parvadas infectadas al final del ciclo productivo tienen un marcado descenso de la produccin y requieren de perodos relativamente largos para recuperarse parcialmente; en cambio las gallinas en el pico de postura pueden experimentar slo una ligera baja en la produccin con rpida recuperacin; pero pocas parvadas logran recuperar el porcentaje de postura que tenan antes de la enfermedad. Cuando hay afeccin renal pueden aumentar significativamente el consumo de agua y aparecer heces acuosas. Lesiones macroscpicas Las lesiones incluyen inflamacin moderada del tracto respiratorio superior, senos nasales y trquea, con exudado seroso, catarral o caseoso. Los sacos areos pueden estar hmedos, espumosos, opacos o con exudado de diferentes tipos si hay complicacin bacteriana. En los pollitos puede haber tapones caseosos en la trquea. La infeccin nefroptica causa riones plidos e inflamados con tbulos distendidos y urteres con cristales de uratos (Cumming, 1963). En las gallinas de postura se puede observar distencin abdominal y material fluido de la yema dentro de la cavidad. Tambin puede encontrarse degeneracin del ovario e inflamacin del oviducto. Las lesiones permanentes en el oviducto pueden ser consecuencia de la infeccin con el VBI en pollitas, lo que ocasiona reduccin en la produccin de huevos. Lesiones microscpicas Se caracterizan por prdida de cilios e infiltracin mononuclear y edema de la mucosa y submucosa traqueal, congestin vascular, hiperplasia y hemorragias en la submucosa del epitelio traqueal. El lumen traqueal puede contener exudado mucoso, con elementos celulares inflamatorios. En el oviducto, las clulas epiteliales no sufren una reduccin notable, pero se vuelven cuboidales con alguna prdida de los cilios, hay dilatacin de las glndulas, en la lmina propia y en el estroma intertubular, se observan focos de infiltracin celular linfocitaria, as como dilatacin del retculo endoplsmico rugoso de las clulas epiteliales. Se observa tambin hipoplasia del oviducto, con oclusin del lmen y quistes (Crinion, 1970). Diagnstico Para el diagnstico definitivo es necesario el asilamiento e identificacin del virus, del genoma o protenas virales, o los anticuerpos especficos. La neutralizacin viral y la inhibicin de la hemoaglutinacin son utilizadas para la identificacin y serotipificacin de las cepas de campo del VBI. La prueba de anticuerpos fluorescentes y la precipitacin en gel de agar, pueden usarse para la identificacin de un virus de campo, pero no diferencian entre serotipos.

Las tcnicas de biologa molecular como RT-PCR, polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restriccin e hibridacin de cidos nuclicos, pueden distinguir entre cepas de virus basadas en la protena S1, con sus tipos y subtipos serolgicos, patotipos, e incluso entre cepas virulentas de campo de las vacunales, en poco tiempo, con gran sensibilidad y especificidad. Adems, pueden aplicarse en muestras de tejidos, suspensiones lquidas o heces. El anlisis de muestras pareadas de sueros (con intervalo de 2-3 semanas) proporciona la mejor base para el diagnstico serolgico. Tratamiento No existe tratamiento especfico para la infeccin, pero algunas prcticas de manejo que pueden favorecer la recuperacin, como son disminuir la densidad de la poblacin, evitar las corrientes de aire y los cambios bruscos de temperatura, la suplementacin con vitamina A favorece la recuperacin del epitelio traqueal y bronquial. Prevencin y control Debido a la amplia distribucin del virus, la prevencin y el control de esta enfermedad requieren de un planteamiento bien coordinado entre las medidas de bioseguridad e higiene y la vacunacin. Bioseguridad Restringir el acceso a las granjas; destinar ropa, calzado y equipo para cada granja/caseta; tapetes sanitarios a la entrada de granjas y casetas. Limpieza. Remover y eliminar todo material orgnico (incluido el material de cama), limpiar; lavar la caseta con agua a alta presin para asegurar la eliminacin del material orgnico, agregar detergentes. Desinfeccin. Aplicar desinfectantes (formaldehdo, cloro, cuaternarios de amonio, etc.) a la concentracin correcta y durante el tiempo de contacto apropiado. Por lo menos 10 das de descanso entre parvadas. Vacunacin Tipos de vacunas Virus activo (atenuado): Se aplican a grandes poblaciones por aspersin o en el agua de bebida; son econmicas, inducen proteccin local y sistmica. Causan reaccin posvacunal durante algunos das. Existen tres opciones: a) la va oculonasal, que proporciona buena respuesta, aunque es lenta y laboriosa; b) la aspersin, que representa una buena alternativa para la va oculonasal; y c) el agua de bebida, la cual es la menos confiable (Annimo, 2005a). Virus inactivado. Confiere inmunidad duradera, no ocasiona reaccin posvacunal; es de, alto costo, se aplica ave por ave, permite la combinacin de diferentes serotipos y otros antgenos sin provocar interferencia entre ellos, no se difunde a aves susceptibles ni se revierte la virulencia, la respuesta inmune es uniforme. Las aves deben inmunizarse primero con vacuna de virus activo. Se obtienen ttulos ms altos y persistentes cuando se deja un intervalo de 4-6 semanas entre la ltima vacuna de virus activo y la vacuna inactivada (Annimo, 2005a). Debe ser administrada atemperada (15-25 C), por inyeccin o por aspersin; esta ltima, adems de ser fcil

de realizar, es bien aceptada por los trabajadores, estimula la respuesta inmune local que bloquea la va de entrada del virus al organismo del ave, la nebulizacin requiere gota fina (< 20 ) y alta concentracin de antgeno (Marrufo, et al. 2000). Cepas vacunales en Mxico 1) Serotipo Massachusetts. Es el tipo clsico del VBI e induce proteccin amplia contra otros serotipos. Tipo Massachusetts: Connaught, H52, H120, holandesa de pasaje intermedio, Ma5, M-41, Mass 48. 2) Serotipo Connecticut. Los serotipos nuevos emergen como resultado de pequeos cambios en la secuencia de aminocidos de la glicoprotena S1 del virus; en un serotipo nuevo, la mayor parte del genoma viral permanece inalterada, razn por la cual las vacunas de BI de un serotipo determinado pueden proteger contra cepas heterlogas. Debe determinarse la prevalencia de serotipos variantes antes de considerar el uso de vacunas que contengan estos virus. Se sospecha de la presencia de virus variantes cuando se presentan brotes en parvadas correctamente vacunadas con el serotipo Massachusetts. Cuando los productos existentes en el mercado no dan una buena proteccin contra virus emergentes, se justifica el desarrollo de una vacuna contra la nueva variante (Annimo, 2005a). Programa de vacunacin No existe una regla general, cada programa debe ser adaptado a la situacin de campo. Considerar siempre lo siguiente: la edad al desafo, que las cepas de campo determinan el protectotipo que ha de elegirse y que debe evitarse la interferencia con otros inmungenos activos. Tambin es necesario establecer el propsito de la vacunacin: a) Pollo de engorda. Reducir las mermas econmicas por prdida de peso y bajo ndice de productividad. b) Gallinas de postura y reproductoras. Proteger el oviducto para evitar falsas ponedoras, cadas de la produccin y cambios en la calidad interna y externa del huevo (Annimo, 2005a). En este contexto, la vacunacin de aves jvenes se realiza durante los primeros das de vida. En el pollo de engorda se enfoca a inducir proteccin que cubra el ciclo productivo. En gallinas de postura y reproductoras se busca la proteccin del oviducto durante las primeras semanas de vida con el uso de vacunas de virus activo atenuado, durante el periodo de produccin se utilizan vacunas inactivadas para lograr proteccin contra la cada de la postura de huevo, que sea amplia y lo ms duradera posible, con programas de hiperinmunizacin y medidas de bioseguridad estrictas. Es recomendable dejar dos semanas entre vacunas de virus activo y 4-6 semanas entre la ltima vacuna de virus activo y la vacuna inactivada para lograr la mejor respuesta. Es posible no usar el mismo serotipo en las vacunas de virus activo y en las inactivadas. Algunas vacunas de virus activo reaccionan con componentes heterlogos de BI en la vacuna inactivada, lo que produce cierto grado de proteccin cruzada contra otros serotipos (Annimo, 2005a). IV. VIRUELA AVIAR

La viruela aviar (VA), tambin conocida como epitelioma contagioso o difteria aviar, es una enfermedad viral comn de las aves domsticas (pollos, pavos y palomas) de ornato y silvestres (Prukner-Radovcic et al. 2006); de difusin lenta, caracterizada por ocasionar lesiones cutneas nodulares y proliferativas en las zonas de apterilos de la piel (viruela seca) o puede producir lesiones fibrino-necrticas y proliferativas (Dhawale, 2005) en las membranas mucosas de los tractos respiratorio y digestivo superiores (viruela hmeda). En la mayora de los casos, la enfermedad es leve y la mortalidad es baja, pero cuando se complica con otras infecciones o por mala higiene, puede causar prdidas severas (Tripathy y Reed, 2008). Importancia La VA ocasiona cada en la produccin de huevo y mortalidad (Dhawale, 2005). Los efectos negativos de la enfermedad en la parvada se pueden observar por tres o cuatro meses, durante los cuales se ve afectada la produccin o el crecimiento de las aves. Etiologa La enfermedad es causada por un virus ADN del gnero Avipoxvirus de la familia Poxviridae. Todos los virus de la viruela aviar tienen morfologa similar. El virus maduro (cuerpo elemental) tiene forma de ladrillo y mide 330 x 280 x 200 nm, es uno de los virus ms grandes que afectan a las aves. La cubierta est formada por arreglos aleatorios de tbulos de superficie. El ncleo est formado por una molcula de ADN de doble cadena con envoltura. Cerca de un tercio del virus est constituido por lpidos y algunos de los avipoxvirus presentan hemoaglutininas (Tripathy y Reed, 2008). Se ha observado la integracin de secuencias del virus de la reticuloendoteliosis (VRE) en el genoma del virus, la cual se supone que ocurri desde hace ms de 50 aos. Mientras que la mayora de las cepas de campo contienen provirus del VRE, lo cual incrementa la virulencia, las cepas vacunales solo tiene remanentes de las repeticiones de las terminaciones largas (OIE, 2009). Los Poxvirus aislados de diferentes especies de ave son antignica e inmunolgicamente distintos, pero existe cierto grado de reaccin cruzada entre ellos. El poxvirus de pollo y paloma tienen perfiles genmicos similares. La resistencia al tratamiento con ter se emplea como criterio taxonmico de los poxvirus. El virus de pichn y dos mutantes derivados son resistentes al ter y al cloroformo. El poxvirus aviar es resistente al fenol al 1% y formalina 1:1000 por 9 das, es altamente resistente a la desecacin y otras condiciones medio ambientales por lo que puede permanecer viable por meses o aos, particularmente si est protegido por costras secas o descamaciones de las aves infectadas. El calor (50C por 30 minutos o 60C por 8 minutos) inactiva al virus de la VA. Epizootiologa Incidencia y distribucin: La distribucin es mundial, de incidencia variable en diferentes reas, debido al clima, manejo, higiene o la vacunacin regular. Periodo de incubacin: vara de 4 10 das en aves comerciales y 3 5 das en aves de ornato. Curso de la enfermedad: 3 6 semanas si no se presentan complicaciones.

Morbilidad y mortalidad: La mortalidad depende de la patogenicidad de la cepa viral y de las medidas de control. En el caso de la forma cutnea, la mortalidad usualmente es baja y las aves afectadas tienen ms probabilidad de recuperarse que aquellas con la presentacin diftrica. En la viruela hmeda la mortalidad puede alcanzar el 50%. Hospederos: La VA afecta a pollos, pavos, palomas, canarios y ms de 60 especies de aves de cualquier edad, sexo y estirpe. Debido a los aspectos econmicos solo las infecciones de pollos y pavos son importantes, aunque la enfermedad tambin puede ser epizotica y causar altas prdidas en palomas, canarios, codornices y faisanes. Transmisin: El virus slo se transmite por contacto directo de un animal a otro (va horizontal) o por medio del alimento o del agua de bebida. El aerosol tambin favorece la infeccin cuando el medio ambiente est contaminado con escamas secas que pueden ser inhaladas por las aves. La infeccin ocurre cuando hay soluciones de continuidad o araazos de la piel o las membranas mucosas y se contaminan con polvo o descamaciones que contienen al virus. Las partculas de polvo en el aire y los insectos, que sirven como vector mecnico, pueden ser una fuente importante de virus en las casetas. Los mosquitos Aedes y Mites, son particularmente importantes porque pueden infectar a un gran nmero de aves al acarrear al virus de las aves infectadas al resto de la parvada. El virus puede existir en una forma latente en algunas parvadas y los factores estresantes pueden activar la presentacin de la enfermedad. Los trabajadores de la granja pueden diseminar inadvertidamente la enfermedad a travs de la ropa y el equipo (Norton y Clark, 1998). El incremento en la frecuencia de la enfermedad quiz se deba al confinamiento de las aves, especialmente en granjas con parvadas multi-edades. Tales condiciones dan oportunidad a la transmisin directa de ave a ave, as como a travs del aire. La alta densidad de poblacin y las casetas sucias incrementan las posibilidades de diseminacin de la enfermedad (Dhawale, 2005). Patogenia Las clulas de la mucosa en el aparato respiratorio superior, cavidad oral, cavidad nasal y conjuntiva son altamente susceptibles al virus. La replicacin viral ocurre inmediatamente en la dermis, el epitelio folicular o las membranas mucosas del ave. La infeccin celular comienza con la penetracin viral a las clulas de la dermis (12-24 horas post infeccin PI-), seguida por la replicacin del cido nucleico. Los Poxvirus son ensamblados exclusivamente en el citoplasma de las clulas infectadas y los viriones nuevos aparecen despus de 22 - 24 horas. Los cuerpos de inclusin aparecen a las 72 horas PI en el epitelio de la dermis. La viremia puede presentarse a los 4 das post infeccin. El virus puede ser recuperado de muchos rganos, incluidos el hgado, rin y cerebro. Signos La viruela es extremadamente infecciosa y se presenta en dos formas: hmeda (diftrica) o seca (cutnea). La viruela seca se caracteriza por el desarrollo de lesiones proliferaivas, que van de ndulos pequeos a masas esfricas similares a verrugas en la cresta, barbillas, carnculas, prpados y otras reas desprovistas de plumas (Figura 1), incluida la cloaca; sin embargo, recientemente se report la aparicin de lesiones slo en reas cubiertas de plumas, como en ambos lados de la cadera y las reas abdominal inferior, pericloacal y laterales del cuello inferior (Sentes et al. 2010). Causa

menor mortalidad que la viruela hmeda, pero ocasiona descenso transitorio de la produccin de huevo y retraso en el crecimiento en aves jvenes, debido a que las aves afectadas frecuentemente se vuelven anorxicas (OIE, 2009). Usualmente la enfermedad se desarrolla lentamente y el comportamiento de las aves en general no cambia. En brotes severos, los animales se deprimen, dejan de comer si la cavidad oral es afectada y bajan de peso. Se caracteriza por pstulas o lesiones de la cara y cresta; las lesiones de la cara no se deben de eliminar, pues al quitarlas dejan lceras sangrantes y se aumenta el contagio hacia los animales sanos. Adems, puede haber infeccin en los ojos, que inicia con flujo acuoso que ms tarde se vuelve amarillento y afecta todo el rgano. Muchas veces se pierde la visin en uno o ambos ojos. Los pavos generalmente presentan signos severos tales como ceguera, disminucin aguda en la produccin de huevo e incluso infertilidad. En las gallinas la produccin de huevo se afecta temporalmente, pero la fertilidad permanece intacta. En palomas, la presentacin cutnea es la ms frecuente. En la forma diftrica (viruela hmeda) se desarrollan ndulos blancos opacos ligeramente elevados sobre las membranas mucosas de la cavidad oral (Figura 2), esfago, laringe o trquea, rpidamente aumentan de tamao hasta convertirse en una membrana diftrica amarillenta necrtica. Esta presentacin clnica puede confundirse fcilmente con la laringotraquetis infecciosa (LTI), e incluso puede darse la infeccin simultnea de VA y LTI, lo que puede exacerbar los signos clnicos y la mortalidad (Diallo et al. 2010). Las lesiones proliferativas involucran los pasajes nasales, laringe y trquea, lo que puede ocasionar dificultad respiratoria y muerte por sofocacin cuando se excitan. La tasa de mortalidad es mayor (cerca de 50%), particularmente en aves jvenes, que en la forma seca (OIE, 2009). Generalmente se presentan las dos formas de la enfermedad en la misma parvada, incluso en la misma ave. Lesiones Macroscpicas Dependen de la presentacin de la enfermedad. En la forma cutnea se caracterizan por hiperplasia epitelial local que involucra la epidermis y los folculos pilosos, con formacin de ndulos que aparecen primero como focos pequeos que incrementan rpidamente su tamao (4 das). Las ppulas se forman del 5 al 7 da y son seguidas por el estado vesicular. Las lesiones cercanas pueden coalescer tornarse de color gris o caf oscuro. A los 10-14 das, se presenta inflamacin alrededor de las lesiones, acompaada de hemorragias. La fase reparativa inicia con la aparicin de costras y finaliza con la descamacin de la capa de epitelio degenerado. En la forma diftrica, los ndulos blancos opacos que se desarrollan sobre la membrana mucosa incrementan rpidamente su tamao y generalmente coalescen para originar lesiones diftricas o pseudo-necrticas caseosas; si se retira la membrana se encuentra una erosin sangrante. Los procesos inflamatorios pueden extenderse dentro de los senos nasales, faringe, laringe y esfago. Lesiones Microscpicas Se presenta hiperplasia con clulas alargadas en el epitelio, asociada con cambios inflamatorios. Los grupos de clulas generalmente dan la apariencia de papilomas. Comnmente pueden observarse los cuerpos de inclusin citoplasmticos (Figura 3) eosinoflicos tipo A en el sitio de la lesin, los cuales aparecen en estados tempranos de la enfermedad y son detectables hasta el desarrollo de la necrosis.

Diagnstico Clnico. Puede realizarse si se desarrollan lesiones tpicas de la enfermedad. Hitopatolgico. El virus se multiplica en el citoplasma de las clulas infectadas y forma cuerpos de inclusin (cuerpos de Bollinger) patognomnicos los cuales contienen los cuerpos elementales (cuerpos de Borrel). El virus causa proliferacin del epitelio con abalonamiento de las clulas. Las inclusiones citoplasmticas tipo A varan en tamao y forma, y pueden observarse en cortes de piel, o en lesiones diftricas o de la membrana corioalantoidea MCA- (Tripathy y Reed, 2008). Aislamiento viral. Los poxvirus son aislados fcilmente a partir de lesiones nodulares desarrolladas recientemente en las aves infectadas. El aislamiento del Poxvirus se lleva a cabo por la escarificacin de la piel en un ave susceptible o por la inoculacin de embriones de pollo de 9-12 das de desarrollo, aunque los embriones de pato y pavo tambin son sensibles a la infeccin. Se inocula la suspensin viral en la MCA de los embriones, se incuba a 37C por 5 - 7 das, la replicacin del virus puede ser detectada en la membrana incluso 2 - 3 das PI, cuando se forman pstulas blancas opacas focales o difusas, rodeadas por zonas edematizadas o puede verse engrosamiento generalizado de la MCA. Ocasionalmente, algunas cepas pueden requerir de adaptacin para crecer en la MCA (Tripathy y Reed, 2008). Los Poxvirus tambin pueden ser propagados en la mayora de los cultivos celulares de origen aviar. Serolgico. La respuesta inmune al VVA de campo o vacunal puede demostrarse por pruebas de virus neutralizacin (altamente especfica, requiere de tiempo y material), inmunodifusin en gel de agar (especfica, poco sensible, inadecuada en la infeccin temprana), inmunofluorescencia, o hemoaglutinacin pasiva (sensible, ideal en los estados tempranos de la infeccin), ELISA e inmunoblot (OIE, 2009); sin embargo, estas pruebas no se realizan de forma rutinaria en los laboratorios de diagnstico. Diagnstico diferencial Las lesiones causadas por deficiencia de cido pantotnico y biotina, as como por micotoxinas (T-2) puede confundirse con VA. En palomas y otras aves la infestacin con Trichomona gallinae puede producir lesiones similares en la cavidad oral, faringe y laringe. La forma diftrica puede ser confundida con lesiones causadas por infecciones con el virus de laringotraquetis, y puede darse la infeccin simultnea con ambos virus. Tratamiento No existe tratamiento especfico para las aves infectadas con el virus de VA. Se recomienda el uso de antibiticos y vitaminas adicionales para evitar infecciones secundarias, tambin deben evitarse factores estresantes en las aves enfermas. La aspersin de agentes viricidas ayuda a reducir la carga viral en el ambiente. Prevencin y control Las casetas afectadas deben limpiarse vigorosamente despus de remover y eliminar todo el material de cama. El lavado estricto con detergente abundante y lavador de alta presin ayuda a eliminar el virus remanente. La ropa y equipo empleados en la necropsia (cuchillos, tijeras, etc.) deben lavarse apropiadamente, o mejor an esterilizarse. El equipo nunca debe ser llevado a otra caseta, para evitar la diseminacin del virus (Norton y Clark, 1998).

Mantener podadas las reas alrededor de la caseta y libre de desechos que puedan servir de reservorios para los mosquitos. Evitar la acumulacin de agua en reas donde los mosquitos puedan reproducirse. Minimizar el polvo y caspa, que pueden contaminar los ojos u otras superficies mucosas, por medio del manejo adecuado de la cama. Los animales que se recuperan de la enfermedad quedan como portadores del virus, por lo que se recomienda eliminarlos o evitar mezclarlos con animales susceptibles. La prevencin de la VA es crtica, si se considera la naturaleza persistente del virus. Aunque la higiene general y el control de los insectos son componentes clave de un programa de prevencin efectivo, el xito completo depende grandemente del programa de vacunacin. Vacunacin La prevencin est basada en la inmunizacin activa. La vacunacin provee proteccin contra la infeccin al menos por un ao. Las vacunas comerciales disponibles de virus activo son preparadas a partir de cepas de Poxvirus de pollo y paloma, estas deben contener una concentracin mnima de 10 4 DIEP50/ml para establecer buena inmunidad. En otros lugares tambin se encuentran disponibles vacunas de canario y codorniz. Las vacunas recombinantes estn disponibles en forma experimental. Las vacunas de virus de viruela de pollo y de pichn etiquetadas como originada en embrin de pollo se preparan a partir de membrana corioalantoidea contienen VVA activo capaz de producir enfermedad seria en una parvada, si se usa incorrectamente. La vacuna contra la VA originada en cultivo de tejido se elabora de cultivo de fibroblastos de embrin de pollo (Dhawale, 2005). Experimentalmente se ha evaluado a la cepa PV-CE/90 como candidato vacunal propagado en cultivo celular, la cual demostr no revertir a la virulencia (Alfonso et al. 2003). La vacuna contra VA se aplica comnmente en el pliegue del ala en pollos de 4 semanas de edad y en pollas de reemplazo 4 8 semanas antes del inicio de la postura de huevo. No debe usarse en gallinas durante la etapa de produccin de huevo. La vacuna de VVA atenuado originada en cultivo celular puede ser usada en pollitos de un da de edad, incluso combinada con la vacuna contra la enfermedad de Marek, Gumboro o Newcastle (Dhawale, 2005) y puede administrarse por va intramuscular, oral o intranasal. Es menos protectora y requiere revacunacin tarda. La vacuna de viruela del pichn contiene virus activo no atenuado (menos patgeno para los pollos) aislado de infeccin natural de pichones. Generalmente se administra en el pliegue del ala a pollos de 4 semanas de edad o en pollas 4 semanas antes del inicio de la produccin de huevo. En palomas se aplica por puncin en la membrana del ala. En los pavos, la vacuna de virus activo no atenuado puede generalizar lesiones severas, incluso enfermedad, si no se aplica en el tiempo y con el mtodo adecuado. Los pavos tpicamente se vacunan con el virus de pollo a las 8 12 semanas de edad, mientras que los reproductores deben revacunarse a intervalos regulares para mantener inmunidad completa. Los pavos pueden recibir la vacuna con virus de pichn al da de edad en cuyo caso es necesaria la revacunacin. La vacunacin con cualquiera de los dos tipos de virus es recomendable cuando los animales se cran durante la temporada de actividad de los insectos. En zonas con invierno muy fro, la vacunacin durante la primavera y el verano puede ser suficiente.

En las reas ms clidas con insectos activos en los meses de invierno puede requerirse la vacunacin durante todo el ao (Norton y Clark, 1998). Si las vacunas comerciales no protegen adecuadamente, puede prepararse una autovacuna a partir de un virus aislado en la misma granja. Se recomienda controlar la reaccin post vacunal una semana despus de la inmunizacin. Si no hay buena reaccin inflamatoria en el sitio de vacunacin, no se logra la proteccin apropiada. Para detener brotes severos de la enfermedad, se debe vacunar de inmediato a todos los animales que no muestren los sntomas caractersticos; sin embargo, una vez que se manifieste alguno de ellos, no es aconsejable vacunar, ya que una fuerte reaccin a la vacuna puede ocasionar la muerte de los animales. Bibliografa Disponible con el autor