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Instituto para la Calidad

Pontificia Universidad Católica del Perú -1-
Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana
Curso: Validación de Métodos de Ensayo
Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005
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VALIDACI VALIDACIÓ ÓN DE M N DE MÉ ÉTODOS DE ENSAYO TODOS DE ENSAYO
Docente: Ing. Lupe Ognio de Docente: Ing. Lupe Ognio de Muscari Muscari
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Parte 1
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Definiciones
Validación:
Confirmación mediante el suministro de evidencia
objetiva de que se han cumplido los requisitos para una
utilización o aplicación específica prevista.
Es un programa documentado que debe incluir evidencia
del funcionamiento y confiabilidad del equipo, de los
sistemas y del personal para proporcionar un alto grado
de seguridad de que el método de ensayo propuesto es
el adecuado para los usos diseñados.
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Definiciones
Validación de un método de ensayo es el proceso que
permite establecer mediante estudios de laboratorio que
los parámetros de desempeño del método de ensayo
cumplen las especificaciones relacionadas con el uso
previsto de los resultados del ensayo.
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Definiciones
Validación de métodos de ensayo:
Establecer mediante estudios sistemáticos de
laboratorio, que las características técnicas de dichos
métodos cumplen las especificaciones relativas al uso
previsto de los resultados analíticos.
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Aseguramiento de la Calidad
Todas aquellas actividades sistemáticas planeadas
dentro del sistema de calidad, demostradas como
necesarias que proporcionan una confianza adecuada
para que una entidad satisfaga requisitos de calidad.
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Material de Referencia Certificado
(MRC)
Material de referencia acompañado de un certificado ,
en el cual uno o más valores de las propiedades están
certificados por un procedimiento que establece
trazabilidad a una realización exacta de la unidad en la
cual se expresan los valores de la propiedad y en el que
cada valor certificado se acompaña de una
incertidumbre con un nivel declarado de confianza.
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Trazabilidad
Propiedad del resultado de una medición o del valor de
un patrón por la cual pueda ser relacionado a
referencias determinadas, generalmente patrones
nacionales o internacionales, por medio de una cadena
ininterrumpida de comparaciones teniendo todas
incertidumbres determinadas.
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Verificación
La verificación consiste en la evaluación de las
características de desempeño analítico seleccionadas;
para generar datos relevantes y adecuados, en vez de
repetir el proceso de validación ( USP).
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Parámetros de desempeño Analítico
Características de validación que necesitan ser
evaluadas y que se relacionan a la exactitud, precisión,
especificidad, limite de detección, limite de
cuantificación, linealidad, intervalo de linealidad y
robustez.
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Método Normalizado
Es aquel método desarrollado por un Organismo de
Normalización u otras organizaciones y que son
aceptados por el sector técnico involucrado (INDECOPI,
ASTM, AOAC,APHA, etc.).
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Método No Normalizado
Es aquel método desarrollado por el propio laboratorio y
otras partes, o que ha sido modificado a partir de una
norma (métodos publicados en revistas técnicas,
métodos de fabricantes de equipos, métodos que
utilizan “Kits”).
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Validación como requisito de la
ISO/IEC 17025
En el apartado 5.4.5 establece que el laboratorio debe
validar:
– Métodos no normalizados,
– Métodos diseñados/desarrollados por el laboratorio
– Métodos normalizados utilizados fuera del alcance
previsto,
– Ampliaciones y modificaciones de métodos
normalizados
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Validación como requisito de la
ISO/IEC 17025
Establece asimismo que la validación debe:
– Ser tan extensiva como sea necesario para satisfacer las
necesidades de aplicación.
– Registrar los resultados obtenidos, el procedimiento utilizado y
una declaración de si el método es adecuado para el uso
propuesto.
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Validación como requisito de la
ISO/IEC 17025
Asimismo debe declarar:
– Rango y exactitud de los valores (parámetros de
desempeño) que se obtienen de los métodos
validados (incertidumbre, límite de detección,
selectividad del método, linealidad, límite de
repetibilidad y/o reproducibilidad, robustez etc.), así
como la evaluación para el uso propuesto deben ser
pertinentes a las necesidades de los clientes.
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Validación como requisito de la
ISO/IEC 17025
El requisito sugiere que la validación incluya:
– Procedimientos para el muestreo, manipuleo,
transporte,
– Empleo de técnicas para determinar los parámetros
de desempeño del método como:
• Uso de materiales o patrones de referencia,
• Comparación de los resultados con otros métodos
de ensayo,
• Comparaciones interlaboratorios,
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Validación como requisito de la
ISO/IEC 17025
• Evaluación de la incertidumbre.
– Especificación de los requisitos,
– La determinación de las características de los
métodos,
– Verificación de que los requisitos pueden cumplirse
con el método usado,
– La validación incluya una declaración sobre la validez.
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Para qué validar
Para demostrar experimentalmente, la funcionalidad del
método para las aplicaciones analíticas propuestas,
como también obtener evidencia documentada del
procedimiento seguido, un tratamiento estadístico
apropiado y unos criterios de aceptación.
Además se debe validar un método cuando es necesario
verificar que sus parámetros de desempeño son
adecuados para ser utilizados en un problema analítico
específico.
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¿Cuándo es necesario validar un
método?
Un método de ensayo debe ser validado cuando es
necesario verificar que los parámetros ejecutados son los
adecuados para resolver un problema analítico en
particular.
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Esquemas de Validación
Considerando la variedad de ensayos, es lógico que
diferentes métodos de ensayo adquieran diferentes
esquemas de validación.
Estas categorías son las siguientes:
– Categoría I. Los métodos analíticos para la
cuantificación de componentes mayores de aditivos
en alimentos o ingredientes activos (incluyendo
preservantes).
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Esquemas de Validación
– Categoría II. Los métodos analíticos para la
determinación de impurezas en aditivos para
alimentos o componentes de degradación en
productos terminados.
Estos métodos incluyen ensayos cuantitativos y
ensayos de límite (contaminante, conservadores).
– Categoría III. Métodos analíticos para la
determinación de características llevadas a cabo
(ejm: solubilidad, punto de fusión análisis
semicuantitativos).
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Esquemas de Validación
– Categoría IV. Pruebas de Identificación.
Para cada categoría de ensayo hay diferente información
analítica que se requiere.
Lo que se menciona en la tabla siguiente son datos de
elementos que son normalmente requeridos para cada
una de las categorías ( según USP).
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Elementos requeridos para los
ensayos de Validación
Parámetros
analíticos
Categoría I
Categoría II
Categoría III Categoría IV
Cuantitativo
Ensayos de
Límite
Exactitud Sí Sí * * No
Precisión Sí Sí No Sí No
Especificidad Sí Sí Sí * Sí
Límite de
detección
No No Sí * No
Límite de
cuantificación
No Sí No * No
Linealidad Sí Sí No * No
Rango Sí Sí * * No
Robustez Sí Sí Sí Sí Sí
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Elementos requeridos para los
ensayos de Validación
* Puede ser requerido, dependiendo de la naturaleza del
ensayo específico.
Parámetros que deben comprobarse en la validación de
métodos analíticos según el objetivo de los mismos dado
por la AOAC *
Cualitativo
Determinación
de contenidos
Análisis
de trazas
Parámetro
físico-químicos
EXACTITUD X X X
PRECISIÓN X X X
LINEALIDAD X X X
SELECTIVIDAD X X X
L. DETECCIÓN X X
L. CUANTIFICACIÓN X
ROBUSTEZ X X X X
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Validación
¿Qué parámetros se deben evaluar?
– Especificidad
– Rango de trabajo y rango lineal
– Límite de detección
– Límite de cuantificación
– Exactitud
– Precisión: Repetibilidad
Precisión intermedia
Reproducibilidad
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Validación
– Robustez (“Robustness”)
– Fortaleza (“Ruggedness”)
– Recuperación
– Adecuación del sistema (“Systemsuitability”)
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Criterios de Validación
El rango, la exactitud y la precisión de los valores
obtenidos debe estar de acuerdo con las necesidades del
cliente
– La validación incluye especificación de los
requerimientos.
– La validación es siempre un balance entre costos,
riesgos y posibilidades técnicas.
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Criterios de Validación
Las características de funcionamiento de un método
analítico comprenden todos los datos y resultados
experimentales que demuestran su aptitud para el uso al
que se destina.
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Criterios de
Validación
Se consideran los siguientes grupos de características de
funcionamiento:
– Fiabilidad
– Practicabilidad
– Idoneidad
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Características de Fiabilidad
Son las que demuestran la capacidad del método
analítico para mantener a lo largo del tiempo los criterios
fundamentales de validación, no necesariamente
aplicables en todos los casos, y de los que derivan los
parámetros de validación.
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Fiabilidad
Proporcionalidad entre concentración del analito y
respuesta del instrumento.
Este concepto se relaciona con los parámetros de:
– Linealidad
– Intervalo o rango
– Sensibilidad
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Fiabilidad
Dispersión de una serie de resultados alrededor del valor
medio o central es decir el “ mas –menos” de un
procedimiento analítico.
Se relaciona con los siguientes parámetros:
– Precisión
– Repetibilidad
– Reproducibilidad
– Robustez
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Fiabilidad
Diferencia entre el valor hallado en el análisis y el valor
verdadero, relacionado a:
– Exactitud
– Recuperación
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Fiabilidad
Cantidad mínima de analito requerida para obtener un
resultado significativo, relacionado con los parámetros
de:
– Sensibilidad
– Limite de detección
– Limite de cuantificación
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Fiabilidad
Capacidad de un método para determinar el analito sin
interferencias de impurezas, productos de degradación,
excipientes u otras sustancias presentes en la muestra.
Concepto relacionado con los parámetros de:
– Selectividad
– Especificidad
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Practicabilidad
La practicabilidad se evalúa en la fase de desarrollo del
método analítico: tiempo, costo, tamaño de la muestra,
tipo de equipo o instrumentación, condiciones de
seguridad etc.
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Idoneidad
El termino idoneidad se aplica al conjunto de parámetros
relacionados con la verificación del buen funcionamiento
de los instrumentos.
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Procedimientos de Validación
Validación prospectiva: se aplica cuando se elabora un
nuevo método.
Validación retrospectiva: Métodos no validados
previamente y de los que se tiene un record de
resultados.
Revalidación : Se aplica cuando en un método analítico
previamente validado se ha introducido un cambio
significativo.
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Actividades previas a la Validación
• Referidas a los factores que afectan la
exactitud y confiabilidad de los resultados de
la validación:
• Factores humanos ( competencias)
• Instalaciones y condiciones ambientales
( controles).
• Métodos y procedimientos definidos
( muestreo, manipuleo, transporte,
almacenamiento)
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Actividades previas a la validación
• Disponer del equipo necesario ( calibrados y
verificados).
• Mantenimiento de computadoras y equipos
automatizados asegurando que funcionen
adecuadamente.
• otros
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Planeamiento de Validación
La planificación y grado de control sobre los factores que
influyen en los análisis deben ser establecidos desde el
inicio y mantenidos rigurosamente, se sugiere una
secuencia de trabajo como la que se muestra a
continuación:
– Definir el objetivo y campo de aplicación del
método;
– Definir los parámetros de validación y criterios de
aceptación (de dichos parámetros);
– El método analítico debe ser claro y establecido al
inicio de los análisis;
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Planeamiento de Validación
– Un pre-requisito esencial para el éxito de la
validación, la disponibilidad de muestras matrices
estables homogéneas y en la cantidad suficiente
para ser utilizadas a lo largo del estudio de
validación;
– La validación es realizada por un mismo analista
usando el mismo equipo, aparatos y reactivos en
un periodo de una semana a dos semanas.
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Planeamiento de Validación
– Definir los ensayos a efectuarse en la validación;
– Verificar si las características de operación de los
equipos con los que cuenta el laboratorio son
compatibles con las exigidas por el método de
estudio;
– Verificar las condiciones de operación y
performance del equipo a usarse;
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Planeamiento de Validación
– Caracterizar los materiales, por ejemplo, patrones
y reactivos;
– Ejecutar los ensayos para los parámetros
considerados en la validación;
– Ajustar los parámetros de validación del método y
los criterios de aceptación, si es necesario;
– Preparar las descripción del método validado;
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Planeamiento de Validación
– Definir criterios de revalidación (por ejemplo:
periodicidad, cambios de personal, condiciones
ambientales, equipos, etc.)
– Definir tipo y frecuencia de verificación de control
de calidad analítica de rutina.
Los ensayos y los resultados deben ser
documentados y registrados.
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Documentación de la Validación
La documentación esta referida a:
– Plan de validación
– Protocolo de validación incluye declaración del
método validado.
– Método de ensayo objeto de la validación
– Procedimiento de operación normalizado.
– Reportes de resultados,
– Evaluación estadística
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Documentación de la Validación
– Certificados de calibración y /o de verificación de los
equipos empleados.
– Verificación del material de vidrio
– Certificados de los estándares y/o material de
referencia.
– Registros de las soluciones
– Informe de la incertidumbre del método.
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Precisión
Es el grado de concordancia entre resultados
individuales, cuando el método de análisis se aplica
repetidamente a diferentes muestras a partir de una
muestra homogénea.
Se pueden considerar en tres niveles:
– Repetibilidad
– Precisión intermedia
– Reproducibilidad
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Repetibilidad
Expresa la precisión de los resultados de las mediciones
del mismo analito, la precisión en condiciones de
repetibilidad e involucra:
– Mismo laboratorio
– Mismo equipamiento
– Un único analista
– Mismo método
– Misma muestra
– Intervalos cortos de tiempo

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Repetibilidad
Puede determinarse de una manera interna en el
laboratorio.
Teniendo en cuenta:
Realizar un mínimo de 10 mediciones.
Repetir tres veces (como mínimo) en un intervalo corto
de tiempo.
Determinar la desviación estándar de los resultados.
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Precisión intermedia
Es la precisión en condiciones de precisión intermedia:
– Mismo laboratorio
– El equipamiento puede ser el mismo o pueden
emplearse otros equipos
– Distintos analistas
– Mismo método
– Misma muestra
– Intervalos de tiempo mayores que para “r”
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Reproducibilidad
Es la precisión en condiciones de reproducibilidad e
involucra:
– Distinto laboratorio
– Diferente equipamiento
– Distintos analistas
– Mismo método
– Misma muestra
– Intervalos de tiempo largos
Reproducibilidad →Ensayos interlaboratorios
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Precisión
El estimador estadístico de la precisión es la desviación
estándar (S) la cual normalmente se expresa como desviación
estándar relativa o coeficiente de variación (CV).
1
) (
1
2

=
=

=
n
X X
S
n
i
i
ri
ensayo el en obtenidos datos los todos de promedio X
ensayos los en datos X
analista un o o laboratori un de estándar desviación S
i
ri
=
=
=
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Precisión
Cálculo de coeficiente de variación:
Limite de repetibilidad (r): Diferencia critica entre analistas para
determinar la repetibilidad del metodo.
r =
100 × =
X
S
CV
ri
) 1 (
2
1
2
1
8 . 2 . .
2 1
K K K K K K
n n
S D C
r
+ × =
analista segundo del datos de N n
analista primer del datos de N n
analistas dos los de o laboratori del datos los de estándar desviación S
crítica diferencia D C
r
º
º
) (
. .
2
1
=
=
=
=
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Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005
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Precisión
Este criterio se acepta si la diferencia crítica es mayor o igual
a la diferencia absoluta de las medias entre los dos analistas
Si los analistas no son comparables usar la siguiente ecuación:
2 1
. . y y D C − ≥
( ) ( )
(
¸
(

¸

+
− +
× − + −
=
2 1 2 1
2
2 2
2
1 1
1 1
2
1 1 1
n n n n
S n S n
S
r
datos de número n
cuadrado al analista segundo del estándar deviación S
cuadrado al analista primer del estándar deviación S
=
=
=
2
2
2
1
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Limite de reproducibilidad
Diferencia critica entre laboratorios para determinar la
reproducibilidad del método.
) , (
) , ( ) , (
8 . 2 ) (
) , ( 8 . 2 ) (
2
1
2
1
1 ) ( ) ( 8 . 2
2 1
2 2
l d CM
n
l d CM l e CM
R
l d CM r
n n
r R CD R
+

× =
× =
|
|
¹
|

\
|
− − − × = =
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Limite de reproducibilidad
" "
" "
) , (
) , (
) ( ) (
) (
% 95
:
2
1
B o laboratori del datos de número n
A o laboratori del datos de número n
o laboratori cada de dentro error del medio cuadrado l d CM
os laboratori entre del medio cuadrado l e CM
analistas entre os laboratori entre ilidad reproducib de estándar desviación R
o laboratori cada de dentro dad repetibili de estándar desviación r
ilidad reproducib de critica diferencia CD
Donde
=
=
=
=
=
=
=
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Limite de reproducibilidad
El criterio se acepta si la diferencia critica es mayor o
igual a la diferencia absoluta de las medias entre los dos
laboratorios.
2 1
. . y y D C − ≥
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Ejercicio
Calculo de:
– Precisión
– Precisión intermedia
– Reproducibilidad
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Exactitud
Exactitud es el grado de concordancia entre el resultado
de un ensayo y el valor aceptado como referencia.
Exactitud expresa la cercanía de un resultado verdadero.
– Exactitud de un método (sesgo) expresa la cercanía de
la media de un conjunto de resultados (producido por
ese método, al valor verdadero).
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Exactitud
Es la diferencia entre el valor de la concentración
considerada verdadera y el valor experimental, cuando se
aplica el método varias veces a diferentes muestras,
incluye una combinación de errores aleatorios y
sistemáticos.
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Exactitud
Generalmente se expresa la exactitud en función del
porcentaje de recuperación, que se obtiene al aplicar el
ensayo luego de agregar a la muestra cantidades
conocidas de analito.
Se recomienda usar un mínimo de 9 determinaciones
sobre 3 niveles de concentración, 3 replicas por cada
nivel.
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Exactitud
Se calcula de la siguiente manera:
Se establece el rango de aceptación para el porcentaje
de recuperación por ejemplo:
( ) 100 / (%)
3 2 1
× − = C C C ón Recuperaci
ión fortificac la de ión concentrac C
a fortificad no muestra en a determinad ión concentrac C
a fortificad muestra en a determinad ión concentrac C
Donde
1
=
=
=
3
2
:
% 105 % 95 ≤ ≤ R
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¿Cómo se evalúa la Exactitud?
100 %
) (
× =
− =
verd
obs
verd
obs
X
X
R ón recuperaci Como
V X Sg bias sesgo Como
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Exactitud
Manera de determinar la exactitud:
Analizar materiales de referencia certificados.
Comparar con un método de referencia
Comparar con resultados obtenidos en un ensayo de
aptitud
Utilizar pruebas estadísticas para evaluar las diferencias.
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Veracidad
Grado de concordancia entre el promedio de un serie
grande de resultados y el valor de referencia.
– La validación de métodos de ensayo busca cuantificar
la exactitud de los resultados evaluando los efectos de
los errores aleatorios y sistemáticos sobre los
resultados.
Precisión Veracidad Exactitud + =
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Inexacto Inexacto
Inexacto Exacto
Alta Baja
Baja
Alta
Precisión
V
e
r
a
c
i
d
a
d
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Ejercicio
• Determinación de exactitud

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Definiciones
Validación: Confirmación mediante el suministro de evidencia objetiva de que se han cumplido los requisitos para una utilización o aplicación específica prevista. Es un programa documentado que debe incluir evidencia del funcionamiento y confiabilidad del equipo, de los sistemas y del personal para proporcionar un alto grado de seguridad de que el método de ensayo propuesto es el adecuado para los usos diseñados.
INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

Definiciones
Validación de un método de ensayo es el proceso que permite establecer mediante estudios de laboratorio que los parámetros de desempeño del método de ensayo cumplen las especificaciones relacionadas con el uso previsto de los resultados del ensayo.

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Definiciones
Validación de métodos de ensayo: Establecer mediante estudios sistemáticos de laboratorio, que las características técnicas de dichos métodos cumplen las especificaciones relativas al uso previsto de los resultados analíticos.

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Aseguramiento de la Calidad
Todas aquellas actividades sistemáticas planeadas dentro del sistema de calidad, demostradas como necesarias que proporcionan una confianza adecuada para que una entidad satisfaga requisitos de calidad.

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generalmente patrones nacionales o internacionales. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Trazabilidad Propiedad del resultado de una medición o del valor de un patrón por la cual pueda ser relacionado a referencias determinadas. por medio de una cadena ininterrumpida de comparaciones teniendo todas incertidumbres determinadas. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -4- . en el cual uno o más valores de las propiedades están certificados por un procedimiento que establece trazabilidad a una realización exacta de la unidad en la cual se expresan los valores de la propiedad y en el que cada valor certificado se acompaña de una incertidumbre con un nivel declarado de confianza.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Material de Referencia Certificado (MRC) Material de referencia acompañado de un certificado . INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.

INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. linealidad. especificidad. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -5- . intervalo de linealidad y robustez. limite de detección.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Verificación La verificación consiste en la evaluación de las características de desempeño analítico seleccionadas. en vez de repetir el proceso de validación ( USP). INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. limite de cuantificación. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. precisión. Parámetros de desempeño Analítico Características de validación que necesitan ser evaluadas y que se relacionan a la exactitud. para generar datos relevantes y adecuados.

Método No Normalizado Es aquel método desarrollado por el propio laboratorio y otras partes.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Método Normalizado Es aquel método desarrollado por un Organismo de Normalización u otras organizaciones y que son aceptados por el sector técnico involucrado (INDECOPI. métodos de fabricantes de equipos. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -6- . ASTM. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. o que ha sido modificado a partir de una norma (métodos publicados en revistas técnicas.). métodos que utilizan “Kits”). INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. etc. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. AOAC.APHA. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

5 establece que el laboratorio debe validar: – Métodos no normalizados.4. el procedimiento utilizado y una declaración de si el método es adecuado para el uso propuesto. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Validación como requisito de la ISO/IEC 17025 Establece asimismo que la validación debe: – Ser tan extensiva como sea necesario para satisfacer las necesidades de aplicación. – Registrar los resultados obtenidos. – Métodos diseñados/desarrollados por el laboratorio – Métodos normalizados utilizados fuera del alcance previsto.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Validación como requisito de la ISO/IEC 17025 En el apartado 5. – Ampliaciones y modificaciones de métodos normalizados INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -7- . INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

robustez etc. límite de detección. límite de repetibilidad y/o reproducibilidad.). Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. transporte. • Comparaciones interlaboratorios. – Empleo de técnicas para determinar los parámetros de desempeño del método como: • Uso de materiales o patrones de referencia. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -8- . • Comparación de los resultados con otros métodos de ensayo. manipuleo. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Validación como requisito de la ISO/IEC 17025 Asimismo debe declarar: – Rango y exactitud de los valores (parámetros de desempeño) que se obtienen de los métodos validados (incertidumbre. selectividad del método. Validación como requisito de la ISO/IEC 17025 El requisito sugiere que la validación incluya: – Procedimientos para el muestreo. así como la evaluación para el uso propuesto deben ser pertinentes a las necesidades de los clientes. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. linealidad.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. la funcionalidad del método para las aplicaciones analíticas propuestas. La determinación de las características de los métodos.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Validación como requisito de la ISO/IEC 17025 – – – – • Evaluación de la incertidumbre. Además se debe validar un método cuando es necesario verificar que sus parámetros de desempeño son adecuados para ser utilizados en un problema analítico específico. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. un tratamiento estadístico apropiado y unos criterios de aceptación. Especificación de los requisitos. La validación incluya una declaración sobre la validez. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. como también obtener evidencia documentada del procedimiento seguido. Verificación de que los requisitos pueden cumplirse con el método usado. Para qué validar Para demostrar experimentalmente. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -9- .

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -10- .Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 ¿Cuándo es necesario validar un método? Un método de ensayo debe ser validado cuando es necesario verificar que los parámetros ejecutados son los adecuados para resolver un problema analítico en particular. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Estas categorías son las siguientes: – Categoría I. Esquemas de Validación Considerando la variedad de ensayos. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Los métodos analíticos para la cuantificación de componentes mayores de aditivos en alimentos o ingredientes activos (incluyendo preservantes). es lógico que diferentes métodos de ensayo adquieran diferentes esquemas de validación.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Los métodos analíticos para la determinación de impurezas en aditivos para alimentos o componentes de degradación en productos terminados. Pruebas de Identificación. Para cada categoría de ensayo hay diferente información analítica que se requiere. Estos métodos incluyen ensayos cuantitativos y ensayos de límite (contaminante. Esquemas de Validación – Categoría IV. punto de fusión análisis semicuantitativos). Métodos analíticos para la determinación de características llevadas a cabo (ejm: solubilidad. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. – Categoría III.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Esquemas de Validación – Categoría II. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -11- . INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. conservadores). Lo que se menciona en la tabla siguiente son datos de elementos que son normalmente requeridos para cada una de las categorías ( según USP). INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.

Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Elementos requeridos para los ensayos de Validación Parámetros analíticos Exactitud Precisión Especificidad Límite de detección Límite de cuantificación Linealidad Rango Robustez Categoría II Categoría I Sí Sí Sí No No Sí Sí Sí Cuantitativo Sí Sí Sí No Sí Sí Sí Sí Ensayos de Límite * No Sí Sí No No * Sí Categoría III Categoría IV * Sí * * * * * Sí No No Sí No No No No Sí INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. CUANTIFICACIÓN ROBUSTEZ X X X X Determinación Análisis de contenidos de trazas X X X X X X X X X X X X Parámetro físico-químicos X X X INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -12- . Parámetros que deben comprobarse en la validación de métodos analíticos según el objetivo de los mismos dado por la AOAC * Cualitativo EXACTITUD PRECISIÓN LINEALIDAD SELECTIVIDAD L. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Elementos requeridos para los ensayos de Validación * Puede ser requerido. dependiendo de la naturaleza del ensayo específico. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. DETECCIÓN L.

Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Validación ¿Qué parámetros se deben evaluar? – Especificidad – Rango de trabajo y rango lineal – Límite de detección – Límite de cuantificación – Exactitud – Precisión: Repetibilidad Precisión intermedia Reproducibilidad INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -13- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Validación – – – – Robustez (“Robustness”) Fortaleza (“Ruggedness”) Recuperación Adecuación del sistema (“System suitability”) INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Criterios de Validación El rango. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. riesgos y posibilidades técnicas. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -14- . Criterios de Validación Las características de funcionamiento de un método analítico comprenden todos los datos y resultados experimentales que demuestran su aptitud para el uso al que se destina. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. la exactitud y la precisión de los valores obtenidos debe estar de acuerdo con las necesidades del cliente – La validación incluye especificación de los requerimientos. – La validación es siempre un balance entre costos.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. y de los que derivan los parámetros de validación. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -15- .Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Criterios de Validación Se consideran los siguientes grupos de características de funcionamiento: – Fiabilidad – Practicabilidad – Idoneidad INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. no necesariamente aplicables en todos los casos. Características de Fiabilidad Son las que demuestran la capacidad del método analítico para mantener a lo largo del tiempo los criterios fundamentales de validación.

Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -16- . Fiabilidad Dispersión de una serie de resultados alrededor del valor medio o central es decir el “ mas –menos” de un procedimiento analítico. Se relaciona con los siguientes parámetros: – Precisión – Repetibilidad – Reproducibilidad – Robustez INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Fiabilidad Proporcionalidad entre concentración del analito y respuesta del instrumento. Este concepto se relaciona con los parámetros de: – Linealidad – Intervalo o rango – Sensibilidad INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Fiabilidad Cantidad mínima de analito requerida para obtener un resultado significativo. relacionado a: – Exactitud – Recuperación INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. relacionado con los parámetros de: – Sensibilidad – Limite de detección – Limite de cuantificación INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Fiabilidad Diferencia entre el valor hallado en el análisis y el valor verdadero. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -17- .

tamaño de la muestra. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Practicabilidad La practicabilidad se evalúa en la fase de desarrollo del método analítico: tiempo. excipientes u otras sustancias presentes en la muestra. tipo de equipo o instrumentación. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Concepto relacionado con los parámetros de: – Selectividad – Especificidad INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -18- . productos de degradación.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Fiabilidad Capacidad de un método para determinar el analito sin interferencias de impurezas. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. condiciones de seguridad etc. costo.

Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -19- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Procedimientos de Validación Validación prospectiva: se aplica cuando se elabora un nuevo método. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Validación retrospectiva: Métodos no validados previamente y de los que se tiene un record de resultados.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Idoneidad El termino idoneidad se aplica al conjunto de parámetros relacionados con la verificación del buen funcionamiento de los instrumentos. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Revalidación : Se aplica cuando en un método analítico previamente validado se ha introducido un cambio significativo.

Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Actividades previas a la Validación • Referidas a los factores que afectan la exactitud y confiabilidad de los resultados de la validación: • Factores humanos ( competencias) • Instalaciones y condiciones ambientales ( controles). Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -20- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. • Mantenimiento de computadoras y equipos automatizados asegurando que funcionen adecuadamente. • otros INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. manipuleo. almacenamiento) INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Actividades previas a la validación • Disponer del equipo necesario ( calibrados y verificados). transporte. • Métodos y procedimientos definidos ( muestreo.

se sugiere una secuencia de trabajo como la que se muestra a continuación: – Definir el objetivo y campo de aplicación del método. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -21- . la disponibilidad de muestras matrices estables homogéneas y en la cantidad suficiente para ser utilizadas a lo largo del estudio de validación. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. aparatos y reactivos en un periodo de una semana a dos semanas. – El método analítico debe ser claro y establecido al inicio de los análisis. – La validación es realizada por un mismo analista usando el mismo equipo. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. – Definir los parámetros de validación y criterios de aceptación (de dichos parámetros). Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Planeamiento de Validación – Un pre-requisito esencial para el éxito de la validación.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Planeamiento de Validación La planificación y grado de control sobre los factores que influyen en los análisis deben ser establecidos desde el inicio y mantenidos rigurosamente.

– Ajustar los parámetros de validación del método y los criterios de aceptación. – Ejecutar los ensayos para los parámetros considerados en la validación. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. – Verificar si las características de operación de los equipos con los que cuenta el laboratorio son compatibles con las exigidas por el método de estudio. por ejemplo. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. – Verificar las condiciones de operación y performance del equipo a usarse. Planeamiento de Validación – Caracterizar los materiales.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Planeamiento de Validación – Definir los ensayos a efectuarse en la validación. – Preparar las descripción del método validado. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -22- . INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. si es necesario. patrones y reactivos.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. etc. condiciones ambientales. – Reportes de resultados. equipos. Los ensayos y los resultados deben ser documentados y registrados.) – Definir tipo y frecuencia de verificación de control de calidad analítica de rutina. – Método de ensayo objeto de la validación – Procedimiento de operación normalizado. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -23- . Documentación de la Validación La documentación esta referida a: – Plan de validación – Protocolo de validación incluye declaración del método validado. – Evaluación estadística INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Planeamiento de Validación – Definir criterios de revalidación (por ejemplo: periodicidad. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. cambios de personal. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.

Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -24- . – Registros de las soluciones – Informe de la incertidumbre del método. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Documentación de la Validación – Certificados de calibración y /o de verificación de los equipos empleados. – Verificación del material de vidrio – Certificados de los estándares y/o material de referencia. Precisión Es el grado de concordancia entre resultados individuales. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Se pueden considerar en tres niveles: – Repetibilidad – Precisión intermedia – Reproducibilidad INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. cuando el método de análisis se aplica repetidamente a diferentes muestras a partir de una muestra homogénea.

INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Repetir tres veces (como mínimo) en un intervalo corto de tiempo. Determinar la desviación estándar de los resultados.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Repetibilidad Expresa la precisión de los resultados de las mediciones del mismo analito. la precisión en condiciones de repetibilidad e involucra: – Mismo laboratorio – Mismo equipamiento – Un único analista – Mismo método – Misma muestra – Intervalos cortos de tiempo INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Teniendo en cuenta: Realizar un mínimo de 10 mediciones. ” Repetibilidad Puede determinarse de una manera interna en el laboratorio. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -25- .

Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -26- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Precisión intermedia Es la precisión en condiciones de precisión intermedia: – Mismo laboratorio – El equipamiento puede ser el mismo o pueden emplearse otros equipos – Distintos analistas – Mismo método – Misma muestra – Intervalos de tiempo mayores que para “r” INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Reproducibilidad Es la precisión en condiciones de reproducibilidad e involucra: – Distinto laboratorio – Diferente equipamiento – Distintos analistas – Mismo método – Misma muestra – Intervalos de tiempo largos Reproducibilidad →Ensayos interlaboratorios INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

= 2.D. = diferencia crítica S r = desviación estándar de los datos del laboratorio (de los dos analistas ) n1 = N º de datos del primer analista n2 = N º de datos del segundo analista INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. ∑(X S ri = i =1 n i = X )2 n −1 S ri = desviación estándar de un laboratorio o un analista X i = datos en los ensayos X = promedio de todos los datos obtenidos en el ensayo INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Precisión El estimador estadístico de la precisión es la desviación estándar (S) la cual normalmente se expresa como desviación estándar relativa o coeficiente de variación (CV).D.8 × S r 1 1 + K K K K K K (1) 2n1 2n2 C. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -27- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Precisión Cálculo de coeficiente de variación: CV = Limite de repetibilidad (r): Diferencia critica entre analistas para determinar la repetibilidad del metodo. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. S ri ×100 X r= C.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.8 × + CM (d . l ) CM (e. l ) n INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -28- .  1 1  − R = CD = 2. l ) − CM (d .8 × ( R) 2 − (r ) 2 1 −  2n 2 n   1 2   (r ) = 2.8 × CM (d .Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Precisión Este criterio se acepta si la diferencia crítica es mayor o igual a la diferencia absoluta de las medias entre los dos analistas C. ≥ y1 − y2 Si los analistas no son comparables usar la siguiente ecuación: Sr = (n1 − 1)S12 + (n2 − 1)S 22 ×1  1 n1 + n2 − 2 1 n + n  2  1 S12 = deviación estándar del primer analista al cuadrado 2 S 2 = deviación estándar del segundo analista al cuadrado n = número de datos INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. l ) ( R) = 2. Limite de reproducibilidad Diferencia critica entre laboratorios para determinar la reproducibilidad del método.D.

D. l ) = cuadrado medio del entre laboratorios CM ( d . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. C. ≥ y1 − y2 INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Limite de reproducibilidad El criterio se acepta si la diferencia critica es mayor o igual a la diferencia absoluta de las medias entre los dos laboratorios. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -29- . l ) = cuadrado medio del error dentro de cada laboratorio n1 = número de datos del laboratorio " A" n2 = número de datos del laboratorio " B" INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Limite de reproducibilidad Donde : CD = diferencia critica de reproducibilidad 95% ( r ) = desviación estándar de repetibilidad dentro de cada laboratorio ( R) = desviación estándar de reproducibilidad entre laboratorios (entre analistas ) CM (e.

Exactitud expresa la cercanía de un resultado verdadero.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Ejercicio Calculo de: – Precisión – Precisión intermedia – Reproducibilidad INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. al valor verdadero). Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -30- . – Exactitud de un método (sesgo) expresa la cercanía de la media de un conjunto de resultados (producido por ese método. Exactitud Exactitud es el grado de concordancia entre el resultado de un ensayo y el valor aceptado como referencia.

que se obtiene al aplicar el ensayo luego de agregar a la muestra cantidades conocidas de analito. Exactitud Generalmente se expresa la exactitud en función del porcentaje de recuperación.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Exactitud Es la diferencia entre el valor de la concentración considerada verdadera y el valor experimental. 3 replicas por cada nivel. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. incluye una combinación de errores aleatorios y sistemáticos. Se recomienda usar un mínimo de 9 determinaciones sobre 3 niveles de concentración. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -31- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. cuando se aplica el método varias veces a diferentes muestras. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Exactitud Se calcula de la siguiente manera: Recuperación (%) = (C1 − C2 ) / C3 × 100 Donde : C1 = concentración determinada en muestra fortificada C2 = concentración determinada en muestra no fortificada C3 = concentración de la fortificación Se establece el rango de aceptación para el porcentaje de recuperación por ejemplo: 95% ≤ R ≤ 105% INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -32- . Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. ¿Cómo se evalúa la Exactitud? Como sesgo (bias ) Sg = X obs − Vverd Como recuperación %R = X obs ×100 X verd INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.

Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Comparar con un método de referencia Comparar con resultados obtenidos en un ensayo de aptitud Utilizar pruebas estadísticas para evaluar las diferencias. Veracidad Grado de concordancia entre el promedio de un serie grande de resultados y el valor de referencia. Exactitud = Veracidad + Precisión INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Exactitud Manera de determinar la exactitud: Analizar materiales de referencia certificados. Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -33- . – La validación de métodos de ensayo busca cuantificar la exactitud de los resultados evaluando los efectos de los errores aleatorios y sistemáticos sobre los resultados. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.

Instituto para la Calidad Pontificia Universidad Católica del Perú -34- . Ejercicio • Determinación de exactitud INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009.Profesor: Lupe Ognio De Muscari / Pablo Cárdenas Zambrana Curso: Validación de Métodos de Ensayo Diplomado Gestión de la Calidad en Laboratorios de Ensayos y/o Calibración ISO/IEC 17025:2005 Precisión Alta Baja Baja Veracidad Inexacto Inexacto Alta Exacto Inexacto INSTITUTO PARA LA CALIDAD © 2009. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú. Prohibida su reproducción total o parcial sin permiso del autor y del Instituto para la Calidad de la Pontificia Universidad Católica del Perú.