Universidade Federal de So Joo Del-Rey Engenharia de Bioprocessos

Relatrio para preparo de soluo tampo Thamara Carvalho Coutinho

Ouro Branco, maro de 2010

Resumo Nessa prtica foram preparadas duas solues tampo. Uma soluo fosfato 0,12M pH 7 e uma soluo carbonato- bicarbonato 0,15M pH 10. Para isso foram calculadas as quantidades de cido e base conjugadas necessrias para cada tampo. Mediu- se o pH das solues. Adicionou- se em cada uma delas 0.2mL de HCl 1M e 0,2mL de NaOH de maneira a verificar se houve mudana no pH. Foi observado que no houve variao no pH do tampo. Para fazer uma comparao com o efeito tampo foi adicionado as mesmas quantidades de cido e bases conjugadas em 50mL de gua. Mediu- se o pH e observou se que este foi o esperado para uma soluo que no tem comportamente tampo, ou seja, pH cido e pH fraco.

Introduo Quase todo processo biolgico dependente do pH, uma pequena alterao pode causar uma grande alterao na velocidade do processo. Tampo so sistemas aquosos que tendem a resistir as alteraes no pH quando pequenas quantidades de cido ou base so adicionados. Um sistema tampo consiste de um cido fraco(doador de prtons) e sua base conjugada(receptor de prtons). [1] Cada cido possui uma tendncia caracterstica de perder seu prton em uma soluo aquosa. Quanto mais forte o cido, maior a tendncia de perder seu prton. A tendncia de qualquer cido(HA) de perder um prton e formar sua base conjugada (A-) definida pela constante de equilbrio (Keq) para a equao reversvel: HAH+ + A- que Keq= [H+][A-] = Ka [HA] As constantes de equilbrio para as reaes de inonizao so usualmente chamadas de constante de dissociao, designadas por Ka. [1] Pode- se expressar, portanto, o valor do pKa, anlogos ao pH definido pela equao: pKa= log 1 = -logKa k Quanto menor a tendncia de se dissociar um prton, como nos cidos fracos, maior o valor de seu pKa. O pKa de qualquer cido fraco pode ser determinado facilmente a partir das curvas de titulao desses cidos. [1] As curvas de titulao dos cidos fracos apresentam formas aproximadamente idnticas sugerindo uma relao fundamental que dada pela equao de HendersonHasselbach: pH= pKa + log [A-] ,onde [A-] o aceptor de eltrons e [HA] o doador de eltrons. [HA] No ponto mdio da regio de tamponamento, onde a concentrao cido igual concentrao da base conjugada, o poder tamponante do sistema mximo. Nesse ponto [HA] igual a [A-]. Logo, o pKa de um cido fraco igual ao pH da soluo no ponto mdio da titulao: pH= pKa + log 1 = pKa + 0 = pKa O tamponamento resulta do equilbrio de duas reaes reversveis que ocorrem em uma soluo prxima s concentraes iguais de um doador de prtons e seu receptor de prtons conjugado. Toda vez que H+ e OH- for adicionados a um tampo acontece uma pequena alterao na razo das concentraes relativas de um cido fraco e deu nion, e portanto uma pequena alterao no pH. [1] Cada par conjugado possui uma zona de pH caracterstica onde ela um tampo efetivo. Objetivo Preparar solues tampo e verificar a capacidade tamponante.

Materiais e mtodos Para esse prtica foi utilizado fosfato de sdio monobsico, fosfato de sdio dibsico, carbonato de sdio, bicarbonato de sdio, soluo 1M de HCl, soluo 1M de NaOH, gua, potencimetro, dois bquers, duas pipetas, dois bales, uma barra magntica. Foi realizado dois experimentos. No primeiro, inicialmente foi calculado a quantidade de fosfato de sdio monobsico e de fosfato de sdio dibsico para preparar 100mL de tampo fosfato 0,12mol/L pH 7. No segundo experimento inicialmente foi calculado a quantidade de carbonato de sdio e bicarbonato de sdio para realizar 100mL de tampo carbonato-bicarbonato 0,15mol/L pH 10. As quantidades de cido e base conjugadas para cada tampo foram medidas em balana apropriada. Cada espcie foi colocada em um bquer e adicionados em cada um 50mL de gua. Juntou- se as solues de cido e bases conjugadas e elas foram homogeinizadas com barra magntica. Depois de preparado 100mL de cada tampo foi medido em potencimetro os valores de seu pH. Verificou- se se era igual o pH terico, se no ajustou- o. Foi adicionado em cada bquer contendo 50mL de tampo 0,2mL de HCl e verificado o seu pH. Foi adicionado em cada bquer contendo 50mL de tampo 0,2mL de NaOH e verificado o seu pH. Foi adicionado 0,2mL HCl mol/L em um bquer contendo 50mL de gua e verificado o seu pH. Foi adicionado 0,2mL de NaOH em um bquer contendo 50mL de gua e verificado o seu pH. Resultados e Discusso Foi preparado 100mL de tampo fosfato 0,12M pH 7,0. Para isso foi calculado as quantidades de fosfato de sdio monobsico (NaH2PO4.H2O) e fosfato sdio dibsico (NaHPO4.H2O) necessrias para a soluo: NaH2PO4.H2O NaHPO4.H2O HA A[HA] + [A-] = 0,12 M (1) A partir da equao Henderson- Hasselbach e sabendo- se que o pKa = 7,2, temse: pH= pKa + log [A-] [HA] 7 = 7,2 + log [A-] [HA] -0,2 = log [A-] [HA] 10-0,2 = [A-] [HA] [A- ] = 0,63 [HA] (2)

Substituindo (2) em (1) tem- se: [HA] + 0,63[HA] = 0,12 [HA] = 0,12 = 0,074 M 1,63 Substituindo [HA] na equao (1), tem- se: 0,074 + [A- ] = 0,12 [A- ] = 0,046 M A quantidade em g do cido e da base conjugada foi obtida multiplicando as concentraes pelas respectivas massas molares. A massa molar do NaH2PO4.H2O 138 g/mol e a do Na2HPO4.H2O 141,96 g/mol, logo: [HA] = NaH2PO4.H2O = 0,074 M * 138g/mol = 10,212 g [A- ] = Na2HPO4.H2O = 0,046 M * 141,96 g/mol = 6,5 g Esses valores so para 1L de gua. Como a soluo para apenas 100mL a massas para o fosfato de sdio monobsico 1,02 g e para o fosfato de sdio dibsico 0,65g. A soluo foi preparada e o seu pH foi medido em potencimetro e obtido o valor 6,54. Esse valor foi ajustado para 7,0 com adio da base NaOH. Foram adicionados 0,2 mL de HCl 1M em 50mL da soluo e medido o seu pH. O pH encontrado 6,96. O valor esperado foi encontrado atravs da equao HendersonHasselbach: pH= pKa + log [A-] [HA] Porm, com a adio do cido clordrico as concentraes do cido e da base conjugada foram alteradas pois houve um aumento de ons H+ e um consumo de on OHem soluo. A concentrao do HCl 1M, ou seja, um mol para 1000mL. Foram adicionados 0,2mL de HCl, ento sua concentrao : 1 mol ------------- 1000mL x-------------------0,2mL x = 0,0002 mols As novas concentraes de cido e base conjugada so: [HA ] = 0,074 + 0,0002 = 0,0742 [A-]= 0,046 0,0002 = 0,0458 O valor de pH esperado : pH= 7,2 + log 0,0458 0,0742 pH= 6,99

Tambm foram adicionados 0,2 mL de NaOH 1mol/L em 50mL da soluo e medido o seu pH. O pH encontrado 7,06. De maneira anloga o valor esperado seria encontrado da seguinte maneira: [HA ] = 0,074 - 0,0002 = 0,0738 [A-]= 0,046 + 0,0002 = 0,0462 pH= pKa + log [A-] [HA] pH= 7,2 + log 0,0462 0,0738 pH= 6,99 A funo de uma soluo tampo a de no alterar muito o pH quando se adiciona pequenas quantidades de cido ou base. O tampo fosfato comprovou esse efeito uma vez que o pH medido e calculado se aproximou bastante do pH sem a adio do cido e da base. Tambm foi preparada 100mL de soluo tampo carbonato- bicarbonato, 0,15M pH 10 . Para isso,calculou se as quantidades de Na2CO3 e NaHCO3 necessrias: NaHCO3 Na2CO3 HA AHA + A- = 0,15M (3) Usando a equao Henderson- Hasselbach e sabendo- se que o pKa = 10,3, temse: pH= pKa + log [A-] [HA] 10 = 10,3 + log [A-] [HA] -0,3 = log [A-] [HA] [A- ] = 0,501 [HA] (4) Substituindo (4) em (3) tem- se: [HA] + 0,501[HA] = 0,15 [HA] = 0,15 = 0,099 M 1,501 Multiplicando esse valor pela massa molar do bicarbonato de sdio que 84,01g/mol, encontra- se a massa de bicarbonato de sdio necessria para o tampo, 8,316 g. Substituindo [HA] na equao (3), tem- se: 0,099 + A- = 0,15 A- = 0,051M

Multiplicando esse valor pela massa molar do carbonato de sdio que 105,99g/mol, encontra- se a massa deste necessria para o tampo, 5,405 g. Como a soluo para 100mL, ento as massas de bicarbonato de sdio e carbonato de sdio so respectivamente, 0,8316g e 0,54g. Depois de preparada a soluo tampo carbonato bicarbonato, foi medido o pH da soluo. O pH encontrado foi 9,6 e por isso ajustou- o para 10. A prxima etapa foi adicionar 0,2 mL de HCl 1 M em 50mL da soluo tampo. O pH medido em potencimetro foi 9,4. O valor esperado calculado atravs da equao de Herdenson- Hasselbach, porm com os valores das concentraes do cido e da base conjugada modificados: [HA ] = 0,099 + 0,0002 = 0,0992 [A-]= 0,0501 - 0,0002 = 0,0499 pH= pKa + log [A-] [HA] 10= 10,3 + log 0,0499 0,0992 pH= 10,0 Adicionou- se tambm em 50mL do tampo 0,2mL de NaOH 1mol/L. O pH medido foi 10,5. De maneira anloga, calculou- se o pH terico esperado: [HA ] = 0,099 - 0,0002 = 0,0988 [A-]= 0,0501 + 0,0002 = 0,0503 pH= pKa + log [A-] [HA] pH= 10,3 + log 0,0503 0,0988 pH= 10,0 Esses valores calculados comprovam novamente o efeito da soluo tampo. Foi preparado tambm uma soluo cida e uma alcalina para comparar os valores do pH com o do tampo. As mesmas quantidades de HCl e NaOH inseridas no tampo tambm foram adicionados em 50mL de gua. O valor medido do pH para a soluo cida (HCl) foi 3,6 e o valor calculado foi: HCl + H2O= H3O+ + Cl[H+] = 0,0002 pH = - log [H+] pH= - log[0,0002] = - ( -3,69) = 3,69 O valor obtido na medio do pH da soluo bsica (NaOH) foi 11,2 e o valor calculado foi: NaOH + H2O = Na+ + OH[OH-] = 0,0002 pOH= -log [0,0002] = 3,69 pH + pOH = 14

pH = 14 3,69 = 10,31 Foi observado uma pequena variao entre os pHs medidos e os pHs calculados. Isso pode ser explicado por pequenas alteraes ou erros ocorridos nas medidas de cada espcies nas solues. A tabela 1 compara esses valores. Soluo Tampo fosfato Tampo carbonatobicarbonato Tampo fosfato com HCl Tampo fosfato com NaOH Tampo carbonatobicarbonato com HCl Tampo carbonatobicarbonato com NaOH Tabela 1 Concluso Pode se dizer que as solues tampo preparadas se comportaram de maneira esperada. No houve variao no pH das solues em presena de pequenas quantidades de cido, por exemplo, pois a pequena quantidade de H+ somada com a concentrao do cido e subtrada da concentrao da base conjugada uma vez que o H+ ir reagir com seus ons OH-. Ou seja, o aumento de um compensa a diminuio de outro e por isso, no h variao no pH. J nas solues de cido e base no ocorreu esse processo, mesmo quando pequenas quantidades foram adicionadas. Tratando-se de cido e base fortes todo o H+ e OH- se dissociou em soluo contribuindo para um pH cido e fraco respectivamente. Bibliografia [1] LEHNINGUER, A. L.; NELSON, D. L.; COX, M. M. Princpios de Bioqumica. 4ed. So Paulo: Sarvier; 2006. 1202 p. pH experimental 6,54 9,6 6,96 7,06 9,4 10,5 pH terico 7,0 10 6,99 6,99 10,0 10,0