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REVISTA INSTITUCIONAL DEL GRUPO EMPRESARIAL DE PRODUCCIONES BIOFARMACEÚTICAS Y QUÍMICAS, LABIOFAM No.

1 / 2010

CITOTOXICIDAD DEL VENENO DEL ESCORPIÓN CUBANO RHOPALURUS JUNCEUS SUPLEMENTO NUTRICIONAL

EFECTIVIDAD COMPARATIVA DEL BACILLUS THURINGIENSIS VAR. ISRAELENSIS Y TEMEPHOS

SUMARIO
4 camino, evidentes resultados Largo 7 de la producción nacional de Importancia
productos biológicos para la sostenibilidad de los programas de control, en la prevención de epizootias.

No. 1 /2010

Revista del Grupo Empresarial de Producciones Biofarmaceúticas y Químicas, LABIOFAM

PRODUCTOSNATURALES
Rhopalurus 12 Citotoxicidad del veneno del escorpión cubanohumanas. junceus y sus fracciones sobre líneas celulares tumorales polvo de 20 Evaluación de la seguridad toxicológica delACITAN .pseudotallo de Musa paradisiaca: Suplemento nutricional
®

del extracto 30 Genotoxicidadratón. acuoso del Solanum torvum Sw en células germinales de 36 VIMANG

SALUDANIMAL
como 40 Evaluación del uso de los liposomas contra la adyuvantes de una vacuna de ADN enfermedad de gumboro.

CONTROLDEVECTORES
operacional de biolarvicidas 68 Usoculícidos en Mariel y Bejucal. en el control de la productividad 74 Incremento dedel Bactivec . en el proceso de obtención 80 Uso operacional del rodenticida biológico BIORAT en Malabo, Bata y Annobón. Guinea
® ®

48

Obtención y evaluación de un candidato vacunal contra la Paramixovirosis de las palomas empleando la cepa La Sota del virus de Newcastle inactivado. Evaluación de una cepa vacunal contra la Peste Porcina Clásica.

56 de 62 Evaluación toxicológicapara la Gentamicina infusión intramamaria uso veterinario.
LA BIO FAM

Ecuatorial, 2008.

84 Utilización de larvicidas biológicos enycontrol integral de los vectores de la malaria otras
enfermedades en Accra metropolitana, Ghana

90 Efectividad comparativa del Bacillus thuringiensis var. israelensis y Temephos contra larvas de
Aedes aegypti en el municipio de Uberlândia

REPORTEDECASO

97 Bacterias que brindan salud 100 Efecto terapéutico del veneno del escorpión Rhopalurus
junceus en pacientes con cáncer de páncreas

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104 Recomendaciones a los autores.

DIRECTOR GENERAL: DR. JOSÉ ANTONIO FRAGA CASTRO. DIRECTORES EJECUTIVOS:ING. ISBEL GONZÁLEZ MARRERO, LIC. JUANA NAVARRETE MENDOZA. COMITÉ DE REDACCIÓN: DR. DORA RODRÍGUEZ SÁNCHEZ, PROF. MERCEDES RODRÍGUEZ EDREIRA, DR. DIGNA CONTRERAS GONZÁLEZ. CORRECCIÓN DE ESTILO: LIC. LEYDA LAGUARDIA ESQUIVEL, ING. YANELIS RIQUENES GARLOBO. ASISTENTE: LIC. YAITEL GONZÁLEZ IGLESIAS. DISEÑO GRÁFICO: MIGUEL GUERRERO ESCALONA, MAURICIO ZAYAS LIMA. TRADUCCIÓN: LIC. YENISE LONGO OLIVA. : CONSEJO CIENTÍFICO ASESOR: MSC. TATIANA MOLIER LEMUS, MSC. RAISELYS TOIRAC PROENZA, DR. GRISEL MONTERO LAGO, LIC. REINALDO GONZÁLEZ BERGARA, LIC. ROSARIO CARRERO SUÁREZ, DR. MARIELA GUEVARA GARCÍA, LIC. LILIAM LEE HERNÁNDEZ, MSC. VALIA VÁZQUEZ PITA, LIC. ARAMIS MARTÍNEZ ARIAS, LIC. ARAMIS RIVERO GUERRERO, LIC. CARIDAD RODRÍGUEZ TORRES, MSC. IRANIA GUEVARA ORELLANES, DR. M.V. HENRY A. TAIT HERNÁNDEZ. GRUPO EMPRESARIAL DE PRODUCCIONES BIOFARMACEÚTICAS Y QUÍMICAS, LABIOFAM AVE. INDEPENDENCIA KM 16 ½. BOYEROS, CIUDAD DE LA HABANA, CUBA. TELF.: +537 683 0326 / 683 0391. FAX: +537 683 0326. LABIOFAM@CENIAI.INF.CU IMPRESIÓN: INVERPRINT Ltda.

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otras propuestas le permitirán. La seriedad y constancia en el cumplimiento de esta tarea primigenia nos permite mostrar. sin embargo. con sus resultados y aplicación práctica será mostrada al mundo en las sesiones de diálogo y sana confrontación que organiza esta cita científica de carácter internacional. La historia de la institución científica que auspicia el evento converge con algunos de esos grandes retos que vivió esta pequeña isla del Caribe.EDITORIAL omienza hoy. En sus páginas podrá encontrar varias de las temáticas que serán analizadas durante el encuentro con un enfoque científico. Y en esta jornada en la que se inicia tan significativo Congreso. nace también esta Revista institucional. C Dr. esos que han motivado la investigación y desarrollo de vacunas y métodos diagnósticos. la erradicación de epidemias y enfermedades dentro del sector veterinario de nuestro país. Mas. Es sana ambición de todos los funcionarios. evento que marca la consolidación de casi medio siglo de trabajo a favor de la salud animal en Cuba. especialistas. 28 de septiembre. Cada una de las áreas de estudio. ampliar su visión acerca del Grupo Empresarial LABIOFAM. entre los grandes logros del Grupo Empresarial LABIOFAM. investigadores. los nuevos tiempos marcan el camino hacia otros derroteros. Enfrentar una guerra biológica bajo difíciles circunstancias ilustra la abnegación de un grupo de profesionales para neutralizar las agresiones enemigas. suplementos alimenticios para consumo humano. productos biológicos vinculados al control vectorial. desde una perspectiva diferente. técnicos y obreros de nuestros centros de investigaciones que las próximas jornadas. José Antonio FrAgA CAstro DireCtor generAl . el Primer Congreso Internacional LABIOFAM 2010. con sus debates y análisis. todas una amplia gama de productos y servicios que responden a los requerimientos de calidad que la industria de medicamentos exige. propicien las condiciones para fortalecer la misión del Grupo Empresarial LABIOFAM: ofrecer salud al hombre y a la masa animal.

vacunas contra el Ántrax y el Carbunco Sintomático. A partir de ese momento varios Departamentos asumieron la elaboración de suero anticolérico porcino. el Laboratorio cambió su nombre por Estación Biopatológica. entre sus muchos logros. Los bioplaguicidas cubanos. alcanzando . A sólo 8 años de creado. el dengue y la leptospira.G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M EVIDENTES RESULTADOS LARGO CAMINO. La obligada evolución de aquella idea primigenia que por decreto presi- dencial del entonces mandatario cubano Gerardo Machado. la investigación y diagnóstico de animales enfermos o fallecidos y uno dedicado a la administración y la contaduría. Caracterizada por un pobre equipamiento de procedencia española. A Feliberto MohAr hernánDez Dr. el proveer de medicamentos y vacunas al 100 % de nuestra masa animal. norteamericana y nacional. Bactivec y Griselesf motiven hoy la presencia de colaboradores cubanos en varias naciones del mundo con el solidario y humano propósito de salvar vidas. contribuyen al control de vectores trasmisores de enfermedades como la malaria. rAFAel PolAnCo Pérez liliAn lee hernánDez rduo y sostenido trabajo signa el largo camino recorrido por una institución científica cubana que hoy muestra. El Grupo Empresarial LABIOFAM ha hecho posible la erradicación de numerosas enfermedades y plagas en el campo de la veterinaria. la Estación elaboró hasta 10 productos. lo cual repercute favorablemente en el sector económico. dejó constituido el 30 de junio de 1927 los Laboratorios Biológicos de Santiago de las Vegas. permitió que productos como el Biorat. cuya calidad es reconocida ya a nivel internacional.

Los muchos años de trabajo en el campo de la veterinaria. En esa época a pesar de existir 9 médicos veterinarios. Este crecimiento en la fuerza de trabajo. (figura 2) Sin embargo. desde el punto de vista estructural. Dado el L ABIO FA M 5 . el 15 de julio de 1962. y en 1963 se inició la producción del suero contra el Cólera y Erisipela porcina. nace así la Empresa de Laboratorios de Producción Veterinaria. su máxima producción en el año 1938. el 3 de enero de 1977 la Empresa de Laboratorios de Producción Veterinaria. existieron trascendentes modificaciones. representó un significativo incremento en el número de productos veterinarios. representada por CUBAVET. propias de las condiciones socio-económicas del país. rias afectaciones. el nivel cultural y técnico de sus aproximadamente 46 trabajadores era bajo. las complejas condiciones socio-económicas y las fluctuaciones de la economía mundial en los 90. La nueva empresa extendió su alcance a toda la nación y amplió su visión empresarial más allá de la producción de medicamentos al incorporar su distribución y comercialización a través de las 14 delegaciones provinciales y una red de 117 farmacias. Con posterioridad al año 1938 la producción de biopreparados sufrió seDecreto en el que se disponía la creación de los Laboratorios Biológicos de Santiago de las Vegas para la producción del suero contra el Cólera Porcino y el Laboratorio de Epizootias. la mayoría universitaria. sino que se mantuvo esta situación hasta 1959. Comercio y Trabajo. Con escasos recursos materiales y humanos comenzó la producción de medicamentos biológicos y farmacéuticos desde una perspectiva estatal. Este redimensionamiento gradual en cada una de las plantas productoras repercutió también en el nombre de la hasta entonces CUBAVET.G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M Portada de los Laboratorios Bio-Patológicos de la Sección de Industria Animal de la Secretaría de Agricultura. que cubría el 70% de la demanda nacional. Tal situación no solo provocó la casi desaparición de la exigua producción estatal y privada del país. desde ese instante fue posible envasar medicamentos en ámpulas y bulbos inyectables. Manteniendo su sede originaria. La adquisición de nuevas instalaciones y equipamiento hicieron visible una mejora tecnológica en 1966. las habilidades para desarrollar y producir medicamentos. unido a la introducción de nuevas tecnologías permitieron que CUBAVET elaborara productos de alta calidad que cumplían las exigencias del mercado internacional. En ese momento aproximadamente 100 profesionales de las más variadas especialidades conformaban un equipo de trabajo que llegó a estar integrado por tan sólo 9 personas. dada la creación de laboratorios privados y a la importación de medicamentos de uso veterinario fundamentalmente de los Estados Unidos. que tenían su sede en las instalaciones de la Estación Biopatológica. (figura 1) Pero también. Al triunfar la Revolución se nacionalizaron y fusionaron los laboratorios privados. impusieron la necesidad de diversificar aún más las producciones. adquiere el nombre de Empresa Cubana de Productos Veterinarios.

productos químicos para higiene. Somero recuento vivido aún entre personas que se incorporaron en algún momento de este largo camino y que continúan creyendo en esta institución científica. desarrollo. vacunas..Economía Lic. Pecuario Lic. Incremento productivo desde 1938 hasta 1989 .A. CUBAVET (1977). Química Lic.G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M Dr. Derecho Ing. 200 180 160 Número de productos 169 142 182 140 120 100 80 60 40 20 0 10 1938 1968 82 amplio perfil de las proyecciones. Finanzas y Precios Ing. producción y comercialización. Eléctrico Ing. Sistema Autómatico Ing. Ciencias Farmacéuticas Lic. con la cual se adquirió poder legal y jurídico para extender el campo de acción del Grupo Empresarial más allá de nuestras fronteras. De esta forma se crearon las bases para nuevas producciones como: plaguicidas biológicos. la institución científica comenzó a llamarse Laboratorios Biológicos Farmacéuticos (LABIOFAM). Perfil profesional de la Empresa Cubana de Productos Veterinarios. A partir de este momento las plantas se transformaron en empresas y ellas a su vez se integraron para potencializar las actividades de investigación. Planificación y Economía Nacional Lic. En este proceso de perfeccionamiento se hizo necesaria la creación de la Empresa Comercializadora LABIOFAM S. Industrial Ing. Química Arquitecto Figura 1. Bioquímica Lic. alimentos y envases plásticos. Contabilidad Lic. Palpables son sus muchos logros que se hacen evidentes en un Primer Congreso Internacional nacido del esfuerzo y el sacrificio de varias generaciones. 6 . Medicina Veterinaria Lic. LA BIO FAM 1984 1988 1989 Figura 2. Control Económico Lic. suplementos dietéticos de origen natural. Microbiología Lic. que en el año 2000 adquiriría el nombre por el cual responde actualmente: Grupo Empresarial LABIOFAM. Biología Lic.

desde entonces hasta el presente ha sido considerado como uno de los más importantes impactos económicos en la industria avícola mundial. no obstante. los cuales permiten la sustitución de importaciones y completar el espectro de vacunación de nuestra ganadería y avicultura. Esta enfermedad se ha mantenido bajo control durante casi tres décadas. Canadá.Sospecha de la enfermedad pero no ha sido confirmada. en los dos siguientes meses se afectaron un total de 93 granjas de pollos de engorde y fue necesario enterrar más de 13. Honduras.Presencia de la infección con la presencia de signos clínicos. siDuet gonzález lAbioFAM E l Grupo Empresarial LABIOFAM. de investigar y desarrollar nuevos biológicos de mejor calidad y más económicos. tAniA CAMPos Dr. para asegurar niveles satisfactorios de inmunidad materna en la progenie. la misma se revisa y perfecciona constantemente de acuerdo con la situación LABI O FAM 7 . con un programa de vacunación y medidas de bioseguridad junto a una vigilancia ininterrumpida. Brasil. Colombia. mediante monitoreos que permiten conocer el comportamiento de las aves cuando son vacunadas con virus vivo o inactivado como dosis de reforzamiento. a finales de la década del 70 fue llevada a la práctica una nueva estrategia de inmunización contra la EN con la utilización de una vacuna viva. República Dominicana. En nuestro país el último reporte de la enfermedad de Newcastle se realizó en el año 1982 sin embargo. producida por LABIOFAM. liofilizada. a comienzos del año 2000 se informó un brote de Newcastle producido por una cepa muy virulenta que provocó una mortalidad del 60%. han presentado alguna de estas informaciones: .G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M Importancia de la producción nacional de productos biológicos para la sostenibilidad de los programas de control. las pérdidas se estimaron en 50 millones de USD para los avicultores y otros 25 millones de USD al gobierno. En Cuba. PeDro ACostA liC. . . 88 de los 105 países que reportan a la Organización Internacional de Epizootias (OIE) han descrito la presencia de virus velogénicos de la Enfermedad de Newcastle. Chile. en México.Presencia de la infección pero sin signos clínicos. que la estrategia de inmunización ha sido exitosa. en la prevención de epizootias DrA. VACUNAS Vacuna contra la enfermedad de Newcastle La enfermedad de Newcastle (EN) fue inicialmente conocida en Inglaterra y Java en 1926-1927. Haití. Se ocupa además. XioMArA PeñA DrA. México. se encarga de garantizar la salud animal mediante la elaboración de preparados vacunales y medios diagnósticos de producción nacional.6 millones de aves. Bolivia. sAnDrA Moreno liC. Según el reporte de enfermedades en el tiempo de la OIE los siguientes países del área como Belice. rAiDA CAlDerón liC.Presencia de la infección limitada a ciertas zonas en algún período de los últimos cinco años. Perú y Venezuela. Se puede afirmar. casi simultáneamente. cepa La Sota. para lograr así insertarnos en el mercado internacional. . En los últimos tres años.

(gráfico 1) Vacuna contra la enfermedad de Aujeszky Vacuna contra la Encefalomielitis Equina del Este (EEE) La enfermedad de Aujeszky es provocada por un herpes virus. 2002 14 000 140 000 Hasta la actualidad se han producido más de tres millones de dosis de esta nueva vacuna con buenos resultados (tabla 1). actualmente está controlada la enfermese comenzaron los trabajos experimentales en cultivos celulares. que tiene establecido la avicultura cubana. documentación tecnológica de producción y control. Producción de la vacuna contra la EEE desde el año 2002 embrión de pollo. Este virus es naturalmente y salvajes provocando alta mortalidad. es La EEE es clasificada epidemiológicamente como una virosis (arinfectocontagiosa y afecta a la mayoría de los animales domésticos bovirus) transmitida por artrópodos. ocasionando grandes pérdidas económicas fundamental2008 40 000 400 000 mente en la especie porcina. Desde 1967 medad. un colectivo 1873 se reportó en Cuba los primeros antecedentes clínicos de de especialistas de LABIOFAM obtuvo la vacuna contra esta enferla enfermedad. 2003 56 800 568 000 Hace más de 40 años que no se reportan casos clínicos de la 2004 37 400 374 000 enfermedad en el país. la muerte puede las provincias del país. producidas por LABIOFAM y usadas en la Avicultura Nacional en los años 2006. 20000000 concluyendo todos los estudios en 1993. La infección puede cerdas gestantes. obteniéndose la vacuna inactivada y adyuvada con gel de hidróxido de aluminio de superior calidad a la tradicional en Tabla 1. sobre todo a los animales transmitido a los roedores. En la actualidad Serie 1 2006 32880000 27736000 se producen más de dos millones Serie 2 2007 32880000 43800000 de dosis aplicadas a la especie 2008 68864000 50892000 Serie 3 porcina según los programas de inmunización del Instituto de MeGráfico 1. 2007 y 2008. 2005 32 500 325 000 Vacuna contra la Encefalomiocarditis del cerdo (EMC) La EMC es una enfermedad infectocontagiosa provocada por un 2006 64 400 644 000 cardiovirus que afecta a la mayoría de los animales domésticos y 2007 62 000 620 000 salvajes. Desde 1979 se comenzaron los primeros expe40000000 rimentos para lograr una vacuna que controlara las epizootias. así como CANTIDAD el registro del medicamento y su generalización en todo el país al AÑOS DOSIS DE FRASCOS 100% de la masa equina. Esta enfermedad fue reportada en Cuba por Total 307 900 3 079 000 80000000 LA BIO FAM . manteniéndose y internacional de la enfermedad. el hombre y las aves domésticas. En 1965 provocando una rápida diseminación. Se mantiene además la produccontrolándose con una incidencia muy baja y sin provocar pérdición de vacunas contra la EN. dicina Veterinaria (IMV) con buenos resultados. Esta vacuna es una patente cubana. dad sin provocar grandes pérdidas económicas por estas causas. comenzándose a aplicar en los esquemas de inmunización se comenzó en nuestro país la producción de la vacuna contra nacional para la especie porcina. Cantidad de dosis de vacuna contra la EN.G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M 8 primera vez en 1975. comenzándose su pro0 ducción industrial en LABIOFAM AÑOS DOSIS UTILIZADAS DOSIS PRODUCIDA a partir de 1995. y el virus fue confirmado en 1944. aves. que tienen una alta incidencia en vertebrados por varias especies de mosquito. La enfermedad está difundida a la mayoría de ser inaparente en las aves y roedores salvajes. equinos. además de los abortos. En 1993 se comenzaron los estudios con la línea celular BHK-21 Clon 13. fue reportada por primera vez en Cuba en observarse en los equinos. comenzando a difundirse a la mayoría 60000000 de las provincias. al hombre y otros jóvenes. De una alta incidencia que existió la EEE en embrión de pollo (Polanco y col) y a partir de 1972 en las década del 80 y 90. En 1986. por la alta mortalidad y los abortos que puede producir. En 2002 se concluyen todos los estudios de hasta el 2008. según programa de inmunización das económicas significativas.

Uruguay). Ha permitido contar con un producto de mejor calidad en la red diagnóstica nacional y está incluido en los programas de lucha y control de la enfermedad en otros países como Venezuela. teniendo en cuenta la tendencia en los últimos tiempos a la aplicación de vacunas polivalentes para la inmunización de la masa animal. demostrada por primera vez en 1905. se logró la introducción del Patrón Internacional de Tuber- culina PPD bovina acorde a las exigencias internacionales (1mg/ mL – 32 500 UI/ mL) en la red diagnóstica del país. lo que ha permitido mantener el control de la enfermedad ante la aparición de brotes. Sus consecuencias sanitarias son muy graves debido a que se desarrolla en especies en estrecho contacto con el hombre. por esto su característica de zoonosis. para el mismo se han empleado medios de producción nacional (Rosa Bengala. ya se han producido más de dos millones de dosis en las diferentes combinaciones polivalentes aplicadas a la especie porcina.Aujeszky y en 2001 se concluyeron las vacunas Bivalente Aujeszky – Leptospira y la Trivalente EMC –Aujeszky– Leptospira comenzándose a generalizar a todo el país según los planes de lucha y control del IMV con buenos resultados. con cobertura nacional a todo el rebaño bovino y se ha mantenido hasta la fecha de forma sistemática. En todos los países se realizan actividades de control y de vigilancia y algunos se encuentran ya en la etapa de erradicación (Cuba. que sólo afecta a los équidos (asnos.G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M Vacunas polivalentes En LABIOFAM se comenzaron desde el año 1993 los primeros experimentos para obtener las vacunas polivalentes. Vacuna contra la Brucelosis. Es una enfermedad infecto contagiosa de evolución lenta. la cual se desarrolla con un curso crónico. Anualmente se entregan aproximadamente 7000 frascos. se reportó que la infección tuberculosa en bovinos existe en la mayor parte de los países de la Región de América Latina y el Caribe con importancia variable. entre otros) igualmente producidos en LABIOFAM. es la Tuberculina que actualmente se emplea en el diagnóstico alérgico de la Tuberculosis en bovinos a nivel mundial. el diagnóstico de la presencia de la enfermedad ha sido de vital importancia. siendo el continente americano uno de los más afectados. reportando pérdidas de más de 270 millones de dólares anualmente. de ahí que los afecta también. Costa Rica. En el año 2008 en el III Congreso Latinoamericano de Zoonosis. Juego Diagnóstico de Anemia Infecciosa Equina La Anemia Infecciosa Equina (AIE) es una enfermedad transmisible de origen viral. Prueba Lenta. sino en el resto de los países del área. siendo el único método confiable para la detección de los bovinos tuberculosos. mulas y caballos). La Brucelosis es considerada una de las enfermedades que más daño ocasiona a la economía pecuaria a nivel mundial. El programa de control de la Tuberculosis bovina en Cuba se inició en el año 1964. después de ser analizado y avalado por el Laboratorio de Control Estatal del Instituto de Medicina Veterinaria de Cuba (LCE) y el Servicio Nacional de Sanidad Agroalimentaria de Argentina (SENASA). generalmente presentándose de manera insidiosa luego de un ataque agudo inicial. por LABIOFAM. A nivel mundial existen grandes pérdidas económicas por esta enfermedad. Dentro de este programa se destaca la introducción a nivel nacional de la producción de la vacuna contra la Brucelosis bovina en el año 1996. En 2002. en función de su elevada especificidad y sensibilidad. especialmente concentrada en el ganado lechero. En el año 1998 se obtuvo la vacuna Bivalente contra la EMC. Conjuntamente con la vacunación. En los animales afectados se caracteriza por fiebre intermiten- LABI O FAM 9 . Fijación de Complemento. Panamá. que da lugar a la investigación de 70 000 animales. LABIOFAM SE ENCARGA DE GARANTIZAR LA SALUD ANIMAL E INVESTIGAR Y DESARROLLAR NUEVOS BIOLÓGICOS REACTIVOS PARA DIAGNÓSTICOS Tuberculina PPD El PPD (Derivado Proteico Purificado). Bolivia y República Dominicana. Constituye la piedra angular en el desarrollo exitoso de un programa de lucha contra esta enfermedad. con la finalidad de obtener un producto armonizado y que no solo tuviera utilidad en Cuba. que han garantizado el pesquizaje de todo el ganado bovino a nivel nacional. además del ahorro que ocasionan en materias primas y mano de obra. En nuestro país a raíz del triunfo revolucionario se desarrolló un amplio programa de control y erradicación que permitió declararnos libre de Brucelosis. causada por los microorganismos del género Brucella. entre otras ventajas. resultando de esta forma más económico y práctico los planes de ayuda y control de las enfermedades. Actualmente.

6. Argentina. & ROEHRIG J. Trop. 7. ed. & STALLKNECHT D. Science Update Vaccines To END. Características de las poblaciones de virus velogénicos de Newcastle que circulan en México y sus implicaciones. para evitar la infección a otros equinos. Invest. (1967) Encephalomyocarditis virus infections in Florida. 4. Jr (1970). aves y abejas) OIE 5ta edición 2004. La enfermedad se ha reportado en todos los continentes. 2008. J. El diagnóstico clínico de la enfermedad es difícil. Production and testing. Vet.A. 11. USA. 19. 9. LEWIS A. Bernardelli A. Kapczynski D. Se requiere generalmente de observaciones continuas del animal debido a las crisis febriles recurrentes. 765-72. como la prueba de agar gel difusiòn.. LIGGETT A. III Congreso latinoamericano de zoonosis. Vet.E. El virus causante de la enfermedad es un lentivirus (virus lento) de la familia Retroviridae.3.R.. 13. Beard C. KIM H. emaciación y edema en las porciones ventrales del cuerpo.. III. Diagn. Prevalence of exposure to eastern equine encephalomyelitis virus in domestic and feral swine in Georgia. El diagnóstico se hace por campaña y no se autoriza el traslado de un animal de un lugar a otro sin hacer la prueba de AIE. and BERGELAND M. Existen pruebas de laboratorio satisfactorias para la confirmación de esta enfermedad. Med. Rev.. (1988).R. Hyg. En Cuba. Marrufo D. MCKINNEY R. Memorias en CD-ROM del XXI Congreso Latinoamericano de Avicultura. S. 16. 481-84. & COLE F.J. . virologic and histopathologic observations of encepha¬lomyocarditis virus infections in mummified and stillborn pigs. depresión. J. Am. Arbovirus Infections. Bibliografía 1. Agricultural Research. lo cual representa la investigación de 390 000 a 468 000 animales. La Tuberculosis bovina en América latina. Unión Tipográfica Editorial Hispano Americana. 2004: 23. HUNT A. J.S. 12. J. GUY J. 15. de yegua a potrillo. I. Vera A. 10 Patología Veterinaria. Iowa State University Press.. ELVINGER F.. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA) Buenos Aires 2007.W. Trop.T. KARABATSOS N. que han sido previamente usadas en animales infectados. CALISHER C. MAIRE L.. BALDWIN C. Calnek B. Derivado proteico purificado. 14. Base de datos del Sistema mundial de información zoosanitaria (WAHID) Versión: 1. Fecha de emisión 29 Sept 2009. 1962. 8.W. 19601966. Estrategia de inmunización contra la enfermedad de Newcastle. Assn 151: 421-5. Diagn. Rev. En tal sentido LABIOFAM anualmente entrega a la red diagnóstica alrededor de 5000 a 6000 juegos diagnósticos. que ha demostrado su gran utilidad como herramienta para el control de esta enfermedad. (1997).. Invest.E.H. Cuba 2009. Producción y control de tuberculosis bovina y aviar. 2003. 8.G R U P O E M P R E S A R I A L L A B I O F A M te. H. 2003. Cubana de Ciencia Avícola. Situación actual y recomendaciones.F. Lucio E.W. 27: 95-101.D. Identification of Highland J virus from a Florida horse.N. 2. Hyg. Enfermedades infecciosas emergentes y reemergentes de las aves. GAINER J. Buenos Aires. Estos animales se alejan del resto de la masa.. 39. Taller patrocinado por la OIE. a través de cuchillos y jeringas que no están esterilizadas y agujas que se utilizan para marcar. J. TANK K. Barnes H. Am. (1996). J00 H. & Saif Y.. Viamontes O. la cual aún es utilizada en la mayoría de los países del mundo como la prueba estándar para AIE. 3.. Resúmenes del XVIII Congreso Panamericano de Ciencias Veterinarias. S. LABI OFAM 5.L. Smith y Jones. independientemente que se trate de fases agudas o crónicas de la enfermedad. McDougald L. Morales A.. F.. 1: 101-4. Ames. Med.. pues la enfermedad se transmite a través de la picada de mosquitos. Experiencias en el control de la Tuberculosis bovina en Cuba. Fernández A. 10. tatuar o para sacar sangre. Cubana de Ciencia Avícola. existe un programa de examen serológico a todos los animales a través de campañas nacionales anualmente y los animales positivos son segregados. Manual de las pruebas de diagnóstico y de las vacunas para animales terrestres (mamíferos. Med. La habana 2002. Vet..R.M. Am. 119-22. 603-6. An inactivated eastern equine encephalomyelitis vaccine propagated in chick –embryo cell culture. (1989) Serologic.. 27: 89-94. Iowa. El porcentaje de animales positivos al virus es mayor en Centro y Suramérica. En: Diseases of Poultry.

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Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kouri”.cu . Laboratorio de cultivos celulares.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] Citotoxicidad del veneno del escorpión cubano Rhopalurus junceus y sus fracciones sobre líneas celulares tumorales humanas AleXis DíAz gArCíA1* luis Morier DíAz2 herMis roDríguez sánChez2 YAMirA CAbAllero lorenzo Rhopalurus junceus Citotoxicity of venom from Cuban scorpion against human tumor cell lines 1 12 2 Departamento de Investigaciones.sld. * E-mail: alexisdg@infomed. Laboratorios de Producciones Biofarmacéuticas y Químicas (LABIOFAM). Departamento de Microbiología.

es un fluido opalescente. El EfEcto dE las fraccionEs obtEnidas y dEl vEnEno. para el tratamiento de diversas dolencias. kEywords: RhopaluRus junceus vEnom. Sin embargo. (human lung fibroblast). hEp-2. con un pH 7.5-dimEthylthiazol-2-yl)-2. las protEínas dE masa molEcular infErior a 4 kda son las rEsponsablEs dE la significativa y difErEncial toxicidad dEl vEnEno dEl Escorpión RhopaluRus junceus. El vEnEno provocó la muErtE cElular En las células tumoralEs a través dEl EvEnto dE apoptosis. tumor cElls. Publicaciones científicas recientes reconocen las potencialidades de los venenos de escorpión en el tratamiento del cáncer en los que se ha observado en estudios in vitro la inhibición del crecimiento celular y la existencia de la apoptosis como evento de muerte celular [4. (carcinoma EpidErmoidE dE laringE humano). thE trEatmEnt with vEnom from scorpion RhopaluRus junceus has raisEd grEat intErEst in thE last yEars.2].5-diphEnyltEtrazolium bromidE and thE 50% cytotoxic concEntration was calculatEd by linEar rEgrEssion analysis. nci-h292. en Guantánamo. thE EffEct thE human tumor cEll linEs of scorpion vEnom and fractions on cEll linEs was dEtErminEd by a colorimEtric assay using thE (3-(4. En los cultivos dE línEas cElularEs tumoralEs hEla. que se vislumbran las potencialidades del veneno de este escorpión. El vEnEno sE fraccionó mEdiantE cromatografía líquida dE baja prEsión EmplEando una columna dE Exclusión molEcular. el veneno de los escorpiones. mucopolisacáridos. no es hasta comienzos de la década del 80 del siglo XX. thE protEins of low molEcular wEight prEsEnt in vEnom of RhopaluRus junceus arE thE rEsponsiblE for thE significant and diffErEntial toxicity against tumor cEll. citotoxicidad. dolor y cáncer [1. (human cErvix carcinoma). enzimas y una gran variedad de proteínas que incluyen péptidos con masas moleculares inferiores a los 8 kDa [3]. dEbido al conocimiEnto popular dE quE alivia o cura divErsas dolEncias. thE mEchanism of cEllular dEath was studiEd. El vEnEno y las fraccionEs con masas molEcularEs infEriorEs a 4 kda inhibiEron significativamEntE El crEcimiEnto dE las células tumoralEs con rEspEcto a la línEa cElular diploidE.5-dimEtil-tiazol-2-yl)-2. En sus condiciones naturales. (lung carcinoma) and normal cEll linE mrc-5. 13 . sobrE las células tumoralEs. duE to thE popular knowlEdgE that it curE somE illnEss. incluida El cáncEr. thE vEnom and thEir fractions with low molEcular bElow 4 kda significantly inhibitEd thE growth of tumor cElls and thE normal cElls showEd lEssEr sEnsibility.12. ha cobrado gran intErés En los últimos años. ha sido empleado con fines terapéuticos desde principios del siglo XlX. RhopaluRus junceus. lechoso. Los usos más amplios comprenden el tratamiento de convulsiones. thE vEnom causEd thE cEllular dEath through thE apoptosis in tumor cElls. células tumoralEs. En Cuba el veneno del escorpión Rhopalurus junceus. nci-h292. Hasta hoy no se conoce la composición del veneno de este escorpión y su efecto sobre células tumorales. en que se expendía el llamado "aceite de alacrán" que se decía era útil para contrarrestar la retención de la orina [6]. hEp-2. En EstE Estudio sE dEtErminó la citotoxicidad dEl vEnEno y sus fraccionEs protEicas. palabras clavE: vEnEno dE Escorpión. especie endémica de Cuba. (carcinoma dE cérvix humano). (carcinoma dE pulmón) y En la línEa diploidE mrc-5. sobrE las línEas cElularEs.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] El EmplEo dEl vEnEno dEl Escorpión RhopaluRus junceus.5]. sE dEtErminó a través dE un Ensayo colorimétrico EmplEando El bromuro dE 3-(4. E LABI OFAM l veneno de escorpión se ha empleado en la medicina tradicional en algunos países como China e India. como agente antitumoral a partir de estudios empíricos [7]. thE scorpion vEnom was fractionatEd by liquid chromatography with a molEcular Exclusion column. por lo que en este trabajo nos propusimos determinar la citotoxicidad del veneno del escorpión Rhopalurus junceus y sus fracciones proteicas sobre cultivos de líneas celulares tumorales y normales humanas. low molEcular wEight protEins. citotoxicity. thE main goal of this study was to dEtErminE thE cytotoxic EffEct of scorpion vEnom and fractions against hEla. (fibroblastos humano dE pulmón). (human larynx carcinoma). sE Estudió la apoptosis como mEcanismo dE muErtE cElular.5-difEnil tEtrazolio y sE calculó la concEntración citotóxica mEdia para cada uno mEdiantE rEgrEsión linEal. includEd thE cancEr. que contiene sales inorgánicas.

El gel se coloreó con Coomasie Blue G-250 (Sigma) y se empleó una solución de destinción para visualizar las bandas de proteínas. carcinoma epidermoide de laringe humano). ovoalbúmina (43 kDa).1 M (NH4Ac) con vórtex y se centrifugó a 15 000 rpm durante 20 min. quimotripsinógeno (25 kDa).1 M de NH4Ac y el material eluyó en el mismo disolvente a una velocidad de flujo de 0. Líneas celulares: en el estudio se emplearon tres líneas celulares tumorales: Hela.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] RHOPALURUS escorpión cubano JUNCEUS MATERIALES Y MÉTODOS Escorpiones: los escorpiones de la especie Rhopalurus junceus utilizados en los experimentos se encuentran en el escorpionario perteneciente a los Laboratorios Biológico-Farmacéuticos (LABIOFAM). Sigma). Cada línea celular se desprendió por tratamiento con una solución al 0. a un 16% de gel separador y 4% del gel concentrador y se corrieron en una cámara de electroforesis (Biorad. A partir de los tiempos de retención y las masa moleculares conocidas se construyó una curva patrón para determinar las masas moleculares relativas de las diferentes fracciones de proteínas obtenidas durante la cromatografía. El peso molecular se estimó por marcadores de peso molecular intermedio. La línea NCI-H292 se creció en medio RPMI-1640 (Sigma) suplementado con 2 mM de glutamina y 10% SFB. albúmina (67 kDa) y azul dextrana 2000 y se corrieron en las mismas condiciones que el veneno. La elusión del material se monitoreó a una longitud de onda de 280 nm durante 72 min. costarR). Ensayo de citotoxicidad: el efecto del veneno se detectó por el método de Mosmann [10]. Veneno: el veneno se obtuvo por estimulación eléctrica del telson de escorpiones. Hep-2. (ATCC CCL-171. con dimensiones 10 x 300 mm implementado sobre un sistema AKTA FPLC (Amersham Pharmacia Biotech). (ATCC CCL-23. 400 mA durante 2 h. El sobrenadante se inyectó sobre una columna de gel filtración Superdex 75 HR 10/30. La columna se equilibró con 0. La corrida se realizó a 120 V. carcinoma de pulmón) y la línea diploide MRC-5. con el veneno previamente disuelto. Electroforesis en geles de poliacrilamida: las muestras del veneno y las fracciones se analizaron en electroforesis de proteínas en condiciones no reductoras. Determinación de las masas moleculares relativas: para la determinación de las masas moleculares relativas se empleó un estuche comercial (Amersham Pharmacia Biotech) conteniendo: ribonucleasa A (13. (ATCC CRL-1848.7 kDa). Cada una se incubó en atmósfera húmeda a 37°C a 5% de CO2 hasta formación de monocapa. La separación y obtención de las fracciones de veneno se realizaron a temperatura ambiente. El ensayo se realizó en placas de poliestireno de fondo plano de 96 pozos. Estudios previos han demostrado que el almacenamiento a esta temperatura no afecta significativamente las características del extracto obtenido. Las líneas celulares Hela. En cada pocillo se adicionó una cantidad equivalente a 50 μg de veneno y 10 μg de cada fracción. Se realizaron varias corridas cromatográficas y las fracciones con tiempos de retención similares se colectaron y se unieron. Mini-PROTEANR ll) [9]. Hep-2 y MRC-5 se crecieron en frascos de cultivo en medio mínimo esencial (MEM. suplementados con 2 mM de glutamina y aminoácidos no esenciales y 10% de suero fetal bovino (SFB). Cromatografía líquida de baja presión (CLBP): el veneno se disolvió en acetato de amonio 0. En cada pozo se adicionó 50 µL de cada línea celular y se incubaron en atmósfera de 5% CO2 a 37°C durante 24 h. fibroblastos humano de pulmón). para quedar a concentración final LABI OFAM 14 .5 mL y se guardó a -20°C hasta su utilización. corridos en paralelo con las muestras.25% tripsina y se prepararon a concentración de 2 x 105 células/mL. El veneno obtenido se diluyó en agua destilada convenientemente. para cultivos celulares (Corning Inc. carcinoma de cérvix humano). se almacenó en viales de 1. NCI-H292. Se emplearon escorpiones adultos y los mismos se mantuvieron a temperatura ambiente y la alimentación consistió en insectos fundamentalmente Grillos sp (grillos) y Periplaneta americana (cucarachas) proporcionados una vez por semana.5 mL/min. Al cabo de este tiempo se adicionaron 50 µL de medio de cultivo correspondiente a cada línea celular. con períodos de al menos 21 días sin extraérseles veneno. Finalmente el sobrenadante. se dializaron y se calculó la concentración como se describe previamente. (ATCC CCL-2. se centrifugó a 15 000 rpm durante 20 min para la eliminación de constituyentes como mucus y restos celulares. La concentración de proteínas se calculó en todos los casos por el método de Lowry modificado [8].

4 kDa y <3 kDa respectivamente. Las curvas de concentración-respuesta se obtuvieron graficando la absorbancia versus las diferentes concentraciones de veneno. Las fracciones FII. empleando el paquete estadístico GraphPad Prism versión 4. En todos los casos se consideró la diferencia significativa para p< 0.5 mL/min monitoreado a 280 nm. La citotoxicidad se expresó como la CC50. Las fracciones F-II. las líneas celulares Hela. .03 (GraphPad Software.).5. Electroforesis en geles de poliacrilamida: la figura 2 muestra el patrón electroforético del veneno y las fracciones obtenidas en cromatografía de gel filtración.2 %. Todas las líneas celulares quedaron a concentración final de 104 células/pozo y el SFB se empleó en el medio al 10%. La fracción FI representa la unión de proteínas desde 14 kDa hasta 70 kDa. Los perfiles cromatográficos tuvieron como promedio ocho picos. Al cabo de este tiempo se aplicaron 0.5 mg/ mL en cada línea celular y se incubó en las mismas condiciones durante 48 h y se utilizaron como controles. 0. sin veneno. pozos cultivados con las líneas celulares. La absorbancia se determinó en un lector de microplacas de ELISA MRX Revelation Dynex Technologies a una longitud de onda de 560 nm con 630 nm como referencia. El perfil cromatográfico mostró un rango de elusión desde los 19 min hasta los 72 min. Hep-2. EL VENENO DE ESCORPIÓN SE HA EMPLEADO. Apoptosis: para análisis de la fragmentación del ADN. Los valores de CC50 del veneno y las fracciones se determinaron a partir de las curvas de concentraciónefecto (% proliferación celular) a través del análisis de regresión lineal. PARA EL TRATAMIENTO RESULTADOS Cromatografía de exclusión molecular: en la figura 1 se muestra el cromatograma del veneno y las fracciones obtenidas. Sigma) y se incubaron durante 10 min. mostrando que el contenido mayoritario del veneno es de proteínas de bajo peso molecular. DEL CÁNCER 15 LABI OFAM Figura 1.5-dimetiltiazol-2-yl)-25difenil tetrazolio (MTT) (Sigma) a 5 mg/mL en solución tampón fosfato estéril.25. El efecto de las fracciones se evaluó en las células Hela. El ADN extraído se corrió en una electroforesis submarina a 70 V. Análisis estadístico: todos los datos se analizaron para distribución normal. 30 mA durante 1-2 h empleando la agarosa a 1. Cada concentración se realizó por triplicado y el ensayo se repitió tres veces. FIII y FIV mostraron masas moleculares relativas de 8 kDa. La banda mayoritaria se localizó debajo de los 14 kDa. Inc. El veneno eluyó durante 72 min a una velocidad de flujo constante de 0. Inc. en cada pozo y se incubaron bajo las mismas condiciones durante 3 h. La electroforesis mostró la presencia de dos bandas definidas a los 45 kDa. Las placas se incubaron nuevamente en atmósfera de 5% CO2 a 37°C durante tres días. lo que evidencia que se corresponden con proteínas de bajo peso molecular. 0. Finalmente se adicionó 100 µL/ pozo de dimetilsulfóxido (DMSO. Al cabo de este tiempo se adicionaron 10 µL de una solución estéril de bromuro de 3-(4.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] de 0. F-III y F-IV mostraron una única banda por debajo de los 14 kDa. NCI-H292 se cultivaron en placas de 12 pozos y se incubaron a 37°C.03 (GraphPad Software. pleando una columna de exclusión molecular superdex 75 HR 10/30. La concentración final de las fracciones se determinó a partir del por ciento que representa cada una en el veneno. 66 kDa y 29 kDa. NCI-H292 y MRC-5. la concentración del veneno que causa el decrecimiento del 50% en el número de células viables (absorbancia del MTT) comparada con controles no tratados.). EN LA MEDICINA TRADICIONAL. El ADN se extrajo a las 24 h y 48 h. La fracción F-I mostró un patrón electroforético similar al del veneno completo. Se realizó el análisis de varianzas (ANOVA) seguido de un test de Rangos Múltiples de Duncan empleando el paquete estadístico GraphPad Prism versión 4.75 y 1 mg/mL en cada pocillo. utilizando el sistema de purificación WisardR Genomic DNA Purification Kit (Promega)11.05. Perfil cromatográfico del veneno del escorpión Rhopalurus junceus separado mediante CLBP El fraccionamiento se realizó em. 5% CO2 durante 24 h en atmósfera húmeda.

2-4) ADN línea celular Hela. V) veneno total.11* 0. FI 20. MR: masas moleculares relativas obdel veneno a bajas concentraciotenidas a partir de una curva de calibración de Tr versus masa molecular de proteínas de masa molecular nes provocó pérdida de la morconocida. Apoptosis: la inducción de apoptosis. Valores de la CC50 del veneno y las fracciones para las líneas celulares evaluadas. Tr: tiempo de retención. La aplicación rango de los tiempos de retención. 3: ADN extraído a las 24h. 3: ADN extraído a las 24h. debido a la toxicidad del FIII 54. ADN extraído a las 48h.83 0.44 veneno. F-I mostró mayor toxicidad para MRC-5 mientras F-II mostró similares niveles de sensibilidad para las tres líneas celulares. FIV) la línea celular NCI-H292 resultó la más sensible.2 %). 3: ADN extraído a las 24h. Citotoxicidad: la evaluación de la actividad citotóxica del veneno se realizó en tres líneas celulares tumorales y una línea diploide de pulmón humano. Electroforesis en geles de agarosa (1. 2: ADN control sin veneno.322pb 2.2 0.82 0. 2: ADN control sin veneno.*p<0.61 4.78* este evento.14* 0. Esto indica que a mayores MUESTRAS Tr (min) Ap/At (%) MR (kDa) tiempos de incubación un mayor Hela NCI-H292 MRC-5 Hep-2 número de células mueren por VENENO 1.28* 0. las proporciones de cada fracción en el veneno y los pesos moleculares relativos. debido al efecto del veneno.557pb 4. ADN extraído a las 48h. 8-10) ADN línea celular HEp-2.05) con respecto a la célula normal. del ADN extraído de las líneas celulares tumorales.05* 0.58 60 72-14 0. ADN extraído a las 48h.24 El cambio morfológico ocurrido en la línea celular tumoFII 49. Ap/At: Área de los picos/Área total.05) el crecimiento de las células tumorales con respecto a la célula normal (tabla 1). FI.64 9 4 0.25 0. La corrida se realizó a un 16% de gel separador. 1) Marcador de peso molecular Lambda DNA /Hind III. Figura 3.36-37. FIV) Fracciones obtenidas en CLBP . Los resultados evidenciaron que el veneno afectó significativamente (p<0.05) a la de la célula normal para las células NCIH292 (tabla 1). se observa en la figura FIV 58.361pb 14 kDa 2. 16 inferiores (p<0. En las tres líneas celulares se observó el evento de apoptosis como mecanismo de muerte celular. incrementándose en la medida que aumentó el tiempo de incubación con el veCC50 (mg/mL) neno. Se presentan el veneno (figura 4A). 2: ADN control sin veneno. La fracción F-III evidenció una inhibición significativa del crecimiento de las células tumorales (p<0.27pb Figura 2. Electroforesis de proteínas del contenido total del veneno del escorpión Rhopalurus junceus y de las fracciones.42 0.416pb 6. Las fracciones obtenidas se agruparon en 4 grupos y se evaluaron en las líneas celulares Hela y NCI-H292 y MRC-5. En todos los casos (veneno.52 16 8 0.0.05 diferencia estadísticamente significativa comparada con la línea celular MRC-5. El cultivo formó una monocapa homogénea en el control sin Tabla 1. FII. FIII. 5-7) ADN línea celular NCI-H292.27 ral Hela.20 0. M) marcador de masas moleculares (14 kDa-97 kDa). La fracción F-IV solo evidenció CC50 significativamente L ABI O FAM . similar a lo observado para el veneno completo. FIII. se observó por el patrón de fragmentación del ADN (figura 3).130pb 9.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] M 94 kDa 67 kDa 43 kDa 30 kDa 20 kDa V FI FII FIII FIV 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 23.82 12 <3 0.68* 2.

FIV) podría deberse a que más de un componente presente en el veneno de escorpión es capaz de actuar sobre estas células. posibilitan que exista una mayor selectividad y por tanto mayor toxicidad. 17 L ABI OFAM .15]. Una caracterizada por el evento de apoptosis y la otra por la necrosis. FIII. También se observaron células con aumento del volumen así como células necróticas con picnosis y restos celulares en el medio de cultivo (figura 4C. sobre la línea celular Hela. Monocapa homogénea morfología característica. Los venenos de escorpión contienen proteínas con masas moleculares por debajo de los 8 kDa y son consideradas toxinas [13]. Estos resultados concuerdan con los obtenidos por Omran M.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] fología celular típica y ruptura de la monocapa. inhibe la proliferación y la migración de estas células [18]. D) 1mg/mL de veneno. La fracción FIV solo evidenció toxicidad significativa hacia NCI-H292.5 mg/mL de veneno.A. Los principios activos presentes en la fracción FIII que provocan reducción significativa de la viabilidad celular en Hela podrían estar en menor concentración o no estar presente en la fracción FIV. 4D). A) Línea celular sin la aplicación del veneno.75mg/mL de veneno. La elevada afinidad del veneno de algunos escorpiones por estos canales iónicos y el aumento en la densidad de estos canales en las membranas de las células tumorales. El bloqueo de la actividad fisiológica de estos canales iónicos y receptores. DISCUSIÓN En este trabajo se realizó la caracterización parcial del veneno del escorpión cubano Rhopalurus junceus. sobre las líneas celulares analizadas. a diferentes concentraciones. Las mayores concentraciones provocaron destrucción total de la monocapa celular. Efecto del veneno del escorpión Rhopalurus junceus. en algunos tipos de tumores la proliferación. hacia estas células [19]. en Hela indicó que esta línea celular es más susceptible de desarrollar apoptosis. [20] quien utilizando el veneno del escorpión L. Los resultados de la electroforesis de proteínas evidenciaron la presencia de bandas de proteínas entre los 29 kDa y los 67 kDa fundamentalmente y una banda por debajo de los 14 kDa lo que se corresponde con otros trabajos sobre venenos de escorpión en los que el contenido mayoritario es de proteínas de bajo peso molecular [12.22]. Por otro lado.13] El veneno total y las fracciones F-III y F-IV evidenciaron una citotoxicidad significativa y diferencial hacia las células tumorales. Esta característica podría estar relacionada con la toxicidad diferencial del veneno y las fracciones F-III y F-IV. quinquestriatus. Las fracciones FIII y FIV mostraron masas moleculares relativas menores de 4 kDa. La acción fisiológica de estas toxinas se ejerce fundamentalmente sobre canales iónicos.A. sobre las líneas celulares eucarióticas 293T y C2C12. la elevada sensibilidad de la línea celular NCI-H292 en todos los casos (veneno. El evento de apoptosis se detectó en las líneas celulares tumorales. La ocurrencia de la degradación de ADN. fusión de las membranas celulares y formación de grandes vacuolas por unión del contenido citoplasmático de varias células y la formación de cincitios. Otros autores coinciden en señalar que existe una doble vía que conduce a la muerte celular. en diferentes concentraciones. El aumento de las concentraciones de veneno provocó cambios celulares relacionados con el alargamiento de las células e irregularidad de los bordes celulares (figura 4B). migración y la invasividad están relacionadas con la sobreexpresión en las membranas celulares de canales ióni- cos [16] y receptores celulares [17]. presentes en las membranas celulares de mamíferos e insectos y algunas son específicas para cada especie [14. En el cáncer. observó que sólo en una subpoblación del total de células ocurrió el evento de apoptosis y en la población restante estuvieron implicados otros eventos entre ellos la necrosis. B) 0. la cual en condiciones normales es enmascarada por la primera [21. a partir de las 24 h de incubación. C) 0. Las mayores concentraciones del veneno provocaron aumento del volumen celular y elevada picnosis lo que podría indicar presencia de necrosis. Figura 4.

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león2 José A. E-mail: mreglap@infomed. LABIOFAM. * María Regla Pérez Capote. FrAgA1 leYAnis Durán2 DAYné hortA2 Toxicological security of pseudostem powder Musa paradisiaca: Nutritional Supplement 20 ACITAN® 1 2 Grupo Empresarial de producciones Biofarmaceúticas y Químicas. Universidad de La Habana.sld.inf.cu ó labiofam@ceniai. Pérez1* gregorio MArtínez2 olgA s. Centro de Estudios para las Investigaciones y Evaluaciones Biológicas.cu .[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] Evaluación de la seguridad toxicológica del polvo de pseudotallo de Musa paradisiaca: Suplemento nutricional MAríA r. Instituto de Farmacia y Alimentos.

toxicologically. así como fibra diEtética como su componEntE mayoritario. phEnolic compounds and. recientemente ha dictado regulaciones de buenas prácticas de manufactura para los suplementos nutricionales [8]. la administración oral dEl acitan no provocó altEracionEs En la ganancia normal dE pEso corporal. no producE lEtalidad ni signos dE toxicidad por lo quE sE ubica En la catEgoría toxicológica sin clasificar. this rEsEarch is aimEd at thE Evaluation of oral sharp toxicity and thus. thErEforE. classifying as a minimum dEgrEE. kEywords: acitan. diEtEtic fibEr. quE lo clasifica como irritantE mínimo. palabras clavE. El prEsEntE trabajo tuvo como objEtivo Evaluar la toxicidad aguda oral y El potEncial irritantE En la mucosa oral. acitan has bEEn dEvElopEd as a nutritional supplEmEnt using this ElEmEnt. sE obtuvo un índicE dE irritación dE la mucosa oral igual a 1. LABI OFAM 21 . la FDA. nueces y legumbres que no pueden ser digeridos por los seres humanos. Un gran número de suplementos dietéticos destinados a diferentes beneficios han sido ilegalmente adulterados con ingredientes farmacéuticos descontinuados. las fibras dietarias son partes de frutas. ratE valuE was 1. acitan. as to irritability on oral mucuos. muchos de los cuales han servido de modelos para la síntesis de un gran número de fármacos. para suplir el déficit de algunos nutrientes deviniendo estos en suplementos nutricionales. sE tomaron muEstras para Estudio hEmatológico E histopatológico. Para garantizar el uso seguro y la calidad de los mismos. sE rEalizó un Estudio dE dosis límitE por vía oral (5000 mg/kg) y un Estudio sobrE irritabilidad dE la mucosa oral a dosis rEpEtidas. y para ello se han diseñado diversas formulaciones o incorporado fuentes de origen natural en diferentes presentaciones. sin los cuales no es posible una mínima nutrición. it is concludEd that thE oral administration of acitan with a 5000 mg/kg dosE doEs not prEsEnt lEthal EffEcts or toxicity signs. al concluir El pEríodo dE obsErvación. it is unclassifiEd. thErEforE. studiEs on oral dosE limits (5000 mg/kg) and oral mucuos irritability with rEpEatEd dosagE wErE carriEd out. compuEstos fEnólicos.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] El psEudotallo Musa paRadisiaca posEE una variada y rica composición En oligoElEmEntos. nutriEnts. de ahí que la investigación de las mismas haya propiciado importantes avances en la terapéutica de variadas enfermedades [9]. así como tampoco En las variablEs hEmatológicas ni En El Estudio histopatológico a los órganos Examinados. irritability. samplEs of hEmatological and histopathological studiEs wErE takEn oncE thE obsErvation pEriod was ovEr. Sin embargo. El empleo de suplementos nutricionales ha experimentado un incremento considerable en años recientes [1-4]. E n la alimentación humana hay nutrientes esenciales que son el motor básico de nuestro metabolismo. granos. otros muchos ingredientes que permiten un mejor estado de salud. y potencialmente podrían ser perjudiciales para los consumidores que los ingieran [5-7]. nutriEntEs. Desde el punto de vista investigativo las plantas son una fuente importante de productos biológicamente activos. irritación. hEmatological variablEs or histopathological studiEs in organs undEr considEration. Por otra parte. toxicity. a partir dEl mismo sE ha dEsarrollado un suplEmEnto nutricional dEnominado acitan. vegetales. es necesario adicionar. thE oral administration of acitan producEd no disordErs on normal wEight gaining. irritability potEntial on oral mucuos. mostly. Han comenzado a ser importantes y comúnmente utilizados por consumidores bajo propia decisión para lograr regímenes de salud adecuados. toxicidad Musa paRadisiaca psEudostEm is composEd by rich and variEd tracE ElEmEnts. Mejoran la absorción de nutrientes.

Habana. a una temperatura de 20±2ºC. donde se valoraron las dosis propuestas por metodología de la Organización para la cooperación económica y el desarrollo (OECD) [15] (50. los cuales le adjudican al mismo una marcada actividad antioxidante [12]. Evaluar la toxicidad aguda por vía oral. constituyeron los objetivos de este trabajo. El ACITAN fue preparado previo a la administración para lo cual se suspendió en CMC 0. Se emplearon ratones OF1 de ambos sexos distribuidos en dos grupos experimentales de seis ratones cada uno: control negativo (CMC 0. fibra dietética (50%) siendo este su mayor aporte con valor nutricional [11]. entre los que se incluyen anticancerígenos. teniendo en cuenta que ésta es la vía de elección por la cual se administra este producto. Animales de experimentación Se emplearon ratones OF1 (20±2g) de ambos sexos y Hámster Sirio dorados machos (60±2g) suministrados por el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB. con libre acceso al agua y los alimentos. Ciclo de luz-oscuridad 12 x 12 h. A los animales se les retiró el alimento (sólo acceso al agua) 18 h antes de la administración de la sustancia de ensayo y se suministró pasadas 3 h de la inoculación.5% en agua para obtener una concentración final de 500 mg/mL. Reunía los requisitos de calidad química y microbiológicos establecidos por el fabricante. así como el establecer un margen de seguridad para su empleo. El ACITAN se administró. Cuba) y empleada en todos los estudios reportados en este documento. compuestos polifenólicos. colesterol. Observaciones Los animales fueron observados diariamente dos veces al día durante los 14 días posteriores a la administración con especial LABI OFAM . antioxidantes y antinflamatorios. constituye un suplemento nutricional [14]. entre otros [10]. Existen evidencias que apoyan la hipótesis de que los polifenoles de la dieta pueden tener efecto protector y un potencial terapéutico en el daño oxidativo relacionado a las patogenias [13]. y se administró un volumen constante a razón de 2 mL/100 g de peso corporal mediante canulación intragástrica al igual que la CMC del grupo control. así como el potencial irritante sobre la mucosa oral y la aparición de signos de toxicidad tras la administración del ACITAN. La Musa paradisiaca (Musácea) conocida comúnmente como plátano está ampliamente distribuida en diversas regiones. Para introducir un nuevo agente en la práctica médica es de obligatorio cumplimiento la realización de ensayos toxicológicos que garanticen la inocuidad del producto desde el punto de vista tóxico. no se observaron muertes en las primeras 24 h por lo que se decidió realizar el ensayo a una dosis límite de 5000 mg/kg. prevenir el cáncer. Toxicidad Aguda Inicialmente se realizó un estudio exploratorio para determinar la dosis del ensayo. Han sido reportados una gran variedad de efectos biológicos a los polifenoles de la dieta. Se mantuvieron siete días antes del ensayo y durante el mismo bajo las mismas condiciones experimentales. MATERIALES Y MÉTODOS Datos de la muestra en ensayo La muestra en ensayo fue producida y facilitada por los laboratorios LABIOFAM (C. 300 y 2000 mg/kg). humedad relativa de 70±5%. La Habana.5%) y tratado con ACITAN a una dosis de 5000 mg/kg. Cuba). Tradicionalmente sus frutos han sido utilizados como alimento. por vía oral. El pseudotallo de la planta posee una variada y rica composición en oligoelementos. a la cual tampoco se observaron muertes y estos animales fueron monitoreados durante 14 días El procedimiento empleado estuvo en correspondencia con los principios de buenas prácticas de laboratorio como se plantea en el procedimiento por “pasos” descrito en el ensayo alternativo de la Clase Tóxica Aguda de la OECD No 423 [15]. El polvo de pseudotallo de Musa paradisiaca. en lo adelante ACITAN.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] suplemento nutricional ACITAN EL POLVO DE PSEUDOTALLO DE MUSA PARADISIACA CONSTITUYE UN SUPLEMENTO NUTRICIONAL 22 favorecen el tránsito gastrointestinal y pueden ayudar a reducir el riesgo de enfermedades cardiovasculares.

para evaluar mortalidad y morbilidad. cavidad nasal. Tabla 1. timo. Procedimiento experimental El pellet de algodón se embebió en la solución de ACITAN (500 mg/mL. hígado. El pellet estuvo expuesto durante 24 h. control de la temperatura. hígado. corazón. muy ligero eritema: 1. Se examinó el desarrollo de signos de toxicidad (cambios en el pelo. congestión vascular e infiltración leucocitaria como criterio de cambios estructurales y determinar así. la cavidad craneal. Al concluir la última exposición los animales fueron sacrificados en atmósfera de éter. se observó macroscópicamente y se volvió a colocar un pellet nuevo. timo. así como estudio histopatológico de algunos órganos que fueron colectados de los animales después de la necropsia y fijados en solución de formaldehído buferado y se procesaron según la técnica convencional de inclusión en parafina. hematocrito. posteriormente se retiró. sistema respiratorio. SNC. Las muestras de sangre para la bioquímica sanguínea fueron extraídas por el plexo retro orbital bajo condiciones de anestesia. Evaluación del daño La apariencia macroscópica de las bolsas se evaluó determinando el grado de irritación para eritema de acuerdo a la siguiente escala: no eritema: 0. LABI OFAM CLASIFICACIÓN No irritante Irritante mínimo Irritante medio Irritante moderado Irritante severo ESCALA 0 1-4 5-8 9-11 12-16 ACEPTACIÓN Aprobar Aprobar Aprobar Rechazar Rechazar 23 . según la metodología descrita para la especie [16]. así como el peso corporal de cada uno de los animales al inicio. la actividad somatomotora y el comportamiento de reflejos corneal. tamaño y textura. riñón. cerebro. riñón. Estudio a dosis repetida Se emplearon Hámster sirios dorados distribuidos en dos grupos experimentales (control y tratado con ACITAN) de tres animales cada uno. Se controló el peso de los animales antes y al final del estudio. cerebro. Anatomía patológica La necropsia incluyó una examinación macroscópica de la superficie externa del cuerpo. Clasificación de las sustancias de acuerdo al Índice de irritación oral. las bolsas gulares extraídas y fijadas en formol neutro.05 fueron considerados significativos. según la metodología descrita para la especie [16] fueron necropsiados y los órganos (estómago. hematología y peso de los órganos (peso absoluto y peso relativo) fueron chequeados por el test t Student. cavidades pélvicas y víscera. reteniéndose con un collar de gasa. se colocó en la bolsa gular. pulmón. la reacción al epitelio. Los parámetros evaluados incluyeron: conteo de eritrocitos.5%) y CMC para el grupo control. glándulas suprarrenales. (tabla 1) Análisis estadístico Los resultados son expresados la media ± DS. Este resultado fue contrastado en la tabla de clasificación para establecer así la aprobación o rechazo de la sustancia de ensayo. membranas mucosas. conteo total de leucocitos.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] atención durante las primeras 24 h. Irritabilidad de la mucosa oral. bazo. se lavó la bolsa con solución salina fisiológica (SSF). ovarios y testículos) evaluados macroscópicamente de acuerdo a coloración. buffer al 10% y se procesaron según la técnica convencional de inclusión en parafina. para colorear con hematoxilinaeosina y evaluar por microscopía óptica teniendo en cuenta los parámetros: edemas. moderado eritema: 2. Se empleó EDTA como anticoagulante. circulatorio. ovarios y testículos). pineal y flexorhomolateral). corazón. ojos. SNA. glándulas suprarrenales. suspendido en CMC 0. El procedimiento se repitió durante cinco días consecutivos. bazo. Al finalizar el período de observación todos los animales se sacrificaron por dislocación cervical. para colorear con hematoxilina-eosina y evaluar por microscopía óptica (estómago. eritema bien definido: 3 y severo eritema: 4 [18]. pulmón. conteo de plaquetas. Valores de p<0. Los datos del peso corporal. el Índice de Irritación Oral (IIO). evaluados según lo establecido por las normas ISO/DIS 10993-10:2002 [17]. siete y 14 días del ensayo. hemoglobina. todos los orificios.

A excepción de los siguientes eventos: hemoglobina de las hembras tratadas fue significativamente menor respecto al control (p<0. Ratones OF 1.6±0. En la tabla 2 se muestran los resultados correspondientes a la temperatura rectal y coordinación motora. .9±0.9 g. los resultados son similares para ambos sexos. Durante la observación diaria de la ocurrencia de signos tóxicos sobre los diferentes sistemas (autonómicos.001). Los valores representan la media ± DE (n=5). flexorhomolateral.001). conductual. Curva ganancia de peso corporal de ratones hembras tratados por vía oral con ACITAN a una dosis única de 5000 mg/kg. machos (p<0. Comportamiento del peso corporal No se encontraron diferencias significativas (p≥0. gastrointestinal. la temperatura y coordinación motora No hubo modificaciones sobre el sistema sensorial en los animales tratados con respecto a los controles cuando se observa el comportamiento de las variables: estímulo pineal. Ratones OF1. neuromuscular. ocular. en machos aumentaron significativamente los Control LABI OFAM Control 35 30 Peso corporal (g) 35 30 Peso corporal (g) ACITAN ACITAN 25 20 15 10 5 0 T0 T7 Tiempo de ensayo (días) 25 20 15 10 5 0 24 T14 T0 T7 Tiempo de ensayo (días) T14 Figura 1. sensorial. cardiovascular. Los valores representan la media ± DE (n= 5).05) entre el peso corporal inicial y final de los ratones tratados con ACITAN y los ratones controles (figura 1 y figura 2). corneal. cutáneo) no aparecieron signos tóxicos en los grupos tratados durante el período de ensayo.67± 0. respiratorio. lo cual es indicativo de la no ocurrencia de alteraciones en este parámetro. incremento significativo en los neutrófilos en ambos sexos. Figura 2. hembras (p<0. machos controles 7.8 g y tratadas 3. genito-urinario. Curva ganancia de peso corporal de ratones machos tratados por vía oral con ACITAN a una dosis única de 5000 mg/kg. Los valores representan la media ± DE (n= 5). Evaluación de los reflejos.6 g y tratados 8. Estudio hematológico Los resultados se muestran en las tablas 3 y 4 respectivamente.2±0.05).suplemento nutricional ACITAN [ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] LAS PLANTAS SON UNA FUENTE IMPORTANTE DE PRODUCTOS BIOLÓGICAMENTE ACTIVOS RESULTADOS Toxicidad aguda Oral No se observó mortalidad seguido de la administración oral de 5000 mg/kg de ACITAN durante las dos semanas de observación.7 g). donde se evidencia que no hubo diferencias estadísticas significativas respecto al grupo control. El balance acumulativo en gramos del peso corporal con respecto al peso inicial de los animales se comportó de modo similar en los grupos de igual sexo (hembras controles 4. conteo diferencial de leucocitos.

no ocurrieron alteraciones significativas en los parámetros hematológicos. órganos reproductores (ovarios/ testículos).1 ± 1.80 38 ± 2 LABI OFAM 13.71± 4. hígado. hígado. Estos valores se encuentran dentro de los límites fisiológicos establecidos para la especie [19. Estudio anatomopatológico La necropsia y el estudio histopatológico no reflejaron ningún daño en los órganos examinados. En la tabla 5 se pueden apreciar los cocientes de peso de los órganos (bazo. Tabla 3. MACHOS PARÁMETROS Glóbulos rojos (cel x103/mm3) Glóbulos blancos (cel x103/mm3) Hemoglobina (mmol/L) Hematocrito (%) ACITAN 1073 ± 170 — 18.0 ± 0 > 3. adrenales. riñones.0 ± 0 monocitos (p<0. Para estas variables no se evidenciaron diferencias significativas (p>0.9 36. .5 ± 1. MACHOS VARIABLES Temperatura Rectal (oC) Coordinación Motora (min) GRUPO ACITAN Control ACITAN Control VALOR MEDIO 36. riñones.001. MACHOS PARÁMETROS Neutrófilos Eosinófilos Monocitos Basófilos Linfocitos ACITAN 4 ± 2* 0±0 1±1 3± 2** 91 ± 6 CONTROL 3±2 0±0 1±1 1±0 94 ± 3 ACITAN 3 ± 2* 0±0 0±0 0±0 90 ± 6 HEMBRAS CONTROL 0±0 0±0 0±0 0±0 94 ± 3 25 Los valores representan la media ± DE (n=5).0 ± 0.9 > 3.07 ± 5. Efecto de la administración oral de ACITAN a una dosis única de 5000 mg/kg sobre la temperatura rectal y la coordinación motora hasta los 14 días. Los órganos (corazón.1 2.54 ± 5. ** p< 0.71 ± 0.64** 55 ± 5 Tabla 4.0 ± 0 GRUPO ACITAN Control ACITAN Control HEMBRAS VALOR MEDIO 36.001) y los basófilos (p<0.07 47 ± 5 CONTROL 1401 ± 145 — 21.05) entre los grupos tratados y controles a los 14 días. Efecto de la administración oral de ACITAN a una dosis única de 5000 mg/kg sobre las poblaciones de leucocitos a los 14 días. adrenales) examinados macroscópicamente no evidenciaron alteraciones patológicas en los animales administrados oralmente con el ACITAN.05).4 > 3. pulmones)/ peso corporal. pulmones. 20]. Efecto de la administración oral de ACITAN a una dosis única de 5000 mg/kg sobre parámetros hematológicos a los 14 días.2 ± 0. timo. comportándose en todos los casos igual al control.14 ± 2.56 49 ± 4 ACITAN 1198 ± 359 3921 ± 194 HEMBRAS CONTROL 1232 ± 410 4109 ± 201 16. * diferencia estadística significativa respecto al control (p<0. lo que presupone que ésta es superior a la dosis límite 5000 mg/kg de peso corporal.0 36. Basándonos en todos estos resultados y bajo las condiciones en las que se efectuó el estudio no es posible estimar una DL50 tras la administración en ratones OF1 por vía oral.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] Tabla 2. bazo.05).

Además desde el punto de vista clínico no se apreciaron alteraciones patológicas.0 ± 0 0. alteración patológica y mantuvieron un acceso normal al agua y Discusión general alimentos.6 ± 0. En la tabla 7 se muestra el índice de Un indicador importante en la determinación de la irritabilidad de la mucosa oral tanto individual como comparado.Tabla 6.002 HEMBRAS CONTROL 4.7 LABI OFAM Los valores representan la media ± DE (n= 3).0 ± 0.7 ± 0 11.01 7.006 6.0 ± 0.0 ± 0. fue normal Durante el estudio los animales no mostraron signos clínicos de y similar al grupo control.8 ± 0. toxicidad de cualquier sustancia lo constituye la determinación determinados según la clasificación microscópica para la reacción de manifestaciones clínicas. temas.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] Tabla 5.001 52.6 ± 0 16. el ensayo (control y ACITAN). así como de de la mucosa oral(IIC=1) (Tabla 7).001 Los valores representan la media ± DE (n= 5). Además se plantea que toda ACITAN. para erilas plantas medicinales científicamente validadas [21].45 ± 3.0 ± 0 MACHOS CONTROL 3.0 ± 0.4 ± 0 12.6 ± 0 16. se establece la promoción del uso correcto de sa gular y el grado de reacción de la superficie en ésta. no afectánha escapado al influjo de esta tendencia y dentro del Programa dose la ganancia normal del peso corporal en los animales tratados.001 0. Efecto de la administración de ACITAN a una dosis única de 5000 mg/kg en términos relativos (g/peso corporal (g)) de peso de órganos los 14 días. en el estudio histológico no se observamera barrera los posibles efectos tóxicos que podía provocar la ron modificaciones de gran interés entre los grupos evaluados en administración oral del ACITAN. . Por otro lado. que traen por resulEl índice de irritación comparado(IIC) calculado para el tado alteraciones en sus funciones.03 ± 3.001 0.0 ± 0 45.0 ± 0.9 ± 0 ACITAN 3.0 ± 0 44.2 71. Para velar por la seguridad de los preparados medicinales se esLa tabla 6 muestra el comportamiento del peso corporal tablecen regulaciones internacionales. indiGRUPO Control ACITAN PESO INICIAL 56. asociados a lesiones en sistemas de órganos. En Cuba no se fue similar al grupo empleado como control (p≥0.45 57.54 ± 6. al contrastarlo con el valor de la tabla de clasificación essustancia tóxica produce alteraciones anatomofisiológicas que se tablecida como patrón para la aprobación o rechazo de las sustanmanifiestan en modificaciones en el cuadro clínico general. la ganancia de peso corporal. La variación de esta variable para gaciones fármaco-toxicológicas en animales de experimentación los animales tratados con ACITAN durante los cinco días de estudio antes de iniciar su aplicación en seres humanos. Irritabilidad mucosa oral 26 cador importante del estado general de los animales. Comportamiento del peso corporal.21 PESO FINAL 73.0 ± 0. En la evaluación macroscópica realizada durante los días de tratamiento no se evidencia. y estas cias permitieron clasificar a ese producto como irritante mínimo dependen de la severidad y extensión de la lesión.01 7. las ligeras alteraciones que dieron lugar al resultado del estudio histológico de la mucosa. ya que es posible determinar daños del tejido de la mucosa oral. No COMPORTAMIENTO PESO CORPORAL (g) obstante. no interfirieron en el comportamiento normal de los animales tratados con el producto.52 ± 6. ron cambios relevantes a nivel de la mucosa. no mostró alteraciones después de cada aplicación con el En el presente trabajo se evaluaron en ensayos de priACITAN. que exigen amplias investide los animales al final del ensayo.001 55.001 0.0 ± 0 6.0 ± 0. Nacional de Medicina Natural y Tradicional del Ministerio de Salud La observación macroscópica de la apariencia de la bolPública (MINSAP).1 ± 0.05). PESO DE LOS ÓRGANOS/ PESO CORPORAL(X 10-3) SEXO ÓRGANOS/ TRATAMIENTO Bazo Adrenales Riñones Hígado Pulmones ACITAN 4.

Por otra GRUPO CLASIFICACIÓN parte. constituye un indicador importante de Los resultados del estudio de toxicidad aguda indican que las alteraciones fisiológicas que puedan ocurrir en el organismo el ACITAN administrado por vía oral a una dosis de 5000 mg/kg tras la exposición a determinada sustancia [24]. resultados del caso que nos ocupa el ACITAN no ocasiona ningún Unificando toda la información. evaluación de riesgo relevante. algún cambio en el sistema heEn el ensayo y evaluación de las características tóxicas matológico tiene un elevado poder predictivo para la toxicidad de una sustancia. la determinación de la Toxicidad Aguda. LABI OFAM suplemento nutricional 27 . Índice de irritabilidad de la mucosa oral expuesta repetidamente con ACITAN durante cinco días. La pérdida aceno produce ningún signo de toxicidad o muerte en ratones. sugilerada del peso corporal (aproximadamente del 15 al 29% en riendo una DL50 por encima de 5000 mg/kg. las sustancias que estudios toxicológicos [25]. los datos sugieren que la trastorno orgánico que se pueda apreciar a través de estas variables. según humana. corneal (indicativo ACITAN 4 1 Mínima de las funciones sensoriales y motoras).[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] Tabla 7. cuando los datos son extrapolados desde los estudios en la vía de administración propuesta en humanos. Durante el período de ensayo no se evidenciaron signos lo cual puede constituir el inicio del empleo seguro para el uso de toxicidad en los animales tratados. Desde el punto de vista clínico médico de este producto.26]. El peso corporal. pineal. constituye un animales. variaciones en el peso corporal constituyen indicadores de posibles respectivamente. así como las ser consideradas prácticamente no tóxicas o SIN CLASIFICAR. edad y salud general del El análisis de los parámetros de la sangre constituye una animal [22]. duración de la exposición. Según los del ACITAN por la vía oral es prácticamente nula. cantidad total de la sustancia en sangre. presentan una DL50 superior a 5000 mg/kg por la vía oral pueden El seguimiento del consumo de alimentos. Las variaciones que tuvieron lugar tras la administración paso inicial que provee de información sobre los posibles daños oral de ACITAN no tienen importancia desde el punto de vista a la salud que pueden surgir de una exposición a corto plazo de biológico. mostrar un efecto adverso. mo en los animales tratados con respecto a los controles. no se apreciaron modificaciones sobre el mislos sistemas de órganos involucrados. [27] y lo establecido en la OECD. parámetro más sensible para males para la especie [19. ya que los valores están dentro de los intervalos noresa sustancia [23]. los animales mantuvieron una apariencia normal corresponÍNDICE DE IRRITACIÓN diente a su especie. De acuerdo a Kenun periodo de cinco a siete días) es un dato a considerar en los nedy et al. administración oral del ACITAN no induce ningún efecto tóxico. en las mediciones de INDIVIDUAL COMPARADO los reflejos flexorhomolateControl 3 — — ral. Por lo tanto esto sugiere que la toxicidad aguda trastornos orgánicos causados por el agente que se ensaya.

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com . Centro de Toxicología y Biomedicina.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] Genotoxicidad del extracto acuoso del en células germinales de ratón Solanum torvum Sw AníbAl DoMínguez oDio1* eDgAr Puente zAPAtA2 lázAro ibrAhiM roMero gArCíA3 irelA YolAine Pérez AnDres2 hilArio sAlAs Perez2 Genotoxicity of Solanum torvum Sw aquous broth on germinal mouse cells 30 1 2 3 Dirección de Investigación y Desarrollo. * E-mail: anibalodio@yahoo. Hospital Clínico Quirurgico y Docente “Saturnino Lora Torres”. anibalodio@gmail. Grupo Empresarial de Producciones Biofarmaceúticas y Químicas. Laboratorio de Genética Toxicológica. LABIOFAM. Departamento de Docencia.com.

[1-3] La planta Solanum torvum Sw (familia Solanaceae. su uso se ha evitado debido a la citotoxicidad de algunos de sus componentes [11]. sE concluyE quE El Extracto acuoso dE s. lo largo de los siglos muchas plantas han sido utilizadas por sus propiedades curativas. [5]. torvum no indujo altEracionEs toxicológicas En El 100% dE los animalEs tratados. diuréticas. a pesar de existir estos antecedentes y evidencias científicas. células gErminalEs. gErminal cElls. through a morphological assay on spErmatozoon hEad. 12. Sin embargo. dEnsidad y morfología EspErmática (35 días). citotoxicidad. y por sus efectos antiglicemiantes fundamentalmente por inhibir la enzima alfa-glucosidasa contenida en las células intestinales de ratas [10]. es una de las especies que forma parte del arsenal terapéutico de la flora de nuestro país. En este contexto. gEnotoxicidad. 7] y antimalarica [8]. Haemaphysalis bispinosa y Paramphistomum cervi. Estos conocimientos heredados constituyen el fundamento de la fitoterapia actual y el punto de partida. anticonvulsivantes. toRvuM lEavEs is nEithEr cytotoxic nor gEnotoxic on mousE spErmic cElls within thE prEvious tEst conditions. orally. como una vía para determinar el riesgo de daño genético en las personas que la consumen. antimicrobianas. entre otras [4]. it is concludEd that aquEous broth of s. efectividad y calidad. aquEous broth was administErEd to cEnp: nmri micE. it was provEd that s. tradición transmitida por generaciones hasta la actualidad. Each 24 h for thE first fivE tEst days. género Solanum). los parámEtros toxicológicos Evaluados fuEron pEso corporal (0. sE administró Extracto acuoso a ratonEs cEnp:nmri por vía oral En dosis 500. 6. resulta importante determinar el potencial genotóxico de esta planta. torvum no rEsultó citotóxico ni gEnotóxico En las células EspErmáticas dE ratón y bajo las condicionEs ExpErimEntalEs dEscritas. antiartríticas. 1000 y 2000 mg/kg wEight dosE. mEdiantE El Ensayo dE morfología dE la cabEza dEl EspErmatozoidE. oncE tEst was finishEd. el ensayo de morfología de la ca- 31 LABI OFAM . al finalizar El ExpErimEnto sE dEmostró quE El s. se tiene confirmación experimental de sus A propiedades antiparasitarias específicamente contra Rhipicephalus boophilus microplus. 12. 18 y 35 days) as dEnsity and spErmatic morphology (35 days). de muchas investigaciones destinadas a otorgarle a esta práctica seguridad. kEywords: solanuM toRvuM. cytotoxicity. a study was carriEd out to EvaluatE gEnotoxicity of aquEous broth of solanum torvum lEavEs on gErminal mousE cElls. gEnotoxicity. palabras clavE: solanuM toRvuM. De igual forma. También sobresale por sus efectos favorables sobre la presión arterial y el metabolismo de la fructuosa en ratas hipertensas [9]. t oxicological pattErns EvaluatEd body wEights (0. 6. Es un arbusto silvestre utilizado en la medicina tradicional por sus propiedades narcóticas. De todos los ensayos disponibles. antibacterianas incluyendo Helicobacter pylori [6. 18 y 35 días). conocida popularmente en Cuba por el nombre Prendejera. 1000 y 2000 mg/kg dE pEso corporal cada 24 h durantE los primEros cinco días dEl ExpErimEnto. with a 500. toRvuM prEsEntEd no toxicological EffEcts on 100% of trEatEd animals.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] sE rEalizó un Estudio para Evaluar la gEnotoxicidad dEl Extracto acuoso dE las hojas dE solanuM toRvuM En células gErminalEs dE ratón.

disnea. Administración y dosificación: todos los grupos se administraron por vía oral con una cánula intragástrica. inapetencia. los animales se sacrificaron por dislocación cervical y se les extrajo ambos epidídimos. se filtró a presión reducida en condiciones de esterilidad y se concentró en un evaporador rotatorio. torvum (500. Culminada esta fase. predecir las alteraciones negativas de su capacidad fertilizante y el riesgo de ocurrencia de ciertas enfermedades genéticas en las futuras generaciones. radiofrecuencias [16]. Citotoxicidad: se tomó un 1 mL de la suspensión espermática anterior y se colocó en una cámara de Neubauer (DDR. El extracto acuoso fue obtenido por decocción a partir de 50 g de material vegetal en 100 mL de agua destilada estéril. tres grupos tratados con diferentes dosis de extracto acuoso de S. Para garantizar la mayor extracción posible de los principios activos del tejido vegetal. Todos se mantuvieron en condiciones controladas de temperatura (22±3°C). Observaciones: los animales fueron observados diariamente (dos veces al día). Su colecta siempre fue realizada en horario de la mañana. 1000 y 2000 mg /kg PC. registrando la presencia de signos de toxicidad como: alopecia. Procedimiento experimental: a los 35 días después de la última administración. torvum. preservantes alimentarios [18] y medicamentos [19]. Grupos experimentales: se conformaron cinco grupos experimentales con cinco ratones cada uno: un grupo control ne- gativo (agua destilada estéril). diarreas. solanum PRENDEJERA. se diluyeron en agua destilada estéril una hora antes de cada administración. se realizaron dos frotis por cada animal en portaobjetos codificados. luego se homogenizó y se dejó reposar por cinco minutos. para determinar densidad espermática. en el horario de 9:30-10:30 am. y en lugares pertenecientes al macizo montañoso Nipe-Sagua-Baracoa a 475 m sobre el nivel del mar. 1000 y 2000 mg /kg de peso corporal (PC) y un grupo control positivo (ciclofosfamida) en dosis de 40 mg/kg PC. hasta obtener el sirope. la existencia de experiencias en evaluaciones de extractos vegetales [12-14]. Se analiza- LA BIO FAM . el cual se liofilizó y almacenó en recipientes color ámbar con tapas herméticas a temperatura de 8ºC. el presente trabajo tuvo como propósito evaluar la citotoxicidad y la genotoxicidad del extracto acuoso de las hojas de S. metales pesados [17]. Animales de experimentación: se utilizaron ratones machos adultos jóvenes de la línea Cenp: NMRI. El contenido se homogenizó y se filtró para realizar el análisis de las siguientes variables.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] beza del espermatozoide en roedores tiene especial relevancia. Preparación del material vegetal y extracto acuoso: las hojas se sometieron a un proceso de secado en una estufa con circulación de aire caliente a una temperatura de 37ºC durante cuatro días continuos. pues permite identificar compuestos que interactúan con el ácido nucleico de las células germinales masculinas y con ello. salivaciones. torvum. letargo. en células germinales de ratón. el solvente fue renovado tres veces seguidas por otro fresco cada 30 minutos aproximadamente. para posteriormente triturarse. suministrados por el Centro Nacional para la Producción de Animales de Laboratorio (CENPALAB). La alimentación consistió en una dieta a base de pienso concentrado multipropósito convencional CMO 1000 procedente del CENPALAB y agua fresca ad libitum. ES UNA DE LAS ESPECIES QUE FORMA PARTE DEL ARSENAL TERAPÉUTICO DE LA FLORA DE NUESTRO PAÍS 32 componentes vacunales parenterales y mucosales [15]. mediante el ensayo de morfología de la cabeza del espermatozoide. Cada uno de los animales fue pesado al inicio y a los 6. 18 y 35 días del experimento. Posee además como atractivo adicional. Genotoxicidad: a la suspensión espermática restante se le añadió tres gotas de eosina al 1%. Alemania). cada 24 h durante los primeros cinco días del experimento y con 16 h de ayuno. hasta el momento de su utilización. Transcurrido ese tiempo. los cuales fueron reducidos a pequeños fragmentos y depositados en placas Petri que contenían 2 mL de solución isotónica de NaCl 0. Las dosis de 500. con edades entre 8-12 semanas de edad y peso corporal entre 27-30 g. 12.9%. MATERIALES Y MÉTODOS Colecta del material vegetal: el material vegetal elegido para este estudio consistió en hojas sanas de S. humedad (30-70%) y períodos de luz/oscuridad de 12/12 h. temblores. Teniendo en cuenta lo anterior. convulsiones. sueño y coma.

5 los tratados con ciclofosfamida 0 (control positivo) mostraron afec0 6 12 18 35 Dias De Pesaje taciones significativas en todos los parámetros toxicológicos tenidos Figura 1. En todos los casos se empleó el programa estadístico SPSS 12. 1975 [20] y Dobrzyriska y Gajewski. en los cinco grupos experimentales durante los días 0.05). los resultados se muestran en la tabla 2. en un microscopio óptico con aumento de 100 x.0. demostrándose que ninguno de los grupos administrados con 500. 33 L ABIO FA M . 1000 y 2000 mg/kg PC de extracto acuoso de la planta tuvieron afectación significativa de la ganancia de peso corporal cuando se les comparó con el control negativo (p<0. El criterio de clasificación morfológica se basó en cabezas espermáticas normales y anormales según criterio de Wyrobeck y Bruce. torvum 2000 mg vado en los grupos administrados 10 Positivo con extracto acuoso de S. S. La no detección de efectos citotóxicos y genotóxicos en el grupo tratado con diferentes concentraciones de extracto acuoso de S. torvum 1000 mg 15 S. Para ambas pruebas estadísticas fue seleccionado un nivel de significación α= 0. Los valores para este paPeso Corporal (G) ron 1000 espermatozoides de forma consecutiva por animal y por un mismo observador. con respecto al grupo control negativo. Comportamiento del peso corporal en ratones NMRI (n=5) administrados con extracto acuoso de S. En la figura 1 se muestra el comportamiento del peso corporal en diferentes momentos del experimento. torvum. 2000[21]. a las posibles ausencias o bajas concentraciones de las sustancias 45 responsables de dichos efectos en 40 el extracto acuoso de las hojas. torvum 500 mg 20 A diferencia de lo obserS. y 35 quizás al recién descubierto efecto 30 antioxidante de la planta en tejidos Negativo 25 de roedores [23]. 18 y 35 del estudio. validándose la conduc- SW Smirnov. Análisis estadístico: se verificó la distribución de las variables tenidas en cuenta por medio de la prueba de Kolmogorov- rámetro en los animales administrados con dosis de 500. concluyendo el estudio con un 100% de supervivencia.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] torvum RESULTADOS Y DISCUSIÓN Los animales tratados con las diferentes dosis de extracto acuoso del S. 6. utilizando una ANOVA no paramétrica de Kruskal Wallis (días de pesaje y grupo experimental). torvum. * diferencia significativa según prueba de Kruskal Wallis (p<0. y una vez comprobado se procedió a identificar variaciones estadísticamente significativas del peso corporal. torvum. torvum no presentaron mortalidad. La densidad espermática determinada para cada grupo experimental se muestra en la tabla 1.05). en ninguno de los criterios de clasificación tenidos en cuenta.05. ni signos de toxicidad. en cuenta. 1000 y 2000 mg se comportaron de manera similar a los obtenidos en el grupo control negativo. La administración del extracto acuoso no produce incrementos significativos en la frecuencia de aparición de espermatozoides anormales. permite inferir que su administración no afecta ninguna de las etapas que forman parte de la espermatogénesis. 12. Este comportamiento favorable podría relacionarse con la presencia de la barrera hematotesticular que protege a las células espermáticas de efectos tóxicos [22]. Referente a las alteraciones morfológicas en las cabezas de los espermatozoides.

8 a 38 a 18. Dany Larramendi Griñan. torvum no resultó citotóxico ni genotóxico en las células espermáticas de ratón. titulado Evaluación toxicológica de plantas medicinales con acción antimicrobiana. torvum. torvum. Comportamiento de la densidad espermática en ratones NMRI administrados con extracto acuoso de S. y que además permite una posterior recuperación del peso corporal en los animales tratados al final del experimento. empleadas en la salud comunitaria. para esta sustancia y tipo de ensayo [12. Se agradece igualmente el apoyo del MSc. están en correspondencia con lo reportado por otros autores. (p<0. La citotoxicidad y genotoxicidad hallada en este grupo. (p<0. Tabla 2. Petra Aguilera Feria y Téc. 25]. Alfredo Alfonso Castillo. 34 Solanum torvum SW Agradecimientos Esta investigación ha sido financiada parcialmente por el proyecto 36-06/04 (CITMA-MINSAP).67 b S.05). letras diferentes difieren significativamente entre sí para la prueba de Kruskal Wallis.05) LABI OFAM CONCLUSIONES El extracto acuoso de las hojas de S.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] Tabla 1. GRUPOS EXPERIMENTALES Control negativo DOSIS (mg/kg) — 500 FRECUENCIA* /1000 CÉLULAS SIN GANCHO 4a 3a 4a 4a 15 b BANANA 4a 2a 6a 5a 50 b AMORFO 7a 6a 4a 6a 22 b S. torvum 1000 2000 ción de este ensayo en nuestras condiciones experimentales. DMV. bajo las condiciones experimentales descritas. Narvis Sedeño Soularí. De igual manera se pudo conocer. DMV. Comportamiento de la frecuencia de aparición de espermatozoides anormales en ratones NMRI administrados con extracto acuoso de S. Pedro Suárez Arias. disminuyendo su producción y maduración [26]. Tal comportamiento es producto a que sus metabolitos logran interactuar con las células de Sertoli y directamente con las células germinales. 24. letras diferentes difieren significativamente entre sí para la prueba de Kruskal Wallis. DMV. . GRUPOS EXPERIMENTALES Control negativo DOSIS (mg/kg) — 500 DENSIDAD ESPERMÁTICA* (106 x mL) 38 a 44 a 47. torvum 1000 2000 Control positivo 40 *valores expresados como medianas. pertenecientes todos al Centro de Toxicología y Biomedicina de Santiago de Cuba. Control positivo 40 *valores expresados como medianas. que la dosis utilizada no es letal.

genotoxic effects of methotrexate in germ cells of male Swiss mice. Ramos RA. Arencibia DF.465-98. 678: 59-64. Chou CH. Elango G. Bapat VA. 7. 14. Evaluación genotóxica del extracto fluido de Indigofera suffructicosa Mill (Añil cimarrón) mediante el ensayo de anomalías en la cabeza de los espermatozoides. J Ethnopharmacol 2010.Genotoxic assessment of aqueous extract of Rhizophora mangle L. Food Chem Toxicol 2010. phytochemistry Benítez G. 1988. J Environ Biol 2007. Tamayo IM. Hosokawa K. Reddy PP Modulating effect of Phyllanthus fruit . Mohan M. Cytotoxic and . Oncol Rep 2010. Rahuman AA. (20): 133-40. Takahashi K. Roig JT. 15(1): 18-26. Sultana S. Wyrobeck A. 23. Steroids 2009. pp. Food Chem Toxicol 2010. Parasitol Res 2010. Jahan S. Biosci Biotechnol Biochem 2010. 106(6):1403-12. Mutat Res 2008. Domínguez A. . Betancourt BJ. Yoshioka Y. Chromosome aberrations. Rev CENIC 2009. Gámez R. 133(1): 115-24. Investigation of . Noa M. 26. Kato E. Su CH. Nat Aca Sc 1975. Bagavan A. Luo J. 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[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] 36 FÓRMULA NATURAL QUE BRINDA SALUD LABI OFAM .

Para el Master en Ciencias Reymundo Miranda Leyva. donde se interceptan las avenidas 100 y Ojo 37 LABI OFAM . la constancia y el empeño de muchos en no dejarla morir conceden el privilegio de poder aprovechar sus bondades. incluso más fuerte que la combinación de vitamina A. antiinflamatorio e inmunorregulador. llamaron la atención a un grupo de especialistas que se incorporaron a este estudio aportando valor científico con sus evaluaciones preclínicas y clínicas. Siempre supe que no todos los árboles de esta extensa familia. nacida de la práctica cotidiana. alrededor de 15 son las empleadas en acciones curativas de manera efectiva. con convincentes resultados. También se destaca como analgésico. C y E. “Desde pequeño –refiere Páezmi padre curaba todos los malestares de la familia cocinando un poco de aquellos pedacitos de corteza que el mismo recolectaba en el campo. conocimiento que asumió por tradición familiar. convencido de las propiedades de la corteza de la planta de mango. crema cosmética y jarabe VIMANG® L egada por los abuelos de nuestros abuelos. están distribuidas en todo el mundo. Más de 200 tipos de anacardiáceas. propiedad esta que se la otorgan los flavonoides polifenólicos.” Años de investigación empírica. como un recurso a tener en cuenta para el tratamiento y profilaxis en temas vinculados a la salud. marcó las pautas para esta investigación en Cuba. además. este compuesto natural “es un poderoso antioxidante. En busca de satisfacer la demanda En el municipio de Arroyo Naranjo. todavía hoy. la Mangifera indica L. sin embargo. Recientemente se le descubrieron. Aunque no toda la comunidad científica apuesta por este tipo de terapia. Eleuterio Páez. originarias del continente asiático. eran apropiados para ese brebaje. los oligoelementos. quien lleva más de 15 años vinculado al proyecto. de esa necesidad de tomar de la naturaleza la cura a las más disímiles dolencias.[ PRODUCTOS N AT U R A L E S ] Extracto acuoso. los ácidos grasos polinsaturados y una rica variedad de minerales presentes en su composición. para desacelerar los procesos de envejecimiento de la piel. la medicina natural y tradicional continúa presentándose. en estudios pre clínicos.” Este suplemento nutricional resulta beneficioso. valores antiangeogénico lo cual abre un camino hacia el posible tratamiento de enfermedades oncológicas. además. especialista en II grado en Medicina Tradicional y Natural.

su consumo habitual. anunció la puesta en práctica de nuevas vías para obtener mayores cantidades del extracto concentrado. ya que con ellos podremos demostrarle a los escépticos que el Vimang es muy bueno”. mas. director de este centro. una planta de glucosa en la provincia de Cienfuegos. para lograr presentarlo como un medicamento se tendría que hacer un estudio más profundo. el extracto acuoso y el jarabe. “Estamos utilizando en estos momentos. extracción y concentración por efecto muy similar al nuestro. especialistas. que este compuesto sea empleado de manera profiláctica y no sólo como una opción extrema para la solución. los valores del reconstituyente van más allá de sus propiedades beneficiosas para la salud. sin embargo. Acudir a esta cita representa una manera de mostrar agradecimiento.[ [N P R O D U CD EO S E N A T U R A L E S O M B R E T CCIÓN] ] 38 de Agua. o como paliativo. trabajar en la dosificación. que tiene un sistema de maceración. Una familia se reencuentra Cada agosto pacientes y especialistas se reúnen para exponer sus experiencias en el uso de los productos Vimang. sustancia base para la fabricación de la crema. LABI OFAM . Como parte de este proyecto de salud en 100 y Ojo de Agua también radica una clínica de atención médica terciaria a la que asisten todas las personas interesadas en este tipo de terapia. perteneciente al Grupo Empresarial LABIOFAM. un encuentro en el que se confirma cuanto de beneficioso puede resultar su consumo sistemático. técnicos y obreros que desarrollan los productos Vimang. radican el laboratorio y la planta de producción en la cual se elaboran los principales productos de la línea Vimang –crema cosmética. a estas se le incorporan la calidad humana y la sensibilidad de todo el personal que labora en la clínica. jarabe y extracto acuoso– que responden a la marca comercial Natura. Osvaldo Martínez. Allí los pacientes pueden adquirir todos los productos prescritos por el facultativo en una farmacia que logra mantener una oferta estable. “Esta convergencia de cualidades provoca que el Vimang potencie su efecto curativo. reafirma que “la profilaxis es lo más importante del compuesto natural. realizar muchos más ensayos clínicos.” Una clínica para el Vimang Es interés de los directivos. Según las evidencias puestas de manifiesto entre los presentes. Es evidente una mejoría en la calidad de vida de la persona enferma. a determinados problemas de salud. los directivos y especialistas del centro de investigaciones Vimang trabajan por consolidar este noble proyecto de salud. Con esto asumimos un proceso a gran escala que nos permitirá lograr miles de litros de este concentrado primario. a manera de prueba. El doctor Reymundo. a decir de Páez “puede evitar padecer de un sinnúmero de enfermedades”. responsable del grupo médico. La alta demanda de cada uno de estos compuestos de origen natural ha dirigido la mirada hacia la necesidad de ampliar las capacidades de la industria.” Los estudios sobre el alcance del referido compuesto natural para la salud humana son aún una página abierta. A pesar de las barreras que persisten para aceptar la medicina tradicional y natural como una terapia efectiva. lo cual redundará favorablemente en un incremento notorio de nuestras producciones finales. a decir de muchos.