Penetapan Kadar Hb Dengan Metoda Sianmethemoglobin

Penetapan kadar Hb dengan metoda sianmethemoglobin

I.

Tujuan Menentukan kadar Hb dalam darah secara kuantitatif dengan metoda sianmethemoglobin

II.

Dasar Pada metoda ini semua bentuk hemoglobin diubah menjadi pigmen yang lebih stabil, yaitu sianmetHb setelah menambahan suatu pereaksi tunggal yang mengandung kalium sianida dan kalium ferisianida. Ferisianida akan mengoksidasi Hb menjadi metHb yang kemudian direaksikan dengan ion sianida membentuk sianmetHb.

III.

Bahan dan alat : 1. Darah yang akan diperiksa 2. Pipet sahli 0,2 mL 3. Pipet volumetrik 5 mL 4. Pereaksi Drabkin (1,0 gram NaHCO3, 52 mg KCN-beracun-, dan 198 mg K3fe(CN)6 dalam 1 L airsuling. Simpan dalam botol coklat). 5. Spektrofotometer dan kuvet. 6. Standar Hb.

IV.

Cara kerja 1. Pipetkan dengan pipet volumetrik 5 mL pereaksi drabkin ke dalam sebuah tabung reaksi 2. Tambahkan 0,02 mL darah yang akan diperiksa pada tabung yang berisi pereaksi Drabkin, bilas pipet tersebut 3 kali dengan pereaksi Drabkin dalam tabung tersebut. 3. Diamkan selama 10 menit. 4. Pindahkan campuran tersebut ke dalam kuvet spektrofotometer dan tentukan serapannya pada 540 nM. Sebagai blanko digunakan pereaksi Drabkin.

5. Tentukan kadar Hb dalam g% dari standar Hb yang disediakan dengan rumus sbb. 6. Kadar Hb = V. Hasil Tabung Pereaksi Drabkin (mL) Darah segar (mL) Standar Hb (mL) Diamkan (menit) Bacalah serapan pada panjang gelombang 540 nm Hasil perhitungan : kadar (g%) Blanko 5,02 10’ Standar 5,02 10’ Uji 5 0,02 10’ ( )

VI.

Pembahasan Interpretasi : Batas-batas nilai normal dengan metoda ini untuk lakilaki berkisar antara 13,5 sampai 18,0 g/dL darah dan untuk wanita berkisar antara 11,5-16,5 g/dL darah.

VII.

Kesimpulan

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful