‫الفيتامين ‪C‬‬

‫ميكروفلوروميتريك إجراءات المقايسة‬

‫إعداد عينة‬
‫إعداد عينة استخراج كما هو مبين في الشكل ‪ .8-11‬إلى ‪ 100‬مل لكل من حمض السكوربيك‬
‫القياسية و اختبار عينة حلول إضافة ‪ 2‬غرام من حمض غسلها نوريت‪ R -‬محايدة‪ ،‬يهز بقوة‪،‬‬
‫وتصفية‪ ،‬التخلص من مل القليلة الولى‪.‬‬
‫حمض السكوربيك القياسية واختبار عينة الفراغات نقل ‪ 5‬مل من كل الترشيح لفصل قوارير‬
‫الحجمي ‪ 100‬مل تحتوي على ‪ 5‬مل من ‪-H3BO3‬نواك الحل‪ .‬السماح الوقوف ‪ 15‬دقيقة‪،‬‬
‫ودوامة أحيانا‪ .‬تعيين كمعيار أو اختبار عينة فارغة‪ .‬تمنع تطوير الكينوكسالين الفلورسنت من‬
‫خلل تشكيل مجمع حمض ‪-H3BO3‬ديهيدرواسكوربيك قبل إضافة كاشف ‪ -o‬فينيلينديامين‪.‬‬
‫في الوقت المناسب‪ ،‬تمييع حلول فارغة لحجم مع منزوع اليونات ‪ .H2O‬نقل ‪ 2‬مل من‬
‫هذه الحلول لكل من ثالثاة أنابيب مضان‪.‬‬
‫حمض السكوربيك العينات القياسية واختبار نقل ‪ 5‬مل من كل معيار واختبار عينة الترشيح‬
‫لفصل القوارير الحجمي ‪ 100‬مل التي تحتوي على ‪ 5‬مل من ‪) ٪50‬ث ‪ /‬ت( هيدروكسيد‬
‫الصوديوم ناهوك و ‪ ca. 75‬مل من ‪ ،H2O‬محتويات دوامة‪ ،‬وبعد ذلك تمييع لحجم مع ‪H2O‬‬
‫منزوع اليونات‪ .‬نقل ‪ 2‬مل من هذه الحلول لكل من ثالثاة أنابيب مضان‪.‬‬
‫تشكيل كينوكسالين لجميع العينات وأنابيب فارغة‪ ،‬إضافة ‪ 5‬مل من ‪) ٪0.02‬ث ‪ /‬ت( مائي‬
‫كاشف ‪ -o‬فينيلينديامين‪ ،‬دوامة محتويات باستخدام دوامة خلطا‪ ،‬والسماح للوقوف في درجة‬
‫حرارة الغرفة مع الحماية من الضوء لمدة ‪ 35‬دقيقة‪.‬‬
‫عزم قياس مضان عينة وأنابيب فارغة في إكس ‪ λ = 350‬نانومتر‪ ،‬إم ‪ λ = 430‬نانومتر‪.‬‬

‫تحليل فيتامين ‪ C‬بواسطة طاريقة ميكروفلوروميتريك‪ ،‬أوك الطريقة ‪.(2) 45.1.15 ،967.22‬‬
‫]مقتبس من )‪ ،(20‬ص ‪ [.341-338‬درجة الحموضة‪ .‬الخطوات التحليلية التي تبدأ مع الكسدة‬
‫من الثيامين من خلل قياس مضان )الشكل ‪ (11-11‬يجب أن يتم بسرعة وبدقة وفقا للتعليمات‪.‬‬
 ‫‪ 11-2-5-4-3‬الجراء يبين الشكل ‪ 11-11‬تسلسل سيدور من تحليل الثيامين‪ .‬إنزي ‪ -‬العلج‬
‫ماتيتش واللوني اللوني قد ل يكون من الضروري تنظيف مع مصفوفات معينة‪ ،‬مثل مرآزات‬
‫الفيتامينات التي تحتوي على نونفوس ‪ -‬ثايامين فوريلتد وليس كميات كبيرة من‬
‫المواد التي يمكن أن تتداخل مع القرار‪.‬‬
‫‪ 11-2-5-4-4‬الحسابات ميكروغرام من الثيامين في ‪ 5‬مل من محلول الختبار‬
‫= ])‪[5] [(I - b / S - d‬‬
‫أين‪:‬‬
‫‪ I‬و ‪ = b‬مضان استخراج من عينة الختبار المؤكسد وعينة فارغة‪،‬‬
‫على التوالي ‪ S‬و ‪ = d‬مضان استخراج من المؤكسد القياسية و فارغة القياسية‪،‬‬
‫على التوالي ميكروغرام من الثيامين ‪ /‬ز‬
‫= ])‪ / C / A × 25 × [(I - b / S - d‬ف × فو ‪ /‬وت ]‪[6‬‬
‫أين‪:‬‬
‫‪ I‬و ‪ = b‬مضان استخراج من أكسدة عينة الختبار وعينة فارغة‪،‬‬
‫على التوالي ‪ S‬و ‪ = d‬مضان من استخراج من أكسدة‬
‫معيار ومعيار فارغة‪ ،‬على التوالي ‪ = C‬تركيز الثيامين · حمض الهيدروكلوريك القياسية‪،‬‬
‫ميكروغرام ‪ /‬مل ‪ = A‬قسامة اتخذت‪ ،‬مل ‪ = 25‬الحجم النهائي من خيط العمود‪ ،‬مل‬
‫ف = حجم مرت من خلل العمود الكروماتوغرافي‪ ،‬مل‬
‫فو = حجم التخفيف من العينة الصألية‪ ،‬مل‬
‫وت = وزن العينة‪ ،‬ز تحليل ثايامين من قبل ثايوكروم الجراءات‬
‫إعداد عينة تزن عينة تحتوي على الثيامين‪ ،‬إضافة حجم ‪ M 0.1‬هكل يساوي في مل ل ≤‪10X‬‬
‫الجافة وزن جزء الختبار في ز‪ ،‬مزيج‪ ،‬الوتوكلف لمدة ‪ 30‬دقيقة في ‪ ،C◦123-121‬ثام بارد‪.‬‬
‫تمييع مع ‪0.1‬‬
‫‪ M‬هكل إلى حجم قياس تحتوي على كاليفورنيا‪ 5-0.2 .‬ميكروغرام ثايامين ‪ /‬مل‪.‬‬
‫النزيم التحلل خذ قسامة تحتوي على كاليفورنيا‪ 25-10 .‬ميكروغرام ثايامين‪ ،‬تمييع إلى‬
‫كاليفورنيا‪ 65 .‬مل مع ‪ 0.1‬م حمض الهيدروكلوريك وضبط درجة الحموضة إلى ‪ 4.5-4.0‬مع‬
‫كاليفورنيا‪ 5 .‬مل ‪ .M CH3COONa 2‬إضافة ‪ 5‬مل من محلول انزيم‪ ،‬مزيج‪ ،‬احتضان لمدة ‪3‬‬
‫ساعة في ‪ .C◦50-45‬بارد‪ ،‬التكيف مع كاليفورنيا‪ .‬ودرجة الحموضة ‪ ،3.5‬تمييع إلى ‪ 100‬مل‬
‫مع ‪ H2O‬منزوع اليونات‪ ،‬والتصفية‪.‬‬
 ‫عينة استخراج تنظيف تطبيق قسامة من عينة اختبار استخراج تحتوي على ‪ ca. 5‬ميكروغرام‬
‫ثايامين إلى المحدد ايون تبادل الراتنج العمود‪ ،‬وغسل العمود مع ‪ 3X 5‬مل أجزاء من الماء‬
‫المغلي تقريبا‪.‬‬
‫ثام أزل الثيامين من الراتنج مع ‪ 5X 4.0‬إلى ‪ 4.5‬مل أجزاء من الغليان تقريبا حمض‪-‬بوكل‬
‫حل‪ .‬جمع شطافة في قارورة الحجمي ‪ 25‬مل وتمييع لحجم مع حمض بوكل حل‪ .‬معاملة المعايير‬
‫بشكل متطابق‪.‬‬
‫أكسدة الثيامين إلى ثايوكروم إلى أنبوب اختبار‪ ،‬إضافة ‪ 1.5‬غرام من كلوريد الصوديوم و ‪ 5‬مل‬
‫من الثيامين · حمض الهيدروكلوريك حل قياسي )‪ 1‬ميكروغرام ‪ /‬مل(‪.‬‬
‫إضافة ‪ 3‬مل من كاشف مؤكسد ]أي ‪ K3Fe‬الساسية )ن( ‪ ،[6‬محتويات دوامة‪ ،‬ثام إضافة ‪13‬‬
‫مل من إيزوبوتانول‪ ،‬يهز بقوة‪ ،‬وأجهزة الطرد المركزي‪ .‬كرر الخطوات للخيار القياسي ولكن‬
‫بدل من ذلك استبدال الكاشف المؤكسد مع ‪ 3‬مل من ‪) ٪15‬ث ‪ /‬ت( هيدروكسيد الصوديوم‪.‬‬
‫صأب مقتطفات اليزوبيوتانول )أي‪ ،‬المعيار والفاكس( في أنابيب القراءة مضان‪ ،‬وقياس في‬
‫إكس ‪ λ = 365‬نانومتر و إم ‪ λ = 435‬نانومتر‪ .‬علج حل الختبار بشكل‬
‫متطابق‪ ،‬وتسجيل كثافة مضان عينة الختبار وفراغ‪.‬‬
‫تحليل الثيامين )فيتامين ‪ (B1‬من قبل فلووميتريك ثايوكروم الجراء‪ ،‬أوك الطريقة ‪،942.2.3‬‬
‫‪.(2) 45.1.05‬‬
‫ارجع إلى )‪ (2‬لمزيد من التفاصأيل حول الجراء‪.‬‬
‫‪ 11-2-5-5‬الريبوفلفين )فيتامين ‪ (B2‬في الغذية و فيتامين الستعدادات‪ ،‬طاريقة فلوروميتريك‬
‫)أوك ميثود ‪ 1-5-5-2-11 (2) (45.1.08 ،970.65‬المبدأ بعد الستخلص‪ ،‬والتنظيف‪،‬‬
‫والتعويض عن وجود تدخالت فرعية فرعية‪ ،‬المواقف‪ ،‬يتم تحديد الريبوفلفين فلوروميتريكالي‪.‬‬
‫‪ 11-2-5-5-2‬النقاطا الحرجة نظرا للحساسية الشديدة‪ ،‬من فيتامين إلى الشعة فوق البنفسجية‪،‬‬
‫وجميع العمليات تحتاج إلى أن تجري تحت ضوء خافت‪ .‬ذي ‪ -aa‬كيست يحتاج أيضا أن يكون‬
‫على بينة من أن اللتزام الدقيق لعملية الكسدة برمنغنات أمر ضروري لنتائج موثاوقة‪.‬‬
‫‪ 11-2-5-5-3‬الجراء مخطط إجرائي بروتوكول لهذا التحليل في الشكل ‪ .12-11‬على الرغم‬
‫من حقيقة أن الريبوفلفين تصنف على أنها قابلة للذوبان في الماء فيتامين‪ ،‬فإنه ل تذوب بسهولة‬
‫في الماء‪ .‬متى وإعداد الحل القياسية‪ ،‬يجب على المحلل إيلء اهتمام خاص وضمان أن‬
‫الريبوفلفين هو حل تماما‪.‬‬
‫‪ 11-2-5-5-4‬الحسابات ملغ من الريبوفلفين ‪ /‬مل حل الختبار النهائي‬
‫= ])‪0.10 × 0.001 [7] × [(X - B) / (B - C‬‬
 ‫أين‪:‬‬
‫‪ B‬و ‪ = C‬مضان عينة الختبار التي تحتوي على المياه والصوديوم ديثيونايت‪ ،‬على التوالي‬
‫‪ = X‬مضان عينة الختبار التي تحتوي على معيار الريبوفلفين‬
‫ملحوظة‪ .‬يجب أن تكون قيمة ])‪ 0.66≤ [(X - B) / (B - C‬و ≥‪ (1.5‬ملغ من الريبوفلفين ‪ /‬ز‬
‫من العينة‬
‫= ])‪) x [(X - B) / (B - C‬كس ‪) x (V /‬دف ‪ /‬وت( ]‪[8‬‬
‫أين‪:‬‬
‫‪ B‬و ‪ = C‬مضان العينة التي تحتوي على الماء و هيدروسلفيت الصوديوم‪ ،‬على التوالي‬
‫‪ = X‬مضان عينة تحتوي على معيار الريبوفلفين‬
‫كس = تركيز المعيار المعبر عنه ملغ ‪ /‬مل ريبوفلفين إجراء الفحص عن طاريق فلوريزنس‬

‫إعداد عينة‬
‫تزن عينة متجانس‪ ،‬إضافة حجم ‪ M 0.1‬هكل يساوي في مل ل ≤‪ 10X‬الوزن الجاف للجزء‬
‫الختبار في ز؛ يجب أن يحتوي الحل الناتج ≥‪ 0.1‬ملغ الريبوفلفين ‪ /‬مل‪ .‬مزيج محتويات‪،‬‬
‫الوتوكلف لمدة ‪ 30‬دقيقة في ‪ C◦123-121‬وثام بارد‪ .‬يعجل المواد المسببة للتداخل عن طاريق‬
‫تعديل ودرجة الحموضة إلى ‪ 6.5-6.0‬مع هيدروكسيد الصوديوم المخفف تليها فورا تعديل الرقم‬
‫الهيدروجيني إلى ‪ 4.5‬مع تمييع حمض الهيدروكلوريك‪ .‬تمييع مع ‪ H2O‬منزوع اليونات إلى‬
‫كاليفورنيا‪ 0.1 .‬ميكروغرام من الريبوفلفين ‪ /‬مل‪ ،‬والتصفية‪.‬‬
‫أكسدة المواد المسببة للتداخل أكسدة على النحو التالي‪ :‬نقل ‪ 10‬مل من الترشيح اختبار لكل من‬
‫أربعة أنابيب‪ .‬إلى اثانين من هذه النابيب‪ ،‬إضافة ‪ 1.0‬مل من ‪ H2O‬منزوع اليونات‪ ،‬والباقي‬
‫منها إضافة ‪ 1.0‬مل من حل قياسي )أي‪ 1 ،‬ميكروغرام ‪ /‬مل من الريبوفلفين(‪ .‬ثام إلى كل‬
‫أنبوب‪ ،‬واحد في وقت واحد‪ ،‬إضافة ‪ 1.0‬مل من هواك الجليدية تليها ‪ 0.5‬مل من ‪) ٪4‬ث ‪ /‬ت(‬
‫‪ .KMnO4‬السماح للخليط للوقوف لمدة ‪ 2‬دقيقة‪ ،‬ومن ثام إضافة ‪ 0.5‬مل من ‪(v / v) ٪3‬‬
‫‪ .H2O2‬يهز بقوة حتى يتم طارد ‪ O2‬الزائدة‪.‬‬
‫قياس مضان‬
‫قياس مضان في إكس ‪ λ = 440‬نانومتر و إم ‪ λ = 565‬نانومتر‪ .‬أول قراءة عينات الختبار‬
‫التي تحتوي على ‪ 1‬مل من محلول ريبوفلفين معيار المضافة‪ ،‬ومن ثام عينات تحتوي على ‪ 1‬مل‬
‫من منزوع اليونات ‪ .H2O‬إضافة‪ ،‬مع الخلط‪ 20 ،‬ملغ من ‪ Na2S2O4‬إلى اثانين من النابيب‪،‬‬
‫وقياس الحد الدنى مضان في غضون ‪ 5‬ثاانية‪.‬‬
 ‫‪ 11-12‬الشكل‬
‫تحليل الريبوفلفين )فيتامين ‪ (B2‬بواسطة مضان‪ ،‬أوك طاريقة ‪.(2) 45.1.08 ،970.65‬‬
‫‪ = V‬حجم العينة لمضان قياس‪ ،‬مل‬
‫دف = عامل التخفيف‬
‫وت = وزن العينة‪ ،‬ز‬

‫‪ 11.3‬مقارنة الطرق‬
‫كل نوع من أسلوب له مزاياه و ‪ -disad‬الفضال‪ .‬في اختيار طاريقة معينة من التحليل‬
‫لفيتامين معين أو الفيتامينات‪ ،‬تحتاج إلى النظر فيها‪ ،‬وبعضها مدرجة‬
‫أدناه‪:‬‬
‫‪ .1‬طاريقة الدقة والدقة‪.‬‬
‫‪ .2‬الحاجة إلى معلومات التوافر البيولوجي‪.‬‬
‫‪ .3‬الوقت ومتطلبات الجهزة‪.‬‬
‫‪ - 4‬احتياجات الموظفين‪.‬‬
‫‪ .5‬نوع المصفوفة البيولوجية التي سيتم تحليلها‪.‬‬
‫‪ .6‬عدد العينات التي سيتم تحليلها‪.‬‬
‫‪ .7‬المتطلبات التنظيمية ‪ -‬يجب أوك الرسمية الساليب الدولية المستخدمة؟‬
‫وتستغرق الختبارات الحيوية وقتا طاويل للغاية‪ .‬هم تقتصر العمالة عموما على تلك الحالت‬
‫التي ل تتوفر فيها طاريقة بديلة مناسبة‪ ،‬أو للحالت التي التوافر البيولوجي من الحليلة هو‬
‫المطلوب‪ ،‬خاصأة إذا لم تكن هناك أساليب أخرى أثابتت تقديم هذه المعلومات‪ .‬اختبارات بيولوجية‬
‫لديها ميزة أنها في بعض الحيان ل تتطلب وإعداد مقتطف‪ ،‬وبالتالي القضاء على إمكانات‬
‫التغيرات غير المرغوب فيها في التحليل التحليلي‪ ،‬إعداد مستخلص‪ .‬من ناحية أخرى‪ ،‬في‬
‫حالة من متطلبات التنمية نقص قبل التحليل‪ ،‬تقتصر الختبارات البيولوجية على الحيوانات بدل‬
‫منالبشر‪.‬‬
‫كل من الميثروبيولوجية والفيزيائية ‪ -meth‬أودس تتطلب استخراج فيتامين )أي‪ ،‬قبل الذوبان‬
‫للتحليل(‪ .‬بشكل عام‪ ،‬والنتائج التي تم الحصول عليها من خلل‬
‫وتمثل هذه الساليب المحتوى الكلي للجزء الجسيمات‪ ،‬فيتامين لر في مصفوفة بيولوجية معينة‪،‬‬
‫مثل الغذاء‪ ،‬وليس بالضرورة التوافر البيولوجي للبشر‪.‬‬
 ‫إن إمكانية تطبيق المقايسات الميكروبيولوجية محدودة‪ ،‬إلى الفيتامينات القابلة للذوبان في الماء‪،‬‬
‫والكثر شيوعا تطبق على النياسين‪ ،B12 ،‬وحمض البانتوثانيك‪ .‬على أية حال تستغرق وقتا‬
‫طاويل‪ ،‬فإنها عموما يمكن استخدامها لتحليل مجموعة واسعة نسبيا من البيولوجية‬
‫المصفوفات دون تعديلت كبيرة‪ .‬علوة على ذلك‪ ،‬وغالبا ما يتطلب إعداد عينة أقل مقارنة‬
‫الفحوصأات الفيزيائية‪.‬‬
‫بسبب بساطاتها النسبية‪ ،‬والدقة‪ ،‬والطرق الفيزيائية‪ ،‬على وجه الخصوص‬
‫الطرق الكروماتوغرافية باستخدام هبلك‪ .ferred ،‬على سبيل المثال‪ ،‬هبلك القياسية هو عادة‬
‫تستخدم كطريقة رسمية لتحليل فيتا‪ -‬دقيقة ‪ ،A، E، D‬وكطريقة لمراقبة الجودة‬
‫لفيتامين ‪ .C‬بينما هبلك ينطوي على رأس المال عالية تنفق‪ ،‬فإنه ينطبق على معظم الفيتامينات‬
‫والقراض نفسها في بعض الحالت لتحليل في وقت واحد من العديد من الفيتامينات و ‪ /‬أو‬
‫الفيتامرات )أي‪ ،‬أيزومرات فيتا ‪ -‬دقيقة(‪ .‬تنفيذ إجراءات متعددة الصفات ل يمكن تحليل‬
‫الفيتامينات القابلة للذوبان في الماء يؤدي إلى كفاءة الفحص مع المدخرات في الوقت والمواد‪ .‬إلى‬
‫تكون مفيدة‪ ،‬يجب أن ل يؤدي الفحص في وقت واحد إلى الخسارة من الحساسية والدقة والدقة‬
‫عند المقارنة إلى أساليب تحليلية واحدة‪ .‬وبصفة عامة‪ ،‬أساليب تحليلها للفيتامينات قابلة للذوبان‬
‫في الماء فحص منتجات عالية التركيز بما في ذلك الصيدلنية‪ -‬كالس‪ ،‬والمكملت الغذائية‪،‬‬
‫وفيتامين بريمكسيس هي تماما وضعت بسهولة‪ .‬على الرغم من أن تطبيق هبلك‬
‫وقد ثابت أن مجموعة واسعة من بيولوج‪ -‬المصفوفات اللكترونية مع أي تعديلت طافيفة أو فقط‬
‫في بعض الحالت‪ ،‬يجب أن نضع في اعتبارنا دائما أن جميع التقنيات الكروماتوغرافية‪ ،‬بما في‬
‫ذلك هبلك‪ ،‬هي الفصل وليس طارق تحديد الهوية‪ .‬وبالتالي‪ ،‬أثاناء التكيف من طاريقة هبلك القائمة‬
‫لمصفوفة جديدة‪ ،‬ووضع دليل على ذروة الهوية و النقاء هو خطوة أساسية في التكيف الطريقة‬
‫أوتطوير‪.‬‬

‫على مدى العقد الماضي‪ ،‬اللوني السائل فيالجمع مع مطياف الكتلة )مس( )انظر الفصل‪(26 .‬‬
‫بعدا جديدا لفيتامين تحليل‪ -‬جهاز المن والمخابرات‪ .‬بشكل عام‪ ،‬طارق لك‪-‬مس متوفرة الن‬
‫لكل فيتامين الدهون و المياه القابلة للذوبان‪ .‬الكشف عن طاريقمرض التصلب العصبي المتعدد‬
‫يؤدي إلى زيادة الحساسية‪ ،‬أوكال تحديد وتوصأيف الفيتامين‪.‬‬
 ‫أصأبحت المقايسات لك‪-‬مس بسرعة دعامة أساسية‬
‫دقيقة‪ ،‬فعالة من حيث التكلفة تحليلت الفيتامينات‪ .‬فمثل‪ ،‬يستخدم لك‪-‬مس عادة للتحقق من ‪vita‬‬
‫دقيقة ‪ D‬من المنتجات ذات المصفوفات الصعبة )أي‪ ،‬ومقارنة النتائج مع تلك التي لديها معيار‬
‫لك تحليل‪ -‬سيس(‪ ،‬و لك‪-‬مس ‪ /‬مس للفولت )مقابل الميكروبيولوجية طاريقة(‪ .‬ويشير القارئ إلى‬
‫المرجع )‪ (12‬لتطبيقات لك‪-‬مس لفيتامينات محددة‪.‬‬
‫وعند اختيار نظام للتحليل‪ ،‬ومن الحكمة النظر في استخدام الساليب الرسمية التي تم اختبارها‬
‫من خلل دراسة استباقية‪ ،‬والتي يتم نشرها من قبل مثل هذه المنظمات كما أوك إنترناشونال )‬
‫‪ ،(2‬اللجنة الوروبية لتوحيد )‪ ،(10-3‬والوليات المتحدة الدوائية الدوائية‪ -‬فنتيون )‪ ،(11‬أوأسك‬
‫إنترناشونال )‪ .(21‬مرة أخرى‪ ،‬يجب أن ندرك أن هذه الساليب تقتصر على‬
‫بعض المصفوفات البيولوجية‪ 11.4 .‬الموجز ثالثاة أنواع الكثر استخداما من أساليب ل الشرج‬
‫يسيس من الفيتامينات ‪ -‬بيوسايس والميكروبيولوجية والفحوص الفيزيائية ‪ -‬تم توضيحها في هذا‬
‫الفصل‪ .‬وهي تنطبق‪ ،‬بوجه عام‪ ،‬سيس من أكثر من فيتامين واحد والعديد من المصفوفات‬
‫الغذائية‪ .‬ومع ذلك‪ ،‬يجب أن تكون الجراءات التحليلية بشكل صأحيح‬
‫مصممة خصيصا للحليلة في السؤال و ‪ -Biologi‬كال مصفوفة ليتم تحليلها‪ .‬القضايا المتعلقة‬
‫بالعينة‬
‫التحضير‪ ،‬الستخراج‪ ،‬والقياس الكمي ‪ -‬وتشارك أيضا مشاركة‪ .‬ومن الضروري التحقق من‬
‫صأحتها أي طالب جديد بشكل مناسب من خلل تقييمه الحكام والدقة‪ .‬التحقق من صأحة السلوب‬
‫هو ‪ -espe‬سيالي المهم مع أساليب الكروماتوغرافي مثل كما هبلك‪ ،‬لن هذه الساليب لهجة‬
‫أساسا ‪ -sep‬بدل من تحديد المركبات‪ .‬إلى عن على هذا السبب‪ ،‬فمن الضروري ضمان الهوية‬
‫ليس فقط‬
‫من هذه المركبات ولكن أيضا‪ ،‬بنفس القدر من الهمية‪ ،‬منها نقاء‪.‬‬

‫‪ 11.5‬أسئلة الدراسة‬
‫‪ .1‬ما هي العوامل التي ينبغي النظر في اختيار الفحص لفيتامين معين؟‬
‫‪ .2‬لتكون كوانتيتاتد من قبل معظم الساليب‪ ،‬يجب أن تكون الفيتامينات المستخرجة من الطاعمة‪.‬‬
‫ما هي العلجات شائعة تستخدم لستخراج الفيتامينات؟‬
‫لفيتا واحد قابل للذوبان في الدهون‪ ،‬دقيقة واحدة فيتامين للذوبان في الماء‪ ،‬وإعطاء مناسبة‬
‫استخراج الجراء‪.‬‬
‫‪ .3‬ما هي الفيتامينات اثانين يجب أن تكون مدرجة على مستوى نوتر‪ -‬تيونال التسمية؟‬
 ‫‪ - 4‬المعيار الذي تقيس به جميع الساليب الكيميائية يتم مقارنة فيتامين ‪ D‬المحتوى هو طاريقة‬
‫بيواساي‪ .‬وصأف طاريقة هذه الطريقة الحيوية‪.‬‬
‫‪ 5.‬اشرح لماذا من الممكن استخدام الكائنات الحية الدقيقة في الكوان‪ -‬تيتات فيتامين معين في‬
‫المنتج الغذائي‪ ،‬ووصأف مثل هذا الجراء‪.‬‬
‫‪ .6‬النياسين وفولت كلهما يمكن كوانتيتاتد بواسطة الميكروبيولوجي‪ -‬إيكال‪ .‬ما هي الجراءات‬
‫والحتياطاات الضافية اللزمة في مقايسة حمض الفوليك مقارنة مع فحص النياسين‪ ،‬و لماذا؟‬
‫‪ - 7‬وهناك أسلوبان شائعان من أساليب النفاذ إلى الضوضاء )أوك( تأكد من محتوى فيتامين ‪C‬‬
‫من الطاعمة‪ .‬تحديد هذين أساليب؛ ثام قارن والتباين بينها فيما يتعلق المبادئ المعنية‪.‬‬
‫‪ .8‬هل محتوى فيتامين ‪ C‬على النحو الذي يحدده ‪ -2،6‬يتم تقليل طاريقة ثانائي كلورويندوفينول أو‬
‫الفراطا في تناولها‪ ،‬ويقدر في حالة الحرارة عينات عصير معالجتها؟ اشرح اجابتك‪.‬‬
‫‪ .9‬ما هي مزايا وعيوب استخدام هبلك لتحليل فيتامين؟‬
‫‪ .10‬يمكن عرض محتويات الفيتامين ك وحدات ملغ أو ميكروغرام‪ ،‬ووحدات دولية )إيو(‪ ،‬أو‬
‫‪٪‬دف‪ .‬ناقش الختلفات بين هذه النهج للبلغ عن نتيجة‪.‬‬

‫‪ 11.6‬مشاكل الممارسة‬
‫‪ .1‬عينة من سمك التونة ‪ 3.21‬ز )معبأة في الماء وتصريفها من قبلخذ العينات( لتحليل محتوى‬
‫النياسين‪ .‬و‪ -‬تم هضم بل في ‪ 50‬مل من ‪ .N H2SO4 1‬بعد حل تمت إزالة البروتين عن طاريق‬
‫هطول المطار وفقا لطريقة أواك‪ ،‬تم تخفيف قسامة ‪ 20‬مل إلى ‪ 100‬مل‪ ،‬ثام قسامة ‪ 25‬مل من‬
‫الحل المتوسط أخذت وخففت إلى ‪ 250‬مل‪ .‬تركيز النياسين في حل العمل كان من المقرر أن‬
‫يكون ‪ 0.168‬ميكروغرام ‪ /‬مل‪.‬‬
‫)أ( مقدار النياسين الموجود في التونة‬
‫)ب( مدى قرب مقارنة هذه القيمة مع التي قدمت في قاعدة بيانات وزارة الزراعة المغذيات ل‬
‫ستان‪ -‬دارد المرجع )أي السماك والتونة والضوء والمعلبة في الماء‪ ،‬المواد الصلبة المجففة(؟‬

‫‪ .2‬تم تقدير فيتامين ‪ C‬في الصيغة الغذائية وذلك باستخدام طاريقة تيتريمتريك ‪-2،6‬ثانائي‬
‫كلورويندوفينول‪ .‬تحديد تركيز فيتامين ‪) C‬ملغ ‪ /‬ز( في نوتراسيوتيكال استنادا إلى البيانات‬
‫الواردة أدناه من فحص‪.‬‬
‫• وزن العينة‪ 101.7 .‬غرام‪ ،‬المخفف إلى ‪ 500‬مل مع حل ‪ / HPO3‬هوك وتصفيتها‬
‫• حجم عينة الترشيح المعايرة‪ 25 :‬مل‬
 ‫• حجم الصبغة المستخدمة في المعايرة حل الختبار‪ 9.2 :‬مل‬
‫• حجم الصبغة المستخدمة لختبار المعايرة فارغة‪ 0.1 :‬مل‬
‫• ملغم حامض السكوربيك ملغ إلى ‪ 1.0‬مل من إندوفينول الحل القياسي‪ 0.175 :‬ملغ ‪ /‬مل‬
‫‪ .3‬تم تحليل الثيامين في عينة طاعام الحيوانات الليفة باستخدام أوك طاريقة فلوروميتريك‪ .‬استنادا‬
‫إلى فحص ‪ -con‬والدوية الموصأوفة أدناه‪ ،‬وتحديد تركيز الثيامين )ميكروغرام ‪ /‬غرام( في‬
‫عينة طاعام الحيوانات الليفة الصألي‪.‬‬
‫• وزن العينة‪ 2.0050 .‬جم‬
‫• التخفيفات‪ .‬عينة المخفف إلى ‪ 100‬مل‪ ،‬تطبيق ‪ 25‬مل على بيو‪-‬ريكس ‪ 70‬عمود التبادل‬
‫اليوني‪ ،‬ثام المخفف شطافة إلى ‪ 25‬مل وتستخدم ‪ 5‬مل للتألق‬
‫• تركيز الثيامين · حمض الهيدروكلوريك العمل القياسية ‪ solu- : 0.1‬ميكروغرام ‪ /‬مل‬
‫• فلوروميتري نسبة القراءة‪ .4 0.850 :‬تم تحليل الريبوفلفين في اللوز الخام باستخدام‬
‫أوك طاريقة فلوروميتريك‪ .‬واستنادا إلى فحص كوندي ‪ -‬تيونات الموصأوفة أدناه‪) ،‬أ( تحديد‬
‫تركيز الريبوفلفين )مغ ‪ (g /‬في اللوز و )ب( مدى قرب هذا قيمة مقارنة مع تلك المنصوص‬
‫عليها في المواد الغذائية وزارة الزراعة الميركية قاعدة بيانات للمرجعية القياسية‪.‬‬
‫• وزن العينة‪ 1.0050 :‬ز‬
‫• التخفيفات‪ :‬إلى ‪ 50‬مل‪ .‬تستخدم ‪ 10‬مل ل فلوروميتري‬
‫• قراءات الفلوروميتري‪B60 / X85 / C10 :‬‬
‫• التركيز أو الحل القياسية الريبوفلفين‪ 1 :‬ميكروغرام ‪ /‬مل ‪ .5‬تم تحليل ‪ 1.7‬جم من طاعم لحم‬
‫الخنزير مطهو ببطء‪ ،‬أمين‪ .‬تم هضم العينة مع ‪ 20‬مل من ‪ M 0.1‬حمض الهيدروكلوريك ثام‬
‫يخفف إلى ‪ 50‬مل‪ .‬قسامة ‪ 40‬مل من الهضم تم التعامل مع إعداد النزيم وفي نهاية المطاف‬
‫المخفف إلى ‪ 100‬مل‪ .‬قسامة ‪ 45‬مل من النزيم المعالجة تم تنقية الترشيح باستخدام بيو‪-‬ريكس‬
‫‪ 70‬تبادل اليونات ‪ .col- UMN‬تم تطبيق الحليلة من قسامة ‪ 45‬مل إلى العمود واستردت مع‬
‫خمسة أجزاء ‪ 4.0‬مل من حمض ساخن حل بوكل‪ .‬تم تجميع الجزاء في قارورة حجمية ‪ 25‬مل‬
‫ومخفف للحتفال‪ A 5 .‬مل قسامة وكذلك الفراغات المناسبة والمعيار )‪ -con‬تركيز = ‪1‬‬
‫ميكروغرام ‪ /‬مل( تم تحويلها إلى ثايوكروم و قياس الطيف الضوئي‪ .‬النتائج التالية‬
‫تم ايجادها‪:‬‬
‫• كثافة الفلورسنت من عينة الختبار المؤكسد وكانت فارغة ‪ 62.8‬و ‪ 7.3‬على التوالي‬
‫• كثافة الفلورسنت من الثيامين · حمض الهيدروكلوريك القياسية و كان الفراغ ‪ 60.4‬و ‪5.2‬‬
‫على التواليتحديد )أ( كم ميكروغرام من الثيامين في ‪ 5‬مل من اختبار الحل؛ )ب( كم ميكروغرام‬
‫من الثيامين ‪ /‬ز مطهو ببطء لحم الخنزير ختم فرم؛ )ج( كيف يقارن الجواب من )ب( مع ما ورد‬
‫في قاعدة بيانات المغذيات لوزارة الزراعة الميركية للمرجع القياسي‪.‬‬
‫‪ .6‬يقوم طاالب الدراسات العليا بتحليل النشاطا المضاد للكسدة ‪ -‬الفينول‪ ،‬المركبات‪ ،‬إلى داخل‪،‬‬
‫عصير التفاح‪ ،‬العينات‪ ،‬أيضا‪ -pur ،‬يطارد بعض عصير التفاح من سوق المزارعين‪ .‬ستو ‪-‬‬
‫مخاوف من أن المنتج قد تكون محصنة مع حمض السكوربيك‪ ،‬وإذا كان المر كذلك‪ ،‬سوف‬
‫يفسد له أنتيوكسي‪ -‬دانت الفحص‪ .‬لذلك‪ ،‬يتم إجراء تحليل فيتامين ‪ C‬من قبل ‪-2،6‬ثانائي‬
‫كلورويندوفينول طاريقة تيتريمتريك‪ 120 .‬مل من تم خلط عصير التفاح مع ‪ 120‬مل من‬
‫‪ / HPO3‬هوك حل‪ .‬في ثالث نسخ‪ ،‬قسامة ‪ 10‬مل من الناتجة تم أخذ الحل ومعايرة ضد‬
‫إندوفينول المحاليل القياسية‪ .‬تم العثور على النتائج التالية‪:‬‬
‫• متوسط ‪ 13.3‬و ‪ 0.1‬مل من مادة إندوفينول ستان‪ -‬دارد كان يستهلك خلل المعايرة من عينة‬
‫الختبار و فارغة‪ ،‬على التوالي‬
‫• من العمل الولي تم تحديد ذلك‬
‫‪ 0.1518‬ملغ من حمض السكوربيك ما يعادل ‪ 1.0‬مل من إندوفينول القياسية الحل‬
‫تحديد )أ( كم ملغ من حمض السكوربيك ‪ /‬مل من التفاح عصير التفاح؛ )ب( كيف يمكن مقارنة‬
‫هذه النتائج مع المعلبة أو عصير التفاح المعبأة في زجاجات جديدة وفقا ل أوسدا ‪ -Nutri‬إنت‬
‫قاعدة بيانات للمرجع القياسي؛ )ج( لديه التفاح تم تحصين عصير التفاح مع فيتامين ‪ .C‬و )د(‬
‫يمكن هذا التفاح يمكن استخدام عينة عصير التفاح في النشاطا‬
‫المضاد للكسدة دراسة؟‬
‫‪ .7‬في طاريقة تيتريمتريك ‪-2،6‬ثانائي كلورويندوفينول‪ ،‬و يتم إعداد كاشف إندوفينول عن طاريق‬
‫إذابة ‪ 50.0‬ملغ من ‪-2،6‬ثانائي كلورويندوفينول ملح الصوديوم بالضافة إلى بعض الصوديوم‬
‫بيكربونات في الماء منزوع اليونات إلى ‪ 200‬مل‪ .‬و أسكور‪ -‬يتم إعداد حمض بيك القياسية‬
‫الحل عن طاريق إذابة ‪ 50.0‬ملغ من أوسب أسكوربيك حمض المعيار المرجعي في ‪ 50‬مل‬
‫من الماء منزوع اليونات‪ .‬إذا قسامة ‪ 4.5‬مل من أسكور‪ -‬يتم التعامل مع معيار مرجعي حمض‬
‫بيك مع ‪ 5.0‬مل من الحل ‪ / HPO3‬هوك ومن ثام معايرة ضد‬
‫كاشف إندوفينول‪ ،‬كم ميلليترز ينبغي أن يكون المستهلكة؟ ملحظة‪ :‬تذكر الكيمياء المتكافئة ل‬
‫رد فعل‬
‫• فو من ملح الصوديوم ‪-2،6‬ثانائي كلورويندوفينول هو ‪ 290.08‬جم ‪ /‬مول‬
‫• فو من حمض السكوربيك هو ‪ 176.12‬غرام ‪ /‬مول‬
 ‫‪ - 8‬ووضعت صأيغة جديدة للرضع لتسليمها بلد ثاالث‪ .‬لسوء الحظ‪ ،‬والرضع المجففة تم تخزين‬
‫الصيغة في الهواء الطلق لمدة ‪ 3‬أشهر في الشمس‪ -‬ضوء قبل الستخدام وهناك خوف من أن‬
‫فيتامين )أ( لديه المتدهورة‪ .‬محتوى فيتامين )أ( ذكرت )أعرب عنها كل‪-‬ترانس مكافئ الريتينول(‬
‫في الصيغة عند النقطة من الشحن ‪ 3.0‬ميكروغرام ‪ /‬جم من الصيغة الجافة‪ .‬التى اختبار‪140 :‬‬
‫غرام من الصيغة الجافة )أي بعد ‪ 3‬أشهر من التخزين في الهواء الطلق في ضوء الشمس(‬
‫حلها في الماء وتصل إلى ‪ .L 1‬طاريقة أوك مع الملحظات التالية‪:‬‬
‫• كانت منطقة الذروة بالنسبة لكل ال ريتينول في المعيار ‪934‬‬
‫• وزن محلول الزيت المستخدم لعداد العمل وكان معيار الريتينول ‪ 53‬ملغ‬
‫• تركيز آل‪-‬ترانس‪-‬ريتينول في معيار الزيت كان الحل ‪ 1996‬نانوغرام ‪ /‬مل‬
‫• منطقة الذروة لمحلول الختبار بعد التخزين في الهواء الطلق كان ‪ 89‬تحديد )أ( تركيز )نغ‬
‫مل( من جميع‪ -‬ريتينول في حليب الطافال المجفف؛ )ب( بماذا نسبة لديها محتوى فيتامين )أ(‪،‬‬
‫وأعرب كما كل عبر ترينول‪ ،‬في صأيغة الرضع المجففة المتدهورة؟‬

‫الجوبة‬
‫)أ( ‪ 420‬ميكروغرام في جزء اختبار ‪ 3.2‬ز؛‬
‫)ب( هناك ‪ 13.08‬ملغ النياسين ‪ 100 /‬جرام التونة في عينة الختبار‪ .‬أوسدا المغذيات قاعدة‬
‫البيانات للمرجع القياسي يسرد قيمة ‪ 0.711 ± 13.280‬ملغ النياسين ‪ 100 /‬غرام من سمك‬
‫التونة؛ لذلك‪ ،‬القيم مقارنة جيدا‪.‬‬

‫العمليات الحسابية‪:‬‬
‫)أ( النياسين الموجود في عينة التونة هو‪. . .‬‬
‫‪ 0.168‬ميكروغرام مل ×‪ 250‬مل ‪ 25‬مل ×‪ 100‬مل ‪ 20‬مل × ‪ 50‬مل‬
‫= ‪ 420‬ميكروغرام = ‪ 0.420‬ملغ النياسين‬
‫وبالتالي‪ 0.420،‬ملغ النياسين ‪ 3.21‬جم‬
‫= ‪ 0.1308‬مجم ‪ /‬جم من التونة أو ‪ 13.08‬مجم من النياسين ‪ 100 /‬جم من سمك التونة‬

‫)ب( قاعدة بيانات المغذيات الخاصأة بوزارة الزراعة المريكية للمرجع القياسي يسرد محتوى‬
‫النياسين من ‪ 13.28‬ملغ ‪ 100 /‬ز التونة ل "السماك‪ ،‬التونة‪ ،‬والضوء‪ ،‬والمعلبة في الماء‪،‬‬
‫والمواد الصلبة استنزفت "‪ .‬وهكذا‪ ،‬و ‪ 13.08‬ملغ النياسين ‪ 100 /‬غرام قيمة التونة قريبة جدا‬
 ‫من قيمة ‪ 13.28‬ملغ المبلغ عنها في قاعدة البيانات‪ 0.313 .2 .‬ملغ حمض السكوربيك ‪ /‬ز‬
‫نوتراسيوتيكال‬
‫العمليات الحسابية‪:‬‬
‫‪ F = 0.175‬ملغ آ مكافئ ‪ /‬مل معيار إندوفينول ‪ X = 9.2‬مل من صأبغ لختبار المعايرة الحل‬
‫‪ B = 0.1‬مل من الصبغة لختبار المعايرة فارغة مغ حمض السكوربيك ‪ /‬ز عينة‬
‫= )‪ 9.2) = (V / Y) × (F / E) × (X - B‬مل ‪ 0.1 -‬مل( × ‪ 0.175‬ملغ ‪ /‬مل ‪ 101.7‬جم×‬
‫‪ 500‬مل ‪ 25‬مل‬
‫= ‪ 0.313‬ملغ من حمض السكوربيك ‪ /‬ز نوتراسيوتيكال صأيغة ‪ 0.8479 .3‬ميكروغرام‬
‫ثايامين ‪ /‬ز الغذاء الحيوانات الليفة‬

‫العمليات الحسابية‪:‬‬

‫تركيز الثيامين · حمض الهيدروكلوريك القياسية = ‪ 0.1‬ميكروغرام ‪ /‬مل‬

‫نسبة قراءة فلوروميتري = ‪(S-d) (I - b) 0.850‬‬
‫‪ μg‬ثايامين ‪g =(I - b)(S-d)×CA ×25 /‬‬
‫نائب الرئيس×فو ‪ WT= 0.850 ×0.1‬ميكروغرام ‪ /‬مل ‪ 5‬مل ×‪ 2525‬مل ×‪ 100‬مل‬
‫‪ 2.0050‬جم‬
‫= ‪ 0.8479‬ميكروغرام ثايامين ‪ /‬ز طاعام الحيوانات الليفة ‪.4‬‬
‫)أ( ‪ 3-10 × 9.95‬ملغ الريبوفلفين ‪ /‬ز اللوز الخام‪.‬‬
‫)ب( هناك ‪ 0.995‬ملغ الريبوفلفين ‪ 100 /‬جرام اللوز الخام في عينة الختبار‪.‬‬
‫قاعدة بيانات المغذيات لوزارة الزراعة المريكية لقوائم المراجع القياسية قيمة ‪0.025 ± 1.014‬‬
‫ملغ الريبوفلفين ‪ 100 /‬جرام اللوز الخام‪.‬‬
‫)ترجمه من صأفحه ‪ 192‬الي صأفحه ‪( 197‬‬

‫تحت اشراف ‪.‬‬

‫د‪ .‬مصطفي كامل‬

‫أ‪.‬كمياء اغديه‬

‫اعداد ‪.‬‬
‫أيه ابراهيم سيد‬
‫قسم الصناعات الغذائيه‬