You are on page 1of 55

2.5.

Determinacin de transferencia de oxgeno

2.5.1. Conceptos generales


Requerimientos de oxgeno:
La disponibilidad de oxgeno en el medio de cultivo durante los procesos fermentativos, es muy importante en el control de la velocidad de crecimiento y en la produccin de metabolitos

2.5.1. Conceptos generales


El medio puede influir sobre la disponibilidad de oxgeno en las siguientes formas: Cuando sustratos rpidamente metabolizables (azcar) con una alta demanda de oxgeno, se encuentran presentes en el medio en altas concentraciones, el cultivo puede verse limitado por el oxgeno, al no estar disponible en el fermentador.

1. Metabolismo rpido:

2.5.1. Conceptos generales


2. Reologa: Los componentes individuales del
medio pueden influir sobre la viscosidad final del medio y sobre su comportamiento subsecuente con respecto a aereacin y agitacin 3. Antiespumantes: muchos espumantes utilizados actan como surfactantes y reducen la velocidad de transferencia de oxgeno

2.5.1. Conceptos generales


En los procesos de fermentacin aerbicos es necesario un suministro adecuado de oxgeno que satisfaga los requerimientos metablicos de los m.o. La oxidacin de la fuente de carbono y su transformacin en clulas, productos y CO2 establece una demanda de oxgeno que es esencial satisfacer a travs de aereacin y mezclado del cultivo

2.5.1. Conceptos generales


Es indispensable conocer los requerimientos de oxgeno del cultivo para asegurarse de que su suministro sea suficiente. Cuando se evala la transferencia de oxgeno en una fermentacin es necesario calcular las resistencia a la transferencia que encuentra el oxgeno antes de llegar a la clula

Transferencia de oxgeno

Pelcula de lquido

Burbuja
Clula

El mecanismo total de la transferencia de oxgeno se puede dividir en: Transferencia difusional del oxgeno a travs de las pelculas de gas y lquido que rodean las burbujas de aire Transferencia en la solucin Transferencia a travs de la pelcula de lquido que rodea la clula Reaccin bioqumica intracelular

Resistencia mayor a la transferencia de oxgeno (paso controlante):

Pelcula de lquido que rodea la burbuja

Organismos unicelulares: Agregados celulares

difusin a travs del mismo agregado

(pellets):

Velocidad de transferencia de oxgeno


Velocidad de transferencia de masa Coeficiente de transferencia de masa

(1)

rea X

fuerza directriz

Velocidad total de transferencia de oxgeno por unidad de volumen (Na)


Na = kL a (Cg* - CL) (2)

Donde: k L:

Coeficiente de transferencia de oxgeno en la fase lquida a: rea interfacial Cg*: Concentracin de oxgeno en la interfase gas-lquido (solubilidad) CL: Concentracin de oxgeno en la solucin

Diferentes unidades de kLa


Na lbO2/ft3 h gO2/m3 h mMO2/l h lbO2/ft3 h mMO2/l h DC lbO2/ft3 * gO2/m3 o ppm* mMO2/l * atm atm k La h-1 h-1 h-1 lbO2/ft3 h atm mMO2/l h atm

*Suponiendo que pO2 = HCO2; donde p=presin parcial en atm y H es la constante de Henry para gases insolubles sin reaccin qumica

Demanda de oxgeno
La demanda de oxgeno deber ser siempre igual o menor que Na para que el sistema no est limitado por oxgeno Demanda de O2 = QO2x (3)

Donde:

QO2:
x:

Velocidad de consumo de oxgeno Concentracin de microorganismos

Demanda especfica de O2 y concentracin crtica de oxgeno para diferentes organismos


ORGANISMO
Aspergillus niger Streptomyces griseus Penicillium chrysogenum Klebsiella aerogenes Saccharomyces cerevisiae Escherichia coli Candida utilis Pseudomonas ovalis
(mMO2/gcel. h)

QO2
3.0 3.0 3.9

(mg/l)

Ccrit
-

0.40

4.0 8.0 10.8 -

0.60 0.26 1.10 2.00

Transferencia de oxgeno en procesos de fermentacin


dC = kL a (Cg* - CL) - QO2 x dq
Donde: dC/dq: Cambio de concentracin del oxgeno disuelto kLa: Coeficiente de transferencia de masa (h-1) Cg*: Concentracin de saturacin de oxgeno, en el intervalo dq (mmol/l) CL: Concentracin de oxgeno en la solucin (mmol/l) x: Concentracin de microorganismos (g de clulas/l) QO2: Velocidad de consumo de O2 (mmolO2/g cl. h)

(4)

Evaluacin de la transferencia de oxgeno


1

Aire g1 Y1
3

V: Volumen del reactor Y: Fraccin mol de oxgeno en el aire g: flujo de aire (l /h) 1: Analizador de oxgeno gaseoso

Aire

1 2

g0 Y0

2: Medidor de flujo de aire


3: Electrodo medidor de oxgeno disuelto

Tcnicas para la medicin de la transferencia de oxgeno

Medicin directa
a. Balance de oxgeno en el sistema b. Tcnica dinmica

Medicin indirecta
a. Oxidacin de sulfito b. Tcnica de eliminacin de gas

2.5.2. Medicin directa


Se realiza con fermentaciones reales, tanto batch, como continuo El valor obtenido es ms representativo Balance de oxgeno en el sistema: g0Y0 g1Y1 VQO2x = V dC dq (5)

Balance de oxgeno
1

Aire g1 Y1
3

V: Volumen del reactor Y: Fraccin mol de oxgeno en el aire g: flujo de aire (l /h) 1: Analizador de oxgeno gaseoso

Aire

1 2

g0 Y0

2: Medidor de flujo de aire


3: Electrodo medidor de oxgeno disuelto

Balance de oxgeno en el sistema


En el edo. estacionario del cultivo continuo, o cuando CL vara muy poco (cultivo BATCH), las ec. (4) y (5) se convierten en:

kL a (Cg* - CL) = QO2 x g0Y0 g1Y1 = VQO2x

(6) (7)

Balance de oxgeno en el sistema


Combinando las ec. (6) y (7), resulta: kL a = g0Y0 g1Y1 V (Cg* - CL)promedio

(8)

Balance de oxgeno en el sistema


Consumo de oxgeno (Na), considerando que g0 g1: Na = g0Y0 g1Y1 = g0 ( Y0 Y1) V V (9)

Balance de oxgeno en el sistema


Para fermentadores pequeos: KLa = Na (Cg* - CL) (10)

Para fermentadores mayores de 50 litros KLa = Na (11) (Cg0* - Cg1*) ln Cg0* - CL Cg1* - CL

Tcnica dinmica (rgimen no estacionario)


Utiliza la respuesta transitoria de un electrodo medidor de oxgeno disuelto a los cambios de concentracin de oxgeno no disuelto Se basa en la ecuacin (4) Las mediciones se hacen utilizando un electrodo de respuesta rpida (5 a 10 seg.) y una concentracin celular conocida

Tcnica dinmica (rgimen no estacionario)


C*
(C* - C) = QO2 x / kL a I -QO2 x II

dC = kL a (Cg* - CL) - QO2 x dq


I: Suspensin del flujo de aire II: Aereacin

Ccrit 0

tiempo

Tcnica dinmica (rgimen no estacionario)


1. Se suspende la entrada de aire y se grafica el decremento en la concentracin de oxgeno contra el tiempo:

- dC = QO2 x
dq

(12)

2. 3.

Se determina QO2 x a partir de la pendiente de la grfica Antes de que CL alcance el valor crtico de la concentracin de oxgeno, se reinicia la aereacin y se grafica de nuevo CL vs tiempo y se calcula dC/dq en observaciones sucesivas

Problemas prcticos de la aplicacin de la tcnica dinmica


1. Tiempo de respuesta del electrodo
2. Concentracin celular 3. Aereacin superficial 4. Escala de operacin

Tcnica dinmica
CL = Cg* 1 kL a dC + QO2 x dq

C*
C -1/KLa

QO2 x

dC/dq

Tcnica dinmica
Cuando no se desea hacer la diferenciacin indicada en el paso 3, se puede resolver la ecuacin (4) considerando que:
Cuando q ; dC 0

QO2 x = (Cg* - C) kL a

(13)

Donde C es la concentracin de oxgeno disuelto en el lquido cuando q

Tcnica dinmica
Combinando las ecuaciones (4) y (12):

dC = kL a [(C* - C) (C* - C)] dq


De donde:

(14)

dC C - C

= kL a dq

(15)

Tcnica dinmica
Integrado la ecuacin (15), se obtiene:

- ln C - CL = kL a q C - C0

(16)

Graficando ln (C - C) vs. tiempo, la pendiente de la lnea recta resultante es kL a

2.5.3. Medicin indirecta


Se denomina indirecta porque se lleva a cabo en sistemas donde no se est efectuando una fermentacin Los valores obtenidos slo indican un orden de magnitud Se emplean para hacer comparaciones entre diferentes reactores que operan en condiciones similares

2.5.3. Medicin indirecta


En este caso el trmino correspondiente a la utilizacin de oxgeno por el microorganismo, QO2x vale 0, por lo que la ec. (4) se transforma en:

dC = kL a (Cg* - CL) dq

(17)

La solucin de dicha ecuacin se obtiene experimentalmente siguiendo cualquiera de los dos mtodos

Oxidacin de sulfito
Se puede establecer la capacidad de un fermentador para absorber oxgeno, burbujeando aire travs de una solucin acuosa de algn agente reductor Por ejemplo, la oxidacin cataltica del sulfito de sodio

Oxidacin de sulfito
El coeficiente de transferencia obtenido no refleja exactamente el sistema Habr una cantidad despreciable de oxgeno disuelto en la solucin de sulfito, lo que hace que (C*g CL) se converta en C*g Vincent y Allock confirmaron la ecuacin anterior usando un sistema de control de oxgeno disuelto que meda la solucin de sulfito en el fermentador

Oxidacin de sulfito
Parmetros que afectan la medicin por este mtodo: Pureza de la solucin de sulfito pH Tipo de equipo utilizado Es importante anotar las condiciones experimentales en las que se obtienen los valores de la oxidacin de sulfito

Oxidacin de sulfito
Cu++

2Na2SO3 + O2
Co++

2Na2SO4

(18)

Na2SO3 + I2 + H2O
almidn

Na2SO4 + 2HI

(19)

2Na2S2O3 + I2

inicador

Na2S4O6 + 2NaI

(20)

Oxidacin de sulfito (Tcnica)


1. Se coloca en un fermentador una solucin de sulfito de sodio (0.1 a 1.0 N) con una concentracin de CuSO4 mayor de 1mM 2. Se ajusta el flujo de aire y la velocidad del impulsor 3. Se comienza a tomar muestras peridicamente (en botellas llenas y perfectamente selladas para prevenir la posterior oxidacin) 4. Mediante las ecuaciones (18) a (20) se determina la velocidad de oxidacin del sulfito, que est dada por KLa Cg*

Oxidacin de sulfito:
Limitantes
Los valores obtenidos por esta tcnica son en general mayores que los medidos por otros mtodos, por lo que se recomienda precaucin en su uso Cuando aumenta el tamao del fermentador, el costo de esta tcnica la hace inaplicable, en cuyo caso se recomienda el uso de la tcnica de eliminacin de gas

Tcnica de eliminacin de gas


C(t) C* C2 C1
Aire nuevo
Eliminacin de O2 con N2 o SO3-2

t1 t2

Tiempo

Tcnica de eliminacin de gas


Las bases de esta tcnica son muy similares a las de oxidacin de sulfito, como QO2x = 0 es aplicable la ecuacin (17) Considerando que CL = 0 e integrando la ecuacin (17):
ln((Cg* - C2)/(Cg* - C1)) = -KL a (t2 t1) (21)

Tcnica de eliminacin de gas


Cuando el oxgeno disuelto ha sido totalmente eliminado, a t1 = 0; C1 = 0 y la ecuacin 21 adopta la siguiente forma: ln (1 - C(t)/Cg*) = -KL a t (22)

Tcnica de eliminacin de gas


1

Pend = -KL a t
ln (1 - C(t)/Cg*)

Tiempo

2.5.4. Tiempo de respuesta


En las soluciones anteriores, el problema de tiempo de respuesta de un electrodo no est considerado

Es necesario hacer un anlisis matemtico para determinar criterios de seleccin de electrodos

2.5.4. Tiempo de respuesta


Haciendo un balance de oxgeno en el electrodo y considerando que su respuesta es de primer orden: dCm = K (C Cm) dq (23)

Donde: Cm = Concentracin de oxgeno disuelto medido por electrodo K = 1/t Tiempo de respuesta

t=

2.5.4. Tiempo de respuesta


Aplicando las transformadas de Laplace a la ecuacin (23) se obtiene:
Cm(s) = C(s) + t Cm(0)

(24)

ts + 1

ts + 1

2.5.4. Tiempo de respuesta


Utilizando las ecuaciones (4) para hacer un balance en el proceso de transferencia y aplicando las transformadas de Laplace, se establece:

C(s) =

C(0)

(s + kL a)

+ kL a Cg* - QO2 x

(25)

s(s + kL a)

2.5.4. Tiempo de respuesta


Combinando las ecuaciones (24) y (25):

C(s) =

C(0) + kL a Cg* - QO2 x + t Cm(0) (ts + 1 )(s + kL a) s(s + kL a)(ts + 1) (ts + 1)

(26)

2.5.4. Tiempo de respuesta


Buscando las antitransformadas correspondientes, la ecuacin (26) se convierte en:
Cm(q) = C0 (e-q kL a - e q/t) + Cg* - QO2 x 1 - t kL a kL a 1+ kL a e-q kL a te q/t + Cm(0) e q/t kL a 1 kL a

(27)

2.5.4. Tiempo de respuesta


Considerando que Cm() = Cg* - QO2 x / kL a y en
el rgimen estacionario C(0) = Cm(0):
q/t

Cm() - Cm(q) = t kL a e Cm() Cm(0) t kL a 1

1 e-q kL a t k La 1

(28)

2.5.4. Tiempo de respuesta


Definiendo el primer trmino de la ecuacin (28) como W, para electrodos de respuesta rpida (t = 0), resulta: W = Cm() - Cm(q) = Cm() Cm(0)

e-q kL a

(29)

2.5.4. Tiempo de respuesta


Es decir, el criterio de seleccin es: t > 1/ kLa t < 1/ kLa Respuesta pobre Respuesta adecuada

Cuando se utiliza un electrodo de respuesta muy rpida, como el de alambre de platino, se presenta el problema del ruido

2.5.4. Tiempo de respuesta


1 / 1 t KLa

ln W

Pend = - KL a