Profesor: TM Miguel Ramírez López

PRINCIPIOS DE MICROBIOLOGÍA

 Evolución Microbiana y Biodiversidad

¿Cómo surgió la diversidad microbiana?
 Como resultado de procesos de mutación y de

recombinación genética, que actúan en un ambiente de constante selección.  La diversidad microbiana refleja la variedad fisicoquímica de los hábitats adecuados para la vida en la Tierra

 Los biólogos en general aceptan la idea que la

vida se origina a partir de materia inanimada en un proceso que se denomina evolución química

SH2.  Temperaturas superiores a 100ºC . las condiciones de la tierra primitiva. H2. distaban mucho de las actuales. CH4) y poco o nada de O2. La Tierra primitiva  A pesar de que nunca se sabrá con certeza.  La atmósfera primitiva contenía: Vapor de Agua (H2O).  Astrofísicos y geólogos calculan la edad de la tierra en 4600 millones de años. N2 y en menor cantidad. CO2.. NH3. CO..

estas moléculas orgánicas se acumularon sencillamente por que no fueron devoradas ni reaccionaron con el oxigeno como lo haría en la actualidad.  Dado que la atmósfera primitiva carecía de oxigeno libre y de cualquier forma de vida.  Esta acumulación sería lo que se llama actualmente "caldo de cultivo primitivo" y a partir del cual podría haber surgido la primera forma de vida..  La interacción entre las moléculas así generadas se incrementó a medida que su concentración aumentaba. . El siguiente paso fue la formación de grandes moléculas por polimerización de las pequeñas moléculas..

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LOUIS PASTEUR      LILLE: región productora de cerveza y vino se le encarga estudiar el proceso de fermentación Descubre: En este proceso los m. Pasteurizacion.(t° 30” a 60°C) .o. Acidificacion de la leche a t° ambiente tambien se producia por m.o. son capaces de transformar azucares en alcohol.

.El trabajo de Pasteur estableció que   Los microorganismos podían ser aislados de su ámbito natural y hacerlos crecer en el laboratorio para su estudio y clasificación. Estableció la asociación de las bacterias con la enfermedad.

Trabajo con Peste bubónica. ántrax TBC.o. * Pudo desarrollar m. en forma pura de muestras biológicas de animales y personas enfermas . TBC: “teoría germinal de las enfermedades infecciosas “ *Trabajo en el desarrollo de medios de cultivo. Cólera. gelatinas con diversos aditivos y nutrientes.ROBERT KOCH       Medico Alemán Pionero de la “Microbiología Medica” .

EL MICROBIO DEBE SER CULTIVADO EN FORMA PURA. EL MISMO MICROBIO DEBE SER AISLADO Y CULTIVADO DE LOS ANIMALES A LOS QUE SE LES ADMINISTRO.Estandarización de criterios experimentales (POSTULADOS DE KOCH)     PARA QUE UNA ENFERMEDAD SEA CONSIDERADA INFECCIOSA DEBE HABERSE IDENTIFICADO EL MICROBIO ESPECIFICO QUE LA CAUSA. . EL MICROBIO IDENTIFICADO Y CULTIVADO EN FORMA PURA DEBE PRODUCIR LA ENFERMEDAD CUANDO ES ADMINISTRADO A UN ANIMAL.

PAUL EHRLICH   Finales del siglo 19 no existían ATBs para combatir a m. Estudios bases para la tincion Gram. Estudios Premio Nóbel 1908 Inmunología Uso de tintas en la identificación bacteriana. En 1910 Paul Herlich usa como ATBs colorantes que matan y tiñen selectivamente a las espiroquetas Treponema pallidum (Sífilis). Zhiel Neelsen.  • • • .o.

ALEXANDER FLEMING  • • Medico Escocés Descubre las Lisozimas. y se dio cuenta del carácter inhibitorio del hongo.(Hongo Penicillium notatum) En un cultivo de E. que generaba un “halo” alrededor suyo. • . surgió una colonia fúngica.Coli expuesto al aire.(fluido nasal) Penicilina.

métodos y fines de la clasificación de los seres vivos. . Seres vivos: Todos aquellos en que la estructura básica y unidad funcional es la célula.TAXONOMIA   Ciencia que se ocupa de los principios.

Trypanosoma.Bacterias. Hongos Reino Animalia.------. Toxoplasma.ácaros arañas etc. Reino Plantae. garrapatas . Plantas Reino Fungi. Helmintos. Giardia. Plasmodium. organismos unicelulares con núcleo.Clasificación seres vivos  • • • • • 5 reinos Monera:Procariontes. organismos unicelulares carentes de núcleo. Protozoos: Ameba. . Protistas: Eucariontes.

ambientes salinos (halófilos extremos). alcalinos. morfológicas y de adaptación a distintos nichos ecológicos o ambientales.Reino Monera (procariontes)  • • Estudios de ácidos nucleicos indican que existen 2 líneas filogenéticos. oxidan o reducen azufre y crecen a t° tan altas como 95°c. encontramos bacterias quimiolitotroficas. “ cuando nos referimos a bacterias es dominio Bacteria” . Dominio Archea: encontramos bacterias que viven en ambientes extremos de temperatura. volcanes (hipertermofilos). ambientes ácidos. hipertermofilas. aguas termales. Dominio Bacteria:Encontramos bacterias con un espectro amplio de propiedades fisiológicas.

PROP. ESTRUCTURA DE ACCESORIOS( FLAGELO. PROP BIOQUIMICAS.  . CAPSULA).TAXONOMIA MOLECULAR Y CONVENCIONAL  TAXONOMIA MOLECULAR: DNA %G+C/A+G+C+T ES UNA REFERENCIA UTIL EN UNA PRIMERA APROXIMACION AL ESTUDIO DE LAS RELACIONES EVOLUTIVAS ENTRE BACTERIAS. FORMA. REACCION FRENTE A COLORANTE. PIGMENTACION. TAXONOMIA CONVENCIONAL----FENOTIPO. METABOLICAS. AGRUPACION. FIMBRIA. REQUERIMIENTOS NUTRICIONALES.

Primera palabra con mayúscula y segunda palabra con minúscula. Escrita en latín. .NOMENCLATURA • •     Carlos linneo (1707-1778)Naturalista y medico austriaco Nomenclatura binomial Compuesta por Genero y especie. Ambas palabras subrayadas.

Su difundido y generalizado uso. Estabilidad de los nombres usados. pues este se conserva a pesar de las modificaciones taxonómicas y sistemáticas. Strectococcus pnumoneae. Staphylococcus aureus .Ventajas de su uso        Su economía. Escherichia coli. usa dos palabras para identificar inequívocamente a una especie. Ejm. Klebsiella pneumoneae.

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Esta simplicidad no significa que las procarióticas sean inferiores a las células eucarióticas. con una muy buena relación superficievolumen.Estructura de una Bacteria  Generalmente. la longitud de las células procarióticas está comprendida entre 1 y 10 micras. son unas 10 veces más pequeñas que las células eucarióticas. Su gran ventaja es su pequeño tamaño. es decir. La estructura de una célula procariótica es muy sencilla: sin núcleo definido en su interior y la mayoría sin compartimentos internos delimitados por membranas. .

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ESTRUCTURA El desarrollo de la M. E. plasmática Región citoplasmática Envoltura celular . en los años 50’ da a conocer la arquitectura bacteriana: Apéndices flagelo pili fimbria genoma ribosomas inclusiones cápsula pared celular memb.

ELEMENTOS BACTERIANOS OBLIGADOS Pared celular Membrana citoplasmática Citoplasma Ribosomas Mesosomas Cromosoma disperso .

ELEMENTOS BACTERIANOS FACULTATIVOS Cápsula Flagelos Fimbrias Esporos Plásmidos .

celular Mb citopl Fimbrias Flagelo .Estructuras de la célula bacteriana Cápsula Citoplasma Ribosomas P. celular Mb citopl. Cromosoma Plásmido Inclusión Cápsula P.

etc) 50% 25% 3% 22% . glicocalix COMPOSICION CELULAR Aproximadamente un 70% es agua Peso seco proteínas RNA DNA Otros Otros (lípidos.membrana plasmática .ARQUITECTURA BACTERIANA Apéndices externos Región citoplasmática Envoltura celular. término que describe el material que engloba al citoplasma de la célula .cápsula.pared celular . carbohidratos.

Sistema coloidal En esta matrix encontramos: Genoma bacteriano Herencia Ribosomas (RNA) Síntesis de proteínas Gránulos de inclusión Reservas material . enzimas. etc. otorgando una matrix que contiene los distintos constituyentes celulares internos. proteínas.CITOPLASMA Principalmente es agua.

constituidos por plásmidos. circular bicatenario DNA Extracromosomal. molécula única ubicada en área específica. transpones e integrones .ADN Bacteriano Genoma bacteriano DNA Cromosomal.

semiconservativa . nucleolos e histonas. Estado superenrollado.ADN Cromosomal No existe membrana nuclear. aspecto fibrilar Función principal. contener la información genética celular que regula el funcionamiento celular Replicación.

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con capacidad de autoreplicación y en algunos casos autotransferencia (horizontal y vertical) . doble cadena e independiente del cromosoma Pueden encontrarse libres en el citoplasma o integradas al cromosoma.ADN extracromosomal Plásmidos Moléculas de ADN circular.

genes de transferencia .genes de virulencia . etc.Le confieren a la bacteria propiedades como: .genes para la producción de metabolitos. .genes de resistencia .

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Pili Fimbria Adherencia 1975 Ottow 1977 Jones Pili Conjugación .FIMBRIAS Estructuras filamentosas proteicas. rígidas y extracelulares 1949 Anderson y Houwinke las denominan apéndices filamentos no flagelares 1955 Daguid y col. Fimbria 1959 Brinton y col.

factor de iniciación de la infección Propiedades antigénicas Conjugación: pili .FIMBRIAS .PILI Composición: pilina FUNCIONES: Adherencia .

Pili sexual de Escherichia coli .

Tamaño Pili 6-13.PM 16.5 m longitud diámetro longitud Se encuentran en bacterias Gram negativas .1-1.Composición química de naturaleza proteica (pilina .000).5 nm diámetro  20 m Tamaño Fimbria 4-10 nm 0.

FLAGELOS Composición: Flagelina FUNCIONES Movilidad Especificidad antigénica H .

Estructura filamentosa proteica adherida a la superficie celular Función. movilidad bacteriana Se pueden encontrar en Gram + y Gram - Diámetro aproximado 20 nm Composición subunidades de proteína llamada FLAGELINA .

Estructura flagelar .

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. etc.Estructura rígida que se mueve en forma rotatoria en sentido contrario a manecillas del reloj Energía aportada por la fuerza protón-motriz. como respuesta a la presencia de: Atractantes Repelentes Cambios de pH Concentración de sales.

flagelo polar Bacterias entéricas flagelos perítricos Polar uno o ambos polos en penacho (en penacho) Perítricos distribuidos en contorno celular . Ej: Pseudomonas sp.Los flagelos se disponen sobre la superficie bacteriana de distintas formas: Por la disposición flagelar pueden distinguirse distintas bacterias.

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slime) Fibras polisacáridas Muy hidratadas Carga negativa .EXOPOLISACARIDOS Cápsulas Capas mucosas (biofilm.

CAPSULA Su composición es proteica o polisacárida Protege fagocitosis Elemento de identificación Anticuerpos protectores Impide fijación de fagos Dificulta acción antimicrobianos Ubicada fuera de la pared celular. puede ser gruesa o delgada y estar estrecha o laxamente asociada a la pared Cuando la adhesión es débil y el grosor y la densidad pequeña se llama slime o glucocalix No son estructuras vitales pero son de importancia para la supervivencia de la bacteria. .

Factor de virulencia Poco antigénica y fagocítica Protección frente a la desecación o materiales tóxicos Adherencia a células y mucosas del huésped u otras bacterias .

SLIME

Adherencia laxa a la bacteria Permite la formación de microcolonias Adherencia a materiales sintéticos

Membrana citoplásmica
Membrana bicapa fosfolipídica Peptidoglicán Membrana externa

Canal
Proteína

Bicapa fosfolípidos

Proteína Periférica

Membrana citoplasmática
Doble capa fosfolipídica (sin esteroles: colesterol, ergosterol con excepción de los micoplasmas) Se encuentran incluidas diversas proteínas 30-60% fosfolípidos 50-70% proteínas

Rodea al citoplasma bacteriano

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Bicapa fosfolipídica Modelo de mosaico fluido Moléculas anfipáticas .

electrones .replicación del ADN .Biosíntesis membrana externa .Es responsable de muchas funciones que son atribuibles a los distintos organelos eucariotas: .Biosíntesis peptidoglicán .Barrera aislante Las proteínas membrana se encuentran encargadas de: .Fosforilación oxidativa .Respiración celular . protones.transporte de metabolitos.Síntesis y secreción de enzimas y toxinas .biosíntesis de lípidos .

MESOSOMAS Invaginación de la membrana plasmática observable en el interior del citoplasma Principalmente en Gram positivas .

poseen funciones secretoras. Fijación de ADN para la multiplicación coordinada. participan en el proceso de división celular favoreciendo la formación del tabique de separación. Mesosomas laterales.Estructuralmente al igual que su composición son idénticos a membrana citoplasmática Mesosomas septales. síntesis de exoenzimas .

PEPTIDOGLICÁN Exoesqueleto que rodea a la membrana citoplasmática Es esencial para la estructura. . replicación y supervivencia Puede interferir con la fagocitosis. presenta propiedades pirogénicas y mitogénicas Se encuentra presente en casi todas las especies bacterianas con excepción de micoplasmas que no poseen pared celular y Archaeobacteria que presentan seudoglicanos.

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Gram positivos Pared celular gruesa (80 nm) y que está compuesta por varias capas de peptidoglicán. polisacáridos. ácidos teicoicos y ácidos lipoteicoicos. proteínas. .

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. Los ácidos lipoteicoicos están asociados a la membrana citoplasmática. estabilizan la pared y también pueden ser factores de virulencia y adherencia en algunas bacterias. también pueden tener relación con la síntesis de peptidoglicán y en la división celular Tienen carácter antigénico.Los ácidos teicoicos están asociados al peptidoglicán estabilizando la pared celular.

Esta estructura corresponde a un esqueleto de residuos de carbohidratos formados por unidades alternadas de Nacetilmurámico y N-acetilglucosamina unidos por enlaces 1. .4.

Gram negativas

Es más complejas tanto química como estructuralmente pero es más delgada que la de Gram positivas. Por fuera de la membrana citoplasmática encontramos un espacio periplásmico que contiene enzimas hidrolíticas, factores de virulencia líticos, sistemas de transportes y lipoproteínas que unen el peptidoglicán y la membrana externa.

El peptidoglicán es una sola unidad de espesor por lo tanto , es más laxa y no posee ácido teicoico y lipoteicoico.

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ésta depende de: grado de entrecruzamiento enlaces β(14) – compacto Alternancia de NAM y NAG es uno de los polisacáridos más estables Alternancia de aa en L y en D  estabilidad adicional Gran flexibilidad.Relaciones estructura-función en el peptidoglucano Gran rigidez. soporta variaciones de presión osmótica del protoplasto Condiciona la forma celular . aguanta fuerzas osmóticas del protoplasto (5-15 atm).

. confiere la forma a la célula y crea una barrera física contra el ambiente externo Las bacterias Gram positivas y Gram negativas se diferencian por la estructura y grosor de la pared El componente rígido corresponde al peptidoglicán La estructura de la pared bacteriana tiene una importancia directa y práctica ya que el tipo de estructura es responsable de la reacción frente a la tinción de Gram.La pared celular brinda rigidez estructural.

Tinción de Gram Cristal violeta Lugol Alcohol acetona Safranina .

TINCION DE GRAM .

es característica de Gram negativas y constituye una barrera impermeable para moléculas de gran tamaño y moléculas hidrófobas. Lipopolisacárido (LPS) . además de ofrecer protección a condiciones ambientales adversas.Membrana externa Se encuentra por fuera de la capa de peptidoglicán.Zona externa molécula anfipática. Es una membrana asimétrica .Zona interna fosfolipídica .

Cadenas laterales O-específicas (variablesidentificación).Lípido A. Similar en Flias . responsable de la actividad endotóxica (esencial para viabilidad bacteriana).Región central o Core polisacárido (esencial para viabilidad). Similar en un mismo género y especies .Conocido como endotoxina ya que es un potente estimulador del sistema inmune (antígenos somáticos o antígeno O) Molécula de glucolípidos complejos compuestos por: . Se proyectan hacia el exterior .

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También se encuentran presente: . canales transmembrana .Porinas.Fosfolípidos . transmembrana asociadas al peptidoglicán .Lipoproteínas. proteínas pequeñas que estabilizan la pared celular .No porinas.

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Esporas bacterianas .

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adicional) Cubierta de la espora Corteza Núcleo o corazón .Exosporio (env.

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Célula vegetativa Ambiente desfavorable ENDOSPORA Condiciones favorables Célula vegetativa .

Esporulación División asimétrica Invaginaciones de membrana citoplasmática Peptidoglicán constituye el séptum Séptum engloba el material nuclear Germinación Cese de la dormancia Sobrecrecimiento .Formas de resistencia: ciertas bacterias forman endoesporas que pueden sobrevivir en condiciones adversas y cambian las condiciones del medio ambiente o se agotan los nutrientes continua siendo viables incluso durante años y cuando las condiciones mejoran devuelven a la bacteria a la vida vegetativa.

Reproducción Bacteriana  La reproducción bacteriana es un proceso coordinado en el que se producen dos celulas hijas iguales. pero no del tamaño bacteriano.  La multiplicación implica el aumento del numero. . Es importante que el medio que rodea a las bacterias proporcione las condiciones físico químicas apropiadas.  Las bacterias se reproducen normalmente por fisión binaria.

especialmente. . de los nucleótidos destinados a la síntesis del ADN.REPLICACIÓN  La replicación bacteriana es un proceso coordinado durante el cual se producen dos células hijas idénticas. Su crecimiento exige la presencia de suficientes metabolitos para permitir la síntesis de los componentes bacterianos y.

mas pequeñas que la progenitora. . por bipartición : el ADN de la bacteria se duplica y forma dos copias idénticas. Así se forman dos células hijas iguales.Fisión Binaria  En células procariotas se produce la división simple. Cada copia se va a un punto de la célula y mas tarde la célula se divide en dos mitades.

síntesis de peptidoglucano y división celular se llevan a cabo de forma coordinada. los cromosomas hijos se separan. A medida que crece la membrana bacteriana. el ADN se asocia a mesosomas. En algunas células. Los procesos de formación de la membrana bacteriana. El comienzo de la replicación cromosómica también inicia el proceso de división celular. la cual se puede visualizar por el comienzo de la formación del tabique que separará a las dos células hijas  . La replicación cromosómica se inicia en la membrana y cada cromosoma hijo se ancla a una porción diferente de la misma.

N y/o P dan origen a una ESPORA o ENDOESPORA. como carencia de C.ESPORAS Algunas bacterias es determinadas condiciones. Características: Alta resistencia a agentes ambientales Ausencia de agua en su estructura Refractaridad a la tinción Mantención indefinida en forma de latencia .

Las dos copias están fijas a la membrana en puntos cercanos 3 La célula se alarga. se agrega nueva membrana plasmática entre los puntos de unión 4 La membrana plasmática crece hacia el interior 5 La célula original se ha dividido en dos células hijas .Fisión Binaria 1 El cromosoma circular está unido a un punto de la membrana plasmática 2El cromosoma se duplica.

su morfología y en la utilización o no de O2 en su metabolismo.. Las BAAR que se tiñen con la técnica de Ziehl.Clasificación  Se basa en la afinidad o no por la tinción de Gram. . a su vez estos grupos pueden estar conformados por bacterias Aerobias o Anaerobias facultativas y bacterias Anaerobias Estrictas. Gram + y aquellas que no se tiñen con Gram (ej.Nielsen). las bacterias son divididas en 3 grandes grupos :  Gram .

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en cuyo caso reciben el nombre de anaerobias facultativas. se denominan aerobias estrictas. en consecuencia. la mayor parte de las bacterias puede crecer tanto en presencia como en ausencia de oxígeno. Sin embargo. .Hay bacterias que requieren la presencia de oxígeno molecular para su crecimiento y.

Este tipo de bacterias son conocidas como anaerobias estrictas .Algunas bacterias no pueden crecer en presencia de oxígeno.

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entre 3 y 10 veces menos que el poder de resolución del ojo humano  . La mayoría de las células eucarióticas miden entre 10 y 30 micrómetros de diámetro. El poder de resolución es una medida de la capacidad para distinguir un objeto de otro.Visita al mundo celular  El ojo humano sólo tiene un poder de resolución de aproximadamente 1/10 milímetros o 100 micrómetros. es la distancia mínima que debe haber entre dos objetos para que sean percibidos como objetos separados.