UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE CENTRO DE CINCIAS BIOLGICAS E DA SADE DEPARTAMENTO DE MORFOLOGIA

Disciplina: Microbiologia Mdica

COCOS GRAM POSITIVOS

Prof. Gabriel Lee 2013.1

Famlia Micrococcaceae
4 gneros: Planococcus (ambientes marinhos) Micrococcus (saprfitas e transitoriamente na
pele; tambm assoc. a meningites e septicemias)

Stomatococcus (flora do trato respirat. sup.;

assoc a bacteremias, septicemias e meningites)

Staphylococcus

FAMLIA MICROCOCCACEAE (contedo G-C 66 - 75%) Arthrobacter, Micrococcus, Kocuria, Nesterenkonia, Rothia, Stomatococcus, Terracoccus, Renibacterium, Demetria, Leucobacter, Bogoriella FAMLIA STAPHYLOCOCCACEAE (contedo G-C 30 - 45%) Staphylococcus, Macrococcus (1998), Gemella, Salinicoccus

Micrococcus: bem distribudo no ambiente, principalmente como microbiota transitria na pele de humanos e outros mamferos.

Algumas cepas produzem pigmentos que variam de laranja a rosa.

Isolados de infeces humanas, em pacientes imunocomprometidos, muitas vezes so confundidos com Staphylococcus.

Cocos gram + catalase positivos

Staphylococcus

Comensais encontrados no trato respiratrio superior e em outras superfcies epiteliais de todos os animais de sangue quente. Patgenos oportunistas Cerca de 33 spp, trs de importncia humana:
S. aureus- agente piognico S. epidermidis S. saprophyticus S. intermedius - animais S. schleiferi- otite externa em ces

Classificao
Coagulase positivos (CPS):
S. aureus S. intermedius S. hyicus S. schleiferi S. delphini

Coagulase negativos (CNS): o resto CPS so mais patognicos que CNS

Morfologia
Cocos, Gram (+) , ausncia de flagelos e no formam esporos. 1 m de dimetro staphyle = cacho de uva Presena de cpsula varivel. Pigmentos carotenides conferem colorao amarelada: aureus = dourado

Gram-negativos ou positivos?

Resistncia

Resistem a dessecao por semanas, aquecimento a 60/30min, variaes de pH entre 4 e 9,5 e concentraes salinas de 7,5% Atividade de gua (aw) = 0,91 cristal violeta, sais biliares e alguns desinfetantes e antimicrobianos o inibem. a resistncia a antimicrobianos betalactmicos se deve a produo de penicilinase codificada por plasmdeos

Reservatrio
coagulase (+) : vias nasais distais, parte externa de narinas e a pele, princ nas proximidades de bordas mucocutneas como perneo, genitlia externa; transitoriamente no trato GI coagulase (-) : so os mais prevalentes na flora cutnea residente encontrados mundialmente em animais de sangue quente

Fatores de virulncia: - fatores de adeso (adesinas ligam-se ptna da matriz);

- fatores de evaso (evasinas, cpsula e ptna A) - fatores de leso (agressinas, toxinas e enzimas)

1. Componentes da superfcie celular . Cpsula: polissacardica; antifagocitria . Peptidoglicano (PG) e cidos teicicos: ativam via alternativa do complemento; estimulam produo de citocinas (~LPS G -) . Protena A (SpA): ligada ao PG; nica cadeia polipeptdica com 4 resduos de tirosina, expostos na superfcie; liga-se poro Fc das lgG impedindo interao com clulas fagocitrias . Protenas (MSCRAMMs: Microbial Surface Components Recognizing Adhesive Matrix Molecules) que se ligam Fibronectina, Colgeno e Fibrinognio: ancoradas no PG, funcionam como adesinas (colonizao). A que se liga ao fibrinognio (fator clumping) atua como receptor para fibrinognio livre, demonstrada por suspenso de S. aureus em gota de plasma de coelho, onde aglutinam

2.Toxinas - S. aureus produz toxinas que atuam por diferentes mecanismos: - A). citotoxinas - -toxina (-hemolisina): forma poros na membrana celular dos leuccitos (ao antifagocitria); leso celular causada pela -toxina pode promover liberao de citocinas (choque sptico). Amostras de S. aureus que produzem , e hemolisinas, podem lesar membrana de diferentes clulas

- B). leucocidina (destroi leuccitos como a -toxina; 90% das amostras de S. aureus isoladas de leses dermonecrticas graves produzem leucocidina

b. superantgenos - estimulam linfcito T a liberar citocinas que provocam choque: - TSST-1 (toxic shock syndrome toxin-1) - enterotoxinas estafiloccicas

c. toxinas que degradam molculas de adeso do epitlio cutneo (toxinas esfoliativas); h 4 tipos imunolgicos: - ETA, age sobre a desmoglena, protena da superfcie das clulas epiteliais da pele que promove adeso entre elas - ETB, ETC e ETD, responsveis pela sndrome da pele escaldada (epiderme separada da derme)

3. Enzimas
S. aureus produz vrias enzimas extracelulares: coagulase: caracterstica da espcie; coagula o plasma pela
transformao de protrombina em trombina, que ativa formao de fibrina a partir do fibrinognio

catalase: todos os estafilococos; protege mo do perxido de hidrognio

txico, acumulado aps metabolismo bacteriano

DNAse: somente em S. aureus; despolimeriza o DNA

hialuronidase: hidrolisa c. hialurnico; em mais de 90% de S. aureus lipases: hidrolizam lipdios; todos S. aureus e mais de 30% de SCN

proteases: hidrlise de ptn e outras molculas geram nutrientes

utilizveis por S. aureus para sua disseminao pelos tecidos

penicilinase: confere resistncia a penicilina

Estafiloquinase (=fibrinolisina): em quase todos S. aureus

transforma plasminognio em plasmina, que dissolve cogulos

Importncia do estudo de

Staphylococcus
1. agentes primrios / secundrios de infeces superficiais / disseminadas

2.

adquirem facilmente antimicrobianos

resistncia

3. mutantes por presso seletiva responsveis por infeces hospitalares 4. intoxicao alimentar

Doenas causadas

Transmisso
propagam-se por contato direto/indireto a maioria das infeces endgena Caractersticas em comum:

Ao destrutiva local 80% das infeces tm pus Localizao em vrias partes do corpo

Fatores Predisponentes
Alteraes quimiotticas dos leuccitos
Alteraes na opsonizao por anticorpos Alteraes na destruio intracelular de bactrias aps fagocitose Leses cutneas Presena de corpos estranhos Infeces por outros agentes Doenas crnicas de base Administrao profiltica ou teraputica de antimicrobianos

PROCESSOS SUPURATIVOS 1) Infeces superficiais (piognicas) Ex: Foliculite

2) Infeces superficiais (piognicas) Ex: Furnculos

2) Infeces superficiais (piognicas) Ex: Carbnculos

3) Infeces superficiais (piognicas) Ex: lceras de decbito

4) Infeces profundas.Ex: bacteremia

5) Infeces profundas. Ex: osteomielite

5) Pneumonias

6) Infeces hospitalares por MRSA (metycillin resistant S. aureus)

PROCESSOS TXICOS 7) Intoxicaes Alimentares Ex.: enterotoxina

8) Sndrome do choque txico

9) Impetigo bolhoso

10) sndrome da pele escaldada

11) Doenas nos animais Ex.: mastites e dermatites

Mastite: doena mais comum em vacas leiteiras 85% causadas por cocos piognicos 60% apenas por S. aureus

Diagnstico Laboratorial
aspirao de leses, swabs, leite, sangue e urina exame direto: cachos ou cadeias curtas de cocos, gram + Meios de cultura

gar sangue: beta hemlise gar Baird-Parker:

coagulase +: gema de ovo Utilizao de telurito de potssio [NaCl] 7,5%

gar sal manitol

gar Baird-Parker

Staphylococcus epidermidis
- Tornou-se importante agente de infeco hospitalar, pela capacidade de formar biofilmes
em superfcie de polmeros, alm de constituir um reservatrio de bactrias estrategicamente posicionadas, dificulta penetrao e difuso de antimicrobianos e de elementos de defesa do organismo. Obs: biofilmes de S. epidermidis no contm outras bactrias, devido a ao de bacteriocinas Formao de biofilme: bactrias aderem tanto superfcie livre do polmero [1] como superfcie da camada de protenas que mais tarde passa a recobrir o polmero [2]; aderidas, proliferam formando mltiplas camadas (fase de acmulo) [3]

Tratamento e Controle

Drenagem de abcessos Antibioticoterapia: betalactmicos (penicilinas/cefalosporinas), fluoroquinolonas, cloranfenicol, eritromicina, vancomicina, oxacilina e meticilina (ltima opo) Problema de sade pblica: cepas multirresistentes a meticilina (MRSA)

Cocos gram-positivos catalase negativos

STREPTOCOCCUS

Streptococcus sp
Comensais encontrados nas mucosas do trato respiratrio superior, genital inferior e quase todo o trato digestivo de animais de sangue quente.

Morfologia
Cocos, Gram (+), ausncia de flagelos, no formadores de esporos. Diviso ocorre em um plano s, produzindo pares ou cadeias curtas S. pneumoniae produz cpsula

MORFOLOGIA

MORFOLOGIA

BACTERIOSCOPIA

BACTERIOSCOPIA - PNEUMOCOCO

Fatores de virulncia .Toxinas

. eritrognica . leucocidinas . , e hemolisinas . estreptolisinas S e O . Enzimas . fibrolisina (estreptoquinase) . desoxirribonuclease . hialuronidase . Substncias antifagocitrias . cpsula . protena M . cido lipoteicico

Classificao

De acordo com as caractersticas beta hemolticas

Lancefield: 20 grupos sorolgicos Peptideoglicano e carboidrato C

Os estreptococos de importncia mdica so divididos em:

Estreptococos beta-hemolticos Pneumococos Estreptococos do grupo D Estreptococos viridans (alfa-hemolticos)

Classificao Lancefield

S. pyogenes

S. agalactiae

S. equi C S. equisimilis C S. zooepidemicus C

S. dysgalactiae C Enterococcus sp D S. bovis D S. equinus D S. canis G S. suis R, S S. uberis S.pneumoniae

Resistncia
resistem a dessecao por semanas aquecimento de 55-60/30min Inibidos por NaCl 6,5%, bile a 40%, azul de metileno a 0,1%, temperatura baixa (10C) e alta (45C) Sensveis a antibiticos betalactmicos, estreptomicina, cloranfenicol e sulfa

Transmisso

propagam-se por contato direto/indireto (inalao, ingesto, sexualmente, congenitamente ou por fmites)

PRINCIPAIS

PATOLOGIAS

ANIMAIS: Mastites Endometrites Rinofaringite Garrotilho Linfadenite Cervical Cervicite Metrite Septicemias Neonatais

HUMANAS: Pielonefrite Amigdalite Pneumonia Pneumoccica Febre Reumtica Escarlatina Erisipela*

Doenas e sintomas causados

- Faringotonsilite estreptocccica: infeco da faringe ou das tonsilas que produz uma resposta inflamatria; cursa com dor de garganta, febre, enrijecimento da faringe e exudado amigdalar purulento.

- Escarlatina: causada por S. pyogenes portador de fago lisognico produtor de toxina que provoca descamao da pele, parece um exantema na parte superior do trax que se extende a todo o corpo com dor de garganta, calafrios, febre, cefalia e lngua em morango (papilas inflamadas).

- Impetigo comum: infeco cutnea supurativa que ocasiona leses costrosas e vesculas rodeadas de um bordo vermelho.

- Erisipela: inflamao da derme cutnea, mais frequente em pessoas com antecedentes de faringoamigdalite, manchas vermelhas e leses dolorosas na pele).
- Febres puerperais: infeco generalizada que surge depois do parto. - Febre reumtica: doena auto-imunitria que ocasiona leses inflamatrias que afetam vlvulas cardacas, articulaes, SNC e tecido subcutneo.

- Glomerulonefrite: inflamao dos glomrulos renais; sintomas, febre, hipertenso e sangue na urina.
Tratamento: penicilinas (benzilpenicilina) ou eritromicina; h cepas resistentes tetraciclina.

Diagnstico Laboratorial
aspirao de leses; swabs; leite; sangue, urina, lq cefalorraquidiano, tecidos, aspirados transtraqueais exame direto: pares ou cadeias curtas ou longas, gram + / gar sangue: beta hemlise (patognicos)

Enterococcus faecalis
- Agrupa os antigos estreptococos de origem fecal, correspondentes ao grupo D de Lancefield; so -hemolticos - Forma parte da miocrobiota intestinal do homem; eliminado pelas fezes. - empregado como ndice de contaminao fecal, pois muito resistente dessecao. - Apesar de no ser considerado patgeno, nos ltimos 20 anos est adquirindo grande importancia hospitalar como agente de infeces do trato urinrio (ITU); endocardite aguda e bacteremia nosocomial, j que muito resistente a penicilina e outros antimicrobianos.

SEQNCIA DIAGNSTICA

Staphylococcus

Streptococcus

Streptococcus no hemoltico

HEMLISE , ,

BETA HEMLISE

CAMP TEST

FARINGITE

IMPETIGO

ESCARLATINA

MASTITE BOVINA

MASTITE BOVINA

PIOMETRA

PIOMETRA

TRATAMENTO
Penicilina G Ampicilina Cefalosporinas Sulfametoxasol/Trimetoprim Fluoroquinolonas Penicilina G + Gentamicina

Epidemiologia, Preveno e Controle

- Fonte final de estreptococos do grupo A- homem. - O ser humano pode ter infeco clnica, subclnica ou ser um portador do estreptococos. - Os procedimentos de controle visam fonte humana: - Deteco e tratamento antimicrobiano precoce das infeces respiratrias e cutneas; - Quimioprofilaxia antiestreptoccica em pacientes que sofreram uma crise de febre reumtica;

Epidemiologia, Preveno e Controle Erradicao de estreptococos do grupo A dos portadores; Controle da poeira, ventilao, filtrao do ar e aerossis; Profilaxia medicamentosa na me com culturas positivas em caso de parto prematuro ou ruptura prolongada das membranas.

Diferenas entre Staphylococcus e Streptococcus

Staphylococcus
- pele - junes mucocutneas - mucosas: resp. sup e urogenital Cocos gram (+) em forma de grumos ou cachos de uvas Cresce at 7,5%

Streptococcus

Hbitat

- mucosas: oral e resp. sup - intestino

Cocos gram (+) em forma de cadeias de cocos Cresce at 6,5%

Morfologia

Inibio em NaCl
Crescimento

Rpido, em at 12h , colnias com mais de 1mm de dimetro

Lento, em at 12h , colnias com menos de 1mm de dimetro