BIOQUÍMICA APLICADA

CAPITULO 4
ENZIMAS

ENZIMAS
• Sustancias proteicas elaboradas por una célula viva que catalizan una reacción específica necesaria para el mantenimiento de la vida.

 Las enzimas incrementan las velocidades de reacción por disminución de las energías de activación.  La energía de activación es una barrera energéticas para la reacción química.

Hidrólisis de celulosa Hidrólisis de almidón Producción de jarabes de fructosa Glucosa oxidasa Hemicelulasas Invertasa Lacasas Lipasas Pectinasas Penicilina acilasa Producción de ácido glucónico. Hidrólisis de almidón Amiloglucosidasa Catalasa Celulasas Glucanasas Glucosa isomerasa Hidrólisis de almidón Producción de ácido glucónico.Algunas Aplicaciones de las Enzimas Algunas aplicaciones de las enzimas Enzimas Amidasas Amilasas Aplicaciones Producción de aminoácidos Detergencia. Aplicaciones analíticas Detergencia. Aplicaciones analíticas Hidrólisis de hemicelulosa Hidrólisis de sacarosa Blanqueo de pasta de papel Detergencia. Biotransformaciones Clarificación de zumos de frutas Producción de antibióticos semi-sintéticos .

CARACTERISTICAS DE ENZIMAS • • • • Estructura globular Alto poder catalitico Accion a condiciones ambientales Especificidad .

.Estructura globular .a.

107 veces .catalaza (hidratacion del CO2)– CO3NH2. 102-103 veces Enzimas.b.Alto poder catalitico • • • • Catalizadores inorganicos.. 106-1020 Ejplo.

Acción a condiciones ambientales • Producción de NH3 • Fijacion biológica de nitrógeno.. .c.

Especificidad. Acción de enzimas amilasas. • Solo catalizan reacciones específicas. • Ejplo.d. ..

En él se encuentran los residuos catalíticos que participan en la reacción enzimática. .Centro activo o centro catalítico Las enzimas poseen uno o más sitios específicos donde se une el o los sustratos de una reacción. - .

Acción del sitio activo

Aminoácidos comunes, en sitios activos de enzimas

Modelos de interaccion

FACTORES QUE AFECTAN LA ACCION ENZIMATICA • • • • Temperatura. pH. Concentración del sustrato Presencia de cofactores .

•La representación usual del efecto del pH se ilustra con el siguiente modelo sencillo para la ionización del sitio activo:  En el esquema anterior. • Estos grupos ionizables pueden formar parte del centro activo. en función del pH.Efecto del pH sobre la actividad enzimática •Los aminoácidos que constituyen las proteínas contienen grupos ionizables que puede estar cargados positiva o negativamente a un pH determinado.  La actividad enzimática pasa por un máximo (pH óptimo). de manera que sólo sea activa una forma ionizada de la enzima. . •De esta forma.representa la forma activa.son formas inactivas obtenidas por protonación y desprotonación del sitio activo. mientras E y E2. la enzima activa catalíticamente será una fracción mayor o menor de la enzima total presente. E.

Efecto del pH .

 Las enzimas sólo son activas en un rango limitado de temperaturas. mediante la ecuación de Arrhenius:  Donde k es la constante de velocidad de reacción.Efecto de la temperatura • En cinética química.  A temperaturas elevadas se producen modificaciones de su estructura terciaria. conduciendo a la desnaturalización. .. el efecto de la temperatura sobre la constante de velocidad de reacción se describe.b. usualmente. EA la energía de activación y A el factor pre-exponencial.

Efecto de T .

• velocidad de reaccion a T = T1 . • Q10 =velocidad de reaccion a Tº = (T+10).Coeficiente Q • Se mide dentro del rango de incremento de la actividad enzimatica.

muchas vitaminas funcionan como coenzimas. Cofactor. 2. Iones o moléculas inorgánicas. Molécula orgánica. Coenzima..d. .Presencia de cofactores Algunas enzimas actúan con la ayuda de estructuras no protéicas. En función de su naturaleza se denominan: 1. .

.

.

.

cada uno de ellos en clases. El de la reacción que catalizan (alcohol deshidrogenasa. no sistemática y poco informativa desde el punto de vista químico. Pepsina. Papaina. CLASIFICACIÓN DE LAS ENZIMAS • Formas tradicionales de designar : •A) Añadiendo el sufijo -asa al sustrato ( amilasas) •B). y éstas en sub clases . cataliza la deshidrogenación de un alcohol). •Divide a las enzimas en seis grupos principales. •D). •La Enzyme Commission ha adoptado una clasificación basada en la naturaleza de la reacción catalizada . Nombres propios. •Es poco práctica. •C) Según su origen.2.

Óxido-reductasas (Reacciones de oxidoreducción). Si una molécula se reduce.Grupos de enzimas 1. Transferasas · grupos acilos (Transferencia de grupos · grupos glucósidos funcionales) · grupos fosfatos (kinasas) . tiene que haber otra que se oxide · grupos aldehídos 2.

Clase 1: Oxidorreductasas Catalizan reacciones de oxidorreducción. . transferencia de (H+) o (e-) de un sustrato a otro: AH2 + B Ared + Box A + BH2 Aox + Bred Ejemplos son la succinato deshidrogenasa o la citocromo c oxidasa.

según la reacción: A-B + C A + C-B Ejemplo.Clase 2: Transferasas Catalizan la transferencia de grupo químico (distinto del hidrógeno) .ADP + glucosa-6-fosfato . cataliza la reacción: glucosa + ATP ----. glucoquinasa.

Liasas (Adición a los dobles enlaces) · Entre C y C · Entre C y O · Entre C y N . Hidrolasas (Reacciones de hidrólisis) · enlace Ester · enlace glucosídico · enlace peptídico · enlace C-N 4. Actúan sobre: 3.Transforman polímeros en monómeros.

que cataliza la reacción: ácido acetacético CO2 + acetona .Clase 4: LIASAS Catalizan reacciones de ruptura o soldadura de sustratos: A-B A+B Un ejemplo es la acetacetato descarboxilasa.

Isomerasas (Reacciones de isomerización) 6. Ligasas (Formación de enlaces. con aporte de ATP) · · · · Entre C y O Entre C y S Entre C y N Entre C y C .5.

Actúan sobre CH=CH 4. Actúan sobre radicales superóxido 16. (oxigenasas) 14. Actúan sobre un grupo sulfuro 9.Clases E. Actúan sobre CH-OH 2. Actúan sobre donadores sencillos con incorporación de 0. Actúan sobre C=O 3. ÓXIDORREDUCTASAS (Reacciones de oxidación-reducción) 1. Actúan sobre un grupo hemo 10. Actúan sobre otros compuestos nitrogenados 8. Actúan sobre ferredoxina reducida 19. Actúan sobre donadores complejos con incorporación de 02 15. Actúan sobre NADH o NADPH 7. Actúan sobre CH-NH2 5. Actúan sobre peróxido de hidrógeno 12. Actúan sobre CH2 18. para las enzimas 1. C. Oxidan iones metálicos 17. Actúan sobre hidrógeno 13. Actúan sobre flavodoxina reducida Otras óxidorreductasas . Actúan sobre CH-NH 6. Actúan sobre difenoles 11.

Grupos acilo 4. Enlaces C-C 8. Enlaces haluro 9. Enlaces glucosídicos 3. Grupos glicoxilo 5. Grupos alquilo o arilo 6. Grupos aldehído o cetona 3. Grupos nitrogenados 7. Ésteres 2. TRANSFERASAS (Transferencia de grupos funcionales) 1. Enlaces S-N 11. Grupos con un carbono 2. Grupos que contienen azufre 3. Grupos que contienen fósforo 8. Anhídridos de ácido 7. HIDROLASAS (Reacciones de hidrólisis) 1. Otros enlaces C-N (diferentes del peptídico) 6.2. Enlaces éter 4. Enlaces C-P . Enlaces peptídicos 5. Enlaces P-N 10.

Racemosas y epimerasas 2. Liasas C-O 3.4. Liasas P-O 5. Transferasas intramoleculares 5. ISOMERASAS 1. Liasas C-S 5. Oxidorreductasas intramoleculares 4. Isomerasas cis-trans 3. Liasas C-C 2. Liasas intramoleculares 6. Liasas C-haluro 6. Liasas C-N 4. LIGASAS (Formación de enlaces acoplados con la transformación de substancias como ATP o nucleósidos)  Enlaces C-O  Enlaces C-S  Enlaces C-N  Enlaces C-C  Enlaces éster fosfórico . LIASAS (Adición a dobles enlaces) 1.

y. en la práctica se siguen utilizando los nombres triviales. – Se usa un codigo.Nomenclatura sistemática •Codigo EC. EC. tipo de reacción.z. •Algunos de los nombres sistemáticos son muy largos. .x. –Utiliza el prefijo EC delante del número. •Basada en la naturaleza de la reacción catalizada •Nombre del o los sustratos.v.

Cantidad de enzima o extracto enzimatico contenida en 1 ml de solución.Actividad enzimática • los extractos enzimaticos contienen proteína no catalítica. Actividad de un extracto capaz de transformar 1 mol de sustrato/s. capaz de transformar 1 umol de sustrato o producto en 1 min en las condiciones optimas.2 y 25°C. • UI.22. • La actividad específica μ: • μ = unidades de actividad/mg de proteína = μmol de producto/(mg de proteína) · (ml · min) • Ejm. obtenida de fuente vegetal.4. • 1 Katal. se define una unidad de actividad como la cantidad de enzima que hidroliza 1 μmol de BAEE (éster etílico de N(x-benzoil-L-arginina) por minuto a pH 6. Las preparaciones comerciales de esta enzima. la concentración de enzima se expresa habitualmente en términos de unidades de actividad en lugar de concentración molar o másica. En proteasa papaína (EC 3. contienen de 10-40 unidades/mg proteína. .2). • Por eso.

el esquema de reaccion sería: .CINETICA ENZIMATICA Cinética de reacciones con un sólo substrato • Michaelis y Menten propusieron un modelo para relacionar la velocidad de reacción con la concentración de substrato. Suponiendo la existencia de un solo complejo central.

Velocidad de reacción vs. Concentración de substrato .

Vmax Velocidad de la reacción (v) Vmax/2 Km Concentración de Sustrato [S] A mayor Km. menor es la afinidad de la enzima por el sustrato A menor Km mayor es la afinidad de la enzima por el sustrato .

Representación directa v 100 80 Vmax Vmx s v Km  s 60 40 20 s 0 0 20 40 60 80 100 Km .

Baja concentración de sustrato ALTA concentración de sustrato SATURACION .

Cuanto menor es Km. mayor es la afinidad del enzima por el S. .Km Es una medida de la afinidad del enzima por el S.

Significado de la constante Km 1. Medida inversa de la afinidad de la enzima por el substrato (en condiciones de equilibrio rápido) 3. Se define para una pareja enzima-substrato 6. Se mide en unidades de concentración . Concentración de substrato para la que la velocidad se hace igual a la mitad de la máxima (s0.de equilibrio rápido) 4. Mide la función de fijación (en cond.5) 5. Constante de equilibrio de disociación del complejo ES (en condiciones de equilibrio rápido) 2.

Significado de la constante Vmax = k+2 e0 1. Se expresa en unidades de velocidad . Velocidad asintótica para s 2. Mide función de transformación catalítica 4. Directamente proporcional a la concentración de enzima (hoy se prefiere caracterizar a la enzima por k+2) 3.

Cálculo de Parámetros cinéticos de la ecuación • La Linearización de Lineweaver-Burk . • 1/v = ([S] + km)/Vm[S] • 1/v = 1/Vm + km/Vm[S] • Recta de la forma Y = A + BX. A = 1/Vm. y X = 1/[S] . B = km/Vm. • El artificio consiste en convertir a la ecuación M-M en la ecuación de una recta. donde: • Y = 1/v. • Artificio matemático que permite deducir gráficamente los valores de km y Vm.

Función linearizada .

Burk) 0.01 1 Km 1 1    v Vmx s Vmx 0.4 0.6 1/s .00 -0.4 -0.02 -1/Km 0.2 0.Representación recíproca doble (Lineweaver .2 0.04 Representación Lineweaver-Burke 1/v 0.03 1/Vmax 0.0 0.

. con ese fin se multiplica ambos miembros de la inversa de la ecuación M-M por el factor vi.Ploteo de Eadie-Hostee • El ploteo se realiza entre vi versus vi[S].Vmax obteniéndose: •Vmax (vi) = KmVmax(vi) + Vmax(vi)[S] vi Vmax[S] Vmax [S] • Vmax = Km.vi [S] • Esta es una ecuación de línea recta de la forma Y = a – bX.Km. • Pendientes = –Km. Ordenada en el origen= Vmax.vi + vi [S] Ordenando: • vi = Vmax .

Km.vi [S] .vi = Vmax .

Representación de Eadie-Hofstee Representación v/s .Hanes) v 100 80 v v   Km   Vmx s 60 40 20 v/s 0 0 2 4 6 8 10 12 14 16 .v Vmax (Wong .

Vi Vmax + [S] . 1 .Wolf [S] = Km. Vmax [S] V a m V 1 x Km V max  0 [S] .Ploteo de Hanes.

6 -Km 0.4 s 1 Km  s v Vmx Vmx 0.Representación s -s/v (Eadie .2 0.0 -20 0 20 40 60 80 100 120 s .8 0.0 0.2 s/v 1.Hofstee) Representación Hanes 1.

Km [S] V V max [S] Km .Ploteo Eisentahl-Cornish • Vmax = vi + vi.

Métodos de linealización para determinación parámetros cinéticos Método Eje Y Eje X Intercepto Eje Y 1/V Intercepto Eje x -1/K Pendiente LineweaverBurke 1/v 1/s K/V Hanes s/v s K/V -K 1/V EadieHofstee v v/s V V/K -K .

EFECTORES ENZIMATICOS • Activadores. substancias que provocan que una reacción enzimática transcurra más lentamente. Cofactores. coenzimas • Inhibidores. .

Iodo acetato b) Inhibición Reversible I-E enlaces débiles no covalentes Se examina según Ec.INHIBICIÓN ENZIMATICA a) Inhibición Irreversible I .E enlace covalente E se torna inactiva Equilibrio derecha. Michaelis . irreversible Ej.Menten 3 tipos: Ejemplos de Inhibidores: Antibióticos Insecticidas Hervicidas Venenos Diferentes Medicamentos .

plomo. . • Se unen covalentemente a residuos aa de la enzima impidiendo su acción. Ejm:Efecto del mercurio. • Se unen a la enzima por el mismo tipo de interacciones que se producen entre las enzimas y los sustratos. • REVERSIBLES. gases neurotóxicos y compuestos arsenicales.INHIBIDORES • IRREVERSIBLES. Hay INHIBIDORES COMPETITIVOS Y NO COMPETITIVOS.

Neurotransmisores .APLICACIÓN: Inhibidores irreversibles: Venenos • • • • Los gases nerviosos. Carbamatos Actúan sobre las enzimas del sistema nervioso. Organofosforados.

Agentes nerviosos • Los agentes nerviosos son ésteres del ácido fosfórico. con los OH sustituidos por otros radicales: .

• Con enlace P-N fosforamido.Plaguicidas organofosforados •Esteres de fosfato con O sustituidos con S u otros radicales. • Con enlace P-S fosfotiolato • Inhiben la acetilcolinesterasa . • Con enlace P-C fosfonato.

Carbamatos • Acido carbámico • Isocianato de metilo.Proviene del fosgeno (oxicloruro de carbono COCl2) • Carbaryl (Sevin) .

Neurotransmisión • Circuito eléctrico de transmisión de señal entre una sensación (nervio sensitivo) y un movimiento muscular (nervio motor) .

Inhibición irreversible • Los compuestos organo-fosforados inhiben la actividad enzimática de la acetilcolinesterasa y paralizan la transmisión nerviosa colinérgica .

Inhibidor Irreversible Fluorofosfato de diisopropilo (DFP) Acetilcolina Acetilcolinesterasa Acetato + Colina .

se recupera la actividad.Inhibidor Reversible • La unión del inhibidor y la enzima es reversible. Hay 3 tipos: Competitiva No Competitiva Acompetitiva (Alostérica) . • Al quitar el inhibidor del medio.

Inhibición Competitiva .

Inhibición competitiva .

.Competitiva.

Inhibidores Competitivos Malonato Sulfas Antihipertensores: Alopurinol Fluoruracilo Deshidrogenasa del ácido succínico Infecciones microbianas Captopril y Enalopril Controla la gota Cáncer .

Inhibición No Competitiva .

• Kmax+S (1+I/Ki) • Km se mantiene .No competitiva • V = Vmax. . S .1.

La Km se mantiene y la Vmax disminuye.Inhibición acompetitiva • El inhibidor se une a un sitio diferente al sitio activo afectando la catálisis. .

Inhibición acompetitiva .

.TABLA DE DIFERENCIACIÓN DE TIPOS DE INHIBICIONES .

. • Una alta especificidad y potencia asegura que el medicamento va a tener pocos efectos secundarios y por tanto una baja toxicidad. la cual indica la concentración necesaria para inhibir a una enzima). • La validez de un inhibidor enzimático medicinal suele venir determinada por su especificidad (su carencia de unirse a otras proteínas) y su potencia (su constante de disociación.Aplicaciones • Muchos medicamentos son inhibidores enzimáticos.

Sulfamidas .

.

Inhibidor competitivo

REACCIONES CON MÁS DE UN SUBSTRATO
•Mecanismos para explicar este tipo de reacciones, la mayoría pueden clasificarse en dos tipos: a)Todos los substratos se unen a la enzima antes de la catálisis (en caso de dos substratos se denomina mecanismo de formación de complejo ternario); a)Se libera un producto a partir de un primer complejo binario antes de la unión con el segundo substrato.

a.- Reacciones mediante formación de un complejo ternario. En este caso, el complejo ternario puede formarse independientemente del orden de unión de los substratos (aleatorio), o bien únicamente en un orden determinado (mecanismo ordenado). Mecanismo aleatorio. Los substratos A y B forman un complejo con la enzima. Cualquiera de ambos puede combinarse con el otro substrato para formar el complejo ternario EAB, que conduce a los productos X e Y y a regenerar la enzima:

un acil-enzima) que es atacado por el segundo substrato (por ejemplo.Reacciones enzimáticas sin formación de un complejo ternario.. transfiriéndose el grupo acilo). formándose un complejo de la enzima con un substrato (EA). que libera el producto X. quedando como EA' (por ejemplo. . Un substrato (A) se une inicialmente con la enzima formando el complejo EA.Mecanismo ordenado. El mecanismo se denomina ping-pong. El segundo substrato sólo se une al complejo EA para conducir al complejo ternario EAB: b.

• Extracción de enzimas. • Aplicaciones de enzimas .APLICACIONES DE ENZIMAS • Producción de enzimas.

Diagrama producción de enzimas .

• Asimismo se puede trabajar en condiciones moderadas.APLICACIONES DE ENZIMAS EN INDUSTRIA ALIMENTARIA • La gran especificidad de acción que tienen los enzimas hace que no se produzcan reacciones colaterales imprevistas. quedando entonces asimilados al resto de las proteínas presentes en el alimento. • Además los enzimas pueden inactivarse fácilmente cuando se considere que ya han realizado su misión. lo que evita alteraciones de los componentes más lábiles del alimento. . especialmente de temperatura.

Ya se comercializa leche a la que se le ha añadido el enzima para eliminar la lactosa. un enzima que hidroliza la lactosa. .Industrias lácteas •El cuajo del estómago de los rumiantes es un producto clásico en la elaboración de quesos. •Mezcla de dos enzimas digestivos (quimosina y pepsina) y se obtiene del cuajar de las terneras jóvenes •Estos enzimas rompen la caseína de la leche y producen su coagulación. •Otros enzimas con acción semejante obtenidos a partir de microorganismos o de vegetales •Lactasa.

que la contienen en abundancia.Panadería • • • En panadería se utiliza la lipoxidasa. La forma en la que se añade es usualmente como harina de soja o de otras leguminosas. simultáneamente como blanqueante de la harina y para mejorar su comportamiento en el amasado. se añade amilasa. normalmente en forma de harina de malta. . aunque en algunos países se utilizan enzimas procedentes de mohos ya que la adición de malta altera algo el color del pan. Para facilitar la acción de la levadura.

Bromelína. . se obtiene de la piña tropical. •Un proceso fundamental de la fabricación de la cerveza. la rotura del almidón para formar azúcares sencillos que luego serán fermentados por las levaduras.Cervecería •A principios de este siglo (1911) se patentó la utilización de la papaína para fragmentar las proteínas presentes en la cerveza y evitar que ésta se enturbie durante el almacenamiento o la refrigeración. •Enzima semejante. lo realizan las amilasas presentes en la malta.

aunque la cantidad producida no llegue a ser preocupante para la salud. que es tóxico. que pueden destruirse por la acción de enzimas presentes en el propio zumo o bien por enzimas añadidas obtenidas de fuentes externas.Fabricación de zumos .Esto es debido a la presencia de pectinas.Esta destrucción requiere la actuación de varios enzimas distintos. . . uno de los cuales produce metanol. .A veces la pulpa de las frutas hace que los zumos sean turbios y demasiado viscosos.

en lugar del azúcar de caña o de remolacha. •La glucosa formada puede transformarse luego en fructosa. conservas de frutas. repostería. •La forma antigua de obtener estos jarabes. . otro azúcar más dulce. •Los enzimas utilizados son. alfa-amilasas y amiloglucosidasas. se utilizan en la elaboración de bebidas gaseosas. ha sido desplazada por la hidrólisis enzimática. usualmente inmovilizado en un soporte sólido. utilizando el enzima glucosa-isomerasa. etc.Fabricación de glucosa y fructosa a partir del maíz •Jarabes fructosados. por hidrólisis del almidón con un ácido.

la glucosa-oxidasa y la catalasa. se pueden utilizar. enzimas que rompen las proteinas. que podrían oscurecerlos. • . para ablandar la carne. Por otra parte. se eliminan con la acción combinada de dos enzimas. fundamentalmente durante el cocinado doméstico. las trazas de glucosa presentes. la papaína y bromelína.Otras aplicaciones • En la fabricación de productos derivados de huevos.

las cuales al llegar a los cuerpos de agua provocarán daños en los seres vivos presentes en éstos. restos de otros compuestos orgánicos etcétera. .APLICACIONES EN INDUSTRIA DE DETERGENTES •La tecnología de enzimas en los detergentes se desarrolló a partir de los años 60. y Lipasas que degradan lípidos que son los que comúnmente se adhieren a la ropa y a ellas se les adhieren el resto de la suciedad como polvo. por acción directa sobre ellos o sobre los nutrientes que componen su dieta alimenticia. las cuales degradan restos de proteínas. •Los detergentes que contienen enzimas se les llama detergentes biológicos. con lo cual se desechan enzimas activas al drenaje. •Proteasas. •El problema se presenta al usar exceso de estos detergentes.

almidón. cereales. . los avances tecnológicos están permitiendo acortar la brecha. este rubro ofrece un enorme potencial que puede ser aprovechado. o residuos forestales. puesto que el petróleo sigue siendo más barato. Por lo tanto. •Cada año crecen unas 200 mil millones de toneladas de biomasa (madera. •El principal obstáculo para la viabilidad de esta propuesta es el costo. •Alcohol obtenido por fermentación de azúcares. Sin embargo. etc). de las cuales los humanos usamos sólo un 3%.APLICACIONES DE LA ENZIMAS EN ENERGÍA •Otra actividad de aplicación de enzimas en biotecnológica es en la producción biocombustibles renovables.

se obtienen los siguientes datos: • S(g/l) 20 15 10 7.015g/l.5 0.Ejemplos de Aplicación: Cinética Enzimática.14 1. En una reacción enzimática que transcurre con una concentración de enzimas de 0. .87 0.0 3.0 2.44 0.35 • Deduzca el modelo que representa la cinética del proceso.59 0.01 0.72 0. • 1.5 • v(g/l-min)1.0 4.0 5.

8 0.Representando gráficamente M-M se tiene: V 1.2 0 0 5 10 15 20 25 (S) .4 0.2 1 0.6 0.

30 0.Deducción de los.25 0.0 3.273 2.000 2.70 0.59 0.149 1.695 2.10 0.3 2.066 0.5 v (g/l-min) 1.5 5.44 0.15 0.0 4.05 0.990 1.428 1.35 1/S 0.14 1. coeficientes de la ecuación de Linewaber-Burk S 20 15 10 6.857 .877 0.20 0.01 0.50 0.87 0.40 1/v 0.

9914 2.0000 0.Graficando a Linewaber-Burk 1/v 1/v 3.350 0.150 0.0000 1.000 0.050 0.0000 2.100 0.400 0.300 0.5000 y = 5.450 .250 0.3879x + 0.5000 1/S 0.0000 0.5000 1.200 0.6147 R² = 0.

387 Km = 8.S/(Km+S) V = 1.614 vmax = 1.628S/(8.• • • • • • • • Intersección.= 1/vmax=0. = 5. Pendiente: Km/vmax.776+S) Comprobar por Eadie-Hostee .628 g/l-min. V = Vmax.776 g/l El modelo será.

100 0.V/S v/S 0.080 0.6 0.140 0.120 0.020 0.por Eadie-Hosteee • V = Vmax – Km.060 0.000 0 0.4 0.8 1 1.160 V 0.040 y = -0.1148x + 0.9758 0.2 V/S .1861 R² = 0.2 0.

un soporte/matriz no esencial para su actividad. ó bien para facilitar la separación del catalizador de sus productos. lo que permite aumentar su productividad. simplificando la etapa posterior de purificación. • La inmovilización permite la utilización de las enzimas en procesos continuos. o contenida en. .Inmovilización de enzimas • Se entiende por enzima inmovilizada (EI) aquella física/químicamente asociada a.

Inmovilización de enzimas .

libre de catalizador. que sale como un producto. ‰ Operación continua ‰ Reutilización Heterogéneo: uso continuado .BIOCATALIZADORES INMOVILIZADOS La inmovilización es el proceso por el que las enzimas y las células pueden transformarse en catalizadores heterogéneos El biocatalizador se confina a una región determinada a través de la cual se pasa la solución del substrato.

Métodos de Inmovilización Retención física Atrapamiento o inclusión Inmovilización química Adsorción Unión covalente Entrecruzamiento .

Enzimas inmovilizadas .

Soportes de inmovilización SOPORTES MAS UTILIZADOS Agarosa Celulosa Quitina Dextrano Ácidos naturales Almidón .

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