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VIRUS

VIRUS: COMPONENTES
Algunos tienen DNA y otros RNA, pero nunca ambos cidos nucleicos En general tienen doble hlice de DNA( doble cadena), pero pueden ser monocatenarios.. En muchos casos reciben el nombre de la enfermedad que causan ( ej. Virus Polio), o del tejido que afectan (ej.Adenovirus) Contienen: Acido nucleico central, rodeado de una cubierta proteica: cpside,cada proteina individual que forma la cpside se llama capsmero Formas: las ms comunes son : Helicoidal: son largos cilindros, con una estructura central y rodeados de capsmeros. Icosaedro: (20 caras triang. con 12 vrtices.) Son en general virus pequeos de apariencia redondeada. Envoltura: son estructuras ms complejas que rodean al complejo ncleo-cpside. No todos los virus poseen envoltura

VIRUS
Ser vivo con un elemento gentico que contiene DNA o RNA y que es capaz de alternar entre dos estados distintos: Extracelular : infeccioso( virus completo para infectar otra clula) Intracelular : fase replicativa ( donde reproducen los cidos nucleicos y todos sus componentes para luego salir de la clula a infectar otra clula.) Varan de : tamao, forma, composicin, organismos atacados, tipos de daos celulares inducidos. Todos son sub- microscpicos ( no se ven con microscopio ptico), slo pueden verse con microscopio electrnico

Virus : multiplicacin
Deben introducirse en una clula viva para inducirla a fabricar

1. 2. 3. 4. 5. 6.

los componentes esenciales de una partcula vrica y debe hacerse de forma adecuada para poder escapar de la clula a infectar otra clula. Las fases pueden resumirse en 6 etapas: Fijacin o adsorcin: a la clula huesped ( Hepatocitos del hgado, por ej) Penetracin en la clula Replicacin del cido nucleico en la cl.-huesped Produccin de capsmeros y otros componentes Reunin de cido nucleico capside dando lugar a nuevas partculas vricas Liberacin de las partculas vricas para infectar otas clulas

No poseen metabolismo ni organizacin celular, por lo que se les situa en el lmite entre lo vivo y lo inerte.

Los virus pueden actuar de dos formas distintas:


1-Reproducindose en el interior de la clula infectada, utilizando todo el material y la maquinaria de la clula hospedante. 2- Unindose al material gentico de la clula en la que se aloja, produciendo cambios genticos en ella.

Por eso se pueden considerar los virus como agentes infecciosos productores de enfermedades o como agentes genticos que alteran el material el material hereditario de la clula husped.

Interaccin Huesped - Virus


En la naturaleza un virus ataca generalmente organismos relacionados( humanos, aves, plantas, determinados rganos, etc) En el Laboratorio pueden infectarse huspedes que no se infectan naturalmente ( determinadas lneas celulares) Especificidad Huesped - Virus : est dada por la especificidad entre el lugar de adsorcin del huesped y de fijacin del virus Daos en el huesped: son variables, desde los virus latentes que por aos estn mudos de sntomas en el huesped, hasta los extremadamente virulentos como el de la Polio, que disgrega los polirribosomas del huesped produciendo inhibicin de la sntesis proteica en ste.

Bacteriofago - Bacteria

Coleccin y transporte de muestras clnicas


Tiempo de la toma dentro de la 1 semana de sntomas Medios : solucin salina o enriquecida con proteinas (suero o albmina) Temperatura:conservar refrigeradas ( 4- 8 C ) Hisopos: cualquiera sea su procedencia ( faringe, piel, recto,conjuntiva,genitales) deben enviarse dentro de medio de transporte especial.

Sangre:entera, anticoagulada con EDTA, recogida en forma esteril. Suero:Dos sueros sin anticoagulante. El 1 en etapa sintomtica y el 2 en convalescencia

Rotular las muestras con nombre del paciente

VIRUS RESPIRATORIOS

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Cules son? Son un verdadero problema sanitario? Tiene costo beneficio su diagnostico? Es posible la prevencin?

Cuntas enfermedades pueden producir?

Otitis Faringitis Otitis

A
Adeno

VIRUS RESPIRATORIOS En cifras... avaladas por la literatura


Causa o contribuye a la muerte de 4 a 5 millones de nios por ao en pases en vas de desarrollo.

En Argentina son causales de un 10% de las muertes en menores de 1 ao.

Un nio en un rea urbana tiene 5 a 8 episodios de enfermedad respiratoria anuales en sus dos primeros aos de vida.

Son causa de infecciones nosocomiales:


pacientes de riesgo (alta mortalidad VRS,ADV,PI3) personal de salud ( ausentismo- infecciones nosoc.)

La gravedad de alguno de ellos en el grupo de 0-4 aos es semejante a la de > 65 aos.

A QUIENES PUEDEN AFECTAR??


BQL lactante

Neumonitis

JOVENES ADULTOS*

NIOS ***

Neumona

PUEDEN DEJAR SECUELAS GRAVES ( ADV)

ANCIANOS***

Quines son....?
FAMILIA GENERO VIRUS
Influenza tipos A, B y C Parainfluenza tipos 1, 2, 3 y 4A y B

Orthomyxoviridae Influenzavirus Paramyxoviridae Respirovirus Pneumovirus Metapneovirus Adenoviridae Picornaviridae Coronaviridae Adenovirus Rhinovirus Coronavirus

VSR subgrupos A y B Metapneumovirus humano. Adenovirus serotipos 1 a 49 ( 3* y 7 *)


>99 tipos Resfro comn

SARS ( Co-V)

INFLUENZA A Y B Virus de la GRIPE


El

virus

Los

viriones estn envueltos y contienen ocho segmentos de ARN


Tienen

espculas formadas por dos glicoprotenas:

HA y NA.
Para

el IA se conocen 15 subtipos de HA y 9 de NA. gran variabilidad antignica .

Tienen La

poblacin ms afectada
Lactantes Enfermedad pulmonar previa Enfermedades debilitantes

Mayores de 65 aos Cardipatas Inmunosuprimidos

GRIPE

Se

propaga

1918

de persona a persona

20.000.000 muertes

por gotas de secresiones respiratorias

forma indirecta por objetos contaminados.

Perodo

de incubacin: 1 a 7 das.

Sobrevive en secresiones respiratorias secas y

en superficies del medio ambiente por 1 o 2 das.


Sintomas: cefalea, fiebre, coriza. BQL- NM- Neumonitis
>

50 % internaciones y 80% de mortalidad en > 65 aos

GRIPE: INCIDENCIA ESTACIONAL


100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 ENERO

1999 2000 2001 2002 2003

MAYO

SEPTIEMBRE

PREVENCION: Aislamiento
respiratorio

Vacuna

PROGRAMAS DE VIGILANCIA: GRIPE


DE INFECCIONES RESPIRATORIAS AGUDAS VIRALES Anual: recogiendo y publicando la informaciones semanalmente

Centros centinelas
Mdicos de todo el pas

CENTROS DE CONTROL
Lab de OMS CDC Atlanta

Laboratorios de red de vigilancia


Htal Garrahan

VACUNA ANUAL

Laboratorio de referencia
Inst.Malbrn

Marzo-mayo

Cepas circulantes en el ao 2001


A/

Panam/2007/99 (H3N2) Caledonia/20/99 (H1N1) a la cepa B/Yamanashi/166/98

A/New

B/Sichuan/379/99 Similares

Similares

a la cepa B/Johannesburg/5/99

Vacuna 2002 recomendada por OMS para 2002


Anlogo

al A/Moscow/10/99 (H3N2) al A/New Caledonia/20/99 (H1N1) al B/Sichuan/379/99

2004

A/Panam/2007/99 (H3N2)

Anlogo Anlogo

A/Nueva Caledonia/20/99(H1N1) A/Fujian/411/2002(H3N2) B/Hong Kong/330/2001

B/Guandong/120/2000, B/Johannesburg/5/99

B/Victoria/504/2000
aproximada de 80% de prevencin

Efectividad Redujo

en un 75% las muertes por influenza y las complicaciones en pacientes que requieren hospitalizacin.

ALTO COSTO BENEFICIO

PARAINFLUENZA 1 2 3

El virus

Contiene una cadena de ARN

Parainfluenza 3

Es el ms frecuente en nuestro medio


PRODUCE: neumona , bronquiolitis ( < 1 ao), coup, laringits , otitis media aguda (nios 2 5 aos) Brotes en primavera.

Son comunes las reinfecciones. Se elimina de 4 a 7 das. Se transmite de persona a persona

Mortalidad: 2.8%
Htal Garrahan

INCIDENCIA ESTACIONAL
25 20 15 10 5 0 ENERO 1999 2000 2001 2002 2003

MAYO

SEPTIEMBRE

Htal Garrahan

PREVENCION:
Aislamiento de contacto

VIRUS SINCISIAL RESPIRATORIO VSR

Es ms pequeo que los Parainfluenza,

es envuelto y tiene una cadena de ARN

Es el patgeno respiratorio ms importante en nios de 0 3 aos .

Causante de bronquiolitis y neumonitis

3 a 5 % necesita hospitalizacin.

En adultos produce enfermedad del tracto respiratorio superior leve Las reinfecciones2.4% son comunes. Mortalidad: Htal Garrahan

INCIDENCIA ESTACIONAL
500 450 400 350 300 250 200 150 100 50 0 ENERO

1999 2000 2001 2002 2003

MAYO

SEPTIEMBRE
Htal Garrahan

VSR
Factores de riesgo

Enfermedad cardaca y broncopulmonar Inmunosupresin ( Tx MO, leucmicos) Prematuros y lactantes < 3 meses

El perodo de contagio de 3 a 8 das La transmisin


directa o indirecta por fomites perdura en ambiente y secreciones por ms de 48hs. Ribavirina ( slo a inmunocomprometidos). Gammaglobulina hiperinmune.

Tratamiento Sintomtico.

Vacuna?
PREVENCION: aislamiento de contacto

ADENOVIRUS
EL
No

VIRUS: contiene ADN doble cadena ,


no son envueltos.

lo afectan el pH del estmago, las sales biliares o las enzimas proteolticas, replica bien en el tracto gastrointestinal.
La

epidmica.

transmisin es espordica y

Se transmite por agua y fomites


Se mantienen activos a temperatura ambiente durante 7 das.
Los

principales serotipos respiratorios

son : 1, 2, 3, 5 y 7.

ADENOVIRUS
EL 90% de los recin nacidos por va transplacentaria reciben anticuerpos protectores hasta los seis meses de vida. Luego la curva desciende hasta los dos aos. INFECCION RESPIRATORIA responsables del 80% de los Edad: > 6 meses pacientes peditricos con INFECCIONES secuelas respiratorias graves por Respiratorias Gastrointestinales neumonitis necrotizante Miocarditis, pericarditis, encefalitis, meningitis Cistitis hemorrgica.
INCUBACION:

2 a los 14 das puede ser directa o indirecta

TRANSMISION:

MORTALIDAD: 22%

INCIDENCIA ESTACIONAL
35 30 25 20 15 10 5 0 ENERO MAYO SEPTIEMBRE 1999 2000 2001 2002 2003

PREVENCION
Aislamiento respiratorio

METAPNEUMOVIRUS HUMANO: caracteristicas


Familia Paramixoviridae Genoma ARN Pleomorfico Con envoltura lipdica Glicoprotenas de superficie F, G

25% nios entre 6-12 meses tienen Ac

Virtualmente todos los nios > 5 aos son sero +

El virus circula hace medio centenar

Mayor prevalencia en nios < 1 ao (11.6)

Sin prevalencia en cuanto a sexo y raza.

ARGENTINA: 11% en BQL (- ) para otros virus ( CEMIC)

INCIDENCIA ESTACIONAL Ao 2003


500

450

400

350

VSR: n= 910 FLU A n=153 ADV n= 151 PARA 3 n = 97

300

250

200

150

100

50

0 EN FEB MZO AB MAY JUN JUL AG SET OCT NOV DICIEMBRE

ADV

VSR

FLU A

FLU B

PARA 1

PARA 2

PARA 3

Muestras totales: 5320

Positivos: 24.72%

Htal Garrahan

Presentacin clnica
ADV NM BQL 43% 42% VSR 13% 84%
23%

IA 21% 49%
78%

PI3 22% 50%


43

Distres 86%

Htal Garrahan 2003

OTROS PARAMETROS EPIDEMIOLOGICOS


Dias de Htal Requer. O2 Dias deO2 Requer. UCI Dias UCI

ADV VSR IA PI3

30 12 17 18

89

27 11 11 18

31.2 13.2 11 25

22 1.4 5 15

93.8 77 84.6

COSTO da / cama UCI: 790$ CIM: 490$

Htal Garrahan

Infecciones respiratorias virales diagnstico etiolgico


Diagnstico

veces

sindromtico orienta a la causa solo a

Cundo y para qu solicitar un examen virolgico confirmatorio?

Nio internado, con factores de riesgo.

Confirmar Dx
Fijar pronstico Suspender teraputicas innecesarias

Cohortizacin de pacientes
Evitar infecciones horizontales Resultados en el da

DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO
EL LABORATORIO LA MUESTRA CLINICA

Exudado faringeo
Aspirado naso farngeo

Bioseguridad

El resultado depende de la calidad de la muestra

Buena microscopa

CUANDO PEDIRLO?
50 45 40 35 30 25 20 15 10 5 0

PORCENTAJE DE POSITIVOS

1999 2000 2001 2002

Tiene costo beneficio el estudio entre los meses de mayo a setiembre

EN FE ER BR O ER O M AR ZO AB RI M L AY JU O NI O JU AG LIO SE O TI ST EM O B O CT RE NO U VI BR E E DI MB CI R EM E BR E

Metodologas de Diagnstico

Cultivo

Convencional

Cultivo
ELISA

rpido
molecular

Inmunifluorescencia (antgenos virales)

Biologa

Mtodos de diagnstico cul elegir?


Cultivo convencional
Cultivo rpido
18- 20 das S: 75% Costo: $ 40

24 48 hs S: 80% Costo : $ 30

Mtodos de diagnstico cul elegir?


FLUORESCENCIA
2 hs S: > 90% (Salvo ADV) $ : 13

( -)

(+)

VSR

FLU A
1h S: > 85 % $ : 30

ELISA

Valor de los estudios con AC monoclonales fluorescentes

N=8670 TOTAL ADV VSR IA IB PI1 PI2 PI3

S % 84.2 64.8 90.6 84.3 82.6 82.0 41.3 87.0

E % 87.7 99.9 93.3 95.1 99.0 99.8 99.9 99.6

VPP % 70.7

VPN % 94.0

K.E.Irmen, Use of monoclonal antibodies for rapid diagnosis


of respiratory viruses in a community hospital, 2000, Clinical and diagnostic laboratory inmunology , 7, 396-403

Diagnstico microbiolgico
Comparacin Fluorescencia Directa / Cultivo viral

Cultivo: ADVEscaso Costo/ beneficio para diagnstico Importante para coleccin de cepas para trabajo en vacunas

VSR - FLU A - FLU B -PARA FLU 1 2 3 El cultivo No tiene costo beneficio

CDC Atlanta

Mtodos de diagnstico cul elegir?


Amplificacin Molecular (PCR)

El paciente

slo ADV de alta sospecha si dan (-) los otros mtodos Metapnemovirus

Estudios de brotes Tipificacin de cepas

Gold standard
24- 48 hs > 50$

FLUORESCENCIA CONANTICUERPOS MONOCLONALES

Hora
11 11.30 12

Algorritmo de trabajo diario


Recepcin de muestras

Screening de 7 virus

(-)

(+)

13 - 14

Identificacin
I INFORME 2- 3 hs d
Mas de 1 virus ( VSR +ADV =0.4%)

Aislamiento respiratorio

FLU ADV

Aislamiento VSR de contacto PARA 3


Serv. Epidemiologa Htal Garrahan

OBJETIVOS DEL DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICO Para el paciente Para la Intitucin de Salud

Confirmar Fijar

diagnstico

Cohortizacin Evitar

de pacientes

pronstico

Suspender

teraputicas innecesarias

infecciones horizontales
Ahorro

en TTO ATB y en casos secundarios