Instituto Politcnico Nacional Escuela Nacional de Medicina y Homeopata Seccin de estudios de posgrado e investigacin Especialidad de Acupuntura humana.

Participacin de la va de ON/GMPc/KATP en analgesia producida con electroacupuntura en modelos murinos

Nuez Villaseor Nora de Montserrat Tutores: Dr. Juan Manuel Ordoez Rodrguez Dra. Aracely Evangelina Chvez Pia

MARCO TEORICO
Dolor:

El dolor es una experiencia sensorial y emocional, displacentera, que se asocia a daos reales o potenciales del organismo.

Loeser JD. et Treede RD.: The Kyoto protocol of IASP Basic Pain Terminology. Pain 137 (3): pp 473-7. 2008

Prehistoria: connotacin mstica, apsitos de hierbas o minerales, masajes Siglo XVIII en adelante: Definicin dolor, Nace anestesiologa, obtencin de analgesicos naturales y sintticos.

Mesopotamia: demonios, Cdigo de Hammurabi

DOLOR
Edad media y renacimiento: Dolor:medio de purificacin religiosa Antiguo Egipto: Papiro de Ebers uso de narcticos derivados de hierbas

China: Teora del yin yang, analgesia con hachis y acupuntura.

Drs.SaulKrivoy, Magalys Tabasca,Wallens Adelaide,Marlon Daz, El dolor en la historia Coleccin Razetti. Volumen X. Caracas: Editorial

CLASIFICACION
(ORGANIZACIN MUNDIAL DE LA SALUD)
Por su duracin Agudo: Limitado en el tiempo, menor o igual a 2 semanas y con escaso componente psicolgico. Por su patogenia Neuroptico: Se produce por estmulo directo del SNC o por lesin de vas nerviosas perifricas.

Por la localizacin
Somtico: Se produce por la excitacin anormal de nocioceptores somticos superficiales o profundos.

Crnico: Ilimitado en su duracin, mayor o igual a 3 meses y se acompaa de componente psicolgico.

Nocioceptivo: Se divide en somtico y visceral

Psicgeno: Interviene el ambiente psicosocial que rodea al individuo.

Visceral: Se produce por la excitacin anormal de nocioceptores viscerales. Frecuentemente se acompaa de sntomas neurovegetativos.

Por el curso

Por la intensidad

Por factores pronsticos de control del dolor

El dolor difcil (o complejo) es el que no responde a la estrategia analgsica habitual (escala analgsica de la OMS).

Continuo: Persistente a lo largo del da y no desaparece.

Leve: Puede realizar actividades habituales.

Irruptivo: Exacerbacin transitoria del dolor en pacientes bien controlados con dolor de fondo estable. El dolor incidental (subtipo)

Moderado: Interfiere con las actividades habituales. Precisa tratamiento con opioides menores

Severo: Interfiere con el descanso. Precisa opioides mayores.

F. Puebla Daz.: Tipos de dolor y escala terapetica de la OMS. Oncologa; 28 (3):139-143. 2005.

TRATAMIENTO

F. Puebla Daz.: Tipos de dolor y escala terapetica de la OMS. Oncologa; 28 (3):139-1

La finalidad del dolor es sobre todo un mecanismo que protege el organismo y que aparece cada vez que se lesiona cualquier tejido

Arthur C. Guyton, John E. Hall., Tratado de fisiologa mdica.Ed.12, pp. 669., 2011

Potencial de membrana

El potencial de membrana es la diferencia de potencial a ambos lados de una membrana que separa dos soluciones de diferente concentracin de iones
BOMBA N++/k+

Arthur C. Guyton, John E. Hall, Tratado de fisiologa mdica.Ed.12, pp. 59-6

Potencial de accin

Un potencial de accin o tambin llamado impulso elctrico, es una onda de descarga elctrica que viaja a lo largo de la membrana celular modificando su distribucin de carga elctrica.

Arthur C. Guyton, John E. Hall.:, Tratado de fisiologa mdica.Ed.12, pp. 61., 2011

Dolor Agudo

0.1 segundos

Dolor Crnico

1 segundo o ms
www.med.ufro.com

Jaime W. Zegarra. Bases fisiopatolgicas del dolor. Acta md. peruana, mayo/agos, vol.24, no.2: p.35-38; 2007

Los receptores del dolor son terminacione s libres que se encuentran en todo el cuerpo

www.fulgrace.wordpress.com, 23/05/201

DOLOR AGUDO

MECANICO

TERMICOS

ESTIMULOS DOLOROSOS

QUIMICO

DOLOR CRONICO

FIBRAS DOLOROSAS

FIBRAS Ad

FIBRAS C

Mielnicas
Dolor Agudo 6

Amielnicas Dolor

y 30m/s

Crnico 0.5 y 2m/s

Arthur C. Guyton, John E. Hall, Tratado de fisiologa mdica.Ed.12, pp. 59-6

XIDO NTRICO

Gas simple que se libera por la conversin del aminocido L-arginina en L-citrulina por medio de la accin de la enzima sintetasa de xido Ntrico. 6 segundos de vida

Dora Ferrer Viant,et.al. xido ntrico:Importancia y participacin en algunas funciones cardiovasculares y hemtologicas. MEDISAN 1998; 2(3):45-46

ISOFORMAS DE OXIDO NITRICO SINTETASA

ISOFORMA

OTRO NOMBRE

PESO MOLECULAR 155 Kda

REGULACIN

LOCALIZACION

ONS TIPO I

nONS

Ca++/calmodulina

Neuronas del SNC y SNP, neuroglias, islotes del pancreas

ONS TIPO II

IONS

125 Kda

Expresin inducida por citosinas y endotoxinas

Macrofgos, hepatocitos, clulas musculares lisas, neutrfilos y otros

ONS TIPO III

eONS

133 Kda

Ca++/calmodulina

Endotelio vascular, rion, plaquetas

Dora Ferrer Viant,et.al. xido ntrico:Importancia y participacin en algunas funciones cardiovasculares y hemtologicas. MEDISAN 1998; 2(3):45-46

Va de No-Guanosin monofosfato cclico (GMPc)

cGMO regulado por fosfodiesterasa PDE cGMP dependiente de protein cinasa

Arginina NOS

cGMP

NO

Guanilil ciclasa GTP

cGMP regulado por canales inicos

Efectos celulares: Cardiovasculares (contractilidad muscular cardiaca) y nerviosas (transmisin sinptica)

Activa a canales de KATP

A.Miclescu,T.Gordh Nitric oxide and pain: something old,something new,Acta Anaesthesiol Scand, 2009;

Canales de Potasio dependientes de ATP Producen el flujo de potasio al espacio

extracelular e hiperpolarizan las membranas impidiendo que se activen los canales de calcio.

Jorge G. Peralta ROL DEL POTASIO EN LA ACTIVIDAD Y METABOLISMO CELULAR, Separata Lnea Montpellier 2009 - VOL. 17 N3

ANTECEDENTES DE PUNTOS,FRECUENCIAS, y VA DE ON/GMPc

Nombre del artculo Frecuencias utilizadas Puntos Sustancia Resultados

Non-opioid dependent antiinammatory effects of low frequency electroacupuncture

Shi Ping Zhanga, Jin Shan Zhanga,b, Ken K.L. Yungc, Hong Qi Zhanga Brain Research Bulletin 62 (2004) 327334 Pre-emptive antihyperalgesic effect of electroacupuncture in carrageenan-induced inflammation: role of nitric oxide. Garrido-Surez BB, Garrido G, Mrquez L, Martnez I, Hernndez I, Merino N, Luque Y, Delgado R, Bosch F. Brain Res Bull. 2009 Aug 14;79(6):339-44. doi: 10.1016/j.brainresbull.2009.04. 01 Epub 2009 May 3.

4Hz

Zusanli (E36) Sanyinjiao (B6)

Carragenina inyectada en la superficie plantar de la pata trasera derecha para modelo inflamatorio
Carragenina 1% inyectada en la superficie plantar de la pata trasera derecha

Demuestran que a baja frecuencias en EA es capaz de inhibir la inflamacin perifrica y la actividad neuronal central asociado a travs de un mecanismo no opioide-dependiente.
Se demuestra el efecto antihiperalgsico de la EA a bajas Frecuencias, con la participacin de la va de ON/GMPc en la analgesia acupuntural

10Hz

Huantiao (VB30)

JUSTIFICACION

El dolor es un sntoma que se encuentra presente en todos los padecimientos La prevalencia del dolor oscila entre el 60 y el 80%; ms del 50% de estos pacientes sufre un dolor intenso. Los costos para el tratamiento del dolor son elevados(50-1200 pesos)

Mayor especificidad al tratar el dolor sin efectos adversos

Por lo que la electroacupuntura sera un buen tratamiento integral del dolor y a yun menor costo Rafael Castro Delgado, Pedro Arcos Gonzlez Prevalencia tratamiento del dolor agudo en medicina de
emergencias

HIPOTESIS

Si se colocan los puntos Zusanli (E36) y Sanyinjiao (B6) con electroestimulacin a una frecuencia baja (4 Hz) presentar una analgesia acupuntural mediada por la activacin de la va del Oxido Ntrico

OBJETIVO GENERAL
Demostrar que al aplicar electroestimulacin a frecuencias bajas (4 Hz) se producir un efecto analgsico por medio de la va del Oxido Ntrico en el dolor agudo.

OBJETIVOS ESPECIFICOS
1.

Evaluar si los puntos Zusanli (E36) y Sanyinjiao(B6), generan un efecto analgsico al estimularlos elctricamente, en el dolor agudo producido por formalina. Comprobar que al colocar los puntos Zusanli (E36) y Sanyinjiao (B6) se activa la va de Oxido Ntrico ayudando a promover el efecto analgsico

2.

3. Determinar si la activacin de GMPc y Canales de Potasio dependientes de ATP al colocar Zusanli (E36) y Sanyinjiao (B6) con electroestimulacin se relacionan con el efecto analgsico

MATERIAL Y METODOS
1.

2.
3. 4.

Ratas de la cepa Wistar Electroestimulador Agujas para acupuntura de acero inoxidable Instalaciones de la E.N.M. y H. Bioterio

4 grupos de 10 ratas Wistar cada uno:

Grupo

Control Grupo con Electroacupuntura Grupo Sham Grupo con Frmaco (Diclofenaco)

Al grupo con electroacupuntura se le darn 6 sesiones una por semana de 20 min cada una.

Al termino de la 6 sesin se administrar 50 Microlitros de formalina diluida al 1% se inyectara en la cara dorsal de la pata trasera derecha Se observar el nmero de sacudidas en periodos de 1 minuto cada 5 minutos durante 60 min.

Ortiz MI, Torres-Lpez JE, Castaeda-Hernndez G, Rosas R, Vidal-Cant GC, Granados-Soto V.; Pharmacological evidence for the activation of K(+) channels by diclofenac; Eur J Pharmacol. Mar 1;438(12):85-91. 2002

SUSTANCIAS PARA INHIBIR LAS VIA NO/GMPc/KATP

Va a Inhibir Sustancia

Sntesis de xido Ntrico

L-NAME (Nitro-L-Arginina-metilster)

Sntesis de GMPc Activacin de canales de K dependientes de ATP

ODQ (1H-(1,2,4) Oxidiazolo(4,3a)quinoxalin-1-one) Glibenclamida

Almeida RT, Duarte ID. Nitric oxide/cGMP pathway mediates orofacial antinociception induced by electroacupuncture at the St36 acupoint, Brain Res. 2008 Jan 10;1188:54-60. Epub 2007 Nov 1.

Wistar hembras 6-8 semanas 180-200g Ayuno de 18-20horas

Cmaras de observacin transparentes por 30 min.

Sesiones de EA 4Hz 6 sesiones una por semana de 20 min cada una. antes de la aplicacin de formalina

Inyeccin de Formalina 1% (50l) en el dorso de la pata derecha trasera. Se valorar el nmero de sacudidas en 1 min c/5 min durante una hora.

Inyeccin de L-NAME, ODQ o Glibenclamida 10 minutos antes de formalina.

FORMALINA

A la disolucin de formaldehdo en agua en una concentracin que oscila entre el 37 y el 50%, que puede contener hasta un 15% de metanol.

Este modelo es de tipo inflamatorio ya que involucra un proceso de sensibilizacin durante el cual el fenmeno inflamatorio se desarrolla.

Leonardo lvarez Herrera, Juan Carlos Snchez Calvo Formalina:caractersticas y mecanismos de control ante la exposicin del personal en los servicios de anatoma patolgica a nivel hospitalario Revista medica de Costa Rica y Centroamerica LXIX (602) 235-339, 2012

ELECTROACUPUNTURA

Electroacupuntura es una forma de acupuntura donde una pequea corriente elctrica se pasa entre pares de agujas de acupuntura. Esta prctica amplifica los resultados de la acupuntura regular

Low-voltage electrodiagnostic devices. Med Lett Drugs Ther 50 (956).

Localizacin de puntos en humanos

ZUSANLI (E36)
A 3 cun por debajo de Dubi (E35) y un dedo transversal hacia afuera del borde anterior de la tibia

SANYINJIAO (B6)
A 3 cun por arriba de la punta del maleolo interno, sobre el borde posterior de la tibia

TIPO DE ESTUDIO
1.

Experimental Longitudinal Prospectivo

2.

3.

VARIABLES
VARIABLES DEPENDIENTES VARIABLES INDEPENDIENTES

Intensidad del dolor agudo que condiciona numero de sacudidas de la pata

Los puntos elegidos Zusanli (E36) y Sanyinjiao (B6) La frecuencia utilizada (4Hz) de la electroestimulacin Aplicacin de Formalina Aplicacin de L-NAME, ODQ, y Glibenclamida

BIOETICA
NOM-062-ZOO-1999

Especificaciones tcnicas para la produccin, cuidado y uso de los animales de laboratorio.

Actividades Planeacin del proyecto y bsqueda de informacin

Semestre 1 E F M A M J

Semestre 2 J A S O N D

Semestre 3 E F M A M J

Semestre 4 J A S O N D

Propuesta de Ttulo, objetivos, hiptesis y justificacin

Elaboracin del Marco terico occidental

Elaboracin del Marco terico en contexto de la MTCH

Realizacin de la fase experimental Recopilacin de resultados

Anlisis estadstico Elaboracin de la discusin y conclusiones

Redaccin del trabajo de tesis