Dra.

María Belén Rodriguez Cardozo

Directora
 BANCO NACIONAL
DE DATOS GENETICOS
( B. N. D. G. )
CREACION Y OBJETO

1.- Motivación histórica

2.- Antecedentes de su creación y

emplazamiento en el Hospital
Dr. C. G. Durand

3.- Ley de creación y Decreto

Reglamentario

4.- Convenio MSyAS - MCBA

 BANCO NACIONAL
DE DATOS GENETICOS
El Banco Nacional de Datos Genéticos (BNDG) creado por Ley Nacional
23.511 tiene su motivación histórica en la desaparición forzada de
personas ocurrida durante los años 1976 – 1983 en la República
Argentina, no obstante lo cual esta Ley comprende y alcanza a todo
conflicto relativo a la filiación de las personas.

Desde el año 1984 hasta la fecha se han extraído en este BNDG muestras
hemáticas de 8.000 personas familiares de desaparecidos, niños
secuestrados o nacidos presuntamente durante el cautiverio de sus
madres que nos fueran enviados exclusivamente por los Juzgados
Penales intervinientes y por la Comisión Nacional por el Derecho a la
Identidad.

Los archivos de esta población del BNDG incluyen a aproximadamente

360 grupos familiares (ramas paternas y maternas), la mayoría de los
cuales integran los registros de la Comisión Nacional por la Desaparición
de Personas (CONADEP) ante la cual fueron efectuadas las denuncias
por la desaparición de personas a partir del año 1984.
 BANCO NACIONAL
DE DATOS GENETICOS
A la fecha, se han identificado por estudios genéticos
realizados en este BNDG 97 menores y jóvenes que de esta
forma recuperaron su identidad e inserción familiar.

La actividad del BNDG ha continuado incrementándose desde

la creación de la Comisión Nacional por el Derecho a la
Identidad (CONADI) la cual recepciona las denuncias que no
fueron presentadas ante CONADEP y continúa con la
investigación de aquellas que tienen su legajo ante esa
Comisión, comprendiendo a presunta supresión de estado
civil, tráfico de menores, etc.

La Comisión Nacional por el Derecho a Ia Identidad desde el

año 1998 centraliza los estudios para la identificación genética
en este BNDG.
 Decreto 700/89

Artículo 2º - El Director del BANCO NACIONAL DE DATOS

GENETICOS tendrá a su cargo las siguientes funciones:
Organizar, coordinar y supervisar las actividades científicas
y técnicas propias.
Fijar las pautas y políticas científicas y técnicas necesarias
para su desarrollo, de acuerdo a lo determinado por la ley.
Preparar el presupuesto y cálculo de recursos del BANCO
NACIONAL DE DATOS GENETICOS y someterlo a
aprobación de la prioridad.
Art. 7º - Los servicios del BANCO NACIONAL DE
DATOS GENETICOS serán prestados en forma
gratuita, debiendo los interesados abonar únicamente
al mismo, el costo de los reactivos a emplearse para la
realización del examen respectivo.

Estarán exceptuados de abonar los reactivos aludidos

en el párrafo anterior, los familiares de niños
desaparecidos o supuestamente nacidos en cautiverio
o aquellos que acrediten imposibilidad económica de
afrontar el pago de los citados reactivos.
Art. 11º - El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS
determinará el día y la hora en que se realizará las pruebas
procediendo a notificar dicha circunstancia a los interesados por
medio fehaciente.

Todo lo concerniente al control de la prueba por las partes como

a la intervención de los consultores técnicos, se regirá por las
normas establecidas en los Códigos Procesales en lo Civil y
Comercial y en Materia Penal de la Nación y Leyes
Complementarias.

En la fijación de los turnos para la realización de las pruebas,

deberá respetarse rigurosamente el orden cronológico de la
recepción de oficios el que no deberá ser alterado salvo por la
existencia de fuerza mayor o de urgencia derivada de causas
graves, las que deberán ser debidamente fundadas por el Director
General del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS.
Art. 13º - La Dirección del BANCO NACIONAL DE
DATOS GENETICOS dictará las normas necesarias
para garantizar la corrección y veracidad de los
estudios y habilitará a los funcionarios responsables
de las áreas de identificación de personas, de
extracción, de inmunogenética, de conservación de
muestras y de registro para que den fe de los actos
que les corresponda, bajo pena de nulidad.

Art. 14º - El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS

no proporcionará información a particulares sobre los
datos registrados, ni tampoco a entidades públicas o
privadas, cualquiera sea la índole de las razones
alegadas.

La información almacenada solo será suministrada por

requerimiento judicial, en causa determinada.
 DECRETO 511 /09
Artículo 1º - Sustitúyese el artículo 1º del Decreto Nº 700 del 24 de mayo de
1989, por el siguiente:

“ARTICULO 1º - El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS tendrá su

asiento en el Hospital General de Agudos ‘Carlos G. DURAND’ dependiente
del GOBIERNO DE LA CIUDAD AUTONOMA DE BUENOS AIRES. La estructura
y planta de personal, ámbito físico, mobiliario y equipamiento son los que se
detallan en los Anexos I, II y III del convenio a que se refiere el artículo 3º el
cual, a todos los efectos, forma parte del presente.

“El BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS estará bajo la conducción

técnica y administrativa de un profesional en bioquímica o biología molecular,
con reconocida experiencia en genética forense, quien desempeñará el cargo
de ‘Director del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS’ (Ley Nº 23.511), y
tendrá su despacho en dependencias del Hospital General de Agudos ‘Carlos
G. DURAND’.

El Director del BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS será seleccionado

en concurso público de oposición y antecedentes, que garantice su idoneidad
científica y la transparencia del proceso de selección.”
Art. 2º - Sustitúyese el artículo 14 del Decreto Nº 700 del
24 de mayo de 1989, por el siguiente:

“ARTICULO 14.- El BANCO NACIONAL DE DATOS

GENETICOS no proporcionará información a particulares
sobre los datos registrados, ni tampoco a entidades
públicas y/o privadas cualquiera sea la índole de las
razones alegadas.

La información almacenada sólo podrá ser suministrada

por requerimiento judicial, en causa determinada, a los
fines de respaldar las conclusiones de los dictámenes
periciales elaborados por el citado Banco para posibilitar
su control por los peritos de parte.”
 MARCADORES GENÉTICOS Y FILIACIÓN
Condiciones previas al empleo de un sistema
1º - La transmisión genética del sistema debe ser bien conocida
2º - Los determinantes genéticos deben estar bien desarrollados al
nacimiento y permanecer constantes durante toda la vida.
3º - La identificación de los antígenos o de los genes deberá ser realizada con
métodos fiables y reproductibles.

Características de MHC - HLA y ADN

• Ambas investigaciones ya no pertenecen al campo experimental.
• Los métodos para su investigación son controlables, seguros y
reproductibles.
• Existen tablas de frecuencias de antígenos y de genes según las razas y el
lugar geográfico de la investigación.
MARCADORES GENÉTICOS Y FILIACIÓN

(CONT...)

Características del ADN

• Permite su utilización para el estudio de evidencias tales

como: manchas, fluídos, cabellos, restos cadavéricos, etc.

• Las técnicas de amplificación (PCR) permiten acceder a

pequeñas cantidades de material genómico aunque éste
se encuentre parcialmente degradado.

• El locus del ADN investigado debe estar revalidado por

estudios familiares que demuestren que ese locus cumple
con las Leyes de Mendel y que muestra una baja
frecuencia de mutaciones.
 GENÉTICA FORENSE

ES UNA RAMA DE LA MEDICINA LEGAL

CONSISTE EN LA APLICACIÓN DE LOS

CONOCIMIENTOS
DE LA GENÉTICA A LA RESOLUCIÓN DE LOS
PROBLEMAS
JUDICIALES
 ¿ Que puede Investigarse hoy además de todo
lo que veremos en esta presentación?
 Posibilidad de analizar características físicas a través de los
marcadores genéticos SNPs:
• Sexo
• Color del pelo: pelirrojo
• Pigmentación: Color de los ojos, color de la piel
• Características faciales
• Lateralidad (zurdo o diestro).- gen CAPG??
• Edad
• Parámetros biométricos - altura
- masa corporal
 Posibilidad de analizar características Físicas:

Algunas características faciales

El pelo rojo está regulado pueden ser simples
por un solo gen

Melanocortin 1 receptor gene

MC1R
 BANCO NACIONAL
DE DATOS GENETICOS

ESTUDIOS PERICIALES : Metodologías

I. Técnicas Inmunoserológicas
a) Aglutinación-elución : antígenos ertrocitarios (ABO, Rh-Hr, MNSs,
P, Kell, Kidd y Duffy).
b) Microlinfocitotoxicidad-doble fluorocromasia: antígenos HLA Clase I.
c) Microlinfocitotoxicidad antígenos HLA Clase II
II. Técnicas de Biología Molecular
1- Genoma Nuclear: ADN Codificante.
a) PCR-SSP y PCR-SSO (low-medium y high resolution)
Genes MHC Clases I y II.
b) PCR-SSOP (high resolution) Genes MHC Clases I y II
 BANCO NACIONAL
DE DATOS GENETICOS
Genoma Nuclear : ADN no codificante. (VNTRs)
 Sin amplificación: SLPs: Locus D7S21, D7S22, D12S11, D16S309, D4S163
y D2S44.
 PCR-Ampli FLP : Locus D1S80.
 PCR-STRs : Locus CSF1PO, D3S1358, TPOX, FGA, TH01, D8S1179,
vWA, D21S11, D16S539, D7S820, D13S317, D18S51,
D5S818, Amelogenina. D2S531 D19 Penta D y Penta E
 Cromosoma Y PCR-STRs: Locus DYS393, DYS19, DYS389 II ,
DYS390, DYS391, DYS385, DYS438, DYS439, DYS436,
DYS434, DYS435, DYS437, GATA A7.2, GATA A7.1, GATA A4, GATA A10,
GATA C4, GATA H4.
 Genoma Mitocondrial : Secuenciación de Region D-Loop, Segmentos
Hipervariables HV1 y HV2
 La Prueba de ADN
Consiste en el análisis de un número determinado de
Polimorfismos genéticos en una muestra biológica

El conjunto de los distintos alelos presentes se

denomina PERFIL GENÉTICO

Si se cuenta con el perfil genético de dos individuos

se puede proceder a calcular su índice de relación
por medio del cálculo matemático estadístico
adecuado.
ETAPAS DE UN ESTUDIO
PERICIAL
 Etapa Preanalitica
 Etapa analitica

 Etapa postanalitica
ETAPAS DE UN ESTUDIO
PERICIAL
 Etapa Preanalitica
 Etapa analitica
 Etapa postanalitica
¿De que depende el éxito de la pericia?
Precauciones durante el proceso de
recogida y envío de muestras al
laboratorio

Bolsas tipo
ziploc o
guantes papel
madera
TOMA DE MUESTRAS DE REFERENCIA
SANGRE
CÉLULAS EPITELIALES BUCALES
Material
esteril
Taco de
Globulos
Blancos
 ADN en condiciones de ser
utilizado

HLA STRs ADN Almacenamient

o
Mitocondrial

Cromosoma Cromosoma Autosómicos

Y X
 Toma de Muestra en Sala de Autopsia

• Todas las muestras que se tomen del cadáver deben ser

congeladas JAMÁS deberán ser colocadas en formol.

• Si se realiza la toma de muestra inmediatamente

después del fallecimiento se podrá acceder a un
fragmento de Hígado o músculo esquelético, en caso
contrario se accederá a hueso o dientes-
 Muestras indubitadas en cadaveres en buen
estado de conservación
 Sangre Postmortem:
 Se toma una muestra de 10 ml de sangre en EDTA al 5%
 Músculo esqueletico:
 Se seleccionan dos fragmentos de músculo esqueletico de unos 10 g de
peso se coloca en un recipiente plástico con boca ancha y tapa a rosca
 Músculo cardiaco
 4 piezas dentales

Muestras indubitadas en cadaveres en avanzado estado de

putrefacción o esqueletizados
Huesos: preferentemente huesos largos

Dientes: 4 piezas dentarias que no esten externamente

dañados ni hayan sido sometidos a endodoncias.
 Otras Muestras de
referencia en personas
fallecidas

 Análisis de restos biológicos existentes en centros

hospitalarios: sangre, biopsias, preparaciones
histologicas
 Análisis de restos biológicos del fallecido que aún
permanezcan en el ambito familiar: maquinas de
afeitar, peines, cepillos de dientes, ropas usadas.
 Restos Cadavericos

 En buen estado de conservación: si se trata de

tejido muscular se coloca el mismo en un frasco
estéril de boca ancha sin líquido fijador. Si se
trata de viceras se eligen las que estén mejor
conservadas: ej: corazón
 Carbonizado: se procesa lo que se encuentre
sin haberse carbonizado
 En mal estado de conservación: se elige huesos
largos y piezas dentarias.
Restos Fetales y Placentarios
Se colocan en un frasco estéril sin líquido fijador
Recogida de Indicios
Biológicos en el lugar
de los hechos
Manchas secas
Indicios húmedos
Indicios líquidos
Pelos dubitados
Restos cadavericos
Restos fetales y Placentarios
 Per sonal

• En España esta labor la realizan los médicos

forenses y la Policía Judicial, sin perjucio de que el
Juez Instructor pueda solicitar la colaboración de
otros expertos calificados de acuerdo a la Ley de
Enjuiciamiento Criminal.

• Este Personal debe tener formación, conocimiento

técnico y experiencia adecuada para el desempeño
de estas funciones por lo cual se realizan programas
de formación y entrenamiento en estas áreas.
Indicios Líquidos
Semen:
o Los preservativos con semen líquido se atan y se
coloca en un frasco estéril
o Semen en escasa cantidad: se deberá tomar con un
hisopo estéril

Pelos Dubitados:
o Se toman con una pinza limpia colocando cada
pelo o grupo de pelos en un papel pequeño y luego
se introduce en una bolsa de papel pequeña.
 Indicios Húmedos

Ropas u otros objetos con indicios húmedos:

se dejarán secar en un lugar protegido sobre
una superficie limpia

Indicios Líquidos
Sangre en gran cantidad: se debe tomar con una pipeta de plástico estéril y
colocarla en un tubo con EDTA al 5%

Sangre en escasa cantidad: se deberá tomar con un hisopo estéril

Sangre coagulada: se deberá tomar con una cucharita de plástico e

introducirla en tubo o frasco estéril
 Manchas secas en muestras
pequeñas y de fácil transporte
 Armas blancas: se colocan por separado en cajas de cartón
 Llaves, monedas, joyas: con pinzas se colocan en bolsas de
papel
 Piedras, ramas y hojas: idem anterior
 Billetes, papeles, cartones pequeños: idem

Manchas secas en muestras grandes no Transportables

Soportes no absorbentes (cristales, metales) puedo proceder así:

A) Frotando con un hisopo estéril ligeramente mojado en agua destilada
B) Raspando la mancha con un bisturí sobre un papel

Soportes absorbentes

Telas, alfombras, se recorta la mancha con un bisturí o una tijera y se coloca en una bolsa
de papel.
Manchas secas en muestras pequeñas y
de fácil transporte
Colillas: deben tomarse con pinzas limpias
e introducirse por separado en bolsas de
papel
Chicles: deben tomarse con pinzas limpias e
introducirse en envases de plástico duro
Sobres y sellos: sin despegarse se recogen
con pinzas y se introducen en bolsas de
papel o plástico
 Protección de las Muestras

Contaminación por material biológico humano:

Se debe al depósito de material biológico humano en el
lugar de los hechos y/o en el cuerpo de la víctima con
posterioridad a la producción del delito.

Puede estar causada por personas ajenas a la

investigación (curiosos o familiares) o personas que
colaboran en la investigación y que de forma
accidental o desconocimiento producen la
contaminación.
 Documentación en casos de
Interés criminal
Documentación necesaria:

 Formulario de envío de muestras: en este formulario debe

constar

a) La investigación solicitada
b) Antecedentes y datos de interés sobre la causa
c) Causa de los hechos, lugar, fecha instrumento utilizado en
la agresión, si hay cadaver: antigüedad, conservación
d) Datos de la víctima:
e) Edad, sexo, grupo poblacional, existencia de lesiones,
traumatismos heridas, relación con el sospechoso
Documentación en casos de
Interés criminal

Datos del o los sospechosos:

Edad, sexo, grupo poblacional,
existencia de lesiones,
traumatismos, heridas.
Documentación Recomendable

 Informe Preliminar de autopsia

 Informe clínico
 Informe o datos de la inspección ocular
 Localización de las muestras o indicios
biológicos
 Fotografía de los indicios biológicos
 Identificación de las muestras
• Listado de los indicios Biológicos:

 Número de referencia de la muestra

 Tipo de muestra con una descripción breve

(hisopado vaginal, camisa azul )

 A quién pertenece (victima, imputado/s)

 Tipo de indicio en concreto que debe estudiarse

(semen, sangre, saliva etc)
Cadena de custodia:

 Nombre o identificación y firma de las

personas responsables de la recogida de
muestras

 Fecha y hora de la toma de muestras

 Condiciones de almacenaje de las muestras

hasta el envío al Laboratorio
 De la correcta recolección de las
muestras y de la elaboración del
Documento de cadena de custodia

Este es el principio de la Prueba

Forense
 AGRESIONES SEXUALES
Documentación requerida
 Datos de la víctima: Edad, sexo, grupo poblacional,
relaciones sexuales próximas a la agresión, uso de
productos vaginales, datos del reconocimiento
ginecologico
 Datos de la agresión: lugar de los hechos, fecha y
hora de los hechos, penetración (vaginal, anal y/o
bucal
 Relación de parentesco víctima-agresor
 Si hubo uso de preservativos
 TOMA DE INDICIOS BIOLOGICOS EN EL
CUERPO DE LA VICTIMA

• Manchas de sangre, semen u otros fluídos

biológicos
• Saliva en marcas de mordeduras
• Uñas
• Pelos dubitados
Manchas de sangre, semen u otros fluídos
biológicos
Tomar la mancha con un hisopo estéril ligeramente mojado
en agua destilada. Limpiar toda el área presionando
suavemente y si es posible con un solo hisopo
Toma de indicios Biológicos

 2 tomas bucales: con hisopo estéril

 Se buscarán manchas de semen o saliva así como
posibles mordeduras
 Peinado de vello púbico
 2 tomas cervicales, 2 tomas vaginales, y 1 toma de
genitales externos
 Lavado vaginal: Luego del hisopado se utilizarán 10 ml
de suero fisiológico estéril que se recoge en un frasco
plástico
Toma de indicios Biológicos
 2 tomas anales y toma del margen anal:
mediante hisopos estériles

 Las ropas vestidas por la víctima en el

momento de la agresión: debe
envolverse por separado en papel

 Recogida de muestras indubitadas:

 Muestras indubitadas de la víctima
 Muestras indubitadas del sospechoso
 Saliva en marcas de
mordeduras
Tomar la mancha con un hisopo estéril ligeramente mojado
en agua destilada. Limpiar de forma circular la marca
dejada por los dientes y toda el área interior que delimita.

Uñas y Pelos Dubitados

Uñas: primero tomar con una pinza todo indicio que se pueda
visualizar y guardarlo en frasco estéril luego cortar las uñas y
almacenarlas en otro frasco estéril

Pelos: deben ser tomados con una pinza colocados sobre

papel pequeño y luego en un sobre de papel
SISTEMAS DE EMPAQUETADO
Y PRESERVACIÓN DE
MUESTRAS

Identificación de las muestras

Cadena de custodia
Sistemas de empaquetado
 Sistemas de empaquetado y
preservación de muestras
Los indicios líquidos, los tejidos blandos y órganos y los indicios
húmedos
(si estos últimos no se dejan secar)
se deben mantener y enviar refrigerados

Identificación de las muestras:

El número de referencia de la muestra

Tipo de muestra
A quien pertenece y/o localización
 Sistemas de empaquetado y
preservación de muestras
o Frascos o recipientes con indicios líquidos o con órganos, tejidos
blandos

o Hisopos estériles en seco: Los hisopos serán empaquetados en

cajas de cartón pequeñas en estos recipientes los hisopos están
protegidos y se secan totalmente.
o Muestras con manchas secas: Cada muestra será colocada sobre
un papel

o Pelos dubitados: Deben ser recogidos en papeles pequeños que

serán doblados y luego introducidos en bolsas precintadas y
correctamente identificadas. Enviar al laboratorio sin refrigerar
Recepción de Muestras en el
Laboratorio

Normas de recepción de
muestras
 Normas de recepción de muestras
 Recibir las muestras y rellenar la hoja de custodia donde
debe constar

 Nombre de la persona que entrega las muestras

 Nombre de la persona que recibe las muestras
 Fecha y hora de entrega
 Empresa que realiza el transporte
 Chequear el número de referencia de cada muestra
 Comprobar que todas las muestras estén empaquetadas y que los
precintos estén integros
Conclusiones
 Es fundamental la recolección de muestras y su
almacenamiento
 Es absolutamente imprescindible que se mantega la
cadena de seguridad para todas las etapas de la pericia
 El Laboratorio que realizará la pericia deberá cumplir
con todo lo pautado: infraestructura, tecnología y
materiales necesarios para la pericia.
 Etapa Analítica
Las Muestras en poder del
Laboratorio pericial
• A.D.N: Acido desoxirribonucleico.
• Genes: Son tramos funcionales del ADN.
• Locus: posición de un gen sobre un cromosoma (plural Loci).
• Alelos: formas alternativas o variantes de un locus.
• Homocigota: los dos alelos (materno y paterno ) son iguales.
• Heterocigota: los dos alelos (materno y paterno ) son distintos.
• Polimorfismo genético: variabilidad entre personas, es decir
múltiples alelos para un mismo locus en distintas personas.
Sources of Biological Evidence
Blood
Semen
Saliva
Urine
Hair
Teeth
Bone
Tissue
 Cantidad de ADN obtenido
Tipo de muestra ADN esperado
 Sangre total 20-40 μg/ml

 Semen 150-450 μg/ml (1-3 pg/cel.)

 Pelo con bulbo 1-750 ng/bulbo

 Saliva 1-10 μg/ml

 Orina 1-20 ng/ml

 Hígado 15 μg/mg

 Músculo-Piel 3 μg/mg

 Huesos 3-10 ng/mg

Muestras en soportes no
absorbentes
 Elección de la técnica de
extracción de ADN
• Extracción con solventes Organicos:
sobre todo en muestras con escasa cantidad de
ADN y sobre todo si ellas proceden de material
graso.
• Extracción Diferencial: para muestras
procedentes de una violación (masculina-
femenina) separa ambos componentes
 Elección de la técnica de
extracción de ADN cont.
• Pelo: es de difícil extracción la melanina
hidrosoluble forma un complejo con la
enzima polimerasa inhibiendo la PCR

• Uñas: para encontrar material procedente

de otro individuo hace falta una presion de
1.2 gr que rara vez se logra con un
rasguño.
REAL
TIME
 Se Extraen dos
fracciones de
cerdas en dos
recipientes
distintos.

Se
recolecto
en bolsas
tipo
Ziploc
 Se corta de la Prenda usada
una fracción que visualmente
presente zonas de roce o
manchas

Se puede fraccionar esa región en

dos o mas tubos distintos
 Mancha ya
recortada

FTA cards. Se
recorta o con Punch
o con bisturí una
fracción de la
mancha
Ropa intima femenina
recortada
Media parte posterior
del talón (se saca una
parte del género y se
corta y fracciona en
varios eppendorf)
HISTOCOMPATIBILIDAD
• Evolucion técnica
Biologia Molecular
Serologia
2.- ESTUDIO DE ANTIGENOS DE HISTOCOMPATIBILIDAD

LOCUS Titular Padre Alegado Abuela Materna Alegada (fallecida)

LOCI
FENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO
GENOTIPO MAS ROBABLE

A03011-05 A03011-05 - B4101/02/03 A11011-03/05/06 A11011-03/05/06 - A03011-05 A11011-03/05/06 - B3501-04/06-

Clase I A11011-03/05/06 A11011-03/05/06 A31012-04 B07021/022/023/03-06/07-10/15/17 A11011-03/05/06 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/
A31012-04 -
ABC B4101/02/03 B5801-04/05 B07021/022/023/03-06/07- B5801-04/05
B07021/022/023/03-06/07- 29/30/33
B5801-04/05 ó 10/15/17 ó 10/15/-17 A03011-05 -
A03011-05 - B5801-04/05 B5801-04/05 A11011-03/05/06 – B3501-04/06- B07021/022/023/03-06/07-
A11011-03/05/06 - B5801-04/05 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/ 10/15/-17
B4101/02/03 A31012-04 29/30/33
B07021/022/023/03-06/07-10/15/17

LOCUS Tío Materno Alegado Tía Materna Alegada 1 Tía Materna Alegada 2
LOCI
FENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO MAS
PROBABLE

A3, A11; A3-B41 / A11-B35 A03011-05 A03011-05 - B4101/02/03 A11011-03/05/06 A11011-03/05/06 - B3501-04/06-
Clase I B35, B41 B07021/022/023/ 03-06/07- A03011-05 - A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/
ABC 10/15-17 B07021/022/023/03-06/07- B3501-04/06- 29/30/33
B4101/02/03 10/15-17 092/11/15/17/18/20/21/23/24/27/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14
29/30/33 - B3801-022/04
B3801-022/04

LOCUS Tía Abuela Paterna – Materna Alegada 1 Tía Abuela Paterna – Materna Alegada 2 Tía Abuela Paterna – Materna Alegada 3
LOCI
FENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO MAS
PROBABLE

A03011-05 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/ A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14

Clase I A2601/02/04/05/08/09/11N/ – B3801-022/04 14 14 - B1501101/01102N/013/04- B1501101/01102N/013/04- - B3801-022/04
ABC 12/14 A03011-05 – B1501101/01102N/013/04- 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/14
B3801-022/04 B4101/02/03 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50 A2601/02/04/05/08/09/11N/12/ B3801-022/04 - B1501101/01102N/013/04-
B4101/02/03 B3801-022/04 14 - B3801-022/04 07/20/25-27/28/32-35/38-40/50
 MARCADORES GENETICOS

1.-ESTUDIO DE ANTIGENOS ERITROCITARIOS

Titular Padre Alegado Abuela Materna Alegada (fallecida)

SISTEMA
GENOTIPO MAS GENOTIPO MAS
FENOTIPO PROBABLE
FENOTIPO GENOTIPO MAS PROBABLE FENOTIPO
PROBABLE

ABO O --- O --- O ---

Rh / Hr CDce CDe/cde R1/r CDe CDe / CDe R1 / R1 CDEce CDE/cde Rz / r

MNSs MSs MS / Ms Ms Ms / Ms MS MS / MS
P P1 --- P1 --- P1 ---

KELL CELLANO K k K/k k k/k k k/k

KIDD Jk (a-b+) Jkb / Jkb Jk (a-b+) Jkb / Jkb Jk (a-b+) Jkb / Jkb
DUFFY Fy (a-b+) Fyb / Fyb Fy (a+b+) Fya / Fyb Fy (a-b+) Fyb / Fyb
Tío Materno Alegado Tía Materna Alegada 1 Tía Materna Alegada 2
SISTEMA
GENOTIPO MAS GENOTIPO MAS
FENOTIPO PROBABLE
FENOTIPO GENOTIPO MAS PROBABLE FENOTIPO
PROBABLE

ABO A2 --- B --- A2

Rh / Hr CDEc CDE/cDE Rz/R2 CDEce CDE / cde Rz / r ce cde/cde r / r

MNSs MSs MS / Ms --- --- MSs MS / Ms

P P1 --- P1 P1
KELL CELLANO Kk K/k Kk K/k Kk K/k

KIDD Jk (a+b+) Jka / Jkb Jk (a+b+) Jka / Jkb Jk (a+b+) Jka / Jkb
DUFFY Fy (a-b+) Fyb / Fyb Fy (a-b+) Fyb / Fyb Fy (a-b+) Fyb / Fyb
Tía Abuela Paterna – Materna Tía Abuela Paterna – Materna Alegada
Tía Abuela Paterna – Materna Alegada 1
SISTEMA Alegada 2 3
GENOTIPO MAS GENOTIPO MAS
FENOTIPO FENOTIPO GENOTIPO MAS PROBABLE FENOTIPO
PROBABLE PROBABLE

ABO --- --- --- --- --- ---

Rh / Hr --- --- --- --- --- ---

MNSs --- --- --- --- --- ---

P --- --- --- --- --- ---

KELL CELLANO --- --- --- --- --- ---

KIDD --- --- --- --- --- ---

DUFFY --- --- --- --- --- ---

 1 2
1) abuelo paterno alegado.
A2 B48 A25 B44 2) abuela paterna alegada.
A29 B44 A31 B51 3) abuelo materno alegado.
DR8 DR7 4) abuela materna alegado.
DRX DR8 5) padre alegado desaparecido. Información genética deducida.
DQ4 / DQX DQ2/ DQ3
6) madre alegada desaparecida. Información genética deducida.
0 0
cDE / cDE R2/R2 cDE/cDE R2/R2 7) tía paterna alegada.
P1 P1 8) tía paterna alegada.
Ns/Ns Ms/Ms 9) tía paterna alegada.
k/k k/k 10) tía materna alegada.
JKb/JKb Jkb/Jkb
11) nieta alegada.
Fyb/Fyb Fya/Fyb

7 8 9 5

A29 B44 ó 11
A29 B44 A29 B44 A2 B48
A25 B44
A31 B51 A31 B51 A31 B51
A2 B48 ó A2 B48
DR8
A25 B44 A2 B35
0 0 DR8
cDE/cDE R2/R2 A29 B44 ó DR8
cDE/cDE R2/R2 DQ4
P1 A31 B51 DR4
P1 DQ3
Ms/Ns A2 B48 ó DQ4
Ms/Ns
k/k A31 B51 DQ3
k/k 0
Jkb/Jkb DR8 ó
Jkb/Jkb cDE/cDE R2/R2
Fyb/Fyb DR7 0
Fya/Fyb P1
DR8 ó CDE/CDE R1/R2
Ms/Ns
DR8 Ns/Ns
k/k
DRX ó k/k
Jkb/Jkb
DR7 Jka/Jkb
Fya/Fyb
DRX Fya/Fya
DR8
DQ4
DQ2 ó
DQ4
DQ3 ó
DQX
DQ2 ó
DQX
DQ3 ó
1) abuelo paterno alegado. 3 4
2) abuela paterna alegada.
3) abuelo materno alegado. A1 B37 A2 B35
4) abuela materna alegado. A2 B7 A31 B51
5) padre alegado desaparecido. Información genética deducida. DR15 DR4
6) madre alegada desaparecida. Información genética deducida. DR4 DR8
7) tía paterna alegada. DQ3/DQ6 DQ3 / DQ3
8) tía paterna alegada. A1
9) tía paterna alegada. Cde/cDE R0/R2 0
10) tía materna alegada. P1 CDe/cde R1/r
Ns/Ns Ms/Ns
11) nieta alegada. k/k k/k
Jka/Jkb Jka/Jkb
Fya/Fyb Fya/Fya

6 10

11 A1 B37 ó A1 B37
A31 B51 A31 B51
A1 B37 ó DR 15
A2 B48 A2 B35 DR8
A2 B35 A2 B7 ó DQ3 / DQ6
DR8 A31 B51 A1
DR4 A2 B7 ó cDE/cDE R0/r
DQ4 A2 B35 Ns/Ns
DQ3 DR15 ó k/k
0 DR8 Jka/Jkb
CDE/CDE R1/R2 DR15 ó Fya/Fya
Ns/Ns DR4
k/k DR4
Jka/Jkb DR8 ó
Fya/Fya DR4
DR4
DQ3 ó
DQ3
DQ3
DQ6
Marcadores VNTRs y
STRs
Herencia Mendeliana o al Azar
LEYES DE MENDEL
 Primera ley, o
Principio de la
segregación.

 Segunda ley, o
Principio de la
transmisión
independiente.
Gregor Johann
Mendel
 MADRE
P A a
A
D B AB aB
R
E
b Ab ab
STRs AUTOSOMICOS
EN ESTUDIOS DE
FILIACIÓN
 ESTUDIOS DE ADN
APLICACIÓN FORENSE

 En procesos de Filiación: Paternidad,

Maternidad y otros.

 En Criminalística.

 En identificación de cadáveres y/o restos

cadavéricos.
EVOLUCION HISTORICA DE LOS ESTUDIOS DE
FILIACION

• 1900-1950:
Grupos sanguíneos o Antígenos Eritrocitarios (ABO, Rh)
• 1947-1960:
Proteínas Plasmáticas (Haptoglobina,Transferrina, Factores del Complemento,
etc).
• 1965-1980:
Enzimas Eritrocitarias (GPT, PGM, etc).
• 1980: Sist. HLA o Complejo Mayor de Histocompatibilidad
• 1985: Polimorfismos del ADN.
Huella Digital Genética o Fingerprint
• STRs
 REPRESENTACION GRAFICA DE LOS STRs

•Unidades de repetición de 2 a 7 pb.

•Altamente polimórficas.
•Pueden ser analizados por técnicas de amplificación (PCR).
• Escasa muestra
• Muestras parcialmente degradadas
• PCR Multiplex
Grupo Español Portugués de la ISFG
http://www.isfg.org/
STRs AUTOSOMICOS
Requisitos para ser aplicados en Genética
Forense

 Ubicación en cromosomas diferentes.

 Alta reproducibilidad en los resultados.
 Escasa o nula tendencia a producción de
artefactos ( STRs tetraméricos).
 Bajo índice de mutación.
 Rango de longitud alélica de 90-500 pb.
STRs NOMENCLATURA

Número de unidades de repetición completas.

Número de unidades de repetición completas, separación
con un punto y número de unidades de repetición
incompletas.

STRs: Número de loci

Actualmente se recomienda el estudio de por lo menos 13
loci autosómicos.
cromosoma
TERMOCICLADOR
REACCION EN CADENA DE LA
POLIMERAZA (PCR)
SECUENCIADOR AUTOMATICO ABI
3100
ABI 3100 TECNOLOGIA
 LADDER
ALELICO

ELECTROFEROGRAMA
ALELOS
INVESTIGACION DE
LA PATERNIDAD
ADN NUCLEAR
 Human Identity Testing with Multiplex STRs
AmpFlSTR® SGM Plus™ kit

DNA Size (base pairs)

D3
amelogenin D8 TH01
Two different individuals

D19 VWA D21 D16

D18 D2
FGA

probability of a random
match: ~1 in 3 trillion Results obtained in less than 5
amelogenin D3 hours with a spot of blood the
D19
size of a pinhead
D8 VWA D16
D21 D18 D2
FGA
TH01

Simultaneous Analysis of 10 STRs and Gender ID

Investigación de Paternidad : TRÍO
Padre Hijo
1 D8S1179Madre 15-15 13-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31 30-31
3 D7S820 8-11 12-12 12-12
4 CSF1PO 10-12 11-13 12-13
5 D3S1358 16-18 16-17 17-18
6 TH01 7-9 6-7 6-6
7 D13S317 10-12 10-12 10-11
8 D16S539 9-12 9-11 9-15
9 D2S1338 24-25 16-17 17-23
10 D19S433 13-13 12-13.2 12-14
11 VWA 19-19 18-18 18-18
12 TPOX 11-11 11-11 10-11
13 D18S51 13-13 13-17 13-15
14 D5S818 10-13 11-11 11-12
15 FGA 19-22 20-24 20-25
16 Amelogenina X-Y X-X X-X
Investigación de Paternidad : TRÍO
Padre Hijo
1 D8S1179Madre 15-15 13-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31 30-31
3 D7S820 8-11 12-12 12-12
4 CSF1PO 10-12 11-13 12-13
5 D3S1358 16-18 16-17 17-18
6 TH01 7-9 6-7 6-6
7 D13S317 10-12 10-12 10-11
8 D16S539 9-12 9-11 9-15
9 D2S1338 24-25 16-17 17-23
10 D19S433 13-13 12-13.2 12-14
11 VWA 19-19 18-18 18-18
12 TPOX 11-11 11-11 10-11
13 D18S51 13-13 13-17 13-15
14 D5S818 10-13 11-11 11-12
15 FGA 19-22 20-24 20-25
16 Amelogenina X-Y X-X X-X
Investigación de Paternidad : TRÍO
Padre Hijo
1 D8S1179Madre 15-15 13-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31 30-31
3 D7S820 8-11 12-12 12-12
4 CSF1PO 10-12 11-13 12-13
5 D3S1358 16-18 16-17 17-18
6 TH01 7-9 6-7 6-6
7 D13S317 10-12 10-12 10-11
8 D16S539 9-12 9-11 9-15
9 D2S1338 24-25 16-17 17-23
10 D19S433 13-13 12-13.2 12-14
11 VWA 19-19 18-18 18-18
12 TPOX 11-11 11-11 10-11
13 D18S51 13-13 13-17 13-15
14 D5S818 10-13 11-11 11-12
15 FGA 19-22 20-24 20-25
16 Amelogenina X-Y X-X X-X
Investigación de Paternidad : TRÍO
Padre Hijo
1 D8S1179Madre 15-15 13-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31 30-31
3 D7S820 8-11* 12-12 12-12
4 CSF1PO 10-12* 11-13 12-13
5 D3S1358 16-18 16-17 17-18
6 TH01 7-9 6-7 6-6
7 D13S317 10-12 10-12 10-11
8 D16S539 9-12 9-11 9-15
9 D2S1338 24-25* 16-17 17-23
10 D19S433 13-13* 12-13.2 12-14
11 VWA 19-19* 18-18 18-18
12 TPOX 11-11 11-11 10-11
13 D18S51 13-13* 13-17 13-15
14 D5S818 10-13* 11-11 11-12
15 FGA 19-22* 20-24 20-25
16 Amelogenina X-Y X-X X-X
 CONCLUSIONES
 El
Hijo comparte con su madre biológica el 50%
de los marcadores STRs estudiados.

 El
Padre Alegado NO comparte 8 de los 15
marcadores STRs autosómicos investigados.

 ElPadre Alegado queda excluído de ser el padre

biológico del Hijo.
Investigación de Paternidad : Dúo
Padre Hijo
1 D8S1179 15-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31
3 D7S820 8-11 12-12
4 CSF1PO 10-12 11-13
5 D3S1358 16-18 16-17
6 TH01 7-9 6-7
7 D13S317 10-12 10-12
8 D16S539 9-12 9-11
9 D2S1338 24-25 16-17
10 D19S433 13-13 12-13.2
11 VWA 19-19 18-18
12 TPOX 11-11 11-11
13 D18S51 13-13 13-17
14 D5S818 10-13 11-11
15 FGA 19-22 20-24
16 Amelogenina X-Y X-X
Investigación de Paternidad : Dúo
Padre Hijo
1 D8S1179 15-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31
3 D7S820 8-11* 12-12
4 CSF1PO 10-12* 11-13
5 D3S1358 16-18 16-17
6 TH01 7-9 6-7
7 D13S317 10-12 10-12
8 D16S539 9-12 9-11
9 D2S1338 24-25* 16-17
10 D19S433 13-13* 12-13.2
11 VWA 19-19* 18-18
12 TPOX 11-11 11-11
13 D18S51 13-13 13-17
14 D5S818 10-13* 11-11
15 FGA 19-22* 20-24
16 Amelogenina X-Y X-X
 CONCLUSIONES
 Debidoa que se carece del perfil genético de la madre
NO es posible definir en el Hijo el “haplotipo materno”.
En consecuencia, tampoco es posible definir los “genes
obligados paternos”.

 El
Padre Alegado NO comparte 7 de los 15 marcadores
STRs autosómicos investigados.

 ElPadre Alegado queda excluído de ser el padre

biológico del Hijo.
 Padre Hijo Madre
1 D8S1179 15-15 13-15 13-15
2 D21S11 28-30 30-31 30-31
3 D7S820 8-11 12-12 12-12
4 CSF1PO 10-12 11-13 12-13
5 D3S1358 16-18 16-17 17-18
6 TH01 7-9 6-7 6-6
7 D13S317 10-12 10-12 10-11
8 D16S539 9-12 9-11 9-15
9 D2S1338 24-25 16-17 17-23
10 D19S433 13-13 12-13.2 12-14
11 VWA 19-19 18-18 18-18
12 TPOX 11-11 11-11 10-11
13 D18S51 13-13 13-17 13-15
14 D5S818 10-13 11-11 11-12
15 FGA 19-22 20-24 20-25
16 Amelogenina X-Y X-X X-X
 Padre Hijo Madre
1 D8S1179 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 9-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 Padre Hijo
1 D8S1179Madre 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 9-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 Padre Hijo
Madre
1 D8S1179 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 9-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 Padre Hijo
1 D8S1179Madre 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 9-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 CONCLUSIONES
 El Hijo comparte con su madre biológica el 50%
de los marcadores STRs estudiados, quedando
definidos los “genes obligados paternos”.
 El Padre Alegado comparte con el Hijo Alegado el
50 % restante de los marcadores STRs
autosómicos investigados. Por lo tanto no se
puede excluir el alegado vínculo biológico.
 Se procede al cálculo matemático-estadístico del
Índice y Probabilidad de Paternidad.
INCOSISTENCIAS
GENÉTICAS EN STRs
DEFINICIÓN
Una mutación es cualquier cambio que se
produce en la secuencia de nucleótidos del
ADN. Dicho cambio es estable y heredable
en el material genético.

La mutación es la fuente primaria de

variabilidad genética
MUTACIONES
Es la frecuencia con la que se observa un
tipo particular de mutación en una
población de células o de individuos.
Frecuencia de
mutación=2/8=0,
25.
 Están diferenciadas en maternas y paternas.
 Se describen para cada locus, pero no para cada alelo.
 Se expresan como un cociente o en %
 Tasas de mutación entre 5 x 10-4 y 7 x 10-3
Un laboratorio que efectúe 100 pruebas de paternidad al año con 15
marcadores, puede observar entre 2 y 20 mutaciones cada año.
 Padre Hijo Madre
1 D8S1179 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 10-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 Padre Hijo Madre
1 D8S1179 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 10-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 Padre Hijo Madre
1 D8S1179 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 10-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-17 17-17 17-17
12 TPOX 11-11 8-11 8-11
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 RECOMENDACIONES DE ISFG

 Calcular los IP de cada locus y el IPA y la PPA, sin incluir el

locus con la inconsistencia genética.
 Calcular el IP del D13S317, considerando la tasa de
mutación μ correspondiente a ese locus.
 Calcular el IPA y la PPA incluyendo también al D13S317.

Como las tasas de mutación tienen valores muy bajos, tanto el IPA
como la PPA con el D13S317 descienden significativamente.
 En el informe deben constar
 IPA y PPA sin mutación.
 IPA y PPA con mutación.

 Para
confirmar que se trata de una
mutación se debería SECUENCIAR.
 Son producto de una limitación técnica.
 Se evidencian como Falsos Homocigotas
 Principal causa: modificación de la zona de
anillamiento del primer, que impide a éste unirse
durante la reacción de PCR, por lo que dicho alelo no
se amplificará.
 En casos excepcionales se visualiza la no
amplificación de ningún alelo, si ocurre en ambos
cromosomas.
EQUIPO EQUIPO
COMERCIAL COMERCIAL
POWERPLEX IDENTIFILER
 Padre Hijo Madre
1 D8S1179 13-13 13-16 13-16
2 D21S11 30.2-28 30-30.2 30-30
3 D7S820 8-12 8-12 10-12
4 CSF1PO 11-13 12-13 11-12
5 D3S1358 18-18 18-18 16-18
6 TH01 7-9.3 9.3-9.3 7-9.3
7 D13S317 9-11 8-9 8-12
8 D16S539 9-11 11-11 10-11
9 D2S1338 19-20 17-20 17-25
10 D19S433 12-16 12-14 13-14
11 VWA 16-16 17-17 17-18 →¿Mutación o
12 TPOX 11-11 8-11 8-11 alelo nulo?
13 D18S51 12-15 13-15 13-13
14 D5S818 11-12 12-13 11-13
15 FGA 19-25 24-25 21-24
16 Amelogenina X-Y X-Y X-X
 Cálculo del IPA y PPA sin el locus que presenta la inconsistencia.

 Cálculo del IPA y PPA considerando al vWA como posible mutación.

 Cálculo del IPA y PPA considerando al vWA como posible alelo nulo.

 La única forma de confirmar la inconsistencia es por SECUENCIACIÓN.

STRs de cromosomas
sexuales
Aplicaciones Forenses
STRs del cromosoma X

Aplicaciones Forenses
Características del Cromosoma X
 El cromosoma X fue descubierto por Barr y Bertram
en 1949.
 Se cree que, al igual que el cromosoma Y,
evolutivamente deriva de los cromosomas
autosómicos.
 Corresponde a un 5% del genoma humano.
 Es pobre en genes.
 Se asocia a ciertas enfermedades genéticas.
Mujeres → Homocigotas Hombres → Hemicigotas.
 Herencia del Cromosoma X

U
n padre transmite su único cromosoma X a todas
sus hijas mujeres.
Importancia en Genética
Forense

odas las hijas mujeres de un

mismo padre tienen el mismo
cromosoma X
 Utilidad de los STRs del Cromosoma X en
aplicaciones forenses

 Casos de Paternidad en ausencia del Padre,

donde la titular es una mujer.
Entre una hija legal y una hija alegada.
Entre una abuela paterna y una nieta alegada.
 Estudio de STRs del Cromosoma X
 Los STRs del Cromosoma X son los marcadores más
nuevos, con respecto a los otros STRs de utilidad en
Genética Forense.

 No hay disponibilidad de equipos comerciales por el

momento.

 Elaboración de bases de datos poblacionales a través

de trabajos de cooperación entre laboratorios de
distintos países.
STRs del Cromosoma X incluidos en el estudio

 DXS7423
 DXS6809
 DXS7132
 DXS9902
 DXS6789
Ejemplo de estudio de STRs - X

Madre – Hija alegada – Padre Alegado

 Perfiles genéticos:
MARCADOR PADRE TITULAR MADRE
ALEGADO
DXS8378 11 11-12 10-12
DXS9898 12 12-12 12-12
DXS7133 9 9-10 9-10
GATA31E08 10 10-11 11-11
GATA172D05 8 6-8 6-12

DXS7423 15 15-15 15-15

DXS6809 33 33-33 32-33
DXS7132 14 13-14 12-13
DXS9902 12 11-12 10-11
DXS6789 20 20-20 20-20
Definimos lo que la titular heredó de
su madre...
MARCADOR PADRE TITULAR MADRE
ALEGADO
DXS8378 11 11-12 10-12
DXS9898 12 12-12 12-12
DXS7133 9 9-10 9-10
GATA31E08 10 10-11 11-11
GATA172D05 8 6-8 6-12

DXS7423 15 15-15 15-15

DXS6809 33 33-33 32-33
DXS7132 14 13-14 12-13
DXS9902 12 11-12 10-11
DXS6789 20 20-20 20-20
Comparamos los genes obligados paternos
con el perfil genético del padre alegado...
MARCADOR PADRE TITULAR MADRE
ALEGADO
DXS8378 11 11-12 10-12
DXS9898 12 12-12 12-12
DXS7133 9 9-10 9-10
GATA31E08 10 10-11 11-11
GATA172D05 8 6-8 6-12

DXS7423 15 15-15 15-15

DXS6809 33 33-33 32-33
DXS7132 14 13-14 12-13
DXS9902 12 11-12 10-11
DXS6789 20 20-20 20-20
CONCLUSIONES:
 En caso de compartir el perfil de STRs del
cromosoma X, no puede ser excluido el alegado
vínculo biológico.
 El estudio de STRs del cromosoma X permite
excluir con certeza un vínculo biológico cuando
no se comparten los marcadores (en aquellos
vínculos que tienen una herencia obligada).
STRs del cromosoma Y
Aplicaciones Forenses
Representación gráfica del
Cromosoma Y
• Cromosoma pequeño
(2% del genoma).
• 60% de su contenido de ADN está
constituido por secuencias
repetitivas polimórficas.
• Carece de cromosoma
homólogo→haploidía parcial → falta
de recombinación durante la
meiosis, excepto PAR y PAR2.
• Todas las secuencias polimórficas
constituyen un grupo de ligamiento,
es decir que se heredan en bloque.
COMO LOS STRs DEL CROMOSOMA Y
SE HEREDAN EN BLOQUE.

AL CONJUNTO DE ESTOS
MARCADORES TIPIFICADOS EN UN
INDIVIDUO CONSTITUYE UN
HAPLOTIPO
 Importancia en Genética
Forense

odos los hijos varones de un

mismo padre tienen el mismo
haplotipo de cromosoma Y
 Herencia del Cromosoma Y

n
Utilidad de los STRs del
Cromosoma Y en aplicaciones
forenses

 Estudios antropológicos y/o evolutivos.

 Genética de poblaciones.
 Identificación humana.
 Estudios de filiación en ausencia del padre.
 Casos forenses → asaltos sexuales.
 Bases de Datos para STRs del
cromosoma Y
 En Berlín, en 1998 se crea una importante base de datos
europea.
 Disponible en Internet: http://ystr.charite.de
 Tiene 4 objetivos principales:
 Estandarizar un haplotipo común de STRs del cromosoma Y.
 Garantizar los resultados emitidos por los laboratorios
mediante controles de calidad periódicos
 Determinar la estratificación poblacional caucásica en Europa.
 Recopilar una amplia base de datos que permita la estimación
real de frecuencias haplotípicas para su aplicación en la
práctica forense.
 YHRD
(Y cromosome Haplotype Reference
Database)

• Disponible en Internet http://www.yhrd.org

• Cuenta con mas de 59.000 haplotipos distribuidos en todos los
continentes.
• Todos los laboratorios que desean contribuir con datos de sus
poblaciones deben realizar un control de calidad obligatorio
previo.
• El BNDG ha contribuido con más de 300 haplotipos.
Herencia del Cromosoma Y

El cromosoma Y se hereda por línea

 Filiación en ausencia del Padre
Caso 1
Abuelo
Paterno
Alegado

Titular
 MARCADOR TITULAR ABUELO
PATERNO
ALEGADO
1 - DYS456 16 16
2 - DYS389I 13 13
3 - DYS390 24 25
4 - DYS389 II 29 30
5 - DYS458 18 15
6 - DYS19 14 17
7 - DYS385 a/b 11-14 11-14
8 – DYS393 12 12
9 – DYS391 10 10
10- DYS439 12 11
11-DYS635 23 23
12-DYS392 13 11
13-Y GATA H4 12 12
14-DYS437 15 14
15-DYS438 12 11
16-DYS448 19 20
 MARCADOR TITULAR ABUELO
PATERNO
ALEGADO
1 - DYS456 16 16
2 - DYS389I 13 13
3 - DYS390 24 25
4 - DYS389 II 29 30
5 - DYS458 18 15
6 - DYS19 14 17
7 - DYS385 a/b 11-14 11-14
8 – DYS393 12 12
9 – DYS391 10 10
10- DYS439 12 11
11-DYS635 23 23
12-DYS392 13 11
13-Y GATA H4 12 12
14-DYS437 15 14
15-DYS438 12 11
16-DYS448 19 20
CONCLUSIONES
 La tipificación en el haplotipo del
Cromosoma Y del titular y del abuelo
paterno alegado difiere en 9 de los 16 loci
analizados.
 Por lo tanto el titular y el abuelo paterno
alegado NO presentan identidad
haplotípica, y queda excluido el vínculo
biológico por rama paterna entre ambos.
Filiación en ausencia del Padre
Caso 2

Tío
Paterno
Alegado

Titular
 MARCADOR TITULAR TIO PATERNO
ALEGADO

1 - DYS456 14 14

2 - DYS389I 13 13

3 - DYS390 24 24

4 - DYS389 II 29 29

5 - DYS458 18 18

6 - DYS19 14 14

7 - DYS385 a/b 11-14 11-14

8 – DYS393 12 12

9 – DYS391 10 10

10- DYS439 12 12

11-DYS635 23 23

12-DYS392 13 13

13-Y GATA H4 11 11

14-DYS437 15 15

15-DYS438 12 12

16-DYS448 19 19
CONCLUSIONES
1. La tipificación en el haplotipo del Cromosoma Y del titular y
del tío paterno alegado muestran identidad total en el
haplotipo investigado.
2. El haplotipo no presenta/presenta n número de ocurrencias
en la Base de Datos YHRD, para los 16 loci STRs
investigados. El tamaño de la base de datos varía según el
número de loci que se ingresan.
3. En nuestra Base de Datos de STRs del cromosoma Y el
mencionado haplotipo no presenta/presenta n número de
ocurrencias, sobre 301 haplotipos de 10 loci STRs.
CONCLUSIONES
El titular y su tío Paterno alegado presentan identidad
haplotípica del cromosoma Y y para los 16 marcadores
STRs estudiados. Por lo tanto no puede ser excluído
entre ellos el alegado vínculo biológico por rama
paterna.
 Aplicaciones de STRs
autosomicos y del
Cromosoma Y
En Muestras Complejas
¿Qué técnicas moleculares
podemos utilizar?
Ya está extraído el ADN
STRs autosómicos:
a) Identifiler
b) Minifiler
c) Strs del Cromosoma Y

Secuenciación del ADN

mitocondrial
 Perfil
genético
obtenido de
un cepillo de
dientes

Balance
perfecto
de los picos
Stutter Products
STUTTER Stutter Products

Se trata de pequeños picos que suelen ser una

unidad de repetición menos del pico principal.

Stutter Products

Allele Dropout or Null Alleles

Mutations in the
primer binding sites
may result in an
allele failing to
amplify.
 Perfil
genético
obtenido de
un hisopado
vaginal

Descontando
el patrón de la
victima
 Degraded/Trace DNA
Samples

BAJA
CONCENTRACION
DE ADN

Larger alleles “drop-out” when template DNA is low in

quantity or quality, reducing certainty of genotypes.
CONCLUSIONES
 De acuerdo a los resultados obtenidos para el locus
Amelogenina la muestra remitida e identificada como
“N4” cepillo de dientes….. Correspondería a un
individuo del sexo masculino

 No es posible excluir el alegado vínculo biológico por

rama materna paterna entre la muestra remitida e
identificada por el Juzgado interviniente como “Nº4”
cepillo de dientes color rojo marca “NN” y el Sr/ Sra.
-------- (padre alegado desaparecido)
ANALISIS DE PERFILES MEZCLA

Perfil mezcla:
procede de mas de una persona.

Se detecta por la presencia de mas de dos alelos en varios de los sistemas analizados; además los diferentes alelos que aparecen en un marcador pueden estar desbalanceados.
 Etapas en el análisis de mezclas forenses

Primero: Identificar la presencia de una mezcla y designar

los alelos sin ambigüedad.

Las mezclas se detectan por

1) Presencia de extra – bandas: descartar bandas artefactuales.
Stutter o tartamudeos
Contaminación
Amplificación inespecífica, bandas “pull-
up”, anomalías cromosómicas, etc.
2) Desbalance entre las intensidades de los alelos
Amplificación diferencial por escasa cantidad de ADN

Mutaciones en la zona de annealing del primer

Segundo: Identificar el número de personas que contribuyen a la mezcla

y su proporción relativa.

Tercero: Comparar con muestras indubitadas.

Cuarto: Valoración estadística.

DNA Mixtures
 MEZCLAS COMPLEJAS
Caso: Violación múltiple, se analizan una bombacha, un hisopada vaginal y muestras de
Sangre de la víctima y de 3 sospechosos. Se estudian 17 STRs autosómicos y 5 Y-STRs.

Muestra D3S1358 Penta E D5S818 Penta D D8S1179

Bombacha 14-15-17- 13-14-15- 11-12 9*-10- 13-14

18 19 12-16
Hisopado 14-15-(17- 12-13-14- 11-12 9-9*-10- 12-13-14
(f.espermat. 18) 15-19 12-13-16
)
víctima 15 12-15 11-12 9-13 12
Sospechoso 17-18 12-15 7-11 10-13 10-15
1
Sospechoso 17-18 13-14 11 10-12 12-13
2
Sospechoso 14-15 15-19 11-12 9*-16 14
3
 MEZCLAS COMPLEJAS

Muestra D3S1358 Penta E D5S818 Penta D D8S1179

Bombacha 14-15-17-18 13-14-15- 11-12 9*-10-12- 13-14

19 16
Hisopado 14-15-(17-18) 12-13-14- 11-12 9-9*-10- 12-13-14
(f.espermat.) 15-19 12-13-16

víctima 15 12-15 11-12 9-13 12

Sospechoso 1 17-18 12-15 7-11 10-13 10-15

Sospechoso 2 17-18 13-14 11 10-12 12-13

Sospechoso 3 14-15 15-19 11-12 9*-16 14

 CONTINUACION …

Muestra AMELG DYS19 DYS390 DY391 DYS392 DYS393

Bombacha XY 14-15 23-25 10-12 11-13 13-14
Hisopado XY 14-15 23-25 10-12 11-13 13-14
(f.espermat.)
Sospechoso 1 XY 16 23 11 12 14
Sospechoso 2 XY 14 25 12 13 13
Sospechoso 3 XY 15 23 10 11 14
 Minifiler
Muestras altamente degradadas
Conclusiones hisopado vaginal
 De acuerdo al analisis del locus genetico
amelogenina se definio un perfil mezcla de por
lo menos mas de un individuo masculino y
femenino
 Descontando el perfil genético de la victima
podemos inferir que existe mas de un individuo
de sexo masculino como posible contribuyente a
la mezcla.
 ¿Si le incorporamos el
Cromosoma Y?
• No es posible excluir a los imputados de autos
como contribuyentes de la mezcla
“HisopadoVaginal” por presentar identico
haplotipo de Cromosoma Y con los
evidenciados para la muestra mencionada
DYS393 INDIVIDUO 1
0.5 ng DNA
DYS390
DYS389-I
DYS19
DYS389-II

DYS393 INDIVIDUO AZOOSPERMICO INDIVIDUO 2

DYS19 DYS389-I

DYS390 DYS389-II

DYS393
0.5 ng DNA
DYS390
DYS393 DYS389-I
DYS19 ESPERMA CAVIDAD VAGINAL

DYS19 DYS389-I

DYS390 DYS389-II
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD

Conceptos Básicos

OBJETIVO PRINCIPAL DE LA VALORACIÓN

CÁLCULO DE LR ó IP para cada locus

 CÁLCULOS DE PATERNIDAD

Paternidades Simples

Premisas

1. Ambos progenitores no están relacionados

2. Población en Equilibrio de H-W
3. No mutaciones
4. Herencia Mendeliana
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD

Paternidades Simples

Probabilidad de transmisión de alelos de los progenitores

Individuos homocigotos: 1
Individuos heterocigotos: 0.5

Probabilidad de transmisión de alelos por un hombre al azar

Frecuencia poblacional del alelo
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD

Paternidades Simples

Identificación: Madre Alegada-Hijo-Padre Alegado

MA PA
H1: MA y PA son los padres biológicos del H

? H0: Los padre biológicos de H son dos individuos al azar

no relacionados con MA y PA

Ej:
TPOX CSF1PO
H
MA: 8,11 MA: 11,12
H: 8,9 H: 11,12
PA: 9,11 PA: 12,12
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS

Relaciones Familiares

Incesto (Vínculo biológico entre la Madre y el Padre Alegado (Hno, Padre, etc.)
M1 PA
H1: el padre alegado (PA) es el padre biológico del hijo
H0: el padre alegado (PA) NO es el padre biológico del hijo
y por lo tanto el padre biológico es otro individuo

M2
Ej:
TPOX CSF1PO
?
H: 9,11 H: 11,12
PA: 8,11 PA: 11,12

H
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS

Relaciones Familiares

Incesto

Valores del coeficiente de consanguinidad (θ )

No relación: 0
Padre/Hijo, hermanos completos: 1/4
Tío/Sobrino, medio hermanos: 1/8
Primos hermanos: 1/16
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS

Relaciones Familiares

Familiares del Padre Alegado

Situaciones en las que se piensa que el PA puede ser familiar del Padre Biológico
Distintas Hipótesis:
A) Indice de Paternidad (IP)
H1: el padre alegado (PA) es el padre biológico del hijo
H0: el padre alegado (PA) NO es el padre biológico del hijo y por lo tanto el padre
biológico es otro individuo

B) Índice Avuncular (AI)

H1: un familiar del padre alegado (PA) es el padre biológico del hijo
H0: el padre biológico es un individuo no relacionado
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS

Paternidad con Abuelos Paternos Alegados

Aba Abo

M
H1: el padre biológico de H es un hijo biológico de Aba y Abo
? H0: el padre biológico es un individuo al azar no relacionado

Ej:
2 enfoques
CSFIPO
M: 10,11
H H: 10,12
Aba: 9,10
Abo: 12,12
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS

Paternidad con Hijos del Padre Alegado

M PA Ej:
? TPOX CSF1PO
M: 8, 8 M: 10,12
H1: 8, 8 H1: 10,12
H2: 8, 8 H2: 10,12
H3: 8, 8 H3: 10,12
H1 H2 H3 T T: 8, 8 T: 10,12

H1: el padre biológico de H1, H2, H3 es el padre biológico de T

H0: el padre biológico de T es un individuo al azar no relacionado
 CÁLCULOS DE PATERNIDAD EN CASOS COMPLEJOS

Paternidad con Hermanos del Padre Alegado

Aba Abo

T1 T2 T3

H
H1: el padre biológico de H es un hermano completo de T1, T2 y T3
H0: el padre biológico de H es un individuo al azar no relacionado
 CÁLCULOS
MATEMÁTICO-ESTADÍSTICOS
EN CASOS COMPLEJOS
 CASOS COMPLEJOS
1-Parentalidad

2-Paternidad en ausencia de padre

 Reconstrucción a partir de familiares.

3-Vínculos biológicos discontinuos

4-Relación biológica
 Incesto
 Familiar del padre alegado

5-Casos de supresión de identidad

 1-PARENTALIDAD

Casos en que no puede considerarse a la

madre como indubitada. Ej:
 Cambio de bebés en maternidad
 Identificación de restos cadavéricos

Conviene testear también a ambos

padres por separado.
CÁLCULO DE PARENTALIDAD
(Padre y Madre dubitados)
 Cálculo del IP
(Padre y Madre dubitados)

Pob → A = a (frecuencia poblacional del alelo A)

Pob → B = b (frecuencia poblacional del alelo B)

2-PATERNIDAD EN AUSENCIA DE
PADRE

partir de los familiares disponibles se

reconstruye la información genética del
presunto padre. Con el perfil genético
deducido, se realiza el cálculo de
paternidad.
ESTAMOS ASUMIENDO
VINCULOS BIOLOGICOS QUE
NO TENEMOS CERTEZA QUE
SEAN REALES.
 EL UNICO DATO
INDUBITADO ES EL DE LOS
RESTOS OSEOS DEL
PADRE ALEGADO
FALLECIDO
RECONSTRUCCIÓN DE LA
INFORMACIÓN GENÉTICA
Reconstrucción a partir de los
abuelos
Ventaja:
Los abuelos tienen todos los alelos del
perfil genético del PAF.

Desventaja:
El resultado aplica a cualquier hijo de
esos abuelos.
 RECONSTRUCCIÓN DE LA
INFORMACIÓN GENÉTICA
• Otros familiares: hermanos, hijos biológicos.
• Se recomienda por lo menos 2 familiares de la misma
rama( cuantos más sean, mejor)
• Madres
Si hay pocos familiares → otros marcadores, como
STRs del cromosoma Y, ADN mitocondrial, etc
según el caso.
 3-VÍNCULOS BIOLÓGICOS
DISCONTINUOS
• Entre 2 personas:

o Hermandad
o Media hermandad
o Tío – sobrino
o Abuela – nieto
o etc
Limitación del ADN nuclear
en este tipo de pericias

Es difícil la valoración de
resultados
 4-RELACIÓN BIOLÓGICA
C
asos en que los padres alegados están
relacionados biológicamente entre ellos.

L
as relaciones familiares hacen que se
compartan alelos y como consecuencia
disminuye la probabilidad de exclusión.
• Se debe incluir en el cálculo un
Coeficiente de cosanguinidad (θ).
• Se debe calcular el Índice Avuncular
(AI).

Cálculo convencional: "padre alegado

frente a individuo no relacionado “

Cálculo en estos casos: "padre alegado

frente a familiar del padre alegado“
 asos en que padre alegado y madre del
titular están relacionados biológicamente
entre sí

Si disponemos de Madre-Padre-Hijo el cálculo se realiza como

INCESTO
en un estudio convencional, pero se observará mayor número
de marcadores homocigotas en el hijo.

Si no disponemos de la madre sí se modifican las fórmulas,

incorporando el Coeficiente de cosanguinidad (θ) a las fórmulas.
 5-CASOS DE SUPRESIÓN DE
IDENTIDAD
• En la mayoría de los casos se realiza el cálculo de
Parentalidad.
• Los perfiles genéticos de Madre y Padre alegados se
reconstruyen a partir de los familiares con que se
cuenta.
• Se recurre a programas informáticos.
• Se realizan paralelamente otros marcadores genéticos:
ADN mitocondrial, STRs del Cromosoma Y , HLA,
Antígenos Eritrocitarios.
 Programas informáticos

• Programas gratuitos
- Distribuidos por Internet
- Entregado a pedido por los autores

• Programas “caseros”
- Desarrollados en cada laboratorio

• Programas comerciales
 Objetivo de los programas
informáticos
• Base de Datos de Patrones Genéticos
• Estudios genéticos poblacionales
• Cálculos en Relaciones de Parentesco
• Cálculos en Causas de Incriminación
Programas informáticos en cálculo de
parentesco
CASOS SENCILLOS A MUY COMPLEJOS
FAMILIAS:
(Hilde-Gunn Bruu, Ingvild Dalen, Thore Egeland,Petter Mostad )
http://www.nr.no/familias

Relaciona posibles pedigrees obteniendo un valor numérico del

pedigree más probable.

• Los casos vistos anteriormente

• Casos de parentesco con presencia de familiares indirectos
CONCLUSIONES

 Es importante informar al laboratorio que realiza la pericia todas

aquellas situaciones que puedan influir en los cálculos.
 Solicitar asesoramiento acerca de qué familiares son los más
aconsejables para realizar una reconstrucción de información
genética.
 Tener en cuenta que en reconstrucciones se están asumiendo
vínculos biológicos.
 El único dato indubitado es SIEMPRE el obtenido de una muestra
directa del presunto padre.
BANCO NACIONAL DE DATOS GENETICOS

ADN MITOCONDRIAL
EN MUESTRAS
FORENSES
DNA NUCLEAR vs MITOCONDRIAL
 ADN MITOCONDRIAL
Aplicaciones en Genética
Forense
 Evidencias biológicas muy degradadas o en
pequeña cantidad (cabellos, huesos, dientes).

 Muestras sin ADN Nuclear (cabello sin bulbo).

 Asignación de vínculo biológico entre muestras

óseas recuperadas y familiares de una rama
materna.
 IC ES
E
UN D

IN U O D
UN NO
ICO A
IND O
CA VIDU

O IDU
DI N
V
I

DE

1 copia por célula Múltiples copias por célula

ADNmt: LINAJE MATERNO
Tasa de mutación del ADN mit
Factores que intervienen en los mecanismos de
mutación del ADN mit:

• Radicales libres en la mitocondria que tienen efecto

mutagénico sobre el ADN.

• No posee proteínas de protección.

• Actividad reparadora de la DNA polimerasa deficiente.

• Mayor N° de rondas de replicación que el ADN nuclear.

 mtDNA Sequence Heteroplasmy

16093 (C/T)

16086 16101

Figure 10.9, J.M. Butler (2005) Forensic DNA Typing, 2nd Edition © 2005 Elsevier Academic Press
 ¿ Cómo se analiza la secuencia obtenida?
16303 16311 16319 16327 16336

GTACATAGTACATAAAGCCATTTACCGTACATAG ANDERSON

GTACATAGCACATAAAACCATTTATCGTACATAG SEC EN ESTUDIO

SE DESCRIBEN TODAS LAS DIFERENCIAS

MUTACIONALES QUE ENCUENTRE CON RESPECTO A LA
SECUENCIA DE REFERENCIA (Sec de Anderson) Y SE
OBTIENE EL HAPLOTIPO DE LA MUESTRA EN ESTUDIO.

Ej: 16311-C, 16319-A, 16327-T

ANALISIS DE ADNmt
DE HUESOS Y
DIENTES
 ANALISIS DE ADNmt DE
HUESOS Y DIENTES

 IDENTIFICACION DE PERSONAS
 ATENTADOS
 DESASTRES EN MASA
 DESAPARICION DE PERSONAS
 FILIACION MATERNA
 ANTROPOLOGIA
mtDNA FORENSE

mtDNA PERMITIO LA
IDENTIFICACION DE:
 Czar Nicholas II (Russia),
 Rey Louis XVII (France)
 Dr. Joseph Mengele (Germany)
 Soldados de Viet Nam y Korea
 DNA sequence analysis of two hypervariable
regions of mitochondrial DNA showed identical
sequences for the three daughters and the
Tsarina, as would be expected for a maternally
inherited character. In addition, the same
sequence was found in the current Duke of
Edinbrough (Prince Phillip) who is related to the
late Tsarina through a maternal line. The same
regions of mtDNA for the Tsar had a different
sequence from the Tsarina.

Princesa Alicia

Zar Zarina

Felipe de Edimburgo
 PERFIL
PERFIL
COMPLET SIN
PARCIAL RESULTADOS
O
ANALISIS DE ADNmt
DE PELOS
 PELOS COMO “EVIDENCIA”
 ABUNDANTE: el hombre tiene más de
100.000 bulbos pilosos sólo en la
cabeza
 FACILMENTE TRANSFERIBLE: una
persona pierde un promedio de 100
pelos por día
 DURABLE: se han recuperado pelos de
momias de 2000 años
 MORFOLOGIA DEL PELO
DN
AM
PUNTA T

DNA NUCLEAR
TALLO

RAIZ
BULBO
PELOS COMO “EVIDENCIA”
 el éxito en la obtencion y analisis del dnamt no
depende solo del largo del pelo sino del
diametro del pelo
 Pelo púbico: mejores resultados
 Se puede obtener ADN aun de fragmentos de
pelo de 5 mm.
 Próximo a la raíz: más ADN
 Distal a la raíz: menos ADN
0-5
6-10 TIEMPO
11-20
SIN PERFIL
+21
PERFIL PARCIAL
PERFIL COMPLETO

TAMAÑO

1-1.9 2-2.9
cm cm
 RECOLECCION Y
CADENA DE
CUSTODIA DE LAS
EVIDENCIAS

INFORME

EVALUACION DE
LAS EVIDENCIAS

COMPARACION
EXTRACCION Y
DEL PERFIL
CUANTIFICACION
OBTENIDO CON
DEL DNA
BASES DE DATOS

COMPARACION
AMPLIFICACION POR PCR D-LOOP MtDNA
DEL GENOTIPO
SECUENCIACION
CON MUESTRAS
GENOTIPIFICACION
DE REFERENCIA
 COMPARAR LAS SECUENCIAS Q-R

Caso #1 Caso #2
Questioned GCATATTGCGCCTA GCATATTGCGCCTA
Known GCACATTACGTCTA GCATATTGCGCCTA

EXCLUSION NO EXCLUSION
CRITERIOS DE NOMENCLATURA
 Siempre se reportan “todas las diferencias” con respecto a la secuencia de
Anderson conocida como SECUENCIA DE REFERENCIA DE CAMBRIDGE.

 Cada diferencia con respecto a la secuencia de Anderson se define con un

número y una letra. Ej: 16.223-T

 Las deleciones se reportan anotando la posición donde aparece la deleción

seguida de la letra d. Ej: 88 d

 Las inserciones se reportan indicando la menor posición donde aparece

dicha inserción seguida de la expresión “.1”. Ej: 89.1-C

 Las heteroplasmias confirmadas se reportan con los 2 nucleótidos que

coexisten en la misma posición. Ej: 73 A=G , 73 A>G ó 73 A<G.
CRITERIOS DE
INCLUSION - EXCLUSION

PELO AGCTAGATCGTTATTCCGAG

VICTIMA AGCTAGATCGTTATTCCGAG

Conclusion: EL PELO PODRIA PERTENECER A LA

VICTIMA.
 Caso Ejemplo Interpretación

MATCH CRITERIA: Interpretación de resultados

Secuencias idénticas Sec 1 GTTTATGCTCCTGAAGT NO EXCLUSIÓN
Sec 2 GTTTATGCTCCTGAAGT

Una base heteroplásmica en ambas Sec 1 GTT (T/C) ATGCTCCTGAAGT

secuencias en la misma posición Sec 2 GTT (T/C) ATGCTCCTGAAGT

Una base heteroplásmica en una Sec 1 GTT (T/C) ATGCTCCTGAAGT ¿?

secuencia no observada en la otra Sec 2 GTT T ATGCTCCTGAAGT

Una base diferente con no evidencia Sec 1 GTTTATGCTCCTGAAGT

de heteroplasmia Sec 2 GTTCATGCTCCTGAAGT

Dos bases heteroplásmicas en la Sec 1 GTT (T/C) ATGCTCCTG (A/C) AGT

misma posición en ambas muestras Sec 2 GTT (T/C) ATGCTCCTG (A/C) AGT

Una base heteroplásmica en la misma

posición, una base muestra Sec 1 GTT (T/C) ATGCTCCTG (A/C) AGT
heteroplasmia en una muestra pero no Sec 2 GTT (T/C) ATGCTCCTG A AGT
en la otra, con un nucleótido en común
en cada una de ellas

Una base heteroplásmica en la misma Sec 1 GTT (T/C) ATGCTCCTGAAGT

posición, una base diferente en otra Sec 2 GTT (T/C) ATGCTCCTGTAGT
posición con no evidencia de
heteroplasmia

Dos bases diferentes sin evidencia de Sec 1 GTTTATGCTCCTGAAGT EXCLUSIÓN

heteroplasmia Sec 2 GTTCATGCTCGTGAAGT
 ¿CÓMO SE INFORMA?
 NO SE INFORMA CON UN CÁLCULO YA QUE NO EXISTEN
FRECUENCIAS DE HAPLOTIPOS DE ADN MIT.

 SE INFORMA COMO UN “PREDICADO VERBAL”.

Ej : EXCLUSIÓN

“……queda excluído el alegado vínculo biológico por

rama materna ……por diferir en sus secuencias….”

Ej : NO EXCLUSIÓN

“ ……no se puede excluir el alegado vínculo biológico

por rama materna ……por presentar identidad de
secuencia …”
 Performance of the Banco
Nacional de Datos Genéticos
in Argentina
Abovich M, Alcazar D, Arellano A, Bettelani M, Cabeller
S, Colica M, Cruz M, Echenique C, Filippini S, Fraga
M, Gillo C, Lavalle H, Gagliardi F, Garcia Abates A,
Ochoa L, Santapa O, Solimine J, Szocs A, Tombesi G,
Valente S, Rodriguez Cardozo MB*.
 Results and conclusions
People sent to BNDG by the CONADI · Ministerio de Justicia y Derechos Humanos

531

386

249

117
104
98

70
99 102
58 62
62 64
69 71
34
26 16 48 54
45
3 10 38
3 29
2 4 21

1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008

Año

Young People Family Group

 10
11
12

0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
1984

1
3
1985

0
1986

2
1987

0
1988

0
1989

0
1990
FAMILIARES

3
1991

0
1992

3
1993

1994

0
1995 1

1996 0
1

1997
2

1998
0

1999
5

2000

2001
0
2

2002
4

2003
6

2004

2005
1
5
JOVENES RESTITUIDOS A SUS GRUPOS

3
9

1
Personal del BNDG

Bioquímicos y Biólogos y médico:

M. Abovich. S. E. Filippini; M. V. Colica; Z. Acosta; M. G. Fraga; J.
Solimine; M. Abovich. C. G. Echenique
Asesor legal: H. E. Lavalle.
Técnicos
: Químicos y de Laboratorio:
S. F. Valente ; D. Alcazar; O. A. Santapá; F. Gagliardi; A. Szöcs; S.
Cabeller; Jessica Magiore, Valeria
Técnicos Administrativos:
Gastón Tombessi; A. M. Arellano; M. A. Cruz; L. M. Ochoa; C. C. I. Gillo.
Javier Arellano, Alejandro Costilla, Hugo Moundjian, Fernando Moundjian

Preparadores de Material:
N. Gomez; M. S. Ganam;; I. M. Monzón; R. R. Monzón.
Area Psicológica : Lic. M. A. Cruz

Directora del BNDG: M. Bélen Rodriguez Cardozo

 Integrantes del Banco Nacional de Datos Genéticos

D. Alcazar, Dra. Mariel Abovich, Marina Bettelani, Alejandra Cruz, Andrea

Szocs, Gastón Tombessi, Florencia Gagliardi, Claudia Guillo, Dra. Gabriela
Fraga y el Dr. Hernan Lavalle