CARRERA DE

:
MEDICINA HUMANA
CATEDRA DE:
BIOQUIMICA
Enzimas
Enzimas
Son polímeros biológicos que catalizan las
reacciones químicas que hacen posible la
vida tal como la conocemos
Actualmente hay mas de 2000 enzimas en
la célula viva y cada una de ellas se
encarga con especificidad de una reacción
química
-En 1835 la primera teoría general sobre la catálisis química publicada por J.J.
Berzelius incluía un ejemplo de lo que hoy conocemos como un enzima: la
diastasa de la malta, señalando que la hidrólisis del almidón se catalizaba más
eficazmente por ésta que por el ácido sulfúrico.
-En 1860 Louis Pasteur propuso que la fermentación del azúcar para
transformarse en alcohol era inducida por ciertos catalizadores biológicos, razón
por la cual los enzimas fueron llamados inicialmente "fermentos". Pasteur supuso
que dichos catalizadores se hallaban unidos de modo indisoluble a la estructura
de las células de la levadura por lo que no podían actuar fuera de estas.
-En 1877 se utiliza por primera vez la denominación "enzima" (etimológicamente
"en la levadura").
-En 1897 E. Büchner consiguió extraer de las células de la levadura los enzimas
que catalizan la fermentación alcohólica, demostrando que éstos pueden actuar
independientemente de la estructura celular. Este hecho permitió estudiar "in vitro"
la actividad y propiedades de los enzimas, aislarlos en estado puro y analizar su
composición.
-En 1926 J.B. Sumner aisló un enzima, la ureasa, en forma cristalina pura y
demostró que los cristales estaban formados por proteínas.
-Entre 1930 y 1936 se aislaron en forma cristalina pura diversos enzimas quedando
establecida de modo definitivo la naturaleza proteica de estos catalizadores
biológicos. Desde entonces se han identificado varios miles de enzimas diferentes,
habiéndose aislado muchos de ellos en forma cristalina.
-En el mismo período J.B.S. Haldane expuso la idea de que los enzimas establecen
3

interacciones débiles con el sustrato para distorsionarlo y catalizar así su
transformación; esta idea resultó capital para el moderno conocimiento de la acción
enzimática.
-En 1981 se descubrió que determinados tipos de RNA pueden catalizar su propia
síntesis, hecho este que obligó a revisar algunas de las ideas preexistentes acerca
de la naturaleza de los biocatalizadores.
Los enzimas actúan de acuerdo con los mismos principios generales que los demás
catalizadores: aumentan la velocidad de las reacciones químicas combinándose
transitoriamente con los reactivos de manera que estos alcanzan un estado de
transición con una energía de activación menor que el de la reacción no catalizada.
Hay que destacar sin embargo que los enzimas son mucho más eficaces que
cualquier catalizador artificial conocido. Se ha podido comprobar que los aumentos
de velocidad que producen son de entre 10 7 y 10 14 veces la velocidad de la
reacción no catalizada. La actividad molecular (número de moléculas de sustrato
transformadas por una sola molécula de enzima por minuto) de distintos enzimas
oscila entre unos pocos miles y varios millones de moléculas de sustrato por minuto.
Cabe preguntarse pues, cómo consiguen los enzimas aumentos tan espectaculares
en la velocidad de las reacciones químicas que catalizan.
Las enzimas son catalizadores eficaces y
muy específicos





Se unen por medio de tres puntos de fijación
Pueden convertir sustratos no quirales en
productos quirales

Las enzimas son proteínas conjugadas
Cofactores
a) Metales enzima asociada
Fe2+ y Fe3+ citocromo oxidasa, catalasa, peroxidasa
Cu2+ citocromo oxidasa, tirosinasa
Mg2+ hexoquinasa, glucosa 6 fosfatasa
Zn2+ anhidrasa carbonica
Mn2+ arginasa, fosfotransforasa
K+ piruvatoquinasa
Ni2+ ureasa
b) Grupos prostéticos enzimas asociadas
FAD(flavina adenina dinuoletido) deshidrogenasa succinica
PPT (pirofosfato de liamina) piruvato descarboxilasa
biotina piruvato carboxilasa
c) Coenzimas
NAD+ deshidrogenasa lactica
NADP+ glucosa 6 fosfato deshidrogenasa
Catálisis por proximidad
Catálisis acidobásica
Catálisis por tensión
Catálisis por covalente
Clasificación por el tipo de reacción
Oxidorreductasas : catalizan oxidaciones y
reducciones
Transferasas : catalizan la transferencia
de porciones
Hidrolasas : catalizan la ruptura de
enlaces químicos con la adición de
elementos de agua
Liasas : catalizan la ruptura de enlaces c-o
c-c c-n y otros
Clasificación por el tipo de reacción
Oxidorreductasas : catalizan oxidaciones y
reducciones
Transferasas : catalizan la transferencia
de porciones
Hidrolasas : catalizan la ruptura de
enlaces químicos con la adición de
elementos de agua
Liasas : catalizan la ruptura de enlaces c-o
c-c c-n y otros
Isomerasas : catalizan reacciones de
isomerización
Ligasas : catalizan reacciones que
implican la condensación de dos
moléculas
Isomerasas : catalizan reacciones de
isomerización
Ligasas : catalizan reacciones que
implican la condensación de dos
moléculas
Oxidorreductasas
Deshidrogenasas
Oxidasas

Transferasas
Quinasas
Mutasas
Transaldolasas
Trancetolasas
Transaminasas
Fosforilasas
Hidroalsas
Fosfatasa
Liasas Descarboxilasas
Isomerasas Epimerasas
Ligasas
Sintasa
Tioquinasa
E + S
E
E + P
k2
k1 k1
k4
La ecuación final conocida precisamente como la ecuación de
Michaells Menten, es la siguiente :


v = Vmax(s)/km + (s)

Donde v es la velocidad inicial de la reacción
Vmax es la velocidad máxima de la reacción
km es la constante de michaelis menten
(S) es la concentración del sustrato


Factores que modifican la velocidad de las
reacciones enzimáticas
-Efecto de la temperatura
-Efecto de concentración de hidrogenasa
-Efecto de la concentración de la enzima
-Efecto de la concentración de sustrato

Inhibición enzimática
Compuestos que al ser añadidos al medio
donde esta actuando la enzima,
determinan una menor actividad de la
misma

- Inhibidores reversibles
- Inhibidores irreversibles
Inhibición competitiva :
Cuando el inhibidor se une reversiblemente
al mismo sito que normalmente ocupa el
sustrato
Inhibidor no competitiva
En este caso el inhibidor se une a la enzima
en un lugar diferente que el destinado a
unirse con el sustrato
Aspartato aminotransferasa (AST/GOT)

•Valores normales: < 40U/ml
•Aumento importante: Infarto e miocardio, hepatitis,
traumatismos
•Aumento moderado: cirrosis, mononucleosis, ictericia,
hemólisis

 también llamada aspartato transaminasa (AST)
Se encuentran cantidades elevadas de esta enzima en el suero
en casos de infarto agudo de miocardio, hepatopatía aguda,
miopatías, por el empleo de determinados fármacos y en
cualquier enfermedad o trastorno en el cual resulten seriamente
dañadas las células.
Alanina aminotransferasa (ALT/GPT)
•Valores normales: < 50 U/ml
•Aumento importante: Shock, hepatitis
•Aumento moderado: cirrosis, mononucleosis, ictericia.

 anteriormente conocida como transaminasa glutámico-pirúvica
(GPT)
Como es una aminotransferasa más específicamente
hepática que la aspartato aminotransferasa (AST), aparece
más elevada en las enfermedades hepáticas que en otras,
por eso el cociente ALT/AST (o GPT/GOT) será mayor de 1
en ciertas enfermedades hepáticas como la hepatitis vírica.
Al contrario aparece menor de 1 en enfermedades crónicas
como la cirrosis hepática, enfermedad hepática alcohólica,
congestión hepática o tumores hepáticos.

α-amilasa:

• Valores normales: <50U/ml
•Aumento importante: pancreatitis aguda y crónica, cáncer de páncreas.
•Aumento moderado: parotiditis, algunos carcinomas, procesos
parapancreáticos
(gastritis, úlcera duodenal, peritonitis, obstrucción intestinal.
 La amilasa, denominada también sacarasa o ptialina,
Es un enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción
de hidrólisis de los enlaces 1-4 del componente α-Amilasa al digerir
el glucógeno y el almidón para formar azúcares simples, se produce
principalmente en las glándulas salivales (sobre todo en las
glándulas parótidas) y en el páncreas. Tiene actividad enzimática a
un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la
pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado
su nivel en sangre (amilasemia)
 Fue la primera enzima en ser identificada y aislada por
Anselme Payen en 1833, quien la bautizó en un principio
con el nombre de "diastasa«.
Creatín fosfoquinasa (CPK)
•Valores normales: < 160U/ml en varones y <130U/ml en
mujeres
•Aumento importante: Infarto de miocardio (isoenzima CPK-1)
•Aumento moderado: miopatías, distrofia muscular, accidente
cerebro-vascular.

La creatinafosfoquinasa (CPK), ahora es más comúnmente conocida
como la Creatinkinasa (CK), es un enzima autilizado exclusivamente
por las células musculares para permitir el funcionamiento de los
músculos. La concentración de CPK es normalmente muy baja en la
sangre y su presencia en cantidad anormal es indicativa de
destrucción (lisis) de las células musculares. Este incremento se
observa en los casos de rabdomiolisis, destrucción a nivel de los
músculos de control voluntario, pero también en los casos de infarto de
miocardio. Las principales formas de CPK son la CPK-MB o (CK-MB ),
destinadas a las células cardíacas, la CPK-MM o (CK-MM ) destinadas
a las células musculares y la CPK-BB o (CK-BB) destinada a las
células del cerebro .
Fosfatasa ácida (ACP)
• Valores normales: < 2 U/ml
• Aumento importante: hipertrofia o cáncer de próstata (isoenzima
prostático),
hiperparatiroidismo, Hodkin, enf. Paget
• Aumento moderado: enf. Gaucher, insuficiencia renal aguda,
hepatitis, ictericia obstructiva.
Las fosfatasas ácidas se encuentran presentes en casi todos los
tejidos del organismo, siendo particularmente altas sus cantidades
en próstata, estómago, hígado, músculo, bazo, eritrocitos y
plaquetas.
Se ha visto que en individuos con carcinoma de próstata, se produce
una elevación en los niveles de la enzima en suero, como
consecuencia del aumento de isoenzima prostática. Cuando no se
ha producido metástasis y el tumor se encuentra circuns-cripto a la
glándula, el incremento será pequeño o nulo. En cambio, éste será
importante cuando existe compromiso de otros tejidos,
especialmente, el óseo.
En principio, se pensó que la fracción tartrato lábil era específica de
próstata. Hoy se sabe que existen fosfatasas ácidas tartrato lábiles
de origen no prostático.
Fosfatasa alcalina (ALP)

• Valores normales: 85-190U/ml en el adulto. Hasta 500U/ml en
niños en desarrollo
• Aumento importante: ictericia obstructiva, colelitiasis, neoplasia
de vías biliares, cirrosis, hepatomas
• Aumento moderado: neoplasias óseas osteogénicas,
osteomalacia, enf. Paget, hiperparatiroidismo.

 La fosfatasa alcalina recibe el nombre de orto-fosfórico-monoéster
hidrolasa.
 Las causas de un aumento de FAL:
Enfermedad ósea de Paget, obstrucciones hepáticas, hepatitis,
hepatoxicidad por medicamentos y osteomalacia.
 Las causas de una disminución de FAL: Cretinismo y déficit de
vitamina C.
Los niveles de la fosfatasa alcalina superiores a los normales
pueden deberse a:
• Anemia
• Obstrucción biliar
• Enfermedad ósea
• Consolidación de una fractura
• Hepatitis
• Hiperparatiroidismo
• Leucemia
• Enfermedad hepática
• Cánceres óseos osteoblásticos
• Osteomalacia
• Enfermedad de Paget
• Raquitismo
Gamaglutamil transpeptidasa (GGT)
•Valores normales: < 35U/ml en varones y <25U/ml en mujeres
•Aumento importante: Hepatitis vírica, obstrucción biliar,
metástasis hepáticas, enf. alcohólica
•Aumento moderado: infecciones que afectan al hígado
(citomegalovirus, mononucleosis infecciosa)
La GGT está presente en las membranas celulares de muchos
tejidos, incluyendo los riñones, el conducto biliar, páncreas, hígado,
bazo, corazón, cerebro, y las vesículas seminales como también lo
son las transaminasas y la lactatodeshidrogenasa. Está involucrada
en la transferencia de aminoácidos a través de la membrana celular
y el metabolismo de los leucotrienos. Su rol principal es en el
metabolismo del glutatión mediante la transferencia de la fracción
glutamil a una variedad de moléculas aceptoras como el agua,
algunos L-aminoácidos y péptidos, dejando el producto cisteína
para preservar la homeostasis intracelular del estrés oxidativo.
En general la reacción es:

(5-L-glutamil)-péptido + un aminoácido \rightleftharpoons
péptido + 5-L-glutamil

La GGT tiene varios usos como marcador diagnóstico en la
clínica. En general, y dependiendo del laboratorio en
cuestión, el rango normal de la enzima en la sangre va de 40
a 78U/L. Valores séricos elevados de la GGT pueden ser
encontrados en enfermedades hepáticas, del páncreas y de
la vía biliar.
Láctico deshidrogenasa (LDH)
• Valores normales: < 120-230 U/ml
• Aumento importante: infarto de miocardio (LDH1), hepatitis víricas
(LDH4, LDH5)
• Aumento moderado: hemólisis, accidente cerebro-vascular, distrofia
muscular

Corresponde a la categoría de las oxidorreductasas, dado que
cataliza una reacción redox, en la que el piruvato es reducido a lactato
gracias a la oxidación de NADH a NAD+. Dado que la enzima también
puede catalizar la oxidación del hidroxibutirato, ocasionalmente es
conocida como Hidroxibutirato Deshidrogenasa (HBD).

Participa en el metabolismo energético anaerobio, reduciendo el
piruvato (procedente de la glucólisis) para regenerar el NAD+, que en
presencia de glucosa es el sustrato limitante de la vía glucolítica.

Los niveles aumentados de LDH pueden indicar:
• Cardiopatías: infarto de miocardio, miocarditis, insuficiencia
cardíaca aguda, arritmias cardíacas.
• Enfermedades hematológicas.
• Hepatopatías: hepatitis, hepatopatía tóxica, obstrucción de
las vías biliares.
• Metástasis tumorales.
• Otros: tromboembolismo pulmonar, neumonías, insuficiencia
renal aguda, infarto renal, hipotiroidismo, ejercicio muscular
muy violento, fiebre tifoidea, tratamiento con medicamentos
hepatotóxicos, alcoholismo.

• Valores normales: <9U/ml en el adulto.
• Aumento importante: colestasis intra o extrahepática, enfermedades
hepatobiliares, cáncer hepático
• Aumento moderado.

5´ nucleotidasa (NTP)
Un aumento de 5’nucleotidasa sérica responderá al aumento de
síntesis provocada en forma específica por la colestasis, ya que esta
enzima no responde a otros mecanismos de inducción enzimática
(alcohol, drogas, etc). Se encuentran valores aumentados en
pacientes con enfermedad hepatobiliar con obstrucción biliar
intrahepática o extrahepática, carcinoma hepático y con cirrosis biliar
incipiente. Sus niveles son paralelos a los de fosfatasa alcalina, pero
no aumentan en enfermedad ósea, en el crecimiento, ni está
comprometida en el metabolismo de la mucosa intestinal.
Esta determinación, junto a la Gamma GT y la Leucinaminopeptidasa
(LAP), es de utilidad, especialmente, en los casos de
hiperfosfatasemia dudosa, con actividades de fosfatasa alcalina
(ALP) demasiado elevadas para una colestasis, evitando la
determinación adicional de las isoenzimas de ALP.