" A importncia dos exames

bioqumicos na prtica clnica"

Bioqumica
- (bios vida + kymos qumica) - uma cincia que
estuda principalmente as reaes qumicas dos processos
biolgicos que ocorrem em todos os seres vivos.
O conhecimento da bioqumica essencial
a todas as cincias da vida
Gentica
Fisiologia
Imunologia
Farmacologia e
farmcia
Toxicologia
Patologia
Microbiologia
Botnica
Zoologia
Bioqumica
Biologia
celular e
molecular
Qual a importncia da bioqumica
nos exames laboratoriais ?
A importncia dos exames
laboratoriais
- Os exames laboratoriais alm de colaborar com o
diagnstico, tambm tem um papel muito importante
dentro da medicina preventiva,os exames laboratoriais
quando bem realizados tem colaborado bastante em
vrias patologias.

- Por muitas vezes determina o caminho que o clnico
deve seguir;

Importante :

1) No entendimento e manuteno da sade;

2) No entendimento e no tratamento eficiente de
doenas.
Laboratrio de Bioqumica
Clnica
- Os exames bioqumicos so exames
complementares que devem ser analisados em
conjunto com outros exames, como o hemograma e a
urinlise, para auxiliarem o diagnstico clnico;

- Vrias determinaes bioqumicas simultneas so
importantes para a avaliao da funo de um ou
mais sistemas do organismo.

Qual a importncia dos exames
bioqumicos ?
Exames Bioqumicos

Objetivos:

- Confirmar um diagnstico;
- Proporcionar diretrizes em relao aos
cuidados com o paciente;
- Estabelecer prognstico;
- Monitorar terapias medicamentosas;
- Detectar patologias.
Os testes de bioqumica compreendem
mais de um tero de todas as
investigaes laboratoriais de um
hospital
Laboratrio Clnico
A qualidade do resultado de um exame
laboratorial comea a ser construda
no momento da coleta



- Cuidado desde o ato de coletar, passando pelo momento de
obteno da amostra e levando-se em conta o tempo e todas
as alteraes possveis que ocorrer na amostra obtida at o
momento em que ela ser processada, isto , quando o exame
for realizado.

- Utilizao de mtodos analticos adequados e aparelhagem e
instrumental propcios, recursos humanos treinado na tcnica
e nos fundamentos cientficos, segurana, informatizao,
etc...


Qualidade dos resultados
- Interferncia nas provas laboratoriais:

Caractersticas do teste metodologia adequada, fatores
tcnicos e medicamentosos
Obteno, controle e conservao da amostra
Armazenamento da amostra
Valores de referncia/ Valores desejveis/Normais
Anlises bioqumicas
Quais amostras so usadas para as
anlises bioqumicas?
Principais grupos de exames
laboratoriais bioqumicos
- Os exames laboratoriais mais comuns incluem:

1) Dosagens de eletrlitos: Sdio, potssio,bicarbonato, cloreto, clcio,
fosfato e magnsio;
2) Funo renal: uria e creatinina;
3) Funo heptica: bilirrubina e as enzimas marcadoras hepticas;
4) Glicose plasmtica;
5) Lipdios: colesterol total, triglicerdeos, lipoprotenas;
6) Exames endcrinos: hormnios da tireide, cortisol, gonadotrofinas e
esterides, hormnios hipofisrios;
7) Marcadores tumorais;
8) Frmacos (medicamentos);
9) Anlises toxicolgicas;
10) Marcadores cardacos


Coleta de sangue
1) Coleta

Coleta de Sangue
- Aspectos a serem considerados antes da coleta:

a) Uso de medicamentos (pode modificar o verdadeiro resultado de um
exame bioqumico)

- Algumas drogas elevam e outras diminuem o valor real do exame

Ex: Glicocorticides (efeito hiperglicemiante); Vitamina C (propriedade
redutora), Aspirina, Anticoncepcionais e Antibiticos alteram os valores
de alguns exames, sendo indicado, em alguns casos, a suspenso da
droga antes de coletar o material.

Lembrar de sempre informar recepo o uso de toda e qualquer
medicao que estiver utilizando.
b) Dieta prvia
A ingesto predominante de certos alimentos influi nos
resultados de exame de laboratrio
Ex: Dieta rica em protena (uria elevada)



c) Jejum
Toda vez que um exame bioqumico de sangue for solicitado
em carter de no urgncia, bastante aconselhvel e muitas
vezes indispensvel que o paciente faa jejum, por um perodo
de tempo, cerca de 12 a 14 horas, durante o qual no h, em
geral, necessidade de restrio de gua
Significa a no ingesto de alimentos ou lquidos como sucos, leite
etc. permitido a ingesto de pequena quantidade de gua como um copo
de 200 ml.


Jejum no obrigatrio
Hemograma, Bilirrubina, Coagulograma, Grupo Sanguneo + Fator Rh, TSH,
Cloro, Creatinina, YGT, Sdio, Potssio, TGO, TGP, Prolactina.


Jejum obrigatrio de 4 horas
Testosterona Total e Livre, Progesterona, T3, T4, Amilase, Uria, cido rico,
FTA-ABS (detectar sfilis - teste de absoro de anticorpos por fluorescncia
para treponema)


Jejum
Jejum obrigatrio de 8 horas

Lipase, Complemento Srico, Chagas, Mucoprotenas, FAN ( um exame
laboratorial ,que serve para diagnosticar distrbios auto-imunes como: lpus
eritematoso (LES), Esclerose sistmica progressiva (ESP), Doena mista dos
tecidos conjuntivos (DMTC) e Sndrome de Sjogren ), Rubola, Ltex ( teste
sorolgico que tem como funo identificar a presena do fator reumatide (FR)
um grupo de auto-anticorpos das classes IgG, IgM e IgA, para a identificao
prvia do processo patolgico tpico da artrite reumatide (AR), Colesterol Total,
Glicose, Frutosamina (este exame capaz de apresentar o controle glicmico das
ltimas 4 a 6 semanas).

Jejum obrigatrio de 12 horas

Colesterol HDL, LDL, VLDL, Triglicrides, Lipdios totais, Gastrina, Eletroforese
de Lipoprotena, Ltio.

d) Horrio
-Padronizao em relao ao ritmo circadiano (hormnios)
-Padronizao em relao atividade fsica



e) Estado emocional
-Estados de estresse e ansiedade podem provocar distrbios no
equilbrio cido-base, aumentando os nveis de lactato, cidos graxos livres,
curva glicmica, gasometria arterial em uma criana chorando, etc.,
conveniente estarmos relaxados nos momentos que antecedem e durante a
coleta sangunea.
f) Postura

Certas protenas e alguns elementos ligados a elas, podem sofrer variaes
quando um indivduo adota uma postura ereta aps um perodo de
reclinao, como o Cortisol, Tiroxina, Hematcrito.
g) Esforo Fsico

Exerccios intensos (subir escadas, correr, andar de bicicleta, nadar, etc.)
feitos at 2 dias antes de efetuar a coleta de sangue podem alterar
significativamente o resultado de alguns exames como: Glicose, CK, LDH,
Lactato, Creatinina, Fatores de Coagulao.
h) Fumo

O fumo pode comprometer alguns exames como Lpase, Amilase, Colesterol,
Glicose, Hemoglobina, Metahemoglobina e Carboxihemoglobina.
i) lcool

A ingesto de bebidas alcolicas at 48 horas antes de se coletar o
sangue provoca alteraes importantes nas concentraes de
diversos elementos, tais como: Colesterol, Glicose, TGO, TGP,
Fosfatase Alcalina, Triglicrides, cido rico, Gama GT, etc.
j) Relaes Sexuais

O ato sexual prejudicial ao espermograma e ao PSA, necessitando de
um perodo de abstinncia de no mnimo 3 dias (lembrar que o sexo
um esforo fsico).
2) Relativos amostra a ser obtida

2.1) Manuseio da amostra
2.2) Material para a puno (tubos a vcuo, seringas, etc...)
2.3) Recipientes para receber o sangue

a) Obteno do soro
b) Obteno do plasma ou sangue total (anticoagulantes)
Qual a diferena entre soro e
plasma?
Obteno de soro (sem
anticoagulantes)

Anticoagulantes

Alguns utilizados na clnica:
Coleta de urina
URINA
Preparao do paciente:

Uso de medicamentos;
Higiene da genitlia externa;
Coleta (EAS exame de elementos anormais e Urina de 24 horas);
Recipiente para colocao da amostra;
Identificao do material colhido;
Tempo decorrido entre a coleta e a realizao do exame, transporte,
contaminao e decomposio do material a ser analisado.

-A urina fornece informaes sobre muitas das principais funes
metablicas do organismo.


-Podem ocorrer grandes variaes na concentrao dessas substncias,
devida influncia de fatores como a ingesto alimentar, atividade fsica, o
metabolismo orgnico, a funo endcrina e at mesmo a posio do corpo.


-Outras substncias encontradas so hormnios, vitaminas e medicamentos.
Embora no fazendo parte do filtrado plasmtico original, a urina tambm
pode conter elementos como clulas, cristais, muco e bactrias. Quantidades
aumentadas destes elementos muitas vezes so indcios de doena. O
volume de urina depende da quantidade de gua excretada pelos rins.
Exame fsico
- Volume
- Cor
- Aspecto
- Reao de pH
- Densidade



Exame qumico qualitativo
Tiras reagentes
- Pesquisam: glicose, corpos cetnicos, bilirrubina,
urobilinognio, protena, hemoglobina e determinam
pH. Algumas indicam a densidade, mas com preciso
discutvel

- Deteco de hCG (gonadotropina corinica humana)

- Obs: H aparelhos computadorizados, que medem a
absorvncia nas tiras reagentes e fornecem as
diversas taxas dos elementos eliminados na urina.
Testes na urina
Protenas pelo cido sulfossaliclico;
Glicose Reativo de Benedict;
Urobilinognio Reativo de Ehrlich.
Coleta de fezes
EXAMES DE FEZES:

O exame de rotina de fezes compreende as anlises macroscpicas, microscpicas e
bioqumicas para a deteco precoce de sangramento gastrintestinal, distrbios
hepticos e dos ductos biliares e sndromes de malabsoro. De igual valor diagnstico
so a deteco e identificao das bactrias patognicas e parasitas.
A coleta de fezes tem recomendaes especiais, segundo as finalidades do exame a que
se destinam.
As principais finalidades do exame de fezes so:

O estudo das funes digestivas

A dosagem da gordura fecal

As pesquisas de sangue oculto

A pesquisa de ovos e parasitas

A coprocultura.
Clculo Renal

A anlise fsico-qumica do clculo renal de grande importncia clnica na
orientao preventiva da calculose. So avaliados os aspectos macroscpicos,
como tamanho, cor, forma, consistncia, alm da anlise bioqumica, na qual
so identificados os elementos presentes. Os elementos freqentemente
encontrados so oxalato de clcio, cido rico, fosfato amonaco magnesiano
e, mais raramente, cistina.


Anlise do lquor

Para anlise qualitativa, o lquor comumente obtido por puno lombar. Uma
amostra de lquor freqentemente obtida durante outros testes neurolgicos.

Lquido cefalorraquidiano (LCR)

Lquido aquoso, incolor e transparente encontrado nos ventrculos cerebrais, e ao
redor da medula espinhal.


Objetivos:

- Diagnstico de infeces (por exemplo, bacteriana, micobacteriana, fngica, viral,
protozoria), certas doenas inflamatrias (esclerose mltipla, sndrome de Guillain-
Barre, vasculite), hemorragia subaracnidea, carcinomatose leptomenngea.
- Administrao de medicao intratecal (corticosterides,antibiticos e agentes
quimioterpicos), contraste radiolgico ou como via para administrao de anestsicos.
- Teraputico, particularmente na hipertenso intracraniana benigna (pseudotumor
cerebri), para a reduo de presso de LCR e exames laboratoriais.
Momento de puno
Distrbios Bioqumicos e Doenas que
Alteram os Exames Bioqumicos
=
Muitas doenas ocorrem por alteraes
bioqumicas:

Exemplos:
1) Mutaes ou ausncia de protenas e enzimas;
Anemia falciforme
Agregao Protica
Mutao pontual

Ex: Anemia falciforme

mutao
Hemoglobina cadeia
b
Os genes g, d , e b so encontrados no
cromossomo 11

Normal
forma de disco
flexibilidade
facilidade de fluir atravs dos pequenos vasos
sanguineos
vida : 120 dias

Falciforme
forma de foice
rgida
com frequncia obstrue pequenos vasos
sanguineos
vida : 10 a 20 dias

Processo fisiopatolgico de falcizao

2) Metablitos formados em excesso e acumulados
no organismo:


Artrite gotosa
ictercia
cido rico
bilirrubina
3) Excesso ou deficincia de hormnios;

Sndrome de Cushing
Excesso de cortisol
P diabtico (excesso
de glicose no sangue)
Diabetes
aterosclerose
4) Deficincias no metabolismo de lipdeos
Acmulo de colesterol -
hipercolesterolemia
- Aproximadamente 400 mil pessoas morrem anualmente
no Brasil de doenas cardiovasculares; O equivale a
1.095 bitos por dia, 45 por hora e quase dois a cada
minuto;







- Nos Estados Unidos, calcula-se mais de meio milho o
nmero de bitos devido a elas, sendo a aterosclerose a
principal causa.



Quais so os responsveis pela formao da placa de
ateroma?

O que ocasiona a aterosclerose?

Por que a formao de trombos ?

Existem colesterol bom e colesterol ruim?
A formao da placa de ateroma acredita-se ser uma
resposta inflamatria crnica da parede arterial
despertada por algum tipo de agente que causa
leso na parede do vaso.


Agentes como: hiperlipedimia, vrus, toxinas,
bactrias, hipertenso, fumo e agresso
autoimune.
Aterognese
As placas de ateroma so obstrues fixas dos vasos
sanguneos que levam isquemia

Isquemia Caracterizada no somente por insuficincia de
oxignio, mas tambm pela no chegada de nutrientes as
clulas e remoo inadequada de metablitos de excreo;



Parede vascular
LDL modificada
Derivatizao - glicosilao
de apo B 100

Oxidao - degradao de
apo B 100 por superxidos
Os macrfagos captam a LDL oxidada
formando as clulas esponjosas
Macrfago
Clula Espumosa
Espcies ativas do
oxignio
Vitaminas
LDL oxidada
LDL
H
2
O
2
, etc.
E, C, A
- +
Papel da LDL na Aterosclerose

Clulas espumosas
Migrao celular
Componentes da placa
Placa de ateroma que causava a obstruo, retirada
pela cirurgia
Dosagens de lipdeos
Anlise das protenas e
lipoprotenas
1) Eletroforese

A eletroforese de protenas (EFP) no soro uma tcnica simples para separar
as protenas do soro.


Lipidograma
VLDL
VLDL
Quilomcrons
Classifica
o segundo
Frederikson
Infarto Agudo do Miocrdio (IAM)
uma sndrome clnica resultante do fluxo arterial
coronariano deficiente para uma rea do miocrdio,
ocasionando morte celular e necrose;

caracterizado por dor intensa e prolongada, por alteraes
eletrocardiogrficas agudas e por aumento da concentrao
plasmtica de certas enzimas e protenas da clulas
miocrdia, denominadas marcadores bioqumicos do IAM.
Segundo o clssico critrio da Organizao Mundial da
Sade (OMS) para diagnstico do IAM, so necessrios
dois dos trs elementos seguintes:


1. uma histria de dor no peito do tipo isqumica;

2. modificaes evolutivas nos traados eletrocardiogrficos obtidos
em sries;

3. elevao plasmtica dos marcadores cardacos.
Enzimologia

Enzimas e a Clnica Mdica
Alm do papel central das enzimas na
bioqumica, a atividade das enzimas no
sangue fornece informaes importantes
para o diagnstico de doenas.

O perfil da atividade de enzimas no soro
est relacionado processos patolgicos.


ENZIMAS
So protenas que podem proceder de diversos rgos e
espaos celulares, estando solveis ou fixadas membrana
celular, com funo de catalisar determinadas reaes.

Numerosas enzimas intra e extracelulares podem ser dosadas
em soro ou plasma humano. As enzimas intracelulares dotadas
de maior importncia prtica para o diagnstico clnico esto
presentes em quase todas as clulas corporais. Entretanto, em
cada rgo, encontram-se concentraes diferentes, ou seja,
cada rgo possui um perfil enzimtico que lhe caracterstico
e que o distingue dos outros.





No-plasma especficas

Produzidas pelas clulas durante o metabolismo celular
normal. So enzimas intracelulares, sem funo fisiolgica no
plasma.
Enzimas das glndulas endcrinas

Orgos que libertam enzimas quando lesados
Fgado
Corao Nem sempre o das enzimas quer dizer necrose celular
Pncreas
Osso
Prstata
Msculo esqueltico
Clulas sanguneas
Liberao de enzimas a partir de clulas
normais e de clulas doentes ou
expostas a um trauma
Enzimas no-plasma especficas
Atividade de enzimas intracelulares no plasma
Estado patolgico
Extravasamento
por leso
tecidual
Extravasamento
por alterao de
permeabilidade
da membrana
A determinao das atividades de muitas enzimas no plasma utilizada para
fins diagnsticos em vrias doenas.
O grau de elevao da atividade enzimtica no plasma pode auxiliar na
avaliao do prognstico do paciente.

Em termos de diagnstico deve-se considerar que:
a proporo das enzimas varia de tecido para tecido
tempo de aparecimento destas no plasma diferente
Diagnstico especfico
Valor diagnstico
limitado
Concentrao no plasma
Distribuio tecidual ampla
Distribuio tecidual
restrita a um ou a
poucos tecidos
COMO PROCEDER PARA LOCALIZAR A
LESO
Medir as enzimas rgo-especficas
Determinar as isoenzimas *
Fazer um mapa enzimtico do soro, comparando com
padres das enzimas nos diferentes rgos.
Diagnstico Especfico
Isoenzimas ou isozimas

- Enzimas intracelulares que catalisam a mesma
reao em diferentes tipos celulares;

- Enzimas formadas por vrias cadeias polipeptdicas
(subunidades) permitindo diferentes associaes.

CREATINA-FOSFOQUINASE (CK)
- Esta enzima msculo-especfica que tem a
funo de catalisar a reao pela qual o fosfato
de creatina cede sua ligao fosfrica ao ADP,
formando ATP, o qual proporciona ao msculo
energia qumica destinada a se transformar em
trabalho.



ISOENZIMAS
- A CK tambm pode decompor-se em duas subunidades B
(brain), M (muscle). para a formao de uma molcula ativa,
deve-se formar um dmero. Portanto, temos trs isoenzimas:
BB, MM e MB.
Dmero: subunidades B e M 3 isoenzimas
Composio Tipo Localizao
BB CK
1
/CPK
1
Crebro
MB CK
2
/CPK
2
Corao (15 a 40%) e msculo esqueltico (1 a 2%)
MM CK
3
/CPK
3
Msculo esqueltico e cardaco
Creatina Fosfocreatina
ATP ADP
CREATINA-FOSFOQUINASE (CK)
- A primeira a subir no plasma CK MB, que geralmente atinge
seu pico mximo 24 horas aps a dor precordial;

- Sua elevao mdia aps o infarto de 10 a 25 vezes o limite
superior da normalidade;

- Devido sua curta meia-vida, retorna ao normal aps o terceiro
dia.

Obs: A CK-MB pode no estar elevada 48 horas aps o infarto

Valor de referncia:

CK- Total - homens: varia de 15 a 160 U/L
- mulheres: varia de 15 a 90 U/L

CK-MB - abaixo de 16 U/L
VALORES ELEVADOS

- Infarto
- Distrofia muscular progressiva
- Hemofilia grave (sangramento muscular)
- AVC
- Alcoolismo crnico
Lactato Desidrogenase (LD ou LDH)
A LDH pode decompor-se em duas subunidades: H,
isoladas de tecido cardaco e M, isoladas do tecido
muscular. Para formar uma molcula cataliticamente
ativa, so necessrias quatro subunidades ligadas, um
tetrmero. Portanto, encontramos 5 isoenzimas
diferentes: HHHH, HHHM, HHMM, HMMM e MMMM.

Lactato desidrogenase - LDH

Lactato Piruvato

NADox NADred
Tetrmero: subunidades M e H 5 isoenzimas
Composio Tipo Localizao
MMMM M
4
LDH
5
Fgado e Msculo Esqueltico
MMMH M
3
H LDH
4
Fgado e Msculo Esqueltico

MMHH M
2
H
2
LDH
3
Crebro e Rim
MHHH MH
3
LDH
2
Miocrdio e Hemcias
HHHH H
4
LDH
1
Miocrdio e Hemcias
Padro normal e alterado das isoenzimas
LDH no soro humano
A: paciente com infarto do miocrdio
B: paciente normal
C: paciente com doena heptica
Isoenzimas LDH do soro humano foram separadas em acetato
de celulose, em pH 8,6 e coradas para enzima.
TGO - Transaminase glutmico oxalactica
TGP - Transaminase glutmico pirvica
Presentes nas clulas do fgado, corao, msculo
esqueltico, rim e pncreas.


Outras enzimas importantes em diagnstico
Transaminases
DOENA HEPTICA

INFARTO AGUDO DO MIOCRDIO
TGO eleva-se aps 12 horas, atingindo seu pico aps 24-36 horas.


AMINOTRANSFERASES OU
TRANSAMINASES
Constituem parte das provas de funo heptica que, na
verdade, avaliam o aspecto anatmico do fgado. Nas leses
do hepatcito acompanhadas de necrose ou simples
aumento da permeabilidade celular, a dosagem das
transaminases proporciona informaes de grande
utilidade.

As transaminases so amplamente distribudas nos tecidos:
TGP (ALT): principalmente no fgado, mas tambm em corao,
msculo e rins.
TGO (AST): corao, fgado, msculo, rins, crebro, pncreas e
testculos.
AMINOTRANSFERASES
A ALT restringe-se ao citoplasma das clulas, enquanto a AST
est presente tambm nas mitocndrias. Isto pode dar uma
idia do grau da leso.

Valores normais:
AST: 5 a 40 U/ml ou 5 a 17 U.I.
ALT: 5 a 35 U/ml ou 4 a 13 U.I.


Infarto Agudo do Miocrdio (IAM)
Infarto Agudo do Miocrdio
Protenas
- A troponina T (TnT), a troponina I (TnI) e a mioglobina so
marcadores do infarto de natureza protica que no so enzimas;


Mioglobinas
- Possui peso molecular de 17.800 dltons;

- Presente na musculatura estriada e cardaca (se localiza no
citoplasma da clula);

- Se liga ao oxignio, facilitando o seu deslocamento na clula
muscular e na reserva;

- Ela lanada no espao intersticial,e por ser pequena, se move
rapidamente caindo na circulao sistmica.


- Funciona como marcador de necrose miocrdica, devido a sua
liberao precoce na circulao, em torno de 1 a 3 horas aps o
infarto;

- Pode atingir seu pico plasmtico tambm precocemente, em
cerca de 4 a 7 horas;

- Cerca de 24 a 36 horas depois j no se encontra mais na
corrente sangunea;

- A maior desvantagem do emprego da mioglobina como marcador
do infarto a sua baixa especificidade. (vrias injrias das
musculaturas esqueltica e cardaca)

Obs: Todavia, um resultado negativo para a mioglobina aps 3 horas, de excelente
valor preditivo.

Metodologias empregadas
Mtodos que analisam o consumo de substrato
Mtodos que analisam o produto formado
Mtodos que analisam a variao de absoro da
coenzima que participa da reao enzimtica
Mtodos otimizados
Outros mtodos
Dosagem de ALT/TGP
Dosagem de Creatina
quinase
- O mundo da cincia laboratorial est
sempre em mudana e traz muitos desafios;


- Se manter atualizado sobre avanos
tecnolgicos, as novas patologias e os
padres da prtica laboratorial revisados,
a maior tarefa dos educadores e
profissionais de medicina laboratorial.
Fim