SEMINARIO 1

:
DIARREA
BIOLOGIA MOLECULAR
ALUMNA : VILLEGAS CASTRO GRACE
FACULTAD : MEDICINA HUMANA
1. Estructura y función de la mucosa intestinal. Estructura de un enterocito.
2. Componentes químicos de la membrana plasmática.
3. Tipos de transporte a través de la membrana plasmática:
1. Transporte pasivo: Difusión simple y facilitada.
2. Transporte activo: Bombas y cotransporte.
3. Tipos de transporte que se dan en la membrana apical y basolateral del
enterosito indicando cuál de ellos intervienen en la absorción y secreción
intestinal.

4. Utilizando un esquema del agente infeccioso, explique las características más
importantes de las células procariotas.
5. Diarrea: definición y tipos.
6. En relación al caso clínico, que tipo de diarrea presenta el paciente y cuál sería
el agente etiológico probable.
7. ¿Cómo es el mecanismo patogénico del agente causante de la diarrea?
8. ¿Cómo actúa la toxina a nivel de la mucosa intestinal?
Capa del intestino formada por un epitelio de una capa que recubre un tejido
conjuntivo denominada lámina propia. Es a nivel de la mucosa donde se ubican los
principales mecanismos que controlan la absorción del agua y los electrólitos.
El intestino posee una superficie de absorción que se multiplica por varios sistemas:
las válvulas conniventes, las vellosidades y las microvellosidades.
 Válvulas conniventes o pliegues del Kerkring: Repliegue transversales de la
submucosa recubierta por la muscular de la mucosa y la mucosa.
 Vellosidades intestinales: son proyecciones de la mucosa en forma de dedos de
guantes u hojas.
 Microvellosidades: (proyecciones de la glucocálix) las microvellosidades de los
enterocitos forman el borde en cepillo que está compuesto por microvellosidades
finas de aproximadamente 1mm de longitud por 0,1mm de ancho. Se estima que
cada enterocito contiene alrededor de 600 microvellosidades.

 Es aquí donde se controla la absorción del agua y los electrólitos.

 Es la mucosa la que actúa como protección contra la penetración de los agentes
patógenos (bacterias, parásitos y hongos)

 Impermeabilizar el cuerpo y poner límites o freno a la presión osmótico.

 Es la unidad fisióloga del intestino

 Facilita la absorción de iones

 Las criptas producen comúnmente estas células

 Los enterocitos tienen una membrana apical hacia el lumen intestinal y una
membrana basolateral (MBL) hacia el espacio intercelular enterocito. Los
enterocitos están unidos entre sí por los desmosomas y los espacios
intercelulares. El lado correspondiente a la serosa se encuentra cerrado por la
membrana basolateral y el que se corresponde con la mucosa, por los espacios
intercelulares. En la membrana basolateral se encuentra las enzimas del sistema
ATPasa-Na-K, que dirigen la bomba de sodio

En las membranas de las células eucariotas existen dos tipos
de lípidos: fosfolípidos y colesterol.

Los lípidos presentan carácter anfipático y, en medio acuoso,
se orientan formando micelas o bicapas lipídicas.

Los lípidos tienen posibilidad de movimiento, lo que
proporciona una cierta fluidez a la membrana.

Los lípidos se distribuyen de forma asimétrica y heterogénea,
existiendo zonas más o menos fluidas según el tipo de lípidos
que existan.



El más frecuente es el desplazamiento lateral.
Los fosfolípidos adyacentes alteran sus
posiciones unas 107 veces por segundo.
La fluidez de las membranas depende de varios factores como :
• la temperatura: la fluidez aumenta al incrementarse la temperatura.
• la naturaleza de los lípidos: la presencia de lípidos insaturados y de
cadena corta aumenta la fluidez
• la presencia de colesterol: la presencia de colesterol reduce la
fluidez y la permeabilidad de la membrana.
−Poseen movimiento de difusión lateral lo que contribuye a la fluidez de la
membrana.
−La mayoría tienen estructura globular .
−Según el lugar que ocupan en la membrana se clasifican en:
• Se hallan inmersas en las bicapas
lipídicas, atravesando totalmente la
membrana.
• Tienen carácter anfipático: tienen una
región polar o hidrófila y otra región
apolar o hidrófoba.
Se encuentran en el interior o exterior de
la bicapa. Se pueden unir a los lípidos de
la bicapa por enlaces covalentes o a las
proteínas integrales por enlaces de
hidrógeno.
Sólo poseen regiones polares
−Mayoritariamente son oligosacáridos unidos covalentemente a las proteínas y
lípidos de membrana, formando glucolípidos y glucoproteínas. Constituyen el
glucocálix o cubierta celular

−Su distribución es asimétrica ya que sólo se encuentran en la cara externa de la
membrana biológica de las células eucariotas
(*) Interviene en el reconocimiento celular

Protección de daño mecánico y químico

Relación

Permite el desplazamiento

Presenta propiedades inmunitarias

Intervienen en el reconocimiento de sustancias
MODELO DE MOSAICO FLUIDO (Singer y Nicolson, 1972)
① La membrana plasmática está formada por una bicapa de fosfolípidos con las
regiones polares orientadas hacia el medio acuoso (intra y extracelular) y las regiones
apolares enfrentadas hacia el interior de la bicapa.
② Las proteínas de membrana están dispersas e insertadas individualmente en la
bicapa fosfolipídica, con sus regiones hidrófilas (polares) expuestas al medio acuoso.
Estas proteínas pueden interaccionar entre sí y, a su vez, con los lípidos de membrana.
③ La membrana es un mosaico de moléculas de proteínas que flota en una bicapa de
fosfolípidos.
④ La membrana es un mosaico fluido: tanto las proteínas como los lípidos pueden
desplazarse lateralmente.
⑤Las membranas son estructuras asimétricas en cuanto a la distribución de sus
componentes químicos.
Fosfolípidos
Fibras de la matriz
extracelular
Glucolípidos
Oligosacáridos
Glucoproteínas
Fibras del citoesqueleto
Proteína integral
Proteínas periféricas
Colesterol
Las membranas definen los límites
externos de las células y regulan el
tráfico molecular a través de esos límites,
que permiten:

• Diferencias de concentración, de
sustancias iónicas y no iónicas
(gradientes de concentración)

• Diferencias de potencial eléctrico
(gradiente de potencial eléctrico).
TRANSPORTE A TRAVÉS DE MEMBRANAS
Se llama permeabilidad de membrana, al
grado de permitividad o restricción al
movimiento de sustancias a través de ella.


1.- PASIVOS
•Difusión simple
•Ósmosis
•Transporte pasivo
•(difusión facilitada)
2.- ACTIVOS
•Transporte activo
•Cotransportadores
•Antitransportadores
•Endocitosis:
•Exocitosis
La membrana celular es
permeable a:
– Moléculas no polares (0
2
)
– Moléculas liposolubles
(esteroides)
– Uniones covalentes polares
(C0
2
)
– H
2
0 (pequeño tamaño, sin
carga)

La membrana celular es
impermeable a:
– Moléculas polares grandes
(glucosa)
– Iónes inorgánicos con carga
(Na
+
)
La difusión es el movimiento neto de sustancia
(líquida o gaseosa) de un área de alta
concentración a una de baja
concentraciónRequiere un gradiente

Se produce movimiento hasta que el sistema
alcanza el equilibrio: elimina el gradiente de
concentración y distribuye las moléculas
uniformemente





• Movimiento neto a favor de
gradiente de concentración.

• A través de la bicapa lipídica:
sustancias muy liposolubles
Difusión facilitada:
• Interacción con moléculas
transportadoras


• Depende de:
- La magnitud del gradiente de
concentración:
• A mayor gradiente mejor será la difusión

- Permeabilidad de la membrana
• Membrana neuronas 20 veces más permeable al K
+

que al Na
+
.

- Temperatura
• A mayor Tª, mayor velocidad

- La superficie de difusión
• Microvellosidades incrementan el área de difusión.
Transporte activo primario o bomba:
• No toman importancia al gradiente

• La energía derivada del ATP directamente empuja a la sustancia para que
cruce la membrana

• El ejemplo más característico es la bomba de Na
+
/K
+

• Esta bomba actúa como una enzima que rompe la molécula de ATP y
también se llama bomba Na
+
/K
+
ATPasa.

• ‰Bomba de Na+ -K+: Transporta sodio al exterior de la célula y potasio al
interior en contra de potencial electroquímico.

• ‰Bomba de Ca2+: Transporta calcio al exterior de la célula.



• Los sistemas secundarios de transporte activo aprovechan
la energía almacenada en un gradiente iónico para
transportar un segundo soluto contra un gradiente.

• Clases de cotransporte:

• Simporte

• Antiporte
Cotransporte o simporte
Los solutos se transportan en la
misma dirección a través de la
membrana celular.
El NA
+
se mueve hacia el
interior de la célula sobre el
acarreador siguiendo su
gradiente de electroquímico y
los solutos cotransportados por
el NA
+
también se mueven hacia
el interior de la célula.
Contratransporte o antiporte
Los solutos se transportan en
direcciones opuestas a través de la
membrana celular.
El NA
+
se mueve hacia el
interior de la célula sobre el
acarreador siguiendo su
gradiente de electroquímico y
los solutos cotransportados por
el NA
+
se mueven hacia el
exterior de la célula.

Absorción
Absorción
Secreción
PROCARIOTAS
No tienen núcleo definido
Las células procariotas no poseen sistemas
de endomembranas.
Su ADN no está definido
Las células procariotas presentan Pared
celular no celulósica.
La cadena esta asociada a la membrana
plasmática.
Estructura: membrana plasmática, pared
celular, citoplasma, nucleotide, ribosoma,
operones.
Características principales para considerarse diarrea:

La diarrea es un cambio en las evacuaciones intestinales que
causa heces más blandas que lo normal. De sólido a líquido.

Se considera diarrea cuando el número de deposiciones sea
mayor que 3
Según su
duración:
Hiperaguda
Aguda
Subaguda
Crónica
Disentería
2 Tipos Básicos
Osmótica
Secretoria
Mecanismo osmótico
Virus lesionan
microvellosidades
Provocan
malabsorción
No inflamatoria
Mecanismo
enterotóxico
Liberan enterotoxinas
Alteración función del
enterocito
Transforma absorción
en secreción
Mecanismo entero
invasivo
Destruyen bordes
encepillo
Penetra exterior de la
células
Desequilibrio entre
absorción y secreción
Dando excesiva
secreción
Inflamatoria
Mujer de 22 años que acudió al médico de atención primaria por
presentar desde hace un día diarrea acuosa de 15 deposiciones al
día, sin productos patológicos. Se acompañaba además de vómitos
biliosos y dolor abdominal. Ella refiere haber comido mariscos
crudos. En el coprocultivo crecieron, en la placa de agar sangre, unas
colonias de un bacilo gramnegativo hemolítico y oxidasa positiva, y
en el agar MacConkey unas colonias lactosa negativa. Las colonias
fueron identificadas en Kligler como glucosa positivas, no
productoras de gas ni de sulfhídrico, urea y lisina negativas. El aislado
mostró sensibilidad al cotrimoxazol y resistencia al ácido nalidíxico.
Tipo de diarrea: Diarrea Hiperaguda – Aguda/ Acuosa/
Secretoria/ Enteretóxica o enteroxigénica/ No
inflamatoria
Agente Etológico: Vibrio cholerae:
 Bacilo gram negativo: 1 capa de membrana
 Glucosa positiva
 Hemolítico
 Lactosa Negativo


Resultados de
medios de cultivo
Factores de virulencia:

Subunidad A Toxina Colérica

Subunidad B Toxina Colérica

Neuro aminidasa: Convierte los gangliósidos Largos en
gangliósidos Gm1

Hemagluditinina/Proteasa: Zn- Metaloproteinasas: Destruyen
Zónula Occludens

Hemolisina: Destruye células

Toxina colérica
5 subunidades B
(Enlace)
1 subunidad A
(Parte Activa)
Se unen con receptores
“gangliósidos gm1
A1
Se separa
A2
A1
- Estimula enzima
adenilciclasa
AMP

- Secretan
electrolitos
- Ya no absorbe
Gen ctx: - ctxA Se une al ribosoma
- ctxB
Se une al ribosoma
5 veces más fuerte