BIORREACTORES

OBJETIVOS:
• Analizar y comprender la importancia del
crecimiento celular como base del
funcionamiento de un biorreactor.

• Establecer las ecuaciones de diseño propias de un
biorreactor ya sea intermitente o continuo.

• Indicar los factores o condiciones de proceso que
afectan el funcionamiento de un biorreactor.

BIORREACTORES
1. CRECIMIENTO Y DIVISIÓN CELULAR
Crecimiento de un organismo aeróbico sigue la
ecuación:





Sustrato células Más células + Producto

Crecimiento celular en un reactor discontinuo
2. LEYES DE VELOCIDAD
Hay muchas leyes para velocidad de crecimiento celular de
nuevas células, por ejemplo:
Células + sustrato más células + producto

Sin embargo, la expresión más empleada es la ecuación de
Monod par crecimiento exponencial

rg= µ*Cc
Donde
r
g
= velocidad de crecimiento de la célula, g/dm
3
.s
c
c
= concentración de células ,g/dm
3

µ= velocidad de crecimiento especifico, s
−1

La velocidad de crecimiento especifico de las célula se
puede expresar como:
µ=µ
máx
c
s
k
s
+c
s
s
−1

Al combinar las ecuaciones 1 y 2, llegamos a la ecuación de
Monod para la velocidad de crecimiento de las células
bacterianas.


Para bacterias distintas, la constante
es pequeña, en cuyo caso la ley de velocidad se reduce a:
rg= µmáx*Cc



=
µá ∗ ∗
+

Ecuación de Tessier



Ecuación de Moser


µmáx= [1-exp(

)] ∗
=
µá ∗
( + ∗

)

La estequiometria del crecimiento celular es muy
compleja y varía según los microrganismos.

é + → á é +

El coeficiente de rendimiento para células y sustrato
es

=
é

= −

3. ESTEQUIOMETRIA

=
1

La velocidad de formación para el producto es

=

=

=

á

+

=

é
=

Hacemos que el producto de

y sea (

=

)
Si el producto se forma durante la fase estacionaria

=

(−

)

El coeficiente de rendimiento que relaciona la cantidad
de producto formado por masa de sustrato consumido
es

=


= −

Parte del sustrato que se utiliza para mantener las
actividades cotidianas de las células.

=

é ∙


Un valor típico es
= 0.05



1

= 0.05
−1


Si la tasa de consumo de sustrato para mantenimiento

=

SI el mantenimiento es despreciable

=

0


+

en donde:

=
é
é


=





Utilización de sustrato.


=

é
+

+


=

+

+

=

+

La velocidad correspondiente de formación de producto es

=

Durante la fase estacionaria no existe crecimiento celular.

La velocidad de formación de producto durante la fase
estacionaria es similar en forma de la ecuación de Monod.

=

+

La velocidad neta de consumo de nutrimento
secundario durante la fase estacionaria es

=

+

=

+

+

Dado que el producto deseado puede sintetizarse
cuando no hay crecimiento celular.

=

0

La tasa específica de formación de producto (q
p
) se da
en términos de la ecuación de Luedeking-Piret

=

=

La cual tiene dos parámetros, α (crecimiento) y β
(ausencia de crecimiento).
con

=

4. BALANCE DE MASA
Hay dos formas en las que podríamos explicar
el crecimiento de los microorganismos.
– Tomar en cuenta el número de células
vivas.

– La masa de células vivas.
Un balance de masa para el microorganismo
en un reactor continuo de mezcla perfecta
(quimiostato) de volumen constante es:
Velocidad de
acumulación
de células
g/s
Velocidad de
entrada de
células g/s
Velocidad de
salida de
células, g/s
Velocidad
neta de
generación
de células
vivas, g/s

=

+

(25)
Balance de masa de un quimiostato
V=cte
• Para un sustrato el balance es:

Velocidad de
acumulación
de sustrato,
g/s
Velocidad de
entrada de
sustrato, g/s
Velocidad de
salida de
sustrato, g/s
Velocidad de
generación
de sustrato,
g/s

=
0

0

+

(26)

En casi todos los sistemas la concentración de entrada del
microorganismo C
c0
es igual a cero.

OPERACIÓN INTERMITENTE:
Un sistema intermitente =

= y los balances de masa son
los siguientes:
• Células:
V

=

Balance de masa

Dividiendo entre el V del reactor se tiene:

=

(27)
• Sustrato:
La velocidad de desaparición del sustrato, -r
s
, se deriva del
sustrato empleado para el crecimiento y mantenimiento celular.
V

=

=

(28)
Dividiendo entre V:

=

Fase de crecimiento (29)
Para células en fase estacionaria.
V

= −

+

Fase estacionaria (30)


• Producto:
La velocidad de formación de producto, r
p
, puede relacionarse
con la velocidad de consumo del sustrato a través del siguiente
balance:
V

=

=

Durante la fase de crecimiento se puede relacionar la velocidad
de formación del producto, con la velocidad de crecimiento
celular.
El nutriente esta
uniformemente
distribuido y, en caso
de haber más de una
especie de
microorganismo, estas
tienen el mismo
acceso al nutriente.
CARACTERÍSTICAS

Permite al operador
controlar la velocidad
de crecimiento celular, a
través del ajuste del
flujo volumétrico.
CARACTERÍSTICAS
CÓMO OPERA UN QUIMIOSTATO
La agitación se lograr
por impulsores o por
el movimiento de la
fase líquida.
El suministro de
oxígeno a los
microorganismos se
lleva a cabo, por
burbujeo de aire.
CÓMO OPERA UN QUIMIOSTATO
La temperatura se mantiene
constante y uniforme por
medio de la circulación de
agua de enfriamiento.
El pH del medio de cultivo se
controla con la adición de
ácido o de base.
6. ECUACION DE DISEÑO

En esta sección recordaremos:

 balance celular:
……….. (1)

 balance de sustrato:

………… (2)

= ʋ
0
*Cc
0
- ʋ*Cc + (r
g
– r
d
)

= ʋ
0
*Cs
0
- ʋ*Cs + r
s
*V

A continuación definiremos un parámetro a los
biorreactores llamado “tasa de dilución”.

:tasa de dilución
ʋ:flujo volumétrico
:volumen


La tasa de dilución recíproco al tiempo espacial Ƭ.



=
ʋ

Dividimos las ecuaciones (a) y (b) entre V, y
aplicamos la definición de la tasa de dilución.

Acumulación=Entradas – Salidas + Generación

Células: (3)

Sustrato: (4)

= 0 – D*Cc + (r
g
– r
d
)

= D*Cs
0
– D*Cs + r
s

Para operaciones en estado estacionario,
tenemos:

Células: (5)



Sustrato:
(6)



D*Cc = r
g
– r
d

D(Cs
0
– Cs) = -r
s

Usando la ecuación de Monod, la tasa de
crecimiento se determina como sigue:

(7)

Donde:
: velocidad de crecimiento específicos, s
-1

Ks: constante de Monod, g/dm
3

Cs: concentración de sustrato, g/dm
3


r
g
= *Cc =

max
∗Cs∗Cc
+

De a ecuación (5) despreciaremos la velocidad
de muerte, r
d
luego combinamos las ecuaciones
(5) y (7)para operación en estado estacionario.


Reemplazamos rg


dividimos entre Cc*V


D*Cc = r
g


D*Cc = *Cc
D = 

• Empleando la ecuación (8) para sustituir  en
términos de la concentración de sustrato

(8)

• y después resolviendo para concentración de
sustrato en estado estable, obtenemos:

(9)



 = 
max
*

+

Cs =

max −

• Asumiendo un solo nutrimento sea el
limitante, la estequiometría es:


Sustituyendo Cs de la ecuación (9) obtenemos:


Cc = Y
s/c
(Cs
0
– Cs)
Cc = Y
s/c
(Cs
0


max −
)
7. DESAPARICIÓN
Para comprender el efecto de la tasa de dilución,
combinaremos las ecuaciones (3) y (13), e
igualaremos r
d
= 0
(13)

para obtener:
(14)

r
g
=  * Cc

= ( - D)* Cc

La tasa de dilución a la cual ocurre la
desaparición se obtiene de la ecuación (12)
igualando Cc = 0

(15)

D
max
=
max ∗ 0
+0

• A continuación determinamos la tasa de dilución
máxima de células. La tasa de producción celular por
volumen unitario del reactor es el flujo másico de
células que salen del reactor (es decir, m
c
= Cc =
Cc* ʋ
0
divida entre el volumen V.


• Usando la ecuación (12) para sustituir Cc, se obtiene

(16)

ʋ
0

Cc

= D*Cc
D*Cc = D*Y
c/s
(Cs
0
-

max −
)
En la figura 7-22 se muestra la tasa de producción, la
concentración de células y la concentración de
sustratos como funciones de la tasa de dilución.
(17)



(∗)

= 0


La tasa máxima de producción de células es:

(18)
D
prod.max
= 
max
(1 -

+0
)
8. CRECIMIENTO LIMITADO POR OXIGENO
La velocidad de transferencia de
oxigeno se relaciona con la
concentración de células.
rO
2
= Q
O2
*C
c


8.1. Ejemplo:


• Se obtuvieron los siguientes datos con la levadura
para pan en determinado medio a 23.4 ºC y diversas
presiones parciales de oxígeno.

P
O2
Q
O2
(sin sulfanilamida)
0.0 0.0
0.5 23.5
1.0 33.0
1.5 37.5
2.5 42.0
3.5 43.0
5.0 43.0
Calcule Q
O2
máxima (Vmax) y la constante de
Michaelis Menten Km.
• La ecuación de Michaelis menten:

=
∗∗
+
=

+


• Sea: Q
O2
= r
p
y P
O2
=S

1

=
+

=


+




1

=

∗ (
1

) +
1

1/P
O2

1/Q
O2
(sin
sulfanilamida)
2 0.04255319
1 0.03030303
0.66666667 0.02666667
0.4 0.02380952
0.28571429 0.02325581
0.2 0.02325581
Acomodando los datos:

Graficando 1/Q
O2
vs. 1/P
O2


0
0.005
0.01
0.015
0.02
0.025
0.03
0.035
0.04
0.045
0 0.5 1 1.5 2 2.5
• De la grafica obtenemos que:

y = 0.0111x + 0.0199
• pendiente = 0.0111
• Intersección: 0.0199

1

=0.0199
• Vmax= 50.25 mL O
2
/hr.mg de células

=0.0111
• Km= 0.5578

9. Escalamiento

Conclusiones
• Para comprender el funcionamiento de un
biorreactor es necesario precisar las condiciones
a las que tiene lugar el desarrollo de la vida
celular, así como las etapas y la velocidad de
crecimiento de un microorganismo, especificado
en la ecuación de Monod.

µ = µ
á

+

−1
(2)

• Con las ecuaciones de diseño se puede explicar
el crecimiento y desarrollo de los
microorganismos dentro de un biorreactor, ya sea
intermitente o continuo. Asimismo podemos
expresarlo con la ayuda del balance de masa de
las células vivas. Para lo cual debemos conocer la
velocidad de generación y de desaparición de
células, como se expresa en la siguiente ecuación:

=
0

0

+ (

) (25)

• Para un garantizar que los microorganismos de
la biomasa no mueran, es necesario diseñar
un biorreactor que maximice la transferencia
de oxígeno entre las burbujas del aire
inyectadas y las células, en sistemas limitados
por oxigeno.