OBTENCION DEL MATERIAL DE

SIEMBRA. BIORREACTORES

Saccharomyces cerevisiae

Ácido láctico

Lactobacillus delbrueckii .

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Lactobacillus helveticus .

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Lactobacillus casei .

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Bifidobacterium longum .

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Acetobacter aceti .

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Aspergillus nigeer .

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Propionibacterium shermanii .

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Corynebacterium glaucum .

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Pseudomonas .

Utilización de microorganismos en la industria .

Una cepa económicamente rentable deberá cumplir lo siguiente: 1.. selección y mejora. Al buscar se encuentran cepas salvajes. ya que para poder trabajar con ellos son necesarias sucesivas generaciones del organismo que se mantengan idénticas entre sí.• • • • • • • • • • • • • • • • A excepción de algunos productos de la industria alimentaria. 6..-Tiene que crecer vigorosamente en el fermentador. donde se usan cepas silvestres. Se estudia luego su productividad en medios líquidos en las condiciones que habrá en el fermentador para determinar la cepa que producirá más .-Tiene que ser capaz de producir fácilmente células vegetativas.. es difícil que los microorganismos crezcan en grandes volúmenes de sustrato. es necesario buscar microorganismos y después mejorarlos.. y se estudiará la forma de separar el producto. 4. Esto se realiza en 3 etapas : prospección .Geneticamente estable pero mejorable mediante agentes mutagénicos.Que se pueda conservar. Se les reconocerá según formen halos o cambien el color del medio . de las cuales unas pueden tener interés y otras no. 3. 2. Se aíslan en agares medios sólidos. Aislamiento de Cepas De la naturaleza de los suelos. La conservación de cepas de producción a lo largo del tiempo es un requerimiento básico para la fermentación industrial.Es mejor si crece a pH elevados o a temperaturas elevadas esto lo protegerá.-Tiene que formar productos fácilmente recuperables en ausencia de productos colaterales tóxicos.-Tiene que estar disponible en cultivo puro libre de otros microorganismos. 7. . lodos. Conservación de cepas El problema de trabajar con microorganismos es su corto tiempo de vida.Tiene que producir la sustancia en corto tiempo. 8. lagos y ríos . 5. Características generales. El objetivo es: -La supervivencia del microorganismo y que éste mantenga su capacidad de producción después de la conservación. en la mayoría de casos.

A temperaturas de ultracongelación el metabolismo será totalmente frenado. Incluso pueden morir todas las células al haber tardado en hacer un nuevo repique. Primero se congela y después se pasa al vacío provocando la sublimaición.Sub-cultivos: Los microorganismos se mantienen como cultivo por picadura en agar o en un cultivo líquido en nevera. peptonas. Esto permite mantener los microorganismos décadas . una vez que se haya estabilizado la congelación . -Adición de crioprotectores para evitar la formación de cristales dentro de la célula se usan glicoles a 520%. 1 gr = 5000x106 . -18°C. Se congela a -50°C o menos y se elimina el agua al crear vacío en la muestra. La temperatura óptima de conservación es de 0 a 18 °C y en la oscuridad. no es necesario la conservación a bajas temperaturas.Almacenamiento por congelación3: Un descenso de la temperatura de 10°C supone un descenso de la velocidad de crecimiento del 50% . 2. -Congelar rápidamente.. se cultivará una muestra.• • • • • • • • • • • • • • • • • • Tipos: 1.-Esporulación: Sólo se puede utilizar en microorganismos esporulante. justo antes de llegar a la fase estacionaria. Una vez deshidratado se envasa y sella.196°C(congelación en N líquido duran 15 años).Liofilización: Es el mejor método de conservación. Inconvenientes: costo alto. Los microorganismos que producen esporas son fáciles de conservar. Como se crioprotectores se usan azúcares o leche . 3. El número de microorganismos viables no ha de ser menor de 70-80% del número de viables original. Riesgo de contaminación y mutación .. y se debe considerar la siguiente: -Los microorganismos deben estar en un medio rico y líquido . -80°C. -La concentración de microorganismos ha de ser elevada. Sólo es necesario inducir la esporulación. Las esporas se almacenan en un medio mineral estéril y seco.. 4. Las mutaciones se pueden realizar en 8 -16 semanas o un año. para que no germinen. Es más barato y seguro . La congelación ha de ser rápida pero gradual.glutamato de Na . donde crecerán en la fase exponencial hasta llegar a su N max. -Hacer control de calidad: a los 15 días.

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Difusores de aire .

Biorreactor tipo Tanque agitado .

Biorreactor con agitador de turbina con palas .

donde se lleva a cabo una transformación por el biocatalizador. la cual se da en el fermentador es la conservación de la esterilidad con un intensiva aireación del medio nutritivo durante todo el periodo de cultivo. Una de las principales exigencias.01 hasta 100 metros cúbicos. serpentines . agua. posee un sistema para llenado del medio nutritivo. Antes de llenar el fermentador con el medio de cultivo éste es lavado. La introducción en el fermentador de serpentines adicionales dificultan su esterilización y lavado. . El calor que desprenden los microorganismos en el periodo de crecimiento se extrae con ayuda de intercambiadores de calor. La obtención del producto final del metabolismo en el fermentador de producción viene a ser la principal y frecuentemente la etapa más larga de todo el ciclo tecnológico de crecimiento. La altura del fermentador es de 2 a 2. Con ayuda de los serpentines se esterilizan también los fermentadores. agitación. aireación y pH del medio. Para estabilizar una temperatura durante el proceso de cultivo tecnológicamente lo más apropiado es utilizar materiales aislantes de calor. Al biorreactor lleno de medio nutritivo estéril ( su volumen debe ser no mayor del 70% del volumen total del biorreactor) . El cultivo industrial se realiza en condiciones estériles . etc. El biorreactor es un recipiente hermético cilíndrico con tapa esférica y fondo. Al mismo tiempo se esteriliza todo el sistema de tuberías con vapor. Estos son internos: espirales. dejando pasar vapor en lugar de agua fría. El biorreactor está suministrado de instrumentos que controlan la temperatura.Biorreactor de tanque agitado • Es el más utilizado. se prueba su hermeticidad y se esteriliza.5 veces mayor que su diámetro. se agrega el material de siembra. vapor. tubulares. El volumen del fermentador puede ser de 0. El material de construcción es acero inoxidable.

la duración de cultivos de algunos actinomicetos y hongos es de 12 días. El uso de agentes antiespuma no altera el crecimiento aeróbico de microorganismos. N. La etapa de cultivo industrial para la mayoría de microorganismos es de 48 a 72 horas.• • • • Previamente los valores de la temperatura y pH del medio de cultivo deben alcanzar los valores óptimos para el crecimiento del microorganismo productor. Para la disminución de la formación de espuma se utiliza medios de disminución de espuma químicos ( grasas vegetales y animales) y mecánicos ( ciclones. La adición en exceso del quitaespuma o el exceso de suministro al final de la etapa de cultivo puede volver complejo el proceso de extracción del producto final y llegar al mínimo de extracción. La saturación con oxígeno del medio de cultivo se realiza mediante aireación que garantiza el contacto entre las fases líquida y de gases. gran significado tiene el control de la formación de espuma. Para que el cultivo industrial se desarrolle con éxito. P) se controla el pH de líquido de cultivo. Todos los fermentadores están suministrados con instalaciones para la extracción de gases de la espuma y el control de la altura de la espuma en el biorreactor. la duración de esta etapa no es más de 24 horas. El más difundido en la industria microbiológica es la aireación a través de un difusor. paletas giratorias en la parte superior del fermentador). La calidad de los quita espumas suministrados y la periodicidad de suministro al fermentador debe ser controlado . Los microorganismos pueden utilizar sólo oxígeno disuelto. En el proceso de cultivo se da un control constante del estado del cultivo y la acumulación de los productos de biosíntesis. se fijan el uso de los principales componentes del medio ( C. Para cultivos bacteriales. . En el transcurso de todo este proceso el cultivo en crecimiento sumergido es necesario suministrarle oxígeno.

Biorreactor tipo torre .

lift .Biorreactor Air .

En este caso todas las burbujas se elevan con la misma velocidad de ascenso y el mezclado se origina del líquido arrastrado en la estela de cada burbuja. la densidad de la dispersión gas-líquido en la zona de flujo descendente es mayor que la densidad en la zona de flujo ascendente. prácticamente no se presenta y el perfil de la fracción de gas retenido es uniforme. . está equipado con un difusor de aire en el fondo y tiene partes que forman una zona de flujo ascendente y una zona de flujo descendente. el aire se separa del líquido que pasa a la zona de flujo descendente. conectadas en sus parte superior e inferior. El flujo homogéneo se caracteriza por tener un tamaño casi uniforme de burbujas. que es el fenómeno conocido como coalescencia. En la parte superior. Este flujo ocurre sólo a bajas velocidades superficiales del gas y cuando el difusor tiene orificios uniformemente distribuidos. En el biorreactor airlift.Biorreactor Airlift • • • El diseño básico de un biorreactor airlift consta de un recipiente cilíndrico que tiene generalmente una relación de altura a diámetro entre tres y diez. además. El flujo heterogéneo es aquel que ocurre con un difusor de gas cuyos orificios no estén uniformemente distribuidos. Sin embargo. empieza a ocurrir una distribución desigual de las burbujas de manera aleatoria ocasionando flujos circulatorios de líquido. No se presentan flujos de líquido circulatorios y la fase gaseosa se puede considerar como de flujo pistón. se pueden distnguir dos tipos de regímenes de flujo : homogéneo y heterogéneo . incluso habiendo una distribución uniforme. el líquido es arrastrado por el movimiento ascendente de aire. En este tipo de biorreactor al introducir aire en el fondo de la zona de flujo ascendente. dependiendo de la velocidad de flujo del gas. En consecuencia. especialmente en la dirección radial. al aumentar la velocidad del gas. la unión de burbujas para formar una más grande. Esta diferencia de densidades es la que ocasiona el movimiento circulatorio del líquido.

Biorreactores para substratos sólidos .

Biorreactor tambor horizontal .

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Biorreactor columna charola .

Biorreactor de lecho fluidizado .