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MICROBIOLOGA

Concepto de Microbiologa
Historia

Definicin de Microbiologa
Ciencia que estudia los microorganismos

(MO), cuyo tamao se encuentra por debajo


del poder resolutivo del ojo humano (< 100u)
Definicin implica que su objeto de estudio
est determinado por la metodologa:

Microscopio
Tcnicas de cultivo puro en laboratorio
Etc.

Descubrimiento de los
microorganismos
Antonij van Leeuwenhoek:

Microscopio simple
Descubrimiento de los microorganismos
(animlculos en agua de estanque, 1675)
Describe bacterias
Describe protozoos

Robert Hooke:

Microscopio compuesto
Describe hongos filamentosos (1667)

Leeuwenhoek y su
microscopio simple

Primeros dibujos de bacterias (Leeuwenhoek)

Microscopio compuesto de Robert Hooke

Clasificacin de los
microorganismos
Antes del descubrimiento de los MO se crea
que los seres vivos conocidos eran animales
y plantas. Los reinos animal y vegetal podan
separarse de forma precisa; mientras que los
conocimientos sobre los MO eran escasos.
Para evitar clasificaciones arbitrarias,
Ernest Haeckel, en 1866, propuso el reino de
los PROTISTAS, que inclua a las algas,
hongos, protozoarios y bacterias.

PROTISTAS

Algas

Protozoarios

Hongos

Bacterias

Historia de la Microbiologa

Historia. Las grandes controversias del

siglo XIX y su resolucin

El debate sobre la
generacin espontnea
Ideas asumidas desde Aristteles
Redi (1668): experimentos que descartan la

generacin espontnea de animales

Omne vivo ex ovo


Pero an no se acepta Omne vivo ex vivo

La disputa entre Spallanzani y Needham

Los experimentos se interpretan errneamente


(Needham) como que al calentar los frascos el aire
pierde su fuerza vital (vitalismo)

Pasteur zanja la polmica sobre


la generacin espontnea
Experimentos con frascos abiertos al

aire dotados de largos cuellos


curvados (cuellos de cisne).

Una vez llevados a ebullicin, no


aparecen microorganismos si el frasco
no se mueve
Aparecen microorganismos si el lquido
alcanza el cuello curvo

Trampas para capturar

microorganismos

El debate sobre los fermentos


Dos teoras sobre el origen de las

fermentaciones: qumica y biolgica


Pasteur (1857) es llamado a resolver un
problema de las destileras de Lille

1857: bacterias que producen ferm. lctica


1860: levaduras producen ferm. alcohlica
Descubre la fermentacin butrica y la vida en
ausencia de aire (anaerobiosis)

Reconciliacin de las dos teoras: Buchner

asla un preparado libre de clulas (zimasa) de


levadura

Avances tcnicos: cultivo puro


Dos teoras sobre forma de microorganismos:

pleomorfismo y monomorfismo
Su resolucin dependi de cultivos puros (laboratorio
de Robert Koch)

Medios slidos a base de rodajas de patata


Medios slidos a base de gelatina
Medios slidos a base de agar-agar

Petri (en el laboratorio de Koch) inventa la placa que

lleva su nombre
Medios de enriquecimiento y medios diferenciales
(Beijerink, Winogradsky)

Avances tcnicos: microscopios y


tcnicas de tincin
Koch colabora con la industria alemana del

vidrio (Schott) y pide ayuda a expertos en


ptica (Abb, Zeiss)

Lentes acromticas mejoradas


Iluminacin inferior con condensador.
Objetivo de inmersin (1878)

Koch colabora con industria qumica BASF:


Tinciones para observar bacterias (azul de metileno,
fuchsina, violeta de genciana, etc), 1877 y siguientes
Ziehl y Neelsen: tincin diferencial AAR (1883)
Hans C. Gram: tincin diferencial Gram (1884)

Papel de los microorganismos en


las enfermedades infecciosas
Periodo especulativo (Teolgica)
La humanidad conoce las actividades microbianas

sin saber nada de los microorganismos


Periodo especulativo (Miasmtico)
miasmas
Lucrecio (s. I a. C.): semillas de enfermedad
Fracastorius (1545): grmenes vivos
Alimentos y bebidas fermentados (queso, leches
fermentadas, vino, cerveza, etc.)

Papel de los microorganismos en


las enfermedades infecciosas
Periodo microbiano
Pasteur resuelve una

enfermedad del gusano de seda


(pebrina). En 1869 identifica al
protozoo Nosema bombycis
El clera aviar
Trabaj en la rabia

Papel de los microorganismos en


las enfermedades infecciosas
Koch (1876): con su tcnica de cultivo puro asla y

propaga experimentalmente por primera vez una


bacteria patgena responsable del carbunco
Primeras microfotografas de Bacillus anthtracis
teido con azul de metileno
Confirma que esta bacteria presenta una fase
resistente (endosporas)
La enfermedad se puede reproducir
experimentalmente al reinocular bacilos a animales
de laboratorio

Postulados de Koch (1882)


El agente patgeno debe estar presente en los

individuos enfermos
El microorganismo debe aislarse del husped
enfermo en cultivo puro
El microorganismo crecido en cultivo puro, al
inocularse en animales sanos, induce en ellos
la enfermedad
De estos animales experimentales inoculados
y ya enfermos, se puede volver a aislar el
microorganismo

Postulados de Koch

La escuela de Koch asla


numerosos agentes patgenos
Clera (1883)
Difteria (1884)
Ttanos (1885)
Neumona (1886)
Meningitis (1887)
Peste (1894)
Sfilis (1905)

Asepsia, quimioterapia
La introduccin de anestesia (mediados

siglo XIX) trae infecciones quirrgicas


Lister introduce el uso del fenol y de sales
de mercurio (asepsia en quirfano)
Paul Ehrlich: idea de las balas mgicas

Colabora con industria qumica y descubre el


salvarsn 606, contra la sfilis
Quimioterapia

Domagk (1935): rojo de prontosilo contra

neumococos

poca de las sulfamidas

Desarrollo de la asepsia

Antibioterapia
Fleming (1929): extracto crudo de penicilina

(del hongo Penicillium notatum)


Chain y Florey (1940-4): purificacin
penicilina. Uso en 2 Guerra Mundial
Waksman (1944) Descubrimiento
estreptomicina de Streptomyces griseus
Tras la Guerra, se descubren numerosos
antibiticos, producidos sobre todo por
Actinomicetos

Desarrollo de la antibioterapia

Auge de la microbiologa general:


litotrofa y autotrofa
Sergei Winogradsky

1888: Bacterias del hierro crecen en


medios minerales
1889: Bacterias del azufre oxidan sulfuros
o S y obtienen energa de ello litotrofia
1890: Bacterias nitrificantes fijan CO2 con
la energa de la oxidacin del amonio o
nitrato quimiolito-autotrofia
Primer aislamiento de bacteria fijadora de
nitrgeno (Clostridium pasteurianum)
Explica el ciclo del N en la bisfera

Auge de la microbiologa general:


bacterias fijadoras de nitrgeno
Beijerink:
descubre Azotobacter (1901)
Demuestra que incorpora el N de atmsfera (1909)
(Beijerink 1888; Hellriegel y Willfahrt, 1888),

Papel de Rhizobium en la simbiosis fijadora de las


leguminosas

Incorporacin de la Microbiologa agrcola a

las universidades y estaciones experimentales

Trabajos claves en microbiologa


1684 - van Leeuwenhoek Descubrimiento de bacterias
1798 - Jenner
Vacunacin contra la viruela
1864 - Pasteur
Fin de la controversia de la generacin espontnea
1881 - Koch
Mtodos de cultivo axnico
1884 - Koch
Postulados de Koch
1884 - Gram
Mtodo de la tincin de Gram
1889 - Winogradsky
Concepto de virus
1929 - Fleming
Descubrimiento de la penicilina
1944 - Avery et al
DNA es el material gentico
1946 - Tatum & Lederberg Conjugacin bacteriana
1953 - Watson, Crick & Franklin
Estructura del DNA
1977 - Woose & Fox
Descubrimiento de las Archaea
1981 - Prusiner
Caracterizacin de los priones
1985 - Mullis
Descubrimiento de PCR
1995 - Venter & Smith
Secuencia completa de un genoma bacteriano
(Haemophilus influenzae)
2010- Venter
Creacin de una bacteria sinttica.

Diferencias
PROCARIOTAS
Genforo

un solo cromosoma
ADN c.d.
no membrana nuclear (no
hay ncleo autntico)
no histonas

Replicacin: no mitosis
Org. citoplasma

EUCARIOTAS

Nucleoplasma
varios cromosomas
ADN cadena doble lineal
existe membrana nuclear
(hay ncleo autntico)
histonas

Replicacin: mitosis
Org. citoplasma

no orgnulos de tipo
eucaritico

no citoesqueleto

Ribosomas de tipo 70S

orgnulos (mitocondrias,
cloroplastos, retculo
endoplsmico, aparato de
Golgi, lisosomas...
existe citoesqueleto,
corrientes citoplmcias
Ribosomas de tipo 80S

Comparacin de clula
procaritica y eucaritica

BACTERIA: Tamao y forma


agrupaciones bacterianas

Tamao de los procariotas


Por lo general, ms pequeo que el

de las clulas eucariticas


Pero existen bacterias

Gigantes (0,5 mm)


Enanas (<0,1 micra)

Un tamao tpico:

0,5 x 3 micras

Tamao pequeo:
consecuencias metodolgicas
Hay que recurrir a microscopios y

normalmente a tinciones
La inmensa mayora de los estudios se
realiza con poblaciones enormes, de las
que se sacan promedios
Es muy raro estudiar un individuo cada
vez

Formas tpicas
Cocos
Bacilos
Espirilos
Vibriones
Otras formas:

Filamentos
Anillos casi cerrados
Con prolongaciones (prostecas)

Agrupaciones bacterianas
Un solo plano de divisin

De dos clulas:
Diplococos
diplobacilos

Cadenetas de varias clulas


estreptococos,
Estreptobacilos

Dos o ms planos de divisin (en cocos)


Dos planos perpendiculares: ttradas
Tres planos ortogonales: sarcinas (paquetes
cbicos)
Muchos planos aleatorios: estafilococos

ESTRUCTURAS DE LA CLULA
PROCARITICA
Cpsula
Pared celular*
Membrana citoplasmtica*,
Citoplasma, incluye: genoma (nucleoide) ,

constituido por un cromosoma*, ribosomas*


Pueden existir, adems: plsmidos, flagelos,
fimbrias (= pelos), espora

Cpsula y capas mucilaginosas:


conceptos generales
Cpsulas en sentido estricto son rgidas e

integrales
Las capas mucilaginosas son flexibles y
perifricas
Glucoclix: capas superficiales compuestas
de polisacrido
Sirven para adhesin entre clulas, y
colonizacin de nichos. En muchas
patgenas sirven, adems, para protegerse
de agentes antibacterianos

Cpsula: composicin qumica y


estructura
Composicin qumica

cpsulas polisacardicas
heteropolisacridos aninicos
heteropolisacridos neutros (levanos,
dextranos, pentanos, celulosa)
alginatos
cpsulas polipeptdicas (en Bacillus)

Constituyen el antgeno capsular K

Papeles y propiedades generales


conferidos por la cpsula
Mejora difusin de nutrientes
Proteccin contra la desecacin
Evita la fagocitosis
Proteccin contra agentes

antibacterianos
Adhesin a sustratos

Papeles de la cpsula en la
adhesin a sustratos
A sustratos inertes, microcolonias de la

misma especie y consorcios de diferentes


especies, con ventajas metablicas. Ello tiene
secuelas econmicas:

corrosin de caeras
formacin de placa dental y caries
formacin de biopelculas en catteres y prtesis

A sustratos vivos: actan como adhesinas


efectos benficos: colonizacin de flora autctona en
intestino de mamferos
en sistemas patolgicos: como factores de virulencia; a
veces sirven para escapar del sistema inmune

La pared celular procariota


La pared celular est constituida por la MUREINA o
PEPTIDOGLUCANO:
En Gram positivas grueso (95%)
En Gram negativas delgado (5%)
La murena, est representada por AMINOAZCARES:
N-acetil Glucosamina
N-acetil Murmico
Una cadena tetrapeptdica

Pared
celular

Peptidoglucano: composicin
qumica
La unidad disacardica que se repite es:

N-acetilglucosamina (NAG)...
...unida por enlace (14) con...
... N-acetilmurmico (NAM)

Las distintas unidades disacardicas se unen

entre s mediante enlaces (14)

Este enlace puede ser roto por la lisozima

La cadena tetrapeptdica sale desde el grupo

COOH del lactilo de cada NAM y suele ser:

L-ala D-glu m-DAP D-ala

El PG de bacterias Gram
negativas
Normalmente:
1 capa de PG.
Las distintas cadenas se unen por enlaces peptdicos
directos entre el grupo -NH2 del m-DAP de una cadena
con el COOH de la D-ala de otra cadena
Malla floja con grandes poros: 50% NAM carece de
tetrapptidos
En espiroquetas, el diaminocido en posicin N

3 es la L-ornitina (en lugar de m-DAP)

Estructura global del PG de


bacterias Gram-positivas
Mltiples capas de PG (distintos niveles,

hasta 50 en especies de Bacillus)


Entrecruzamientos entre cadenas del mismo
nivel y entre un nivel y el inmediato superior
o inferior
La mayora de NAM tienen tetrapptidos
La mayora de tetrapptidos participan en
enlaces
Consecuencia: red tridimensional gruesa,
con poros pequeos, ms compacta que
Gram-

Relaciones estructura-funcin
en el peptidoglucano
Gran rigidez aguanta las fuerzas osmticas del

protoplasto (5-15 atm). Rigidez viene de:

El grado de entrecruzamiento
El enlace (14) es muy compacto. La alternancia de NAM y
NAG uno de los polisacridos ms estables que existen
La alternancia de aa en L y en D estabilidad adicional
(cadenas laterales al mismo lado, puentes H)

Al mismo tiempo, gran flexibilidad soporta variaciones

de presin osmtica protoplasto

Condiciona la forma celular


Es muy permeable
Puede estar como endotoxina (antgeno somtico O)

Pared de las bacterias cidoalcohol resistentes (BAAR)


Pared especial de ciertas Gram-

positivas: Nocardia, Mycobacterium


Resisten la decoloracin con
clorhdrico-etanol ( cido-alcohol
resistentes)
Esta propiedad deriva de:

cidos miclicos (ceras)


Glucolpidos

cidos miclicos

Son -hidroxicidos grasos

ramificados en , de cadena muy larga


Forman parte de un esqueleto muy

peculiar de la pared celular:

PGarabinogalactanocidos miclicos

Papeles conferidos por la


pared BAAR
Aspecto y consistencia crea de las

colonias en placas de Petri


En lquidos crecen formando grumos
Gran impermeabilidad

Resistencia a desecacin
Resistencia a agentes antibacterianos
Detergentes
Oxidantes
cidos

y bases

Membrana citoplasmtica

Nucleoide

Representado por el
cromosoma de la bacteria
(ADN), de tira nica y
circular

Plsmido
Elementos genticos (ADN)
extracromosmicos
con
capacidad de replicacin
autnoma

Espora
Cuerpos esfricos, ovoides refringentes incluidos en
la clula vegetativa (clula madre).
Constituidos por iones Ca++ y cido dipicolnico, que
le confieren elevado poder de resistencia a las
condiciones hostiles
Pueden ser deformantes o no deformantes

Espora

Flagelos

Lofotricas

Son largos filamentos extracelulares,


helicoidales, compuestos por flagelina.
Es antignico (antgeno flagelar o H)

Monotricas

Peritricas

Fimbrias
Son apndices filamentosos rectos y rgidos, ms cortos y ms
finos que los flagelos, compuestos por la pilina
Existen dos tipos principales de pili: adhesivas y sexuales

Reproduccin

Se
reproducen
por
biparticin o fisin binaria,
en la que a partir de una
clula madre se originan
dos clulas hijas idnticas
a la primera. El tiempo
requerido para formar 2
clulas a partir de una se
denomina
tiempo
de
generacin, que puede ser
de minutos, horas o das.

Nutricin microbiana
Autotrofa y heterotrofa.

Macronutrientes y micronutrientes.
Nutrientes universales y particulares.
Fijacin de N2. Factores de crecimiento

Conceptos
Energa de radiaciones fototrofa

Fotolitotrofa: captacin de energa lumnica con


nutricin exclusiva a partir de sustancias inorgnicas
Fotoorganotrofa: captacin de energa lumnica con
requerimiento de sustancias orgnicas

Energa de sustancias qumicas quimiotrofa

Quimiolitotrofa: energa qumica a partir de sustancias


inorgnicas
Quimioorganotrofa: energa qumica a partir de
sustancias orgnicas

Fermentaciones: regeneracin de
NAD+ y productos de fermentacin

Algunos tipos de fermentacin


Nombre fermentacin
Lctica
Alcohlica
cida mixta

Productos principales
cido lctico
Etanol, CO2
Etanol, succnico, actico,

frmico, lctico, CO2, H2


Butilngliclica

Butilenglicol, CO2

Acetono-butrica

Actico, acetona, butrico,

butanol, CO2, H2

Necesidad de oxgeno
Bacterias aerobias: aquellas que necesitan O2 para su

metabolismo. Realizan la oxidacin de la materia


orgnica en presencia de O2 molecular, es decir, realizan
la respiracin celular.
Bacterias anaerobias: aquellas que no utilizan O2
molecular en su actividad biolgica. La obtencin de
energa la realizan mediante catabolismo fermentativo.
Se pueden distinguir dos grupos dentro de ellas:

Bacterias anaerobias facultativas: pueden vivir en


ambientes con oxgeno o sin l.
Bacterias anaerobias estrictas: slo pueden
sobrevivir en ambientes carentes de oxgeno. Como
ejemplo, Clostridium.

Necesidad de temperatura
Psicrfilos (0 - 20C)

Mesfilos (20 - 40C)


Termfilos (40 - 90C)
La mayora de las bacterias son mesfilas, especialmente
las patgenas humanas que requieren 37C.

Necesidad de pH
La regulacin del pH interno de los MO se realiza por un sistema

de transporte de protones localizado en la membrana citoplsmica


y que es una bomba de protones ATP-dependiente.
El rango de pH ptimo para el desarrollo de los MO est entre 5 y
8, pero pueden vivir en condiciones extremas
acidfilos (pH 1-5)
neutrfilos (pH 5-9)
alcalfilos (pH 9-10)

Conceptos bsicos
Nutricin: captacin del medio de las

sustancias para crecer (= nutrientes).


Los nutrientes se necesitan para

Fines energticos (en quimitrofos)


mantenimiento
Fines biosintticos (anabolismo, reacciones
plsticas)

Catabolismo y anabolismo: papel de la obtencin


de energa en vincular estos procesos

Conceptos bsicos
Macronutrientes: C, H, O, N, P, S, K, Mg
Micronutrientes (elementos traza): Co, Cu, Zn,

Mo, etc
El mundo microbiano es de una sorprendente
diversidad metablica. Algunos metabolismos
solo han evolucionado en procariotas.
Ejemplos:

En hetertrofos: desde metilotrofos (usan C1) hasta los


verstiles Pseudomonas, que usan ms de 100 tipos de C
orgnico, incluyendo hidrocarburos alifticos y cclicos
Los quimiolitoauttrofos crecen en oscuridad en medios a
base solamente de sales minerales
La fijacin de N2 solo ha evolucionado en procariotas

Clases de nutrientes
Universales, requeridos en esta forma por

todos los procariotas: H2O, CO2, PO4 y sales


minerales
Particulares, elementos que se pueden
captar de diferentes maneras, segn
especies:

N: como N inorgnico (oxidado o reducido), como


N orgnico; fijacin de N2 (en ausencia de N
combinado)
S: como S inorgnico u orgnico

Factores de crecimiento

Factores de crecimiento

Son molculas orgnicas especficas que


determinadas bacterias no pueden sintetizar por s
mismas y que deben tomar del medio ambiente:
Son requeridas en muy pequeas cantidades
No tienen funcin plstica, ni sirven de fuente de
energa
Suelen ser coenzimas o sus precursores,
vitaminas,
Ejemplos:

Brucella requieren biotina, niacina, tiamina y pantotnico


Haemophilus necesita hemo y piridn-nucletidos

El agua
Fuentes de agua:

Endgena (procedente de oxido-reducciones)


Exgena (la mayora)

La disponibilidad de agua se mide como actividad

de agua (potencial de agua; aw)

en bacterias oligotrficas, aw est cercano a 1


en bacterias que viven en sangre y fluidos, aw = 0.995
en bacterias marinas, aw = 0.980
ciertos bacilos Gram-positivos aguantan cierta sequedad (aw =
0.950)
microorganismos xerfilos (aw en torno a 0.75)

arqueas halfilas extremas (Halobacterium)


levaduras sacarfilas, que viven en zumos y jugos

El CO2
El CO2 le hace falta a todos los procariotas

los auttrofos lo requieren como fuente de C


quimioauttrofos, con energa de sustancias
qumicas
fotoauttrofos, con energa de la luz

Las arqueas metanognicas lo pueden usar como


aceptor de electrones procedentes del H2. Adems,
algunas lo usan tambin como fuente de C
Los hetertrofos necesitan pequeas cantidades de
CO2 para sus carboxilaciones en rutas metablicas

Fosfatos
El P suele requerirse en forma de

fosfatos

bacterias que usan fosfatos orgnicos


(poseen)
fosfatasas

extracelulares (secretadas) en
Gram-positivas
periplsmicas en Gram-negativas

fosfatos inorgnicos

Sales minerales: cationes


K (en activacin de enzimas; con cidos

teicoicos de Gram+)
Mg (estabiliza ribosomas, membranas y
cidos nucleicos; cofactor en reacciones con
ATP; en clorofilas y bacterioclorofilas)
Ca (cofactor de enzimas como proteinasas)
Fe (en citocromos, FeS-protenas; cofactor en
enzimas)
Oligoelementos o micronutrientes

Mn (cofactor de ciertas enzimas)


Co (vitamina B12)
Zn (estabiliza ADN-polimerasas y ARN-polimerasas)
Mo (en molibdoflavoprotenas, en la nitrogenasa)
Ni (en hidrogenasas)

Nutrientes particulares
Elementos N y S pueden ser cubiertos de

modos distintos, segn capacidades


biosintticas
En forma combinada inorgnica oxidada:

NO3- (accin de nitratorreductasas y nitritorreductasas


asimilatorias) NH3 N orgnico
SO4- (se activa con ATP, y luego se reduce a SO3- y
finalmente hasta SH2 entra a comp. Orgnicos

En forma combinada reducida

N reducido inorgnico: NH4+


S reducido inorgnico: S2-, SHN reducido orgnico: aminocidos, pptidos
S reducido orgnico: cistena

Mediciones de masa bacteriana en


cultivo lquido
Los mtodos mas comunes incluyen:

a) Turbidez: la opacidad del lquido del cultivo


bacteriano- es una estimacin del total de bacterias
[vivas y muertas]- Esta se cuantifica usualmente con
un espectrofotmetro
b) El nmero de bacterias viables en un cultivo- se
determina contando en nmero de colonias que
crecen despus de sembrar un volumen conocido
sobre una placa (conteo en placa UFC). En
ambos casos se grafica el logaritmo de la turbidez o
el nmero de clulas vivas contra el tiempo y a este
se le llama curva de crecimiento. El tiempo de
generacin se define como el tiempo requerido para
duplicar la masa bacteriana del cultivo.

Curva de crecimiento

GENTICA BACTERIANA

GENOMA BACTERIANO
- Macromolcula circular cerrada covalentemente formada
por 2 cadenas de nucletidos unidas por puentes de H.
- La nueva cadena se forma en el mismo sitio en que se
produjo la rotura del ADN bicatenario.
- El crecimiento de la molcula se produce en forma
bidireccional a partir de inicio de la replicacin.
- Interviene ADN polimerasa y debe existir en citoplasma
precursores en forma de sal trifosfato.

PLSMIDOS Y EPISOMAS
- Elementos genticos constituidos por ADN de doble
cadena superenrrollado y cerrado covalentemente.
- Los Episomas pueden integrarse al genoma
bacteriano, quedando bajo su control de replicacin.
- Plsmidos codifican bsicamente 3 grupos de genes:
los de replicacin, los de caract. fenotpicos, los de
formacin de pili.
- En E. coli es bien conocido el plsmido del factor F
(fertility) que se puede transferir y adems integrarse
en el cromosoma-episoma.

ELEMENTOS TRANSPONIBLES:
TRANSPOSONES
Los genes en los seres vivos no son estticos, pudiendo en

algunos casos cambiar su secuencia bajo ciertas condiciones:


ej, secuencias de insercin.
Para la insercin se produce la rotura de las cadenas sencillas,
mediante la enzima transposasas.
Los transposones o genes saltarines son segmentos de ADN
capaces de moverse desde una posicin a otra en el genoma, o
desde el ADN cromosmico a un plsmido o viceversa.
El transposon se une a los extremos de las cadenas sencillas y
se reparan las mismas que resultan de la replicacin.
La importancia de la transposicin viene dada porque estos
elementos mviles pueden insertarse en plsmidos y favorecer
la aparicin de resistencia a antimicrobianos.

VARIACIN GENTICA
Conj. de mecanismos por lo que las bacterias pueden

variar su nivel de informacin:

Mutaciones en el ADN.
Adquisicin de nuevos genes: transformacin, conjugacin,
transduccin y transposicin.

Mutaciones son cambios generalmente letales o

heredables producidos por la alteracin de la


secuencia de bases en el ADN.
Las mutaciones se producen de forma espontnea o
inducida por agentes mutagnicos (Fcos o Qcos)
Los mutgenos fsicos son: la luz UV, rayos X, rayos
csmicos y radiacin gamma.
Los mutgenos qumicos se diferencian en cuatro
grupos: anlogos de bases, agentes alquilantes,
modificadores de bases y agentes intercalantes.

TIPOS DE MUTACIONES
Pueden ser puntuales, en una sola base o por sustitucin,

insercin o deleccin de varias bases.


En sustitucin se denomina transiciones, si se produce un
cambio entre las bases del mismo grupo (pricas o
pirimdicas), y si el fenmeno ocurre a la inversa
transversiones.
Al cambiar la secuencia de los codones pueden traducirse
para aminocidos distintos, obteniendo como resultado una
protena mutada o no afectar a la traduccin.
La mutacin por insercin o deleccin de bases produce
una modificacin de la secuencia de bases en el ADN, que
cambia todos los tripletes a partir de la zona de dao. Se
produce raramente de forma espontnea y es tpica de las
radiaciones ionizantes y de determinados grupos de
agentes qumicos.

Insercin de una base


U
AU G C AG AAAAG G C U G G U C U AC
Met

Gly

Lys

Arg

Leu

Val

Tyr

AU G C AG AAAAG G C U G G U C U U C
Met

Gly

Lys

Arg

Leu

Val

Afecta a un solo aminocido

Isoleu

Deleccin de una base


A
AU G C AG AAAAG G C U G G U C U AC
Met

Gly

Lys

Arg

Leu

Val

Tyr

AU G C G AAAAG G C U G G U C U AC
Met

Arg

Lys

Gly

Trip

Ser

Afecta a varios aminocidos

EXPRESIN FENOTPICA DE LAS


MUTACIONES
Las mutaciones producen en la cepa mutada la prdida o

ganancia de una o varias habilidades, tales como:

Prdida en la utilizacin de una o varias fuentes de C. Son


frecuentes los mutantes defectivos para la lactosa (Lac -)
Prdida de la capacidad de sntesis de uno varios
aminocidos y vitaminas.
La adquisicin de resistencia a un antimicrobiano.
Alteraciones en la composicin de los componentes
superficiales de las bacterias: Glucoclix, flagelos.
Prdidas de la sntesis principalmente de exotoxinas pero
tambin de endotoxinas.

RECOMBINACIN GENTICA
Surge cuando dos elementos genticamente distintos se
combinan en uno. Comprende tres procesos: Transformacin,
conjugacin y transduccin.
La TRANSFORMACIN es la adquisicin de nuevos genes por
parte de algunas especies bacterianas. Fue descubierta por
Griffith en 1928 estudiando la infeccin gonoccica en ratones.
Griffith comprob que la virulencia del neumococo guardaba
relacin con la presencia de una cpsula polisacrida.
La transformacin puede ser natural o artificial. Algunas
bacterias patgenas que se transforman en forma natural son
Streptococcus peumoniae, Neisseria gonorrhoeae y
Haemophilus influenzae.
El desarrollo de la transformacin artificial fue esencial para el
avance de la tecnologa del ADN, tambin llamada ingeniera
gentica.

RECOMBINACIN GENTICA
La CONJUGACIN transferencia de ADN cromosmico o
plasmdico, desde una bacteria donadora a una receptora,
mediante contacto fsico.
En bacterias Gram(-) la transferencia de ADN se hace a
travs del pili.
En bacterias Gram(+), las dadores de ADN forman protenas
de contacto (adhesinas) en la superficie celular para
receptores de superficie (un cido lipoteicoico) de las
clulas carentes de plsmidos, que obran como inductoras
de adhesinas mediante la sntesis de feromonas
(Streptococcus faecalis).
Se han hallado plsmidos R (resistencia a los antibiticos)
conjugadores en Gram(+) como Streptococcus,
Streptomyces y Clostridium.

RECOMBINACIN GENTICA
La TRANSDUCCIN, transformacin de ADN mediada por
bacterifagos. stos pueden infectar a las bacterias con
replicacin masiva de los mismos ciclo ltico- o bien
integrarse en su genoma ciclo lisognico, hacindose en
este ltimo caso ms lenta la liberacin de los fagos.
La integracin del fago puede hacerse en un lugar
predeterminado del cromosoma o bien al azar.
La transduccin generalizada o no especfica es la que
generalmente se produce en el ciclo ltico. Cualquier
secuencia genmica puede quedar unida a la del virus y
convertirse en infectante para otras bacterias.
La transduccin especializada tiene lugar preferentemente
durante el ciclo lisognico y en la misma se transfiere uno o
varios genes concretos. Un ejemplo , es el de fago lambda
en E. coli.