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NUTRICION

MICROBIANA
Nutricin y factores de
crecimiento de microorganismos

Prof. Sandra Rivas Z.

Introduccin

La fisiologa microbiana comprende el estudio de las


funciones realizadas por los mismos.

Los microorganismos (m.o) son muy eficientes


fisiolgicamente, sintetizan en forma muy rpida sus
componentes celulares, siendo la mayora
autosuficientes a pesar de su simpleza estructural.

En los m.o se desencadenan una serie de procesos


qumicos que en conjunto constituyen el

Metabolismo Microbiano

Nutrientes
Son

sustancias que se emplean en la


biosntesis y produccin de energa.

Son

necesarios para el crecimiento


microbiano.

C,O,H,N, S y P
Son
componentes
de
carbohidratos,
protenas y cidos nucleicos.

lpidos,

Carbono
Fuente de energa y/o compuestos para biosntesis.

Nitrgeno y azufre
Se encuentra en las clulas en forma reducida como
grupos amino y sulfhidrilo. Generalmente en forma
reducida, aunque algunos m.o. los asimilan en forma
oxidada. Sulfatos, nitratos, peptonas (N y S) y
cisteina.
NH3)
Fijacin de N2 (N2

La nutricin microbiana consiste en aportar a las clulas los


ingredientes qumicos necesarios para la sntesis de
monmeros, que son los componentes de las macromolculas,
y a su vez construyen las estructuras celulares.

Monmeros

Macromolculas

Estructuras
celulares

Monosacridos

Polisacridos

Pared celular
Glicoclix

Aminocidos

Protenas

Membrana
Ribosomas
Flagelo
Pelos y fimbrias
Enzimas

cidos grasos

Lpidos

Membranas

Bases nitrogenadas

cidos nucleicos

Cromosoma
Ribosomas
Plsmidos

Macronutrientes o macroelementos
Son

captados por los m.o. en


cantidades relativamente grandes
95% de la clula microbiana esta
constituido por C, O, H, N, S, P, K,
Ca, Mg y Fe.

Nutricin microbiana
macronutrientes

Elemento ms abundante en las macromolculas. Constituye el


50% del peso seco de las clulas. Muchos procariotas son
hetertrofos. Necesitan algn tipo de compuesto orgnico como
fuente de carbono para hacer nuevo material celular.
Aminocidos, cidos grasos, cidos orgnicos, azcares, bases
nitrogenadas, compuestos aromticos y otros compuestos
orgnicos pueden ser utilizados por m.o.
Algunos procariotas son auttrofos, capaces de construir todas
sus estructuras orgnicas a partir del CO 2 con la energa obtenida
de la luz o de compuestos inorgnicos.

Nutricin microbiana
macronutrientes

En una bacteria tpica, alrededor del 12% de su peso


seco es N.
Forma parte de las protenas, cidos nucleicos y
otros constituyentes celulares.
En la naturaleza, se encuentra en forma orgnica e
inorgnica. Pero la mayor parte del N natural se
encuentra en forma inorgnica ( NH3, NO3- o N2 ).
La mayora de las bacterias son capaces de utilizar
NH3 como nica fuente de N, y otras muchas pueden
utilizar NO3- .
El N2 puede ser usado como fuente de nitrgeno por
algunas bacterias, las bacterias fijadoras de
nitrgeno.

Nutricin microbiana
macronutrientes
P

El P se presenta en la naturaleza en forma de fosfatos


orgnicos e inorgnicos.
La clula necesita P para la sntesis de cidos nuclecos y
fosfolpidos.

El S es un componente de los aminocidos cis y met y se


encuentra en algunas vitaminas, como tiamina, biotina, cido
lipoico y Coenzima A.
La mayora del S celular procede de fuentes inorgnicas, ya
sean sulfatos o sulfuros.

El K es necesario para todos los organismos. Es cofactor de


muchas enzimas.

Mg

El Mg funciona como estabilizador de los ribosomas, las


membranas celulares y los cidos nuclecos. Tambin se
necesita para la actividad de muchas enzimas.

Ca
Na

El Ca ayuda a estabilizar la pared celular bacteriana y tiene una


funcin importante en la termorresistencia de las endoesporas.
El Na es requerido por algunos microorganismos (halfilos),

K, Ca, Mg y Fe.
Se encuentran en la clula en forma de cationes
necesarios
para
actividades
enzimticas,
sntesis de protenas (K+), termoresistencia de
endosporas (Ca2+), cofactores de enzimas.
Forma complejos con el ATP y estabiliza los
ribosomas y las membranas celulares (Mg2+).
Forma parte de los citocromos, cofactor de
enzimas y de protenas transportadoras de
electrones (Fe2+ y Fe3+).

Nutricin microbiana
Fe
Es fundamental en la respiracin celular.
Forma parte de los citocromos y de protenas que contienen Fe y
S implicados en el transporte de electrones.
En condiciones anaerbicas, el Fe se encuentra en el estado de
oxidacin +2 (Fe+2) y es soluble.
En condiciones aerbicas suele estar en el estado de oxidacin
+3 ( Fe+3) y forma varios minerales insolubles.
Para obtener el Fe de minerales, las clulas producen agentes
quelantes llamados siderforos que solubilizan el Fe y lo
introducen en la clula.
Es necesario en mayores cantidades que otros metales y no se
considera un elemento traza.

Micronutrientes o microelementos u
oligoelementos

Mn, Zn, Co, Mo, Ni y Cu

Son aquellos que se requieren en cantidades tan


pequeas que contaminantes presentes en agua,
y otros componentes del medio de cultivo son
suficientes.

Son normalmente parte de enzimas y cofactores,


facilitan
la
catlisis
de
reacciones
y
mantenimiento de la estructura de protenas.

Nutricin microbiana
Micronutrientes (elementos traza)
Co, Cu, Mn, Mo, Ni, Se, W, V, Zn.
Se requieren en muy pequeas cantidades.
Son tan importantes para el funcionamiento celular
como los macronutrientes.
Muchos son metales que actan como cofactores
de enzimas.
A menudo no es necesario aadirlos a los medios
de cultivo.
Si el agua utilizada para elaborar el medio es
ultrapura se aade al medio una pequea cantidad
de una solucin de metales traza.

Nutricin microbiana
Factores de crecimiento
Son compuestos orgnicos que se necesitan en muy pequeas
cantidades y slo por algunas clulas.
Son vitaminas, aminocidos, purinas y pirimidinas.
La mayora de los microorganismos son capaces de sintetizar estos
compuestos, pero en algunos casos es necesario aadirlos al
medio.
Las vitaminas son los factores de crecimiento que se necesitan con
mayor frecuencia, funcionan formando parte de coenzimas.
Las principales vitaminas requeridas por los microorganismos son:
tiamina (vitamina B1), biotina, piridoxina (vitamina B6) y
covalamina (vitamina B12)

Factores de crecimiento

Son
sustancias
precursoras
de
ciertos
constituyentes orgnicos de la clula que el m.o.
es incapaz de sintetizar, generalmente se
requieren en pequeas concentraciones.

Aas , protenas
purinas y pirimidinas, cidos nucleicos
Vitaminas, grupos prosteticos o centros activos de ciertas
enzimas.

Crecimiento microbiano
Factores fsicos:
a) pH:

Es un parmetro crtico en el crecimiento de


microorganismos ya que cada tipo de microorganismo tiene
un rango de pH en el que puede vivir adecuadamente, fuera
de este rango muere.

Acidfilos: < de 5.4 ej: Lactobacillus, Thiobacillus


Neutrfilos: 5.4 8.5 ej: Escherichia coli
Alcalinfilos: 7 11.5 ej: V. cholerae, Agrobacterium

b) Temperatura
Temperaturas cardinales: T mnima, T ptima, T mxima

Termfilos extremos: >80C

M.O. SEGN LA TEMPERATURA

c) Oxgeno
Aerobios Obligados ej: Pseudomonas
Facultativos ej: Escherichia coli
Microaerfilos ej: Campylobacter
Anaerobios Obligados ej: Bacteroides
Facultativos ej: Lactobacillus

Formas Txicas
Anin superxido: O-2

Perxido de H: H2O2
Radical hidroxilo: HO-

Enzimas
Superxido dismutasa
catalasa, peroxidasa

Crecimiento microbiano

aerobios
estrictos

Microaerofilico

anaerobios
estrictos

anaerobios
facultativos

anaerobios
aerotolerantes

Crecimiento microbiano
Enzimas bacterianas relacionadas con el oxgeno
Tipo de
microorganismo

catalasa Superoxido
dismutasa

comentarios

Aerobios y
anaerobios
facultativos

presente

presente

Toleran el O2
neutralizando
todas sus formas
txicas

Anaerobios
aerotolerantes

ausente

presente

Toleran el O2
neutralizando
parcialmente sus
formas txicas

Anaerobios
estrictos

ausente

ausente

No toleran el O2,
no neutralizan
sus formas
txicas

Crecimiento microbiano
d) Humedad
Mohos 70%
Bacterias 100%
Levaduras 85%
e) Presin osmtica e hidrosttica
Plasmolisis: retraccin del contenido celular cuando el
ambiente es hiperosmtico
ej: uso de sal como preservativo
Bacterias halfilas: NaCl >3.5%

Crecimiento microbiano
Clasificacin microbiana segn:
a. Fuente de energa
Fototrofos: energa solar
Quimiotrofos: compuestos qumicos

b. Fuente de carbono
Autotrofos: CO2
Si utilizan CO2 + Luz solar = fotoautotrofos
Si utilizan CO2 + compuestos qumicos = quimioautotrofos
Heterotrofos: Compuestos orgnicos preelaborados
Si utilizan compuestos orgnicos + Luz solar = fotoheterotrofos
Si utilizan cptos orgnicos + cptos qumicos = quimioheterotrofos

Auxotrofos: M.O. que han perdido la habilidad de sintetizar una enzima


particular, por mutaciones, requieren sustancias especiales.
Prototrofos: Son formas no mutantes, normales o de tipo salvaje

Curva de crecimiento de un m.o. en


medio de cultivo lquido

Crecimiento de poblaciones
Crecimiento exponencial: es el tipo de crecimiento de una
poblacin donde el nmero de clulas se duplica cada
cierto tiempo

Cultivo y crecimiento de
Microorganismos
Medios de Cultivo:
Composicin y preparacin

Cultivo de microorganismos
En la naturaleza:
a)biofilms
b) consorcios

Cultivo de microorganismos
En el laboratorio: Se estudian como
cultivos puros crecidos con abundancia de
nutrientes a muy altas densidades (cultivo
esttico o continuo)

Quimiostato

Cultivos continuos
CULTIVO SINCRONICO
Cultivos en los que todos los individuos de una poblacin
estn en la misma etapa del ciclo celular.
Se utiliza el mtodo de Helmstetter-Cummings

Medios de cultivo
El material alimenticio en el que crecen los
microorganismos es el Medio de Cultivo y el
crecimiento de los microorg. es el Cultivo.

Medios de cultivo
Clasificacin

1. COMPOSICIN:
Definido

Son medios en que se conocen todos


los componentes.

Los medios definidos se emplean


ampliamente en investigacin dado
que con frecuencia se requiere
conocer que est metabolizando el
m.o.

Medio BG-11 para cianobacterias


Cantidad (g/l)
NaNO3

1.5

K2HPO4.3H2O

0.04

MgSO4.7H2O

0.075

CaCl2.2H2O

0.036

cido ctrico

0.006

Citrato amnico frrico

0.006

Na2CO3

0.02

EDTA

0.001

Solucin de metales traza

1 ml/l

1. COMPOSICIN:
Complejo

Son medios suficientemente ricos para


satisfacer las necesidades nutricionales de
diversos microorganismos.
De gran utilidad cuando se desconoce los
requerimientos nutricionales de un m.o. en
particular.

2. CONSISTENCIA:

Slidos
Lquidos
Semislidos

3. Uso:

Enriquecidos

Selectivos

Diferenciales

Mantenimiento

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