Enzimas en Medicina Biotecnología enzimática

Enzimas en el diagnóstico clínico
Existe en el suero sanguíneo una gran cantidad de actividades enzimáticas. De la relación Vmax = k+2 e0 Se deduce que la medida en suero de la actividad enzimática es una medida directa de la concentración de enzima en dicho medio.

Alteraciones de la concentración enzimática en suero, 1 1. Aumentos de la actividad enzimática (a). Incremento patológico de la permeabilidad de membrana (b). Muerte y destrucción celular (c). Inducción enzimática (d). Proliferación celular

Alteraciones de la concentración enzimática en suero, 2 2. Disminuciones de la actividad enzimática (a). Intoxicaciones (b). Enfermedades crónicas (c). Alteraciones del estado nutritivo

Algunas enzimas con interés diagnóstico

1. Aminotransferasas 2. Creatin kinasa 3. Fosfatasa alcalina 4. α-Amilasa 5. Fosfatasa ácida 6. Lactato deshidrogenasa 7. γ-Glutamil transferasa 8. Seudocolinesterasa

Aminotransferasas (Transaminasas)
Catalizan la interconversión reversible de aminoácidos y cetoácidos. Utilizan piridoxal fosfato como cofactor
COOH H2N CH R1 COOH + C O R2 COOH R1 COOH R2

C O + H2N CH

Su papel es importantísimo en el metabolismo de aminoácidos. En clínica se determinan las siguientes: EC 2.6.1.1, Aspartato aminotransferasa (AST, GOT) EC 2.6.1.2, Alanina aminotransferasa (ALT, GPT)

Aspartato aminotransferasa, EC 2.6.1.1 (AST, GOT)
COO+

COOC O + CH2 CH2 COOα-Cetoglutarato

COOC O CH2 COOOxalacetato

COO+

H3N CH CH2 COO
-

H3N CH CH2 CH2 COOGlutamato

+

Aspartato

Aparece en citosol y mitocondrias de tejidos metabólicamente muy activos. Su nivel se eleva en el suero ante afecciones hepáticas y miocárdicas.

Alanina aminotransferasa, EC 2.6.1.2 (ALT, GPT)
COO+

COOC O + CH2 CH2 COOα-Cetoglutarato

COOC O CH3 Piruvato

COO+

H3N CH CH3 Alanina

H3N CH CH2 CH2 COOGlutamato

+

Enzima citosólica, de elevada concentración en el parénquima hepático. Se considera casi específica de lesión hepática.

Creatin kinasa, EC 2.7.3.2 (CK, CPK)
CH3 HN C N CH2 COOH NH2 Creatina ATP ADP HN C CH3 O O-

N CH2 CO O P ONH2

Creatin fosfato

Creatin fosfato es una forma de almacenamiento de enlaces ricos en energía en el tejido muscular. Es el prototipo de los compuestos conocidos como fosfágenos.

+ MM MB BB

La CK se presenta en forma de tres isoenzimas específicas de tejido: - Forma MM (músculo esquelético) - Forma MB (músculo miocárdico) - Forma BB (cerebro) La isoenzima MB es un marcador precoz de infarto de miocardio. Un nivel muy elevado es mal pronóstico

-

Las isoenzimas se distinguen electroforéticamente o por métodos inmunológicos

Fosfatasa alcalina, EC 3.1.3.1
O R O P O- + H2O OO R OH + HO P OO-

Hidroliza con baja especificidad fosfomonoésteres, a un pH alto (de ahí el nombre). No se conoce con certeza cuál es su función metabólica. Aparece en gran cantidad de tejidos.

La fosfatasa alcalina presenta varias isoenzimas: - Ósea - Hepática - Intestinal - Placentaria Las más importantes son las dos primeras. Se pueden distinguir por su termoestabilidad, siendo la ósea más termolábil. Ósea: Propia del tejido óseo en crecimiento y de enfermedades que cursan con neoformación ósea Hepática: Propia de las células del árbol biliar: se eleva en las colestasis (obstrucciones biliares) asociada a partículas de elevado peso molecular

γ-Glutamil transferasa, EC 2.3.2.2 (GGT)
GSH + aa γ-Glu-aa + Cys-Gly

Tiene un importante papel en el transporte de aminoácidos a través de membranas. Aparece, como la fosfatasa alcalina, en obstrucciones biliares asociada a fracciones de alto pesoç molecular. Es una enzima inducible, y su concentración en suero aumenta con xenobióticos (alcohol, drogas, etc.)

α-Amilasa, EC 3.2.1.1
Es una enzima producida por las glándulas salivales y el páncreas. Es un marcador muy importante de afecciones pancreáticas agudas (pancreatitis). Puede incluso aparecer en la orina, debido a su bajo peso molecular (amilasuria)

Fosfatasa ácida, EC 3.1.3.2
O R O P O- + H2O OO R OH + HO P OO-

Hidroliza fosfomonoésteres con baja especificidad. Presenta varias isoenzimas, una de las cuales (Fosfatasa ácida prostática) es un marcador muy fiable del cáncer de próstata y que se emplea en el diagnóstico precoz del mismo.

Enzimas en Terapéutica: producidas por recombinación

Adagen (adenosine deaminase) Enzon, Inc. Autorizado su uso pediátrico en inmunodeficiencias congénitas. Ceredase (alglucerase) Genzyme Corp. Autorizado su empleo en enfermedad de Gaucher tipo 1 Cerezyme (imiglucerase) Genzyme Corp. Autorizado su empleo en enfermedad de Gaucher tipo 1 Pulmozyme (Dnase) Genentech, Inc. Autorizado su empleo en fibrosis quística Activase (recombinant alteplase) Genentech, Inc. Autorizado en infarto de miocardio y embolia pulmonar

Biotecnología enzimática
- Procesos industriales enzimáticos: * Industrias del almidón * Detergentes * Industrias lácteas * Industrias de la fruta * Antibióticos - Biosensores y biochips

Biosensores

Anodo C á to d o M e m b ra n a d e T e flo n

Esquema de un biosensor de glucosa

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