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Procedimento

Antomopatolgico
(Histopatolgico)
Mestranda Alessandra
Chiele Barros

Conceitos
HISTOLOGIA = a cincia que estuda a
estrutura fina dos diferentes rgos e tecidos
vivos, tanto animais como vegetais.
PATOLOGIA = o estudo das doenas.
Pathos= doena, sofrimento / logos=
estudo
- Patologia o estudo da doena desde a causa
primria (etiologia) at seu mecanismo de
produo ( patogenia).

HISTOLOGIA X
HISTOPATOLOGIA

Tipos de materiais

Anatomia-Patolgica
Histopatolgi
co
Exames
Citopatolgic
o
Necroscpico
Histopatologia
Transoperatr X
Citopatologia
io
Fragmento de tecidos
Clulas esfoliadas
Visualizar a arquitetura tecidual
No analisa-se a arquitetura tecidual
Avaliar os critrios de malignidade
Avalia-se alguns critrios de malignidade
Diagnstico definitivo
Exame de triagem
Demorado, mais caro, invasivo
Rpido, barato, indolor e pouco invasivo

Anatomia Patolgica Importncia


Auxlio ao clnico/cirurgio
Diagnstico
Prognstico
Tratamento

Exames complementares:
Imunohistoqumica
Exame transoperatrio
Imunofluorescncia
Microscopia eletrnica

Diagnstico Post-Mortem
Procedimento mdico necessrio para o diagnstico de
doenas ou para estabelecer o estadiamento de tumores,
a partir dos estudos macroscopia, mesoscopia e ao
microscpio de amostras de tecidos e rgos retirados de
pacientes.

Anatomia-patolgica - Tcnica
1. Colheita do material
2. Fixao
3. Clivagem (Macroscopia)
4. Desidratao
Somente aps todos
5. Diafanizao
estes procedimentos
6. Impregnao
a lmina passa ao
7. Incluso
Patologista
para
diagnstico.
8. Microtomia
9. Colorao
10. Montagem

Etapas - Colheita
Bipsia simples amostra de tecido,
retirada por interveno de pequeno porte
(cirrgica, endoscpica, com agulhas
oupunchs, curetagem, etc.);
Bipsia incisional - apenas parte da leso
removida.
Indicada em caso de leses extensas ou de localizao
de difcil acesso.

Bipsia excisional - toda a leso removida.


indicada em leses pequenas e de fcil acesso.

Etapas - Colheita
Bipsia cirrgica (Peas mdias ou
radicais) rgo ou parte de rgo,
retirado por mtodos cirrgicos.
Bipsia anatmica (Peas grandes)
rgos ou partes de rgos, em conjunto
ou no, com maior complexidade,
retirados por mtodos cirrgicos, por
necropsia ou mesmo eliminado eliminado
de forma espontnea (placenta).

Colheita - Cuidados
1) adequada fixao da amostra com a utilizao de
soluo de formalina a 10% 1 a 2 horas por mm
2) alguns tecidos requerem fixadores especiais
(exemplo: soluo de Bouin para bipsia renal ou
testicular)
3) quando h mais de uma amostra, elas devem ser
postas em frascos separados, devidamente identificados
e discriminados de acordo com a exata topografia.
4) no acondicionar em mesmo frasco leses ou tecidos
diferentes ou de diferentes topografias, EXCETO quando
retiradas em monobloco.
5) Disponibilizar laudo anatomopatolgico prvio, alm
de dados clnicos e laboratoriais relevantes
Abralapac, 2014

Erros de colheita

Fragmento no representativo da leso.


Fragmento grande.
Diversos fragmentos sem identificao do local.
Frasco imprprio.
Material em substncia inadequada.
Substncia fixadora mal preparada ou em
pouco volume.
Material sem nome.
Material sem hiptese diagnstica.
Margens no definidas.

Colheita Requisio e Frasco


Identificao do paciente:

Nome
Registro hospitalar
Sexo
Idade
Etnia
Demais dados relevantes...

Identificao do material:

Data da coleta
Local da leso ou rgo(s)...
Poder ser utilizado um esquema (desenho)
Marcao da margem cirrgica, se for o caso
Exames de imagem.

Etapas - Fixao
Fixadores qumicos:

Simples

Compostos

Formol a 10 %
Bicromato de potssio
Bicloreto de mercrio Etanol
Metanol
Lquido de Zenker
Lquido de Helly

Fixao
Caractersticas do bom fixador:
agir rapidamente, matando a clula
no interferir na colorao, aumentando a afinidade
do tecido pelo corante
preservar morfologia e composio qumica teciduais
evitar a autlise e o crescimento de bactrias e fungos
no produzir arterfatos ou estruturas artificiais
ter alto poder de penetrao
endurecer sem deformar
ser de baixo custo / "atxico
ter ao conservante

Fixao - Requisitos
Intervalo mnimo entre a colheita e a fixao
Contato superfcies/ substncia fixadora
Fixador = 20x o volume da pea
Espessura da pea = 1-6 mm

12h
Cadver
48h
E Membros 1 semana

Fresco
Resfriado
Congelado

Etapas - Clivagem
a seco da pea histolgica fixada,
selecionando a rea de maior interesse para
estudo.
Nesta fase feita uma descrio macroscpica
do material.
O que deve ser considerado?
1- Local da (s) pea (s)
2- Quantidade: pea nica/ retalho/ fragmentos
3- Formato: irregular/ arredondado/ ovalado
4- Tamanho: ...x...x... cm / .... cm dimetro
5- Superfcie externa
6- Consistncia aos cortes
7- Superfcie de corte

Clivagem
Superfcie externa:
Tonalidade
Lisa / rugosa
Recoberta
por
pele
(parcial,
total,
tricotomizada)
lcera/ ntegra
Envolta por tecido (do tipo adiposo,
conjuntivo)
Nodular/papilomatosa/deprimida/ulcerada/cros
tosa
Coberta de sujidades/sangue/muco/pus
Consistncia:
Presena
de ectoparasitas
Frivel/
gelatinosa/
bem macia/ macia/ esponjosa
Elstica/ firme-elstica/ firme/ rangente/ ptrea
Ora macia, ora firme/ deixando fluir lquido

Clivagem
Superfcie de corte:
Tonalidade
Irregular/ lisa (compacta)/ fasciculada/ marmreo/
Aspecto fibroso/ untuosa/ lobada ou multilobada
cstica ou policstica (...cm de dimetro)

Contedo dos cistos: consistncia (lquido, gelatinoso,


caseoso, purulento...)
Tonalidade (brancacenta, pardacenta, rsea, enegrecida,
ora.... ora...)
Cortes:
Odor (ptrido, inodoro, amoniacal...)

- Material: Navalha, faca, bisturi


- Tamanho: 2 a 6 mm
- Finalidade

Clivagem - cuidados
Material afiado no serrar
Tamanho adequado do material
cassetes/lamnula
rea representativa do que se quer
estudar- planos de corte
Acondicionamento adequado nos cassetes
mesma consistncia dos fragmentos

Clivagem

Clivagem

Desidratao, diafanao e
impregnao
Desidratao (6h)
Diafanizao (3h)
(clarificao)

Remoo da gua do tecido


por substncias miscveis
com a gua
Remoo
do
lcool
por
substncias miscveis com o
lcool e com a parafina (Xilol)

mpregnao pela parafina (2h) - 56 a 58o C

Etapas - Incluso
Parafina fundida .... 56o C .... solidificar
temperatura ambiente
Molde apropriado
Altura = 1,5 cm
Placa de resfriamento
Obedecer critrios de consistncia e tamanho
da amostra
Verificar a superfcie de corte a ser vista

Etapas - Microtomia
- Cuidados nesta fase ?
-

Navalha afiada
Espessura dos cortes
Tcnico com experincia
Temperatura do banho-maria
Temperatura da estufa

- Nmero de lminas a serem feitas

Etapas - Colorao
Preparo adequado dos corantes
Respeitar os tempos de cada sub-fase da
colorao
Substituio peridica das substncias
utilizadas
corante bsico cora estruturas
- Hematoxilina
Colorao de
rotina: HE
(natural / vegetal)

cidas

Por ex. ncleo


- Eosina corante cido cora estruturas
(artificial)

bsicas
Por ex. citoplasma

Etapas - Coloraes
Coloraes
especiais:

Cristal Violeta
Mtodo de Warthin para Treponema
Hematoxilina Fosfotngstica
Sudo Negro para gorduras
Mtodo de Grocott para fungos
Pigmento de Formol em corte histolgico (remoo)
Mtodos de Ziehl-Neelsen e Fite para bMtodo de Fontana-Masson para melanina
acilos cido-resistentes
Soluo sulfocrmica
Melanina (remoo)
Imunofluorescncia Direta
Azul de Alcian
Mtodo de Grimelius para neurosecreo
Mtodo de Weigert - Van Gieson para e
Azul de Toluidina para substncia metacromtica
lstico e colgeno
Mtodo de Verhoeff para elstico e co Reao de Perls para Hemossiderina
lgeno
Luxol fast blue - Nissl para mielina e neurnios
Tricrmico de Masson
AGNOR
Verde Metil Pironina
DESCALCIFICADORES
Vermelho Congo Alcalino
FERRO COLOIDAL DE MOWRY
Giemsa - mtodo de Wolbach modific
ado
Escarlate R mtodo de Herxheimer
PAS - Reao do cido Peridico - Schif
f
Reticulina - mtodo de Gomori
Mtodo de Von Kossa para clcio

Etapas - Montagem
Blsamo do Canad / Goma de Damar
Cobrir adequadamente os cortes histolgicos com
as lamnulas
Utilizar o Blsamo na diluio correta evitar
bolhas

Anlise microscpica

Anlise microscpica