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Vidal Garca J. A y Payr de la Cruz E.


Instituto Tecnolgico Agropecuario No. 28. Villa Ocuiltzapotln, Centro Tabasco,
Mxico. pteasmec@hotmail.com, epayro@hotmail.com

SUMMARY
Pitahaya (Hylocereus undatus (Haw), Britton & Rose) is a native Mexican plant that has gained
great importance on international markets in recent years, generating foreign currency by the
commercialization of fresh fruit consumption. Under natural conditions the species spreads by
seed but commercially it is vegetatively propagated. However, pathogenic micro-organisms are
disseminated by this last method and cause serious diseases, such as: anthracnose
(Colletotrichum gloeosporioides Penz), bacterial rot (Erwinia carotovora Smith) and fish eye
(Dothiorella spp.). Symptoms are present for years after the establishment of the plantations and,
traditionally, the diseases are controlled by chemical products that negatively affect the ecosystem.
The use of biotechnology presents an alternative solution, by the cultivation and manipulation of
plant tissue in vitro, and clonal propagation of plants selected for pathogen resistance. In our
laboratory, we have developed a model for the regeneration of pitahaya plants, starting from
aseptic cuttings cultivated in vitro under different concentrations of thidiazuron (TDZ). By this
method it is possible to induce callus and then stimulate multiple buds. These buds are separated
and transferred to organic substrates, under natural conditions ex vitro, when they are able to
adapt successfully. The aim of this work is to present a regeneration model and to analyze its
potential application for research, as a tool to obtain disease resistant pitahaya clones by in vitro
selection.

DIAGRAMA DE FLUJO
Explante inicial

REGENERACIN

Induccin de callos y brotes


Experimentos para
regeneracin

INTRODUCCIN
La pitahaya (H. undatus Britton & Rose), es una cactcea tropical
altamente cotizada como fruta extica en el mercado internacional,
por lo que la superficie del Pas dedicada a este cultivo va en
aumento (Lpez, et al. 1996); sin embargo presenta problemas de
enfermedades tales como la bacteriosis (Chi, 1998), que el
mejoramiento gentico por mtodos convencionales no ha podido
superar. El cultivo de tejidos constituye una poderosa alternativa
para la propagacin clonal y el mejoramiento gentico a travs de la
seleccin in vitro y el uso de tcnicas moleculares que han sido
poco explotada en esta especie. Sin embargo se requiere establecer
un sistema de regeneracin y aclimatizacin eficiente, proceso en el
cual los reguladores del crecimiento son determinantes para el
buen xito. En nuestras investigaciones hemos encontrado que el
TDZ es una de las sustancias citocnicas mas activa para el cultivo
de tejidos vegetales en pitahaya, coincidiendo con Mohamed (1994),
Cruz et al., (1998), Payr et al., (1998) y Narvez et al., (2001),
quienes obtuvieron resultados exitosos en la morfognesis y
regeneracin, sin embargo tambin se menciona que el BA es una
citosina muy eficiente en la regeneracin de plantas in vitro, por lo
que en nuestro laboratorio hemos estudiado la efectividad del TDZ
y el BA sobre la regeneracin de plntulas a partir de explantes
aspticos de pitahaya y hemos generado una tecnologa para la
aclimatizacin de los materiales clonados bajo condiciones
rusticas, cuyo potencial de aplicacin favorece la seleccin in vitro,
para la resistencia a enfermedades.

Subcultivo paras estimular


el crecimiento de los brotes

Plntula con sistema radical


Cultivo y proliferacin de callos
Co-cultivos y experimentos para
la seleccin in vitro

Regeneracin de plantas a partir


de tejido resistente

ACLIMATIZACIN
Transferencia a condiciones ex vitro.

OBJETIVO
Describir la metodologa obtenida en nuestro laboratorio para la
regeneracin y aclimatizacin de plantas de pitahaya y su uso
potencial para la seleccin in vitro.

Evaluacin y mantenimiento del cultivo

METODOLOGIA
REGENERACIN.
Planta terminada

De plntulas aspticas se disectan brotes (1cm) y son decapitados


para su cultivo en un medio nutritivo MS (Murashigue y Skoog,
1963), suplementado con diferentes concentraciones de TDZ o BA
(0, 1, 2, 4, 6, 8, y 10 M), sacarosa 30 gr/l, pH 5.7. En cada
contenedor se aplican 20ml de medio y se siembra un explante
individual. A los 24 das 6 M de BA al igual que 1 M de TDZ
inducen 20 brotes respectivamente, al igual que callo, el que es
separado y cultivado de manera independiente donde muestra su
capacidad para la regeneracin de brotes. En esta etapa los callos
pueden ser co-cultivados con filtrados del agente causal de la
bacteriosis y con el tejido sobreviviente estimular la brotacin. Los
brotes de aproximadamente 1 cm de altura, son individualizados y
transferidos a medio de cultivo nuevo donde permanecen por 15
das, se estimula su crecimiento y la emisin de races.
ACLIMATIZACIN.
Plntulas de aproximadamente 2.5 cm de altura, son transferidas ex
vitro a macetas conteniendo una mezcla (v/v) de tierra negra,
cascarilla de cacao (Theobroma cacao L) triturada y arena de ro
previamente esterilizadas en autoclave (121C durante 20 min);
donde permanecen por 30-45 das duplicando su crecimiento y
teniendo una sobrevivencia mayor del 95%.

CONCLUSIONES
La metodologa propuesta tiene una capacidad potencial

para la
produccin de 20 plntulas por explante y una sobrevivencia del
95% durante la etapa de aclimatizacin.

El ciclo de propagacin no rebasa los 6 meses.

BIBLIOGRAFIA
1.- Chi, M.F. 1998. Etiologa y Manejo Integral de la Bacteriosis (Erwinia carotovora Smith) en Pitahaya. Tesis de
Maestra. Centro de Investigacin y Graduados Agropecuarios No. 2. Conkal, Yucatn.
2.- Cruz D.H., Snchez R.D. y Payr C.E. 1998. Efecto del Tiadiazurn Sobre la Morfognesis en Yemas Axilares de
Pitahaya (Hylocerus undatus). IX Congreso Nacional de Investigacin y Desarrollo Tecnolgico Agropecuario.
D.G.E.T.A. Conkal, Yucatn. Pg. 95.
3.- Lpez, A.J.I., Rodrguez, C.M., Olivera, S., y Gonzlez, L.V.W. 1996. reas Potenciales Para el Cultivo de
Maracuy y Pitahaya en Tabasco. Informe Tcnico. INIFAP. Campo Experimental Huimanguillo, Tabasco 7p.
4.- Mohamed, Y.Y. 1994. Micropropagation of Pitahaya (Hylocereus undatus Brtton & Rose). Hort Science. 29:55-59.
5.- Murashigue, T. and F.A. Skoog (1962). A Revised Medium For Rapid Growth and Bioassays With Tobacco Culture.
Physiol. Plant. 15:473-497.
6.- Narvez G.J.L., Bustamante G.M., Payr de la C.E y Gonzlez G.S. 2001. Evaluation of Citokinines on
Regeneration in vitro of Pitahaya (Hylocereus undatus H.). Hort Science 36(3). 458-459.
7.- Payr C.E., Ruiz C.V., Cruz D.H., y Snchez R.D. 1998. Metodologa Para el Establecimiento Asptico de Yemas
Axilares de Pitahaya (Hylocerus undatus). XI Reunin Cientfica-Tecnolgica Forestal y Agropecuaria. I.N.I.F.A.P.
Villahermosa, Tabasco. Pg. 241-245.

A model for the regeneration of pitahaya (Hylocereus


undatus Haw. Britton & Rose) by indirect organogenesis:
Potential use for in vitro selection