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IDENTIFICAO DE LEVEDURAS

CONTAMINANTES EM
FERMENTAO DO TIPO
BATELADA EM USINA DE
LCOOL DE PEREIRA BARRETO SP

Apresentado por: Jssika Fernandes


Rvila Almeida

Introduo

Fatores que interferem nos


processos fermentativos de uma
usina alcooleira:

Qualidade da matria prima


utilizada;

Tempo de fermentao;

Introduo

A contaminao bacteriana amplia o risco de


inibio da levedura Saccharomyces cerevisiae
uma vez que compete pelo substrato, alm de
contribuir para a liberao de metablitos, os
quais podem ocasionar perda na eficincia e
no rendimento da destilaria;

Bom rendimento alcolico;

Garantir um produto de qualidade.

Objetivo

Portanto, este trabalho teve


como objetivo identificar a
presena de leveduras
contaminantes em amostras de
fermento utilizado na safra de
2010 pela Usina Santa Adlia
Pereira Barreto S.P.

Conceitos Iniciais

MOSTO - o termo empregado em tecnologia, para definir


todo o lquido aucarado susceptvel de sofrer fermentao. Na
prtica a mistura de melao (mel final) com gua ou caldo de
cana, que devidamente preparado para sofrer a fermentao
alcolica.

VINHO - o produto resultante da fermentao alcolica. O


vinho centrifugado para separao da levedura e enviado
para as colunas de destilao.

BRIX - So os slidos solveis na cana ou na soluo


aucarada, dos quais uma parte a sacarose. expressada
como percentagem de peso de slidos.

Leveduras

Figura 1 : Clulas vegetativas, colnias de Saccharomyces cerevisiae e o


brotamento em leveduras
Saccharomyces cerevisiae;

podem se reproduzir por esporulao, por brotamento ou por


fisso;
realiza a fermentao do acar com o objetivo de conseguir a
energia qumica necessria sua sobrevivncia;
vinhos, cervejas, pes e etanol atravs de processos fermentativos

Fermentao Alcolica

A fermentao alcolica que ocorre nas dornas de fermentao para


a produo de lcool ocorre em trs etapas distintas.

A pr-fermentao se inicia quando o fermento (leveduras)


adicionado ao mosto devidamente preparado e se caracteriza por
ativa multiplicao das clulas e elevao lenta e gradual da
temperatura do meio.
Aps cinco a seis horas, com pouca espuma, inicia-se a
fermentao principal, que reconhecida pela elevao rpida da
temperatura, queda da densidade do mosto por causa do
desaparecimento dos acares e da formao equivalente do lcool
A ps-fermentao caracterizada pela diminuio lenta e
gradual da temperatura do mosto, diminuio do desprendimento
do gs carbnico e no h formao de espumas.

Fermentao

N, P, Mg,
k
Mn e Zn

Levedur
as

Materiais e Mtodos

Laboratrio de microbiologia da Usina


Santa Adlia;

Levedura comercial do processo (I1);

Leveduras contaminantes (I2 e I3);

Levedura no-fermentativa (I4);

Controle sem levedura (I5).

Materiais e Mtodos

a) WLN Agar - para enumerao de leveduras


totais;

b) WLN Agar + 5 ppm de actidiona para


enumerao e isolamento de leveduras
resistentes a actidiona;

c) Meio de Lisina modificado pela adio de gar para enumerao e isolamento de leveduras
selvagens no pertencentes ao gnero
Saccharomyces;

Materiais e Mtodos

Todos os testes foram realizados em


duplicata;

As placas foram incubadas por sete


dias em estufa de cultura a 35C;

Meio de cultura - meio basal de


Wicherhan.

Materiais e Mtodos

Coloca-se o tubo de Durham invertido dentro


do tubo de cultura e adiciona-se 4 ml da
soluo basal estril. adicionado ao meio 2
ml do acar estril, agitando lentamente.
Aguardou-se um perodo de 24 horas para
inocular as culturas a serem testadas, onde a
levedura preparada em uma soluo salina
estril e inocula-se 0,1 ml. Depois de
transcorrido 24 horas da inoculao
interpreta-se da seguinte maneira: (+) forte:
completo preenchimento do tubo de Durham
com gs, no prazo de 1 a 3 dias; (+W) fraca:
preenchimento parcial de gs; (-) negativa.

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Resultados

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Resultados

Concluso

Castro - utilizaram o WLN para avaliao da diversidade


de leveduras em usinas de acar e etanol;

Campbell - indica a anlise da variao de morfologia e


cor de colnias de leveduras crescidas em meio WLN
como um dos testes para distino de cepas de
Saccharomyces cerevisae. Segundo o autor, este um
teste simples e suficiente para reconhecer similaridades
ou diferenas entre isolados de levedura, apesar de no
fornecer informaes sobre sua identidade.

Concluso

Estes resultados sugerem a utilizao destas


tcnicas para a avaliao da qualidade do etanol
produzido, bem como da seleo de novas cepas
a serem utilizadas no processo;

Com isso conclui-se que a caracterizao de


leveduras contaminantes essencial para
identificar leveduras com boa fermentao ou
leveduras no fermentativas que possam causas
prejuzos na produo de etanol.

OBRIGADA!