¿Que es la Tecnología de Gel?

Sistema utilizado en inmunohematología para investigar e identificar antígenos y anticuerpos antieritrocitarios.

¿Qué estandariza?
•Técnica que estandariza la lectura de la reacción antígeno-anticuerpo con facilidad y repetitividad. •Estandariza el uso de reactivos, tiempos y lecturas disminuyendo sustancialmente la influencia de la mano de operador.

Historia de la Tecnología de Gel
• Nació en 1984 en un pequeño laboratorio del Centro Regional de Transfusión Sanguínea de Lyon, Francia

• Dr. Ives Lapierre.

Historia de la Tecnología de Gel

1985 – 1988

Primer kit comercial, la prueba en gel fue utilizada en el laboratorio del Dr. Lapierre y allí se probó su calidad y eficiencia.

1988
Disponible en Europa

Objetivo
• Encontrar una forma de estabilizar las reacciones de aglutinación 2. reducir los resultados falsamente negativos a consecuencia de una técnica inapropiada 3. crear un método de interpretaciones

Historia
1900 Landsteiner 1939 Levine 1945 Coombs 1951 Pollak 1960 1961 Hässing 1980 1984 Lapierre 1986 2005 Sistema AB0 Factor Rh Pba. de la Antiglobulina Humana Pba. en tubo Pba. de la Antiglobulina Humana Pba. con enzimas Compatibilidad en 3 fases Albúmina LISS Pruebas en gel Normas de transfusión sanguínea Pruebas en gel con mayor sensibilidad DG gel

Fundamento de las Tarjetas de Gel…
La tecnología de microtipificación en gel se basa en la separación por tamaño de los eritrocitos aglutinados, durante un proceso de centrifugación en un gel poroso.

Fundamento del Sistema de Gel
Los eritrocitos van perdiendo elasticidad en sus membranas de forma que los aglutinados grandes quedan atrapados en la zona superior y los pequeños quedan distribuidos a lo largo de la columna.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel

Control de Calidad en las Tarjetas DG-Gel… Una nueva generación

DG Gel®

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel

Cámara de Reacción

Sobrenadante
Gel de Sephadex

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Facilidad de dispensación
Diseño optimo de la cámara de reacción Nuevo soporte Visibilidad y definición

Burbuja de aire Visibilidad de la columna Perfil de 8 columnas

Gel de matriz compacta Fondo en “V”
Resultados claros

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Cámara de reacción - volumen - Forma └┘ - diámetro de la entrada

Facilidad de dispensación Mejora en la fase de sensibilización

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación

Cuello -↓ Ø diámetro estabilidad del “air-gap” resistencia a la caída de los reactivos

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Columna
- Longitud - Diámetro - Segmento circular

Mejora la estabilidad del gel dentro de la columna Visibilidad más clara

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación

Mayor definición de los resultados negativos y débilmente positivos Fondo Vshape en “V”

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
Grifols Gel Technology
Tratamiento técnico en Grifols
-Tamaño partículas más uniforme -Menor rotura de partículas -Distribución homogénea

Alta definición de la reacción de aglutinación

-Volumen regular del gel en las columnas - Velocidad centrifugación menor

- Solución tamponada común para las columnas neutras

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
DG Gel Sol

Diluyente único: Facilita el procedimiento en la preparación de diluciones

Control de Calidad en lasTarjetas DG-Gel… Una nueva generación
1. Cámara de reacción 7. Diluyente único 2. Cuello

3. Columna

5. Grifols Gel Technology

4. V-shape 8 columnas

6. Soporte plástico

Instrumentación

Manual

Semiautomatizado

Automatización Total

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Las Tarjetas de Gel están compuestas de: Gel de Sephadex Reactivos

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Inspección visual En la tarjeta se deberá de observar un volumen uniforme en todos los pocillos y no se deben de observar gotas de gel en la cámara de reacción.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Se debe observar claramente la diferencia entre el Gel y el sobrenadante.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
No se debe observar ningún cambio de coloración en el Gel.

OK

No OK

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
El Gel debe tener una consistencia uniforme libre de burbujas y/o partículas extrañas.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Consideraciones importantes
• Leer el inserto. • Almacenar las tarjetas a la temperatura indicada en el inserto

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
En lo que se refiere a los reactivos contenidos en las Tarjetas de Gel las especificaciones están contenidas en:

NOM-222-SSA1-2002

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Avidez
Es la medida del tiempo en el cual se observa aglutinación al reaccionar un anticuerpo con su correspondiente antígeno

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel

No aplica en Tarjetas de Gel.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Especificidad
Es la capacidad que tiene un anticuerpo de reaccionar solamente con su correspondiente antígeno

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
ABO
Preparar suspensiones de eritrocitos de grupo 0, A1, A2, B, A1B, A2B y variantes débiles del grupo A.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Anti-D
Preparar no menos de 8 muestras de eritrocitos R1, R2, R0, r´, r”, r, Arr y Brr…

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel… Especificidad
Los antisueros contenidos en las tarjetas para sistema AB0 se enfrentarán a :
 Células A  Células B  Células 0

Los antisueros contenidos en las tarjetas para sistema Rh-hr se enfrentarán a :
 Células R1r  Células rr

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel… AB0, Rh
Antísueros Preparación de eritrocitos para AB0 y Rh Preparar la suspensión de eritrocitos al 5.0 %
Suspender 50µl de células en 1ml de diluyente.

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel… AB0, Rh
Antísueros Dosificar 10 µl de la Suspensión al 5.0 % en los pocillos correspondientes

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Sistema ABO
Antísueros
Células B Negativo Pocillo Anti-A Pocillo Anti-B Pocillo Anti-AB Células A1 y A2 Positivo Negativo Células AB Positivo Células 0 Negativo

Positivo

Positivo

Negativo

Positivo

Positivo

Positivo

Negativo

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Sistema Rh
Antísueros Pocillo Anti-D Células R1r Células rr Positivo Negativo Negativo Negativo

Pocillo Anti-D´ Positivo Pocillo Control Negativo

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Sistema ABO Células para grupo inverso

Enfrentar 50 µl células A y B a 25 µl antisueros Anti-A, Anti-B y AntiAB

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Anti-A Células A1 Positivo Anti-B Negativo Positivo Anti-A,B Positivo Positivo

Células B Negativo

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
• Centrifugar 9 min a 1100 rpm • Leer • Lectura de tarjetas exclusiva para el Control de Calidad

POSITIVO

NEGATIVO

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Antíglobulina humana Tarjetas de Coombs

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Lavar eritrocitos sensibilizados y no sensibilizados

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Preparar una suspensión al 0.8 % de eritrocitos sensibilizados Preparar una suspensión al 0.8 % de eritrocitos no sensibilizados

10µl de eritrocitos 1ml de Diluyente

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Dosificar 50 µl de la suspensión de eritrocitos sensibilizados en un pocillo Y 50 µl de la suspensión de eritrocitos no sensibilizados en otro pocillo

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Centrifugar 9 min a 1500 rpm Leer  Lectura de tarjetas exclusiva para el Control de Calidad

Eritrocitos Sensibilizados

Eritrocitos no Sensibilizados

Control de Calidad en las Tarjetas de Gel
Titulación
Es la prueba para medir la máxima dilución un la cual un antisuero reacciona con su correspondiente antígeno. No aplica en Tarjetas de Gel

leopl@prodigy.net.mx

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