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IMUNOENSAIO

Juliana Carmo, Karolline Mota, Pamela Rosa, Tarcisio Correa

Imunoensaios
Baseiam-se

na interao antgeno-anticorpo para medir a


presena/concentrao de um analito

Analito

= antgeno

Exemplos:
o Cromatografia
o ELISA

de afinidade

/ RIA
o Western blotting
o Microscopia de imunofluorescncia
o Hemaglutinao / Tipagem sangunea

Imunoensaios
Utilizam

anticorpos policlonais e monoclonais

Policlonais: obtidos de soro de animais


imunizado com um antgeno (in vivo)
o Monoclonais: obtidos de linhagem de clulas
hbridas (in vitro)
o

Anticorpos

monoclonais ligam-se apenas a


um eptopo de um antgeno pois derivam de
um nico linfcito B atravs da tecnologia de
hibridoma

Anticorpos

policlonais uma mistura de


imunoglobulinas que coletivamente se ligam
a vrios eptopos de um antgeno e so
derivados de diferentes limfcitos B

ELISA
Enzyme-linked

Assay

Immunosorbent

Diversos kits de ELISA esto disponveis


Normalmente

usam placas de policarbonato de 96 poos que j contem o anticorpo


ou antgeno imobilizado

Alta especificidade e sensibilidade


Pode ser quantitativo:
Pode-se

preparer curvas-padro utilizando quantidades conhecidas de Ag

Relativamente baratos e prticos


Comuns para:
Medir

nveis hormonais

Detectar

infeces virais, bacterianas e por mycoplasma

Detectar

alrgenos em alimentos

Medir

anticorpos para detectar doenas autoimunes

Detectar
Medir

drogas de abuso

toxinas em alimentos contaminados

Teste

de triagem pois detecta todos


os indivduos infectados por HIV

Deteco

de Ig contra antgenos
virais (usualmente anti-p24, gp41
e/ou gp120)

Ensaios

de 4 gerao deteco
de antgenos p24, reduzindo a
janela imunolgica em
aproximadamente uma semana

Teste

de anticorpos totais Srgio


Franco R$ 102 (2 dias)

HIV-1

p24 ELISA Kit MBL


International Corp. US$595 (96
ensaios)

IMUNOCROMATOGRAFIA

Metodologia envolvendo matriz de membrana de nitrocelulose ligada a uma tira


de acetato transparente;

Caractersticas: Rpido, qualitativo, triagem, fcil interpretao;

Deteco:

Antgeno ( Ac de captura + Ac marcado especfico);

Anticorpo (Ag especfico + Ac anti-imunoglobulina marcado);

Teste rpido para HIV Kit TR DPP


HIV 1/2 Bio-Manguinhos

Composio do Kit

Positivo

Negativo

Invlido

Resultados falsos
Tratamento
Janela

antiretroviral;

imunolgica;

Crianas

h contra-indicao; (Testes Moleculares);

Patologias;

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