MUESTRA

Objetivo:
Realizar

un anlisis sobre la recogida,

transporte y conservacin de las
muestras microbiolgicas reseando
el material necesario, la tcnica de
obtencin, volumen, nmero y
transporte de cada una de ellas,
segn las distintas localizaciones y
caractersticas especiales de aquellas
o de los microorganismos a investigar

NORMAS
BSICAS
GENERALES
COORDINACION 2007-2008

Solicitud de peticin
Cada

muestra deber ir acompaada de

una solicitud de estudio a ser posible con
copia autocalcable, que deber estar
correcta, legible y completamente
cumplimentada.

Cada

peticin debera suministrar al

laboratorio la suficiente informacin para
que la muestra se procesara
convenientemente y se interpretarn los
resultados

Solicitud debe poseer las siguientes

datos:

1. Filiacin y datos administrativos se deben

especificar el nombre y apellidos, sexo y edad del

paciente, el mdico solicitante y el centro,
servicio, o consulta al que pertenezca,asi como
cualquier otra informacion importante
2. Datos clnicos fecha del comienzo de la
enfermedad,diagnstico clnico de
presuncin.Todos estos datos son de gran inters
para orientar las tcnicas que hay que seguir.
3. Datos de la muestra como fecha de la
obtencin y, en algunos casos, la hora,
naturaleza del producto y exacta localizacin de
la toma, as como el procedimiento de extraccin

CLASIFICACION DE LAS
MUESTRAS CLINICAS.Segn la posibilidad de que las muestras
clnicas para el cultivo bacteriolgico,
estn contaminadas con la FLORA
NORMAL se pueden dividir en tres reas.
Hay distintos procedimiento en cada caso
para ACCEDER al PATOGENO.

A.-MUESTRASDEAREASPROFUNDASY
CERRADASDELCUERPO(DIRECTAS)
La muestra recogida contendr solo el germen
patgeno. Debe atravesarse la piel para llegar
al patgeno utilizando medios quirrgicos o
POR ASPIRACION CON AGUJA. Asepsia
previa. Ej. Sangre.

B.-MUESTRASDEAREASPROFUNDAS
QUECOMUNICANCONELEXTERIOR
(INDIRECTAS).
La muestra seguramente contendr AMBOS
TIPOS DE GERMENES: Patgenos y de la
Flora normal, pues estos ltimos estn en "el
paso" para acceder al patgeno. Ej. Orina por
miccin.

C.-MUESTRASDEAREASSUPERFICIALES

DELCUERPO.
La flora patgena y la no-patgena estn
ASOCIADAS en el lugar de la infeccin; ambos tipos
son recogidos en la muestra. Los grmenes no
patgenos no deben tomarse en cuenta al interpretar
los resultados del cultivo. El instrumento mas til en
la recoleccin de estos especmenes es la TORUNDA,
un aplicador con la punta envuelta en algodn, fibra
de poliester, alginato de calcio, o dacrn.
Ej. : Piel y membranas mucosas.

FARINGEYNASOFARINGE.

PROCEDIMIENTO.- Sedebertomarsoloconunavisinclaradelafaringe,buenaluzy
utilizandounbajalengua.Seevitarrozarotrasestructuras.Prevenir
alpacienteconcurrirenayunassinlavarselosdientesconpasta
dental.
-Sedispondrdedoshisopos,preferentementehumedecidosen
tripticasadesoja.
-Conloshisopossetocarelfondodelagarganta,amgdalas,fosas
tonsilaresycualquierotrolugardondeexistainflamacin,exudadoo
ulceracin.Elfrotedebeserenrgico,delocontrarioserun
espcimendeficienteparaelcultivo.
-Unodeloshisoposseusarparahacertinciones,yelotroparahacer
cultivo.
ElestreptococodelgrupoAeslanicacausabacterianacomnde
faringitis,porellolaestrategiadiagnsticaencultivosdegarganta

Obtencin
de la
Muestra

Obtencin de la muestra

Es imprescindible realizarla en el propio laboratorio

como en exudados genitales que requieren una
observacin en fresco al microscopio y siembra
inmediata.

La toma se efecte en el sitio exacto de la lesin con

las mximas condiciones de asepsia que eviten la
contaminacin con microbios exgenos.

Que la toma sea lo ms precoz posible y que se

prefieran siempre los productos purulentos frescos
lquidos (recogidos por aspiracin directa con
jeringa) o tejidos sospechosos, a las muestras
tomadas con hisopos o torundas con algodn.

Transporte

La mayora de las bacterias resisten bien las

temperaturas bajas, por lo que los productos
pueden mantenerse en la nevera unas horas,
pero el LCR (el meningococo es muy sensible
al fro), exudados, heces y muestras de
anaerobios no deben ser refrigerados (28C).
En todos los casos, el envo de la muestra
debe evitar la salida (y posible
contaminacin) del contenido, por lo que el
recipiente debe de cerrarse con seguridad, o
utilizar un doble recipiente, siempre
quedarn claras la identidad de la muestra,
de la persona a quien pertenece, y los
servicios solicitante y receptor.

ENVASES / CONTENEDORES

Hisopos

ENVASES / CONTENEDORES
Cuando

la viabilidad de las bacterias

es muy escasa o la posibilidad de
desecacin de la muestra es grande
(favorecindose la destruccin
bacteriana) y la toma no puede
realizarse en el mismo laboratorio,
se usarn medios de transporte.

Se

trata de medios, tales como el

Stuart o Amies, que no son
nutritivos, sino que preservan las
bacterias existentes, sobre todo si
son escasas, a la vez que impiden el
crecimiento exagerado de otra flora
bacteriana no deseada.

HEMOCULTIV
O

MATERIAL NECESARIO

Frascos de hemocultivo.

Compresas de goma.
Jeringas y agujas de puncin IV.
Gasas estriles.
Guantes de goma estriles.
Alcohol etlico o isoproplico al 70%.
Solucin Yodada.

VOLUMEN DE LA MUESTRA

Como norma general es adecuado que la

sangre mantenga una proporcin 1:10 con
el medio de cultivo. Es decir, para un
frasco de 100 ml, introducir 10 ml. de
sangre.

En caso de neonatos y nios pequeos en

que no se pueden obtener volmenes
grandes de sangre es suficiente una
cantidad de 1-5 ml, que se introduce en un
solo frasco.

UROCULTIVOS

ORINA OBTENIDA POR MICCIN

MEDIA.

MATERIAL NECESARIO

- Gasas estriles.

- Jabn neutro.

- Recipiente de boca ancha con tapa de

rosca, hermtico y estril.

- Bolsas de plstico o colectores estriles

para nios.

OBTENCION DEL
PRODUCTO.

La muestra idnea es la primera

miccin de la maana, ya que
permite la multiplicacin de
bacterias durante la noche.

Tcnicas para mujeres

Se lavar las manos cuidadosamente con
agua y jabn, las enjuagar con agua y las
secar con una toalla limpia.
Se separarn los labios mayores y
menores, y los mantendr separados en
todo momento hasta que se haya recogido
la orina.
.
Se indicar a la paciente que orine
desechando los 20-25 primeros mililitros,
tras lo cual y sin interrumpir la miccin, se
recoger el resto de la orina en el
recipiente.

Tcnica para hombres

- Lavado de las manos con agua y jabn.

- Retraer completamente el prepucio, que

se mantendr as en todo momento, hasta
que se haya recogido la orina.

- Limpiar el glande con jabn neutro.

- Se pedir al paciente que orine

desechando los primeros 20-25 mililitros
para, sin interrumpir la miccin, recogerse
el resto de la orina en el recipiente estril.

Tcnica para nios

En nios y nias mayores la orina se
recoge de
forma similar a los adultos.
En nios y nias ms pequeos, la orina se
recoger en colectores o bolsas estriles
especialmente diseadas para ellos
Lavado cuidadoso de los genitales y rea
perineal igual que en los adultos.

OBSERVACIONES

- En pacientes ingresados con imposibilidad de

recoger la muestra por s mismos, se realizar
sondaje vesical por personal sanitario experto
con las medidas aspticas oportunas.

- Para la investigacin de anaerobios es

necesario que la orina se obtenga por puncin
suprapbica.

- Para la bsqueda de micobacterias, la orina se

recoge durante tres das consecutivos. En este
caso el volumen de orina debe ser minimo entre
100-150 ml. y se elegir preferentemente la
primera miccin de la maana.

PUNCION SUPRAPUBICA
MATERIAL NECESARIO.
- Gasas.
- Alcohol 70 o
solucin yodada.
- Jeringa o aguja
estril.
- Recipiente estril.

COPROCULTIVO

MATERIAL NECESARIO

-Recipiente de boca ancha para recoger las

heces, tipo orina,o bacinilla.
No es necesario que est estril, slo es preciso
que est limpio..
-. Puede ser vlido el empleado para recoger
orinas, aunque es preferible utilizar un recipiente
que tenga esptula para tomar la muestra de las
heces.
-Medios o sistemas de transporte para heces. Se
emplean slo si la remisin de la muestra se
retrasa y los distribuye el laboratorio de
Microbiologa. Existen sistemas comerciales para
bacterias (Cary-Blair o modificaciones o solucin
de glicerol tamponado)

OBTENCIN DE LA MUESTRA

Se seleccionan zonas donde haya sangre,

moco o pus.
No son vlidas las muestras contaminadas
con orina. No debe utilizarse para la
recogida papel higinico, porque suelen
tener sales de bario que inhiben algunas
bacterias enteropatgenas.

VOLUMEN MNIMO.

Muestras del tamao de una nuez son muy

adecuadas pues permiten realizar la
mayora de las investigaciones posibles.
Heces lquidas: entre 5 y 10 ml

HISOPOS RECTALES
MATERIAL NECESARIO.
- Hisopos rectales con medio de transporte.
OBTENCIN DE LA MUESTRA.
En general debe desaconsejarse su uso, aunque
hay que recurrir a l si no se puede disponer de
heces, como en neonatos o adultos debilitados. Se
ha demostrado eficaz en el aislamiento de
Neisseria gonorrhoeae, Campylobacter spp.,
Shigella spp.
TRANSPORTE.
Se introducen inmediatamente en medio de
transporte adecuado (Stuart, Cary-Blair, para
anaerobios en el caso de C. difficile ), pues as se
protege a las bacterias de la desecacin y se enva
rpidamente al laboratorio

TRACTO GENITAL
TRACTO GENITAL FEMENINO.
1. Exudados vaginales.
2. Exudados cervicales.
3. Exudados uretrales.
4. Exudados rectales.
5. Endometrios.
6. Trompas y ovarios.
7. Vulva.
8. Lesiones cutneomucosas para
campo
oscuro (chancros).
9. Ganglios linfticos inguinales.
10. Lquido amnitico.
11. Productos de la concepcin.

TRACTO GENITAL
MASCULINO.
1. Exudados uretrales.

2. Exudados rectales.
3. Ganglios linfticos
inguinales.
4. Lesiones de campo oscuro
(chancros).
5. Muestras para el estudio de
la prostatitis

Muestra del tracto Genital

Femenino

ENDOCERVICALES
MATERIAL NECESARIO.

Camilla ginecolgica.
- Espculo estril.
- Torundas secas sin medio de transporte
(para limpieza de exocrvix).
- Torundas de alginato clcico o Dacron con
medio de transporte tipo Stuart-Amies.
Con la paciente en posicin ginecolgica
introducir suavemente el espculo sin
lubricar (o lubricado con agua templada).
Se limpiar el exocrvix de secreciones
vaginales, con una torunda seca.
Bajo visin directa se comprimir
cuidadosamente el crvix con el espculo y
se introducir una torunda en el canal
endocervical con un suave movimiento de
-

rotacin.

. EXUDADOS
URETRALES
MATERIAL NECESARIO.

- Torundas uretrales finas, con

varilla de alambre no
excesivamente flexible, de alginato
clcico o Dacron con medio de
transporte tipo Stuart-Amies.

- Gasas estriles.

TCNICA.

Limpiar cuidadosamente
la mucosa circundante
con gasas estriles.
Introducir la torunda
suavemente con un
movimiento de rotacin
hasta penetrar unos 2 cm
dentro de la uretra (3-5
cm para la investigacin
de Chlamydia trachomatis
). (Vase figura) Repetir
operacin con una
segunda torunda.
Cuando no haya
suficiente exudado,
puede estimularse
mediante un masaje
suave de la uretra contra
la snfisis del pubis.

EXUDADOS RECTALES.
MATERIAL NECESARIO.
-Guantes de goma.
-Torundas con un medio de transporte
(Stuart-Amies).
TCNICA.
Introducir una torunda suavemente a
travs del esfnter anal.
Rotar contra las criptas rectales, dejar 1030 segundos para que se absorvan los
microorganismos y extraer.
Se intentar evitar el contacto con
materia fecal.
Cuando la torunda salga manchada de
heces, deber tomarse una nueva muestra