UNIVERSIDADE FEDERAL DE GOIS

INSTITUTO DE CINCIAS BIOLGICAS

DEPARTAMENTO DE BIOQUMICA E BIOLOGIA
MOLECULAR

BIOPROCESSOS I ENZIMOLOGIA
CURSO: BIOTECNOLOGIA

OBJETIVOS:
1- Introduzir conhecimentos bsicos sobre a estrutura e funes
das enzimas.
2- Compreender os mecanismos de catlise enzimtica e a
influncia de fatores externos.
3- Assimilar os conhecimentos referentes produo de enzimas
a partir de
microorganismos (seleo dos microrganismos,
fases do processo, purificao
dos produtos).
4- Conhecer exemplos de enzimas com importncia tecnolgica e
suas aplicaes nos diferentes ramos da produo industrial.
5- Fornecer o conhecimento bsico sobre os mecanismos de
imobilizao de enzimas,
principais vantagens e aplicaes na
indstria.
EMENTA:
1- Introduo ao estudo de enzimas.
2- Extrao e purificao de enzimas microbianas.
3- Bioprospeco.
4- Utilizao de resduos agro-industriais para a produo de
enzimas microbianas.
5- Imobilizao de enzimas em suportes insolveis.

BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA:
1- BORZANI, W.; SCHIMIDELL, W.; LIMA, U.A.; AQUARONE, E.:
Biotecnologia Industrial. Volume I - Fundamentos, Ed. Edgard
Blucher, SP, 2011.
2- SCHIMIDELL, W.; LIMA, U.A.; AQUARONE, E.; BORZANI, W.:
Biotecnologia Industrial. Volume II Engenharia Bioqumica. Ed.
Edgard Blucher, SP, 2007.
3- LIMA, U.A.; AQUARONE, E.; BORZANI, W.; SCHMIDELL, W.:
Biotecnologia Industrial. Volume III Processos fermentativos e
enzimticos. Ed. Edgard Blucher, SP, 2007.

BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTAR:
4- CABRAL, J.M.S.; AIRES-BARROS, M.R.; GAMA, M.: Engenharia
Enzimtica. Ed. Lidel, Lisboa, 2003.
5- LEHNINGER, A.L.; NELSON, D.L.; COX, M.M.: Princpios de
Bioqumica. Ed. Artmed, RS, 2006.

6- Textos de peridicos recentes.

BIOPROCESSOS I ENZIMOLOGIA
CAPTULO 1
INTRODUO AO METABOLISMO
PRINCPIOS DE BIOENERGTICA

METABOLISMO
ATIVIDADE CELULAR ALTAMENTE
COORDENADA, ONDE MUITOS SISTEMAS MULTIENZIMTICOS
COOPERAM PARA:
OBTER ENERGIA (SOLAR OU QUMICA)
CONVERTER AS MOLCULAS DE NUTRIENTES EM MOLCULAS COM
CARACTERSTICAS
PRPRIAS DE CADA CLULA
POLIMERIZAR PRECURSORES MONOMRICOS EM
MACROMOLCULAS
SINTETIZAR E DEGRADAR BIOMOLCULAS NECESSRIAS PARA AS
FUNES CELULARES
ESPECIALIZADAS
COMPOSTOS
ORGNICOS
O
2

AUTOTRFICOS
FOTOSSINTETIZ
ANTES

HETEROTRFI
COS
CO
2

Macromolcul
as celulares
Protenas
Polissacardeos
Lipdeos
cidos
nuclicos
A
N
A
B
O
L
I
S
M
O
Molculas
precursoras
Aminocidos
Monossacarde
os cidos
graxos Bases
nitrogenadas

ADP
HPO42NAD+
NADP+
FAD
ATP
NADH
NADPH
FADH2
Energia
qumica

Nutrientes
energticos
Carboidratos
Gorduras
Protenas
C
A
T
A
B
O
L
I
S
M
O
Produtos
finais sem
energia
CO2
H2O
NH3

CATABOLISMO X ANABOLISMO
EXISTEM ROTAS RECPROCAS, COM TRECHOS IGUAIS, MESMAS
ENZIMAS, MAS NUNCA
COMPLETAMENTE IDNTICAS
PELO MENOS UMA DAS ETAPAS CATALISADA POR ENZIMAS
DIFERENTES NOS SENTIDOS
CONTRRIOS
PELO MENOS UMA DAS REAES ESPECFICAS DE CADA SENTIDO
DEVE SER
TERMODINAMICAMENTE MUITO FAVORVEL
GERALMENTE A REGULAO DE ROTAS CONTRRIAS ACONTECE
EM COMPARTIMENTOS
CELULARES DISTINTOS
REGULAO EM VRIOS NVEIS, DENTRO E FORA DA CLULA
- CONCENTRAO DO SUBSTRATO
- REGULAO ALOSTRICA
- HORMNIOS, FATORES DE CRESCIMENTO, MENSAGEIROS
INTRACELULARES,
FOSFORILAO
- SNTESE OU DEGRADAO DE ENZIMAS

OS ORGANISMOS VIVOS DEVEM:

OBTER ENERGIA E MATRIA-PRIMA DO SEU ENTORNO, PARA
CONSTRUIR AS PRPRIAS MOLCULAS E MANTER A ORDEM DE
SUAS ESTRUTURAS
REALIZAR TRABALHO BIOLGICO EM TEMPERATURA CONSTANTE

G = H - TS
Variao da energia
Variao da
Variao da entropia.
livre.
entalpia. - Calor
-Medida da
- Energia disponvel
total liberado ou
desorganizao.
para realizar
absorvido numa
- Energia dissipada (no
trabalho.
reao.
aproveitada).
- Prediz se uma
reao favorvel.
T = 25C (298 K)
G (Var. Energia Livre Padro)
Todos os Produtos e
Reagentes: 1 M
P = 1 atm. (101,3 Kpa)
[H+] = 10-7 M (pH = 7)
G (Var. Energia Livre Padro
[H2O] = 55,5 M
Aparente)
[Mg2+] = 1 mM
T = 25C; P = 1 atm.

aA + bB

cC + dD

Keq
=

[C]c x [D]d
[A]a x [B]b

G = - RT x
ln Keq
Keq = 1
Keq > 1
Keq < 1
DESFAVORVEL

G = 0
G (-)
G (+)

REAO FAVORVEL
REAO

G REAL: NAS CONCENTRAES DE REAGENTES E PRODUTOS, E

TEMPERATURA REAIS
[C]
TENDE A 0 NA MEDIDA QUE A REAO SE APROXIMA AO
[D]
EQUILBRIO
[A]
[B]
G = G + RT x ln
G ( - ) E ENERGIA DE ATIVAO ELEVADA REAO LENTA
CATLISE
NO ALTERA O EQUILBRIO

ENZIMA

METABOLIS
MO
ANABOLISMO

CATABOLISMO

REAES QUMICAS
REAES QUMICAS PARA
PARA A SNTESE DE
A DEGRADAO DE
MACROMOLCULAS, E
NUTRIENTES, OBTENO
ESTRUTURAS
DE ENERGIA, OBTENO
BIOLGICAS. CONSUMO
DE MATRIAS-PRIMAS
DE ENERGIA
REAES MUITO COMPLEXAS, A POSSIBILIDADE DE
ACONTECEREM ESPONTANEAMENTE EM TEMPERATURA
AMBIENTE MUITO BAIXA
G

ENERGIA DE ATIVAO (para atingir o estado transitrio):

G
A+B
C+D
C+
A+
D
B
G (+):
G (-):
ENDERGNI
EXERGNI
A+
CA
C + CA
B
D

G1 ( - )
REAO
FAVORVEL

Ex: ATP + H2O ADP + Pi

( - 30,5
kJ/mol)

G2 ( + )
REAO
DESFAVORVEL

Ex: Glicose + Pi Glicose-6-fosfato

(13,8
kJ/mol)

G1 + G2
(-)
REAO
G = - 16,7
FAVORVEL
kJ/mol

EM CONDIES BIOLGICAS, AS REAES NO CATALISADAS

TENDEM A SER LENTAS
A MAIORIA DAS MOLCULAS BIOLGICAS SO ESTVEIS EM pH
NEUTRO, TEMPERATURA
MODERADA E AMBIENTE AQUOSO
(INTERIOR DAS CLULAS)
MUITAS REAES BIOQUMICAS REQUEREM DE EVENTOS OU
SITUAES
DESFAVORVEIS OU IMPROVVEIS NO AMBIENTE
CELULAR (FORMAO DE
INTERMEDIRIOS INSTVEIS,
COLISO DE DUAS OU MAIS MOLCULAS NA
ORIENTAO
PRECISA
MUITAS REAES NO OCORREM COM UMA VELOCIDADE TIL,
SEM CATLISE:
- DIGESTO DE ALIMENTOS
- TRANSMISSO
DE SINAIS NERVOSOS
AS ENZIMAS CONTORNAM
ESSES PROBLEMAS
- CONTRAO
MUSCULAR
OFERECENDO
UM AMBIENTE ESPECFICO
DENTRO DO QUAL UMA DETERMINADA REAO
POSSA ACONTECER MAIS RAPIDAMENTE (STIO
ATIVO)

BIOPROCESSOS I ENZIMOLOGIA
CAPTULO 2
ESTRUTURA E FUNES DAS ENZIMAS
PRINCPIOS DE CINTICA ENZIMTICA

ENZIMAS:
CATALISADORES ORGNICOS PRODUZIDOS PELO ORGANISMO
VIVO
DIMINUEM A ENERGIA DE ATIVAO DA REAO, FAVORECENDO
QUE A MESMA
ACONTEA A UMA TEMPERATURA MENOR
(AMBIENTE)
FUNCIONAM DENTRO E FORA DAS CLULAS
POSSUEM ESTRUTURA PROTICA
APOENZIMA
HALOENZIMA
+ COENZIMA
CENTRO ATIVO
COFATORES (SUBST.
ATIVIDADE CATALTICA
(PROTENA)
ORGNICAS OU ONS
METLICOS)

SUBSTR
ATO

COFAT
OR
APOENZI
MA

ENZIMA
ATIVA
(HALOENZI
MA)

ATIVIDADE BIOLGICA: CAPACIDADE DE REAGIR COM O

SUBSTRATO
(FORMAO DE COMPLEXOS)
DEPENDE DE:
ESTRUTURA DA PROTENA (NMERO E ARRANJO DAS CADEIAS
POLIPEPTDICAS)
NATUREZA DO SUBSTRATO
ESTRUTURA DO COFATOR
PRESENA DE FATORES DESNATURANTES (CALOR, PH, ETC.)
PRESENA DE ATIVADORES OU INIBIDORES DA ENZIMA
UNIDADES DE ATIVIDADE ENZIMTICA:
QUANTIDADE DE SUBSTRATO TRANSFORMADO EM UM
INTERVALO DE TEMPO,
POR UMA QUANTIDADE (PESO)
DETERMINADA DE ENZIMA
ESPECIFICIDADE: CAPACIDADE PARA RECONHECER UM
DETERMINADO SUBSTRATO
* SISTEMA CHAVE FECHADURA (FISCHER, 1894)
* MODELO DO AJUSTE INDUZIDO

ESPECIFICIDADE (CONT.)
a)ESPECIFICIDADE BAIXA: ENZIMAS QUE RECONHECEM UM TIPO
DE LIGAO
EX: LIPASE (HIDROLISA LIGAES STER)
b) ESPECIFICIDADE ABSOLUTA: QUANDO A ENZIMA ATUA SOBRE
UM DETERMINADO COMPOSTO. EX: UREASE
c) ESPECIFICIDADE DE GRUPO:
EX: QUIMIOTRIPSINA
(Met, Asp, Gln, Leu)
SOBRE ALDOSES, CETOSES, ETC...
d) ESTEREOESPECIFICIDADE: ENZIMAS QUE RECONHECEM UM
DETERMINADO ISMERO
L ou D; ou ;
EX: PROTEASES (LIGAES PEPTDICAS DE L
AMINOCIDOS)
AMILASE (HIDROLISA AMIDO, MAS NO CELULOSE)
e) ESPECIFICIDADE ORGNICA: DEPENDE DA ORIGEM
EX: INSULINA (HUMANA, PORCO, CAVALO,...)
AMILASE (DE SALIVA, DE PNCREAS,...)

CLASSIFICAO DAS ENZIMAS:

1- XIDO REDUTASES: RELACIONADAS COM PROCESSOS DE
OXIDAO REDUO, RESPIRAO, FERMENTAO, TRANSPORTE
DE ELTRONS, PRTONS E OXIGNIO
EX: GLICOSE OXIDASE, CATALASE, PEROXIDASE,
CITOCROMO OXIDASE, ...
2- TRANSFERASES: TRANSFERNCIA DE GRUPOS DE UM
COMPOSTO PARA OUTRO
EX: TRANSAMINASES, TRANSALDOLASES,
FOSFORILASES, ...
3- HIDROLASES: RESPONSVEIS PELA HIDRLISE DE MOLCULAS
EX: LIPASE (BAIXA ESPECIFICIDADE), a AMILASE,
PROTEASES (ALTA ESPECIF.)
4- LIASES: REMOVEM GRUPOS FUNCIONAIS
EX: DECARBOXILASES (METABOLISMO DOS AMINOCIDOS)

DEGRADAO (HIDRLISE)

a) Substrato
b) Enzima
c) Produtos

SNTESE

E +
P

ES

ENZIMA
COMPLEME
TAR AO:
ESTADO
TRANSITRIO

SUBSTRATO

COENZIMAS
(ATP,
NAD/NADH+)

ENERG
IA

INTERAES
FRACAS (-NH3+,
-COO-)

LIGAES
COVALENTES

CINTICA DAS REAES ENZIMTICAS:

FUNO DAS ENZIMAS: CATALISAR REAES QUMICAS
OS ESTUDOS SO BASEADOS EM MEDIDAS QUANTITATIVAS DA
VELOCIDADE DA REAO
CATALISADA E DOS FATORES QUE A
INFLUENCIAM
TEORIA DE MICHAELIS E MENTEN:
FORMAO DE UM COMPLEXO ENZIMA SUBSTRATO
(TRANSITRIO)

ES

k1

ES

k3

k
k
4
2
ES: CHAMADO COMPLEXO ATIVADO E POSSUI O NVEL DE
ENERGIA NECESSRIO PARA
QUE A REAO ACONTEA
k1, k2, k3, k4: CONSTANTES DE VELOCIDADE DA REAO
NOS PRIMEIROS INSTANTES DA REAO, A VELOCIDADE DE
FORMAO DO COMPLEXO ES
IGUAL VELOCIDADE DE
DECOMPOSIO (ESTADO DE EQUILBRIO)
k1 [E] [S] + k4 [E] [P] = k2 [ES] + k3 [ES]
ZERO
k1 [E] [S] = k2 [ES] + k3 [ES]
[ES]

ou

k4 [E] [P]
k1 [E] [S] = (k2 + k3)

[E]
=
k2 + k3
ou
[E]
= k2 + k3
KM:[S]
CONSTANTE
DE MICHAELIS
[ES]
k1 [S]
k1
-[ES]
MENTEN
[ET] = [E] + [ES] ou [E] = [ET] [ES]
KM = [ET] - 1 [S]
[ES]

A VELOCIDADE DE FORMAO DO PRODUTO FINAL (P) DEPENDE

DA CONCENTRAO DO
COMPLEXO (ES)
UM AUMENTO DA CONCENTRAO DO SUBSTRATO (S) IR
PROVOCAR UM AUMENTO
NA VELOCIDADE DE DECOMPOSIO
DO COMPLEXO ATIVADO (ES)
V = k3 [ES]

VM = k3 [ET]

V=

VM [S]
KM = VM [S]
KM + [S]
V

- [S]

EQUAO DE MICHAELIS MENTEN: RELAO ENTRE A

CONCENTRAO DE SUBSTRATO
VELOCIDADE
V DE UMA REAO ENZIMTICA

EA

VM
A
EXTRAPOLAO
DE VMAX NO
EXATA

VM/2

KM

[S
]

MODIFICAO DE LINEWEAVER BURK: UTILIZA A EQUAO DE

MICHAELIS MENTEN
REPRESENTADA COM
OS VALORES INVERSOS (RECPROCOS)
KM = VM [S]
V

[S]
1 = KM +
[S]
V
VM [S]

=
1

V
1/V

1/VM

- 1/KM

KM

VM [S]
[S]

KM/VMAX

1/
[S]

ATIVIDADE CATALTICA
ESTRUTURA
TRIDIMENSI
ONAL

ESTABILIDADE E
ESPECIFICIDADE

ASSEGURADA POR:
- LIGAES DE
HIDROGNIO
- INTERAES
HIDROFBICAS
- PONTES DISSULFETO
- LIGAES INICAS
- FORAS DE VAN DER
WAALS
AFETADA POR:
- TEMPERATURA
- pH

FATORES QUE INFLUENCIAM A VELOCIDADE DAS REAES

ENZIMTICAS
(CONSIDERANDO QUE [S] SUFICIENTE PARA ATINGIR A VMAX)
1- pH:
TODA ENZIMA POSSUI UM pH TIMO (VALOR DE pH ONDE A
ATIVIDADE MXIMA)
NA MAIORIA DAS ENZIMAS O pH TIMO EST NA FAIXA DE 4,5
8,0
A
VALORES EXTREMOS DE pH DESNATURAM AS PROTENAS,
PROVOCANDO A INIBIO (REVERSVEL) OU A INATIVAO
(IRREVERSVEL) DAS ENZIMAS

pHo

p
H

FATORES QUE INFLUENCIAM A VELOCIDADE DAS REAES

ENZIMTICAS
2- TEMPERATURA:
TODA ENZIMA POSSUI UMA TEMPERATURA TIMA (ONDE A
ATIVIDADE MXIMA)
NA MAIORIA DAS ENZIMAS A TEMPERATURA TIMA EST NA
FAIXA DE 36 40 C
A VELOCIDADE DAS REAES ENZIMTICAS AUMENTA COM A
TEMPERATURA AT ATINGIR UM VALOR MXIMO (To), A PARTIR
DA QUAL DESCE RPIDAMENTE
DEVIDO DESNATURAO DA
PROTENA
A PELO CALOR
NAS TEMPERATURAS PRXIMAS AO CONGELAMENTO, A
ATIVIDADE ENZIMTICA
DIMINUI SIGNIFICATIVAMENTE, MAS
NO DETIDA TOTALMENTE (NO H
DESNATURAO)

To

FATORES QUE INFLUENCIAM A VELOCIDADE DAS REAES

ENZIMTICAS
3- GUA:
O TEOR ELEVADO DE GUA FAVORECE AS REAES ENZIMTICAS
(A MOBILIDADE DO SUBSTRATO IMPORTANTE)
EM BAIXA UMIDADE A ATIVIDADE DIMINUI, MAS AS ENZIMAS NO
SO COMPLETAMENTE
INATIVAS
AS ENZIMAS SO MAIS RESISTENTES AO CALOR EM AUSNCIA DE
GUA
4- PRESSO:
POUCO SIGNIFICATIVA
SOMENTE PRESSES MUITO ELEVADAS (INEXISTENTES NOS
SISTEMAS VIVOS) PODEM
PROVOCAR A DESNATURAO DAS
ENZIMAS
5- FATORES QUMICOS: ATIVADORES E INIBIDORES
a)ATIVADORES: EM GERAL, SO ONS INORGNICOS OU
ORGNICOS DE PEQUENO
TAMANHO QUE CONTRIBUEM PARA A
FORMAO DO COMPLEXO ATIVADO, SEM PARTICIPAREM DA

b) INIBIDORES: COMPOSTOS CAPAZES DE COMBINAR-SE COM

DETERMINADAS ENZIMAS, LIMITANDO SUA AO
INIBIO
REVERSVEL
ENTRE A ENZIMA E O
INIBIDOR EXISTE UM
EQUILBRIO CARACTERIZADO
POR UMA CONSTANTE DE
AFINIDADE (K)
INIBIDORES COMPETITIVOS:
-COMPETEM COM O SUBSTRATO
PELO STIO ATIVO DA ENZIMA
-POSSUEM ESTRUTURAS
SEMELHANTES S
DO
SUBSTRATO

IRREVERSV
EL
A ENZIMA E O INIBIDOR
FORMAM UM COMPOSTO
ESTABILIZADO POR
LIGAES COVALENTES
INIBIDORES NO COMPETITIVOS:
-COMBINAM-SE COM OS GRUPOS
ATIVOS
DA ENZIMA,
IMPEDINDO A FORMAO DO
COMPLEXO ATIVADO
-COMBINAM-SE COM O COMPLEXO
ATIVADO,
IMPEDINDO A SUA
TRANSFORMAO EM
ENZIMA E
PRODUTO

INIBIDORES
COMPETITIVOS:

INIBIDORES NO
COMPETITIVOS:

1/
V

1/V

1/VMAX
1/VMAX

1/KM

A VELOCIDADE DA REAO
PODE SER RECUPERADA,
AUMENTANDO A
CONCENTRAO DE
SUBSTRATO [S]

1/
[S]

1/KM

O AUMENTO DA
CONCENTRAO DE
SUBSTRATO [S] NO TER
NENHUM EFEITO SOBRE A
VELOCIDADE DA REAO

1/
[S]

REGULAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA

COORDENAO DE NUMEROSAS VIAS
METABLICAS
RESPOSTA ADEQUADA S MUDANAS DO
AMBIENTE
CRESCIMENTO E DIFERENCIAO HARMNICA DO
ORGANISMO
CONTROLE DA DISPONIBILIDADE DE ENZIMAS (A VELOCIDADE DE
SNTESE E
DEGRADAO DETERMINA A CONCENTRAO
CELULAR DAS ENZIMAS)
REGULAO HORMONAL
CONTROLE DA ATIVIDADE DA ENZIMA (MUDANAS ESTRUTURAIS
QUE ALTERAM A
VELOCIDADE DA CATLISE)
REGULAO ALOSTRICA E MODIFICAO COVALENTE
SNTESE DA FORMA INATIVA (ZIMOGNIO) ALGUMAS ENZIMAS
DE AO
EXTRACELULAR, COMO AS PROTEASES
INTESTINAIS
- PEPSINA, TRIPSINA, QUIMIOTRIPSINA
ISOENZIMAS (CATALISAM A MESMA REAO, MAS TM
ESTRUTURAS DIFERENTES DEPENDENDO DA ORIGEM: RGO,

COENZIMAS E VITAMINAS: A MAIORIA DAS ENZIMAS PRECISA DA

ASSOCIAO COM OUTRAS MOLCULAS PARA PODER EXERCER A
SUA ATIVIDADE CATALTICA COFATOR
ES
ONS METLICOS
Zn2+; Fe2+; Cu2+; Co2+; etc.

-FAZEM PARTE DA ESTRUTURA DA

ENZIMA
-LIGAM-SE FORTEMENTE S
CADEIAS LATERAIS
DOS A.A.
DO STIO ATIVO

Na+; K+; Mg2+; Mn2+; Ca2+; etc.

-LIGAO FRACA E REVERSVEL

ATUAM COMO CATALISADORES

CIDOS
MEDIAM REAES DE XIDO
REDUO,
HIDROXILAO,
etc.
S VEZES LIGAM-SE AO
SUBSTRATO OU
COENZIMA

COENZIMAS
MOLCULAS ORGNICAS, NOPROTICAS
ATUAM COMO ACEPTORES OU
DOADORES DE TOMOS E
GRUPOS FUNCIONAIS
ENTRE O
SUBSTRATO E O
COMPLEXO ENZIMTICO
(TRANSPORTADORES)
NECESSRIAS EM PEQUENAS
CONCENTRAES, PODEM SER
REGENERADAS
GRUPO PROSTTICO: QUANDO
A
COENZIMA EST LIGADA
COVALENTEMENTE
ENZIMA
QUANDO A COENZIMA OU UMA
PARTE DELA
NO SO
SINTETIZADAS PELO

VITAMINAS
HIDROSSOLVEIS
B1 TIAMINA
B2 RIBOFLAVINA
B3 NIACINA
B5 CIDO PANTOTNICO
B6 PIRIDOXINA
B8 BIOTINA
B9 - CIDO FLICO
B12 CIANOCOBALAMINA
C CIDO ASCRBICO

LIPOSSOLVEIS
A - RETINOL
D - CALCIFEROL
E - TOCOFEROL
K - MENADIONA

COENZIMA

GRUPO
TRANSPORTADO

VITAMINA

ADENOSINA TRIFOSFATO (ATP)

FOSFATO

TIAMINA PIROFOSFATO (TPP)

ALDEDO

TIAMINA (B1)

FLAVINA ADENINA DINUCLEOTDEO

(FAD)

HIDROGNIO

RIBOFLAVINA
(B2)

COENZIMA A

ACILA

C.
PANTOTNICO
(B5)

NICOTINAMIDA ADENINA
DINUCLEOT. (NAD)

HIDRETO

NICOTINAMIDA
(B3)

REAO
IRREVERSVEL
DO TIPO S
P

CONDIO
DE FLUXO
IDEAL

AUSNCIA DE
EFEITOS
INIBITRIOS

PREMISSAS
PARA
BIOPROCESS
OS
ENZIMTICO
S

A CINTICA
OBEDECE AO
MODELO DE
MICHAELIS MENTEN

REAO
CATALISADA
POR UMA S
ENZIMA

BIOPROCESSOS I ENZIMOLOGIA
CAPTULO 3
PRODUO INDUSTRIAL DE ENZIMAS

PRODUO DE
ENZIMAS A
ESCALA
INDUSTRIAL

FERMENTAO
SUBMERSA

MAIORITRIA
INSTRUMENTA E
CONTROLE DE
PROCESSOS MAIS
AVANADOS
MAIORES RENDIMENTOS

FERMENTAO SEMISLIDA

PASES ORIENTAIS
UTILIZAO DE RESDUOS
AGROINDUSTRIAIS
DE BAIXO
CUSTO

MAIOR RISCO DE
CONTAMINAO
NECESSIDADES DE ESPAO
PRIMEIRO PASSO:MENORES
PESQUISARENDIMENTOS

- SELEO DO MICRORGANISMO
PRODUTOR
- FORMULAO E OTIMIZAO DO MEIO

CULTURA
ESTOQUE
PREPARO DO
MEIO

CRESCIMENTO EM
FRASCOS
AGITADOS

ESQUEMA GERAL
(FERMENTAO
SUBMERSA)
PR INCULO
EM
FERMENTADOR

ESTERILIZAO

UPSTRE
AM
DOWNSTRE
AM

FERMENTADOR
INICIAL

SEPARAO

CONCENTRAO

PURIFICAO

ACABAMENTO

UTILIZAO DE CLULAS PARA A OBTENO DE ENZIMAS DE

INTERESSE INDUSTRIAL
MICRORGANISMOS
- BACTRIAS
- VIRUS
- FUNGOS
BOLORES
LEVEDURAS
CLULAS ANIMAIS
CLULAS VEGETAIS
FONTES DE OBTENO DE MICRORGANISMOS
-ISOLAMENTO A PARTIR DE RECURSOS NATURAIS
-COMPRA EM COLEES DE CULTURAS
-OBTENO DE MUTANTES NATURAIS
-OBTENO DE MUTANTES INDUZIDOS POR MTODOS
CONVENCIONAIS
- OBTENO DE MICRORGANISMOS RECOMBINANTES POR

CARACTERSTICAS DESEJVEIS DAS CLULAS e/ou

MICRORGANISMOS
ELEVADA EFICINCIA NA CONVERSO DE SUBSTRATO EM
PRODUTO
PERMITIR O ACMULO DE PRODUTO NO MEIO
NO PRODUZIR SUBSTNCIAS INCOMPATVEIS COM O
PRODUTO
APRESENTAR CONSTNCIA NO COMPORTAMENTO FISIOLGICO
NO SER PATOGNICO
NO EXIGIR CONDIES DE PROCESSO MUITO COMPLEXAS
NO EXIGIR SUBSTRATOS DISPENDIOSOS
PERMITIR A RPIDA LIBERAO DO PRODUTO PARA O MEIO
CADA ESPCIE OU
LINHAGEM CELULAR
REQUERIMENTOS
FORMULAO
DO MEIOPOSSUI
DE
ESPECFICOS DE:CULTURA
TEMPERATURA
pH
NUTRIENTES
OXIGNIO

CRESCIMENTO
PRODUO

PROCESSOS A MONTANTE (UPSTREAM) DA

FERMENTAO
1- PREPARO DO INCULO:
CULTURA
ESTOQUE
-LIOFILIZADA
-CONGELADA
-CONSERVADA EM
MEIO INERTE
(GLICEROL)

CULTIVO EM
FRASCO
AGITADO
(250 mL 5 L)

FERMENTADO
R PRINCULO
(SE
NECESSRIO)

PROPORO DO INCULO:
1 10%
CONTROLE NAS TRANSFERNCIAS:
- CONTAMINAO
- INFECO POR BACTERIFAGOS
- PROLIFERAO DE MUTANTES MENOS EFICIENTES

2- MEIO DE CULTIVO (COMPOSIO DEFINIDA EM ESTUDOS

PRVIOS)
PODE SER:
a) SINTTICO
b) MATRIAS-PRIMAS NATURAIS
DEVE CONTER:
- FONTES DE CARBONO E ENERGIA
- FONTES DE NITROGNIO E FSFORO
- SAIS MINERAIS, VITAMINAS, FATORES DE
CRESCIMENTO...
DEVE SER ADEQUADAMENTE:
- OTIMIZADO
- ESTERILIZADO
MUITAS VEZES AS INFORMAES SO
ESCASSAS, POIS OS FABRICANTES
GUARDAM SIGILOSAMENTE A COMPOSIO
DO MEIO DE CULTIVO USADO A NVEL
INDUSTRIAL.

FERMENTAO
INDUSTRIAL
GERALMENTE CONDUZIDA EM REATORES
MECANICAMENTE AGITADOS
10.000 100.000 LITROS
MODO DESCONTNUO
(BATELADA)
CONTROLE DE TEMPERATURA,
pH, OXIGNIO, ESPUMA
DURAO: 30 150 HORAS
CALDOS COM ELEVADA VISCOSIDADE
MEIOS CONCENTRADOS
E INCULOS EXPRESSIVOS
(AGITAO E AEREAO)

GASTO ENERGTICO

FORMAO DE ESPUMA
CONTROLE DO TRMINO DA FERMENTAO:
- ATIVIDADE ENZIMTICA
- pH, OXIGNIO
- CARACTERSTICAS DO CALDO, DURAO DA

PROCESSOS A JUSANTE (DOWNSTREAM) DA

FERMENTAO
FERMENTA
FERMENTA
O SEMISLIDA
EXTRAO
CLARIFICA
O

Preparao
comercial
lquida
Produto
comercial
slido
Produto
comercial
slido

SOBRENADAN
TE (enzimas
extracel.)

CONCENTRA
O
SECAGEM
ACONDICIONAME
NTO

O
SUBMERSA
SEPARAO
SLIDO LQUIDO
CLULAS
(enzimas
extracelulares)
RUPTURA
DAS
CLULAS
SEPARAO
SLIDO LQUIDO
PRECIPITA
O/
FRACIONAME
NTO
SOLUO
CLARIFICAD
A
PURIFICA
O
ADICIONAL
SECAGEM

Resd
uo

Produto
seco
SECAGEM
Produto
lquido
Produto
slido

ETAPAS INICIAIS DE SEPARAO E

CONCENTRAO
1- RESFRIAMENTO A 5 C
- ASSEGURA A ESTABILIDADE DA ENZIMA
- INIBE O CRESCIMENTO DE MICRORGANISMOS
CONTAMINANTES
2- AJUSTE DO pH NO VALOR TIMO DE ATUAO DA ENZIMA
3- SEPARAO DAS CLULAS
- FLOCULAO
- CENTRIFUGAO
- FILTRAO
* ENZIMAS EXTRACELULARES (NO CALDO CLARIFICADO):
CONCENTRAO
* ENZIMAS INTRACELULARES (NO INTERIOR DAS CLULAS):
- LAVAGEM
MOAGEM
ALTA PRESSO
- ROMPIMENTO
SONIFICAO (LAB)
CONGELAMENTO
TRATAMENTO QUMICO OU ENZIMTICO
(LAB)

ETAPAS INICIAIS DE SEPARAO E CONCENTRAO (cont.)

4- CONCENTRAO
- ANTIGAMENTE: EVAPORAO A VCUO (<35 C)
- PRECIPITAO POR SAIS, PONTO ISOELTRICO
- MAIS RECENTEMENTE: ULTRAFILTRAO (MEMBRANAS DE
2.000 300.000 Da)
APS A OBTENO DE UM CONCENTRADO ENZIMTICO,
AS OPERAES DE PROCESSAMENTO NO MAIS SE DIFERECIAM
QUANTO NATUREZA INTRA OU EXTRA CELULAR DA ENZIMA,
MAS SIM QUANTO FORMA DE APRESENTAO E O GRAU DE
PUREZA DO PRODUTO COMERCIAL.
DEPENDENDO
DO USO
TCNICO OU
INDUSTRIAL
ACADMICO

ANALTICO
OU
FARMACUTI
CO

NECESSIDADES BSICAS PARA REALIZAR A

PURIFICAO E PRESERVAR A ATIVIDADE
ENZIMTICA
1- MINIMIZAR PERDAS POR DESNATURAO E PROTELISE
* EXTRAES, DILISES, PRECIPITAES, CROMATOGRAFIA:
REALIZADAS A 4 C
* CMARA FRIA ADEQUADA, DISPONIBILIDADE DE
GELADEIRAS E CONGELADORES
* USO DE TAMPES ADEQUADOS
* USO DE INIBIDORES DE PROTEASES
* USO DE AGENTES REDUTORES (EVITAR OXIDAO,
PRINCIPALMENTE NO STIO
ATIVO)
* USO DE SUBSTRATOS e/ou CO-FATORES (EFEITO
ESTABILIZANTE)
2- CONTROLE DA ATIVIDADE, PUREZA
* ESPECTROFOTMETRO, ELETROFORESE
3- PLANEJAMENTO INICIAL
* NMERO MNIMO DE ETAPAS: AUMENTAR O RENDIMENTO
* COMBINAO ADEQUADA DE TCNICAS, CONDIES IDEAIS

PRIMEIRA ETAPA EXTRAO: OBTENO DE UM EXTRATO

BRUTO CONTENDO A
ENZIMA
NA FORMA SOLVEL
ENZIMAS EXTRACELULARES: REMOO DAS CLULAS
(FILTRAO ou CENTRIFUGAO)
EVITAR A LISE CELULAR (CONTAMINAO
DESNECESSRIA)
ENZIMAS INTRACELULARES: SEPARAO E CONCENTRAO DAS
1-CLULAS
MIXERS E LIQUIDIFICADORES
* COPO DE AOROMPIMENTO
INOX (FACILITA
O RESFRIAMENTO)
CELULAR
* ADEQUADOS PARA CLULAS ANIMAIS E VEGETAIS (E
ALGUMAS BACTRIAS)
2- AGITAO COM ABRASIVOS
* ALMOFARIZ E PISTILO (PEQUENOS VOLUMES)
* PROLAS DE VIDRO DE 0,1 0,5 mm (VOLUMES MAIORES)
* ADEQUADA PARA MICRORGANISMOS MAIS RESISTENTES
(FUNGOS
FILAMENTOSOS)
3- EXTRUSO SLIDA E LQUIDA
* CMARAS SOB PRESSO
* AS CLULAS IN NATURA ou CONGELADAS SO FORADAS

ROMPIMENTO CELULAR (cont.)

4- ULTRASSOM
* APARELHO DE ALTAS FREQNCIAS (ALTERNNCIA DE
ZONAS DE VCUO E
COMPRESSO, QUE FORMAM
ONDAS DE CHOQUE)
5- CONGELAMENTO - DESCONGELAMENTO
* FORMAO DE CRISTAIS DE GELO: RUPTURA DA
MEMBRANA CELULAR
* IMPORTANTE: TIPO DE CLULA, IDADE, TEMPERATURA
FINAL, TAXA DE
RESFRIAMENTO E
AQUECIMENTO
* PROCESSO DEMORADO E DE DIFCIL IMPLANTAO EM
LARGA ESCALA
6- CHOQUE OSMTICO
* ADEQUADO EM CLULAS VEGATAIS, ANIMAIS E BACTRIAS
GRAM-NEGATIVAS,
SEPARADAS DO CALDO POR
CENTRIFUGAO
* SACAROSE 20% + GUA PURA
7- ENZIMAS HIDROLTICAS DE PAREDE
* MTODO SUAVE E SELETIVO, LIMITADO A PEQUENA
ESCALA (CUSTO)

ROMPIMENTO CELULAR (cont.)

9- DETERGENTES E SOLVENTES
* DISSOLVEM A MEMBRANA CELULAR, LIBERANDO OS
COMPONENTES
INTRACELULARES
* MAIS USADOS: SAIS BILIARES, LAURILSULFATO DE
SDIO, DOCECILSULFATO DE
SDIO, TRITON
* SUA AO DEPENDE DO pH E DA TEMPERATURA
(CUIDADO COM A
DESNATURAO)
* MAIS EFICIENTE QUANDO PRECEDIDO POR UM PR
TRATAMENTO COM
SOLVENTES (ACETONA,
TOLUENO) EX: PROD. DE INVERTASE

PURIFICAO BASEADA NA SOLUBILIDADE (BAIXA RESOLUO)

A SOLUBILIDADE DE UMA ENZIMA EM UM SOLVENTE AQUOSO
DETERMINADA PELA DISTRIBUIO DE CARGAS PRESENTES SOB
DETERMINADAS CONDIES
OS GRUPOS CARREGADOS INTERAGEM COM ONS E MOLCULAS
DE GUA
A PRECIPITAO PODE SER INDUZIDA POR:
- MUDANAS NO pH

PONTO ISOELTRICO

- MUDANAS NA FORA INICA

(NaCl; (NH4)2SO4)

ADIO DE SAIS

- SOLVENTES ORGNICOS
CONSTANTE
SOLUO, AGREGAO
INTERAES ELETROSTTICAS

DIMINUIO DA
DIELTRICA DA
POR

AFASTAM A CAMADA DE HIDRTATAO E DIMINUEM

A AFINIDADE DA PROTENA PELO SOLVENTE

CROMATOGRAFIA (separao de alta resoluo)

TCNICA DE SEPARAO BASEADA NA MIGRAO DIFERENCIAL
DOS DIFERENTES SOLUTOS NUM FLUXO DE UMA FASE MVEL
QUE ATRAVESSA UMA CAMADA FIXA DE UMA FASE
ESTACIONRIA
CONFIGURAO GERAL: FASE ESTACIONRIA (MATRIZ)
EMPACOTADA EM UMA COLUNA, ATRAVS DA QUAL A FASE
MVEL (ELUENTE) BOMBEADA

DETECTOR
COLUNA

FONTE DA
FASE
MVEL

INJEO
DA
AMOSTRA

REGISTRO
(DISPLAY)
CROMATOGRAMA: GRFICO QUE REPRESENTA A
CONCENTRAO DAS MOLCULAS NO ELUENTE QUE SAI DA
COLUNA
VOLUME DE RETENO
CARACTERSTICO PARA CADA MOLCULA
(IDENTIFICAO)
TEMPO DE RETENO

TIPOS DE CROMATOGRAFIA
1- TROCA INICA (SEPARAO BASEADA NA CARGA):
- ADSORO A GRUPOS CARREGADOS DA RESINA
- ELUIO COM FRACIONAMENTO (GRADIENTE DE FORA
INICA)
2- CROMATOGRAFIA DE PARTIO (SEPARAO BASEADA NO
TAMANHO):
- EXCLUSO OU FILTRAO EM GEL
- A RETENO DEPENDE DA POROSIDADE DA FASE
ESTACIONRIA
- RETENO DA ENZIMA DE INTERESSE E ELIMINAO DAS
IMPUREZAS
OU VICE-VERSA (OU SEPARAO DIFERENCIAL)
3- CROMATOGRAFIA DE AFINIDADE:
- BASEADA NA PROPRIEDADE DE UMA ENZIMA DE
RECONHECER E LIGAR UMA
DETERMINADA
MOLCULA (LIGANTE)
- NA FASE ESTACIONRIA: SUBSTRATO OU COMPOSTO
SEMELHANTE
- ELUIO: MUDANA DE FORA INICA, pH (GERALMENTE
FEITO DE FORMA
DECRESCENTE), SELETIVA OU POR

CONCENTRAO E CONDICIONAMENTO
1- NECESSRIA AO FINAL OU ENTRE AS ETAPAS DE PURIFICAO.
2- REMOO DE GUA: NO CASO DE PRODUTOS
COMERCIALIZADOS PUROS, SECOS,
CRISTALINOS, ETC...
- POR ADIO DE POLMERO
- DILISE (REMOO DO SOLVENTE ATRAVS DE UMA
SEMANA SEMIPERMEVEL)
- LIOFILIZAO (CONGELAMENTO E REMOO DA GUA
SOB VCUO)
- CRISTALIZAO (AGREGAO DE CRISTAIS EM SOLUES
HOMOGNEAS
SUPERSATURADAS;
COMUMENTE USADA EM ENZIMAS COM ALTA
PUREZA, PERMITE A ESTOCAGEM ESTVEL)

BIOPROCESSOS I ENZIMOLOGIA
CAPTULO 4
ENZIMAS IMPORTANTES NA INDSTRIA

MERCADO MUNDIAL DE
ENZIMAS

1985: U$ 400 MILHES

1995: U$ 1 BILHO
2005: U$ 2 BILHES
-12 GRANDES PRODUTORES
-60 COMPANHIAS MENORES
60 % DA PRODUO MUNDIAL:
EUROPA
75 %: HIDROLASES (LATICNIOS E
DETERGENTES)

LCOOL
ALIMENTAO
ANIMAL
PANIFICAO
BIOTRANSFORMA
ES ENZ.
DIAGNSTICOS
LEOS E GORDURAS
AROMATIZANTES
VINHOS E SUCOS
CURTUME
PAPEL
TRATAMENTO DE
RESDUOS

APLICAES INDUSTRIAIS DAS ENZIMAS

APLICAES ANALTICAS
DETERGENTES
COMO PRODUTOS FINAIS
LIMPEZA E HIGIENE
(preparaes enzimticas como
FARMACUTICA
parte do produto final)
ALIMENTAO ANIMAL
TXTIL
PELES E CURTUME
COMO ADITIVOS DO PROCESSO
PAPEL
(enzimas usadas para facilitar o
ACAR
processo, prevenir problemas tc.)
CAF
LATICNIOS
CERVEJA
VINHOS E SUCOS
PRODUO DE ALIMENTOS E BEBIDAS LCOOL
PROTENA
CARNE
PANIFICAO
LEOS E GORDURAS
PROCESSAMENTO DO AMIDO
PROCESSOS DE BIOTRANSFORMAO ANTIBITICOS
QUMICA FINA

ENZIMAS COMO PARTES DO PRODUTO FINAL

1- ALIMENTAO ANIMAL
- AUMENTO DA DIGESTIBILIDADE E BIODISPONIBILIDADE DE
NUTRIENTES
- DEGRADAO DA FIBRA E FATORES ANTINUTRICIONAIS
(FITASE)
- REDUO DA CARGA POLUENTE
2- DETERGENTES
- O MAIOR MERCADO A NVEL MUNDIAL
- PROTEASES, AMILASES, LIPASES, CELULASES
- MAIOR EFICINCIA DE LAVAGEM, TEMPERATURA E TEMPO
MENORES
- QUESITOS: - ESTABILIDADE E ATIVIDADE ADEQUADAS EM
pH ALCALINO E NUMA
FAIXA AMPLA DE
TEMPERATURAS (10 60 C)
- RESISTENTE HIDRLISE E OXIDAO
3- INDSTRIA FARMACUTICA
- SCULO XIX PANCREATINA (EM PESSOAS COM
DEFICINCIAS DIGESTIVAS)
- LIPASE DE Rhizopus arrhizus ATIVA NO pH CIDO DO
ESTMAGO

4- APLICAES ANALTICAS
- IDENTIFICAO E DOSAGEM DE SUBSTNCIAS EM
MISTURAS COMPLEXAS
COMO SANGUE, URINA
E OUTROS FLUDOS BIOLGICOS
- GLICOSE, URIA, AMINOCIDOS, ETANOL, CIDO LTICO,
PROTENAS, CIDOS
NUCLICOS ...
- ELETRODOS DE ENZIMAS BIOSSENSORES (CONTROLE DE
FERMENTAES)
- EX.: GLICOSE NA URINA GLICOSE OXIDASE E
PEROXIDASE
ENZIMAS COMO ADITIVOS DO PROCESSO
1- INDSTRIA DO PAPEL
- XILANASES: REMOVEM A CAMADA DE XILANOS QUE
DIFICULTA A AO DOS
AGENTES QUMICOS DE
BRANQUEAMENTO (REDUZ 10 20 % O USO
DE
PRODUTOS QUMICOS)
- LIPASES: REMOO DE GORDURAS E RESINAS (PINHEIRO)
- OUTRAS ENZIMAS ESTO SENDO TESTADAS PARA:
* REMOO E TINTAS E ADITIVOS (PAPEL
RECICLADO)
* REMOO DA LIGNINA E DAS GOMAS (FIBRA

2- INDSTRIA TXTIL
- SCULO XIX: REMOO DO AMIDO DO ALGODO
(DESENCOLAGEM) COM
EXTRATO DE CEVADA
MODA
- MAIS RECENTEMENTE: AMILASES MICROBIANAS (Bacillus
subtilis) AMIDO
PREVIAMENTE GELATINIZADO
- REMOO DE CERAS, PECTINAS, GORDURAS, PROTENAS,
MINERAIS
(TRADICIONALMENTE FEITA POR
MTODOS QUMICOS QUE DIMINUEM
A RESISTNCIA
DA CELULOSE E CAUSAM UM FORTE IMPACTO
AMBIENTAL)
- CELULASES: ACABAMENTO LIMPEZA DA SUPERFCIE DAS
FIBRAS, REDU DAS
FIBRILAS, MELHOR
IMPREGNAO DA TINTA
ENZIMAS NA PRODUO DE ALIMENTOS E BEBIDAS
1- LATICNIOS
- PROTEASES (RENINA, QUIMIOSINA) E LIPASES: QUEIJOS
- LACTASE: REMOO DA LACTOSE DO SORO LCTEO
2- LEOS E GORDURAS
- PECTINASES E CELULASES AUMENTO DO RENDIMENTO
- FOSFOLIPASES DESENGOMAGEM (CUSTO ELEVADO)

ENZIMAS EM PROCESSOS DE BIOTRANSFORMAO

INCIO DO SCULO XX: PRODUO DE GLICEROL E ACETONA POR
FERMENTAO
ANOS 60 70: ENZIMAS PURIFICADAS (IND. FARMACUTICA,
QUMICA E ALIMENTAR)
- PROCESSOS HIDROLTICOS (LACTOSE, AMIDO,
PROTENAS)
- ANTIBITICOS
- ISOMERIZAO (GLICOSE / FRUTOSE)
- TRANSESTERIFICAO (TRIGLICERDEOS)
- SNTESE (PEPTDEOS E POLMEROS)
- OXIDAO (COMPOSTOS AROMTICOS)
- DEGRADAO (COMP. TXICOS OU NOCIVOS PARA O
MEIO AMBIENTE)
1- PROCESSAMENTO DO AMIDO
- XAROPES CONCENTRADOS (GLICOSE, MALTOSE) AMILASE
- PRODUO DE FRUTOSE A PARTIR DA GLICOSE GLICOSE
ISOMERASE
- CICLODEXTRINAS GLICOSIL TRANSFERASE
- CIDO GLUCNICO GLICOSE OXIDASE

2- ANTIBITICOS LACTMICOS
- DERIVADOS DA PENICILINA (SEMI-SINTTICOS)
AMPICILINA E AMOXICILINA
- HIDRLISE ENZIMTICA COM PENICILINA-ACILASE:
INTERMEDIRIO
- ENZIMA PARCIALMENTE PURIFICADA, IMOBILIZADA E
MUITO ESTVEL
- ELEVADA PRODUTIVIDADE (2.000 KG / KG DE ENZIMA)
- TEMPO DE MEIA VIDA: >1.000 HORAS
3- QUMICA FINA
- PROCESSOS QUE ENVOLVEM UM OU MAIS PASSOS DE
CATLISE ENZIMTICA
- UTILIZAM ENZIMAS OU CLULAS INTEIRAS
CIDO ASCRBICO (ANTIOXIDANTE, CONSERVANTE)
FRUTO-OLIGOSSACARDEOS (PRO-BITICOS)
AMINOCIDOS
ACRILAMIDA (POLMERO E FLOCULANTE)
ASPARTAME (ADOANTE)
EMULSIFICANTES (MONOGLICERDEOS E DIGLICERDEOS)
COMPOSTOS QUIRAIS (PURIFICAO DE MISTURAS RACMICAS)

APLICAES DAS ENZIMAS NA INDSTRIA

1- INDSTRIA ALIMENTAR:
PANIFICAO, CERVEJARIA, ACAR E XAROPES, LATICNIOS,
CARNES, SUCOS, OVOS
2- INDSTRIA FARMACUTICA:
ANTIBITICOS, VACINAS, PRO-INSULINA, HORMNIOS
(SOMATOMEDINA), ANTIVIRAIS (INTERFERON), ANTITUMORAIS,
AGENTES DE RESISTNCIA A ANTIBITICOS (-LACTAMASE)
3- INDSTRIA TXTIL E DO PAPEL
4- DETERGENTES
5- CURTUME
6- LCOOL
7- COSMTICOS
8- PLSTICOS E TINTAS

ENZIMAS INDUSTRIAIS DE ORIGEM ANIMAL

1- PANCREATINA
* GERALMENTE PREPARADA A PARTIR DE PNCREAS DE
PORCO
* APRESENTA ATIVIDADE AMILOLTICA, PROTEOLTICA E
LIPOLTICA
* PNCREAS FRESCOS OU CONGELADOS SO TRITURADOS
JUNTO COM O
TECIDO DUODENAL (A
TRIPSINA DO DUODENO ATIVA OS
PRECURSORES DAS PROTEASES TRIPSINA E QUIMIOTRIPSINA
DO
PNCREAS)
* SECAGEM A VCUO, EXTRAO DAS GORDURAS COM
TER DE PETRLEO
* OBTENO DE UM P FINO (MODO E PENEIRADO)
* ISOLAMENTO, PURIFICAO E CRISTALIZAO
2- PEPSINA
* OBTIDA A PARTIR DA MUCOSA DO ESTMAGO DE PORCO
* FATIADA E MISTURADA COM CIDO CLORDRICO OU
FOSFRICO (pH = 2,0) E
MANTIDA POR 16 hs A
TEMPERATURA AMBIENTE
* 40 45 C; 1 HORA ou 38 C; DOIS DIAS
* FILTRAO E SECAGEM A VCUO

ENZIMAS INDUSTRIAIS DE ORIGEM ANIMAL (cont.)

3- RENINA (COALHO) FABRICAO DE QUEIJOS
* PRESENTE NO QUARTO ESTMAGO DE BEZERRO
LACTANTE
* PROTEASE ALTAMENTE ESPECFICA (HIDROLISA A
LIGAO PEPTDICA 105
106 DA -CASENA)
* SE O BEZERRO FOR ALIMENTADO COM OUTRO ALIMENTO
EXCETO LEITE,
ESTAR CONTAMINADA COM
PEPSINA
* PREPARO:
- SALGA OU SECAGEM AO AR
- FATIADOS EM TIRAS
- MISTURADOS COM DILUENTES INTERTES
- EXTRAO COM CLORETO DE SDIO
* A RENINA DEVE SER MANTIDA SOB REFRIGERAO E pH
5,5 5,9
* ATIVAO: SAL OU pH 5,0
4- CATALASE
* A PARTIR DE FUNGOS, BACTRIAS E FGADO E SANGUE
DE ANIMAIS
* MACERAO, EXTRAO COM CONCENTRAES
CRESCENTES DE ACETONA

ENZIMAS INDUSTRIAIS DE ORIGEM VEGETAL

1- PAPANA
* PROTEASE PRESENTE NO LTEX DA CASCA DE MAMO
* TAMBM NO TRONCO, FOLHAS, PECOLO DAS FLORES
* FACILMENTE INATIVADA POR OXIDAO
* pH TIMO: 5,0 (PODE VARIAR DEPENDENDO DO
SUBSTRATO)
* APLICAES:
- CLARIFICAO DA CERVEJA
- AMACIAMENTO DE CARNES
- AUXILIAR NA DIGESTO
2- BROMELINA
* MISTURA DE 4 PROTEASES PRESENTES NO TALO E NO
FRUTO DO ABACAXI E
OUTRAS PLANTAS DA FAMLIA
DAS BROMELIACEAE
* OBTENO: MOAGEM, PRENSAGEM, FILTRAO,
PRECIPITAO
(SULFATO DE AMNIO,
METANOL, ISOPROPANOL, ACETONA,
HEMOGLOBINA, URIA,
VARIAES DO pH) E SECAGEM
LACTOALBUMINA
* CADA FRAO TEM UM pH TIMO DIFERENTE
CASENA, LACTOALBUMINA,
(DEPENDENDO DO SUBSTRATO)
BACTOPEPTONA
- 4,5

ENZIMAS INDUSTRIAIS DE ORIGEM VEGETAL (cont.)

3- FICINA
* PROTEASE SEMELHANTE PAPANA E BROMELINA
* PRESENTE NO LTEX DE PLANTAS DO GNERO FICUS
* pH TIMO: 6,0 8,0
* EXTRAO COM NaOH, CRISTALIZAO
* ARMAZENAMENTO: 5 C; pH 5,0
* PURIFICAO: CROMATOGRAFIA (COLUNA DE
CARBOXIMETIL CELULOSE)
* RENDIMENTO BAIXO, PREO ELEVADO
4- MALTE
* A PARTIR DA GERMINAO DE CEREAIS
(PRINCIPALMENTE CEVADA)
* GRANDE VARIEDADE DE ENZIMAS (PROTEASES,
LIPASES, XIDO-REDUTASES,
HEMICELULASES E
PRINCIPALMENTE AMILASES)
* PR-GERMINAO:
AUMENTO DA UMIDADE; TEMPERATURA 10 15 C;
2 3 DIAS
* ALGUMAS ENZIMAS J ESTO PRESENTES NO GRO (AMILASE), MAS A
MAIORIA SO FORMADAS
DURANTE A GERMINAO

OUTRAS ENZIMAS IMPORTANTES

1- TRANSGLUTAMINASE (ORIGEM MICROBIANA)
- PRODUZIDA POR Streptomyces sp.
- CATALIZA A FORMAO DE LIGAES CRUZADAS INTRA E
INTERMOLECULARES
ENTRE OS RESDUOS DOS
AMINOCIDOS LISINA E GLUTAMINA NAS
PROTENAS
- USADA NA REESTRUTURAO OU UNIO DE PEDAOS DE
CARNE, FORMAO
DE GIS, FILMES PROTICOS E
MODIFICAO DAS CARACTERSTICAS DE
PROTENAS E
ALIMENTOS PROTICOS

CONSIDERAES FINAIS
VANTAGENS DO USO DE BIOCATALIZADORES
(ENZIMAS OU CLULAS; LIVRES OU
IMOBILIZADOS)
ALTA SELETIVIDADE COM FORMAO DE
PRODUTOS
ENANTIOMERICAMENTE PUROS E
EM CONFORMIDADE COM AS NORMAS
REGULADORAS PARA AS INDSTRIAS
ALIMENTAR E FARMACUTICA, E PARA FINS
AGRCOLAS.
EFICINCIA DO PONTO DE VISTA ENERGTICO:
OPERAM EM FAIXAS DE TEMPERATURA, pH E
PRESSO MODERADAS
MENOR IMPACTO AMBIENTAL

IMPLEMENTAO INDUSTRIAL DO
PROCESSO
PRODUO DE
ENZIMAS

UTILIZAO DE
ENZIMAS

DEPENDE DA TECNOLOGIA ENVOLVIDA, MAS TAMBM DE OUTROS

FATORES QUE PODEM TER UM PESO DECISIVO NO SUCESSO
COMERCIAL:
DIMENSO DO MERCADO
MARGENS DE LUCRO
ECONOMIA DE ESCALA
POSSIBILIDADE DE INTEGRAO EM PROCESSOS INDUSTRIAIS J
EXISTENTES
DISPONIBILIDADE DE MATRIA-PRIMA A BAIXO CUSTO
PATENTES E PROTEO DE PROPRIEDADE TECNOLGICA
PRODUTOS CONCORRENTES
APROVAO DO PRODUTO POR ENTIDADES REGULADORAS
(TESTES DE SEGURANA E CERTIFICAO DE REGULAO
COMERCIAL DO
PRODUTO PODEM SER DEMORADOS E
DISPENDIOSOS)