INSTITUTO POLITNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE

BIOTECNOLOGA

REMEDIACIN DE SUELOS Y MANTOS ACUFEROS

MTODOS ANALTICOS PARA LA

DETERMINACIN DE CONTAMINANTES

Corcuera Delgado Guadalupe

Glvez Salazar Selene Guadalupe
Montiel Garca Daniela Zahory

24 Agosto 2016

HPLC
Cromatografia liquida utilizada para separar los componentes de una mezcla,
Utilizada para la determinacin de compuestos orgnicos semivolatiles
Una muestra en estado lquido es arrastrada por una corriente lquida llamada
eluyente.
Como fase estacionaria acta un slido finamente dividido (dimetro de partcula 3, 5,
10 m), o una pelcula lquida a l adherida.
Dependiendo de la retencin de los componentes de la muestra por la fase
estacionaria y de su solubilidad en el eluyente se provocar su migracin diferencial.

Fundamento
Es un mtodo de separacin analtica, que se lleva a cabo gracias a la afinidad que
tiene un compuesto (analto), por una fase fija o estacionaria, o por una fase mvil.
Cromatografa de Lquidos de Alta Resolucin, Eficiencia, o Rendimiento. Fenmenos
por los cuales ocurre una separacin en HPLC.
1. Adsorcin. Fenmeno de superficie que ocurre por la interaccin fsica o qumica
de un adsorbente de un adsorbato.
2. Particin. Es el fenmeno de reparto de un soluto en 2 fases distintas.
3. Intercambio Inico. Es un fenmeno generado por la interaccin electrosttica
entre molculas cargadas elctricamente.
4. Exclusin. Es un fenmeno fsico que consiste ms que nada en separar molculas
en base a su tamao molecular.
5. Afinidad. Se combina la alta especificidad de ciertas molculas por un sustrato,
tales como Ab, Enzimas, Receptores, etc

Funcionamiento

Fase Directa: fase

estacionaria polar, fase mvil
e baja polaridad
Fase reversa: fase
estacionaria de polaridad
baja, fase mvil de polaridad
alta.

Funcionamiento

Ventajas
Alta resolucin, eficiencia y reproductibilidad

Analisis rapdos, analticos y preparativos

Automatizacion

Desventajas
Costos Altos
La muestra debe ser soluble
Requiere uso de patrones
Dificil resolucin en muestras
complejas

ESPECTOFOTOMETRIA DE MASAS

De amplia utilizacin para la determinacin de estructuras orgnicas, por sisola o en

combinacin con otras tcnicas deespectrofotometra.
no se utiliza ningun tipo de radiacin

Fundamento

La espectrometra de masas est basada en la obtencin de iones a partir de

molculas orgnicas en fase gaseosa; una vez obtenidos estos iones, se separan de
acuerdo con su masa y su carga, y finalmente se detectan por medio de un dispositivo
adecuado.
Un espectro de masas ser, en consecuencia, una informacin bidimensional que
representa un parmetro relacionado con la abundancia de los diferentes tipos de
iones en funcin de la relacin masa/carga de cada uno de ellos

Funcionamiento

El espectrofotmetro desempea 4
funciones
Vaporizar substancias de volatilidades
diferentes
Originar iones a partir de las molculas
neutras en fase gaseosa
Separar iones en funcin de su relacin
masa/carga
Detectar los iones formados

Aplicacin

Elucidacin de la estructura de molculas orgnicas y biolgicas.

Identificacin de los compuestos de cromatogramas en capa fina y papel.
Determinacin de secuencias de aminocidos en muestras de polipptidos y protenas.
Deteccin e identificacin de especies separadas por cromatrografa y electroforesis
capilar.
Otra aplicacin de la espectrometra de masas es la determinacin de masas. Casa
Isotopo de cada elemento (tiene una masa no entera nica.

HORNO DE GRAFITO

Determinacin de metales por Espectrofotometra por absorcin atmica (EEA).

Anlisis de trazas de metales pesados y metaloides en diversas matrices (filtros de
captacin ambiental), esta tcnica permitir valorar el grado de contaminacin
medioambiental.
Tcnica basada en que los tomos absorben la luz en frecuencia o longitudes de onda
caracterstica del elemento de inters.

Funcionamiento
Se coloca una cantidad pequea de muestra (1 a 100 L) en el en centro de un
cilindro hueco de grafito.
Se calienta en etapas a aproximadamente 100, 1000 y ltimo 2000 C para volatilizar
en secuencia el agua, la materia orgnica y el metal a medir.
El haz de luz que atraviesa el cilindro es absorbido parcialmente por el metal
volatilizado y se cuantifica por la curva de calibracin.

Imagen 1. Componentes de Horno de grafito

Ventajas

Los tomos son formados por una sola vez y en corto tiempo.
Se dispone de mas tiempo y de forma mas eficiente la transferencia trmica a la
muestra.
Se puede suprimir el paso de gas, por lo que los tomos formados permanecen mas
tiempo en el haz.
Los rangos de deteccin son por ppb.

PGINAS CONSULTADAS
MICROLAB industrial. http://
www.microlabindustrial.com/laboratorio/ver/metales/3/absorcion-atomica-horno-de-graf
ito
Departamento de medicina legal, Toxicologa y psiquiatra. http://www.ugr.es/~
fgil/proyecto/grafito/index.html
Introduccin al HPLC http://www.upct.es/~
minaeees/fundamentos_analisis_cromatografico.pdf
Cromatografa liquida HPLC http://
www.ucm.es/data/cont/docs/650-2013-12-02-gases%20l%C3%ADquidos.pdf
Hanai T. HPLC Basics https://
books.google.com.mx/books?id=SoMdaNUgtz8C&printsec=frontcover&dq=hplc&h
l=es-419&sa=X&ved=0ahUKEwjG2_efguzOAhVK1mMKHYZKBMIQ6AEIGjAA#v=onepage&q
=hplc&f=false