MUESTRA

• Orina obtenida en forma aséptica a mitad del chorro medio previa limpieza en un frasco
estéril proporcionado por el laboratorio.
• Orina de un niño obtenida en una bolsita recolectora previa limpieza con agua y jabón del
área perineal.
• Las muestras no deben permanecer mas de dos horas a temperatura ambiente.
• Todas muestras serán conservadas a partir de sus entrega al laboratorio a temperatura de
refrigeración

Obtención de muestra Tipo de muestra Método Invasivo Método no Invasivo Punción supra Cateterización Bolsa Sonda púbica Chorro medio vesical recolectora urinaria .

 Este procedimiento permitirá que el número de microorganismos permanezca relativamente constante por un tiempo no mayor de 24horas .  Si el traslado al laboratorio demora más de 15minutos. debe colocarse el recipiente con la orina dentro de un contenedor con hielo.Conservación de la muestra  La muestra para urocultivo debe refrigerarse a 4–8ºC inmediatamente después de recolectada.

porque ir de un extremo al otro del rango.  Método de la micropipeta Usar una micropipeta calibrada de 1 a 10 ul Puntas de pipetas estériles Utilizar micropipetas diferentes para cada volumen.000 UFC/ml.  Método del Asa: Uso de nicrom o plástico. • Medios cromogénicos permite la detección rápida de los uropatógenos más comunes. . tiende a descalibrar el instrumento.A.000 UFC/ml. PROCESO ANALÍTICO DE CULTIVO DE ORINA  Medios de cultivo • Agar Sangre . • Agar chocolate: Orina de riñón o muestras colectadas quirúrgicamente por cistoscopia. Macconkey. infecciones mixtas y hongos. Tamaños Asa 1 ul recuento de colonias mayores de 1. Asa 10 ul recuento de colonias entre 100 y 1.

Un organismo observado a 1. • La presencia de más de 5 leucocitos por campo es considerado como indicativo de piuria. pero una sensibilidad de solo 37%.000 UFC/ml en — 85% de los casos. y deje que se seque al aire sin extenderla. • La presencia de muchas células epiteliales y morfotipos microbianos diferentes sugieren contaminación .  La tinción de Gram determina rápidamente el tipo y el recuento de bacterias y células en la orina. COLORACIÓN DE GRAM • Colocar 10 ul de orina bien mezclada sin centrifugar sobre una lámina portaobjetos.000x correlaciona con un recuento de colonias de 105/ml de orina. EXAMEN DIRECTO • Colocar 10 ul de orina bien mezclada sin centrifugar sobre una lámina portaobjetos. • Determinar el número de organismos por campo de aceite de inmersión. colocar un cubreobjetos y observar a 40x. • Este resultado tiene una especificidad de 90% para predecir una infección urinaria asociada a catéter con más de 105UFC/mL. • La presencia de una bacteria/campo de inmersión tiene buena correlación con 100.

sin centrifugar y bien mezclada . y sumergir solamente el aro por debajo de la superficie de la muestra de orina. Método del asa calibrada • Usando un asa calibrada flameada y enfriada o una descartable. mantener el asa verticalmente. MÉTODOS DE INOCULACIÓN PARA EL RECUENTO DE COLONIAS. .

• Llevar una asada de la orina bien mezclada sobre la placa de agar sangre haciendo una línea recta a lo largo y por el centro del agar y estriar la orina mediante una serie de pases en ángulos de 90° a través del inóculo (método solo para 1 ul). .

• Cuando se utilizan 10 ul de muestra tomar una asada de orina bien mezclada para inocular y estriar en cuadrantes las placas de agar. .

• Incube 48 horas urocultivo negativos con sedimento urinario alterado sembrar en Agar Sangre con estría.37° C. ambiente aeróbico. . • Incubar el A. INCUBACION • Incubarse 18 horas a 35 .  Existe otras causas de sedimento urinario alterado que no corresponden a ITU o para saber si el paciente está recibiendo antibióticos. • En los siguientes casos se debe incubar el cultivo hasta por 48 horas:  Paciente inmunosuprimidos incluye pacientes que han sido trasplantados. LECTURA DE LOS MEDIOS DE CULTIVO • Lectura final es a las 24 hrs. Sangre en 5% de CO2 para mejorar el desarrollo de los organismos gram (+) y bacterias dependientes de CO2.  Se requiere cultivo para hongos o levaduras ( ejm: cultivos de UCI neonata!).

utilizar métodos de identificación rápida. • Mantener las muestras de orina 24 hrs para resolver cualquier problema con la muestra o resultados. coli representa el 80% de los patógenos en cultivos de orina. UROCULTIVO POSITIVO Los cultivos (+). examinar los medios de cultivo para la cuantificación y tipo morfológico de los organismos presentes. • No informar recuento en levaduras . • E. ESTUDIO POSTERIOR DE LOS CULTIVOS POSITIVOS: • Determinar el recuento de colonias de cada morfotipo en el cultivo por separado examinando el agar sangre.01ml 1colonia=100UFC/ml Cuando las colonias son demasiado numerosos para contar. •Streptococcus agalactiae debe ser reportado en mujeres en edad fértil y de diabéticos.001ml 1colonia=1000UFC/ml 0. • El máximo recuento usando el asa de 1ul es >105 UFC/ ml. • El máximo recuento usando el asa de 10ul es >104 UFC/ml. 0. • Mantenga las placas con cultivo positivo a T° ambiente hasta 48.

• Reportar el recuento de colonias de cada patógeno por separado. • c) Cultivos positivos.000 UFC/ml de microbiota urogenital normal. Reportar: de acuerdo al asa calibrada utilizada. • Los cultivos mixtos son reportados con el recuento en UFC/ml. reportar como cultivo negativo y el recuento será de "10. reportar: Se detectó inhibidor antimicrobiano con su recuento respectivo. por 24 o 48 horas. Negativo dil 1/100 UFC/ml Negativo dil 1/1000 UFC/ml. posible contaminación. se sugiere nueva muestra. FASE POST-ANALITICA REPORTE DE RESULTADO a) Reporte de la Tinción Gram: resultados de bacterias y células. • Cuando se observa inhibición por antimicrobianos. . seguido por "múltiple morfotipos bacterianos presente. reportar: Si solamente se observa microbiota urogenital o de la piel. b) Cultivos Negativos.

pueden ser considerado significativo. pero en circunstancias especiales. • Recuento de colonias <105 UFC/ml en muestras emitidas con presencia de disuria y síntomas de ITU puede ser significativo.INTERPRETACION • El criterio de >_ 105 UFC/ml para significancia puede ser aplicado a la mayoría de las muestras enviados para cultivo. • Un cultivo mixto en un paciente ambulatorio no complicado probablemente indica contaminación. lo siguiente será cierto. Sin embargo. . • Recuentos menores (<104/ml) de bacterias comúnmente encontrados sobre la piel y genital interno y externo son considerados ser contaminantes. un recuento de Enterobacteriaceae de 102 UFC/ml o más.

el aislamiento de tres o más especies bacterianas indican que la muestra se ha contaminado por recolección inadecuada o demora en la siembra. así también se pueden encontrar bacteriurias polimicrobianas hasta en casi 15% de enfermos. cuentas bacterianas menores de 105 UFC / ml pueden tener significado. .  En muestras obtenidas por punción suprapúbica.  Cuando el urocultivo es positivo y el paciente está asintomático.  En pacientes con sonda vesical. el desarrollo de una sola colonia en el medio de cultivo indica infección del tracto urinario. TENER EN CUENTA LOS SIGUIENTES CRITERIOS PARA LA INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS  Generalmente. es necesario repetir el estudio.

 Placa de Agar Muelle Hinton 100 x 15 mm.5 de la escala de Mc Farland. • según una plantilla numerada o colocando el número en la parte posterior de la placa.  Tubo con solución salina estéril x 2 ml. . Procedimiento • suspensión de B. • Tomar con la pinza un disco de papel filtro y colocarlo en la placa sembrada. • Sembrar la placa de A.  Cepa de Bacillus subtilis. • Colocar 10 µL de orina con una asa calibrada o una micropipeta • La placa será incubada a 35°C por 18 horas en aerobiosis. • Dejar secar a temperatura ambiente aproximadamente 15 min. Materiales  Pinzas  Discos de papel de filtro estériles de Papel filtro. subtilis con solución salina similar al tubo 0.DETERMINACIÓN DE SUSTANCIAS ANTIBACTERIANAS RESIDUALES EN ORINA Determinar la presencia de sustancias antibacterianas residuales en orina. Mueller Hinton con la suspensión de bacterias de manera similar a un antibiograma.

• Mantener la cepa de Bacillus subtilis en un tubo o placa de agar Mueller Hinton.Interpretación Se buscará la presencia de un halo de inhibición alrededor del disco con la orina. Cualquier diámetro de halo se considerará como prueba positiva. todas la semanas hacer una resiembra para la prueba. Reporté de resultados El resultado se informa como "Actividad antimicrobiana: Positiva o Negativa“ Comentario • El medio de cultivo debe estar a temperatura ambiente y la superficie debe estar seca. La ausencia de halo se considera como prueba negativa. .