GENOTIPADO FETAL RHD, LUEGO DE

TRASPLANTE DE MEDULA SEA

Florentine F. Thurik, Godelieve C.M.L. Page-Christiaens, Aicha Ait

Soussan,Peter C. Ligthart, Goedele M.A.F. Cheroutre,Bernadette Bossers,
Barbera Veldhuisen, C. Ellen van der Schoot, and Masja de Haas.
 Background
En este reporte , se presentan dos casos donde mediante mtodos
no invasivos para el feto, se realizan genotipificaciones RHD, que
pudiesen complicarse por un trasplante de medula sea, cuyo
receptor en este caso es la madre.
Se describe el caso de dos mujeres que tuvieron trasplante de
medula sea alogenica en la infancia, las dos fueron fenotipificadas
como pacientes D+, y ambas recibieron trasplantes alogenicos D-
provenientes de sus hermanos.
Se detecto un anticuerpo anti-D durante el embarazo en una de
ellas, adems del padre biolgico del bebe se fenotpifico como D+.
Se recomienda recibir productos sanguneos fenotipificados
como D- , en pacientes mujeres jvenes que han recibido
trasplantes de medula sea de donantes D-.
 Introduccin
La enfermedad hemoltica tanto del recin nacido
como el feto, esta causada por una
aloinmunizacin de la madre contra el antgeno D.

Solo los fetos o recin nacidos D+, van a ser

afectados por este Aloanticuerpo anti-D.

Mediante un Genotipificado fetal RHD con una

tcnica que utiliza el ADN libre en el plasma
materno, el cual permite una identificacin
temprana, de los embarazos que pudiesen estn
en riesgo de enfermedad hemoltica del feto y del
RN.
 ADN fetal libre en el plasma
materno
Circula libremente en el torrente sanguneo de la madre , el anlisis
del ADN fetal libre en sangre (materna) es un mtodo de diagnstico
prenatal no invasivo.

El ADN fetal libre en sangre se origina en los trofoblastos que forman

la placenta.

Se estima que entre el 2 y el 6% del ADN que se encuentra en la

sangre de la madre es de origen fetal.

El ADN fetal se fragmenta y va a parar al torrente sanguneo de la

 Los trasplantes alognicos de mdula
sea, dependen de la disponibilidad
de un donante sano cuya mdula sea
sea biolgicamente compatible con la
suya lo que los mdicos denominan
compatibilidad HLA son
marcadores de protenas que se
encuentran en la superficie de los
glbulos blancos. Funcionan como
una suerte de huella gentica que
permite que el sistema inmunitario de
nuestro organismo reconozca las
clulas del propio cuerpo.

Los marcadores HLA se encuentran

en pares; un elemento de cada par se
hereda de la madre y el otro
elemento, del padre.
 Se le trasfunden
Paciente 28 aos glbulos rojos O+,
de edad, curso a
los 5 aos con
Caso 1 por lo cual la
paciente se
Anemia Aplastica sensibilizo,
creando
Genotipificada O+, anticuerpos anti-
12 semanas luego
fue trasplantada D.
del trasplante, el
alogenicamente
total de sus Tuvo un primer
con O-, cuyo
clulas perifricas embarazo el cual
donante fue el
fue O- no llega a termino
hermano.
aborto electivo.

El trasplante Su segundo
presento embarazo llega a
compatibilidad termino
HLA resultando un feto
D-, adems de
presentar ttulos
de 64 de anti-D.
Caso 1 Presenta un trasplante de
medula sea a la edad de 5
aos, por presentar anemia
aplstica. La paciente
previamente haba
estado grvida de 2
para 0, pero haba
tenido un aborto
Mujer 28 electivo de un feto. A
aos de posterior tiene
segundo feto.
su

Edad
Antes del trasplante su tipo
Mediante exmenes de de sangre fue O+, la
rutina en el tercer paciente recibi un
trimestre se detectaron trasplante alogenico
aloanticuerpos anti-D. proveniente de su
hermano, el cual es O-.
La sangre materna presentaba un 80% de clulas
DcE/ce R2/r ,de cariotipo XX.

Y un 20% de clulas ce/ce r/r, con cariotipo XY.

Por ende la paciente presentaba Quimerismo , es decir

posee entonces dos tipos de clulas diferentes, cada
una con distinta constitucin gentica.
 Presencia de un alelo
denominado DUC-2, el cual es
una variante del gen RHD, para
la expresin normal del
Antgeno D.
oc ido
Con o D-
com cial.
par Se realizaron
pruebas
serologas a
la sangre
proveniente
del
Presentaron progenitor Revelaron
del feto.
los un
Haplotiplos fenotipo
R2/r
D+
Mediante el uso de PCR se detectaron secuencias RHD y
SRY, en material gentico materno, la ultrasonografa
mostro un feto masculino, se demostr que el feto
mediante el uso de PCR no posea el alelo DUC-2 (paterno),
as se reduce a un 50% la posibilidad que el feto fuera D+.
Los ttulos de anticuerpos anti-D, fueron monitoreados va
Test anti globulina indirecta , en la semana 16 presento un
titulo de 16, no se detectaron otro tipo de aloanticuerpos
en la madre. En la semana 34 el titulo fue de 64.
En la semana 41 + 1 da , dio a luz a un feto masculino, va
parto normal, no se le realizo inmunoprofilaxis de
inmunoglobulina anti-D, ya que ya se haban pesquisado
aloanticuerpos anti-D.
El Rn fue tipificado como O-, con un haplotipo cE/ce r/r.
 Haplotipos
Haplotipo
madre R2/r
padre
(DcE/ce)
R2/r
r/r
(DcE/cE)
(ce/ce)

Dadas las
combinatorias (DcE/ce) x
posibles hay un (DcE/cE) =
75% de R2/r Hijo
probabilidad de
un feto D+ R2/r
r/r
Y un 25% de un (ce/ce) x (ce/cE)
feto D- (DcE/cE) = D-
R2/r
r/r (25%)
Caso 2.
Mujer de 24 aos embarazada por segunda vez se
realiza diagnstico prenatal de genotipo RhD en la
semana n 27 de gestacin.

Primer embarazo result con muerte fetal en la

semana n 35.

Los resultados de los anlisis arrojaron un feto

RhD (+), y los aloantgenos de la madre no fueron
detectados.
La madre present ausencia de anti-A en
presencia del antgeno B en el estudio
serolgico por lo cual se continu con los
anlisis.

Se realizaron estudios de adsorcin elucin

donde se observ una poblacin menor de
glbulos rojos A Rhd (+)

Sospecha de Quimerismo Hematopoytico de la

madre.
Poblacin B RhD (-) y A (o AB) RhD (+).
Se le realiza prueba de Kleihauer- Betke a la madre
donde se descarta la presencia de glbulos rojos
fetales en la sangre materna.

La paciente presentaba historial de Trasplante de

Mdula sea, el donante fue su hermano HLA
compatible probablemente de Grupo B RhD (-).

A la mujer se le administr Rhogam de manera

profilctica en la semana 30 y post- parto, en la
semana 33 de gestacin dio a luz con curso neonatal
sin acontecimientos notables
Discusin.
Se reportaron dos casos de mujeres embarazadas Rhd (+) que presentaron
trasplante de mdula sea en la infancia de donantes Rhd (-), el embarazo en
pacientes trasplantadas de mdula sea si bien es raro debido a los invasivos de
los tratamientos y uso de drogas hoy en da existen tratamientos para lograr
preservar la fertilidad en este tipo de pacientes.

Al haber discordancias en la tipificacin tanto ABO como RhD se deben utilizar

otras metodologas como anlisis de clulas libres de DNA en el plasma materno
para no obtener resultados falsos positivos que pongan en riesgo la vida de la
madre y el feto.
Conclusin.
A modo de conclusin debemos sealar que el historial de trasplantes de mdula
sea de la paciente embarazadas es de real importancia, ya que la fenotipicacin
en estas pacientes no es confiable dando resultados falsos positivos ya que en un
comienzo eran RhD (+) y luego del transplante de mdula sea adquirieron el RhD
(-) propio de su donante.
Por lo cual se deben realizar anlisis con clulas maternas con DNA libre en el
plasma donde se mostrar el status RhD independiente del fenotipo del feto,
adems de otras pruebas prenatales con ADN celular en el plasma materno que
tienen como objetivo detectar alelos heredados por los padres.
Desde el punto de vista de la medicina transfusional una mala tipificacin tanto
ABO como RhD genera riesgos en el pacientes al momento de recibir una
transfusin, por lo cual como futuros Tecnlogos Mdicos debemos ser conscientes
y competentes en nuestra labor diaria.
Referencias.
Revista Transfusion .
http://web.sets.es/index.php?view=newsfeed&catid=50%3Aactualidad-cientifica&id=11
-blood&option=com_newsfeeds&Itemid=7

http://www.aabb.org/Pages/default.aspx