Curso Microbiología IPA 2011 - 10

MUCHAS VECES DEBEMOS CONTROLAR
EL CRECIMIENTO MICROBIANO

Cocina de
En el quirófano
Restaurante

Producción Industrial Cocinando en casa

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ASEPSIA y ANTISEPSIA
La ASEPSIA es un método preventivo.

 Procura la ausencia de gérmenes en un área determinada.
 Se rige por una serie de principios que debe cumplir todo el
personal que trabaje en, o en las cercanías del campo estéril.
 ASEPSIA PROTECTORA se aplica a todo el campo quirúrgico

PRINCIPIOS DE LA ASEPSIA PROTECTORA QUIRURGICA.

 NO CAUSAR DAÑO (no introducir contaminación adicional)
 ELIMINAR CONTAMINANTES Y M.O PATÓGENOS
 DESTRUIR LOS M.O DAÑINOS.
 PROTEGER Y SEPARAR si no es posible la eliminación.
 DESHACERSE DE LOS MATERIALES CONTAMINADOS

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ASEPSIA Y ANTISEPSIA DESINFECCIÓN es la eliminación de los gérmenes presentes (menos las esporas) sobre objetos inanimados. las mucosas y otros tejidos vivos. Frotar Frotar el Frotar entre las palmas el dorso los dedos Frotar Frotar las las muñecas uñas IPA . ANTISEPSIA es similar. Agr. pero se refiere a gérmenes presentes en la piel. Alfredo Rodríguez 4 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing.

Agr. DESINFECCION IPA . Alfredo Rodríguez 5 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing.

MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Agr. ESTERILIZACION Por calor Por radiación Por filtración IPA . Alfredo Rodríguez 6 .

ESTERILIZACION POR CALOR  Recordar que cada M. IPA . al tiempo en que se elimina el 90% de la población inicial.MICROBIOLOGIA 2011 Ing.  Las moléculas fundamentales se DESNATURALIZAN.  La muerte por desnaturalización es exponencial.O tiene una temperatura MAXIMA de crecimiento. Agr.  Se llama TIEMPO DE REDUCCIÓN DECIMAL . para un microorganismo y una temperatura dada. y es mas rápida cuanto mas alta la temperatura. Alfredo Rodríguez 7 .

Alfredo Rodríguez 8 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Curvas de sobrevivencia de un m.o con tres temperaturas diferentes ¿Cuanto demora en morir el 90% de la población a 50 ºC? ¿Y a 70 ºC? IPA . Agr.

El calor húmedo tiene mayor poder de penetración.  El tipo de calor (HUMEDO o SECO) también es importante.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Agr.  (D) es un parámetro a tener en cuenta para decidir los tiempos de esterilización. en autoclave.  El tiempo de reducción decimal (D) depende de la temperatura pero no del número inicial de m. organismos. y actúa mas rápido. IPA . Alfredo Rodríguez 9 .

CURVAS DE D PARA DIFERENTES MICROORGANISMO Organismo (a) a 110 grados alcanza el 90% de muertes en 0. organismos (a) y (b) IPA . En cambio (b) demora 10 minutos a esa temperatura para que muera el 90% de la población.1 minuto. o sea 6 segundos.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Agr. CLASIFIQUE los m. Alfredo Rodríguez 10 .

de mesa para laboratorios. y así alcanzar temperaturas del agua de 121 grados. según su uso. Alfredo Rodríguez 11 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing. AGUA RESITENCIA IPA . EL AUTOCLAVE TAPA HERMETICA  Es un recipiente que permite mantener una presión alta en su interior. CANASTILLA  Este es un modelo vertical. Agr. VAPOR  los hay de varias PAREDES formas y capacidades.

Agr.5 minutos. LOS PROCESOS DE ESTERILIZACIÓN SE DISEÑAN PARA ENDOSPORAS IPA . Para las células vegetativas . Alfredo Rodríguez 12 .1 Kg / cm2 de presión. Esterilización en autoclave  El autoclave es una cámara cerrada que permite la entrada de vapor de agua a presión (o produce vapor de agua en su interior). lo que permite alcanzar unos 121 grados ºC  A esa temperatura y presión el tiempo de esterilización suele ser de 10 a 15 minutos.1 a 0.MICROBIOLOGIA 2011 Ing.  Las endosporas a esa temperatura tienen un tiempo D = 4 ó 5 minutos. a 65 ºC. el tiempo D es de 0.  Generalmente se trabaja a 1.

proteínas o grasas reducen el efecto del calor. IPA . Otros factores que inciden  La muerte por calor es mas rápida en pH ácidos. Por eso es mas fácil esterilizar tomates.  Concentraciones altas de azúcar. y frutas . Agr. que maíz o frijoles que son mas bien neutros. Alfredo Rodríguez 13 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing.

Salmonella. Altera caracteres  Alarga la vida útil de los organolépticos alimentos.  Protege la salud (asegura la inocuidad) 71 ºC por 15 segs. Enfriado rápido Menos satisf.  Destruye todos los patógenos.) menos los esporulados. Agr. Pasteurización alta. Echerichia. 63 ºC por 30 min. IPA . Alfredo Rodríguez 14 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing. brucelosis. Pasteurización baja. N A CIO ILIZ ES TER ES PASTEURIZACION NO  Es un método de tratamiento de alimentos basado en el calor por tiempos cortos. (tuberculosis. etc.

IPA . Agr. Alfredo Rodríguez 15 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing.

 MICROONDAS (efecto térmico)  RAYOS UV (ruptura del ADN)  RAYOS X RADIACIONES  RADIACION GAMMA g IONIZANTES  ELECTRONES IPA . Agr. Alfredo Rodríguez 16 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing. ESTERILIZACIONPOR RADIACION  RADIACIONES ELECTROMAGNÉTICAS.

 LA UNIDAD DE RADIACION ES EL roentgen  LA DOSIS ABSORBIDA se mide en rad  1 rad = 100 ergios/gramo  1 Gray = 100 rad  En noviembre de 1980. IPA . OH) de alta energía. protones. Agr.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. que actúan sobre los biopolímeros como el ADN y las ENZIMAS. Alfredo Rodríguez 17 . OMS concluyen que “la irradiación de cualquier tipo de alimento hasta una dosis de 10 kGray no presenta riesgo para la salud humana” y que “tal tratamiento no plantea especiales problemas nutricionales y/o microbiológicos”. diversos Comités de Expertos de la IAEA. FAO. Esterilización por radiación  Las radiaciones ionizantes producen iones y moléculas reactivas. (electrones.

Alfredo Rodríguez 18 .  Las radiaciones gamma evitan el crecimiento del moho en naranjas. Agr. IPA . fresas y de ensaladas preparadas. Destruye a los parásitos de la triquina que hacen muy peligroso el consumo de carne de cerdo. mariscos.  Los alimentos tratados con esas radiaciones pueden comerse sin riesgo  No hay pérdidas del contenido vitamínico. sin refrigeración. ALIMENTOS IRRADIADOS CON RAYOS g  Los estudios toxicológicos de un gran número de alimentos distintos no han mostrado la existencia de efectos adversos como resultado de la irradiación.  La exposición de alimentos a los rayos gamma aumenta la “vida de refrigeración” de salchichones.  Algunas legumbres. tomates y pan. frutas y carnes sometidas a tratamiento con radiación gamma intensa se conservan frescas y comestibles durante meses y hasta años.MICROBIOLOGIA 2011 Ing.

Gy es un Gray = 100 rad IPA . G+ anaerobia esporulada 2400 Bacillus subtilis Bact.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. G+ anaerobia esporulada 3300 Clostridium tetani Bact. 200 Lactobacillus brevis Bacteria G + 1200 Sacharomyces cerevisae Levadura 500 Deinociccus Bacteria G – radiación resistente Aspergillus niger Hongo 500 Virus 4500 a 13000 Inactivar enzimas 20000 a 50000 D10 = cantidad de radiación necesaria para reducir la población inicial a la décima parte. Alfredo Rodríguez 19 . G+ anaerobia esporulada 600 Salmonella typhimurium Bacteria G . Clostridium botulinum Bact. SENSIBILIDAD A LA RADIACION DE LOS M.O D10 en Gy. Agr. ORGANISMOS Especie Tipo de M.

Agr.  Se utilizan los rayos UV para desinfección de superficies. Alfredo Rodríguez 20 .  La radiación UV no penetra las superficies solidas opacas.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. aire y agua. vidrio. Desinfección por radiación UV  La radiación Ultra Violeta (220 a 300 nm de l tienen suficiente energía para romper las moléculas de ADN. IPA .

de agua de irrigación en Agr. Alfredo Rodríguez horticultura 21 . Desinfección de agua por UV No hay adición de químicos al agua No hay formación indeseada de sustancias en el agua No modifica el sabor ni el olor del agua desinfectada No hay manipulación ni almacenamiento de químicos Sistema de manejo amigable.400 m3/h para diversas aplicaciones.MICROBIOLOGIA desinfección 2011 Ing. se requiere poco mantenimiento Tecnología segura y fiable Bajo precio y costos de operación Plantas de desinfección UV para un promedio de flujo de 1. Aplicación típica de desinfección UV desinfección de agua de consumo humano desinfección de agua industrial y producción de ésta en la industria de bebidas y comidas desinfección de aguas lluvias desinfección de agua pura para laboratorios e industria de semi-conductores IPA .

Agr. pero si las moléculas de líquidos.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. IPA . Alfredo Rodríguez 22 . USO DE FILTROS  Para líquidos termo inestables y para gases.  Poros tan pequeños que no pasan los microorganismos.

asbesto o fibra de vidrio. Alfredo Rodríguez 23 . nitratos o acetatos de celulosa.  FILTROS DE MEMBRANA Polímeros de alta resistencia. Láminas de papel. Se usan como pre filtros. Tienen numerosos poros diminutos.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. tratadas por radiación nuclear que las debilita y químicos que las fisuran. Agr. (Nuclepore) Películas muy finas de policarbonatos. Retienen en el espesor. solapadas. Retienen en superficie  FILTROS DE NUCLEACIÓN. IPA . TIPOS DE FILTROS  FILTROS DE PROFUNDIDAD.

levadura. No se sabe exactamente la composición.) IPA . Agr. carne. Alfredo Rodríguez 24 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing.  LOS MEDIOS DE CULTIVOS pueden ser:  Químicamente DEFINIDOS. etc. Se preparan añadiendo cantidades precisas de compuestos orgánicos e inorgánicos en agua destilada.  COMPLEJOS. soja. CULTIVO DE MICROORGANISMOS  MEDIOS DE CULTIVO: Soluciones nutritivas que se utilizan para el cultivo de microorganismos. Se preparan con hidrolizados de caseína.

MEDIOS DEFINIDOS Y MEDIOS COMPLEJOS  MEDIO DEFINIDO para E coli  MEDIO COMPLEJO para E coli y Leuconostoc  K2HPO4 7g  KH2PO4 2g  Glucosa 15 g  (NH$)2SO4 1g  Ext Levadura 5 g  MgSO4 o.coli y Leuconostoc IPA .1 g  Peptona 5 g  CaCl2 0. Alfredo Rodríguez 25 ..MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Agr.02  KH2PO4 2 g  Glucosa 4 a 10  Agua destilada 1000 ml  Trazas 2 a 10 pg  Agua destilada 1000 ml pH 7 Comentar capacidad de síntesis de E.

Agr. el agar solidifica.  Ejemplo: Agar al 1. se vierte en placas de Petri.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. o en tubos IPA .  El AGAR se agrega al medio.5%  Los medios sólidos inmovilizan las células. MEDIOS SOLIDOS  Agregado de agentes solidificantes. y permiten el crecimiento en colonias relativamente aisladas entre si y observables.  Antes de eso. y al esterilizarlo y posteriormente enfriarse. Alfredo Rodríguez 26 .

MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Agr. PREPARACION DE MEDIOS SOLIDOS IPA . Alfredo Rodríguez 27 .

Alfredo Rodríguez 28 . Tomar la muestra con el asa 5. Flambear la boca 4. Quemar el asa 2. La muestra en el asa se lleva a un medio estéril. Cerrar el tubo 7. IPA . Agr. Flambear nuevamente la boca del tubo 6. SIEMBRA Técnica aséptica 1.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Abrir tubo con microorganismos 3.

. Hay diversas maneras de realizar la siembra. SIEMBRA 8. Agr. Alfredo Rodríguez 29 . Siempre en ambiente aséptico próximo al bunsen. IPA .La muestra obtenida en el asa se siembra en una placa con medio solido estéril.MICROBIOLOGIA 2011 Ing.

MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Alfredo Rodríguez 30 . siembras IPA . Agr.

MICROBIOLOGIA 2011 Ing.IPA . Agr. Alfredo Rodríguez 31 .

Alfredo Rodríguez 32 .MICROBIOLOGIA 2011 Ing.IPA . Agr.

MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Alfredo Rodríguez 33 . Agr. OBSERVACION PREPARACION DE UN FROTIS IPA .

Agregar acetona y/o alcohol y esperar 4 segundos (parte critica de la coloración) 6. 4. 2. IPA . Todas las células Gram positivas y Gram negativas se tiñen de color azul-purpura. Agr. Enjuagar con agua. 3. Tinción de Gram http://youtu. Enjuagar con agua. 8. Enjuagar con agua. 5. Alfredo Rodríguez 34 .be/gTKTdBTghdQ 1.MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Agregar lugol y esperar 1 minuto. 7. Tinción de contraste agregando safranina o fucsina básica y esperar 1-2 min Este tinte dejará de color rosado- rojizo las bacterias Gram negativas. Agregar cristal violeta o violeta de genciana y esperar 1 min. Enjuagar con agua.

MICROBIOLOGIA 2011 Ing. Alfredo Rodríguez 35 .IPA . Agr.

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