C.

AISLAMIENTO DEL PATÓGENO

1. LAVADO DE TEJIDOS AFECTADOS
a. Partes subterráneas
* Realizar limpieza inicial con abundante agua.
* Alargar el proceso de lavado, para el caso de hongos
sensibles a desinfectantes

b. Partes aéreas
* Colocar las partes seleccionadas bajo un chorro de agua
corriente y lavar cuidadosamente
* En el caso de áreas con ceras o pelos realizar una inmersión
momentánea en alcohol

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Hojas Cortar el material en cuadrados pequeños. raíces gruesas.3. DESINFECCIÓN Utilizar para esto * Alcohol etílico al 70%: Para desinfección superficial de órganos leñosos. etc . luego flamear. pasar un algodón humedecido con alcohol sobre la lesión cerrada * Hipoclorito de sodio al 2%: sumergir cortes de tejidos durante 3` 2 .Sumergir o empapar el órgano a esterilizar. colocar en lugar aséptico (o sobre papel secante esterilizado). a partir del borde de la lesión. frutos. CORTES a. . y que contenga parte enferma y parte sana de la hoja 4.Si se trata de fruto.

5.en el medio tibio c.D.en el medio tibio e.en el medio tibio b. USO DE PRODUCTOS ANTIMICROBIANOS Uso de inhibidores como: a.E. Rosa de bengala 100 – 300 ppm. ---------. ENJUAGE . Antibióticos de amplio espectro ---------. Ácido láctico 25 gotas / L. Estreptomicina 200 ppm -------------.----esterilizable d. PCNB : para hongos secundarios ---------.en el medio tibio 3 .Alcohol: Dejar que el alcohol se evapore 6. 3-4 veces y (opcional) secar en papel de filtro estériles .Hipoclorito de sodio: Enjuagar en esterilidad con A.

7. SIEMBRA EN MEDIO DE CULTIVO * Hojas: Colocar los cortes en medio de cultivo (4-5 cortes/ placa) * Tejido leñoso o frutos: Abrir la lesión con cuchillo o bisturí estéril (luego de empapar y flamear). con luz si fuera necesario 4 . INCUBACIÓN Temperatura ambiente por 5 a mas días. exponer parte interna afectada y sembrar directamente en medio de cultivo Importante: Medios pobres en hidratos de carbono limitan multiplicación de bacterias contaminantes e inducen al hongo a entrar en fase de esporulación 8.

OBSERVACIÓN . Un mismo hongo en todos los cortes. Ningún hongo . c.Se pueden realizar identificaciones directamente en las placas: .9. b.Correlacionar el (los) hongos aislado (s) con la literatura .Debe ser diaria.Macroscópicamente: Características de la colonia .Resembrar en placas o tubo con medio inclinado para su posterior identificación y pruebas de patogenicidad (si fuera necesario) . Diferentes hongos en cada corte.Microscópicamente: Características de las hifas y de las estructuras de reproducción ESQUEMA 5 . puede observarse: a.