Instituto Politécnico Nacional

Escuela Nacional de Ciencias Biológicas

Métodos de análisis

“Aplicaciones de
ultracentrifugación” Integrantes
• Sandoval Nájera Liliana
• Gamboa Contreras Alain
Grupo : • Rodríguez Cerrillo Atziry
5QM1

Centrifugación Técnica de MODALIDAD sedimentación. • Alta: entre 10000 y Se aplica al análisis o a 20000 rpm la separación de • Ultracentrifugación: mezclas de: más de 20000 rpm • Partículas • Células . • Baja: menos de 10000 acelerada gracias al uso rpm de fuerza centrífuga.

Uso de ultracentrífugas • Se utilizan para procesos de separación de macromoléculas y el estudio de su sedimentación .

Diagrama básico de una ultracentrífuga .

Fraccionamiento subcelular • Centrifugación diferencial: Basada en la separación por TAMAÑO .

Separación de proteínas .

Gradiente de sacarosa • Obtención de plásmidos 3. BAMD (3. Análisis de ácidos nucleicos • Separación de DNA en base al contenido de GC 1.6-bis (acetoximercuriometil) dioxano) • Fraccionamiento de RNA 2. Utilizando CsCl .

Nivel industrial • Purificación de aceites • Extracción de proteínas de interés animal y vegetal • Eliminación de impurezas en jugo de frutas .

Equilibrio de sedimentación • Gradiente de densidad • La separación se da en continuo (empleando instrumentación) base a la DENSIDAD de • Tiempo de centrifugación largo los componentes (días) • La densidad del • Se alcanza equilibrio entre: componente se iguala 1. Sedimentación (Movimiento con la del medio al fondo) 2. Difusión (Homogenización) .

Aplicaciones • Caracterización de subunidades en complejos: 1.Proteína 2. Proteína . Proteína – DNA • Determinación de sistemas de asociación (cianobacterias y virus) • Interacciones y afinidad entre proteínas (inmunológicos) .

Tejeda • Hilda Guevara (2008) “Métodos en centrifugación” [Internet] [Consultado el 24 de Mayo de 2017] Disponible en: http://www.Referencias • Jeffrey Hansen (1999) “Analytical Ultracentrifugation as a Contemporary Biomolecular Research Tool” [Internet] [Consultado el 24 de Mayo de 2017] Disponible en: https://www. Techniques of Chemistry Volume XVI” John Wiley & Sons.nlm..mx/computo/pdfs/met/Centrifugacion.ibt. Inc.p df .pdf • Wen Hsu.(1981) “Separations by Centrifugal Phenomena. H.unam. 466 pp.nih.gov/pmc/articles/PMC2291609/pdf /v010p00163.ncbi.