APOPTOSE

PLAN
I) Introduction: II) Apoptose et nécrose: III) Caractéristiques morphologiques: IV) Les différentes étapes du processus apoptotiques  Phase d’initiation:  - Voie intrinsèque  - Voie extrinsèque  Phase d’exécution: V) Stimuli apoptotiques

INTRODUCTION
• Il existe deux principales formes de mort cellulaire:  - La nécrose  -L ’apoptose • APOPTOSE: apo pour éloignement et ptose pour chute. • APOPTOSE= mort cellulaire programmée

INTRODUCTION
• L’apoptose est différente de la nécrose, tant d'un point de vue morphologique que biochimique. • Nécrose:  Mort accidentelle  Toujours pathologique  Non régulée  Survient par groupes de cellules  Inflammation et dommages au niveau des tissus

INTRODUCTION
• Apoptose:
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Mort programmée Physiologique ou pathologique Régulée Survient sur cellules isolées Absence de phénomènes inflammatoires

INTRODUCTION
• L’ apoptose fait partie intégrante de la physiologie normale d'un organisme :  - développement embryonnaire : Formation des orteils, des organes génitaux, du développement du SN (Mort massive: étapes précoces )  - Homéostasie tissulaire.  - élimination de cellules dangereuses

INTRODUCTION
• Une dérégulation de la mort cellulaire programmée peut-être à l'origine de nombreuses pathologies:  défaut d’apoptose: cancers, syndromes lymphoprolifératifs.
 

Excès d’apoptose: SIDA, maladies neurodégénératives.

MORPHOLOGIE
• une condensation du cytoplasme • Une condensation de la chromatine • La membrane plasmique bourgeonne transitoirement • la cellule se fragmente en corps apoptotiques • phagocytose des corps

• Fragmentation de l’ADN (nucléases) • Protéolyse intracellulaire ( protéases) • Modification biochimique de la membrane plasmique (l’externalisation de la phosphatidylsérine) signaux « mange-moi » • Phagocytose par les cellules phagocytaires •

Étapes du processus apoptotique
VOIE INTRINSEQUE VOIE EXTRINSEQUE

Phase d’initiation

Mitochondrie

Récepteurs de mort

Apotosome Caspases initiatrices

DISC

Phase d’exécution

Caspases effectrices

apoptose

PHASE D’INITIATION
• S’organise autour de la mitochondrie • Apoptose est déclenchée par la libération dans le cytosol de certaines protéines mitochondriale, notamment le cytochrome c . • Formation d’un complexe macromoléculaire: apoptosome comprenant des caspases régulatrices. • Activations des caspases régulatrices • Activations caspases effectrices •

Voie intrinsèque ou mitochondiale

PHASE D’INITIATION
Voie intrinsèque ou mitochondiale

Voie intrinsèque ou mitochondiale
• Fait intervenir différentes protéines:  - les caspases régulatrices.  - la molécule adaptatrice Apaf-1  -Protéines de la famille Bcl2: Perméabilsation de la membrane mitochondriale • •

• Caspases: Cysteinyl Aspartate Specific Protéinase • Enzymes protéolytiques qui clivent leur cible du côté carboxy-terminal d’un acide aspartique. • Synthétisés sous forme de zymogènes appelés procaspases (inactifs) • Proscapases sont clivés au niveau des résidus aspartate pour générer l’enzyme active: caspase

activation des caspases

• Apaf-1 (apoptosis protease activating factor1): protéine cytosolique connecte le cytochrome c à la cascade des caspases •

Voie intrinsèque ou mitochondiale • Les protéines de la famille Bcl2: contrôlent la pérméabilisation de la membrane mitochondriale • Présence d’au moins un domaine BH (Bcl2 homology): BH 1à BH 4 • On distingues 3 catégories:  - Anti-apoptotiques (4 BH): Bcl2, BclX Bclw,Mcl1: stabilisent les membranes  - Pro-apoptotiques (multidomaines BH): Bax, Bak, Bok  - Protéine à domaine BH3 isolé « BH3 seulement »: Noxa, Puma….

Les protéines de la famille Bcl2

VOIE EXTRINSEQUE
• = Voie des récepteurs de mort. • Récepteurs transmembranaires appartenant à la superfamille du TNF R (Tumor Necrosis Factor Receptor) • Possède dans leur portion intracytoplasmique C-terminal un domaine de mort. • TNF R1, Fas, les deux récepteurs TRAIL DR4 et DR5…

VOIE EXTRINSEQUE
• Domaine de mort permet le recrutement de protéines cytosoliques • Formation d’un complexe macromoléculaire: DISC ( Death Inducing Signaling Complex) • Au sein du DISC: activation des procaspases régulatrices • Exemple de Fas:

Étapes du processus apoptotique
VOIE INTRINSEQUE VOIE EXTRINSEQUE

Phase d’initiation

Mitochondrie

Récepteurs de mort

Apotosome Caspases initiatrices

DISC

Phase d’exécution

Caspases effectrices

apoptose

PHASE D’EXECUTION
• Destruction des constituants cellulaires • Caspases effectrices (3, 6 et 7)activées par protéolyse:  pro-caspases (inactives) caspases(actives) • Clivage des protéines cellulaires • Nucléases qui coupe ADN • Flippase: modification de la membrane plasmique

Signaux apoptotiques
• De nombreux stimuli localisés à l’intérieur ou à l’extérieur de la cellule sont à l’origine de l’enclenchement du processus apoptotique •

Signaux apoptotiques
• Ligand de récepteurs de mort cellulaire • Exemple FasL/Fas: système immunitaire; élimination de cellules infectées

Signaux apoptotiques Absence de facteurs de croissance

Signaux apoptotiques
Absence de facteurs de croissance
• Certaines cellules cancéreuse ont développé des mécanismes qui leur permettent de survivre en l’absence de facteurs de survie • Exemple: surexpression de Bcl2

Signaux apoptotiques
Dommage cellulaire:
Bcl2 Dommage De l’ADN p53 Protéine à BH3 isolé

Cyt.c Bax

Apaf1

caspases

apoptose

Signaux apoptotiques
• Traitement par des médicaments cytotoxiques • Irradiation •

Points clés
• Apoptose=mort cellulaire programmée • Caspases sont les principaux médiateurs intracellulaires de l’apoptose • Leurs activation dépend de deux voies:  voie intrinsèque  voie extrinsèque • Protéines de la famille Bcl2