REFERAT

UJI TEST INTERFERON GAMMA RELEASE

ASSAY UNTUK MENDIAGNOSIS
TUBERCULOSIS

Jonathan Wiradinata 11.2015.134

Kepaniteraan Klinik Ilmu Penyakit Dalam RSUD Cengkareng

Periode 24 April 1 Juli 2017
DEFINISI
Tuberkulosis (TB) merupakan penyakit menular yang disebabkan oleh
Mycobacterium tuberculosis

Umumnya TB menyerang paru-paru, sehingga disebut dengan TB paru.

Tetapi kuman TB juga bisa menyebar ke bagian atau organ lain dalam
tubuh

Seseorang yang tertular dengan kuman TB belum tentu menjadi sakit TB.
Kuman TB dapat menjadi tidak aktif (dormant) selama bertahun-tahun
dengan membentuk suatu dinding sel berupa lapisan lilin yang tebal

Bila sistem kekebalan tubuh seseorang menurun, kemungkinan menjadi

sakit TB menjadi lebih besar. Seseorang yang sakit TB dapat disembuhkan
dengan minum obat secara lengkap dan teratur.
ETIOLOGI
Tuberculosis (TB) merupakan penyakit yang ditularkan melalui udara dan
disebabkan oleh bakteri Mycobacterium tuberculosis (M.tuberculosis)

M. Tuberculosis merupakan bakteri berbentuk bentuk batang, tidak

menghhasilkan spora, bersifat aerob. Pada umumnya berukuran 0,5 m
hingga 3 m dan diklasifikasikan sebagai acidfast bacilli dan memiliki
struktur dinding sel yang penting untuk kelangsungan hidupnya

Barier inilah yang menyebabkan bakteri TB memiliki banyak karakter

fisiologi yang menyulitkan bidang kesehatan, termasuk resistensi pada
antibiotic dan mekanisme perthanyan tubuh
ASPEK IMUNOLOGI INFEKSI
TB Bakteri masuk respon imun oleh
fagosit dan sel NK sel NK
memproduksi Interferon Gamma
(IFN-g) aktivasi makrofag

Timbul respon imun protektif utama

Terhadap bakteri intrasel CD4+ dan
CD8+

Aktivasi sel hasilkan sitokin (IFN-g

dan TNF) hiperkativasi granuloma
dan nekrosis sentral (nekrosis kaseosa)

Pembentukan granuloma fibrosis dan

nekrosis scaring keluhan TB
TESTING METHODS FOR TB INFECTION
Saat ini, ada dua metode yang tersedia untuk mendeteksi infeksi M. tuberculosis
di Amerika Serikat, yaitu

Tes kulit tuberkulin Mantoux (TST)

Release assay interferon-gamma (IGRA)

Quantiferon-TB Gold test in Tube (QFT-GIT)

Uji T-SPOT.TB

Untuk membedakan yang terinfeksi dari orang-orang yang tidak terinfeksi.

Namun, reaksi negatif terhadap salah satu tes tidak mengecualikan
diagnosis LTBI atau penyakit TB
Keputusan tidak boleh didasarkan pada hasil TST atau IGRA saja. Tes
tambahan diperlukan untuk mendiagnosis penyakit TB
MANTOUX TUBERCULIN SKIN TEST
Suatu zat yang disebut purified protein derivative (PPD), yang berasal dari
tuberkulin, disuntikkan di bawah kulit

PPD menghhasilkan T-sel yang dimediasi tertunda-jenis reaksi

hipersensitivitas jika seseorang telah terinfeksi M. tuberculosis

Dibutuhkan 2 sampai 8 minggu setelah infeksi awal dengan M. tuberculosis

untuk sistem kekebalan tubuh untuk dapat bereaksi terhadap PPD dan
infeksi yang akan terdeteksi oleh TST

Pada beberapa orang yang terinfeksi M. tuberculosis, kemampuan untuk

bereaksi terhadap PPD mungkin berkurang selama bertahun-tahun.
MENGATUR DAN MEMBACA TST

TST dilakukan dengan suntikan intradermal 0,1 ml PPD yang mengandung 5 unit
tuberkulin ke permukaan volar lengan bawah

Reaksi terhadap PPD biasanya mulai 5 sampai 6 jam setelah injeksi, mencapai
maksimum pada 48 sampai 72 jam, dan mereda selama beberapa hari

TST dibaca dengan meraba tempat suntikan untuk menemukan area indurasi
(pembengkakan)
FENOMENA BOOSTER TST
INTERFERON-GAMMA RELEASE ASSAYS
IGRA mendeteksi adanya infeksi M. tuberculosis dengan mengukur respon imun
terhadap protein TB di seluruh darah

IGRA tidak bisa membedakan antara LTBI dan penyakit TB aktif

IGRA dapat digunakan untuk keperluan surveilans atau untuk

mengidentifikasi orang-orang yang mungkin memperoleh manfaat dari
pengobatan, termasuk orang-orang yang atau akan berada pada
peningkatan risiko perkembangan penyakit TB jika terinfeksi M.
tuberculosis

Tes QuantiFERON-TB Emas in-Tube (QFT-GIT)

Uji T-Spot.TB.
INTERFERON-GAMMA RELEASE ASSAYS
IGRA mendeteksi adanya infeksi M. tuberculosis dengan mengukur respon imun
terhadap protein TB di seluruh darah

IGRA tidak bisa membedakan antara LTBI dan penyakit TB aktif

IGRA dapat digunakan untuk keperluan surveilans atau untuk

mengidentifikasi orang-orang yang mungkin memperoleh manfaat dari
pengobatan, termasuk orang-orang yang atau akan berada pada
peningkatan risiko perkembangan penyakit TB jika terinfeksi M.
tuberculosis

Tes QuantiFERON-TB Emas in-Tube (QFT-GIT)

Uji T-Spot.TB.
TUBERCULIN SKIN TEST VS. INTERFERON-GAMMA
RELEASE ASSAY
TST maupun IGRA memiliki mekanisme yang sama yaitu stimulasi pelepasan
sitokin oleh sel T setelah pemberian antigen tertentu
ANTIGEN SPESIFIK TB: ESAT6 DAN CFP10
Lokus RD1 tediri atas 9 gen aitu Rv3871 sampai Rv3879 dengan panjang 9,5 kb
mengkode suatu sistem sekresi yang dinamakan ESX-1

Sistem sekesi ESX-1 pada M. tuberculosis disebut juga sistem sekresi tipe
VII karena sistem sekresi tipe I sampai VI telah teridentifikasi terlebih
dahulu dan merupakan milik baktei gram negatif.

Sistem sekresi ESX-1 tedrii dari banyak protein di antaranya terdapat dua
potein target antigenik sel T yang imunodominan dan paling esensial
terhadap virulensi M. tuberculosis, yaitu
secreted antigenic target dengan berat molekul 6 kDa (ESAT6)
culture filtrate protein dengan berat molekul 10 kDa (CFP10)
PRINSIP PEMERIKSAAN IGRA
3 tabung : tabung kosong (Nil), tabung TB
Antigen, dan tabung Mitogen

Tabung TB Antigen berisikan campuran cocktail

peptida yang menyerupai protein-protein ESAT-6,
CFP-10, dan TB7.7 untuk merangsang sel darah
putih limfosit dalam darah heparin tersebut

diinkubasi pada suhu 37*C secepat mungkin

dalam jangka waktu selama 16-24 jam, lalu
plasma dipisahkan dengan cara pemusingan
(centrifuge)

Tabung Mitogen menjadi kontrol positif dan juga

untuk mengetahui apakah prosedur penanganan
spesimen darah serta inkubasi sudah benar
Plasma diperiksa dengan cara ELISA terhadap
kadar interferon- (IFN-) yang dikaitkan dengan
infeksi MTB
PENAFSIRAN HASIL TES
IGRA
Uji dianggap positif bila kadar IFN- yang terbentuk pada tabung TB
Antigen lebih banyak secara bermakna (dalam IU/mL) daripada tabung Nil.
Tabung Mitogen dapat dipakai sebagai kontrol positif.
Bila respons rendah terhadap Mitogen dan hasil tabung TB Antigen juga
negatif maka dinyatakan sebagai indeterminate. Ini dapat dijumpai pada
keadaan limfosit sedikit, keaktifan limfosit rendah karena penanganan
spesimen yang kurang baik
Tabung Nil dipakai untuk menilai latar belakang (background), pengaruh
antibodi heterofil, atau IFN- tidak spesifik dalam darah
PERANAN IGRA PADA BERBAGAI KASUS
1. TB aktif

Dari penelitian disimpulkan bahwa IGRA lebih superior dibandinkan TST untuk deteksi TB
aktif dengan pooled sensitivitas 70% (TST), 81% (QTF-IT) dan 87,5% (T-SPOT TB).
2. TB Laten

Kendala dalam menentukan akruasi diagnosis baik IGRA maupun TST adalah tidak
adanya baku emas untuk diagnosis TB laten.
3. Anak-anak

IGRA dapat meningkatkan ketepatan diagnosis TB hanya pada anak imunokompeten

berusia lebih dari 5 tahun
4. Individu dengan HIV

Akurasi IGRA cukup rendah baik untuk memastikan maupun menyingkirkan diagnosis TB
aktif pada individu dewasa dengan HIV
5. Pekerja kesehatan

Seiring berjalannya implementasi program didapatkan fakta bahwa positifvitas QTF-IT

cukup tinggi angka konversi (perubahan dari negatif menadi positif) dan reversi
(perubahan dari positif menjadi negative) juga cukup tinggi pada pemeiksaan serial
menandakan bahwa repodusibilitas QTF-IT buruk
KESIMPULAN
IGRA memiliki banyak keunggulan dibandingkan TST khususnya pada
individu dengan riwayat vaksinasi BCG dan rendahnya angka kunjungan
kedua untuk pembacaan hasil TST

IGRA tidak dapat membedakan infeksi TB aktif ataupun TB laten

Terdapat 2 platform komesrial IGRA yang tesedia di dunia dan juga

Indonesia yaitu Quantiferon dan T-SPOT.TB

Mengingat harganya yang tergolong mahal saat ini penggunaaan IGRA di

Indonesia masih tebatas pada sektor privat