Etiologi : bhs Latin fervere (mendidihkan).

Mula2 istilah fermentasi digunakan pd

proses pengubahan glukosa menjadi
alkohol yg tjd scr anaerob.

Akhirnya, istilah fermentasi didefinisikan :

seluruh perombakan seny organik yg
dilakukan mikroorganisme yg melibatkan
enzim yg dihasilkannya sbg biokatalis dlm
lingkungan yg dikendalikan.
Pengertian lain
1. Proses yg menggunakan suatu senyawa
(substrat) menjadi senyawa lain (produk) oleh
adanya aktivitas mikroba
2. Suatu proses yg menghasilkan energi dg
melibatkan molekul organic baik sebagai donor
maupun akseptor elektron
3. Suatu proses yg melibatkan kultur mikroba baik
yg bersifat aerob maupun anaerob
4. proses pembusukan bahan makanan
5. suatu kultur mikroba dalam kondisi optimum
untuk
menghasilkan produk berupa metabolit-metabolit,
enzim, atau produk lain (seperti biomassa)
PENGGOLONGAN BERDASARKAN CARA OPERASI
A. Fermentasi cair
I. Submerged fermentation (fermentasi bawah
permukaan):
Batch process
Fed-batch (gabungan sistem batch dg kontinnyu)
Continuous process (proses sinambung/kontinyu)
II. Surface fermentation (fermentasi permukaan),
misal pada pembuatan nata de coco
B. Solid State Fermentation/ fermentasi padat
misal pada pembuatan tape, oncom, koji dll.
 BERDASARKAN LETAK PRODUKSI
produk intraseluler
produk ekstraseluler

BERDASARKAN PERAN DALAM

METABOLISME
metabolit primer
metabolit sekunder
PRODUK FERMENTASI KOMERSIL
1. Fermentasi dengan produk BIOMASSA (sel mikroba) :
SCP (Spirulina, Sancorella)
spora Penicillium roquefortii (keju)
Rhizobium sp.(simbiosis dg tan Leguminoceae)
Bakteri asam laktat (yoghurt)
B. thuringiensis (kristal protein insektisida)

2. Fermentasi dengan produk ENZIM mikroba

contoh : amylase, protease, pektinase, peroksidase,dll
Produksi enzim oleh sel mikroba dpt ditingkatkan dg cara
modifikasi pengendalian kondisi lingkungan (mis,
pemberian induser pada kultur)
Enzim mikroba dapat dibedakan atas :
- enzim ekstrasel - enzim konstitutif
- enzim intrasel - enzim induktif
3. Fermentasi dengan produk METABOLIT mikroba :
metabolit primer, senyawa antara yg disintesis
oleh aktivitas sel pd fase pertumbuhan (trofofase)
metabolit sekunder, senyawa yang disintesis sel
setelah fase pertumbuhan (idiofase)

4. Fermentasi dengan produk hasil BIOKONVERSI

melalui modifikasi suatu senyawa yg ditambahkan
ke dalam medium fermentasi untuk menghasilkan
senyawa lain.
Contoh : progesterone 11- hidroksiprogesterone
 Improving Production in
Fermentation
Culture medium manipulation
Culture condition manipulation
Strain improvement
Adding precursor molecules
Improving product recovery
 tahapan bioproses
pemilihan jenis mikrobia
Formulasi media,
Preparasi inokulum,
Proses fermentasi
kontrol proses
Pemanenan produk :pemisahan, pemekatan,
pemurnian
Proses fermentasi memerlukan komponen sbb :
a) Kultur murni dr organisme terpilih dg jumlah yg
sesuai dan kondisfi fisiologis yang baik;
b) disterilisasi, hati-hati thd komposisi medium
pertumbuhan organisme;
c) Ada seed fermenter, fermenter produksi mini
sebagai inokulum utk menginisiasi proses dlam
fermenter utama;
d) Fermenter produksi, berukuran besar,
e) Peralatan utk :
i) mengetahui medium kultur tetap dlm
keadaan steady state,
ii) pemisahan sel,
iii) koleksi sel tanpa supernatan,
iv) purifikasi produk, dan
v) perlakuan panen.
 Adalah suatu wadah atau tangki dimana
sel atau enzim (tanpa sel) melakukan
transformasi terhadap bahan baku
menjadi produk biokimia atau produk
yang dikehendaki.

Disebut juga sebagai Bioreaktor

Fungsi pokok fermenter adalah dapat menyediakan
lingkungan yang sesuai (nyaman) dimana
organisme dapat secara efisien menghasilkan
target produk yang dikehendaki, misalnya :
- Biomassa sel,
- Metabolit (primer atau sekunder),
- Atau produk biokonversi.
Kemampuan apa yag harus dipenuhi fermenter ?
Konsentrasi biomassa harus tetap tinggi
Mampu mempertahankan kondisi sterile
Konsumsi tenaga/energi efisien
Agitasi efektif
Mampu memindahkan panas
Mudah dibersihkan
Ada fasilitas sampling
 Ada3 kelompok bioreaktor yg digunakan dalam
produksi industri :
- non-stirred, non-aerated (Beer and wine)
- non-stirred, aerated (Biomass, eg Protein)
- stirred, aerated (Antibiotics)
Stirred Tank Reactor
 Ada sistem agitator
Ada sistem penghantaran oksigen
Ada sistem kontrol buih
Ada sistem kontrol temperatur
Ada sistem kontrol pH
Ada bagian untuk Sampling
Ada sistem utk pembersighan dan sterilisasi.
Ada bagian (pipa) utk pengosongan reaktor.
Instrumentation of a
fermentor Use of fermentors

RPM Starters milk, silage,

Qair Baker yeast bread

Pressure Alcoholic beverages

CO2,O2 ? Lactic acid/organic acids (citric)

Gas balance Antibiotics

Vaccines
OD?
Monoclonal antibodies
pH (controlled)
Recombinant proteins (or toxin ?)
Temperature
Waste water treatment
Bioleaching
Tahap transfering proses industri dari skala
laboratorium ke fermentor komersial

Shake flash Experiments

Fermentor skala Lab (5-10 L)
Fermentor skala Pilot (300-3000 L)
Fermentor Komersial (10,000-500,000 L)
Batchprocess
Fed-batch process
Continuous
process
Semi-continuous
process
Ada 2 Tipe Sistem Fermentasi :
(di lab)

Sistem Tertutup :
Tidak ada penambahan nutrien lagi
setelah inokulasi (kecuali oksigen utk
yg aerob)
Pertumbuhan berhenti setelah bbrp shake flask agar plate
saat

Sistem Terbuka :
Nutrient secara kontinyu
dimasukkan setelah inokulasi,
pertumbuhan akan berlangsung
terus sepanjang medium segar
(fresh medium) ditambahkan.
mikroorganisme dan nutrien secara
koninyu masuk dan keluar dari
fermenter
 Tipe Sistem Fermentasi
1) Batch culture: microorganisms are inoculated into a fixed volume
of medium and as growth takes place nutrients are consumed
and products of growth (biomass, metabolites) accumulate.

2) Semi-continuous:
fed batch-gradual addition of concentrated nutrients so that the
culture volume and product amount are increased (e.g. industrial
production of bakers yeast);
Perfusion-addition of medium to the culture and withdrawal of
an equal volume of used cell-free medium (e.g. animal cell
cultivations).

3) Continuous: fresh medium is added to the bioreactor at the

exponential phase of growth with a corresponding withdrawal of
medium and cells. Cells will grow at a constant rate under a
constant condition.
Biotechnological processes of growing
microorganisms in a bioreactor
Batch Culture
Merupakan suatu sistem tertutup
Merupakan operasi reaktor yg sederhana.
bioreaktor diisi dg medium fermentasi dan inokulum
selanjutnya dibiarkan utk melakukan proses hingga
saat pemanenan.
Ketika fermentasi sudah berakhir, hasil fermentasi
dipanen dan dilakukan downstream processing.
Bioreaktor dibersihkan, disterilkan, diisi,dan
diinokulasi kembali, selanjutnya proses fermentasi
berjalan lagi.
Batch Culture
merupakan proses yg dinamik dimana sistem tidak
pernah mengalami steady state
komponen media steril dimasukkan pd awal
fermentasi dg tidak ada penambahan makanan lagi
setelah inokulasi.
laju pertumbuhan mikroorganisme akan
berlangsung terus sehingga mencapai titik nol
seiring dengan semakin menurunnya nutrien atau
terakumulasinya produk toksik.
tahap pertumbuhan dlm sistem batch:
Lag phase
Exponential phase
Stationary phase
Death phase
 Sistem sederhana
sekali sterilisasi dan tidak memungkinkan utk
kontaminasi
biaya peralatan lebih rendah
Produksi seragam - consistency
 Terdapat lag time
Terbentuk Toxin
Utk produk-produk potensial,
produksinya terbatas
Continuous Culture
proses fermentasi berkelanjutan
didisain sedemikian rupa shg
pemasukan nutrisi dikontrol dan
berlangsung secara konstan.
Tahap awal proses sama dg kultur
batch, namun ketika kultur sudah
mencapai tahap eksponensial, maka
dpt diperpanjang terus sampai tak
terbatas dg secara kontinyu
menambahkan medium segar ke
dalam sistem.
Continuous Fermentation
Bioreaktor secara terus menerus di stirer dan
volume konstan selalu dipertahankan dengan
cara medium baru secara konstan selalu
ditambahkan dan hasil fermentasi juga secara
konstan dipanen sebanding dg volume yg
ditambahkan.
Keadaan steady-state akan selalu tercapai,
dimana laju pertumbuhan mikrobia akan sama
dengan jumlah mikrobia yang digantikan dari
fermentor. Proporsional dengan laju pelarutan
oleh medium.
Continuous Culture
Merupakan sistem yg terbuka
Medium baru secara konstan dimasukkan,
dan medium lama dikeluarkan
Memungkinkan terjadi pertukaran gas
Memungkinkan utk pertumbuhan dan
produksi yg lama
Organisme yg memproduksi dpt
dipindahkan bersamaan dg medium lama
 Continuous Culture
Sesuai utk produksi senyawa yg disekresikan
organisme ke dalam medium
Memungkinkan utk memonitor secara kontinyu
dan memodifikasi lingkungan kultur
Bermanfaat apabila produksi molekul yg tidak
perlu diatur ulang
Keuntungan continuous culture
Keadaan steady state mudah dikontrol
Laju konsumsi nutrien dan laju pemanenan
dapat dipertahankan pada kondisi optimal.
Selektivitas tinggi dan mendukung
perkembangbiakan mikroorganisme dengan
adaptasi terbaik dalam kultur.
Kelemahan sistem continuous
Pengoperasiannya mahal
Lebih sulit utk mempertahankan
sterilitasnya
Little value, apabila produknya tdk
disekresikan atau dihasilkan setelah
periode waktu tertentu yang ditentukan
 Merupakan modifikasi sistem batch culture.
fresh medium secara kontinyu dan periodik
ditambahkan, tanpa menghilangkan/ mengeluarkan
medium kultur sampai mencapai volume tertentu.
Fermentor didisain utk dpt mengakomodasi
peningkatan voliume medium. Pada sistem ini tahap
pertumbuhan adalah steady state semu.
Pada sistem ini dpt dicapai tingkat proses dan produk
yg cukup besar
 Kapasitas aerasi kultur dalam fermentor dpt
dipertahankan.
Dapat dihindari efek penghambatan dari komponen
medium spt : cepatnya konsumsi karbon, nitrogen, atau
fosfat;
Dapat dihindari efek toksik dari komponen medium;
Dpt digunakan utk menyediakan tingkat kebutuhan
nutrisi yg terbatas utk strain auxotrophic.
 Produksi ragi roti
Produksi penisilin
Pemilihan mikroorganisme

Teknologi Fermentasi merupakan teknologi untuk
menumbuhkan sel dalam skala besar dg efisiensi yg
tinggi termasuk juga proses-proses mendapatkan
produknya.
Proses utama yang berlangsung secara aktual
dilakukan oleh mikroorganisme, yang biasanya
diistilahkan sebagai biocatalysis
Mikroorganisme (biokatalis) bertindak sebagai
mesin utama baik untuk menghasilkan produk
maupun melakukan transformasi kimia
 Keuntungan Menggunakan
Mikroorganisme
Memiliki laju pertumbuhan yang sangat cepat.
Mudah beradaptasi
Dpt. menggunakan produk sisa sebagai
substratnya (sisa proses produksi yang lain atau
limbah pertanian, rumah tangga, dll)
Dapat ditumbuhkan secara terus menerus
(continuous), dalam skala besar tidak pernah
dihentikan dan tidak perlu disterilisasi ulang.
(memiliki keuntungan ekonomi)
Memiliki kandungan protein tinggi
 Keuntungan Menggunakan
Mikroorganisme
Mampu menghasilkan produk yang tinggi dari

proses yang mungkin kecil
Secara genetik dapat dimanipulasi
Biasanya menghasilkan produk yang tidak toksik
atau limbah yang tidak toksik
Karena mengunakan organisme hidup, maka
temperatur yang diperlukan lebih rendah
dibandingkan dengan apabila prosesnya secara
kimia.
 SYARAT MIKROORGANISME
Dalam teknologi fermentasi, mikroorganisme

menentukan berhasil atau gagalnya proses
bioteknologi.
Harus dipilih mikroorganisme yg dapat
menghasilkan produk atau menjalankan proses
transformasi sesuai yg diinginkan
Tahap awal dalam merancang proses fermentasi
adalah mendapatkan mikroorganisme yang
sesuai dengan memilih yang paling potensial
utk diaplikasikan dalam industri.
 Pemilihan Mikroorganisme
Mampu menghasilkan produk & mutu produk yg
tinggi / komersial
Secara genetik mikroorganisme harus stabil
Strain harus dapat dibuat kultur murni, bebas dari
mikroorganisme lain dan phage
Strain harus dpt tumbuh seragam dan cepat setelah
inokulasi ke dalam fermentor. Harus dihindari
kemungkinan tjd reaksi dengan peralatan
Mudah di-scale up
Strain harus dpt menghasilkan produk sesuai
keinginan dalam periode waktu tertentu (mis. 3
hari), bebas dari produk toksik atau pecahnya sel.
Pemilihan Mikroorganisme
Strain harus mampu melindungi diri dari
kontaminan, jika mungkin. Proteksi diri dpt
dilakukan dg menurunkan pH, mampu dikultur pd
temperatur tinggi atau menghasilkan agen
antimikrobial.
Strain harus dapat dilakukan manipulasi genetik
Strain harus mampu dipelihara untuk waktu yang
lama dengan stabilitas dan viabilitas yang tetap
tinggi
Strain idealnya dpt ditumbuhkan dengan kebutuhan
unsur hara yang simple dan murah. Tidak
memerlukan penanganan yang rumit dalam hal
kebutuhan nutrisi dan proses produksi.
 Membeli dari Culture Collection
Men-skrining dari sumber alam
Melakukan rekayasa genetika
Melakukan mutasi
Menerapkan teknik biologi sel
 Cara Memperoleh Strain
Mikroorganisme

Membeli dari Culture Collection
 Cara Memperoleh Strain
Mikroorganisme

Men-skrining dari sumber alam
Lokasi Sampling: diambil dari lokasi tempat
mikroba tersebut tumbuh.
Prosesing Sample : Sampel harus segera diproses di
lab sesegera mungkin. Jika tidak mungkin, sample
dpt disimpan di suatu tempat yang dpt menjaga
integritasnya. Biasanya dalam pendingin (4oC)

Pre-treatmen Sample : bertujuan utk penapisan
awal. Umumnya dengan teknik konsentrasi sample
dan variasi temperatur. Misal. Teknik konsentrasi dg
filtrasi menggunakan cellulose nitrate atau cellulose
acetate filter. Variasi temperatur pd isolasi spora dg
suhu di atas 80oC untuk membunuh sel-sel vegetatif,
atau 70oC pada isolasi Actinomycetes
Screening based on culture enrichment :
menyediakan /mengatur komposisi nutrien dan
kondisi kultur yang sesuai khususnya bagi
mikroorganisme yg diinginkan dan menghilangkan
yang tidak diinginkan
 The industrial production of antibiotics begins with
screening for antibiotic producers

Pemurnia
n
 Cara Memperoleh Strain
Mikroorganisme
REKAYASA
GENETIKA
 Teknik biologi sel
Fusi Protoplas (terutama utk meningkatkan

frekuensi keberhasilan rekombinasi genetik)
Menghilangkan dinding sel menggunakan enzim litik
dengan adanya stabiliser osmotik
Dengan menggunakan agen fusogenik , misal
polyethylene glycol (PEG), protoplas diinduksi untuk fusi
dan membentuk hibrid atau diploid.
Regenerasi sel-sel yg viabel dari hasil fusi protoplas.
Preservasi dan Penyimpanan mikroorganisme

Serial transfer. Tidak direkomendasikan karena

sebagian besar mikroorganisme akan kehilangan
kemampuan yang diinginkan.
Penyimpanan pada agar miring. Temperatur
kamar, 4oC, -20oC dan selalu di subkultur tiap 6
bulan sekali.
Preservasi dalam air suling. Khususnya untuk
bakteria yang berspora atau fungi. Spora disimpan
dalam air pada suhu 5oC. Untuk pemakaian
terbatas.
Preservation dalam minyak.
Preservasi dan Penyimpanan mikroorganisme

Lyophilisasi atau dikering-bekukan : pembekuan

dilakukan pada akhir fase log yang dilanjutkan dengan
pembekuan dalam vakum untuk mengurangi kandungan
air sel.
Pengeringan dalam silika gel, kertas .
Penyimpanan dalam tanah. Tambahkan inokulum
dengan tanah kering steril dan biarkan kering pada
temperatur kamar selama 2 minggu. Digunakan khusus
untuk fungi dan Actinomycetes.
Penyimpanan dalam gliserol 10-20% pada suhu -20
atau -70 oC.
Penyimpanan dalam nitrogen cair. Sangat mahal.
Penyiapan Inokulum
Fermentasi memerlukan biakan murni yaitu
biakan di mana sel-selnya berasal dari
pbelahan satu sel tunggal.
Biakan murni mgd suatu populasi yg terdiri
dari satu macam mikroba saja.
INOKULUM DAN
SEED FERMENTER
INOKULUM : Sediaan mikrobia yang
disimpan dalam suatu media tertentu
(umumnya dalam bentuk padatan)
SEED FERMENTER : Sediaan mikrobia
yang ditumbuhkan dalam suatu bejana
tertentu dalam skala max 10% dalam
waktu tertentu (sampai fase eksponensial)
sebelum masuk ke fermentor fermentasi
yang sesungguhnya (biasanya dalam
bentuk cair). Seed fermenter tidak
ditujukan untuk menghasilkan produk,
tetapi sebagai penyiapan dan
memperbanyak inoculum
Syarat Inokulum
Sehat, lag fase kecil/pendek
Dapat dibuat/ditumbuhkan dalam volume besar
Harus memiliki ukuran yang pas untuk pertumbuhan
kinetik optimalnya
Bentuk morfologis stabil
Bebas dari kontaminan
Harus sudah masuk /berada dalam fase log
Produktivitas maksimum tetap
Sudah mulai diadaptasikan dengan medium
produksinya. Jika tidak memungkinkan dpt dilakukan
dengan menggunakan seed fermenter bertingkat.
Penyiapan Inokulum
Waktu (untuk mengaktifkan mikroba/inokulum)
organisme waktu
bakteri 20 120 menit
jamur dan alga 2 6 jam

Konsentrasi Inokulum
organisme konsentrasi (%)Tinggi rendahnya
Bakteri 0,1 3,0 konsentrasi inokulum
actinomycetes 5,0 10,0 tergantung dari
viabilitas sel, inhibitor
fungi 5,0 10,0 pertumbuhan atau
suspensi spora 1 50.000/L rendahnya nutrisi
dalam medium
Preparasi Seed Fermenter
Sub-Kultur dalam medium standar/dasar
(mirip medium utk penyimpanan) selama
24 48 jam tgt macam
mikroorganismenya.
Memindahkan ke dalam medium cair
(komposisi mirip medium untuk produksi,
hanya medium produksi utama dalam
konsentrasi kecil) sesuai dengan
konsentrasi yg dianjurkan, selama 3 5
hari (syarat sudah masuk fase log).
Pemindahan ke dalam fermentor
fermentasi sesungguhnya.
 Faktor kritis untuk mendapatkan
inokullum yg sesuai / pas adalah pada
pemilihan medium
Desain medium produksi ditentukan
oleh 2 faktor :
-Kebutuhan nutrisi organismenya, dan
-Pembentukan produk maksimum
 Tahapan Penyiapan Inokulum
1. Kultur Master (induk) dikultur pada media padat
2. Sekitar 10 koloni diinokulasi pada agar miring sbg kultur
submaster. Setiap kultur submaster digunakan untuk
melakukan produksi baru. Pada tahap ini, labu gojok bisa
diinokulasi untuk mengecek produktivitas kultur,.
3. Kultur submaster digunakan untuk menginokulasi satu labu
gojok (250 or 500 ml containing 50 or 100 ml medium), yg
kemudian digunakan sebagai inokulum untuk labu yg lebih
besar, atau fermentor lab, yg digunakan untuk inokulasi
pilot-scale fermentor.
4. Kemurnian kultur dicek pada tiap tahapan untuk mendeteksi
kontaminasi seawal mungkin.
5. Untuk mikroorganisme yang berspora, proses dapat
dimodifikasi untuk memudahkan penggunaan spora sebagai
inokulum.
Penyiapan inokulum
 Tahapan inokulum
Shake flash Experiments
Fermentor skala Lab (5-10 L)
Fermentor skala Pilot (300-3000 L)
Fermentor Komersial (10,000-500,000 L)

Frozen Seed Pre-Seed Seed Production

Seed Flask Fermenter Fermemter Fermenter
Media
 Media - Fermentasi

Semua proses fermentasi yg dilakukan oleh mikroorganisme

memerlukan media yang secara nutritional sesuai : broth, semi
padat, padat.
Umumnya proses fermentasi ada bbrp tahap yg masing-masing
perlu media yg berbeda. Misal : tahap propagasi inokulum
(starter), fermentasi skala-pilot, dan produksi fermentasi utama
(sesungguhnya).
Antara propagasi inokulum dan fermentasi utama seringkali
berbeda dalam macam nutrisi maupun formulasi mediumnya
1. mgd nutrisi yg dibutuhk bagi ptumbhan sel
2. mgd nutrisi yg dpt sbg sumber energi bagi sel
3. tidak mgd zat yg mghambat ptumbhan sel
4. tidak tdpt kontaminan yg dpt ningkatkan
psaingan dlm pggunaan nutrisi
5. harus mengandung semua elemen yg cocok utk
sintesis substansi sel maupun sintesis produk
metabolit
6. Nutrien yg terkandung harus dpt diformulasikan
utk menghasilkan produk target, biomassa
maupun metabolit spesifik

Syarat media
Selain itu, pd skala besar hrs dipakai sumber makanan yg relatif murah
dan memenuhi syarat sbb:
1. mproduksi hsl sebanyak2-nya
2. menuhi kadar produk atau biomassa sebanyak2-nya (per gram bhn
makanan terpakai) .
3. mproduksi produk yg tak diinginkan sekecil-kecilnya.
4. murah, mutu terjamin, mudah diperoleh.
5. nimbulkan efek samping sekecil2-nya akibat proses produksi spt
aerasi, agitasi, ekstraksi, pemurnian, dan pengolahan limbah.
Media & Produk Fermentasi
Formulasi medium tgt produknya dan sangat bervariasi
kmposisinya.
Jika produknya berupa biomassa atau metabolit primer
maka diupayakan medium yg memungkinkan utk
pertumb. optimal mikroorganisme
Untuk produksi metabolit sekunder : antibiotik, maka
diupayakan pertumb. optimal dikurangi.
Konsekuensinya media dibuat yg memungkinkan utk
pertumb. awal, diikuti dg yg memungkinkan utk
produksi metabolit sekunder. Pada titik ini suplay salah
atau bbrp nutrien (karbon, fosfor atau sumber nitrogen)
mungkin dibatasi utk mencapai tahap yg diperlukan.
Kebutuhan Dan Formulasi Media
Sebagian besar fermentasi, kecuali pd medium padat,
memerlukan sejumlah besar air dlm formulasinya.
Secara umum medium memerlukan : sumber karbon
baik utk energi maupun biositesis metabolit, sumber
nitrogen, fosfor dan sulfur.
Mikronutrien harus ditambahkan jika memang
diperlukan; bbrp mikrorganisme memerlukan vitamin
: biotin dan riboflavin.
Biasanya diperlukan buffer medium, pH medium
dikontrol dg menambah asam atau alkali dan
osmolaritasnya diperhatikan.
Diperlukan juga agen ati buih
 MEDIA DESIGN
1. NUTRITIONAL REQUIREMENTS
- Elemental requirements
- Specific nutrients, e.g. vitamins. minerals, amino acids, etc.
- Energy requirements - Carbon source and Oxygen
- Growth
- Product Synthesis
- Maintenance
2. ENVIRONMENTAL REQUIUREMENTS
- pH profile
- Temperature profile
- Dissolved oxygen profile
- Catabolite repression
- Physiological constraints, e.g. ionic strength, product inhibition
Laboratory process development
Shake Flask Experiments

Optimization of conditions
for cell growth and product
formation using shake flask
experiments:
1. pH
2. Temperature
3. Dissolved oxygen (DO)
4. Substrate choice
5. Maximal and optimal
substrate concentration
6. Size and mass of cells
7. Others
 Proses Fermentasi

Alur proses Fermentasi

Total waktu 3-20 hari

Frozen Seed Pre-Seed Seed Production

Seed Flask Fermenter Fermemter Fermenter
 Proses fermentasi
1. Nutrisi, substrat, dan inokulum
dimasukkan ke dalam fermentor
secara aseptis.
2. Pengaturan kecepatan aerasi dan agitasi.
Aerasi berfungsi sbg penyuplai oksigen
utk sel dlm fermetor. Laju oksigen yg
disuplai ke dlm fermentor dijaga stabil.
Fluktuasi laju alir oksigen dpt
menurunk kerja fermentor krn laju
transfer O2 tidak tetap shg
metabolisme sel terganggu krn kadar
DO yang tidak stabil.
Agitasi berfungsi sbg alat pghomogen
larutan fermentasi.
Pengadukan dilakukan oleh impeller.
Semakin banyak impeller di dlm
fermentor semakin homogen larutan
tersebut
.
Laju alir udara dan pengadukan saling terkait satu
sama lain, krn pengadukan akan ningkatkan laju
dispersi oksigen ke dalam larutan dan meratakan
kadar oksigen di seluruh medium fermentasi.

Di pinggiran fermentor tdpt baffle bfungsi mcegah

tjdnya vortex (pusaran air) shg dpt ningkatkan
efisiensi aerator.

Perlu dihindari foaming dg cara :

- ditambahk zat antifoam sblm proses fermentasi
(mis. Silicon).
Foaming tjd krn protein terdenaturasi dlm medium
fermentasi.
- Atau scr mekanik dg ngatur putaran agitator. Hal
ini lebih aman krn zat kimia yg terlalu banyak
ditambahk ke medium dpt mjd inhibitor
ptumbuhan mikroba.
Kontrol proses
Sel mikroba tdr dr seny organik spt protein, yg mudah berubah
sifat akibat perubh fisika atau kimia, mk selama proses di
dalam bejana fermentasi hrs dphatikan bbrp faktor fisika atau
kimia yg mungkin timbul yg dpt mpengaruhi jalannya proses.

Faktor-faktor yg perlu dikontrol antara lain:

keberadaan air
pH
keberadaan oksigen, yg mpengaruhi mikroba aerob atau
anaerob.
suhu, bila terlalu tinggi akan memecah protein.
kekentalan, yg akan mpengaruhi tegangan permukaan.
homogenitas.
kemungkinan kontaminasi.
kemungkinan timbulnya busa (foaming).
 pengunduhan
Hasil proses fermentasi adalah bmacam2 produk yaitu biomassa gel,
bioenzim, metabolit, biokonversi, sisa makanan, dan hasil samping yg
tidak diinginkan.
Utk mperoleh hasil masing2 produk yg diinginkan, harus dipisahk dan
dimumikan shg diperoleh produk yg bermutu.

Teknik pemisahan tgt produk yg akan dipisahkan dg mphatikan :

- Produk dalam (intraseluler) atau luar sel (ekstraseluler)

- Konsentrasi produk
- Sifat fisik (ukuran partikel dll) dan kimia
- Tujuan penggunaan produk
- Kemurnian yang diharapkan
- Harga produk dan pertimbangan ekonomi lain
Yang umum, teknik pemisahan itu meliputi:
pemisahan senyawa larut dan tidak larut, dg bbrp
teknik filtrasi, sentrifugasi, pemecahan gel.
isolasi, dg teknik ekstraksi dan adsorpsi.
pemurnian produk, dg teknik kromatografi,
pengendapan, ultrafiltrasi dan elektroforesa.
pekerjaan akhir, dg teknik kristalisasi, pengeringan,
pengendalian dan tindakan thd kemungkinan
pengotoran lain.
 Pengunduhan Produk Ekstraseluler

Kultur fermentasi Ekstraksi

Pemisahan bahan
tak larut Konsentrasi
Produk

Sel dan Fraksi

bahan tak larut larut
Pemurnian

Produk
akhir
 Pengunduhan Produk Tak Larut

Gravitasi Mekanik
Penyerapan Listrik
permukaan

Sentrifugasi Filtrasi
Dialisa Absorbsi Elektroforesis
Flokulasi
Pertukaran ion Elektroosmosis
Flotasi Elektrodialisa

Pemisahan Sel Filtrasi

Mikrobia dan Sentrifugasi
Padatan lain
Presipitasi/Pengendapan
CONTOH KONDISI
FERMENTASI
 Dhasilkan oleh
ANTIBIOTIK PENISILIN P. Notatum
P. Chrysogenum

Faktor Penting Cara Produksi Kultur Tenggelam

Kultur Permukaan

Bahan Dasar Kondisi Fermentasi

Suhu: 24oC
Sumber C: laktosa, dll
pH : 5 5,75
Sumber N: sodium nitrat
Aerasi : 400 Cu/mnt
Mineral: MgSO4.7 H2O
Oktadekanal 3%
Prekursor: asam fenil asetat
Antifoem tributil sitrat