You are on page 1of 16

ELEKTROFORESIS

PENDAHULUAN
Electro – phoresis = “being carried”

• “Electrically induced movement of particles” :


gerakan partikel yang bermuatan di dalam suatu
media yang diberi arus listrik
• Digunakan untuk pemisahan suatu campuran
senyawa yang bermuatan : protein atau DNA
Prinsip dasar elektroforesis
• Elektroforesis adalah suatu proses migrasi
molekul bermuatan di dalam suatu media yang
bermuatan listrik, dimana kecepatan migrasinya
tergantung pada muatan, ukuran dan bentuk setiap
molekul yang terlibat.
• Pada saat arus listrik diberikan, molekul
bermigrasi melalui media (biasanya berupa gel),
molekul yang kecil akan bermigrasi lebih cepat
daripada yang besar, sehingga akan terjadi
pemisahan
Tipe Elektroferesis
Elektroforesis vertikal untuk Elektroforesis horizontal untuk
analisis protein analisis DNA
DNA?
• DNA adalah asam organik, dan bermuatan
negatif
• Ketika DNA terkena medan listrik, partikel
bermigrasi ke arah elektroda positif
• Potongan DNA yang lebih kecil dapat bergerak
lebih jauh dalam waktu yang diberikan
daripada potongan yang lebih besar
Elektroforesis DNA
• Pada gel electrophoresis untuk DNA, enzim
restriksi memotong DNA menjadi beberapa
fragmen dengan panjang bervariasi.
• Semua fragmen tadi akan bergerak dari sisi gel
yang bermuatan negatif ke arah ujung yang
bermuatan positif.
• Apabila arus listrik dihentikan , fragmen DNA tadi
telah terpisah-pisah di dalam gel tersebut dan yang
berukuran lebih kecil akan berada lebih dekat pada
ujung postif. Fragmen tersebut akan terlihat seperti
bentuk barcode.
• Setiap bar dlm pola tersebut mengandung DNA
fragments dgn ukuran tertentu.
• Urutan DNA complement dpt digunakan sbg
probe untuk menentukan restriction fragment pada
gel yang memiliki urutan nukleotida tertentu.

• Contoh : Scientists dpt menggunakan DNA darah


dilokasi kriminal untuk mengungkap pelaku
kejahatan. Jika contoh darah sesuai dengan yg
terdapat pada gel elektroforesis , maka proses
pairing akan terjadi
Media Elektroforesis
Berupa gel (sediaan semisolid transparan)
• Utk pemisahan protein : digunakan gel
polyacrylamide
• Utk pemisahan DNA : digunakan gel agarose
PREPARASI
• Buat 250 mL larutan bufer TAE 1x dengan cara
mencampurkan 5 mL TAE 50x ke dalam 245
mL akuades.

• Buat gel agarosa 1% dengan cara menimbang


agarosa 0,2 g untuk dilarutkan ke dalam 20 mL
bufer TAE 1x dan dididihkan hingga larut
sempurna. D:\Elektroforesis\Agarose Gel
Electrophoresis - YouTube.MKV
• D:\Elektroforesis\Elektroforesis -
YouTube.MKV
Contoh Kromatogram
Hasil elektroforesis
Elektroforesis DNA

DNA marker Produk PCR


Daftar Pustaka
• Marlia Singgih Wibowo, School of Pharmacy
ITB
• Terima Kasih

You might also like