Introduo

Metabolismo:
toda a atividade qumica realizada por um organismo So de 2 tipos:
aquelas que liberam E = exergnicas - catablicas aquelas que utilizam E = endergnicas - anablicas

PRODUO DE ENERGIA (E)

Requerimentos de energia:

Componentes celulares: parede, membrana, etc.

Sntese de enzimas, cidos nuclicos, polissacardeos, fosfolipdios, etc.

Reparos e manuteno da clula

Crescimento e multiplicao

Acumulao de nutrientes e excreo de produtos indesejveis

Mobilidade

Crescimento celular, reproduo, manuteno e movimento

Componentes celulares como protenas (enzimas), DNA, RNA, carboidratos, lipdeos, etc.

Sntese
Compostos e estruturas

Degradao
E requerida Sistema de armazenamento e transferncia de E E liberada Quebra de substratos ou nutrientes

Produtos da degradao servem como unidades para a produo de compostos celulares

Tipos de energia

Energia qumica energia contida em ligaes

qumicas das molculas

Energia radiante (energia da luz) deve ser

convertida em energia qumica

Compostos ricos em energia: armazenamento e transferncia de energia (imediata)



ATP = adenosina trifosfato ADP = adenosina difosfato Fosfoenolpiruvato Glicose-6-fosfato Coenzimas: Acetil CoA, NAD, NADH, NADPH : CoA,

Armazenamento de energia

Ligaes tioster

(Madigan et al., 2010)

Gerao de ATP por microrganismos - Fermentao

Fosforilao a nvel de substrato = GLICLISE

Glicose

acido 2-fosfoglicrico

acido fosfoenolpirvico

acido pirvico

Glicose + 2ADP + 2 Pi 2 lactato + 2 ATP + 2 H2O + 2 H+

O balano da fermentao d um saldo de 2 ATP para a clula microbiana

Fermentao

Ausncia de O2; Reaes de oxidao e reduo de um composto orgnico; Baixo potencial de energia (processo pouco eficiente); Ocorre fosforilao em nvel de substrato; Ocorre no citoplasma.

Gerao de ATP por microrganismos Respirao

Fosforilao oxidativa
Todas as reaes de oxidao liberam energia (sistema de transporte de eltrons); eltrons) Na clula microbiana a fosforilao utiliza energia liberada pelas reaes reduo que ocorrem na clula para (transferncia de fosfato de intermedirias de alta energia) o ADP em oxidativa de oxioxifosforilar molculas ATP

Gerao de ATP por microrganismos - Respirao

Fosforilao oxidativa
A energia armazenada temporariamente em fora proton-motiva A fora proton-motiva fornece energia para a sntese de ATP a partir do ADP sistema O/R: doador p (O/R)1 p (O/R)2 p (O/R)3 p (O/R)4 p aceptor

nutriente

composto oxidado

Exterior da clula

Citoplasma

Gerao de ATP por microrganismos Respirao

Fotofosforilao

Luz como fonte de energia

y Luz produz fora proton-motiva y Fora proton-motiva promove sntese de ATP

Onde faz e quem faz:

y Cianobactrias, algas, plantas verdes (fototrficos) y Nos tilacides no citoplasma ou nos cloroplastos,

devido a presena de clorofila

Gerao de ATP por fotofosforilao em microrganismos

Como faz:
y Alm de fotofosforilao tambm fixam CO2 y Este processo requer 2 componentes:

ADP (fonte de energia) NADPH2 (doador de e- para a fixao do CO2)

y Depende da atividade de 2 estruturas: Fotossistema I (PS I) Fotossistema II (PS II)

Fotofosforilao

CL = clorofila CR = centros de reao Bph = bacteriofeofitina Q = quinona Fe-S = protena Fe-S bc1 = complexo citocromo bc1 C2 = citocromo c2

Organizao do complexos proticos na membrana fotossinttica de uma bactria prpura fototrfica. O gradiente de prtons gerado pela luz utilizado na sntese de ATP, catalisada pela ATP sintase (ATPase). (Madigan et al., 2010)

Degradao anaerbica da glicose a cido pirvico por uma sequncia de dez reaes catalizadas

enzimaticamente, alm do piruvato, forma-se tambm piruvato, formaduas molculas de ATP, pela fosforilao do ADP. ADP.

A gliclise importante para a clula pela formao das duas molculas de ATP, mas torna-se mais notvel pela sntese de tornaAcetilpiruvato. piruvato. Sendo esse o precursor primrio do Acetil-Coenzima A. A oxidao do acetil-CoA, leva ao fim da reao conhecida acetil-CoA, como Ciclo de Krebs a um balano final de 38 ATP (gliclise + ciclo de Krebs), ou seja muito mais energia que a gliclise sozinha produz. produz.

Regenerao do NAD (Nicotinamida

Adenina Dinucleotdeo)

Atravs de 2 mtodos
y Fermentao y Respirao: y aerbica y anaerbica

ADP

Este o processo bsico na indstria de produo de bebidas alcolicas

Produtos da fermentao
Espcie microbiana Acetivibrio cellulolyticus Actinomyces bovis Principal produto da fermentao cido actico cidos actico, frmico, lctico, etc.

Clostridium acetobutylicum Acetona, butanol, etanol, cido frmico, etc. Enterobacter aerogenes Escherichia coli Lactobacillus brevis Streptococcus lactis Succinimonas amylolytica Etanol, cido frmico, CO2, etc. Etanol, cidos lctico, actico, frmico, succnico, etc. Etanol, glicerol, CO2, cidos lctico, actico, etc. cido lctico cidos actico e succnico

Respirao

Processo de regenerao do NAD onde o NADH2 o doador de e- para o sistema de transporte de eRespirao aerbica: O2 o aceptor final de eRespirao anaerbica: outra molcula (NO3-, SO4--) como aceptor final de eVantagem sobre a fermentao: alm da maior regenerao de NAD h produo de fora protonmotiva para sntese adicional de ATP

Tambm chamado de ciclo do cido Ctrico, foi descoberto por Adolf Krebs. a principal reao de Krebs. formao de energia de organismos aerbicos. aerbicos. A reao comea com a oxidao do Acetil-CoA e por Acetilmeio de uma srie de reaes resultar em formao de 36 molculas de ATP, sendo assim de alto balano energtico. energtico.

A reao ocorre na matriz mitocondrial nos organismos eucariticos e nos procariticos ocorre nas invaginaes da membrana celular (mesossomos).

Produo de ATP: Na cadeia respiratria: 4 NADH formados na gliclise geram 6 NADH formados no ciclo de Krebs geram 2 FADH formados no ciclo de Krebs geram Formao direta na Gliclise Formao direta no Ciclo de Krebs 12 ATP 18 ATP 4 ATP 2 ATP 2 ATP

Total de at ............................................... 38 ATP

Biossntese

Energia para sntese de compostos celulares: cidos nuclicos (DNA, RNA), substncias nitrogenadas (aminocidos, enzimas, protenas), carboidratos (peptidoglicano, quitina), lipdeos, etc. ATP para processos como diviso celular, mobilidade, transporte ativo de nutrientes, etc.

Utilizao de energia

Curva de crescimento Microbiano



Fases de crescimento: lag, exponencial (log), estacionria, declnio

CRESCIMENTO EXPONENCIAL

Crescimento microbiano
Expresso matemtica do crescimento
progresso geomtrica de quociente 2:
1 2 4 8 16 32 ......... X

21

22

23

24

25 ......... 2n

Crescimento microbiano
Tempo de gerao: tempo necessrio para a diviso das clulas
depende da espcie e das condies de crescimento g = t/n, onde:
g = tempo de gerao t = tempo de crescimento n = nmero de geraes dentro de um tempo t de crescimento

E. coli: 20 min

5 x 107

Crescimento microbiano
A relao entre o nmero de clulas e de geraes pode ser expressa em uma srie de equaes matemticas:
sendo a populao inicial = N0
1 2 3 n gerao gerao gerao gerao N = N0 x 2 1 N = N0 x 2 2 N = N0 x 2 3 N = N0 x 2 n

populao final (N) = N0 x 2n

Crescimento microbiano
A relao entre o nmero de clulas e de geraes pode ser expressa em uma srie de equaes matemticas:
sendo a populao inicial = 5
1 2 3 n gerao gerao gerao gerao N = N0 x 2 1 N = N0 x 2 2 N = N0 x 2 3 N = N0 x 2 n = 5 x 2 = 10 = 5 x 22 = 20 = 5 x 23 = 40 = 5 x 2n

populao final (N) = N0 x 2n

Crescimento microbiano
A equao N = N0 x 2n pode ser expressa em termos de n (tempo de gerao), como:
N = N0 x 2 n logN = logN0 + n log 2 logN - logN0 = n log 2 n = logN - logN0 log 2 n = logN - logN0 0,301

n = 3,3 (logN - logN0)

Crescimento microbiano
Agora pode-se usar a expresso de crescimento:
g = t/n, onde:
g = tempo de gerao t = tempo de crescimento n = nmero de geraes dentro de um tempo t de crescimento

Medidas do crescimento
Medidas diretas
Contagem de clulas totais
Cmaras de Petroff-Hausser e de Neubauer Contagem dos viveis

Medidas do crescimento
Contagem microscpica direta: Cmara de Petroff-Hausser

N mdio de esporos em A x 104 = esporos/mL N mdio de esporos em a x 105 = esporos/mL N mdio de esporos em b x 2,0 x 105 = esporos/mL N mdio de esporos em c x 2,5 x 105 = esporos/mL

Medidas do crescimento
Contagem dos viveis
Superfcie

Pour plate

Contagem dos viveis utilizando a tcnica das diluies em srie

Medidas do crescimento
Medidas indiretas
Turbidez Absorbncia

Fatores que afetam o crescimento



Fatores qumicos:
 pH:
 neutrfilos pH 7.0  acidfilos pH < 7.0  alcalfilos pH > 7.0

 Importncia:
Atividade enzimtica Conformao protica Disponibilidade de metais e elementos orgnicos

Archaea acidoflica

rea de minerao cida (extrao de ouro, etc.)

Vermiculita

Rochas calcricas

Fatores que afetam o crescimento



Fatores qumicos:
 O2:
    

Aerbicos obrigatrios Anaerbicos obrigatrios Anaerbicos facultativos Microaerfilos Aerotolerantes Respirao e produo de energia Reaes de xido-reduo Atividade enzimtica

 Importncia:

aerbios obrigatrios

anaerbios obrigatrios

anaerbios facultativos

microaerfilos

anaerbios aerotolerantes

Fatores que afetam o crescimento



Fatores fsicos:
 Temperatura:
   

Psicrfilos: - 5 C a 20 C Mesfilos: 20 C a 50 C Termfilos: 50 C a 80 C Termfilos extremos: acima de 80 C Altera as respostas enzimticas Altera as respostas a choques trmicos Influencia na razo de crescimento

 Importncia:

Chlamydomonas nivalis

 Estratgias de adaptao s altas temperaturas

membranas cidos graxos diferenciados: Archaea no tem cidos graxos nas membranas (tm hidrocarbonetos C40 com unidades de isopropeno). monocamada lipdica, normalmente h uma bicamada.

 Estratgias de adaptao s altas temperaturas

protenas tipo de aminocido: conferem conformao distinta (Glu, Lys, Arg) velocidade de renovao das clulas Taq polimerase (Thermus aquaticus) cidos nuclicos maior concentrao de C G

Fatores que afetam o crescimento

 Fatores fsicos:  Presso osmtica (NaCl):

 Halotolerantes  Halfilos  Halfilos extremos  Barotolerantes  Barfilos

 Presso hidrosttica

Haloflicas extremas

Habitat de Archaea: Great Salt Lake (2460 km2, Utah, EUA

Haloflicas extremas

Evaporadores na Baa de So Francisco, Califrnia, EUA