KULTUR JARINGAN dan TOTIPOTENSI

Kelompok : Bernadette R. P. T / 3 Erris Kusumawidjaya / 11 Kinanti Widyaningsih / 15 Matilda Stella P. / 19 Yulius Damara / 30

• Pengertian, Keuntungan,Keunggulan Bibit, Kultur Jaringan • Tahapan dalam teknik Kultur Jaringan • Landasan Kultur Jaringan • Tipe-tipe Kultur Jaringan • Alat-alat Laboratorium

Pengertian Kultur Jaringan
• Kultur jaringan/Kultur In Vitro/Tissue Culture adalah suatu teknik untuk mengisolasi, sel, protoplasma, jaringan, dan organ (daun, mata tunas), serta menumbuhkan bagian itu pada nutrisi yang mengandung zat pengatur tumbuh tanaman pada kondisi aseptik, sehingga dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi tanaman sempurna. • Prinsip teknik kultur jaringan adalah perbanyakan tanaman dengan menggunakan bagian vegetatif tanaman menggunakan media buatan yang dilakukan di tempat steril.

000 planlet/bibit) • Bibit yang dihasilkan seragam • Bibit yang dihasilkan bebas penyakit (menggunakan organ tertentu) • Biaya pengangkutan bibit relatif murah dan mudah • Dalam proses pembibitan bebas dari gangguan hama. dan deraan lingkungan lainnya .Keuntungan Melakukan Kultur Jaringan • Pengadaan bibit tidak tergantung musim • Bibit dapat diproduksi dalam jumlah banyak. penyakit. waktu relatif cepat (dari satu mata tunas yang sudah respon dalam 1 tahun dapat dihasilkan minimal 10.

Keunggulan Bibit yang Dihasilkan • Sifatnya identik dengan induknya • Dapat diperbanyak dalam jumlah besar (tidak butuh tempat yang luas) • Menghasilkan bibit dengan jumlah besar dalam waktu yang singkat • Kesehatan dan mutu bibit lebih terjamin • Kecepatan tumbuh bibit lebih cepat .

yakni teknik kultur jaringan dengan menggunakan bagian tanaman berupa serbuk sari atau benang sari. . yakni persilangan dua macam protoplasma menjadi satu. yakni teknik kultur jaringan menggunakan kloroplas untuk keperluan memperbaiki sifat tanaman melalui pembuatan varietas baru. – Chloroplast culture. kemudian dibudidayakan sehingga dihasilkan tanaman Back yang mempunyai sifat baru. yakni kultur jaringan menggunakan bagian tanaman dari jaringan muda atau meristem. – Meristem culture. – Somatic cross atau persilangan protoplasma. – Pollen atau Anther culture.Cara Kultur Jaringan • Hendaryono dan Wijayani mengungkapkan bahwa teknik kultur jaringan yang telah dikenal di antaranya sebagai berikut.

.

Tahapan dalam teknik Kultur Jaringan 1) 2) 3) 4) 5) 6) Pembuatan media Inisiasi Sterilisasi Multiplikasi Pengakaran Aklimatisasi .

Media yang digunakan juga harus disterilkan dengan cara memanaskannya dengan autoklaf. Back . Diperlukan juga bahan tambahan seperti agar. vitamin. Media yang digunakan biasanya terdiri dari garam mineral. • Komposisi media yang digunakan tergantung dengan jenis tanaman yang akan diperbanyak. gula. dll. Media yang sudah jadi ditempatkan pada tabung reaksi atau botolbotol kaca.Pembuatan Media • Media merupakan faktor penentu dalam perbanyakan dengan kultur jaringan. baik jenisnya maupun jumlahnya. • Zat pengatur tumbuh (hormon) yang ditambahkan juga bervariasi. dan hormon. tergantung dengan tujuan dari kultur jaringan yang dilakukan.

Back .Inisiasi Pengambilan eksplan dari bagian tanaman yang akan dikulturkan. Bagian tanaman yang sering digunakan untuk kegiatan kultur jaringan adalah tunas.

Back . • Sterilisasi juga dilakukan terhadap peralatan.Sterilisasi • Segala kegiatan dalam kultur jaringan harus dilakukan di tempat yang steril. yaitu menggunakan etanol yang disemprotkan secara merata pada peralatan yang digunakan. Teknisi melakukan kultur jaringan juga harus steril. yaitu di laminar flow dan menggunakan alat-alat yang steril.

• Kegiatan ini dilakukan di laminar flow untuk menghindari adanya kontaminasi yang menyebabkan gagalnya pertumbuhan eksplan.Multiplikasi • Kegiatan memperbanyak calon tanaman dengan menanam eksplan pada media. . • Tabung reaksi yang telah ditanami eksplan diletakkan pada rak-rak dan ditempatkan di tempat yang steril dengan suhu kamar.

Back .

Back . • Pengamatan dilakukan setiap hari untuk melihat pertumbuhan dan perkembangan akar serta untuk melihat adanya kontaminasi oleh bakteri ataupun jamur  Eksplan yang terkontaminasi akan menunjukkan gejala seperti berwarna putih atau biru (disebabkan jamur) atau busuk (disebabkan bakteri).Pengakaran • Fase dimana eksplan akan menunjukkan adanya pertumbuhan akar yang menandai bahwa proses kultur jaringan yang dilakukan mulai berjalan dengan baik.

Pemeliharaan bibit dilakukan dengan cara yang sama dengan pemeliharaan bibit generatif.Aklimatisasi • Kegiatan memindahkan eksplan keluar dari ruangan aseptic ke bedeng • Pemindahan dengan memberikan sungkup untuk melindungi bibit dari udara luar dan serangan hama penyakit • Setelah mampu beradaptasi dengan lingkungan barunya maka sungkup dilepaskan. .

Back .

yaitu: • Totipotensi • Rediferensiasi • Kompetensi .Landasan kultur jaringan didasarkan atas 3 kemampuan dasar dari tanaman.

• Implikasi dari totipotensi : semua informasi pertumbuhan dan perkembangan organisme terdapat di dalam sel. .Totipotensi Potensi atau kemampuan dari sebuah sel tumbuhan untuk tumbuh dan berkembang menjadi tumbuhan dewasa secara utuh (sempurna) jika distimulasi dengar benar dan sesuai. Sel yang paling baik hasilnya adalah sel meristematik.

Heberlandt. ahli fisiologi dari Jerman. F. • Tahun 1969.Steward menguji ulang dengan mengambil satu sel empulur wartel dan menumbuhkannya menjadi satu individu wortel. . tahun 1898. • Teori ini mempercayai bahwa setiap bagian tanaman dapat berkembang biak karena seluruh bagian tanaman terdiri atas jaringan .C.Teori Totipotensi • Teori totipotensi ini dikemukakan oleh G.jaringan hidup.

• Media tumbuh menyediakan bahan yang diperlukan jaringan untuk hidup dan memperbanyak dirinya. . seperti agar. • Media adalah tempat bagi jaringan untuk tumbuh dan mengambil nutrisi yang mendukung kehidupan. • Ada dua penggolongan media tumbuh: – Media padat berupa padatan gel. Nutrisi dicampurkan pada agar. – Media cair adalah nutrisi yang dilarutkan di Back air.Syarat Melakukan Totipotensi • Syarat untuk mendukung kehidupan jaringan yang dibiakkan adalah media tumbuh yang steril.

Rediferensiasi Kemampuan sel-sel masak (mature) kembali menjadi ke kondisi meristematik dan berkembang dari satu titik pertumbuhan baru yang mampu melakukan reorganisasi menjadi organ baru. Back .

Kompetensi • Menggambarkan potensi endogen dari sel / jaringan untuk tumbuh dan berkembang dalam satu jalur tertentu. Back .

Tipe-tipe Kultur Jaringan : Kultur biji (seed culture) Kultur organ (organ culture) Kultur kalus (callus culture) Kultur suspensi sel (suspension culture) Kultur protoplasma Kultur haploid .

Kultur biji (seed culture) Kultur yang bahan tanamnya menggunakan biji atau seedling Back .

pucuk aksilar. akar dll. seperti: ujung akar. bunga. Back . buah muda.Kultur organ (organ culture) • Merupakan budidaya yang bahan tanamnya menggunakan organ. tangkai daun. helaian daun. inflorescentia. buku batang.

Kultur kalus (callus culture) • Kultur yang menggunakan jaringan (sekumpulan sel) biasanya berupa jaringan parenkim sebagai bahan eksplannya • Kalus adalah massa sel yang tidak terdiferensiasi. terdiri dari sel-sel parenkim yang muncul dari sel-sel jaringan induk yang sedang membelah dan biasanya terjadi di tempat irisan untuk menutup luka dalam media Back .

Kultur suspensi sel (suspension culture) • Kultur yang menggunakan media cair dengan sistem pengocokan menggunakan shaker dan menggunakan sel / agregat sel sebagai bahan eksplannya (biasanya berupa kalus atau jaringan meristem) • Kultur suspensi sel terdiri atas populasi sel dengan laju pertumbuhan yang cepat(seluruh permukaan sel dapat kontak langsung dengan medium nutrisi) Back .

yaitu: a) Cellulase untuk menghancurkan sellulose b) Hemicellulase untuk menghancurkanhemisellulose c) Pectinase untuk menghancurkan pektin. . Enzim yang digunakan untuk menghancurkan dinding sel tumbuhan ada 3. • Protoplas diletakkan pada media padat dibiarkan agar membelah diri dan membentuk dinding selnya kembali.Kultur protoplasma • Eksplan yang digunakan adalah sel yang telah dilepas bagian dinding selnya menggunakan bantuan enzim. • Kultur protoplas biasanya untuk keperluan hibridisasi somatik atau fusi sel soma (fusi 2 protoplas baik intraspesifik maupun interspesifik).

Back .

Back . sehingga dapat dihasilkan tanaman haploid. tepungsari/ pollen (kutur pollen). • Kultur antera adalah kultur aseptik antera untuk memproduksi kalus atau tanaman haploid dari mikrospora.Kultur haploid • Kultur yang berasal dari bagian reproduktif tanaman. yakni: kepalasari/ anther (kultur anther/kultur mikrospora). ovule (kultur ovule).

Alat ini digunakan sebagai tahap perlakuan penanaman. .ALAT-ALAT LABORATORIUM KULTUR JARINGAN • Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) Alat ini letaknya diruang penabur. yaitu ruang yang selalu harus dalam keadaan steril.

setelah dilakukan inokulasi eksplan. . maka fungsinya pun sama seperti (LAFC) • Shaker (pengguncang/penggojok) Merupakan alat pengguncang yang putarannya dapat diatur menurut kemauan kita serta digunakan dalam proses perbanyakan sel atau pertumbuhan PLB (Protocrm Likes Body) dalam kegiatan kultur jaringan.• Entkas Merupakan bentuk lama dari alat penabur (LAFC).

• Stirer Alat ini berfungsi untuk menggojok dengan pemanas. .• Autoklaf Autoklaf adalah alat sterilisasi untuk alat dan medium kultur jaringan tanaman. alat ini juga berfungsi sebagai kompor. • Timbangan Analitik Berfungsi sebagai alat untuk menimbang bahanbahan kimia yang digunakan untuk kultur jaringan. • Petridish Alat ini merupakan semacam jenis gelas piala yang mutlak dibutuhkan dalam kultur jaringan. Dengan menggunakan listrik.

Autoklaf Tmibangan analitik Stirer Petridish .

• Gelas Ukur Gelas ukur digunakan untuk menakar air suling dan bahan kimia yang akan digunakan. • Gelas Piala Alat ini digunakan untuk menuangkan atau mempersiapkan bahan kimia dan air suling dalam pembuatan medium. .• Erlenmeyer Alat ini digunakan sebagai sarana menuangkan air suling maupun untuk tempat media dan penanaman eksplan.

• Tabung Reaksi Alat ini digunakan pada saat mengerjakan isolasi protoplas dan isiolasi khloroplas. .• Pinset dan Scalpel Pinset digunakan untuk memegang atau mengambil irisan eksplan atau untuk menanam eksplan • Lampu Spiritus Digunakan untuk sterilisasi dissecting kit (skalpel dan pinset) di dalam laminar air flow cabinet atau di dalam enkas pada kita mengerjakan penanaman atau sub-culture.

.. ♥ ^^Lup yuuuu^^ ♥ ........Maapin ye kalo kelamaan.... ...Thank you..

 02-.80.39:.:7.:9:7 574945.02.8 842. 0:.8.0:.80:39:203.20/.3-7/8.3.3 /3/3809:2-:.93.9...80:39:203.3. .9: .203:3./05.7 202-0.../.3/:3.3.35.3./.8-.390./..3.:7.3.3.8-./. !0.3-.80:39:203.:7.:5:3390785081 . 397.9.82./7/.3/:3.:7.35093  W !74945.8 -..:1:880842.30280:480 . 1:8574945.:39:0507:.3202-039:/3/3803.7.8/09.3:39:203.9/-.5.  W :9:7574945.3. W 85.380:480 .850812.3/3/3803..3032  32.3.

.. .

:9:7 .3 ..3./.3-07..305.370574/:91 9.7-.2.8.7.54/ W :9:7.8.

3907..3907 :9:7 .

7.:9:72748547. 905:38.

2.3907.  .54/ W :9:7.8059.3 .:8.:9:7.:0  803...39. .3 . 5403 :9:75403 4.2.9/. :39:202574/:8.5.3.9.54//..:0 :9:74./.:9.3.3907.72748547.8./.

% % #% #& &%&## W ./.20.9309.-309  .774.9: 7:.3 .3503.3.:./7:.2..-:7 .7:8/.3503.:.23....9.3.380.3 8907 .93/:3.3..380-.5 507.

./...3-039:.07 503:3.2.-:7   2.5:38.8 07:5.9503..2.3.1:383.7.805079  W $.W 39.

2 574808507-.3 ..3! !7494..9 /./:3.3.3  8090.380.3.:.3/.3 .73.72084/ /..9:7203:7:902.:5079:2-:.35:9.9.50344 07:5.5..3:9:7.:.9.39..334:.8085./.20. 8079./.9503:3...33.7.

9/.3 W $9707 .3 W %2-.3 9.73..3 .3 -..33....93207:5.3 2:9.3.....3203:3.73...3897 ..3.-071:38 80-.93-071:38:39:20344 /03.3.32.3802.8:39:.73.1 :94.3-...1.3/..3502.9:39:2032-..989078.2.W :94.9 071:3880-.93:.320/:2 :9:7../-:9:..3:39::9:7.3/:3.42547 W !097/8 .85.20380.8  03./..2:9:7..

3.3.:94.9 $9707 !097/8 .1 %2-.3.

.3 .9.3.32...3..: 2025078.78:3 /./.93/:3..8&:7 0.32..3:39:203.3 503.3.7.93/:3.8::7/:3..320/:2 .9.2 502-:.3-.8.3 W 0..78:3/.3.3-.3:39:203:.920/..3.3/:3.3085.7..W 7032007 .3.8!.2.5..380-.3 W 0.78:32.:5:3:39:9025..3..203:./.

-309 .::39:203.20307.: 203...203.8 .50 !3809/:3.85.3:39:2020.2-78.353809 //.-:3#0../.3.9.8..2.2 085.50 /.3 503..3:39:89078.3.9.W !3809/..714.3.3085.25:$579:8 :3.:9:70 W %./....35.://.3$.:8:- .9.7.8/.93/:3.9.8 .384.3.9.8/880.939 8.84745.3 W .3.23.2.920307.384..8 574945.

.3 º )):5::::))º .2.34: . %.530.4 0..

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful