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CONFERENCIA DE BIOQUÍMICA

IMPORTANCIA MÉDICA DE LOS RADICALES LIBRES
Dra. Ana Maria Muñoz Jauregui Noviembre 2007

OBJETIVOS
Al término de la conferencia, el alumno será capaz de:  Reforzar los conceptos sobre radicales libres y stress oxidativo  Conocer las enfermedades relacionadas con el stress oxidativo  Describir el rol de los RL en las enfermedades CV, del colágeno, tabaquismo, envejecimiento y enf. de Parkinson y Alzheimer  Señalar los métodos de evaluación del stress oxidativo

RADICALES LIBRES
 Son

átomos o moléculas inestables  Altamente reactivas  Al actuar, se activa una reacción en cadena que podría incluso llevar a la muerte de la célula

O-

OH

Radical Peróxido Radical Hidroxilo Anión Superóxido Peróxido de Hidrógeno Oxígeno Singlete

ROS
O2 HO OHO2 H2O2 O2ROOH Oxígeno molecular Radical hidroxilo Radical anión superóxido Radical perhidroxilo Peróxido de hidrógeno Singlete de oxígeno Hiperóxido orgánico

Acción de los radicales libres
Peroxidación de los lípidos  Radical libre ataca a un ácido graso insaturado  El lípido pierde un e Se modifica la molécula Oxidación de proteínas  Modificación de estructura terciaria  Cambio de función Oxidación de carbohidratos  Forma moléculas que reaccionan con el carbonilo proteínas

ESTRÉS OXIDATIVO
 El estrés oxidativo ocurre en

los organismos por:

   

excesiva producción de EROs deficiencia de antioxidantes mala nutrición enfermedad otras causas

 Porque pierden el equilibrio

entre radicales libres y antioxidantes

ESTRÉS OXIDATIVO
Provocado por:
  

el radical superóxido (O2-) el peróxido de Hidrógeno (H2O2) el radical hidroxilo (HO.)
Principal fuente de EROs: cadena respiratoria por las transferencias de electrones:
2% e- NADH forman EROs

Estrés Oxidativo : Causas

 Aumento de

Radicales Libres  Disminuye el sistema de defensa (antioxidante)

de los antioxidantes

Antioxidantes enzimáticos
 Superóxido dismutasa (SOD) Existe en 2 formas:
una forma citoplasmática que contiene cobre y zinc y otra mitocondrial que contiene manganeso

 Catalasa, enzima que contiene hierro

 Glutation peroxidasa, enzima que contiene selenio

ROL DEL NADPH EN EL METABOLISMO DEL GLUTATION
2x GSH Forma reducida activa H2 O2 NADP+

Glutation peroxidasa

Glutation reductasa

H2O

GS-SG forma oxidada inactiva

NADPH + H

IMPORTANCIA DEL NADPH EN LOS GLÓBULOS ROJOS
Un defecto en la enzima o un aumento de RL produce aumento de metaHb NAD+

Hb Fe2+

Fármacos o RL Meta Hb Fe 3+

Citocromo b5 reductasa

NADH

cianosis

Antioxidantes dietéticos
 Vit E: Estabilidad a la membrana celular  Vit C: Protegen a los lípidos plasmáticos  Beta caroteno: Protege a los neutrófilos  Selenio: Neutralizan compuestos de acción

mutagénica o carcinogénica  Cu, Fe, Zn: parte de las enzimas antes mencionadas.  Flavonoides: Estabilizadores de la membrana

Alimentos antioxidantes: fuentes
Carotenoides Zn, Cu, Se, Mn... Coenzima Q Isoflavonas Vit C Vit E
Zanahoria, tomate, naranja, papaya, lechuga... Gérmenes de trigo, cangrejo, ostras, frutos secos, cereales... Carne, vísceras, pescado... Soya y derivados Cítricos, piña, tomate, espinaca... Nuez, maíz, vegetales, trigo...

Enf. Cardiovasculares

El Cáncer

Stress Oxidativo

Envejecimiento

Degeneración Macular

Radicales Libres

El aporte calórico excesivo y el sedentarismo causan aumento intracelular de la glucosa y de los ácidos grasos libres. Esto aumenta la acetilcoenzima A que se transforma en citrato que entra al ciclo del ácido cítrico y conduce a una sobreproducción de NADH. El exceso de NADH mitocondrial aumenta la producción de radicales libres y produce estrés oxidativo. A su vez el estrés oxidativo induce la disfunción endotelial, aumenta la resistencia a la insulina y afecta la secreción de insulina por lesión de las células beta. La alteración de la secreción de insulina produce disminución de la tolerancia a la glucosa y diabetes. Estos dos fenómenos constituyen un mecanismo de retroalimentación que aumenta la formación de radicales libres. La enfermedad cardiovascular es el resultado de la disfunción enotelial y de las alteraciones combinadas del síndrome metabólico.

ATG: alteración de tolerancia a la glucosa. Arterioscler Thromb Vasc Biol 2004

Enfermedades relacionadas
 Cataratas        

Enfermedad de Parkinson Enfermedades auto inmunes Artritis Diabetes Aterosclerosis Enfermedades cardiovasculares Hipertensión arterial Enfermedades de la piel.

Suele ser claro y transparente , cuando se anubla u opaca

Opacidad del cristalino

Las Cataratas
Se presentan en el nacimiento (catarata congénita)

Las Cataratas en los adultos

Asociadas al envejecimiento Desarrollo lento y sin dolor Perdida de la visión gradual Problemas: ver de noche Sensible al resplandor

Enfermedad de Parkinson

Enf. Neurológica •Temblor •Alteraciones en la coordinación de los movimientos

Rigidez muscular

Dificultad al andar

También......
 Estrés oxidativo

• Arrugas

• Piel flácida • Manchas de la piel

CADA CELULA DE NUESTRO CUERPO

ENVEJECIMIENTO DE LA PIEL

Glutation Peroxidasa

Enfermedad de Parkinson

Actividad de la Superoxido dismutasa

Productos derivados de la peroxidación lipídica (p. ej., malonildialdehído. Glutatión reducido en la SN Alteración de la a-cetoglutarato dehidrogenasa mitocondrial

RADICALES LIBRES Y ATEROGENESIS
 El endotelio juega un papel preponderante en el

inicio y las complicaciones de esta enfermedad y en donde la peroxidación lipídica de las lipoproteínas de baja densidad (LDL) es la causa desencadenante.  Los productos principales de la peroxidación lipídica, los hidroperóxidos lipídicos, sufren fisión en presencia de los metales de transición, causando la formación de radicales peroxilo y alcoxilo, así como de aldehidos que son citotóxicos.  El hierro está involucrado en las etapas precoces de la aterosclerosis y su depósito en el endotelio y en la media está estrechamente asociada con la progresión de la aterosclerosis.

Papel de endotelio en los procesos inflamatorios. Las células circulantes como neutrófilos y monocitos necesitan ser reconocidas por las moléculas de adhesión endotelial para penetrar en los diferentes tejidos. La expresión de tales compuestos es inhibida por el óxido nítrico, lo que le confiere propiedades antiinflamatorias insospechadas

Teoría oxidativa de la ateroesclerosis

SISTEMA NERVIOSO CENTRAL Y RADICALES LIBRES
 La gran vulnerabilidad del sistema nervioso central,

ya que el cerebro es un tejido muy rico en lípidos poli-insaturados,  Contiene poca cantidad de superóxido dismutasa, de catalasa y de peroxidasa.  Además el cerebro y la medula tienen concentraciones muy altas de hierro, facilitando la reacción de Fenton  El cerebro además es muy sensible a la reperfusión evento en el cual se liberan una serie de radicales libres y de aminoácidos excitatorios

RADICALES LIBRES Y ENFERMEDADES DEL COLAGENO
 Los

polimorfonucleares activados (mediante complejos inmunes, activación del complemento, endotoxinas, cristales etc.), liberan radicales libres  Se activa la vía del ácido araquidónico -liberando prostanoides: leucotrienos, tromboxano A2, prostaciclina  Produciendo además mieloperoxidasa la cual en presencia de cloro forma cloraminas y ácido hipocloroso, otro radical libre muy potente, siendo responsable en gran parte de los efectos a distancia de la artritis reumatoide

TABAQUISMO Y RADICALES LIBRES
El tabaquismo tiene dos fases: una gaseosa y otra de alquitrán  La fase gaseosa es eminentemente oxidante. La interacción del óxido nítrico más el isopreno da origen a la formación de radicales libres. Estos actúan sobre la metionina produciéndose un efecto de inactivación del inhibidor de la A 1 antitripsina con el consiguiente daño pulmonar cuyo resultado es el enfisema  La fase de alquitrán es eminentemente reductora, en donde la semiquinona del tabaquismo interactúa con el oxígeno, dando origen a la aparición de radicales libres, especialmente radical hidroxilo en grandes cantidades, ocasionando de esta manera daño directo al DNA con las consiguientes posibilidades de degenerar en cáncer

INSUFICIENCIA CARDIACA Y RADICALES LIBRES
En la ICC hay aumento de prostaglandinas, y la formación de prostaglandinas genera radicales libres  En la ICC hay una hiperproducción de norepinefrina circulante y local, y su auto-oxidación genera radicales libres.  Recientemente se ha demostrado que en la ICC avanzada (Clase funcional III-IV), hay una activación de la NO synthasa inducible. Esta enzima (No Ca++ ni ATP dependiente) genera cantidades muy importantes de Oxido Nítrico (de valores normales de nanomoles a picomoles), ejerciendo un efecto inotrópico negativo y una vasodilatación irreversible

Efecto vascular: Relajación dependiente del endotelio
 El óxido nítrico

Estimulo

endotelial (NO) posee efectos vasoprotector y anti ateroesclerótico

Ej. Acetilcolina o shear stress)

ecNOS

Oxido nitrico

Vasodilatacion/ regulacion del flujo sanguíneo

NO: Efecto vascular en función normal

La enfermedad de Alzheimer
 El cerebro en la enfermedad de Alzheimer (EA) sufre un estrés oxidativo 

 

significativo, y se sabe que el péptido beta amiloide, principal componente de las placas seniles, causa estrés oxidativo in vitro Las concentraciones altas de péptido amiloide y el alelo 4 de la apolipoproteína E son factores de riesgo de enfermedad de Alzheimer. Además se ha relacionado a la lipoproteína E con aumento del riesgo de aterosclerosis y de la formación de placa amiloide Los iones metálicos, especialmente el zinc, el cobre y el hierro, son también importantes en la oligomerización y toxicidad del beta amiloide Se demostró que las estatinas tienen efectos favorables sobre la EA;,una estatina hidrofílica, que no atraviesa bien la barrera hematoencefálica (pravastatina) es tan eficaz como una estatina que la atraviesa rápidamente (lovastatina) Se deba probablemente a que la disminución de la hipercolesterolemia podría reducir la concentración de hierro en el cerebro, la acumulación de beta amiloide y la capacidad del hierro de las placas para catalizar el daño oxidativo.

Acción de las estatinas
Los inhibidores de la HMG-CoA reductasa (estatinas) reducen significativamente el accidente cerebrovascular (ACV) isquémico en pacientes con vasculopatía comprobada. Además de prevenir el ACV, se comunicó que las estatinas tienen efecto sobre la evolución de un ACV instalado. El efecto favorable de las estatinas sobre el ACV se podría ejercer de varias maneras: 1- Las estatinas podrían aumentar la óxido nítrico sintasa endotelial cerebral 2- Podrían tener acciones antinflamatorias, disminuyendo la expresión de las moléculas proinflamatorias 3- Pueden aumentar la plasticidad cerebral por aumento del crecimiento endotelial vascular, proliferación de células endógenas y neurogénesis 4- Inhiben la síntesis del colesterol cerebral después de una lesión neuronal y reducen así los productos de oxidación tóxica del colesterol.

Estrés Oxidativo:
 BIOMOLÉCULAS

Métodos de evaluación
MÉTODOS Quimioluminiscencia MDA(malondialdehído) Dienos conjugados Peróxidos Pentano, etano Compuestos carbonilos Grupos sulfhidrilos Fragmentación de proteínas Actividad de enzimas Grupo aminos libres Base modificada

Lípidos

Proteínas

ADN

EL CONTROL DEL STRESS OXIDATIVO ES FUNDAMENTAL EN LA PREVENCIÓN DE LAS ENFERMEDADES CRONICAS