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Determinación de coliformes

:
Método del NMP.

NORMA OFICIAL MEXICANA
NOM-112-SSA1-1994.

M.C. Luis Ramiro Caso Vargas.
Coliformes

• Estan constituidos por un grupo heterogéneo
de bacterias (varios géneros y especies)

• Algunas especies constituyen un problema de
salud bastante grave.

• Son organismos “indicadores de
contaminación fecal” en el agua.
¿Por qué usar coliformes?
• Buscar por microorganismo específicos lleva
mucho tiempo y recursos.

• Los coliformes regularmente se encuentran
asociados con fuentes de patógenos que
contaminan el agua.

• El análisis de coliformes en agua potable es
relativamente sencillo, económico y
eficiente.
¡La definición es importante!
• Bacilos Gram negativos.

• No esporulados.

• Aerobios o anaerobios facultativos.

• fermentan la lactosa a 35 °C con la producción
de ácido y gas.

• ¡¡ Todo esto Bajo las condiciones de la norma !!
Prueba de coliformes totales
1. Prueba presuntiva
• Caldo Lauril Triptosa (CLT).
• Caldo Mc. Conkey.
• Caldo lactosa.
• Medio EC.

2. Prueba confirmativa:
• Medio EC.
• Medio bilis lactosa (BLVB)
Día 1 (Prueba presuntiva)
• Preparación del material.

• Realizar diluciones seridas de la muestra de
agua hasta 10-3 en agua peptonada.

• Realiazar 5 pases de 1 ml. de cada una de las
diluciones (10-1, 10-2, 10-3) a tubos con 9 ml. de
caldo Lauril sulfato y campanas Durham.

• Dejar incubando de 24 a 48 hrs. a 35°C.
Día 2 (prueba confirmativa)

1. Realizar pases con alíquotas de 1ml. de
cada los 5 tubos por dilución a tubos con
medio EC y campanas Durham.

3. Dejar incubando de 24 a 48 hrs. a 35°C.
Procedimiento: Pas
Sembrar de cada dilución por o2
1 quintuplicado.

s o 1 2 3 4 5

Pa l
10-1
1 m
1 ml 10-1

1 ml 1 2 3 4 5

1 ml 10-2
10-2

1 ml
Muestra 1 2 3 4 5
1 ml
10-3
Realizar diluciones 10-3
hasta 10-3
Transferir hacia tubos con
1 caldo EC.
Caldo Lauril Sulfato

10-1 10-1 10-1 10-1 10-1

2 4 5
1 3
Caldo EC.

1 2 3 4 5
Tubo Durham

Producción de
Gas
Análisis de resultados
MNP
Dilución
10-1 10-2 10-3
1  X X
2   X
Tubos

3   X
4 X X X
5 X X 
3 2 1
¿Qué tanto es tantito?
NOM-127-SSA1-1994 -SSA1-1994